JP2019519610A - アルブミンベースのナノ医薬品を使用するための組成物及び方法 - Google Patents
アルブミンベースのナノ医薬品を使用するための組成物及び方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019519610A JP2019519610A JP2019518170A JP2019518170A JP2019519610A JP 2019519610 A JP2019519610 A JP 2019519610A JP 2019518170 A JP2019518170 A JP 2019518170A JP 2019518170 A JP2019518170 A JP 2019518170A JP 2019519610 A JP2019519610 A JP 2019519610A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- conjugate
- receptor
- seq
- kit
- cell surface
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6891—Pre-targeting systems involving an antibody for targeting specific cells
- A61K47/6897—Pre-targeting systems with two or three steps using antibody conjugates; Ligand-antiligand therapies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/712—Nucleic acids or oligonucleotides having modified sugars, i.e. other than ribose or 2'-deoxyribose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6867—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of a blood cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
本発明は、Institute of General Medical Sciences of the National Institutes of Health(国立衛生研究所の総合医学科学研究所)により授与された助成金RO1 GM95606の下、政府支援で行われた。政府は、本発明に特定の権利を有する。
本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成する添付の図面は、本発明のいくつかの態様を例示し、本明細書と共に本発明の原理を説明するのに役立つ。
明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「a」、「an」、及び「the」は、文脈に別途明示のない限り、複数の指示対象を含む。
開示されるコンジュゲートは、アポトーシスを誘導する開示される方法及び本明細書に開示の処置方法に使用することができる。
標的化部分及びオリゴマー化部分を含むコンジュゲートが本明細書に開示される。例えば、オリゴマー化部分は、オリゴヌクレオチドまたはオリゴペプチドとすることができる。
限定されないが、オリゴヌクレオチドまたはオリゴペプチドなどのオリゴマー化部分に結合、連結、または付着することができる標的化部分が開示される。
オリゴマー化部分は、複合体を形成するために、少なくとも1つの他のオリゴマー化部分に結合するか、またはこれと相互作用することができる任意の化合物(例えば、オリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、またはオリゴ糖)とすることができる。
オリゴヌクレオチドは、当該技術分野で周知である。開示されるコンジュゲートの一態様では、オリゴヌクレオチドは、生体適合性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、非分解性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、水溶性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、電荷中性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、生体適合性及び非分解性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、水溶性及び電荷中性であり得る。一態様では、オリゴヌクレオチドは、次の:生体適合性、非分解性、水溶性、及び電荷中性のうちの1つ以上とすることができる。例えば、一態様では、オリゴヌクレオチドは、生体適合性、非分解性、水溶性、及び電荷中性とすることができる。
本明細書に開示の組成物及び方法は、化学的に修飾された骨格を有する、生体適合性合成オリゴヌクレオチドアナログを利用することができる。以下に示す概略図は、いくつかのアナログを示し、これらのアナログの特性を天然のDNAと比較する。
表1
表2−例示的モルフォリノのリスト
オリゴペプチドは、当該技術分野で既知である。開示されるコンジュゲートの一態様では、オリゴペプチドは、生体適合性であり得る。一態様では、オリゴペプチドは、非分解性であり得る。一態様では、オリゴペプチドは、水溶性であり得る。
開示されるコンジュゲートの一態様では、1つ以上のコイルドコイル形成ペプチドは、(例えば、それぞれ第1または第2のコンジュゲート中で)標的化部分またはアルブミンに結合させることができる。
アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含むコンジュゲートは、本明細書に開示される。
アルブミンを含むコンジュゲートが開示される。一部の態様では、アルブミンは、天然または合成のものとすることができる。一部の態様では、アルブミンは、野生型アルブミン、アルブミン多様体、またはアルブミンの誘導体とすることができる。アルブミンは、その教示に関して本明細書をもって参照により本明細書に組み込まれる欧州公開第EP2556087号に開示されるアルブミンのいずれかとすることができる。
オリゴマー化部分は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含むコンジュゲートに関して、本明細書に開示されるもののいずれかとすることができる。従って、オリゴマー化部分は、複合体を形成するために、少なくとも1つの他のオリゴマー化部分と結合または相互作用することができる任意の化合物(例えば、オリゴペプチド、オリゴヌクレオチド、またはオリゴ糖)とすることができる。
標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲート、ならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートを含むキットが本明細書に開示される。一態様では、開示されるキットは、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートを投与するための使用説明書を含むことができる。
本明細書に開示される1つ以上のコンジュゲートを含む開示される組成物を含む医薬組成物が、本明細書に開示される。例えば、一態様では、開示される医薬組成物は、(i)標的化部分及びオリゴマー化部分を含むコンジュゲート、ならびに(ii)薬学的に許容される担体、を含む。一態様では、開示される医薬組成物は、(i)アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含むコンジュゲート、ならびに(ii)薬学的に許容される担体、を含む。一態様では、開示される医薬組成物は、(i)標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲート、(ii)アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲート、ならびに(iii)薬学的に許容される担体、を含む。(i)標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲート、ならびに(ii)薬学的に許容される担体、を含む医薬組成物も開示される。一態様では、開示される医薬組成物は、(i)アルブミン及び1つ以上のオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲート、ならびに(ii)薬学的に許容される担体、を含む。一態様では、開示される医薬組成物は、(i)標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含む第1のコンジュゲート、(ii)アルブミン及び1つ以上のオリゴヌクレオチドを含む第2のコンジュゲート、ならびに(iii)薬学的に許容される担体、を含む。一部の態様では、キットは、個々のコンジュゲートまたは1つ以上のコンジュゲートの混合物を含むことができる。
i)アポトーシスを誘導する方法
標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること;アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させることを含み、細胞の、第1のコンジュゲート及び第2のコンジュゲートとの接触が、細胞のアポトーシスを誘導する、アポトーシスを誘導する方法が本明細書に開示される。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を繰り返し接触させることを含むことができる。一態様では、開示される方法は、アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を繰り返し接触させることを含むことができる。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに、アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させることを含むことができる。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに、アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含むことができ、第1及び第2のコンジュゲートは、細胞の集団に接触させる前に、予備混合される。
標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること;アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させることを含み、細胞の、第1のコンジュゲート及び第2のコンジュゲートとの接触が、細胞のアポトーシスを誘導する、アポトーシスを誘導する方法もまた本明細書に開示される。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を繰り返し接触させることを含むことができる。一態様では、開示される方法は、アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を繰り返し接触させることを含むことができる。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに、アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含むことができる。標的化部分及びオリゴペプチドを含む開示されるコンジュゲートならびにアルブミン及び本明細書に開示の1つ以上のオリゴペプチドを含むコンジュゲートを使用することができる。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに、アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含むことができ、第1及び第2のコンジュゲートは、細胞の集団に接触させる前に、予備混合される。
標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含むコンジュゲートを含む第2のコンジュゲートを含む組成物と、細胞の集団を接触させることを含み、細胞の組成物との接触が、細胞のアポトーシスを誘導する、アポトーシスを誘導する方法が本明細書に開示される。一態様では、開示される方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに、アルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含むことができ、第1及び第2のコンジュゲートは、細胞の集団に接触させる前に、予備混合される。
それを必要とする対象の処置方法が本明細書に開示され、方法は、標的化部分及びオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートを含む第1の組成物を対象に投与すること、ならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートを含む第2の組成物を対象に投与することを含み、第1の組成物及び第2の組成物の投与は、対象において細胞の標的の集団のアポトーシスを誘導する。
i)標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲートの合成
標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが本明細書に開示され、プロセスは、標的化部分を得ること、オリゴヌクレオチドを修飾すること、及び標的化部分をオリゴヌクレオチドとコンジュゲートすることを含む。一態様では、標的化部分は、チオエーテル結合を介してオリゴヌクレオチドにコンジュゲートさせることができる。一態様では、オリゴヌクレオチドは、SMCC修飾することができる。一態様では、オリゴヌクレオチドは、3’−マレイミド基を含有することができる。一態様では、コンジュゲートを合成する開示されるプロセスは、検出可能な標識を導入することを含むことができる。コンジュゲートを合成する開示されるプロセスの一態様では、標的化部分は、開示される標的化部分とすることができる。例えば、標的化部分は、CD20に特異的なFab’フラグメントとすることができる。コンジュゲートを合成する開示されるプロセスの一態様では、オリゴヌクレオチドは、開示されるオリゴヌクレオチドとすることができる。例えば、開示されるオリゴヌクレオチドは、10bp〜40bpを含むモルフォリノとすることができる。
標的化部分及びオリゴペプチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが本明細書に開示され、プロセスは、標的化部分を得ること、オリゴペプチドを修飾すること、及び標的化部分をオリゴペプチドとコンジュゲートすることを含む。一部の態様では、標的化部分は、Fab’フラグメントとすることができる。
アルブミン及び1つ以上のオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが、本明細書に開示され、プロセスは、アルブミンを得ること、1つ以上のオリゴヌクレオチドを修飾すること、及びアルブミンを1つ以上のオリゴヌクレオチドとコンジュゲートすることを含む。一態様では、コンジュゲートを合成する開示されるプロセスは、検出可能な標識を導入することを含むことができる。コンジュゲートを合成する開示されるプロセスの一態様では、1つ以上のオリゴヌクレオチドは、1つ以上の開示されるオリゴヌクレオチドとすることができる。例えば、1つ以上の開示されるオリゴヌクレオチドは、それぞれ10bp〜40bpを含むモルフォリノとすることができる。
アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが本明細書に開示され、プロセスは、アルブミンを得ること、1つ以上のオリゴペプチドを修飾すること、及びアルブミンを1つ以上のオリゴペプチドとコンジュゲートすることを含む。一態様では、コンジュゲートを合成する開示されるプロセスは、検出可能な標識を導入することを含むことができる。コンジュゲートを合成する開示されるプロセスの一態様では、1つ以上のオリゴペプチドは、1つ以上の開示されるオリゴペプチドとすることができる。例えば、1つ以上の開示されるオリゴヌクレオチドは、コイルドコイル形成ペプチドとすることができる。
標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴヌクレオチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが本明細書に開示され、プロセスは、標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含む第1のコンジュゲートを、アルブミンを含む第2のコンジュゲートと、1つ以上のオリゴヌクレオチドで接触させることを含む。一態様では、第1のコンジュゲートのオリゴヌクレオチドは、第2のコンジュゲートの1つ以上のオリゴヌクレオチドとハイブリダイゼーションする。一態様では、開示されるプロセスは、第1のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、開示されるプロセスは、第2のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、開示されるプロセスは、第1のコンジュゲートを生成すること及び第2のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、第1のコンジュゲートは、標的化部分及びオリゴヌクレオチドを含む開示される任意のコンジュゲートとすることができる。一態様では、第2のコンジュゲートは、アルブミン及び1つ以上のオリゴヌクレオチドを含む開示される任意のコンジュゲートとすることができる。例えば、開示されるプロセスの一態様では、標的化部分は、CD20に特異的なFab’フラグメントとすることができ、アルブミンは、天然アルブミン、合成アルブミン、またはアルブミン誘導体とすることができ、オリゴヌクレオチドのそれぞれは、10bp〜40bpを含むモルフォリノとすることができ、第1のコンジュゲートのモルフォリノは、第2のコンジュゲートの1つ以上のモルフォリノと相補的である。
標的化部分及びオリゴペプチドを含むコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含むコンジュゲートを合成するプロセスが本明細書に開示され、プロセスは、標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートを、アルブミンを含む第2のコンジュゲートと、1つ以上のオリゴペプチドで接触させることを含む。一態様では、第1のコンジュゲートのオリゴペプチドは、第2のコンジュゲートの1つ以上のオリゴペプチドとハイブリダイゼーションする。一態様では、開示されるプロセスは、第1のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、開示されるプロセスは、第2のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、開示されるプロセスは、第1のコンジュゲートを生成すること及び第2のコンジュゲートを生成することを含むことができる。一態様では、第1のコンジュゲートは、標的化部分及びオリゴペプチドを含む開示される任意のコンジュゲートとすることができる。一態様では、第2のコンジュゲートは、アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む開示される任意のコンジュゲートとすることができる。例えば、開示されるプロセスの一態様では、標的化部分は、CD20に特異的なFab’フラグメントとすることができ、アルブミンは、天然アルブミン、合成アルブミン、またはアルブミン誘導体とすることができ、オリゴペプチドのそれぞれは、コイルドコイル形成ペプチドとすることができ、第1のコンジュゲートのコイルドコイル形成ペプチドは、第2のコンジュゲートの1つ以上のコイルドコイル形成ペプチドに相補的である。
次の実施例は、本明細書で特許請求される化合物、組成物、物品、デバイス、及び/または方法がどのように作製され、評価されるかの説明を、当業者らに提示するために記載され、単に本発明の例示とするものであり、発明者らが自らの発明とみなすものの範囲を制限するものではない。しかし、当業者らは、本開示に照らして、開示される具体的な実施形態において多くの変更を行うことができ、本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく同様または類似した結果をさらに得ることを理解すべきである。数(例えば、量、温度など)に関して精度を確保するための取り組みがなされているが、いくらかの誤差及び偏差が考慮されるべきである。
HSAは、不活性であり、生分解性であり、容易に入手可能であり、腫瘍及び炎症組織により有意に取り込まれるので、多数の薬物送達システムにおいて担体として使用されている。アルブミン含有薬物送達系は、化学的コンジュゲーション、直接遺伝子融合、ナノ粒子封入、及びアルブミンとの非共有結合により調製することができる。FDAが承認したアルブミン製品は、抗糖尿病性融合製品Levemir(登録商標)及びVictoza(登録商標)、パクリタキセルAbraxane(登録商標)のナノ粒子製剤、ならびに診断用製品Nanocoll(登録商標)及びAlbures(登録商標)を含む。他の実験的用途は、HSAのシステイン−34の−SH基を標的とした。HSAは、変性することなく化学的に修飾することができる強力なタンパク質である。
(i)1F5抗体由来のFAB’を使用するナノコンジュゲート1A−(FAB’−MORF1)
1F5 Ab由来のFab’フラグメントを使用して、ナノコンジュゲート1Aを調製する:最初に、200nmolのMORF1−NH2(3’−一級アミンを含有する)(GeneTools、オレゴン州フィロマス)を、170μLのDMSO中の0.67mg(2μmol)のスクシンイミジル−4−(N−マレイミドメチル)シクロヘキサン−1−カルボキシラート(SMCC)(Soltec Ventures、マサチューセッツ州ビバリー)と反応させて、MORF1−mal(3’−マレイミドを含有する)を生成した。反応を、RT(室温)で24時間実施した。生成物を、1.5mLのアセトン中に沈殿させることにより単離し、脱イオン水−アセトン中で2回溶解沈殿させることにより精製し、真空下で乾燥させた。次に、200nmolのMORF1−malを10mMのPBS(pH6.5)200μLに溶解させ、次に、溶液を、2mLのPBS(pH6.5)中で新たに還元したFab’−SH 200nmol(約10mg)と混合した。反応を、4℃で24時間実施した。最後に、サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)を使用して、Fab’1F5−MORF1コンジュゲートを精製して、遊離したコンジュゲートされていないFab’1F5及びMORF1を除去した。PBS(pH7.2)で溶出するSephacryl S−100HR16/60カラム(GE Healthcare)を備えたAKTA FPLCシステム(GE Healthcare、ニュージャージー州ピスカタウェイ)を使用した。任意に、Fab’1F5−MORF1は、イメージング研究のために、5〜10モル過剰のRhodamine Red(商標)−Xスクシンイミジルエステル(R6010)(Molecular Probes(登録商標)、Invitrogen、カリフォルニア州カールスバッド)で標識した。PD−10脱塩カラム(GE Healthcare)を使用して、生成物を精製した。Fab’1F5−MORF1コンジュゲートのFab’1F5当量濃度を決定するために、ビシンコニン酸(BCA)タンパク質アッセイ(Thermo Scientific Pierce、イリノイ州ロックフォード)を使用した。得られた値を、紫外可視分光法(278,000M-1cm-1のモル吸光係数を使用する)から得られたMORF1当量濃度と比較した。このような比較により、1:1化学量論のカップリング反応が確認された。
ナノコンジュゲート1Bを、1Aと同様に調製した。21mgのリツキシマブ溶液に、2.1mgのペプシンを添加した。混合物を、37℃で85分間インキュベートした。F(ab’)2を、Sephacryl 100 60/100カラム(S−100)で分離した後、12mgのF(ab’)2を単離した。MORF1と反応させる直前に、TCEPを用いて、F(ab’)2をFab’に還元した。
既知の技術を使用して、ナノコンジュゲート1C(Fab’−CCE)コンジュゲートを調製した。1F5のFab’フラグメントを、上記のように調製した。マレイミド−チオール化学を使用するFab’のCCEとのコンジュゲーションにより、Fab’−(CCE)1を得た。使用直前に、F(ab’)2を、5mMのEDTAを含有するPBS(pH7.4)中の10mMのトリス(2−カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩(TCEP)を用いて、Fab’に、37℃、暗所で1時間還元した。CCE(Fab’に対して1.5倍過剰)を添加し、カップリング反応を、4℃の暗所で一晩進行させた。次に、PD10カラムを使用して、粗生成物を2回精製した。このカップリング反応は、1:1の化学量論に従う。従って、得られたコンジュゲートを、Fab’−(CCE)1と呼んだ。
ナノコンジュゲート2A(HSA−(MORF2)x)を、2ステップで合成した(図1)。最初に、ヘテロ二官能性架橋剤SM−(PEG)XのN−ヒドロキシスクシンイミドエステル(スクシンイミジル−[(N−マレイミドプロピオンアミド)−ジエチレングリコール]エステル)との反応により、HSAアミノ基の画分を、マレイミド基に変換した。第2のステップでは、新たに調製したMORF2−SHを、チオエーテル結合を介してHSAに付着させた。例えば、5mgのHSA([NH2]:778nmol/mgのHSA、1当量)を、400μLのPBS(pH7.5)に溶解させ、150μLのDMSO中の18.3mgのSM−(PEG)X(43μmol、11当量)と混合した。混合物を、室温で6時間及び4℃で一晩、撹拌した。過剰のSM−(PEG)Xを、限外濾過により除去した(修正エルマンアッセイにより決定された30,000cu群は、318nmol/mgのHSAであった(41%の変換))。5.7mgのMORF2−SS−Rを、100μLのPBS(pH7.0)に溶解させ、900μLのTCEP溶液(10mM、PBS中pH7.0)に添加し、次に、室温で2.5時間インキュベートした。完成後、過剰のTCEPを限外濾過(3,000カットオフ)で4回除去して、MORF2−SHを得、最終容量は、500μLであった。
ナノコンジュゲート2B(HSA−(CCK)x)は、ナノコンジュゲート2Aと同様に合成することができる。SM−(PEG)2で修飾されたHSAは、HSA上のマレイミド基のCCKペプチドのSH基との反応により、チオエーテル結合を介して、CCKペプチド(CYGG K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE)と反応させることができる。
Varian Cary 400 BioUV−可視分光光度計(Agilent Technologies、カリフォルニア州サンタクララ)を使用して、MORF1−MORF2ハイブリダイゼーションへの減色効果の分析を実施した。最初に、MORF1及びMORF2(またはFab’−MORF1及びHSA−MORF2)を、1mLのPBS、pH=7.4に、2.5μM(MORF当量)の濃度で溶解させ、次に、室温で異なる比で混合した。各溶液混合物中のMORFオリゴ(MORF1+MORF2)の最終濃度は、一定(2.5μM)に保たれた。例えば、2.5μMのMORF1溶液0.75mLを、2.5μMのMORF2溶液0.25mLと混合することにより、75%のMORF1(または25%のMORF2)を含有する混合物を作成した。測定のために、試料を1cm石英キュベットに入れた。(塩基が寄与する)260nmでの光学密度(OD)を記録した。全ての測定を、3連で実施した。Fab’−MORF1及びHSA−(MORF2)10のin vitroハイブリダイゼーションを、UV−Visで分析した(図2)。
Fab’−MORF1及びHSA−MORF2との同時処置による、ヒトバーキットB細胞非ホジキンリンパ腫(NHL)Raji細胞のin vitroアポトーシス誘導を、2つのアッセイ:アネキシンV/ヨウ化プロピジウム(PI)結合アッセイ、及びカスパーゼ−3活性化アッセイにより評価した。全ての実験では、ヤギ抗マウス(GAM)二次抗体(2°Ab)(KPL、メリーランド州ゲーサーズバーグ)と超架橋した1F5 mAbを、陽性対照として使用した(モル比1F5:GAM=2:1)。未処置細胞(培地中)を、陰性対照として使用した。
図3の結果は、HPMAコポリマーコンジュゲート(P−コンジュゲート)と比較した場合、HSAコンジュゲートの高い活性を明らかに示している。HSAコンジュゲート双方の組み合わせ、a)Fab’1F5−MORF1/HSA−(MORF2)10(1F5抗体由来のFab’);b)Fab’rtx−MORF1/HSA−(MORF2)10(リツキシマブ抗体由来のFab’)は、HPMAコポリマーベースの組み合わせ、Fab’1F5−MORF1/P−(MORF2)14及びFab’1F5−MORF1/P−(MORF2)11.4(Pは、HPMAコポリマー骨格である)よりも高いアポトーシスレベルを有していた。
ハイブリダイゼーション媒介薬物不含高分子治療薬のin vivo治療有効性を、全身に播種されたRaji B細胞を有するSCID(C.B−17)マウスにおいて評価した。この動物モデルは、100%に近い腫瘍の生着率を有し、処置後の後肢麻痺のない生存期間は、抗癌有効性を正確に反映している。
in vivoイメージングを、所定の時間間隔で実施した。マウスを、精密噴霧器からの酸素中2%(v/v)のイソフルランガス(IsoFlo(登録商標)、Abbott Laboratories)で麻酔し、3mgのホタルD−ルシフェリン(Biosynth)を腹腔内注射した。ルシフェリンの注射の15分後、(最大ルシフェラーゼシグナル強度を有する所定の時間間隔)に、マウスを腹臥位でスキャンした。Xenogen IVIS(登録商標)Spectrum(Perkin Elmer)を、露光時間1分、ビニング中、及びfストップ値1で使用した。画像を取得し、Living Image(登録商標)(Perkin Elmer)ソフトウエア環境下で解析した。マウス全体を含むように輪郭を描くことにより、目的の領域(ROI)を選択した。ルシフェラーゼ発光単位を、平均放射輝度(光子/秒/cm2/sr)で定量した。ex vivo分析のために、死亡させる12分前に、マウスに3mgのルシフェリンを注射した。画像化のために、種々の臓器及び組織(心臓、肝臓、脾臓、腎臓、肺、腸、胃、筋肉、脳、脊髄、大腿骨、脛骨、ならびに腸間膜及び鼠径リンパ節)を採取した。取得パラメータは、次の通りであった:露光時間1分、ビニング小、及びf/stop 1。
紫外可視分光法によるハイブリダイゼーション及び動的光散乱による流体力学的有効径の以前の分析は、Fab−MORF1及びP−MORF2コンジュゲートが、溶液中で混合される時、MORF1−MORF2生物学的認識を介して自己集合したことを示した。Cy5−Fab’RTX−MORF1及びFITC−HSA−MORF2が、細胞表面上のCD20抗原で、特異的に集合することを実証することが必要である。従って、本発明者らは、CD20発現ヒトNHL Raji B細胞株を使用してin vitroで共焦点顕微鏡試験を行った(図7)。Raji細胞を、蛍光標識されたコンジュゲート(Cy5−Fab’RTX−MORF1及びFITC−HSA−MORF2)の双方の予備混合物に曝露すると、B細胞の表面でのCy5及びFITCシグナルのウェル共局在化がもたらされた。逐次的処置では、Raji細胞を、最初に1時間、Cy5−Fab−MORF1に曝露し、次に、FITC−HSA−MORF2で処置した場合、蛍光画像もまた2つのシグナルの共局在化を示した。細胞を蛍光標識コンジュゲートの前に、過剰量のリツキシマブで予めブロックした場合、これら2つのシグナルのいずれも、見出すことができない。細胞表面上に装飾されたCy5−Fab’RTX−MORF1コンジュゲートを、前もって、FITCシグナルが存在しない正常なMORF2モチーフとハイブリダイゼーションさせた時に、ブロッキング効果も実施した。FITC−HSA−MORF2のみに曝露された細胞は、いかなる蛍光シグナルも示さなかった。これらの顕微鏡の結果は、Fab’RTX−MORF1及びHSA−MORF2コンジュゲートが、有効なMORF1−MORF2ハイブリダイゼーションを介して、細胞表面上で集合することができることができることを確認した。
参考文献
1. T.−W.Chu,R.Zhang,J.Yang,M.P.Chao,P.Shami,J.Kopecek,A two−step pretargeted nanotherapy for CD20 crosslinking may achieve superior anti−lymphoma efficacy to rituximab.Theranostics 5,834−846(2015).
2. K.Wu,J.Liu,R.N.Johnson,J.Yang,J.Kopecek,Drug−free macromolecular therapeutics:Induction of apoptosis by coiled−coil mediated crosslinking of antigens on cell Surface.Angew.Chem.Int.Ed.49,1451−1455(2010).
3. T.−W.Chu,J.Yang,R.Zhang,M.Sima,J.Kopecek,Cell surface self−assembly of hybrid nanoconjugates via oligonucleotide hybridization induces apoptosis.ACS Nano 8,719−730(2014).
4. T.−W.Chu,K.M.Kosak,P.J.Shami,J.Kopecek,Drug−free macromolecular therapeutics induce apoptosis of patient chronic lymphocytic leukemia cells.Drug Delivery Translational Res.4,389−394(2014).
5. G.Liu,G.Mardirossian,J.He,S.Zhang,X.Liu,M.Rusckowski,D.J.Hnatowich,Successful radiotherapy of tumor in pretargeted mice by 188Re−radiolabeled phosphorodiamidate morpholino oligomer,a synthetic DNA analogue.Clin.Cancer Res.12,4958−4964(2006).
6. J.J.Mulvey,C.H.Villa,M.R.McDevitt,F.E.Escorcia,E.Casey,D.A.Scheinberg,Self−assembly of carbon nanotubes and antibodies on tumours for targeted,amplified delivery.Nat.Nanotechnol.8,763−771(2013).
7. J.Gunn,S.I.Park,O.Veiseh,O.W.Press,M.Zhang,A pretargeted nanoparticle system for tumor cell labeling.Mol.Biosyst.7,742−748(2011).
8. T.−W.Chu,J.Kopecek,Drug−free macromolecular therapeutics−a new paradigm in polymeric nanomedicines.Biomaterials Sci.3,908−922(2015).
9. R.L.Siegel,K.D.Miller,A.Jemal,Cancer statistics,2015.CA Cancer J.Clin.65,5−29(2015).
10. K.R.Shankland,J.O.Armitage,B.W.Hancock,Non−Hodgkin lymphoma.Lancet 380,848−857(2012).
11. J.O.Armitage,D.D.Weisenburger,New approach to classifying non−Hodgkin’s lymphomas: clinical features of the major histologic subtypes.Non−Hodgkin’s lymphoma classification project,J.Clin.Oncol.,16,2780−2795(1998).
12. A.D.Zelenetz,L.I.Gordon,W.G.Wierda,J.S.Abramson,R.H.Advan,C.B.Andreadis,N.Bartlett,J.C.Byrd,M.S.Czuczman,L.E.Fayad,R.I Fisher,M.J.Glenn,N.L.Harris,R.T.Hoppe,S.M.Horwitz,C.R.Kelsey,Y.H.Kim,S.Krivacic,A.S.LaCasce,A.Nademanee,P.Porcu,O.Press,R.Rabinovitch,N.Reddy,E.Reid,A.A.Saad,L.Sokol,L.J.Swinnen,C.Tsien,J.M.Vose,J.Yahalom,N.Zafar,M.Dwyer,H.Sundar,Non−Hodgkin’s lymphomas,version 4.2014.J.Natl.Compr.Cancer Netw.12,1282−1303(2014).
13. D.G.Maloney,A.J.Grillo−Lopez,C.A.White,D.Bodkin,R.J.Schilder,J.A.Neidhart,N.Janakiraman,K.A.Foon,T.M.Liles,B.K.Dallaire,K.Wey,I.Royston,T.Davis,R,Levy,IDEC−C2B8(Rituximab)anti−CD20 monoclonal antibody therapy in patients with relapsed low−grade non−Hodgkin’s lymphoma.Blood 90,2188−2195(1997).
14. D.G.Maloney,Anti−CD20 antibody therapy for B−cell lymphomas,N.Engl.J.Med.366,2008−2016(2012).
15. A.Molina,A decade of rituximab:improving survival outcomes in non−Hodgkin’s lymphoma,Annu Rev.Med.59,237−250(2008).
16. G.Cartron,L.Dacheux,G.Salles,P.Solal−Celigny,P.Bardos,P.Colombat,H.Watier,Therapeutic activity of humanized anti−CD20 monoclonal antibody and polymorphism in IgG Fc receptor FcyRIIIa gene.Blood 99,754−758(2002).
17. M.R.Smith,Rituximab(monoclonal anti−CD20 antibody):mechanisms of action and resistance.Oncogene 22,7359(2003).
18. I.Dransfield,Inhibitory FcyRIIb and CD20 internalization.Blood 123,606−607(2014).
19. T.Pham,P.Mero,J.W.Booth,Dynamics of macrophage trogocytosis of rituximab−coated B cells.PloS One 6,el4498(2011).
20. P.Stashenko,L.M.Nadler,R.Hardy,S.F.Schlossman,Characterization of a human B lymphocyte−specific antigen.J.Immunol.125,1678−1685(1980).
21. K.C.Anderson,M.P.Bates,B.L.Slaughenhoupt,G.S.Pinkus,S.F.Schlossman,L.M.Nader Expression of human B cell−associated antigens on leukemias and lymphomas:a model of human B cell differentiation.Blood 63,1424−1433(1984).
22. O.W.Press,A.G.Farr,K.I.Borroz,S.K.Anderson,P.J.Martin,Endocytosis and degradation of monoclonal antibodies targeting human B−cell malignancies.Cancer Res.49,4906−4912(1989).
23. R.B.Michel,M.J.Mattes,Intracellular accumulation of the anti−CD20 antibody 1F5 in B−lymphoma cells.Clin.Cancer Res.8,2701−2713(2002).
24. J.K.Bubien,L.J.Zhou,P.D.Bell,R.A.Frizzell,T.F.Tedder,Transfection of the CD20 cell surface molecule into ectopic cell types generates a Ca2+ conductance found constitutively in B lymphocytes.J.Cell Biol.121,1121−1132(1993).
25. T.F.Tedder,P.Engel,CD20:a regulator of cell−cycle progression of B lymphocytes,Immunol.Today 15,450−454(1994).
26. E.Janas,R.Priest,R.Malhotra,Functional role of lipid rafts in CD20 activity?Biochem.Soc.Symp.,2005,165−175.
27. B.D.Cheson,J.P.Leonard,Monoclonal antibody therapy for B−cell non−Hodgkin’s lymphoma.N.Engl.J.Med.359,613−626(2008).
28. P.Boross,J.H.W.Leusen,Mechanisms of action of CD20 antibodies.Am.J.Cancer Res.2012,2,676−690(2012).
29. M.Okroj,A.Osterborg,A.M.Blom,Effector mechanisms of anti−CD20 monoclonal antibodies in B cell malignancies.Cancer Treat.Rev.39,632−639(2013).
30. D.Shan,J.A.Ledbetter,O.W.Press,Apoptosis of malignant human B cells by ligation of CD20 with monoclonal antibodies.Blood 91,1644−1652(1998).
31. J.M.Hartley,T.−W.Chu,E.M.Peterson,R.Zhang,J.Yang,J.Harris,J.Kopecek,Super−resolution imaging and quatitative analysis of membrane protein/lipid raft clustering mediated by cell surface self−assembly of hybrid nanoconjugates.ChemBioChem 16,1725−1729(2015).
32. R Zhang,J Yang,T−W Chu,J M Hartley,J Kopecek,Multimodality imaging of coiled−coil mediated self−assembly in a“drug−free”therapeutic system.Adv.Healthc.Mater.4,1054−1065(2015).
33. J.Kopecek,J.Yang,T.−W.Chu T−Compositions and methods for inducing apoptosis.US Patent Application,PCT/US2014/023784,filed:March 11,2014.
34. M.Bern,K.M.Knutsen Sand,J.Nilsen,I.Sandlie,J.T.Andersen,The role of albumin receptors in regulation of albumin homeostasis:Implications for drug delivery.J.Controlled Release 211,144−152(2015).
35. F.Kratz,Albumin as a drug carrier:Design of prodrugs,drug conjugates and nanoparticles.J.Controlled Release 132,171−183(2008).
36. J.T.Andersen,B.Dalhus,D.Viuff,B.T.Ravn,K.S.Gunnarsen,A.Plumridge,K.Bunting,F.Antunes,R.Williamson,S.Athwall,E.Allan,L.Evans,M Bjoras,S.Kjaerulff,D.Sleep.I.Sandlie,J.Cameron,Extending serum half−life of albumin by engineering neonatal Fc receptor(FcRn)binding.J.Biol.Chem.289,13493−13502(2014).
37. A.Sethi,M.Sher,M.R.Akram,S.Karim,S.Khiljee,A.Sajjad,N.H.Shah,G.Murtaza,Albumin as a drug delivery and diagnostic tool and its market approved products.Acta Pol.Pharmaceutics−Drug Res.70,597−600(2013).
38. B.Elsadek,F.Katz,Impact of albumin on drug delivery−New applications on the horizon.J.Controlled Release 157,4−28(2012).
39. N.Desai,V.Trieu,B.Damascelli,P.Soon−Shiong,SPARC expression correlates with tumor response to albumin−bound paclitaxel in head and neck cancer patients.Transl.Oncol.2,59−64(2009).
40. G.Liu,J.He,S.Dou,S.Gupta,J.L.Vanderheyden,M.Rusckowski,D.J.Hnatowich,Pretargeting in tumored mice with radiolabeled morpholino oligomer showing low kidney uptake.Eur.J.Nucl.Med.Mol.Imaging 31,417−424(2004).
41. A.M.Ghetie,J.Richardson,T.Tucker,D.Jones,J.W.Uhr,E.S.Vitetta,Disseminated or localized growth of a human B−cell tumor(Daudi) in SCID mice.Int.J.Cancer 45,481−485(1990).
42. A.M.Ghetie,K.Tucker,J.Richardson,J.W.Uhr,E.S.Vitetta,The Antitumor activity of an anti−CD22 immunotoxin in SCID mice with disseminated Daudi lymphoma is enhanced by either an anti−CD 19 antibody or an anti−CD 19 immunotoxin.Blood 80,2315−2320(1992).
43. G.L.Griffiths,M.J.Mattes,R.Stein,S.V.Govindan,I.D.Horak,H.J.Hansen,D.M.Goldenberg,Cure of SCID mice bearing human B−lymphoma xenografts by an anti−CD74 antibody−anthracycline drug conjugate.Clin.Cancer Res.9,6567−6571(2003).
Claims (136)
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
(i)標的化部分及びモルフォリノを含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに
(ii)アルブミン及び1つ以上のモルフォリノを含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含み、
前記細胞の、前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートとの前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - ステップ(i)及びステップ(ii)を繰り返すことをさらに含む、請求項1記載の方法。
- (iii)前記細胞のアポトーシスを確認することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項1に記載の方法。
- 前記細胞が、対象に存在する、請求項1に記載の方法。
- 前記対象が、非ホジキンリンパ腫または関節リウマチを有する、請求項5に記載の方法。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項1に記載の方法。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項7に記載の方法。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項7に記載の方法。
- 前記標的化部分が、Fab’フラグメントである、請求項9に記載の方法。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項10に記載の方法。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項11に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノ及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的である、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAA GCC AAG GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号25)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CCT TGG CTT ACT C 3’(配列番号26)である、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAC AGC CAG AGA GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号21)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CTC TCT GGC TGT ACT C 3’(配列番号22)である、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAT GAA GTA CCG ACA AGA TA 3’(配列番号33)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT CTT GTC GGT ACT TCA TC 3’(配列番号34)である、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノオリゴヌクレオチドが、配列番号1〜52のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノオリゴヌクレオチドが、相補的な配列番号1〜52のうちのいずれか1つ以上である、請求項1に記載の方法。
- 前記アルブミンが、ヒト血清アルブミンである、請求項1に記載の方法。
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
標的化部分及びモルフォリノを含む第1のコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のモルフォリノを含むコンジュゲートを含む第2のコンジュゲートを含む組成物と、細胞の集団を接触させることを含み、前記細胞の前記組成物との前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - 前記細胞の前記組成物との前記接触を繰り返すことをさらに含む、請求項19の方法。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項19に記載の方法。
- 前記細胞が、対象に存在する、請求項19に記載の方法。
- 前記対象が、非ホジキンリンパ腫または関節リウマチを有する、請求項22に記載の方法。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項19に記載の方法。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項24に記載の方法。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項19に記載の方法。
- 前記標的化部分が、Fab’フラグメントである、請求項26に記載の方法。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項27に記載の方法。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項28に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノ及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的である、請求項19に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAA GCC AAG GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号25)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CCT TGG CTT ACT C 3’(配列番号26)である、請求項19に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAC AGC CAG AGA GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号21)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CTC TCT GGC TGT ACT C 3’(配列番号22)である、請求項19に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAT GAA GTA CCG ACA AGA TA 3’(配列番号33)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT CTT GTC GGT ACT TCA TC 3’(配列番号34)である、請求項19に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、配列番号1〜52のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的な配列番号1〜52のうちのいずれか1つ以上である、請求項19に記載の方法。
- 前記アルブミンが、ヒト血清アルブミンである、請求項19に記載の方法。
- (i)標的化部分及びモルフォリノを含む第1のコンジュゲート、ならびに(ii)アルブミン及び1つ以上のモルフォリノを含む第2のコンジュゲートを含むキット。
- (i)のコンジュゲート及び(ii)のコンジュゲートを投与するための(iii)使用説明書をさらに含む、請求項36に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートが、合剤化される、請求項36に記載のキット。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項36に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、細胞上に在る、請求項39に記載のキット。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項40に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項39に記載のキット。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項36に記載のキット。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項43に記載のキット。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項44に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノ及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的である、請求項36に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAA GCC AAG GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号25)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CCT TGG CTT ACT C 3’(配列番号26)である、請求項36に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAG TAC AGC CAG AGA GAG AAT CAA TAT A 3’(配列番号21)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT ATT GAT TCT CTC TCT GGC TGT ACT C 3’(配列番号22)である、請求項36に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、5’ GAT GAA GTA CCG ACA AGA TA 3’(配列番号33)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、5’ TAT CTT GTC GGT ACT TCA TC 3’(配列番号34)である、請求項36に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノオリゴヌクレオチドが、配列番号1〜52のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的な配列番号1〜52のうちのいずれか1つ以上である、請求項36に記載のキット。
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
(i)標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに
(ii)アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含み、
前記細胞の、前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートとの前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - ステップ(i)及びステップ(ii)を繰り返すことをさらに含む、請求項51記載の方法。
- (iii)前記細胞のアポトーシスを確認することをさらに含む、請求項51に記載の方法。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項51に記載の方法。
- 前記細胞が、対象に存在する、請求項51に記載の方法。
- 前記対象が、非ホジキンリンパ腫または関節リウマチを有する、請求項55に記載の方法。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項51に記載の方法。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項57に記載の方法。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項57に記載の方法。
- 前記標的化部分が、Fab’フラグメントである、請求項59に記載の方法。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項60に記載の方法。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項61に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的である、請求項51に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、コイルドコイルを形成する相補的なオリゴペプチドである、請求項51に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号64)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号65)である、請求項51に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記D−アミノ酸オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号66)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のD−アミノ酸オリゴペプチドが、K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号67)である、請求項51に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、配列番号64〜83のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的な配列番号64〜83のうちのいずれか1つ以上である、請求項51に記載の方法。
- 前記アルブミンが、ヒト血清アルブミンである、請求項51に記載の方法。
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含むコンジュゲートを含む第2のコンジュゲートを含む組成物と、細胞の集団を接触させることを含み、前記細胞の前記組成物との前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - 前記細胞の前記組成物との前記接触を繰り返すことをさらに含む、請求項69の方法。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項69に記載の方法。
- 前記細胞が、対象に存在する、請求項69に記載の方法。
- 前記対象が、非ホジキンリンパ腫または関節リウマチを有する、請求項72に記載の方法。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項69に記載の方法。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項74に記載の方法。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項69に記載の方法。
- 前記標的化部分が、Fab’フラグメントである、請求項76に記載の方法。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項77に記載の方法。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項78に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的である、請求項69に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、コイルドコイルを形成する相補的なオリゴペプチドである、請求項69に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号64)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号65)である、請求項69に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記D−アミノ酸オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号66)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のD−アミノ酸オリゴペプチドが、K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号67)である、請求項69に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、配列番号64〜83のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的な配列番号64〜83のうちのいずれか1つ以上である、請求項69に記載の方法。
- 前記アルブミンが、ヒト血清アルブミンである、請求項69に記載の方法。
- (i)標的化部分及びオリゴペプチドを含む第1のコンジュゲート、ならびに(ii)アルブミン及び1つ以上のオリゴペプチドを含む第2のコンジュゲート、を含むキット。
- (i)のコンジュゲート及び(ii)のコンジュゲートを投与するための(iii)使用説明書をさらに含む、請求項86に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートが、合剤化される、請求項86に記載のキット。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項86に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、細胞上に在る、請求項89に記載のキット。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項90に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項90に記載のキット。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項86に記載のキット。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項93に記載のキット。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項94に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的である、請求項86に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチド及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、コイルドコイルを形成する相補的なオリゴペプチドである、請求項86に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号64)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、CYGG K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号65)である、請求項86に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記D−アミノ酸オリゴペプチドが、E VSALEKE VSALEKK NSALEKE VSALEKE VSALEK(配列番号66)であり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のD−アミノ酸オリゴペプチドが、K VSALKEK VSALKEE VSANKEK VSALKEK VSALKE(配列番号67)である、請求項86に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、配列番号64〜83のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的な配列番号64〜83のうちのいずれか1つ以上である、請求項86に記載のキット。
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
(i)標的化部分及び第1のオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、ならびに
(ii)アルブミン及び1つ以上の第2のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートと、細胞の集団を接触させること、を含み、
前記細胞の、前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートとの前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - ステップ(i)及びステップ(ii)を繰り返すことをさらに含む、請求項101記載の方法。
- アポトーシスを誘導する方法であって、前記方法が、
標的化部分及び第1のオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲートならびにアルブミン及び1つ以上の第2のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲートを含む組成物と、細胞の集団を接触させることを含み、前記細胞の前記組成物との前記接触が、前記細胞のアポトーシスを誘導する、前記方法。 - 前記細胞のアポトーシスを確認することをさらに含む、請求項101〜103のいずれか1項に記載の方法。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項101または103に記載の方法。
- 前記細胞が、対象に存在する、請求項101または103に記載の方法。
- 前記対象が、非ホジキンリンパ腫または関節リウマチを有する、請求項106に記載の方法。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項101または103に記載の方法。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項108に記載の方法。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項108に記載の方法。
- 前記標的化部分が、Fab’フラグメントである、請求項110に記載の方法。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項111に記載の方法。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項112に記載の方法。
- 前記第1のオリゴマー化部分及び前記1つ以上の第2のオリゴマー化部分が、相補的である、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、モルフォリノまたはオリゴペプチドである、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、ホスホジエステルオリゴヌクレオチドである、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、ホスホロチオアートオリゴヌクレオチドである、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、ペプチド核酸である、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、2’−O−メチルホスホジエステルオリゴヌクレオチドである、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1及び第2のオリゴマー化部分が、ロックオリゴヌクレオチドである、請求項101または103に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、配列番号1〜52のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的な配列番号1〜52のうちのいずれか1つ以上である、請求項115に記載の方法。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、配列番号64〜83のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的な配列番号64〜83のうちのいずれか1つ以上である、請求項115に記載の方法。
- 前記アルブミンが、ヒト血清アルブミンである、請求項101または103に記載の方法。
- (i)標的化部分及び第1のオリゴマー化部分を含む第1のコンジュゲート、ならびに(ii)アルブミン及び1つ以上の第2のオリゴマー化部分を含む第2のコンジュゲート、を含むキット。
- (i)のコンジュゲート及び(ii)のコンジュゲートを投与するための(iii)使用説明書をさらに含む、請求項124に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲート及び前記第2のコンジュゲートが、合剤化される、請求項124に記載のキット。
- 前記標的化部分が、内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子に特異的である、請求項124に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、細胞上に在る、請求項127に記載のキット。
- 前記細胞が、B細胞である、請求項128に記載のキット。
- 前記内在化しない細胞表面分子または徐々に内在化する細胞表面分子が、CD20受容体、C型タンパク質チロシンホスファターゼ受容体、細胞表面デス受容体、前立腺幹細胞抗原受容体、または腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーに属する受容体である、請求項128に記載のキット。
- 前記標的化部分が、多糖、ペプチドリガンド、アプタマー、Fab’フラグメント、または一本鎖可変フラグメントである、請求項124に記載のキット。
- 前記Fab’フラグメントが、抗CD20受容体抗体に由来する、請求項131に記載のキット。
- 前記抗CD20受容体抗体が、1F5、リツキシマブ、トシツモマブ、イブリツモマブ、オファツムマブ、ベルツズマブ、オクレリズマブ、オカラツズマブ、オビヌツズマブ、PRO131921、BCD−020、IBI−301、ウブリツキシマブ、またはBLX−301である、請求項132に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノ及び前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的である、請求項124に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記モルフォリノが、配列番号1〜52のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のモルフォリノが、相補的な配列番号1〜52のうちのいずれか1つ以上である、請求項124に記載のキット。
- 前記第1のコンジュゲートの前記オリゴペプチドが、配列番号64〜83のいずれか1つであり、且つ前記第2のコンジュゲートの前記1つ以上のオリゴペプチドが、相補的な配列番号64〜83のうちのいずれか1つ以上である、請求項124に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662350462P | 2016-06-15 | 2016-06-15 | |
US62/350,462 | 2016-06-15 | ||
PCT/US2017/037736 WO2017218813A1 (en) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | Compositions and methods for using albumin-based nanomedicines |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019519610A true JP2019519610A (ja) | 2019-07-11 |
JP2019519610A5 JP2019519610A5 (ja) | 2020-07-30 |
JP7069135B2 JP7069135B2 (ja) | 2022-05-17 |
Family
ID=60663373
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019518170A Active JP7069135B2 (ja) | 2016-06-15 | 2017-06-15 | アルブミンベースのナノ医薬品を使用するための組成物及び方法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10925973B2 (ja) |
EP (1) | EP3471740A4 (ja) |
JP (1) | JP7069135B2 (ja) |
WO (1) | WO2017218813A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108794581B (zh) * | 2018-06-26 | 2021-09-10 | 江苏大学 | 一种靶向结合淋巴癌细胞系的特异性d型多肽及其应用 |
CN113518623A (zh) * | 2019-01-22 | 2021-10-19 | 科罗生物公司 | Rna编辑的寡核苷酸及其用途 |
US11479575B2 (en) | 2019-01-22 | 2022-10-25 | Korro Bio, Inc. | RNA-editing oligonucleotides and uses thereof |
KR102613348B1 (ko) * | 2020-01-07 | 2023-12-13 | 에이치케이이노엔 주식회사 | 알부민 및 코일드코일 형성 도메인이 연결된 융합단백질, 및 이를 이용한 이중 표적 결합체 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20160015732A1 (en) * | 2013-03-12 | 2016-01-21 | University Of Utah Research Foundation | Compositions and methods for inducing apoptosis |
Family Cites Families (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5506337A (en) | 1985-03-15 | 1996-04-09 | Antivirals Inc. | Morpholino-subunit combinatorial library and method |
US5217866A (en) | 1985-03-15 | 1993-06-08 | Anti-Gene Development Group | Polynucleotide assay reagent and method |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US5521063A (en) | 1985-03-15 | 1996-05-28 | Antivirals Inc. | Polynucleotide reagent containing chiral subunits and methods of use |
US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
DE3650699T2 (de) | 1985-03-15 | 1999-04-15 | Antivirals Inc | Immunotestmittel für Polynukleotid und Verfahren |
US5731424A (en) | 1990-06-11 | 1998-03-24 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity TGFβ nucleic acid ligands and inhibitors |
US5476766A (en) | 1990-06-11 | 1995-12-19 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Ligands of thrombin |
US5846713A (en) | 1990-06-11 | 1998-12-08 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity HKGF nucleic acid ligands and inhibitors |
US5861254A (en) | 1997-01-31 | 1999-01-19 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Flow cell SELEX |
US5795721A (en) | 1990-06-11 | 1998-08-18 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands of ICP4 |
US6030776A (en) | 1990-06-11 | 2000-02-29 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Parallel SELEX |
US5864026A (en) | 1990-06-11 | 1999-01-26 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: tissue selex |
US5660985A (en) | 1990-06-11 | 1997-08-26 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands containing modified nucleotides |
US6001988A (en) | 1990-06-11 | 1999-12-14 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands to lectins |
US5503978A (en) | 1990-06-11 | 1996-04-02 | University Research Corporation | Method for identification of high affinity DNA ligands of HIV-1 reverse transcriptase |
US5780228A (en) | 1990-06-11 | 1998-07-14 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands to lectins |
US5869641A (en) | 1990-06-11 | 1999-02-09 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands of CD4 |
US5723289A (en) | 1990-06-11 | 1998-03-03 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Parallel selex |
US6011020A (en) | 1990-06-11 | 2000-01-04 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid ligand complexes |
US6028186A (en) | 1991-06-10 | 2000-02-22 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | High affinity nucleic acid ligands of cytokines |
US5631146A (en) | 1995-01-19 | 1997-05-20 | The General Hospital Corporation | DNA aptamers and catalysts that bind adenosine or adenosine-5'-phosphates and methods for isolation thereof |
US6013443A (en) | 1995-05-03 | 2000-01-11 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: tissue SELEX |
WO1996041010A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid ligands that bind to and inhibit dna polymerases |
US5792613A (en) | 1996-06-12 | 1998-08-11 | The Curators Of The University Of Missouri | Method for obtaining RNA aptamers based on shape selection |
US6051698A (en) | 1997-06-06 | 2000-04-18 | Janjic; Nebojsa | Vascular endothelial growth factor (VEGF) nucleic acid ligand complexes |
US20070010014A1 (en) | 2005-07-06 | 2007-01-11 | General Electric Company | Compositions and methods for enhanced delivery to target sites |
WO2011124718A1 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Novozymes A/S | Albumin derivatives and variants |
-
2017
- 2017-06-15 WO PCT/US2017/037736 patent/WO2017218813A1/en unknown
- 2017-06-15 US US16/310,754 patent/US10925973B2/en active Active
- 2017-06-15 JP JP2019518170A patent/JP7069135B2/ja active Active
- 2017-06-15 EP EP17814117.2A patent/EP3471740A4/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20160015732A1 (en) * | 2013-03-12 | 2016-01-21 | University Of Utah Research Foundation | Compositions and methods for inducing apoptosis |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
BIOMATERIALS, vol. 34, JPN6021023824, 2013, pages 7939 - 7949, ISSN: 0004535383 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2017218813A1 (en) | 2017-12-21 |
EP3471740A1 (en) | 2019-04-24 |
US20190175751A1 (en) | 2019-06-13 |
JP7069135B2 (ja) | 2022-05-17 |
US10925973B2 (en) | 2021-02-23 |
EP3471740A4 (en) | 2020-03-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101990341B1 (ko) | 세포 내재화를 유도하기 위한 cd20-결합 면역독소 및 이의 사용 방법 | |
Wu et al. | Coiled-coil based drug-free macromolecular therapeutics: in vivo efficacy | |
TWI771316B (zh) | 條件性活性多肽及產生其之方法 | |
Chu et al. | Drug-free macromolecular therapeutics–a new paradigm in polymeric nanomedicines | |
JP7069135B2 (ja) | アルブミンベースのナノ医薬品を使用するための組成物及び方法 | |
JP6814824B2 (ja) | アポトーシスを誘導するための組成物及び方法 | |
Zhang et al. | Human Serum Albumin‐Based Drug‐Free Macromolecular Therapeutics: Apoptosis Induction by Coiled‐Coil‐Mediated Cross‐Linking of CD20 Antigens on Lymphoma B Cell Surface | |
WO2021234110A1 (en) | Single domain antibodies and their use in cancer therapies | |
US20230065416A1 (en) | Clathrin-chimetic antibody receptor constructs for immune cell activation therapy in vivo | |
KR102177339B1 (ko) | 경구용 유전자 전달체 및 이의 용도 | |
KR20230144961A (ko) | Itgb2 매개 약물전달체 | |
Chu | Drug-free macromolecular therapeutics for treatment of B-cell malignancies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200615 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200615 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210624 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210922 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211122 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220404 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220502 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7069135 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |