JPWO2015053413A1 - ドライバーオンコジーンの遺伝子変異を標的にアルキル化する新規アルキル化剤 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位に特異的に結合するDNA結合化合物と、アルキル化剤との複合体。
(2)遺伝子変異部位が遺伝子配列の変化及び/または遺伝子コピー数の変化である、(1)に記載の複合体。
(3)ドライバーオンコジーンが、KRAS、HRAS、NRAS、BCR−ABL、EGFR、c−KIT、BRAF、PI3K、ALK、PIK3CA、FLT3、MET、BCL2、EML4‐ALK、APC、BRCA1/2、TP53、MSH2、MLH1、MSH6、PMS2、RB1、PTEN、VHL、P16、MEN1、RET、CDH1、STK11、PTCH、Her2/neu、EGFR、MYC、MYCNおよびMET、並びに癌の遺伝子変異データベースに登録される遺伝子から選ばれる少なくとも1つである、(1)および(2)のいずれか1つに記載の複合体。
(4)DNA結合化合物がBridged Nucleic Acid(架橋化核酸)、Locked Nucleic Acid(LNA)、PNA、DNA結合蛋白複合体、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP))、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)修飾物またはDNA結合蛋白もしくはその複合体である、(1)〜(3)のいずれか1つに記載の複合体。
(5)アルキル化剤が、DNAの特定の塩基配列に対して、アルキル化能を有する官能基を有する化合物である、(1)〜(4)のいずれか1つに記載の複合体。
(6)アルキル化剤がsecoCBIである、(5)に記載の複合体。
(7)(1)〜(6)のいずれか1つに記載の複合体を含む、ドライバーオンコジーン遺伝子変異特異的アルキル化剤。
(8)下式で表される(1)に記載の複合体。
(15)(9)に記載の複合体を含むALK遺伝子F1174L変異アルキル化剤。
(16)(10)および(11)のいずれか1つに記載の複合体を含むPIK3CA遺伝子E545K変異アルキル化剤。
(17)(12)および(13)のいずれか1つに記載の複合体を含むMYCN遺伝子増幅変異アルキル化剤。
(18)(1)〜(6)および(8)〜(13)のいずれか1つに記載の複合体を含む医薬組成物。
(19)医薬組成物が抗癌剤である(18)に記載の医薬組成物。
(20)(1)〜(6)および(8)〜(13)のいずれか1つに記載の複合体を含むキット。
(21)(1)〜(6)および(8)〜(13)のいずれか1つに記載の複合体を含む研究試薬キット。
(22)(1)〜(6)および(8)〜(13)のいずれか1つに記載の複合体を含む治療用キット。
(23)(1)ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位に特異的に結合するようにDNA結合化合物を設計する工程、
(2)設計したDNA結合化合物とアルキル化剤とを結合させる工程を含む、
ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位を特異的にアルキル化する複合体の製造方法。
(24)遺伝子変異部位が遺伝子配列の変化または遺伝子コピー数の変化である、(23)に記載の製造方法。
(25)ドライバーオンコジーンが、RAS、KRAS、HRAS、NRAS、BCR−ABL、EGFR、c−KIT、BRAF、PI3K、ALK、PIK3CA、FLT3、MET、BCL2、EML4‐ALK、APC、BRCA1/2、TP53、MSH2、MLH1、MSH6、PMS2、RB1、PTEN、VHL、P16、MEN1、RET、CDH1、STK11、PTCH、Her2/neu、EGFR、MYC、MYCNおよびMET、並びに癌の遺伝子変異データベースに登録される遺伝子からなる群から選ばれる少なくとも1つである、(23)または(24)に記載の製造方法。
(26)DNA結合化合物がBridged Nucleic Acid(架橋化核酸)、Locked Nucleic Acid(LNA)、PNA、DNA結合蛋白複合体、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP))、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)修飾物またはDNA結合蛋白もしくはその複合体のいずれかである、(23)〜(25)のいずれか1つに記載の製造方法。
(27)アルキル化剤が、DNAの特定の塩基配列に対して、アルキル化能を有する官能基を有する化合物である、(23)〜(26)のいずれか1つに記載の複合体の製造方法。
(28)アルキル化剤がsecoCBIである、(27)に記載の製造方法。
(29)(23)〜(28)のいずれか1つに記載の製造方法で得られた複合体の医薬組成物の製造のための使用。
(30)(23)〜(28)のいずれか1つに記載の製造方法で得られた複合体の抗癌剤の製造のための使用。
KRAS遺伝子のコドン12の変異は、現在、最も治療の困難な膵臓癌に多く見られるほか、化学療法抵抗性の転移を有する大腸癌患者または肺癌患者にも見られる遺伝子変異である。現在、KRAS遺伝子のコドン12変異に対する有効な治療薬が望まれている。本実施例では、KRAS遺伝子のコドン12の変異配列を標的とするヘアピン型PIP(hPIP)にDNA塩基の副溝側のアデニンを特異的にアルキル化するsecoCBIを縮合させることでKRAS遺伝子のコドン12の変異を特異的に認識するhPIP−secoCBI(KR12)を合成した。KR12を用いて、(1)KRAS遺伝子コドン12変異の塩基配列のアルキル化確認実験、(2)大腸癌細胞に対する50%阻害濃度の測定、(3)細胞増殖及び細胞形態の観察、(4)細胞周期変化の解析、(5)半定量的遺伝子発現解析、(6)コロニーシークエンス、(7)RAS活性測定、(8)癌細胞を移植したヌードマウスの腫瘍抑制評価実験(9)がん細胞およびスフェア形成細胞への取り込みと薬剤排泄メカニズムからの回避の確認実験(10)腫瘍細胞核内への集積性の確認実験を行った。
KRAS遺伝子のコドン12変異アルキル化PIP(KR12)の化学構造は以下の化学式14で表される。本発明の化合物の作製方法は以下のとおりである。カルボン酸末端を持つPIPをDMF100μLに溶解し、iPr2NEt(0.5μL、2.86μmol)とPyBOP(1.0mg、1.95μmol)を加えた。反応溶液を撹拌しながら室温で2時間反応させた後、1−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルの活性体が出来ているかをHPLCで確認した。確認後、NH2−インドールseco−CBI(0.6mg、1.58μmol)を反応容器に加え、室温、窒素雰囲気下で一晩撹拌し、溶媒であるDMFを除き、残渣をジクロロメタンとジエチルエーテルで分液した。反応物の層はHPLCにより精製し(0.1%TFA/CH3CN、30−75%リニアグラジエント、0〜30分間)、凍結乾燥により目的化合物であるKRAS遺伝子のコドン12変異アルキル化PIポリアミド(KR12)が白い粉末で得られた(LC−MSm/e C89H94ClN31O16[M+2H]2+ 計算値:943.86、実測値944.25、図3)。
また、上述の方法を適用して、下記の化学式15で表されるKRAS遺伝子のコドン12と野生型の配列を認識しないコドン13変異を標的にしたアルキル化PIP(KR13)も合成した(図4)。そして、下記の化学式16、17に示す通り、KRAS遺伝子の野生型コドン12の塩基配列を認識するWT(図5)、KR12からアルキル化能を持つCBI基を除いたC12−Dpも合成した(図6)。
(1)プラスミドDNAのクローニング
25μMの2つの断片対(5’−GCCTACGCCATCAGCGCTGTTGGCGTAGGCA−3’(配列番号1)、3’−ACGGATGCGGTAGTCGCGACAACCGCATCCG−5’(配列番号2))を含む最終容量50μLをアニールしてDNA断片を得た。アニール化された断片をSigma−Aldrich製のpGEM−T easy vectorsに連結した。産物をプロメガ製のEscherichia・Coli(JM109)コンピテントセルに形質転換し、100μg/mLのアンピシリンを加えたLB培地のプレートで37℃、一晩培養した。目的の形質転換されたホワイトコロニーは500nMのプライマーセット(T7:5’−TAATACGACTCACTATAGG−3’(配列番号3)、sp6:5’−CATACGATTTAGGTGACACTATAG−3’(配列番号4))とプロメガ製の1U GoTaq(R) Green Master Mixを含む10μLの反応溶液を用いたコロニーダイレクトPCRにより同定した。増幅サイクルは以下のように行った。反応溶液を95℃で2分間インキュベートした後、95℃で30秒、55℃で30秒、72℃で30秒間の反応サイクルを30回繰り返した後に最後の伸長反応を72℃で7分間の反応サイクルで行った。コロニーは100μg/mLのアンピシリンを含む5mLのLB培地に移し、37℃で一晩培養した。この導入されたプラスミドはシグマアルドリッチ製のGenElutePlasmid miniprep kitにより回収した。
5’末端がテキサスレッドで標識された213塩基対のDNA断片を上記で作成したプラスミドとプライマー(sp6:5’−ATTTAGGTGACACTATAG−3’(配列番号5)、T7:5’−TAATACGACTCACTATAGGG−3’(配列番号6)、5’末端はテキサスレッド標識)で合成した。得られた5’末端がテキサスレッドで標識されたDNA断片をシグマ製のPCR−Clean Up Kitで精製し、濃度をUV吸収により決定した。各種アルキル化PIPを含む10μLの反応溶液(5’末端がテキサスレッドにより標識された二本鎖DNA断片10nMと5mMのリン酸ナトリウム緩衝液(pH7.0))を23℃で17時間インキュベートした。反応後、過剰なアルキル化PIPを10mg/mLのcalfthymus DNA(1μL)で除去し、95℃で10分間加熱することで標的アルキル化部位でのDNAの切断を引き起こした。減圧蒸留で溶媒を除去した後、7μLのloading dyeを加える。このサンプルを95℃で25分間加熱した後、迅速に氷上で冷却した。1.2μLのサンプルをHitachi5500−S DNA Sequencerにセットした6%の変性ポリアクリルアミドゲルに乗せ電気泳動を行った(図7)。
LS180大腸細胞株を用い3000〜5000個の細胞/ウェルになるように96穴マイクロプレートの1ウェル毎に細胞を播いて、一晩培養した。翌日、コドン12の変異を認識するKR12、野生型KRASを認識するWT、アルキル化剤を付加していないKR12と同様の構造を持つC12−Dpを1nM、10nM、30nM、100nM、300nM、1μMの濃度でそれぞれ細胞に添加、48時間処理した。その後、cell counting kit−8(DOJINDO)を用いて、WST−8試薬を1ウェル毎に添加して、2時間反応させた後、マイクロプレートリーダーで450nmの波長で比色分析法によって細胞数を計測した。細胞数の計算方法は、1)Mediumのみの平均値をだす、2)各ウェルからmediumの平均値を引く、3)DMSOの平均値をだす、4)Medium引いた値をDMSOの平均値で割る×100、5)各処理区の平均値と標準偏差をだし、グラフ作成を行った。IC50計算式は、IC50=10(LOG(A/B)×(50−C)/(D−C)+LOG(B))、A:50%を挟む高い濃度、B:50%を挟む低い濃度、C:Bでの阻害率、D:Aでの阻害率を用いた。
大腸がん及びすい臓がん細胞株を用い3000〜5000個の細胞/ウェルになるように96穴マイクロプレートの1ウェル毎に細胞を播いて、一晩培養した。翌日、1nM、10nM、30nM、100nM、300nM、1μMの濃度のコドン12の変異を認識するKR12でそれぞれの細胞を48時間処理した。その後、cell counting kit−8を用いて、WST−8試薬を1ウェル毎に添加して、2時間反応させた後、マイクロプレートリーダーで450nmの波長で比色分析法によって細胞数を計測した。細胞数の計算方法は、1)Mediumのみの平均値をだす、2)各ウェルからmediumの平均値を引く、3)DMSOの平均値をだす、4)Mediumを引いた値をDMSOの平均値で割る×100、5)各処理区の平均値と標準偏差をだし、グラフ作成を行った。IC50計算式は、IC50=10(LOG(A/B)×(50−C)/(D−C)+LOG(B))、A:50%を挟む高い濃度、B:50%を挟む低い濃度、C:Bでの阻害率、D:Aでの阻害率を用いた。
実験結果を表1に示した。KR12に対するIC50について、SW480、SW620、SNU−C2B、LS180、HCT116は低い値を示し、SW1463、DLD−1、HT29、Caco−2は高い値を示した。つまり、KR12が認識するコドン12の変異を持つ細胞株では、IC50が100nM以下の低い値を示した。SW1463、DLD−1、HT−29、Caco−2はKR12が認識するコドン12の変異を持たない細胞株であり、これらのIC50は100nM以上の値を示した。図9に、KR12が認識するコドン12の変異を持たないHT29、Caco2、SW1463と変異を持つSW480、SW620、LS180の濃度依存的細胞増殖抑制効果のグラフを示した。
細胞周期を観察するために、処理した細胞と未処理の細胞をDNaseフリーのPBSで2回洗浄した後、70%エタノール(冷凍)で固定した。固定した細胞は、10g/mL RNaseA、50g/mL ヨウ化プロピジウムを含むPBSで暗所に室温、30分間放置して処理した。FACS Calibur flowcytometer(Becton Dickinson,USA)のFL−2Hフィルターを用いて蛍光強度を測定した。細胞周期の比率は、得られたデータをCell Quest software(Becton Dickinson,USA)で分析して決定した。細胞処理は、LS180を50nM(0.125%DMSOに溶解)のKR12、KR13で72時間処理及び長期処理実験として14日間培養実験を行った。コントロールは10%FBS、0.125%DMSOを含むMEM培地で14日間培養した。
細胞処理は、LS180を1.0×105cells/30mm dishでMEM(gibco)+10%FBS(gibco)+100units/ml Penicillin+100μg/ml Streptmycin(gibco)培養液で培養、50nM(0.125%DMSOに溶解)のKR12、KR13で長期処理実験として14日間培養実験及び72時間投与後、コントロール10%FBS、0.125%DMSOを含むMEM培地で11日間培養した群並びにコントロールの10%FBS、0.125%DMSO投与14日培養群で検討した。それぞれの群の細胞をトリプシン処理後、細胞を回収、50μlのPBS溶液に撹拌、3μlの1.5%TritonX(in water)と3μlのRNase(1mg/ml in water)を加え37°Cで30分間処理、つぎに3μlのproteinase K(1mg/ml)を加え37°Cで30分間処理、さらに12μlの6xloading bufferを加え、65°Cで10分間処理後すぐに20μlを2%アガロースゲルでTBE液、100Vで電気泳動し、エチジウムで染色した。
50nM(0.125%DMSOに溶解)のKR12、KR13の14日間の長期投与実験後のLS180細胞を1×SDS−sample bufferに溶解、100度で5分処理後、蛋白量をBradford reagent(Bio−Rad,CA)で判定、10%SDS−PAGEで泳動後、polyvinylidene difluoride membranes(Millipore,MA)にトランスファーし、5%dry milkをTris−buffered saline(TBS)plus0.1%Tween20をブロッキング剤として、anti−γH2AX(2F3,BioLegend,CA)、anti−p53(DO−1,Santa Cruz Biotechnology,CA)、anti−PARP(Cell Signaling Technologies,MA)、もしくはanti−actin antibody(20−33,Sigma,MO)をそれぞれ加え、さらにHRP−conjugated anti−mouse IgGもしくはanti−rabbit IgG(Cell Signaling Technologies,MA)で処理した。2次抗体処理前に適宜1次抗体の洗浄を行った。その後TBS plus0.1%Tween20で洗浄し、ECL化学発光(Amersham Biosciences,NJ)で蛋白質を同定した。
HT29、LS180を12穴プレートで培養した。翌日、細胞を50nMのKR12、KR13で処理した後、48時間培養して、細胞を集めてRNAを抽出した。前記抽出にはRNeasy mini kit (Qiagen,CA)RT−PCRを用いた。次に、抽出した前記RNAをテンプレートにSuper Script VILO cDNA Synthesis Kit(Invitrogen,CA)に従って逆転写用のcDNAを調製した。前記cDNAをテンプレートにPCRのは94℃で5分間の後、94℃で30秒、55℃で30秒、72℃で30秒を20サイクル、最後に72℃で7分間の伸長反応を行った。PCR産物は2%アガロースゲルで電気泳動分析を行った。PCR産物量はエチジウムブロマイドで染色した写真によって算出した。
PCRには下記のプライマーセットを使用した。
KRAS遺伝子
フォワードプライマー(センス):
リバースプライマー(アンチセンス):
RPS18(内部標準)
フォワードプライマー(センス):
リバースプライマー(アンチセンス):
6.5×104個の細胞を播いて、一晩培養した後、細胞を50nMのKR12、KR13で処理した後、48時間培養して、細胞を集めてRNAを抽出した。前記抽出にはRNeasy mini kit (Qiagen,CA)RT−PCRを用いた。次に、抽出した前記RNAをテンプレートにSuper Script VILO cDNA Synthesis Kit(Invitrogen,CA)に従って逆転写用のcDNAを調製した。前記cDNAをテンプレートに配列番号7及び配列番号8のプライマーを用い、PCRは94℃で5分間の後、94℃で30秒、55℃で30秒、72℃で30秒を20サイクル、最後に72℃で7分間の伸長反応を行った。PCR産物は、pGEM−T Easy vector(Promega,WI)を用いてクローニングした。そして、大腸菌DH5αコンピテント細胞(Toyobo,Japan)に形質転換し、形質転換体を50μg/mLアンピシリン、1mg X−gal、1mgイソプロピル−β−チオガラクトピラノシドを含むLBプレートで37℃、一晩培養した。白いコロニーをコロニーダイレクトPCRによって同定した。PCR反応のサイクルは94℃で5分間の後、94℃で30秒、55℃で30秒、72℃で30秒を30サイクル行って、最後に72℃で7分間の伸長反応を行った。下記のプライマーセットM13−F1プライマーとM13−R1プライマーを増幅に使用した。増幅したDNAを、シークエンサーでシークエンス用プライマーKRAS−2Rを用いて配列を解読し、一つ一つのコロニーのKRAS遺伝子変異部位を同定した。
M13−R1プライマー:
KRASコドン12のGAT変異遺伝子(KRAS−MUT−FとKRAS−MUT−R)と野生型遺伝子(KRAS−WT−FとKRAS−WT−R)を特異的に増幅するプライマーを用いて直接前記白いコロニーの大腸菌細胞を用いてPCRを行い、目的のバンドがどちらのプライマーセットで増幅するかで、変異KRAS遺伝子か野生型かをコロニーごとに判断した。
allele specific primer(GAT変異認識)
KRAS−WT−F:
KRAS −WT−R:
KRAS−MUT−F:
KRAS−MUT−R:
2×106cells/100mmプレートまたは1×106cells/100mmプレートの細胞数を完全栄養培地で培養し、翌日、細胞を50nMのKR12、KR13で処理し、48時間培養した後、細胞をマグネシウム溶解バッファー(MLB)に溶解し、RAS activation assay kit(Millipore,MA)を使ってRAS活性レベルを測定した。
細胞を含む下記3種類のPBS溶液をヌードマウスの大腿部の皮下に移植した後(HT29を7匹、LS180を7匹、SW480を6匹)、腫瘍が生着し、腫瘍容積が約100mm3になった時点で、3.4mmolのKR12(1.36mMのKR12をDMSO2.5μLとPBS197.5μLに溶解)、DMSO/PBSコントロール(DMSO2.5μLとPBS197.5μL)の各組成で薬剤を調整し、10分間ソニケーション後、200μLをマウス尾静脈より投与した。体重、腫瘍の大きさは3日に1回計測し、腫瘍の大きさは0.52×L×W×D(1/6×π×L×W×D)の方法で測定した。
HT29(KRAS−WT):(2×106cells/100μlPBSを皮下に移植、KRASコドン12野生株でコドン12の変異を持たない細胞株)
SW480(KRAS−MUThomo):(5×106cells/100μlPBSを皮下に移植、KRAS遺伝子コドン12変異G12Vをホモでもつ細胞株)
LS180(KRAS−MUThetero):(3×106cells/100μlPBSを皮下に移植、KRAS遺伝子コドン12変異G12Dをヘテロでもつ細胞株)
C12DPのN末端にβアラニンを導入し、続いてFITCのカップリングを行った。FITCのカップリングは、4倍過剰のフルオレセイン(0.40mmol)及びDIEA、HCTUをDMFに溶解したものをカラムに通して60分振とうして行った。LS180細胞は、MEM(gibco)+10%FBS(gibco)+100units/ml Penicillin+100g/ml Streptmycin(gibco)培養液で培養し、約50%コンフルエンスの状態で、FITC標識したKR12(1μMol)を添加し、2時間後に封入(VECTOR VECTASHIELD)し、DAPIによる核染色を行いコンフォーカル顕微鏡(Leica TCS−SPE)で観察した。
2種類の大腸がん細胞株SW480細胞とLoVo細胞を用いて実験を行った。それぞれ2×105個をSphere forming Medium(SFM:DMEM/Ham‘s F−12培養液にB27(ミルテニー社、2%)、EGF(20ng/mL)、FGF2(20ng/mLを添加した培養液)とともに培養し、4日目にFITC標識したKR12(1μMol)もしくはDoxisorbicin(1μMol)を添加し、一時間後にPBSで2度洗浄し、再びSFMで培養を始め、0時間、4時間、24時間に封入し(Invitrogen:ProLong(R) Gold Antifade Reagent(With DAPI))、コンフォーカル顕微鏡(Leica TCS−SPE)で観察した。
4週齢で購入したメスBALB/c(nu/nu)マウスに対し、5週齢時に5x106のSW480細胞を皮下に移植後、腫瘍が直径15mmに達した時にFITC標識したKR12(10nmolを1.25%DMSO(200μl)に溶解)もしくはFITC(1mg/kgを1.25%DMSO(200μl)に溶解)、1.25%DMSOを200μl尾静脈より投与し、インビボイメージングシステム(NIPPON ROPER:Lumazone FA)で0時間から2時間おきに10時間まで撮影し、1日後3日後にも蛍光レベルとマウス個体を撮影した(図18)。さらに同様の処理を行ったマウスを24時間後に解剖し、それぞれの臓器及び腫瘍を取り出し、インビボイメージングシステム(NIPPON ROPER:Lumazone FA)で撮影した(図19)。また同様のヒト大腸がん皮下移植マウスに1mg/kgのFITC標識したKR12(1.25%DMSO(200μl)に溶解)、1.25%DMSOを 200μl尾静脈より投与し、24時間後に腫瘍を摘出しOCTコンパウンドにいれ凍結、10ミクロンの凍結切片をLEICA CM1510Sで作成し、コンフォーカル顕微鏡(Leica TCS−SPE)で観察した(図20)。
ALK遺伝子は、肺癌の原因となる融合遺伝子を形成したり、神経芽腫において、恒常的に活性化する点変異を有し、癌化を促進するドライバーオンコジーン遺伝子である。ALK阻害剤がALK遺伝子の変異を持つ癌細胞に有効であることは知られているが、多くの場合癌細胞はALK阻害剤に耐性となり、再発することが多い。神経芽腫におけるALK遺伝子変異F1174L(3522C>A)は、神経芽腫細胞SK−N−SH、SMS−SAN、KELLY、LAN−1において認められている。そこで、この変異配列を特異的に認識する10塩基認識のPIP−indole−secoCBI化合物ALK−FL−1をKR12の合成と同様の方法で合成した(図21)。
ALK遺伝子のアルキル化PIP(ALK−FL−1)の化学構造は以下の化学式で表される(図22)。本発明の化合物の作製方法は以下のとおりである。F1174L(3522C>A)変異は10塩基を認識するPIP−indole−secoCBIで野生型の5’−TGGTGGTTGA−3’配列の3’側から2番目のグアニンを認識できないピロールを配置することで変異型5’−TGGTGGTTTA−3’を認識させる化合物として設計した。
実験はKR12を用いた場合と同様にして行った。実験に用いた細胞は、Kelly細胞、SK−N−SH細胞、IMR−32細胞、SK−N−AS細胞、MDA−MB−231細胞であり、それぞれDMEM、10%FBS、1%Pen/St培地、RPMI1640、10%FBS、1%Pen/St培地で培養した。96ウェル plateに各細胞を1000cells/50μl/ウェル播種し、37℃、5%CO2、飽湿条件下にて24時間培養した後、Mediumに試薬(final concentration 1,3,10,30,100nM)を希釈後、50μl/ウェル添加、混和した。再び37℃、5%CO2、飽湿条件下にて72時間培養した。Cell Counting Kit−8(DOJINDO)を10μl/ウェル添加、混和後、37℃、5%CO2、飽室条件下にて2時間培養した。Microplate Reader MTP−310 Lab(COLONA ELECTORIC)にて吸光度を測定後、IC50値を算出した。
PIK3CA遺伝子は、エキソン10のヘリカルドメインにあたるE545K、E542Kとエキソン21のキナーゼドメインにあたるH1047Rの3か所のホットスポットに変異が集中し、それらの変異は、乳癌、大腸癌、子宮内膜癌、肝癌および脳膠芽腫で高頻度に生じることが報告されている。一方で点変異を伴わないPIK3CA遺伝子の増幅は、頸癌、肺癌、胃癌、卵巣癌、頭頸部癌で認められている。PIK3CA遺伝子は、PI3キナーゼ−Akt経路で、癌ドライバー遺伝子として働くため、PIK3CA遺伝子を標的にしたPI3K阻害剤が開発されているが、毒性の問題等により未だ臨床応用に至っていないのが現状である。PIK3CA遺伝子のE545K(1633G>A)変異は、乳癌細胞株MCF7で認められている。そこで、この変異配列を特異的に認識する9塩基認識のPIP−indole−secoCBI化合物P3A−E5K−1とP3A−E5K−2をKR12の合成と同様の方法で合成した(図24)。
PIK3CA遺伝子のアルキル化PIP(P3A−E5K−1)の化学構造は以下の化学式で表される。本発明の化合物の作製方法は以下のとおりである(図25、26)。E545K(1633G>A)変異を認識させるため5’−CTCCTGCTTA−3’を認識するPIP−Indole−seco−CBIをデザインした。 この化合物は野生型の5’−CTCCTGCTCA−3’を3`から2番目のシトシンが認識できず、3`のアデニンをアルキル化できないが変異配列ではアルキル化できるよう設計した。
実験はKR12を用いた場合と同様にして行った。実験に用いた細胞は、MCF7細胞、MDA−MB−231細胞であり、それぞれDMEM、10%FBS、1%Pen/St培地とRPMI1640、10%FBS、1%Pen/St培地で培養した。96ウェル plateに各細胞を1000cells/50μl/ウェル播種し、37℃、5%CO2、飽湿条件下にて24時間培養した後、Mediumに試薬(final concentration 1,3,10,30,100nM)を希釈後、50μl/ウェル添加、混和した。再び37℃、5%CO2、飽湿条件下にて72時間培養した。Cell Counting Kit−8(DOJINDO)を10μl/ウェル添加、混和後、37℃、5%CO2、飽室条件下にて2時間培養した。Microplate Reader MTP−310 Lab(COLONA ELECTORIC)にて吸光度を測定後、IC50値を算出した。
癌細胞特異的な変異として、点変異や転座ではなく遺伝子配列の変化を伴わない、遺伝子の増幅がある。これはコピーナンバーチェンジ変異と言われ、特定のがん関連遺伝子の領域が増幅し、結果としてがん遺伝子の発現量が上昇することで癌化を促すものである。我々は本発明のように特定のゲノム配列をアルキル化する化合物が、増幅してコピー数が多くなった遺伝子を標的にして作成した場合も効果を発揮すると考え小児の神経芽腫等で高頻度に増幅し、予後不良因子となるMYCNを標的としたMYCNアルキル化PIP(MYCNA1、MYCNA2、MYCNA3)を合成した。MYCN遺伝子は、神経芽腫において高頻度に増幅する遺伝子で、神経芽腫のドライバーオンコジーン遺伝子と考えられている。このMYCN遺伝子に対し、図2に示ように8塩基を認識するPIP−indole−secoCBI化合物(MYCNA1、MYCNA2)及びエキソン3の配列を特異的に認識する9塩基認識のPIP−indole−secoCBI化合物(MYCNA3)(図28)をKR12の合成と同様の方法で合成した。
MYCN遺伝子のアルキル化PIP(MYCNA1、MYCNA2、MYCNA3)の化学構造は以下の化学式で表される。本発明の化合物の作製方法は以下のとおりである。カルボン酸末端を持つPIPをDMF100μLに溶解し、iPr2NEt(0.5μL、2.86μmol)とPyBOP(1.0mg、1.95μmol)を加えた。反応溶液を撹拌しながら室温で2時間反応させた後、1−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルの活性体が出来ているかをHPLCで確認した。確認後、NH2−インドールseco−CBI(0.6mg、1.58μmol)を反応容器に加え、室温、窒素雰囲気下で一晩撹拌し、溶媒であるDMFを除き、残渣をジクロロメタンとジエチルエーテルで分液した。反応物の層はHPLCにより精製し(0.1%TFA/CH3CN、30−75%リニアグラジエント、0〜30分間)、凍結乾燥により目的化合物であるアルキル化PIポリアミド、MYCNA1が白い粉末で得られた(図29)。MYCNA2、MYCNA3も同様の方法で得られた(図30、31)。MYCNを標的としたPIPの設計方法は図2に示されている。
細胞を96穴プレートで1000cells/50μl/ウェル播種し、37℃、5%CO2、飽湿条件下にて24時間培養し、翌日、DMSOコントロール、1nM、3nM、10nM、30nM、100nMのMYCNA1を添加した培養液に取り換え、細胞をIncucyte培養タイムラプス顕微鏡(Essen Instruments、Ann Arbor、MI)で6時間おきに観察した。成長曲線はIncucyte system(Essen Instruments、Ann Arbor、MI)を用いたイメージングプレートから作成した。実験に用いた細胞は、MYCN領域の増幅が見られる神経芽腫細胞株IMR−32細胞(MYCN25コピー)、TGW細胞(MYCN60コピー)であり、それぞれDMEM、10%FBS、1%Pen/St培地、RPMI1640、10%FBS、1%Pen/St培地で培養した。
実験はKR12を用いた場合と同様にして行った。実験に用いた細胞は、IMR−32細胞、TGW細胞であり、それぞれDMEM、10%FBS、1%Pen/St培地、RPMI1640、10%FBS、1%Pen/St培地で培養した。96ウェル plateに各細胞を1000cells/50μl/ウェル播種し、37℃、5%CO2、飽湿条件下にて24時間培養した後、Mediumに試薬(final concentration 1,3,10,30,100nM)を希釈後、50μl/ウェル添加、混和した。再び37℃、5%CO2、飽湿条件下にて72時間培養した。Cell Counting Kit−8(DOJINDO)を10μl/ウェル添加、混和後、37℃、5%CO2、飽室条件下にて2時間培養した。Microplate Reader MTP−310 Lab(COLONA ELECTORIC)にて吸光度を測定後、IC50値を算出した。
配列番号2:合成DNA、
配列番号3:合成DNA、
配列番号4:合成DNA、
配列番号5:合成DNA、
配列番号6:合成DNA、
配列番号7:合成DNA、
配列番号8:合成DNA、
配列番号9:合成DNA、
配列番号10:合成DNA、
配列番号11:合成DNA、
配列番号12:合成DNA、
配列番号13:合成DNA、
配列番号14:合成DNA、
配列番号15:合成DNA、
配列番号16:合成DNA、
配列番号17:合成DNA。
[配列表]
Claims (30)
- ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位に特異的に結合するDNA結合化合物と、アルキル化剤との複合体。
- 遺伝子変異部位が遺伝子配列の変化及び/または遺伝子コピー数の変化である、請求項1に記載の複合体。
- ドライバーオンコジーンが、KRAS、HRAS、NRAS、BCR−ABL、EGFR、c−KIT、BRAF、PI3K、ALK、PIK3CA、FLT3、MET、BCL2、EML4‐ALK、APC、BRCA1/2、TP53、MSH2、MLH1、MSH6、PMS2、RB1、PTEN、VHL、P16、MEN1、RET、CDH1、STK11、PTCH、Her2/neu、EGFR、MYC、MYCNおよびMET、並びに癌の遺伝子変異データベースに登録される遺伝子から選ばれる少なくとも1つである、請求項1および2のいずれか1項に記載の複合体。
- DNA結合化合物がBridged Nucleic Acid(架橋化核酸)、Locked Nucleic Acid(LNA)、PNA、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)修飾物、DNA結合蛋白、およびDNA結合蛋白複合体のいずれかである、請求項1〜3のいずれか1項に記載の複合体。
- アルキル化剤が、DNAの特定の塩基配列に対して、アルキル化能を有する官能基を有する化合物である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の複合体。
- アルキル化剤がsecoCBIである、請求項5に記載の複合体。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載の複合体を含む、ドライバーオンコジーン遺伝子変異特異的アルキル化剤。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 下式で表される請求項1に記載の複合体。
- 請求項8に記載の複合体を含むKRAS遺伝子コドン12変異アルキル化剤。
- 請求項9に記載の複合体を含むALK遺伝子F1174L変異アルキル化剤。
- 請求項10および11のいずれか1項に記載の複合体を含むPIK3CA遺伝子E545K変異アルキル化剤。
- 請求項12および13のいずれか1項に記載の複合体を含むMYCN遺伝子増幅変異アルキル化剤。
- 請求項1〜6および8〜13のいずれか1項に記載の複合体を含む医薬組成物。
- 医薬組成物が抗癌剤である請求項18に記載の医薬組成物。
- 請求項1〜6および8〜13のいずれか1項に記載の複合体を含むキット。
- 請求項1〜6および8〜13のいずれか1項に記載の複合体を含む研究試薬キット。
- 請求項1〜6および8〜13のいずれか1項に記載の複合体を含む治療用キット。
- (1)ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位に特異的に結合するようにDNA結合化合物を設計する工程、
(2)設計した前記DNA結合化合物とアルキル化剤とを結合させる工程を含む、
ドライバーオンコジーンの遺伝子変異部位を特異的にアルキル化する複合体の製造方法。 - 遺伝子変異部位が遺伝子配列の変化または遺伝子コピー数の変化である、請求項23に記載の製造方法。
- ドライバーオンコジーンが、RAS、KRAS、HRAS、NRAS、BCR−ABL、EGFR、c−KIT、BRAF、PI3K、ALK、PIK3CA、FLT3、MET、BCL2、EML4‐ALK、APC、BRCA1/2、TP53、MSH2、MLH1、MSH6、PMS2、RB1、PTEN、VHL、P16、MEN1、RET、CDH1、STK11、PTCH、Her2/neu、EGFR、MYC、MYCNおよびMET、並びに癌の遺伝子変異データベースに登録される遺伝子からなる群から選ばれる少なくとも1つである、請求項23および24のいずれか1項に記載の製造方法。
- DNA結合化合物がBridged Nucleic Acid(架橋化核酸)、Locked Nucleic Acid(LNA)、PNA、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)、ピロール・イミダゾールポリアミド(PIP)修飾物、DNA結合蛋白、およびDNA結合蛋白複合体のいずれかである、請求項23〜25のいずれか1項に記載の製造方法。
- アルキル化剤が、DNAの特定の塩基配列に対して、アルキル化能を有する官能基を有する化合物である、請求項23〜26のいずれか1項に記載の複合体の製造方法。
- アルキル化剤がsecoCBIである、請求項27に記載の製造方法。
- 請求項23〜28のいずれか1項に記載の製造方法で得られた複合体の医薬組成物の製造のための使用。
- 請求項23〜28のいずれか1項に記載の製造方法で得られた複合体の抗癌剤の製造のための使用。
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Non-Patent Citations (18)
Title |
---|
佐々木俊太、他: "DNAアルキル化能を有する新しいピロール-イミダゾールポリアミドの分子設計", 日本化学会講演予稿集, vol. 84, no. 2, JPN6014047395, 2004, pages Page.1049 * |
佐々木俊太、他: "塩基配列特異的認識能を有するアルキル化ピロール‐イミダゾールポリアミドの新規分子設計", 生体機能関連化学シンポジウム講演要旨集, vol. Vol.22nd, JPN6014047411, 2007, pages Page.92-93 * |
大吉崇文、他: "配列特異的アルキル化ポリアミドによる遺伝子発現の制御", 日本化学会講演予稿集, vol. 83, no. 2, JPN6014047400, 2003, pages Page.1127 * |
川上わかな、他: "配列特異的アルキル化ポリアミドによる遺伝子発現の制御", 日本化学会講演予稿集, vol. 81, no. 2, JPN6014047404, 2002, pages Page.945 * |
成田暁彦、他: "アルキル化ピロール-イミダゾールポリアミドによる配列特異的なDNAアルキル化とin vivoでのジーンサイレ", 日本化学会講演予稿集, vol. 84, no. 2, JPN6014047392, 2004, pages Page.1063 * |
斎藤烈、他: "ヒトゲノム最前線 21世紀は遺伝子の時代 II部 ポストゲノムのゆくえ ポストゲノムの生物有機化学 遺伝子を", 別冊化学, vol. Vol.2001, JPN6014047408, 2001, pages Page.89-110 * |
杉山弘: "アルキル化ピロール‐イミダゾールポリアミドによるテーラーメード抗がん剤の創製", 高分子学会予稿集, vol. 52, no. 13, JPN6014047403, 2003, pages Page.3708-3709 * |
杉山弘: "がんの分子標的療法 ピロール‐イミダゾールポリアミドによる遺伝子発現制御", 最新医学, vol. 56, no. 3, JPN6014047413, 2001, pages Page.376-383 * |
杉山弘: "がん領域におけるドラッグデリバリーシステム(DDS) DDSにおける基盤技術開発 DNA配列を標的としたDDS", 最新医学, vol. 61, no. 6, JPN6014047386, 2006, pages Page.1067-1074 * |
杉山弘: "テーラーメード抗ガン剤をめざして", 単一分子・原子レベルの反応制御 第6回シンポジウム2期チーム(平成8年度採択)研究成果報告講演要旨集 平成1, JPN6014047405, 2002, pages Page.67-70 * |
杉山弘: "先端バイオテクノロジーの開発と応用 テーラーメイド抗がん剤の創製", 化学工業, vol. 55, no. 4, JPN6014047399, 2004, pages Page.291-296 * |
板東俊和、他: "DNAの機能と構造を操るケミカルバイオロジー", 有機合成化学協会誌, vol. 63, no. 10, JPN6014047388, 2005, pages Page.1016-1027 * |
板東俊和、他: "ピロール‐イミダゾールポリアミドの効率的なアルキル化がもたらす生物活性", 日本薬学会年会要旨集, vol. 124, no. 2, JPN6014047397, 2004, pages Page.54 * |
板東俊和、他: "配列特異的アルキル化剤の医薬品としての可能性", 医薬品研究, vol. 36, no. 1, JPN6014047391, 2005, pages Page.1-12 * |
柏崎玄伍、他: "アルキル化PIポリアミドの生物活性評価", 日本化学会講演予稿集, vol. 91, no. 3, JPN6014047379, 2011, pages Page.735 * |
熊本はな、他: "DNA配列特異的アルキル化によるbcr‐abl遺伝子発現制御への応用", 日本化学会講演予稿集, vol. 90, no. 3, JPN6014047380, 2010, pages Page.750 * |
蓑島維文、他: "DNAの配列特異的アルキル化と生物化学的応用", 日本化学会講演予稿集, vol. 89, no. 2, JPN6014047383, 2009, pages Page.1391 * |
飯田博一、他: "ピロール‐イミダゾールポリアミドによるDNA塩基配列認識の進歩 ポスト・ゲノム時代の創薬", 有機合成化学協会誌, vol. 58, no. 10, JPN6014047410, 2000, pages Page.975-987 * |
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