KR0147890B1 - 유산균 배양액의 발효냄새를 제거하는 방법 - Google Patents

유산균 배양액의 발효냄새를 제거하는 방법

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Abstract

본 발명은 미네랄과 펩티드와의 복합체를 함유한 유산균 배양액으로부터 발효냄새 성분을 제거하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게도 1단계:증기증류에 의한 정제, 2단계:흡착에 의한 정제 및 3단계:이온교환수지 또는 고다공성 수지에 의한 정제로 구성된 3단계의 정제공정을 통해 발효냄새 성분을 제거하여 활성 산소소거효과 및 보습효과가 우수한 유산균 배양액을 제공하는 방법에 관한 것이다.

Description

유산균 배양액의 발효냄새를 제거하는 방법
본 발명은 미네랄과 펩티드와의 복합체를 함유한 유산균 배양액으로부터 발효냄새 성분을 제거하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 1단계:증기증류에 의한 정제, 2단계:흡착에 의한 정제 및 3단계:이온교환수지 또는 고다공성 수지에 의한 정제로 구성된 3단계의 정제공정을 통해 발효냄새 성분을 제거하여 활성 산소 소거효과 및 보습효과가 우수한 유산균 배양액을 제공하는 방법에 관한 것이다.
최근 세포에 대한 연구가 진척되어감에 따라 기능성 화장품에 대한 관심이 고조되고 있는데, 기능성 화장품의 원료 개발에 있어서 중요한 측면 중의 하나는 활성 산소류의 소거이다.
활성 산소류의 작용은 지질 과산화, 단백질 변성, 핵산의 돌연변이 유발 등을 기본으로 하고 있으며, 이와 같은 활성 산소류(1O2, OH, O2, H2O2)의 자가용은 노화, 발암의 근원적 원인이 되고 있으며, 생체의 염증 반응 및 각종 질환과 관련되어 있다.
이미, 활성 산소 제거 소거와 관련된 기능성 화장품의 원료 개발에 있어서, 탈지유 또는 탈지분유에 금속이온과 단백질 분행효소 및 유산균을 첨가하여 배양한 후 유산균을 분리하고 특정의 처리를 하면 보습 효과와 유해 산소 소거 효과가 뛰어난 화장품 원료를 얻어낼 수 있음을 밝혀낸 바 있다(대한민국 특허출원공개 91-19600호).
즉, 본 발명은 탈지유 및 탈지분유에, 단백질 분해효소와 유산균을 첨가하여 배양한 후, 배양액에 단백질 분해효소를 첨가하여 펩티드를 얻고, 여기에 각종 활성 미네랄을 첨가하여 펩티드와 미네랄과의 복합체를 형성시킴으로써 보습 효과와 유해 산소 소거 효과가 뛰어난 화장품 원료(유산균 배양액)를 얻는 방법에 기초를 두고 있다.
유산균 배양액은, 유산균 배양에 의한 우유 단백질의 가수분해에 의해 생성된 펩티드와, 피부에 활성 미네랄을 공급할 목적으로 첨가된 미네랄과의 복합체로 형성되어 있다. 유산균 배양액은, 사용된 원료가 저분자 및 동물성 자원이므로 피부 투과성이 좋고 피부 친화력이 우수하며, 특히 유산균의 주대사물인 젖산은 나트륨과 염을 형성하여 뛰어난 보습력을 가진 물질이다. 즉, 펩티드와 미네랄과의 복합체는, 피부에 활성 미네랄을 공급할 뿐 아니라, 그 자체는 활성산소 소거효과 또한 뛰어나다.
그러나, 이러한 우수한 보습력 및 활성 산소 소거능을 갖는 유산균 배양액은 발효 물질 특유의 냄새가 심하여 화장품 및 의약부의품 등에 사용이 어려운 실정이다.
이에, 본 발명자들은 특유의 발효냄새가 없으면서 보습력 및 활성 산소 소거능이 우수한 기능성 화장품 원료를 제공하기 위하여, 유산균 배양액에 함유된 발표냄새 성분들을 예측하고, 이러한 예측에 근거하여 정제 공정을 다단계로 구성함으로써 유효성분의 손실없이 효과적으로 발효냄새 성분들을 제거할 수 있는 방법을 연구하게 되었다. 그 결과, 발효냄새는 유산균 배양 및 단백질 분해효소의 처리와 관련하여 부산물로 생성되는 휘발성 성분의 주종을 이루는 알데히드게 화합물, 변성 유리지방산 및 변성 단백질류임을 예측하고, 다양한 구성의 정제공정을 통해, 1단계:증기증류에 의한 정제, 2단계:흡착에 의한 정제 및 3단계:이온교환수지 또는 고다공성 수지에 의한 정제로 구성되는 정제공정에 의해 가장 효과적으로 발효냄새 성분 성분들을 제거할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은, 미네랄과 펩티드와의 복합체를 합유한 유산균 배양액으로부터 특유의 발효냄새를 제거하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 미네랄과 펩티드와의 복합체를 함유한 유산균 배양액으로부터 특유의 발효냄새를 제거하여, 보습력 및 활성 산소 소거능이 우수한 유산균 배양액을 제공하는 방법에 관한 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은, 탈지유 또는 탈지분유에 단백질 분해효소 및 유산균을 첨가하여 배양한 후, 균체 및 배양액의 단백질을 분해하고, 미네랄을 공급하여 얻은 유산균 배양액으로부터 특유의 발효냄새를 제거하는 방법을 제공하며, 본 발명에 따른 발효냄새의 제거방법은,
전기한 유산균 배양액에, 35∼95℃, 100∼600 torr에 정제한 수증기를, 시간당 배양액의 0.5∼10배를 공브하여, 1차 정제액을 얻는 단계;
전기한 1차 정제액, 활성 백토, 활성탄, 제올라이트 활성 알루미나 중에서 선택된 1종 이상을 1∼15중량% 공급하여 30∼95℃에서 1∼3시간 교반한 후, 여과하여, 2차 정제액을 얻는 단계; 및
전기한 2차 정제액을, 수산기(OH-)로 활성화시킨 음이온 교환수지와 수소기(H+)로 활성화시킨 양이온 교환수지를 2:!의 부피비로 혼합한 이온교환수지 또는 다공성수지에 적용하여, 3차 정제액을 얻는 단계를 포함함을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 유산균 배양액의 발효냄새의 제거방법에서, 이온교환수지 및 다공성수지는 유산균 배양액에 대하여 부피비로 0.1∼20배로 사용하는 것이 바람직하다. 또, 이온교환수지나 다공성 수지는 단상식 탑이나 혼상식 탑에 충전하여 사용하거나, 2차 정제액에 직접 가하여 혼합 교반하여 사용할 수 있다.
[참고예]
탈지분유 1∼10%, 식염 및 트리스 완충액이 포함된 배지 10ℓ를 용량 14ℓ 발효조에 충입하고, 121℃에서 40분간 증기멸균후 실온으로 냉각한 다음 별도로 멸균한 포도당 용액 1ℓ를 최종농도 0.5%가 되도록 첨가한 배양액의 37℃에서 24시간동안 0.2%의 이스트엑기스, 포도당 1%에서 배양한 유산균(Lactobacillus bulgaricus) 종배양액 100㎖를 접종하여 통기량 0.01VVM으로 공기를 주입하고 pH조절 장치로 pH7.0을 유지하면서 40시간 배양하여 유산균 배양액 원액 10ℓ를 얻었다.
[실시예 1]
참고예에서 얻은 유산균 배양액 원액에, 35∼55℃, 450∼600 torr 조건하에서 정제된 수증기를 시간당 10kg을 공급하여 1차 정제 배양액을 얻었고, 연기에 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 2차 정제 배양액을 얻었다. 다시 얻은 2차 정제 배양액을 수산기(OH-)로 활성화시킨 음이온교환수지와 수소기(H+)로 활성화시킨 양이온교환수지를 각각 3ℓ, 1.5ℓ를 혼합 충전한 혼상식 탑에 통과시켜 정제된 유산균 배양액 8,8ℓ를 얻었다.
[실시예 2]
참고예에서 얻은 유산균 배양액 원액에, 55∼65℃, 100∼200 torr 조건하에서 정제된 수증기를 시간당 20kg을 공급하여 1차 정제 배양액을 얻었고, 여기에 제올라이트를 100g씩 첨가하여 50∼60℃에서 2시간 교반한 후, 여과하여 2차 정제 배양액을 얻었다. 다시 얻은 2차 정제 배양액을 고다공성 비이온수지를 3ℓ 충전한 수지탑을 통과시켜 정제된 유산균 배양액 9.3ℓ를 얻었다.
[비교예 1]
참고예에서 얻은 유산균 배양액 원액에, 35∼55℃, 450∼600 torr 조건하에서 정제된 수증기를 시간당 10kg을 공급하여 1차 정제 배양액을 얻었고, 여기에 다시 상기한 정제된 수증기를 시간당 10kg을 공급하여 2차 정제 배양액을 얻었다. 얻은 2차 정제 배양액에 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 정제된 유산균 배양액 9.4ℓ를 얻었다.
[비교예 2]
참고예에서 얻은 유산균 배양액 원액에, 35∼55℃, 450∼600 torr 조건하에서 정제된 수증기를 시간당 10kg을 공급하여 1차 정제 배양액을 얻었고, 여기에 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 2차 정제 배양액을 얻었다. 얻은 2차 정제 배양액에 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 다시 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 정제된 유산균 배양액 8.5ℓ를 얻었다.
[비교예 3]
참고예에서 얻은 유산균 배양액 원액에, 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 1차 정제 배양액을 얻었다. 얻은 1차 정제 배양액에 활성백토와 활성알루미나를 각각 50g씩 다시 첨가하여 70∼95℃에서 1시간 교반한 후, 여과하여 2차 정제 배양액을 얻었다. 다시, 얻을 2차 정제 배양액을 수산시(OH-)로 활성화시킨 음이온교환수지와 수소기(H+)로 활성화시킨 양이온교환수지를 각각 3ℓ, 1.5ℓ를 혼합 충전한 혼상식 탑에 통과시켜 정제된 유산균 배양액 8.7ℓ를 얻었다.
[시험예 1]
악취의 유무
상기 참고예, 실시기예 1∼2, 비교예 1∼3에서 얻은 유산균 배양액에 대하여, 악취의 유무에 대하여 전문 검사요원 20명을 대상으로 다음의 평가법에 따라 관능검사를 실시하였다.
[시험예 2]
활성산소 소거효과 비교측정
활성산소 소거능을 크산틴옥시다제(xanthin oxidase;XOD)를 이용한 효소 측정법에 의해 측정하였다.
이상의 시약을 혼합하고, 시료를 100㎕ 넣은 후, 하이포-크산틴(사그마) 100㎕를 가한 다음, 37℃에서 20분간 반응시켰다. 반응 종료후에 A540에서 흡광도를 측정하고, 활성산소 소거능을 계산하였다. 또, 생성된 슈퍼록사이드 라디칼을 50% 저해하는 SOD활성을 1Unit로 잡는다. 측정치는 2회 반복한 실험결과를 평균하였다.
[시험예 3]
보습효과 비교 측정
피부 보습력 측정을 피부에서 가장 높은 절연계수를 가지고 잇는 수분 함량에 따른 정전용량을 측정함으로써 수분함량의 상대적 크기를 나타낼 수 있는 Corneometer(Corneometer CM820)를 사용하여 측정하였다.
상기 표 1, 표2, 표3으로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 방법에 따르면, 배양액 고유의 발효냄새가 효과적으로 제거될 뿐만아니라, 정제 후에도, 유산균 배양액이 갖고 있던 우수한 활성산소 소거능이나 보습효과가 그대로 유지됨을 알 수 있습니다. 따라서, 본 발명의 정제방법에 의하면, 유산균 배양액 특유의 발효냄새가 없으면서 보습력 및 활성산소 소거능이 우수한 기능성 화장품 원료를 제공할 수 있습니다.

Claims (2)

  1. 탈지유 또는 탈지분유에 단백질 분해효소 및 유산균을 첨가하여 배양한 후, 균체 및 배양액의 단백질을 분해하고, 미네랄을 공급하여 얻은 유산균 배양액으로부터 특유의 발효냄새를 제거하는 방법을 제공하며, 본 발명에 따른 발효냄새의 제거방법은, 전기한 유산균 배양액에, 35∼95℃, 100∼600 torr에서 정제한 수증기를, 시간당 배양액의 0.5∼10배를 공급하여, 1차 정제액을 얻는 단계; 전기한 1차 정제액에, 활성 백토, 활성탄, 제올라이트, 활성 알루미나 중에서 선택된 1종 이상을 1∼15중량% 공급하여, 30∼95℃에서 1∼3시간 교반한 후, 여과하여, 2차 정제액을 얻는 단계; 및 전기한 2차 정제액을, 수산기(OH-)로 활성화시킨 음이온 교환수지와 수소기(H+)로 활성화시킨 양이온 교환수지를 2:1의 부피비로 혼합한 이온교환수지 또는 다공성수지에 적용하여, 3차 정제액을 얻는 단계를 포함함을 특징으로 하는 유산균 배양액의 발표냄새를 제거하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 이온교환수지 또는 다공성 수지는 유산균 배양액에 대하여 부피비로 0.1∼20배로 사용하는 것을 특징으로 하는 유산균 배양액을 발효냄새를 제거하는 방법.
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