JPWO2019178085A5

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Publication number: JPWO2019178085A5
Application number: JP2020549002A
Authority: JP
Publication date: 2022-03-18
Anticipated expiration: 2039-03-12

Claims

IL-13ムテインにより指向性を付与した受容体であるゼータカイン（zetakine）をコードする核酸であって、
該受容体ゼータカインが、
IL-13のムテインを含む細胞外ドメイン；
スペーサー；
膜貫通ドメイン；および
細胞内シグナル伝達領域
を含み、
前記スペーサーが、１１９アミノ酸長を有し、かつ配列番号１０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するIgG4ヒンジ－CH2－CH3からなる、または、L235DおよびN297Q変異を含むIgG4ヒンジ－CH2－CH3を含み、
前記スペーサーが、前記ムテインを前記膜貫通ドメインに連結し、前記膜貫通ドメインが、前記スペーサーを前記細胞内シグナル伝達領域に連結する、
核酸。
前記ムテインが、配列番号１７に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の核酸。
前記ムテインが、配列番号１７に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１または２に記載の核酸。
前記スペーサーが、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の核酸。
前記スペーサーが、配列番号２７にコードされるアミノ酸配列を有する、請求項１～３のいずれか一項に記載の核酸。
前記スペーサーが、１７番目のアミノ酸にロイシンからアスパラギン酸への変異、および７９番目のアミノ酸にアスパラギンからグルタミンへの変異を有する、配列番号１１に示されるアミノ酸配列を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の核酸。
前記膜貫通ドメインが、CD28膜貫通ドメインを含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の核酸。
前記細胞内シグナル伝達領域が、CD27、CD28、4-1BB、OX-40、CD30、CD40、PD-1、ICOS、LFA-1、CD2、CD7、NKG2C、B7-H3およびこれらの組み合わせからなる群から選択される共刺激ドメインと、CD3ζドメインの全体またはその一部との組み合わせを含む、請求項１～７のいずれか１項に記載の核酸。
前記細胞内シグナル伝達領域が、CD3ζドメインの一部と、4-1BBドメインの共刺激部分を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の核酸。
マーカータンパク質をコードする配列をさらに含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の核酸。
前記マーカータンパク質が、末端切断型の上皮成長因子受容体またはジヒドロ葉酸還元酵素（DHFR）を含む、請求項１０に記載の核酸。
前記DHFRが、DHFRの二重変異体（DHFRdm）である、請求項１１に記載の核酸。
前記DHFRdmが、L22Fアミノ酸変異およびF31Sアミノ酸変異を含む、請求項１２に記載の核酸。
リボソームスキップ配列をさらに含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の核酸。
前記リボソームスキップ配列が、Ｐ２ＡまたはＴ２Ａを含む、請求項１４に記載の核酸。
請求項１～１５のいずれか１項に記載の核酸を含む発現ベクター。
ウイルスベクターである、請求項１６に記載の発現ベクター。
レンチウイルスベクターまたはアデノウイルスベクターである、請求項１６または１７に記載の発現ベクター。
請求項１～１５のいずれか１項に記載の核酸によってコードされるIL-13ムテインにより指向性を付与した受容体であるゼータカイン。
請求項１～１５のいずれか１項に記載の核酸を含む細胞。
リンパ球である、請求項２０に記載の細胞。
前記リンパ球が、ＣＤ４５ＲＡ－、ＣＤ４５ＲＯ＋およびＣＤ６２Ｌ＋の表現型を有する、請求項２１に記載の細胞。
ナイーブＣＤ８＋Ｔ細胞、セントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４５ＲＯ＋ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ８＋Ｔ細胞である、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の細胞。
ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞、セントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ４５ＲＡ＋ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ－Ｔ細胞である、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の細胞。
前駆Ｔ細胞である、請求項２０に記載の細胞。
前記前駆Ｔ細胞が、造血幹細胞である、請求項２５に記載の細胞。
請求項２０～２６のいずれか１項に記載の細胞と薬学的に許容されるキャリアを含む組成物。
請求項１～１５のいずれか１項に記載の核酸を含む遺伝子操作された細胞を作製する方法であって、
遺伝子操作された細胞を産生するために請求項１～１５のいずれか１項に記載の核酸を細胞に導入する工程；
抗CD3抗体および／または抗CD28抗体ならびに少なくとも１種の恒常性サイトカインの存在下で前記遺伝子操作された細胞を培養する工程；ならびに
培養後の前記遺伝子操作された細胞を濃縮するする工程
を含む方法。
前記核酸が、マーカータンパク質をコードする配列をさらに含み、前記濃縮する工程が、マーカータンパク質の発現を選択する試薬と培養後の前記遺伝子操作された細胞を培養する工程を含む、請求項２８に記載の方法。
前記細胞がリンパ球である、請求項２８または請求項２９に記載の方法。
前記リンパ球が、ＣＤ４５ＲＡ－、ＣＤ４５ＲＯ＋およびＣＤ６２Ｌ＋の表現型を有する、請求項３０に記載の方法。
前記細胞が、ナイーブＣＤ８＋Ｔ細胞、セントラルメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ８＋Ｔ細胞またはＣＤ４５ＲＯ＋ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ８＋Ｔ細胞である、請求項２８～３１のいずれか一項に記載の方法。
前記細胞が、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞、セントラルメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞、エフェクターメモリーＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ４５ＲＡ＋ＣＤ６２Ｌ＋ＣＤ４＋ＣＤ４５ＲＯ－Ｔ細胞である、請求項２８～３１のいずれか一項に記載の方法。
前記細胞が前駆Ｔ細胞である、請求項２８または２９に記載の方法。
前記前駆Ｔ細胞が、造血幹細胞である、請求項３４に記載の方法。
前記少なくとも１種の恒常性サイトカインが、IL-15、IL-7、IL-21またはこれらの組み合わせである、請求項２８～３５のいずれか１項に記載の方法。
前記マーカータンパク質が、末端切断型の上皮成長因子受容体である、請求項２９～３６のいずれか一項に記載の方法。
IL-13受容体α２（IL-13Ra2）を発現するがんの治療または抑制用の医薬品の製造における、請求項２０～２６のいずれか１項に記載の細胞の使用。
前記がんが脳がんを含む、請求項３８に記載の使用。
前記脳がんが神経膠腫、神経膠芽腫または多形膠芽腫である、請求項３９に記載の使用。
前記がんがIL-13Rα陽性の悪性腫瘍である、請求項３８～４０のいずれか一項に記載の使用。
がんの治療用である、請求項２７に記載の組成物。
前記がんがIL13Rα陽性の悪性腫瘍である、請求項４２に記載の組成物。
前記がんが脳がんを含む、請求項４２または４３に記載の組成物。
前記脳がんが、神経膠腫、神経膠芽腫または多形膠芽腫である、請求項４４に記載の組成物。
化学療法および放射線療法から選択される療法を受けている対象への投与用である、請求項４２～４５のいずれか１項に記載の組成物。
前記化学療法が、電気化学療法、アルキル化剤、抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害薬、分裂阻害薬、コルチコステロイド、DNAインターカレーター、チェックポイント阻害薬またはこれらの組み合わせを含む、請求項４６に記載の組成物。
前記化学療法が、５－フルオロウラシル（5-FU）、６－メルカプトプリン（6-MP）、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、フロクスウリジン、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メトトレキサート、ペメトレキセド、ペントスタチン、チオグアニンまたはこれらの組み合わせを含む、請求項４６に記載の組成物。
哺乳動物への投与用である、請求項４６～４８のいずれか１項に記載の組成物。
ヒトへの投与用である、請求項４６～４９のいずれか１項に記載の組成物。