JPWO2019217956A5

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Publication number: JPWO2019217956A5
Application number: JP2020558896A
Authority: JP
Publication date: 2022-05-25

Claims

（ａ）ヒト人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）におけるＣＩＳＨ遺伝子を欠失させてヒトＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣ細胞を生じさせることと、
（ｂ）インビトロ分化プロトコルを使用して、ヒトＣＩＳＨ ^－／－ＮＫ細胞の集団を生じさせるのに十分な期間、前記ヒトＣＩＳＨ^－／－ｉＰＳＣを培養することと、を含む、ヒトＣＩＳＨ^－／－ＮＫ細胞の集団を作製する方法。
前記ＣＩＳＨ遺伝子の欠失がＣＲＩＳＰＲシステムを使用して達成される、請求項１に記載の方法。
前記分化プロトコルが、前記ヒトＣＩＳＨ^－／－ｉＰＳＣを、ＣＤ３４^＋細胞を少なくとも８０％含む細胞集団に分化させる第１の分化ステップと、前記ＣＤ３４ ^＋細胞を少なくとも８０％含む細胞集団を、ＣＤ４５^＋およびＣＤ５６^＋細胞を少なくとも８０％含む細胞集団に分化させる第２の分化ステップとを含む、請求項１又は２に記載の方法。
前記十分な期間が約５週以上である、請求項３に記載の方法。
前記第２の分化ステップが前記ＣＤ３４ ^＋細胞を少なくとも８０％含む細胞集団とノッチリガンドとの接触を含む、請求項４に記載の方法。
前記ノッチリガンドがプレートに結合している、請求５に記載の方法。
前記ノッチリガンドが細胞に結合している、請求５に記載の方法。
前記ノッチリガンドがＯＰ９－ＤＬ４細胞によってもたらされる、請求項５に記載の方法。
前記ＣＩＳＨ ^－／－ＮＫ細胞の集団が、サイトカイン刺激に対して高感受性であり、かつ、天然ＮＫ細胞と比較して改善された増殖、抗腫瘍機能、および抗ウイルス機能を示す、請求項３～８のいずれか一項に記載の方法。
分化したＣＩＳＨ ^－人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を含む、精製された細胞組成物であって、前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣの少なくとも７０％又は少なくとも８０％がＣＤ４５ ^＋／ＣＤ５６ ^＋二重陽性である、組成物。
７０～９０％の前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣがＣＤ４５ ^＋／ＣＤ５６ ^＋二重陽性である、請求項１０に記載の組成物。
８０～９０％の前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣがＣＤ４５ ^＋／ＣＤ５６ ^＋二重陽性である、請求項１０に記載の組成物。
前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣがヒトｉＰＳＣであり、そして／あるいは前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣがキメラ抗原受容体を発現していない、請求項１０に記載の組成物。
前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣが外因性ＩＬ－１５を発現しておらず、そして／あるいは前記分化したＣＩＳＨ ^－／－ｉＰＳＣが外因性ＩＬ－１２を発現していない、請求項１０に記載の組成物。
ヒト対象における造血器腫瘍または固形腫瘍を治療する方法において使用するための、請求項１０～１４のいずれか一項に記載の組成物。
ヒト対象における、ウイルスおよび微生物による感染症を治療するためを治療する方法において使用するための、請求項１０～１４のいずれか一項に記載の組成物。
前記方法が、有効量の１又は複数のサイトカインを対象に投与することをさらに含む、請求項１５又は１６に記載の組成物。
前記１又は複数のサイトカインが、ＩＬ－２、ＩＬ－１５またはその組み合わせを含み、前記有効量が、天然ＮＫ細胞治療で必要とされる有効量より少ない、請求項１７に記載の組成物。
（ａ）ＣＩＳＨ遺伝子の欠失を含むヒト人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）の集団と、
（ｂ）少なくとも１つのＣＩＳＨ＋／＋ｉＰＳＣと、
を含む異種細胞組成物。
ＣＲＩＳＰＲシステムを更に含む、請求項１９に記載の組成物。
前記ＣＲＩＳＰＲシステムが、
（ａ）ＣＡＳ９タンパク質と、
（ｂ）ガイドポリヌクレオチドであって、前記ＣＡＳ９タンパク質をヒトＣＩＳＨ遺伝子に誘導することができるガイドポリヌクレオチドと、
を含む、請求項２０に記載の組成物。