KR100220554B1 - 지질액포, 그 제조방법 및 그 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 0.1에서 20 마이크로미터의 평균 크기를 가지며, 유성식물 종자의 유성체에 존재하는 실질적으로 전체의 단백질과 인지질로 이루어지고 외인성지질 및/또는 외인성 친유물질을 함유하는 중심부를 둘러싸고 있는 외피를 포함하는 지질액포에 관한 것이다.

Description

지질액포, 그 제조방법 및 그 용도
본 발명은 지질액포(또는 지방액포: lipid vesicles), 그것을 함유하는 수성유탁액(acqueous emulsions) 및 그것을 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은, 보다 상세하게는, 유성식물(oleaginous plants)의 종자내에 존재하는 단백질과 인지질을 외피(covering)로서 함유하는 지질액포에 관한 것이다.
이제까지, 유성식물의 종자에는, 오일(필수적으로 트리글리세라이드)이 평균직경이 110 마이크로미터의 유성체(oily bodies)의 형태로 존재했고, 단백질(올레오신)과 인지질로 이루어지는 외피에 의해 둘러싸인 중심부(core)의 오일을 함유하는 것으로 생각되었다(J. Tzen et al., J. Cell Bio, 117, 327, 1992).
상기 유성체의 외피를, 이루는 단백질이, 일부는 글리코실화되고(glycosylated) 다른 것은 글리코실화되지 않은, 두가지 형태라는 것이 최근 발견되었다.
본 발명의 목적은, 유성체의 외피에 단백질과 인지질을 모두 함유하고, 따라서 유성체의 외피에 있는 것과 동일한 글리코실화되지 않은 단백질과 글리코실화된 단백질을 함유하는 지질액포를 제공하는 것이다.
더욱이, 유성식물로부터 식물유를 추출함에 있어서, 유성체의 외피에 존재하는 단백질과 인지질의 상당한 양의 분획(fractions)을 함유하는 오일찌꺼기(oil cakes)가 회수된다. 이들 오일찌꺼기는, 그 외에도, 1030 중량에 이르는 추출되지 않는 오일을 함유한다.
본 발명은 오일찌꺼기의 가치를 증진시키는 한편 특히 새로운 지질액포 그리고 그것을 포함하는 유탁액을 제공하는데 관한 것이다.
이러한 목적을 위해, 본 발명의 주제는, 평균크기가 0.120 마이크로미터이고 특히 18 마이크로미터이며, 실질적으로 유성체내에 있는 단백질과 인지질의 전부로 되어 있고, 적어도 약간의 외인성지질(exogenous lipids) 및/또는 외인성 친유물질(lipophilic substances)를 포함하는 중심부를 둘러싸고 있는 외피를 포함하는 지질액포에 관한 것이다.
본 발명의 주제는 또한 수상에(in an aqueous phase) 분산된 본 발명의 지질액포를 함유하는 수성유탁액에 관한 것이다.
본 발명에 있어서, "유성식물의 종자의 유성체에 존재하는 단백질과 인지질의 실질적인 전부"라는 표현은, 유성체의 외피에서 발견되는 것과 실질적으로 동일한 성분이 액포의 외피에서 발견된다는 것과 단백질이 글리코실화된 것과 글리코실화되지 않은 것을 모두 포함한다는 것을 의미한다. 실제로, 유성식물의 종자내에 있는 단백질과 인지질은 오일찌꺼기에 있는 것들이다.
본 발명의 주제는 또한 그러한 수성유탁액의 제조공정에 관한 것으로서, 다음과 같이 이루어진다 :
- 오일찌꺼기의 분쇄,
- 지질의 전체적인 백분율이 5090 중량가 되도록 하기 위해 분쇄된 오일찌꺼기에 대한 지질상(lipid phase)의 첨가,
- 균질 페이스트가 얻어질 때까지, 특히 090의 온도로, 분쇄된 오일찌꺼기와 지질상의 반죽,
- 대략 40:60에서 5:95의 페이스트/수상(aqueous phase) 중량비가 되도록, 특히 090의 온도에서, 상기 페이스트에 대한 수상의 첨가,
- 유탁액이 형성되도록 상기 페이스트와 상기 수상의 교반,
- 고체입자를 제거하기 위해 상기 유탁액의, 선택적인, 경사분리(decantation) 및/또는 여과,
- 그리고, 농축된 유탁액을 얻기 위한 상기 유탁액의 선택적인 원심분리.
오일찌꺼기의 예로서, 대두, 파스타치오, 마카다미아, 해바라기, 평지씨(rapeseed), 낙화생, 아몬드, 개암, 참깨, 보라고(borage), 맥아 및 조조바(jojoba) 오일찌꺼기를 들 수 있을 것이다. 높은 오일함량을 가진 종자(파스타치오, 마카다미아, 낙화생, 조조바, 개암, 아몬드)로부터 얻은 오일찌꺼기를 사용하는 것이 바람직하다.
오일찌꺼기의 분쇄는 임펠러 분쇄기와 같은 통상의 분쇄기를 사용하여 행하되, 0.1mm보다 작은 입자크기가 될 때까지 하는 것이 좋다.
분쇄된 오일찌꺼기는, 선택적으로, 박테리아를 무력화시키기 (inactivate) 위해, 10KGy의 강도까지 조사(irradiation)를 할 수도 있고, 밀봉포장내의 불활성분위기하에 저장할 수도 있다.
외인성지질은 보충된 지질, 말하자면 분쇄된 오일찌꺼기는 존재하지 않고 추가된 지질을 말한다. 분쇄된 오일찌꺼기에 첨가된 이들 지질은 사용된 유성식물에 존재하는 것, 즉 내생 지질(endogenous lipids)과 동일 형태의 지질이거나 다른 지질일 수도 있다. 일반적으로, 상대적으로 큰 비율의 트리글리세리드가 오일찌꺼기에 남아 있고, 지질의 전체적인 백분율이 5095 중량가 되도록 하기 위해 지질이 첨가되는 것이다.
지질의 양은 얻고자 하는 최종 유탁액의 입자의 크기에 따라 조절된다. 그리하여, 만일 보다 작은 입자크기가 되기를 바란다면, 첨가되는 지질의 양을 감소시킨다.
이들 지질외에, 광유, 카로틴, 실리콘(예를 들어 다우코닝회사의 DC 200), 지방에스테르가 선택적으로 첨가되는 복합 친유성 혼합물(Kemira Oy회사의 Titan M262CD), 햇볕 화상 방지제(Givaudan회사의 Parsol MCX 및 Parsol 1789 또는 벤조페논-3), 또는 비타민(비타민 D,A,E,K)과 같은 친유성 물질을 첨가할 수 있다.
그리고 나서, 균질 페이스트가 얻어질 때까지, 오일찌꺼기와 첨가된 지질상(added lipid Phase)의 반죽작업이 이루어진다. 비산화 분위기(진공 또는 질소분위기)에서 작업하는 것이 좋다.
지질액포는 0.01100 중량의 외인성지질 또는 외인성 친유성 물질을 함유할 수 있다.
그 다음에, 수상(the aqueous phase)이 첨가되는데, 상온에서 그리고 불활성분위기(진공 또는 질소분위기)에서 하는 것이 좋다. 이 수상은, 물 외에, 각종 친수성 성분을 함유할 수 있다.
수상의 첨가는 대략 40:605:95의 페이스트/수상 중량비를 갖도록 하기 위해 일반적으로 이루어진다. 30:705:95의 비율이 바람직하다.
유탁액을 얻기 위해, 혼합물 전체를, 예를 들어 콜로이드 연마기(mill)를 사용하여, 상당한 강도로 교반작업에 투입한다.
이렇게 얻어진 유탁액은, 예를 들어 200- 마이크로미터 체(sieve)에 넣어 여과 및/또는 경사분리를 실시한다.
얻어진 유탁액은 상대적으로 희석된 상태이고, 일반적으로 원심분리에 의해 이 유탁액을 농축하는 것이 필요하다. 이러한 목적으로, 지질상(lipid phase)의 비율에 알맞는 디스크 원심분리기를 사용할 수도 있다. 이렇게 얻어진 생성물은, 친유성 성분의 비율이 제조조건에 따라 대략 2070 중량사이로 변할 수 있는 지질입자의 농축물이다.
이러한 원심분리를 전후하여, 지질 현탁액을 열처리할 수 있는데, 그 조건은 80 140의 온도로 2초에서 10분까지 다양하게 할 수 있다. 필요한 경우, 예를 들어 골린(Gaulin)타입 장치를 이용하여 균질화 작업을 할 수 있는데, 그 작업조건은 5400105Pa 사이에서 다양하게 할 수 있다.
이러한 지질입자 농축물은 아래에 설명하는 수상으로 희석할 수도 있다. 이 수상은 크산고무(xanthan gum), 스클레란고무(sclerane gum), 벤톤과 유도체, 셀루로즈와 유도체, 카보폴(Carbopol)과 유도체, 구주콩나무, 카라기난과 유도체와 같은 겔화제(gelling agent)를 사용하여 침강농축(thicken)할 수도 있다.
그에 더하여, 버터와 같이 만들기 위해 위의 농축된 지질입자를 낙농기술에 의해 교유처리할(churn) 수 있는데, 수분을 빼내기 위해 압축한다.
그렇게 얻어진 유탁액은 대체로 0.320 마이크로미터의 평균입자 크기를 갖는다.
그렇게 얻어진 유탁액은 특히 화장품 분야에 적용하게 되며, 본 발명의 주제도 또한 본 발명에 의한 지질액포를 함유하는 화장조성물(예를 들어 수화조성물, 햇볕보호 조성물, 영양 조성물)이다.
자연유화시스템에의 이들 조성물(올레오신, 인지질)의 사용은 최종 제품의 피부내성(skin tolerance)의 향상을 가져다 준다.
화장용품의 유탁액을 만드는 경우에는, 예를 들어 다음의 성분을 포함하는 수상을 사용할 수 있다 :
또한 본 발명의 유탁액은 식품제조분야에 적용된다. 그러므로 본 발명의 주제는 또한 본 발명에 의한 지질액포를 함유하는 식품조성물에 관한 것이기도 하다. 예로서, 클레스테롤이 없는 비타민 강화 밀크타입 보조식품, 밀크타입 발효디저트, 요구르트 및 거품 크림등을 들 수 있다. 밀크타입 발효디저트와 요구르트는, 본 발명에 의한 유탁액에 락토바실러스속을 첨가하고 나서, 대략 35의 온도로 5시간동안 배양함으로써 만들 수 있다. 본 발명에 의한 농축유탁액 10부에 촉진제(탄산가스 또는 이산화질소) 90부를 첨가하여 얻을 수 있으며, 여기에는 일상적인 식품첨가제(풍미제와 설탕)이 첨가된다.
본 발명에 의한 유탁액은 또한, 올레오신의 고유한 성질(작은 크기와 친유성)과 관련하여, 인간 또는 가축용의 약품분야에 응용할 수 있다.
그리하여, 본 발명의 주제는 또한 약품조성물이기도 하다. 하나의 예로서, 피부침투 반창고(transdermal patches)를 통해 비타민 E, 비타민 D 또는 호르몬을 공급하기 위한 조성물을 들 수 있다.
나아가, 위에서 얻어진 유탁액은 포유동물의 아폴리포 단백질에 매우 유사한 단백질을 포함한다 ; 바꾸어 말하면, 포유동물의 리파아제(lipase)가 본 발명에 의한 유탁액의 단백질을 확인(recognize)하여, 리파아제가 입자의 피막(membranes)에 결합되고(bound), 결과적으로 문제의 리파아제의 기질(substrates)인 지질이 분해되도록 할 수 있는 것으로 생각된다.
아래의 실시예에 의해 본 발명을 상세히 설명한다.
[실시예 1]
낙화생 오일찌꺼기를, 대략 0.1mm 이하의 크기로 될 때까지, 임펠러 분쇄기를 사용하여 분쇄하였다.
이 오일찌꺼기는 대략 20 중량의 트리글리세리드를 함유한다.
식물유(낙화생 트리글리세리드 또는 다른 유성식물의 트리글리세리드) 50부를 분쇄된 오일찌꺼기 50부에 첨가했다. 이렇게 만든 것을, 균질페이스트를 얻을 때까지, 진공에서 상온하에 반죽하였다.
이 페이스트에 900부의 물을 첨가했다. 이것을, 상온하의 진공에서, 콜로이드 연마기를 최대성능으로 돌려서 활발히 교반시켰다.
이 생성물을 200- 마이크로미터 체(sieve)를 통해 여과시켰다. 유동성이 높은 유액인 여과액을, 선택적으로, 낙농원심분리기에서 원심분리했다.
평균 3 마이크로미터 크기를 지며, 대략 60의 트리글리세리드를 포함하는 지질입자의 여과액을 얻었다.
[실시예 2]
실시예 1과 동일한 공정으로, 마카다미아 오일찌꺼기(25 중량의 트리글리세리드 함유)의 30중량부에 트리글리세리드(마카다미아 오일 또는 다른 유성식물의 오일) 70중량부를 첨가했다.
이렇게 만들어진 페이스트에 900중량부의 비율로 물을 첨가했다.
평균 3 마이크로미터의 크기를 가진 지질입자의 농축액을 최종적으로 얻었으며, 이 농축액은 약 60의 트리글리세리드를 함유했다.
본 발명의 공정에 의해 얻은 조성물의 예를 아래에 나타내었다.
[제조예 A]
밀크로우션(face milk)
농축물 A는 식물유로부터 실시예 1에 기술된 바와 같이 제조한다.
pH는 5.5에서 6.5(qs=구연산)의 사이로 다양하고, 점도는 2,0003,000cP이다.
[제조예 B]
햇볕에 타는 것을 방지하는 밀크크림
농축물 B는, 예를 들어 아래의 조성으로 된 오일로부터 실시예 1에 기술된 바와 같이 제조한다 :
pH는 5.5에서 6.5(qs=구연산)의 사이로 다양하고, 점도는 2,0003,000cP이다.
[제조예 C]
가수작용 보디 밀크크림
농축액 C는, 조조바 지방 에스테르(510)가 첨가되는 식물유로부터 실시예 1에 기술한 바와 같이 제조한다.
pH는 6.0에서 6.5(qs=구연산)의 사이로 다양하고, 점도는 2,0003,000cP이다.
[제조예 D]
콜레스테롤 없는 비타민 강화 밀크타입 보조식품
농축액 D는, 높은 함량의 감마 리놀렌산 트리글리세리드를 함유하고 비타민 D(500IU/g max) 또는 A(1,500IU/g max)가 첨가되는 오일을 사용하여, 실시예 1에 기술된 바와 같이 제조했다.
다음 조건을 채용한다면, 보존제는 사용하지 않을 수도 있다.
- 오일찌꺼기내의 박테리아의 초기무력화.
- 상술한 첨가를 전후한 현탁액의 초고온처리(120 3초)
- 테트라팩 또는 이에 준하는 포장내의 저장
그렇지 않으면, 식품보존제를 선택하게 되는데, 다음의 것이 바람직하다 :
- 소르빈산
- 각종 파라벤(parabens)
- 아황산 나트륨
- BHT
pH는 구연산을 사용하여 6.50.2로 조정한다.
유성체의 외피에 존재하는 단백질의 상이한 성질을 보여주는 실험결과를 아래에 제시한다.
[실시예 3]
마카다미아 오일을 사용하여 실시예 2에서와 같이 실시했다.
지질액포의 농축물로부터, 디에틸 에테르로 지질을 추출한 후 요소 구배법을 사용하여 단백질을 분리했다(Millichip, Int. Colloquim Plant Lipids).
단백질을 10 밀리블 트리스-염산(Tris-HC1) 완충액(0.07 몰 소디움 도레실설레이트,pH8)에 재차 용해시켰다.
10 밀리블 트리스-염산 완충액(0.07 M SDS,pH8.2)으로 평형되고 용출된(equilibrated and eluted) 슈퍼로즈 6 칼럼(a Superose 6 column)을 장착한 분자체(molecular sieve) 크로마토그래피에 의해 단백질의 정제를 실시했다.
50개의 분획이 분리되었고, 용출피크가 나타난 분획 7,36 및 43을 시험했다.
이러한 목적을, (1→3)-알파-글루코스 및 (1→2)-베타-크실로오스 잔기를 함유하는, 대부분의 식물에 공통된, 탄수화물복합체(complex carbohydrate units)와 반응하는 대두 베타-글루코시다제가 특이하게 반응하는(directed against) 혈청(serum)을 사용하여, 도트-블로트기법(dot-blot technique)이 사용되었다.
분획 7과 36은 베타 글루코사이드와 반응하는 세륨에 의해 인식되었으나, 분획 43은 그러하지 아니하였다. 이는 분획 43의 경우에는 존재하지 않지만, 분획 7과 36에서 글루코사이드 체인이 존재함을 나타낸 것이라고 할 수 있다.

Claims (9)

  1. 0.1에서 20 마이크로미터의 평균크기를 가지며, 유성식물 종자의 유성체에 존재하는 실질적으로 전체의 단백질과 인지질로 이루어지고 외인성지질 및/또는 외인성 친유물질을 함유하는 중심부를 둘러싸고 있는 외피를 포함하는, 지질액포.
  2. 제1항에 있어서, 단백질과 인지질이 오일찌꺼기에 존재하는 것들인, 지질액포.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 수상에 분산된 지질액포를 함유하는, 수성유탁액.
  4. 제3항에 있어서, - 오일찌꺼기의 분쇄, - 지질의 전체적인 백분율이 5090 중량가 되도록 하기 위해 분쇄된 오일찌꺼기에 대한 지질상(lipid phase)의 첨가, - 균질 페이스트가 얻어질 때까지, 분쇄된 오일찌꺼기와 지질상의 반죽, - 대략 40:60에서 5:95의 페이스트/수상(aqueous phase) 중량비가 되도록, 상기 페이스트에 대한 수상의 첨가, - 유탁액이 형성되도록 상기 페이스트와 상기 수상의 교반으로 이루어지는 수성유탁액 제조방법.
  5. 제4항에 있어서, 상기 수상의 첨가와 그 수상의 상기 페이스트와의 혼합이 상온에서 이루어지는, 수성유탁액의 제조방법.
  6. 제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 수상의 첨가와 그 수상의 상기 페이스트와의 혼합이 비산화 분위기에서 이루어지는, 수성유탁액의 제조방법.
  7. 화장품베이스에 효과적인 양의, 0.1에서 20 마이크로미터의 평균크기를 가지며, 유성식물 종자의 유성체에 존재하는 실질적으로 전체의 단백질과 인지질로 이루어지고 외인성지질 및/또는 외인성 친유물질을 함유하는 중심부를 둘러싸고 있는 외피를 포함하는 지질액포를 함유하는 화장조성물.
  8. 제4항에 있어서, 고체입자를 제거하기 위해 상기 유탁액의 경사분리(decantation) 및/또는 여과단계와 이어서 농축된 유탁액을 얻기위한 상기 유탁액의 원심분리를 포함하는, 수성유탁액의 제조방법.
  9. 제8항에 있어서, 농축된 유탁액이 추가로 교유처리(churn)되는, 수성유탁액의 제조방법.
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