KR100253819B1 - 혈액 보존제 및 혈액 보존 방법 - Google Patents

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Abstract

하기 일반식의 인산 디에스테르 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 함유하는 혈액 보존제 :
[식중, R1및 R2는 동일하거나 상이하며 각각 수소원자 또는 메틸기를 나타낸다.]
및 그 화합물을 이용함을 특징으로 하는 혈액 보존 방법.
본 발명의 혈액 보존제에 사용되는 화합물은 혈액 성분을 손상시키지 않고 장기간 혈액의 생물학적 기능을 유지시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 제제는 혈액, 및 적혈구, 백혈구 및 혈소판과 같은 혈액성분을 보존하기 위해 유리하게 사용될 수 있으며 수혈을 수반할 수 있는 간장해의 예방에 유용하다.

Description

[발명의 명칭]
혈액 보존제 및 혈액 보존 방법
[발명의 명칭]
본 발명은 유용한 혈액 보존제 및 혈액 보존 방법에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 아스코르브산 및 토코페롤의 인산 디에스테르 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 함유하는 유용한 혈액 보존제 및 이를 이용함을 특징으로 하는 혈액 보존 방법에 관한 것이다.
혈액은 적혈구, 백혈구 및 혈소판과 같은 형태요소, 및 형태요소가 함유된 액체성분인 혈장으로 구성된다. 혈액은 인체 세포의 생존을 위한 생체매질이며 그의 특성은 거의 일정하게 유지된다. 한편, 외과수술도중 및 그외의 경우에 때로는 혈액 또는 혈액 성분을 수혈할 필요가 있다. 저장하는 동안 및 수혈이 달성될때까지 혈액 또는 혈액성분의 생물학적 기능이 유지되어야 한다. 이는 또한 때로 수혈을 수반할 수 있는 간 장해와 같은 기능장해를 예방하기 위해 중요하다.
상기 목적을 위해서, 에너지원으로서 주로 당이 사용되었으며, pH 및 삼투압 조절제로서 무기염이 주로 사용되었고 혈중 ATP (아데노신 트리포스페이트), ADP (아데노신 디포스페이트) 및 AMP (아데노신 모노포스페이트) 의 소비를 방지하기 위한 제제로서 아데닌이 주로 사용되었다. 하지만, 상기 혈액 보존제는 혈구성분의 생존지표인 혈중 ATP수준을 충분히 유지시킬 수 없고 수혈과 관련된 간 장해에 대해 만족스러운 방지효과를 갖지 않으므로 거의 만족스럽지 않다.
따라서, 우월한 혈액 보존효과 및 수혈후의 잠재성 간 장해에 대한 방지효과를 갖는 혈액 보존제 및 혈액 보존 방법을 현재 연구중이다.
이와 같은 상황하에서, 본 발명자들은 강력한 혈액 보존작용을 갖는 화합물을 연구하였으며, 아스코르브산 및 토코페롤의 인산 디에스테르 및 그의 약리학적으로 허용되는 염이 강력한 혈액 보존 효과를 가짐을 발견하였다.
상기 발견을 바탕으로, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명은 하기일반식의 인산 디에스테르 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염 (이후 본 화합물로 약칭함) 을 함유하는 혈액 보존제 및 본 화합들을 이용함을 특징으로 하는 혈액 보존 방법에 관한 것이다 :
[식중, R1및 R2는 동일하거나 상이하며 각각 수소원자 또는 메틸기를 나타낸다.]
본 명세서에서 사용된 용어 “혈액”은 문맥에 반하지만 않으면 혈액 “전체”그 자체, 및 백혈구, 적혈구 및 혈소판과 같은 혈액성분을 의미한다.
본 발명의 혈액 보존제 및 혈액 보존방법에 사용되며 상기 일반식으로 나타내는 본 화합물은 특히 일본국 특허 공고 제 2 - 44478 호 및 일본국 특허 공개 제 62 - 205091호에 기재된 방법, 또는 그의 변형된 방법에 의해 제조될 수 있다.
유리산 형태 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염의 형태인 상기 일반식으로 나타내는 본 화합물을 본 발명의 목적을 위해 사용할 수 있다. 염은 나트륨염 및 칼륨염과 같은 알칼리 금속염, 또는 칼슘염 및 마그네슘염과 같은 알칼리토금속염일 수 있다.
본 발명의 혈액 보존재 및 혈액 보존방법에 사용된 본 화합물은 특히 항백내장제, 갱년기장해 예방·치료제, 피부 미백작용 화장품 (일본국특허 공고 제 2 - 44478 호), 항염증제 (일본국 특허 공고 제 1 - 27004 호), 항궤양제 (일본국 특허 공개 제 63 - 270626 호) 및 허혈성 장기장해 예방 치료제 (일본국 특허 공개 제 2 - 111722 호)로서 이미 공지되어 있다. 하지만, 본 화합물이 본 발명의 목적인 혈액 보존에 유용함은 공지되지 않았다.
본 발명의 혈액 보존제는 1 종 이상의 본 화합물 또는 그의 염을 목적 및 필요에 따라 적절히 배합하며 함유할 수 있다.
혈액 보존에 있어서, 본 발명의 혈액 보존제는 액체, 즉 용액, 현탁액 또는 유제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 혈액 보존제는 초기에 액제 또는 고형제로 제형화될 수 있으며 고형제는 사용을 위해 액제로 제형화될 수 있다. 고형제는 정제수 또는 생리식염수등에 용해, 현탁 및 유화
시킬 수 있다. 고형제로서는 정제, 과립재 및 산제가 예시되며, 이는 통상적인 방법에 의해 적절히 제조될 수 있다. 경우에 따라서, 상기 고형제는 혈액중 또는 혈액 성분 중에 함유될 수 있다.
본 발명의 혈액 보존제는, 본 발명의 목적에 반하지만 않는다면, 항 혈액응고제, 영양제, 등장화제, pH 조정제, 방부제, 용해제 및 증점제와 같은, 혈액 보존제에 사용되는 통상적인 성분을 통상적인 비율로 함유할 수 있다.
상기성분에는, 예를들어 당, 염, 아미노산, 핵산 염기 및 유기산이 포함될 수 있다. 당에는 특히 수크로스, 글루코스, 락토오스, 덱스트로스 및 만니톨이 포함된다. 염으로서는 염화나트륨, 시트르산나트륨, 인산나트륨이 예시된다. 아미노산으로서는 글리신, 글루탐산 및 리신이 예시된다. 핵산 염기로서는 아데닌이 예시된다. 또한, 유기산으로서는 시트르산, 아세트산 및 락트산이 예시된다.
본 발명의 혈액보존제는, 본 발명의 목적에 반하지만 않으면, 예를 들어 항생물질 또는 간장해 억제제와 같은 그외의 약효성분이 보충될 수 있다.
본 발명히 혈액 보존제 및 혈액 보존방법은 혈액성분을 손상시키지 않고 장기간 동안 혈액의 생물학적 기능을 유지할 수 있다. 따라서, 본 발명의 제제는 혈액, 및 적혈구, 백혈구 및 혈소판과 같은 혈액성분을 보존하기 위해 유리하게 사용될 수 있으며, 가끔 수혈을 수반하는 간장해 예방에 유용하다.
본 발명의 혈액 보존제 및 혈액 보존방법에 사용되는 본 화합물은 독성이 매우 낮고 매우 안전하므로 혈액 보존 및 수혈에 유리하게 사용될 수 있다. [L -아스코르브산, DL- α -토코페롤의 인산 디에스테르의 나트륨염 (이하 EPC - Na 로 약칭함) 의 LD50: 경구 투여 10 g/kg (쥐) 이상, 피하주사 793 mg/kg (쥐) 이상].
본 발명의 혈액 보존제는 하기 방법 또는 그의 변형 방법으로 사용될 수 있다. 본 화합물은 혈액, 또는 혈액성분을 함유하는 제제에 혼입 및 혼합된다. 더 구체적으로 금방 수거한 혈액에, 시트르산, 그의 염, 헤파린 및 에데트산 나트륨과 같은 혈액 응고 억제제의 적절한 양 및 혈액 보존 유효량의 본 화합물을 첨가한 다음, 냉각하에 제제를 혼합한다. 상기와 같이 제조된 혼합물로부터, 약 5 ∼ 10분 동안 약 4,000 ∼ 4,500 g 으로 원심분리함으로써 목적하는 혈액성분 또는 분획을 분리한 다음 통상적인 방법으로 수거한다. 필요할 경우, 각 혈액성분 또는 분획에, 본 발명의 혈액 보존제 특정량을 추가로 첨가한다. 다음, 상기와 같이 수득된 각제제를 냉각하의 용기내에 보관한다.
본 발명의 목적을 위한 본 화합물의 투여량은 사용한 본 화합물의 종류, 보존온도, 목적하는 보존시간 등에 따라 달라진다. 혈액중 본 화합물의 최종 농도는 통상적으로 약 5 × 10-9g/ml ∼ 약 5 x 10-3g/ml 의 범위이며, 바람직하게는 약 5 × 10-8g/ml ∼ 약 5 × 10-5g/ml 의 범위이다.
액제로 제형화할 경우, 혈액 보존제의 삼투압은 통상적인 방법에 의해 약 0.5 ∼ 5 (압력비), 바람직하게는 약 0.8 ∼ 2 (압력비) 로 조정될 수 있다.
액제의 pH는 통상적인방법에 의해 약 3 ∼ 10, 바람직하게는 약 4 ∼ 9로 조정될 수 있다.
본 발명의 혈액 보존제를 이용함으로써 혈액을 보존할 경우, 온도는 사용된 본 화합물, 그의 양 및 목적하는 보존시간 등에 따라 달라지지만, 통상적으로 약 -5℃ ∼ 20℃의 범위이고, 바람직하게는 약 0℃ ∼ 15℃의 범위이다.
본 발명의 혈액 보존제를 이용함으로써 혈액을 보존할 경우, 예를 들어 플라스틱 백 및 유리병과 같은 통상적인 혈액 보존용 용기를 적절히 사용할 수 있다.
하기 실험예 및 실시예는 본 발명을 더 상세히 설명하기 위한 것이다.
[시험예 1]
본 화합물의 혈액 보존 효과
[시험 화합물]
L-아스코르브산, DL-α-토코페롤의 인산 디에스테르의 칼륨염 (이하 EPC-K로 약칭함)
[방법]
헤파린 처리한 인체 혈액을 27℃ 에서 15 분간 방치한 다음, 3000 rpm 에서 5분간 원심분리함으로써 혈장 및 혈구로 분리한다. 3부피의 생리 식염수 및 3부피의 수액용 전해질액 [“SOLITA - T No. 2” (등록상표), Shimizu Seiyaku (주) 제] 에 분리한 혈구 1 부피씩을 각각 첨가한다. 각 용액에 최종농도가 5 × 10-5g/ml ~ 5 × 17-7g/ml 가 되도록 EPC - K 를 추가로 첨가한다. 다음, EPC-K를 함유하는 용액 및 EPC-K가 첨가되지 않은 용액을 4℃ 에서 5 일간 저장한다. 혈구중 ATP (아데노신 트리포스페이트) 수준, ADP (아데노신 디포스페이트) 수준, 및 AMP (아데노신 모노포스페이트) 수준을 HPLC 법에 의해 측정한 다음, 하기 식으로부터 혈구중 에너지 전하 (E.C.) (%)를 계산한다.
[결과]
혈액 수거 직후에 측정한 에너지 전하는 54.2% 이다. 4℃에서 5일간 저장한 후의 에너지 전하를 표 1에 나타낸다.
[표 1]
상기 결과로부터, 생존 지표를 나타내는 혈구중 에너지 전하가 유지되기 때문에 EPC - K는 혈액 보존에 유용한 것으로 입증되었음을 알 수 있다.
[실시예 1]
하기 성분들을 멸균 액제로 제형화한다 :
EPC - Na 2 mg
만니톨 55 g
소듐 디히드로겐포스페이트 1 g
시트르산 1 g
아데닌 0.3 g
수산화나트륨 적량
염산 적량
멸균 정제수 전량 1,000 ml
pH 7
혈액 응고 억제제인 시트르산을 함유하는 상기 조성물 약 40 ml 를 금방 수거한 혈액 200 ml 에 첨가한 다음, 천천히 혼합한다.
상기와 같이 수득된 혼합물로 부터, 냉각하에 혈구 분획을 4,500 g 으로 10분간 원심분리하여 분리한 다음 수거한다. 다음, EPC - Na를 함유하는 상기와 같이 수득된 혈구 분획 약 70 ml를 대기산소의 부재하에 4℃에서 7 일간 PVC 백에 저장한다.
[실시예 2]
하기 성분들을 멸균 액제로 재형화한다 :
EPC - K 20 mg
만니톨 25 g
소듐 디히드로겐포스페이트 500 g
아데닌 0.2 g
염화 나트륨 4.5 g
수산화나트륨 적량
염산 적량
멸균 정제수 전량 1,000 ml
pH 7

Claims (2)

  1. 하기 일반식의 인산 디에스테르 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염을 함유하는 혈액 보존제 :
    [식중, R1및 R2는 동일하거나 상이하며 각각 수소원자 또는 메틸기를 나타낸다.]
  2. 혈액 또는 혈액 성분을 제1항의 인산 디에스테르 또는 그의 약리학적으로 허용되는 염과 혼합함을 특징으로 하는 혈액 보존 방법.
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