JPWO2021173797A5 - - Google Patents
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Description
他の実施形態
本発明はその詳細な説明と関連して記載されてきたが、前述の説明は本発明の範囲を例示したものであって、発明の範囲を限定することを意図したものではなく、発明の範囲は添付の特許請求の範囲により定義されると理解される。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内である。
以下に、本願の当初の特許請求の範囲に記載の発明を列挙する。
［発明１］
融合タンパク質であって、
Ｎ末端シグナル配列と、
ヒトα－２，６－シアリルトランスフェラーゼ１（ＳＴ６Ｇａｌ１）の酵素的に活性な部分と、を含む、融合タンパク質。
［発明２］
前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４を含む、発明１に記載の融合タンパク質。
［発明３］
前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４からなる、発明２に記載の融合タンパク質。
［発明４］
前記シグナル配列が、Ｎ末端アズロシジンシグナル配列である、発明１～３のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明５］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含む、発明４に記載の融合タンパク質。
［発明６］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）からなる、発明４に記載の融合タンパク質。
［発明７］
親和性タグを更に含む、発明１～６のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明８］
前記親和性タグが、ポリヒスチジン、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、キチン結合タンパク質、ストレプトアビジンタグ（例えば、Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｎ－Ｐｈｅ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ（配列番号３１））、ＦＬＡＧタグ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号３２））、ビオチンタグ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明７に記載の融合タンパク質。
［発明９］
前記ポリヒスチジンタグが、ＨＨＨＨ（配列番号１１）、ＨＨＨＨＨ（配列番号１２）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号１３）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１４）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１５）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１６）、及びＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１７）からなる群から選択される、発明８に記載の融合タンパク質。
［発明１０］
前記親和性タグが、前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分のＮ末端側に向かって位置する、発明７～９のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明１１］
前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４を含む、発明１に記載の融合タンパク質。
［発明１２］
ヘキサヒスチジンタグを更に含む、発明１１に記載の融合タンパク質。
［発明１３］
前記ヘキサヒスチジンタグが、前記Ｎ末端シグナル配列と前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分との間にある、発明１２に記載の融合タンパク質。
［発明１４］
配列番号６からなる、発明１３に記載の融合タンパク質。
［発明１５］
発明１～１４のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
［発明１６］
発明１５に記載の核酸分子を含む、ベクター。
［発明１７］
前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたプロモーターを更に含む、発明１６に記載のベクター。
［発明１８］
前記プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターである、発明１６に記載のベクター。
［発明１９］
発明１６に記載のベクターで安定的に形質転換された宿主細胞。
［発明２０］
前記細胞が、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞又はその誘導体である、発明１７に記載の宿主細胞。
［発明２１］
前記細胞が、ＨＥＫ誘導体ＨＥＫ２９３である、発明２０に記載の宿主細胞。
［発明２２］
ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記融合タンパク質の発現を許容する条件下で、培地中で発明１９～２１のいずれか一つに記載の宿主細胞を培養することと、
前記培地から前記融合タンパク質を単離することと、を含む、方法。
［発明２３］
融合タンパク質であって、
Ｎ末端シグナル配列と、
ヒトβ－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ（Ｂ４ＧａｌＴ１）の酵素的に活性な部分と、を含む、融合タンパク質。
［発明２４］
前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２５］
前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３からなる、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２６］
前記シグナル配列が、Ｎ末端アズロシジンシグナル配列である、発明２３～２５のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明２７］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２８］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）からなる、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２９］
親和性タグを更に含む、発明２３～２８のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明３０］
前記親和性タグが、ポリヒスチジン、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、キチン結合タンパク質、ストレプトアビジンタグ（例えば、Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｎ－Ｐｈｅ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ（配列番号３１））、ＦＬＡＧタグ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号３２））、ビオチンタグ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明２９に記載の融合タンパク質。
［発明３１］
前記ポリヒスチジンタグが、ＨＨＨＨ（配列番号１１）、ＨＨＨＨＨ（配列番号１２）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号１３）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１４）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１５）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１６）、及びＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１７）からなる群から選択される、発明３０に記載の融合タンパク質。
［発明３２］
前記親和性タグが、前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分のＣ末端側に向かって位置する、発明２３～３１のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明３３］
前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明３４］
セプタヒスチジンタグを更に含む、発明３３に記載の融合タンパク質。
［発明３５］
前記セプタヒスチジンタグが、Ｃ末端である、発明３４に記載の融合タンパク質。
［発明３６］
配列番号４５からなる、発明３５に記載の融合タンパク質。
［発明３７］
発明２３～３６のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
［発明３８］
発明３７に記載の核酸分子を含む、ベクター。
［発明３９］
前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたプロモーターを更に含む、発明３８に記載のベクター。
［発明４０］
前記プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターである、発明３９に記載のベクター。
［発明４１］
発明１６に記載のベクターで安定的に形質転換された宿主細胞。
［発明４２］
前記細胞が、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞又はその誘導体である、発明４１に記載の宿主細胞。
［発明４３］
前記細胞が、ＨＥＫ誘導体ＨＥＫ２９３である、発明４２に記載の宿主細胞。
［発明４４］
ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記融合タンパク質の発現を許容する条件下で、培地中で発明４１～４３のいずれか一つに記載の宿主細胞を培養することと、
前記培地から前記融合タンパク質を単離することと、を含む、方法。
［発明４５］
免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体をシアル化する（sialyating）ための方法であって、
ａ）ＩｇＧ抗体を含む組成物を提供すること、
ｂ）ＵＤＰ－Ｇａｌ及びＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１及び配列番号４を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することと、を含む、方法。
［発明４６］
免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体をシアル化する（sialyating）ための方法であって、
ａ）ＩｇＧ抗体を含む組成物を提供することと、
ｂ）ＵＤＰ－Ｇａｌの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１に前記ＩｇＧ抗体を曝露し、それによって、ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を産生することと、
ｃ）ＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、配列番号４を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することと、を含む、方法。
［発明４７］
前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物が、ステップ（ｃ）の前に精製されない、発明４６に記載の方法。
［発明４８］
前記組成物のうちの１つ又は２つ以上をＣＭＰ－ＮＡＮＡで補充することを更に含む、発明４５～４７のいずれか一つに記載の方法。
［発明４９］
ＩｇＧ抗体の混合物が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明４５～４８のいずれか一つに記載の方法。
［発明５０］
前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの少なくとも６０％が、ジシアリル化される、発明４５又は４６に記載の方法。
［発明５１］
前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの５０％未満が、モノシアリル化される、発明４５又は４６に記載の方法。
本発明はその詳細な説明と関連して記載されてきたが、前述の説明は本発明の範囲を例示したものであって、発明の範囲を限定することを意図したものではなく、発明の範囲は添付の特許請求の範囲により定義されると理解される。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内である。
以下に、本願の当初の特許請求の範囲に記載の発明を列挙する。
［発明１］
融合タンパク質であって、
Ｎ末端シグナル配列と、
ヒトα－２，６－シアリルトランスフェラーゼ１（ＳＴ６Ｇａｌ１）の酵素的に活性な部分と、を含む、融合タンパク質。
［発明２］
前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４を含む、発明１に記載の融合タンパク質。
［発明３］
前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４からなる、発明２に記載の融合タンパク質。
［発明４］
前記シグナル配列が、Ｎ末端アズロシジンシグナル配列である、発明１～３のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明５］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含む、発明４に記載の融合タンパク質。
［発明６］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）からなる、発明４に記載の融合タンパク質。
［発明７］
親和性タグを更に含む、発明１～６のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明８］
前記親和性タグが、ポリヒスチジン、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、キチン結合タンパク質、ストレプトアビジンタグ（例えば、Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｎ－Ｐｈｅ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ（配列番号３１））、ＦＬＡＧタグ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号３２））、ビオチンタグ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明７に記載の融合タンパク質。
［発明９］
前記ポリヒスチジンタグが、ＨＨＨＨ（配列番号１１）、ＨＨＨＨＨ（配列番号１２）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号１３）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１４）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１５）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１６）、及びＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１７）からなる群から選択される、発明８に記載の融合タンパク質。
［発明１０］
前記親和性タグが、前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分のＮ末端側に向かって位置する、発明７～９のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明１１］
前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４を含む、発明１に記載の融合タンパク質。
［発明１２］
ヘキサヒスチジンタグを更に含む、発明１１に記載の融合タンパク質。
［発明１３］
前記ヘキサヒスチジンタグが、前記Ｎ末端シグナル配列と前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分との間にある、発明１２に記載の融合タンパク質。
［発明１４］
配列番号６からなる、発明１３に記載の融合タンパク質。
［発明１５］
発明１～１４のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
［発明１６］
発明１５に記載の核酸分子を含む、ベクター。
［発明１７］
前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたプロモーターを更に含む、発明１６に記載のベクター。
［発明１８］
前記プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターである、発明１６に記載のベクター。
［発明１９］
発明１６に記載のベクターで安定的に形質転換された宿主細胞。
［発明２０］
前記細胞が、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞又はその誘導体である、発明１７に記載の宿主細胞。
［発明２１］
前記細胞が、ＨＥＫ誘導体ＨＥＫ２９３である、発明２０に記載の宿主細胞。
［発明２２］
ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記融合タンパク質の発現を許容する条件下で、培地中で発明１９～２１のいずれか一つに記載の宿主細胞を培養することと、
前記培地から前記融合タンパク質を単離することと、を含む、方法。
［発明２３］
融合タンパク質であって、
Ｎ末端シグナル配列と、
ヒトβ－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ（Ｂ４ＧａｌＴ１）の酵素的に活性な部分と、を含む、融合タンパク質。
［発明２４］
前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２５］
前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３からなる、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２６］
前記シグナル配列が、Ｎ末端アズロシジンシグナル配列である、発明２３～２５のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明２７］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２８］
前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）からなる、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明２９］
親和性タグを更に含む、発明２３～２８のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明３０］
前記親和性タグが、ポリヒスチジン、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、キチン結合タンパク質、ストレプトアビジンタグ（例えば、Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｎ－Ｐｈｅ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ（配列番号３１））、ＦＬＡＧタグ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号３２））、ビオチンタグ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明２９に記載の融合タンパク質。
［発明３１］
前記ポリヒスチジンタグが、ＨＨＨＨ（配列番号１１）、ＨＨＨＨＨ（配列番号１２）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号１３）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１４）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１５）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１６）、及びＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１７）からなる群から選択される、発明３０に記載の融合タンパク質。
［発明３２］
前記親和性タグが、前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分のＣ末端側に向かって位置する、発明２３～３１のいずれか一つに記載の融合タンパク質。
［発明３３］
前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３を含む、発明２３に記載の融合タンパク質。
［発明３４］
セプタヒスチジンタグを更に含む、発明３３に記載の融合タンパク質。
［発明３５］
前記セプタヒスチジンタグが、Ｃ末端である、発明３４に記載の融合タンパク質。
［発明３６］
配列番号４５からなる、発明３５に記載の融合タンパク質。
［発明３７］
発明２３～３６のいずれか一つに記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
［発明３８］
発明３７に記載の核酸分子を含む、ベクター。
［発明３９］
前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたプロモーターを更に含む、発明３８に記載のベクター。
［発明４０］
前記プロモーターが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターである、発明３９に記載のベクター。
［発明４１］
発明１６に記載のベクターで安定的に形質転換された宿主細胞。
［発明４２］
前記細胞が、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞又はその誘導体である、発明４１に記載の宿主細胞。
［発明４３］
前記細胞が、ＨＥＫ誘導体ＨＥＫ２９３である、発明４２に記載の宿主細胞。
［発明４４］
ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記融合タンパク質の発現を許容する条件下で、培地中で発明４１～４３のいずれか一つに記載の宿主細胞を培養することと、
前記培地から前記融合タンパク質を単離することと、を含む、方法。
［発明４５］
免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体をシアル化する（sialyating）ための方法であって、
ａ）ＩｇＧ抗体を含む組成物を提供すること、
ｂ）ＵＤＰ－Ｇａｌ及びＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１及び配列番号４を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することと、を含む、方法。
［発明４６］
免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体をシアル化する（sialyating）ための方法であって、
ａ）ＩｇＧ抗体を含む組成物を提供することと、
ｂ）ＵＤＰ－Ｇａｌの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１に前記ＩｇＧ抗体を曝露し、それによって、ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を産生することと、
ｃ）ＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、配列番号４を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することと、を含む、方法。
［発明４７］
前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物が、ステップ（ｃ）の前に精製されない、発明４６に記載の方法。
［発明４８］
前記組成物のうちの１つ又は２つ以上をＣＭＰ－ＮＡＮＡで補充することを更に含む、発明４５～４７のいずれか一つに記載の方法。
［発明４９］
ＩｇＧ抗体の混合物が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、発明４５～４８のいずれか一つに記載の方法。
［発明５０］
前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの少なくとも６０％が、ジシアリル化される、発明４５又は４６に記載の方法。
［発明５１］
前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの５０％未満が、モノシアリル化される、発明４５又は４６に記載の方法。
Claims (15)
- 融合タンパク質であって、
Ｎ末端シグナル配列と、
（ｉ）ヒトα－２，６－シアリルトランスフェラーゼ１（ＳＴ６Ｇａｌ１）の酵素的に活性な部分、又は
（ｉｉ）ヒトβ－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ（Ｂ４ＧａｌＴ１）の酵素的に活性な部分と
を含む、融合タンパク質。 - 前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４の配列を含む若しくは配列番号４の配列からなる、又は
前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３の配列を含む若しくは配列番号４３の配列からなる、
請求項１に記載の融合タンパク質。 - 前記シグナル配列が、Ｎ末端アズロシジンシグナル配列であり、任意選択で、前記アズロシジンシグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含む又は配列番号３０の配列からなる、請求項１又は２に記載の融合タンパク質。
- 親和性タグを更に含み、任意選択で、
（ｉ）前記親和性タグが、ポリヒスチジン、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、キチン結合タンパク質、ストレプトアビジンタグ（例えば、Ｔｒｐ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｎ－Ｐｈｅ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ（配列番号３１））、ＦＬＡＧタグ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号３２））、ビオチンタグ、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、又は
（ｉｉ）前記親和性タグが、ＨＨＨＨ（配列番号１１）、ＨＨＨＨＨ（配列番号１２）、ＨＨＨＨＨＨ（配列番号１３）、ＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１４）、ＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１５）、ＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１６）、及びＨＨＨＨＨＨＨＨＨＨ（配列番号１７）からなる群から選択されるポリヒスチジンタグである、
請求項１～３のいずれか一項に記載の融合タンパク質。 - 前記親和性タグが、前記ＳＴ６Ｇａｌ１又はＢ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分のＮ末端側に向かって位置する、請求項４に記載の融合タンパク質。
- 前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４の配列を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
- 前記融合タンパク質が、
（ｉ）ヘキサヒスチジンタグを更に含む、
（ｉｉ）前記Ｎ末端シグナル配列と前記ＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分との間にあるヘキサヒスチジンタグを更に含む、又は
（ｉｉｉ）配列番号６の配列からなる、
請求項６に記載の融合タンパク質。 - 前記Ｎ末端シグナル配列が、ＭＴＲＬＴＶＬＡＬＬＡＧＬＬＡＳＳＲＡ（配列番号３０）を含み、前記Ｂ４ＧａｌＴ１の酵素的に活性な部分が、配列番号４３の配列を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
- 前記融合タンパク質が、
（ｉ）セプタヒスチジンタグを更に含む、
（ｉｉ）Ｃ末端であるセプタヒスチジンタグを更に含む、又は
（ｉｉｉ）配列番号４５の配列からなる、
請求項８に記載の融合タンパク質。 - 請求項１～９のいずれか一項に記載の融合タンパク質をコードする、核酸分子。
- 請求項１０に記載の核酸分子を含むベクターであって、任意選択で、（ｉ）前記ベクターが前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたプロモーターを更に含む、又は（ｉｉ）前記ベクターが前記融合タンパク質をコードする前記核酸に動作可能に連結されたサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターを更に含む、前記ベクター。
- 請求項１１に記載のベクターで安定的に形質転換された宿主細胞であって、任意選択で、（ｉ）前記細胞が、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞又はその誘導体である、又は（ｉｉ）前記細胞が、ＨＥＫ誘導体ＨＥＫ２９３である、前記宿主細胞。
- ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記融合タンパク質の発現を許容する条件下で、培地中で請求項１２に記載の宿主細胞を培養することと、
前記培地から前記融合タンパク質を単離することと、を含む、方法。 - 免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）抗体をシアル化する（sialyating）ための方法であって、
ＩｇＧ抗体を含む組成物を提供することを含み、
かつ
ａ１）ＵＤＰ－Ｇａｌ及びＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１及び配列番号４の配列を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することを含む、又は
ｂ１）ＵＤＰ－Ｇａｌの存在下で、β１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ１に前記ＩｇＧ抗体を曝露し、それによって、ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を産生することと、
ｂ２）ＣＭＰ－ＮＡＮＡの存在下で、配列番号４の配列を含むＳＴ６Ｇａｌ１の酵素的に活性な部分に前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物を曝露し、それによって、シアル化（sialyated）ＩｇＧ（ｓＩｇＧ）を含む組成物を産生することとを含み、
任意選択で、前記ガラクトシル化ＩｇＧ抗体を含む組成物が、ステップ（ｂ２）の前に精製されない、
前記方法。 - （ｉ）前記組成物のうちの１つ又は２つ以上をＣＭＰ－ＮＡＮＡで補充することを更に含む、
（ｉｉ）ＩｇＧ抗体の混合物が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、
（ｉｉｉ）前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの少なくとも６０％が、ジシアリル化される、又は
（ｉｖ）前記ｓＩｇＧを含む組成物中の前記抗体のＦｃ領域上の分岐グリカンの５０％未満が、モノシアリル化される、
請求項１４に記載の方法。
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