JPWO2020205838A5 - - Google Patents

Claims (13)

1. 遺伝子改変細胞であって、
   ｍＲＮＡはＺＦＮ対をコードする、配列番号１５のＳＢ－ｍＲＥＮＨ１ ｍＲＮＡ、および配列番号１６のＳＢ－ｍＲＥＮＨ２ ｍＲＮＡ；ならびに
   ＺＦＮ対による切断後に作製されるゲノム改変であって、ＢＣＬ１１Ａ遺伝子が細胞において不活性化されるような内在ＢＣＬ１１Ａエンハンサー配列内に存在する改変、
   を含む赤血球（ＲＢＣ）前駆細胞を含む、前記遺伝子改変細胞。
2. 請求項１に記載の遺伝子改変細胞およびその系統の細胞を含む、医薬組成物。
3. それを必要とする対象においてベータ－サラセミア（β－サラセミア）を治療するおよび／または予防する方法において使用するための、請求項２に記載の医薬組成物。
4. 方法が、それを必要とする対象においてβ－サラセミアを治療するｅｘ ｖｉｖｏ方法であって、前記方法は、 対象における胎児ヘモグロビン（ＨｂＦ）産生が増大し、β－サラセミアの１つまたはそれ以上の臨床症状が減少、改善または除去されるように、医薬組成物を、対象に投与することを含む、請求項３に記載の医薬組成物。
5. （ｉ）β－サラセミアは、輸血依存性β－サラセミアである；
   （ｉｉ）グラム／血漿ｄＬ、および／もしくは総ヘモグロビン（Ｈｂ）中のＨｂＦパーセントにおける臨床検査ヘモグロビン画分のベースラインからの変化は、対象において達成される；
   （ｉｉｉ）ヘモグロビン因子は、成人ヘモグロビン（ＨｂＡ）および／もしくは胎児ヘモグロビン（ＨｂＦ）である；
   （ｉｖ）対象は、β^０／β^０もしくはβ^０／β^＋である；
   （ｖ）サラセミア関連疾患バイオマーカーのレベルは、治療後に変更され、場合により、前記バイオマーカーは、鉄代謝における変化；および／もしくはエリスロポエチン、ハプトグロビンおよび／もしくはヘプシジンのレベルにおける変化である；
   （ｖｉ）鉄過剰に関連するか、もしくはベースライン輸血療法に関連する臨床症状は、改善もしくは除去され、場合により、対象における内分泌機能異常の減少が、甲状腺ホルモン、ＩＧＦ－１、起床時コルチゾール、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、ＨｂＡ１Ｃおよび／もしくはビタミンＤレベルのレベルおよび／もしくは活性を決定することによってアッセイされる；ならびに／または
   （ｖｉｉ）対象におけるＲＢＣ輸血、および輸注血小板輸血、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）輸血、血漿輸血および／もしくは顆粒球輸血についての必要性は、低減もしくは除去される、
   請求項４に記載の医薬組成物。
6. 対象において低減または除去される臨床症状は、肝疾患、心臓異常、ならびに／または、骨粗鬆症および／もしくは骨折である、請求項４または５に記載の医薬組成物。
7. ベースライン赤血球生成は、医薬組成物の投与後に対象において変化し、場合により、過形成は、医薬組成物の投与後に対象において低減もしくは除去され、ならびに／または、未成熟細胞および／もしくは非定型形態を有する細胞の数は、対象において低減される、請求項４～６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
8. （ｉ）対象におけるＦ細胞の数およびパーセントは、医薬組成物の投与後に改変される；
   （ｉｉ）遺伝子改変細胞は、自家性または同種性である；
   （ｉｉｉ）ＢＣＬ１１Ａ遺伝子改変細胞は、１つもしくはそれ以上の追加の遺伝子改変をさらに含み、場合により、前記遺伝子改変細胞は、同種細胞であり、前記１つもしくはそれ以上の追加の遺伝子改変は、１つもしくはそれ以上の自己マーカーもしくは抗原の不活性化を含む；ならびに／または
   （ｉｖ） 遺伝子改変細胞は、対象から単離した造血幹細胞であり、例えば、前記造血幹細胞は、ＣＤ３４＋造血幹細胞もしくは前駆細胞（ＨＳＣ／ＰＣ）であり、ＣＤ３４＋ＨＳＣ／ＰＣは、単離前に１用量もしくはそれ以上のＧ－ＣＳＦおよび／もしくは１用量もしくはそれ以上のプレリキサフォルによる処置によって、各対象において動員され、場合により、少なくとも２５×１０^６個／ｋｇのＣＤ３４＋ＨＳＰＣは、対象において動員され、動員された細胞は、１回もしくはそれ以上のアフェレーシス周期によって回収される、
   請求項４～７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
9. （ｉ）遺伝子改変細胞を含む医薬組成物を対象に投与する前に、医薬組成物の細胞をＢＣＬ１１Ａ内の挿入および／もしくは欠失について評価することをさらに含む；ならびに／または
   （ｉｉ）遺伝子改変細胞を含む医薬組成物の投与前に、１つもしくはそれ以上の骨髄破壊調整剤を１回もしくはそれ以上、対象に投与することをさらに含み、場合により、前記骨髄破壊剤は、ブスルファンを含み、さらに：
   ブスルファンの静脈内（ＩＶ）投与は、０．５～５ｍｇ／ｋｇを１回もしくはそれ以上であるか；
   ブスルファンのＩＶ投与は、３．２ｍｇ／ｋｇ／日であるか；
   ０日目の遺伝子改変細胞を含む医薬組成物の輸注前の、輸注の６～３日前の４日間の総用量１２．８ｍｇ／ｋｇの中心静脈カテーテルを介したＩＶ；もしくは
   ブスルファンのＩＶ投与は、１日１回もしくは６時間毎である、
   請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
10. （ｉ）対象に投与される遺伝子改変細胞の用量は、細胞３×１０^６個／ｋｇ～細胞２０×１０^６個／ｋｇである；
    （ｉｉ）対象に投与される遺伝子改変細胞は、細胞約１×１０^７個／ｍＬの濃度で、１袋当たり細胞約１．０～２．０×１０^８個にて製剤化される；および／または
    （ｉｉｉ）遺伝子改変細胞は、投与前に凍結保存され、解凍の１５分以内に対象に投与される、
    請求項４～９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
11. 方法がさらに：
    （ｉ）遺伝子改変細胞の投与前、投与中および／もしくは投与後の対象のバイタルサインをモニタリングすること；ならびに／または
    （ｉｉ）遺伝子改変細胞の投与前に、対象におけるヘモグロビン、好中球および／もしくは血小板レベルを査定して、対象におけるヘモグロビンのベースラインレベルを決定すること、場合により、遺伝子改変細胞の投与後の対象におけるヘモグロビン、好中球および／もしくは血小板レベルは、ベースラインレベルと比較して、投与後何週間もしくは何カ月間も増大するか、もしくは安定なままである、
    請求項４～１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
12. （ｉ）対象は、遺伝子改変細胞の投与前および／または投与後に１つまたはそれ以上の濃厚赤血球（ＰＲＢＣ）輸血を受容する；
    （ｉｉ）対象における骨髄移植、血液成分および／または鉄キレート療法ＰＲＢＣ輸血のような追加の治療についての必要性は、低減または除去され、場合により、追加の治療についての必要性は、遺伝子改変細胞の投与の１～２０日以内に低減または除去される；
    （ｉｉｉ）対象を、投与後経時的にモニタリングして、輸注した細胞のインデルプロファイルと比較した、末梢血サンプル、骨髄穿刺液または他の組織源から単離した細胞のインデルプロファイルを決定して、対象における移植片の安定性をモニタリングし、場合により、前記細胞のインデルプロファイルは、対象への投与前にモニタリングされる、
    請求項４～１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
13. 細胞は、対象に投与する前に凍結保存される、請求項２に記載の医薬組成物。