JPWO2020082076A5 - - Google Patents
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Description
当業者は、本明細書に記載する本発明の特定の実施形態の多くの均等物に気付くであろう、または常例的実験のみを使用してそのような均等物を突き止めることができるであろう。そのような均等物は、後続の特許請求の範囲により包含されることが意図される。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目１)
ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフ（ＰＢＭ）と、ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含むＲＮＡ成分であって、前記ＤＮＡ標的化配列、前記タンパク質結合モチーフ、および目的の配列は、親長鎖散在反復（ＬＩＮＥ）エレメントタンパク質に由来するタンパク質成分に結合し、ｃＤＮＡに逆転写され得、前記ｃＤＮＡがＤＮＡの前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれ得るように、作動可能に連結されている、ＲＮＡ成分。
(項目２)
前記タンパク質成分が、ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数を含み、前記１つまたは複数のタンパク質結合モチーフが、前記ＲＮＡ成分を、前記タンパク質成分の前記ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼ、またはこれらの組合せに結合させる、項目１に記載のＲＮＡ成分。
(項目３)
親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
項目１または２に記載のＲＮＡ成分。
(項目４)
前記ＤＮＡ標的化配列が、前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である、項目１～３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目５)
前記目的の配列が、遺伝子、遺伝子の断片、または機能性核酸をコードする、項目１～４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目６)
親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する３’ＰＢＭ配列を含む、項目１～５のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目７)
ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓトレーサー配列、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓガイド配列、またはこれらの組合せを含む、項目１～６のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目８)
前記親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する５’ＰＢＭ配列を含む、項目１～７のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目９)
前記５’ＰＢＭが、非機能性ＩＲＥＳ配列を含む、項目８に記載のＲＮＡ成分。
(項目１０)
リボザイムをさらに含む、項目１～９のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１１)
前記リボザイムが、デルタ肝炎ウイルス様リボザイムである、項目１０に記載のＲＮＡ成分。
(項目１２)
前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、項目２～１０のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１３)
前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、項目１０に記載のＲＮＡ成分。
(項目１４)
前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、項目３～１３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１５)
ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼを含むタンパク質成分であって、前記ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼは、ＤＮＡ標的部位においてＲＮＡ成分およびＤＮＡに結合し得、前記ＲＮＡ成分からｃＤＮＡへの逆転写、および前記ＤＮＡ標的部位において、前記ＤＮＡへの前記ｃＤＮＡの組込みを助長し得るように、作動可能に連結されている、タンパク質成分。
(項目１６)
前記ＲＮＡ成分が、ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフと、前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含む、項目１５に記載のタンパク質成分。
(項目１７)
前記ＲＮＡ成分が、親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
項目１５または１６に記載のタンパク質成分。
(項目１８)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して変異している、項目１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目１９)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、前記親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して代替ＤＮＡ結合ドメインで置換されている、項目１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２０)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、別のＤＮＡ結合タンパク質からのＤＮＡ結合ドメインである、項目１９に記載のタンパク質成分。
(項目２１)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、ヘリックスターンヘリックス、ジンクフィンガー、ロイシンジッパー、ウイングドヘリックス、ウイングドヘリックスターンヘリックス、ヘリックスループヘリックス、ＨＭＧボックス、Ｗｏｒ３ドメイン、ＯＢフォールドドメイン、免疫グロブリンフォールド、Ｂ３ドメイン、ＴＡＬエフェクター、またはＲＮＡガイドドメインのうちの１つまたは複数を含む、項目１９または２０に記載のタンパク質成分。
(項目２２)
前記ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数の配列が、前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質の配列と同じである、または前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質と比較して前記ＲＮＡ成分に対する結合もしくは酵素活性を改善するように変異している、項目１５～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２３)
前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、項目１７～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２４)
前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、項目２３に記載のタンパク質成分。
(項目２５)
前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、項目１７～２４のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２６)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分をコードするベクター。
(項目２７)
項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分をコードするベクター。
(項目２８)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分と、項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分とを含む操作されたトランスポゾン。
(項目２９)
前記ＤＮＡ標的部位での組込み反応中に生産的な４方向ジャンクションが形成される、項目２８に記載のトランスポゾン。
(項目３０)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分、項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分、項目２６に記載のベクター、項目２７に記載のベクター、項目２８または２９に記載の操作されたトランスポゾン、またはこれらの任意の組合せを含む、医薬組成物。
(項目３１)
１つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法であって、前記１つまたは複数の細胞を、（ｉ）項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは項目１７に記載のベクターと組み合わせて、項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは項目２６に記載のベクターと、または（ｉｉ）項目２８もしくは２９に記載の操作されたトランスポゾンと接触させるステップを含む方法。
(項目３２)
前記細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏで接触させる、項目３１に記載の方法。
(項目３３)
次いで前記細胞が対象に導入される、項目３２に記載の方法。
(項目３４)
前記細胞をｉｎ ｖｉｖｏで接触させる、項目３１に記載の方法。
(項目３５)
前記細胞における前記目的の核酸配列の発現が、疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状、または疾患もしくは障害の根底にある分子経路を改善する、項目３１～３４のいずれか一項に記載の方法。
(項目３６)
有効数の細胞が、それを必要とする対象を処置するために修飾される、項目３５に記載の方法。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目１)
ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフ（ＰＢＭ）と、ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含むＲＮＡ成分であって、前記ＤＮＡ標的化配列、前記タンパク質結合モチーフ、および目的の配列は、親長鎖散在反復（ＬＩＮＥ）エレメントタンパク質に由来するタンパク質成分に結合し、ｃＤＮＡに逆転写され得、前記ｃＤＮＡがＤＮＡの前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれ得るように、作動可能に連結されている、ＲＮＡ成分。
(項目２)
前記タンパク質成分が、ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数を含み、前記１つまたは複数のタンパク質結合モチーフが、前記ＲＮＡ成分を、前記タンパク質成分の前記ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼ、またはこれらの組合せに結合させる、項目１に記載のＲＮＡ成分。
(項目３)
親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
項目１または２に記載のＲＮＡ成分。
(項目４)
前記ＤＮＡ標的化配列が、前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である、項目１～３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目５)
前記目的の配列が、遺伝子、遺伝子の断片、または機能性核酸をコードする、項目１～４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目６)
親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する３’ＰＢＭ配列を含む、項目１～５のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目７)
ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓトレーサー配列、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓガイド配列、またはこれらの組合せを含む、項目１～６のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目８)
前記親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する５’ＰＢＭ配列を含む、項目１～７のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目９)
前記５’ＰＢＭが、非機能性ＩＲＥＳ配列を含む、項目８に記載のＲＮＡ成分。
(項目１０)
リボザイムをさらに含む、項目１～９のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１１)
前記リボザイムが、デルタ肝炎ウイルス様リボザイムである、項目１０に記載のＲＮＡ成分。
(項目１２)
前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、項目２～１０のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１３)
前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、項目１０に記載のＲＮＡ成分。
(項目１４)
前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、項目３～１３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
(項目１５)
ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼを含むタンパク質成分であって、前記ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼは、ＤＮＡ標的部位においてＲＮＡ成分およびＤＮＡに結合し得、前記ＲＮＡ成分からｃＤＮＡへの逆転写、および前記ＤＮＡ標的部位において、前記ＤＮＡへの前記ｃＤＮＡの組込みを助長し得るように、作動可能に連結されている、タンパク質成分。
(項目１６)
前記ＲＮＡ成分が、ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフと、前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含む、項目１５に記載のタンパク質成分。
(項目１７)
前記ＲＮＡ成分が、親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
項目１５または１６に記載のタンパク質成分。
(項目１８)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して変異している、項目１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目１９)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、前記親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して代替ＤＮＡ結合ドメインで置換されている、項目１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２０)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、別のＤＮＡ結合タンパク質からのＤＮＡ結合ドメインである、項目１９に記載のタンパク質成分。
(項目２１)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、ヘリックスターンヘリックス、ジンクフィンガー、ロイシンジッパー、ウイングドヘリックス、ウイングドヘリックスターンヘリックス、ヘリックスループヘリックス、ＨＭＧボックス、Ｗｏｒ３ドメイン、ＯＢフォールドドメイン、免疫グロブリンフォールド、Ｂ３ドメイン、ＴＡＬエフェクター、またはＲＮＡガイドドメインのうちの１つまたは複数を含む、項目１９または２０に記載のタンパク質成分。
(項目２２)
前記ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数の配列が、前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質の配列と同じである、または前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質と比較して前記ＲＮＡ成分に対する結合もしくは酵素活性を改善するように変異している、項目１５～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２３)
前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、項目１７～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２４)
前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、項目２３に記載のタンパク質成分。
(項目２５)
前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、項目１７～２４のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
(項目２６)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分をコードするベクター。
(項目２７)
項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分をコードするベクター。
(項目２８)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分と、項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分とを含む操作されたトランスポゾン。
(項目２９)
前記ＤＮＡ標的部位での組込み反応中に生産的な４方向ジャンクションが形成される、項目２８に記載のトランスポゾン。
(項目３０)
項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分、項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分、項目２６に記載のベクター、項目２７に記載のベクター、項目２８または２９に記載の操作されたトランスポゾン、またはこれらの任意の組合せを含む、医薬組成物。
(項目３１)
１つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法であって、前記１つまたは複数の細胞を、（ｉ）項目１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは項目１７に記載のベクターと組み合わせて、項目１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは項目２６に記載のベクターと、または（ｉｉ）項目２８もしくは２９に記載の操作されたトランスポゾンと接触させるステップを含む方法。
(項目３２)
前記細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏで接触させる、項目３１に記載の方法。
(項目３３)
次いで前記細胞が対象に導入される、項目３２に記載の方法。
(項目３４)
前記細胞をｉｎ ｖｉｖｏで接触させる、項目３１に記載の方法。
(項目３５)
前記細胞における前記目的の核酸配列の発現が、疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状、または疾患もしくは障害の根底にある分子経路を改善する、項目３１～３４のいずれか一項に記載の方法。
(項目３６)
有効数の細胞が、それを必要とする対象を処置するために修飾される、項目３５に記載の方法。
Claims (39)
- ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフ（ＰＢＭ）と、ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含むＲＮＡ成分であって、前記ＤＮＡ標的化配列、前記タンパク質結合モチーフ、および目的の配列は、親長鎖散在反復（ＬＩＮＥ）エレメントタンパク質に由来するタンパク質成分に結合し、ｃＤＮＡに逆転写され得、前記ｃＤＮＡがＤＮＡの前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれ得るように、作動可能に連結されている、ＲＮＡ成分。
- 前記タンパク質成分が、ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数を含み、前記１つまたは複数のタンパク質結合モチーフが、前記ＲＮＡ成分を、前記タンパク質成分の前記ＲＮＡ結合ドメイン、リンカードメイン、逆転写酵素、ＤＮＡエンドヌクレアーゼ、またはこれらの組合せに結合させる、請求項１に記載のＲＮＡ成分。
- 親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
請求項１または２に記載のＲＮＡ成分。 - 前記ＤＮＡ標的化配列が、前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である、請求項１～３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 前記目的の配列が、遺伝子、遺伝子の断片、または機能性核酸をコードする、請求項１～４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する３’ＰＢＭ配列を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓトレーサー配列、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓガイド配列、またはこれらの組合せを含む、請求項１～６のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 前記親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥエレメントからのまたはそれに由来する５’ＰＢＭ配列を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 前記５’ＰＢＭが、非機能性ＩＲＥＳ配列を含む、請求項８に記載のＲＮＡ成分。
- リボザイムをさらに含む、請求項１～９のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 前記リボザイムが、デルタ肝炎ウイルス様リボザイムである、請求項１０に記載のＲＮＡ成分。
- 前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、請求項２～１０のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- 前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、請求項１０に記載のＲＮＡ成分。
- 前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、請求項３～１３のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分。
- ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼを含むタンパク質成分であって、前記ＤＮＡ結合ドメイン、ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼは、ＤＮＡ標的部位においてＲＮＡ成分およびＤＮＡに結合し得、前記ＲＮＡ成分からｃＤＮＡへの逆転写、および前記ＤＮＡ標的部位において、前記ＤＮＡへの前記ｃＤＮＡの組込みを助長し得るように、作動可能に連結されている、タンパク質成分。
- 前記ＲＮＡ成分が、ＤＮＡ標的化配列と、１つまたは複数のタンパク質結合モチーフと、前記ＤＮＡ標的部位に組み込まれる目的の核酸配列とを含む、請求項１５に記載のタンパク質成分。
- 前記ＲＮＡ成分が、親ＬＩＮＥもしくはＳＩＮＥ骨格からのまたはそれに由来するエレメントを含み、ＲＮＡ成分の前記目的の核酸配列が、前記ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥとは異種である；
タンパク質成分が、親ＬＩＮＥからのまたはそれに由来するエレメントを含む；あるいは
それらの組合せである、
請求項１５または１６に記載のタンパク質成分。 - 前記ＤＮＡ結合ドメインが、親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して変異している、請求項１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
- 前記ＤＮＡ結合ドメインが、前記親ＬＩＮＥ ＤＮＡ結合ドメインと比較して代替ＤＮＡ結合ドメインで置換されている、請求項１５～１７のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
- 前記ＤＮＡ結合ドメインが、別のＤＮＡ結合タンパク質からのＤＮＡ結合ドメインである、請求項１９に記載のタンパク質成分。
- 前記ＤＮＡ結合ドメインが、ヘリックスターンヘリックス、ジンクフィンガー、ロイシンジッパー、ウイングドヘリックス、ウイングドヘリックスターンヘリックス、ヘリックスループヘリックス、ＨＭＧボックス、Ｗｏｒ３ドメイン、ＯＢフォールドドメイン、免疫グロブリンフォールド、Ｂ３ドメイン、ＴＡＬエフェクター、またはＲＮＡガイドドメインのうちの１つまたは複数を含む、請求項１９または２０に記載のタンパク質成分。
- 前記ＲＮＡ結合ドメイン、逆転写酵素、リンカードメインおよびエンドヌクレアーゼのうちの１つまたは複数の配列が、前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質の配列と同じである、または前記親ＬＩＮＥエレメントタンパク質と比較して前記ＲＮＡ成分に対する結合もしくは酵素活性を改善するように変異している、請求項１５～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
- 前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥが、制限酵素様エンドヌクレアーゼ（ＲＬＥ）ＬＩＮＥである、請求項１７～２２のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
- 前記ＲＬＥ ＬＩＮＥが、Ｒ２ ＬＩＮＥである、請求項２３に記載のタンパク質成分。
- 前記ＲＮＡ成分の前記親ＬＩＮＥまたはＳＩＮＥ骨格、および前記タンパク質成分の前記親ＬＩＮＥ骨格が、同じＬＩＮＥであるか、ならびに／または前記ＳＩＮＥが、前記ＬＩＮＥに由来するか、もしくは前記ＬＩＮＥの祖先である、請求項１７～２４のいずれか一項に記載のタンパク質成分。
- 請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分をコードするベクター。
- 請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分をコードするベクター。
- 請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分と、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分とを含む操作されたトランスポゾン。
- 前記ＤＮＡ標的部位での組込み反応中に生産的な４方向ジャンクションが形成される、請求項２８に記載のトランスポゾン。
- 請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分、請求項２６に記載のベクター、請求項２７に記載のベクター、請求項２８または２９に記載の操作されたトランスポゾン、またはこれらの任意の組合せを含む、医薬組成物。
- １つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法において使用するための組み合わせ物であって、（ｉ）請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは請求項２６に記載のベクターと、（ｉｉ）請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは請求項１７に記載のベクターとを含み、
前記方法が、前記１つまたは複数の細胞を、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは請求項１７に記載のベクターと組み合わせて、請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは請求項２６に記載のベクターと接触させるステップを含むものである、組み合わせ物。 - １つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法において使用するための組成物であって、請求項２８または２９に記載の操作されたトランスポゾンを含み、
前記方法が、前記１つまたは複数の細胞を、請求項２８または２９に記載の操作されたトランスポゾンと接触させることを含むものである、組成物。 - 前記細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏで接触される、請求項３１に記載の組み合わせ物または請求項３２に記載の組成物。
- 次いで前記細胞が対象に導入されるものである、請求項３３に記載の組み合わせ物または組成物。
- 前記細胞がｉｎ ｖｉｖｏで接触される、請求項３１に記載の組み合わせ物または請求項３２に記載の組成物。
- 前記細胞における前記目的の核酸配列の発現が、疾患もしくは障害の１つもしくは複数の症状、または疾患もしくは障害の根底にある分子経路を改善する、請求項３１および３３～３５のいずれか一項に記載の組み合わせ物または請求項３２～３５のいずれか一項に記載の組成物。
- 有効数の細胞が、それを必要とする対象を処置するために修飾される、請求項３６に記載の組み合わせ物または組成物。
- １つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法において使用するための組成物であって、請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは請求項２６に記載のベクターを含み、
前記方法が、前記１つまたは複数の細胞を、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは請求項１７に記載のベクターと組み合わせて、請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは請求項２６に記載のベクターと接触させるステップを含むものである、組成物。 - １つまたは複数の細胞のゲノムに目的の核酸配列を導入する方法において使用するための組成物であって、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは請求項１７に記載のベクターを含み、
前記方法が、前記１つまたは複数の細胞を、請求項１～１４のいずれか一項に記載のＲＮＡ成分もしくは請求項２６に記載のベクターと組み合わせて、請求項１５～２５のいずれか一項に記載のタンパク質成分もしくは請求項１７に記載のベクターと接触させるステップを含むものである、組成物。
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