JPWO2011093459A1 - ヒトsCD14−STの分析方法 - Google Patents
ヒトsCD14−STの分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2011093459A1 JPWO2011093459A1 JP2011551936A JP2011551936A JPWO2011093459A1 JP WO2011093459 A1 JPWO2011093459 A1 JP WO2011093459A1 JP 2011551936 A JP2011551936 A JP 2011551936A JP 2011551936 A JP2011551936 A JP 2011551936A JP WO2011093459 A1 JPWO2011093459 A1 JP WO2011093459A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hours
- sample
- whole blood
- human scd14
- scd14
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 94
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 94
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 30
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 15
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 15
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 75
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 15
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 9
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 8
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 6
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 6
- 108010031801 Lipopolysaccharide Receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000005482 Lipopolysaccharide Receptors Human genes 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000012767 chemiluminescent enzyme immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 2
- UKWLRLAKGMZXJC-QIECWBMSSA-L disodium;[4-chloro-3-[(3r,5s)-1-chloro-3'-methoxyspiro[adamantane-4,4'-dioxetane]-3'-yl]phenyl] phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].O1OC2([C@@H]3CC4C[C@H]2CC(Cl)(C4)C3)C1(OC)C1=CC(OP([O-])([O-])=O)=CC=C1Cl UKWLRLAKGMZXJC-QIECWBMSSA-L 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NHCPCLJZRSIDHS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- QTAIIXQCOPUNBQ-QXEWZRGKSA-N Arg-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QTAIIXQCOPUNBQ-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- ZKAOJVJQGVUIIU-GUBZILKMSA-N Asp-Pro-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ZKAOJVJQGVUIIU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N Asp-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ITGFVUYOLWBPQW-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- 238000011546 CRP measurement Methods 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- WTJIWXMJESRHMM-XDTLVQLUSA-N Gln-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTJIWXMJESRHMM-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HLYCMRDRWGSTPZ-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Cys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O HLYCMRDRWGSTPZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N Thr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O ZESGVALRVJIVLZ-VFCFLDTKSA-N 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 238000011086 high cleaning Methods 0.000 description 1
- 102000046699 human CD14 Human genes 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/566—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using specific carrier or receptor proteins as ligand binding reagents where possible specific carrier or receptor proteins are classified with their target compounds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/26—Infectious diseases, e.g. generalised sepsis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
なお、本明細書における「分析」には、分析対象物質であるヒトsCD14−STの存在の有無を判定する「検出」と、分析対象物質の量を定量的又は半定量的に決定する「測定」とが含まれる。
このように、特許文献1には、血清検体の凍結融解や長時間室温放置で測定結果を誤る場合を想定しているが、一般的な検体保管条件に関する内容であって特段な取り扱いを喚起する記載はない。特許文献1は、むしろ、ヒトsCD14−STが生体内血清中で安定であることを開示するものである。
本発明は、このような状況下に鑑みてなされたものであり、全血検体を用いた場合でも、ヒトsCD14−STを正確に測定することのできる分析方法を提供することを課題とするものである。
1)非還元条件下SDS−PAGEでは、分子量13±2kDa、
2)N末端配列に配列番号1のアミノ酸配列を有する、及び
3)配列番号2に記載の16アミノ酸残基からなるペプチドを抗原として作製した抗体に特異的に結合する。
Thr Thr Pro Glu Pro Cys Glu Leu Asp Asp Glu
1 5 10
配列番号2:
Arg Val Asp Ala Asp Ala Asp Pro Arg Gln Tyr Ala Asp Thr Val Lys
1 5 10 15
例えば、特許第4040666号明細書には、ヒトsCD14−STの測定方法、より具体的には、配列番号2に記載の16アミノ酸残基からなるペプチド(特許第4040666号明細書に記載のS68ペプチド)を抗原として作製したポリクローナル抗体(S68抗体)、モノクローナル抗体(F1146−17−2抗体)と、抗CD14抗原モノクローナル抗体(例えば、F1031−8−3抗体、F1106−13−3抗体等)との組合せを用いたサンドイッチEIA系[特許第4040666号明細書の実施例7−(1)]が開示されており、本発明の分析方法に適用することができる。
また、後述の実施例では、検体中のヒトsCD14−STと抗sCD14−STマウスモノクローナル抗体(F1106−13−3抗体)感作磁性ラテックス及びALP(アルカリフォスファターゼ)標識抗sCD14−STウサギポリクローナル抗体(S68抗体)を結合させ、過剰のALP標識抗sCD14−STウサギポリクローナル抗体を除去した後、抗原抗体反応により形成された免疫複合体のALP酵素活性を、発光基質(CDP−Star;トロピックス社製)を用いた化学発光酵素免疫測定法(CLEIA;Chemiluminescent Enzyme Immunoassay)により測定し、検体中のヒトsCD14−ST濃度を求める方法を使用している。
採血管により採取した全血検体は、数回の転倒混和等で撹拌した後、そのまま測定に使用することもできるし、血漿分離して使用することもできる。血漿分離して使用するとは、遠心分離によって血漿と血球を2層に分けた状態で血漿成分を使用する場合と、さらに血漿成分のみを分注して使用する場合を含む。本発明の分析方法では、被検試料として全血検体を使用するが、採血後保存期間の終了後、血漿分離して使用する場合も、「全血検体を使用する」態様に含まれる。また、本実施例を含む本発明者の知見から、全血検体中のヒトsCD14−STを測定する場合、時間経過により測定値が変動することがあり、検体を調製する際や輸送する際の過度な物理的衝撃が測定値に影響を与える要因となる場合がある。
さらに具体的には、EDTA採血管により全血検体を採取した場合には6時間以内に分析を実施することが好ましく、ヘパリン採血管により全血検体を採取した場合には4時間以内に分析を実施することが好ましい。
後述の実施例で具体的データを示すように、血漿検体又は血清検体においては測定値に変化が認められない、採血から6〜8時間後の測定であっても、健常人の全血検体においてヒトsCD14−STの測定値の上昇が認められた。健常人と敗血症患者の間では、ヒトsCD14−ST測定値は50倍の差が認められることが知られており、健常人血中におけるヒトsCD14−ST濃度は極めて低い。このことにより、適切なカットオフ値を設定することで、高い感度および特異性で敗血症を診断することが可能となる(特許文献1の実施例12)。しかし、全血検体において、健常人のヒトsCD14−ST測定値が時間経過とともに上昇した場合、測定時間によって、カットオフ値より低値か高値かの判断に違いが生じてしまう可能性がある。このような状況下、本発明者らは全血検体においても検体を採取してから6時間以内(好ましくは4時間以内)であればヒトsCD14−STの測定値が変動しないことを見出したものであり、本発明の分析方法では、全血検体の採取から6時間以内に分析を実施するため、測定値上昇の影響を受けることなく、正確なヒトsCD14−STの測定を行うことができる。
ヒトsCD14−STを測定するための各検体は、ヒトsCD14−ST測定用の試薬を用いて測定した。この試薬は、第1抗体溶液として抗sCD14−STマウスモノクローナル抗体(F1106−13−3抗体;特許第4040666号明細書)感作磁性ラテックス溶液、第2抗体溶液としてALP(アルカリフォスファターゼ)標識抗sCD14−STウサギポリクローナル抗体(S68抗体)溶液、B/F分離用洗浄液、基質溶液等よりなり、後述の自動免疫発光測定装置に収載されるようにカートリッジに封入されている。
測定には、特許第3115501号公報等に開示されているものと同様の磁性粒子を用いた免疫測定を自動的に行うことのできる自動免疫発光測定装置(パスファースト;三菱化学メディエンス社製)を用いた。該装置は、液体の吸引・吐出ラインとして配設されたチップ内で磁力により効果的にB/F分離を行うことができ、高い洗浄効率を示す。該装置の測定ステップは下記のとおりである。
なお、基質としては、化学発光基質「CDP−Star」(トロピックス社製)を用い、光電子増倍管(PMT)により検出される発光カウントを測定結果とした。
以下、通常の運転方法に従い、各操作が行われる。
(1)希釈液を用いて任意の希釈倍率に調整された試料溶液、磁性粒子溶液、および、第2抗体溶液を混合し、抗原抗体反応を行わせて免疫複合体を生成させる。
(2)未反応の物質を除去するためにB/F分離を行う。まず、液体吸引ラインとしてセットされたチップを通じて反応液を吸引し、磁石をチップ外壁面に接触させて磁性粒子を捕集する。次に、磁性粒子がチップ内壁面に吸着保持された状態で溶液を吐出して分離を行った後、別の反応容器に充填されたB/F分離用の洗浄液を吸引・吐出して洗浄を行う。
(3)前記チップの外壁面から磁石を離脱させて磁力の影響をなくした後に、基質溶液を吸引・吐出し、チップ内壁面に吸着保持された磁性粒子を分散させ、酵素反応を行わせる。
(4)PMTにより発光量を測定する。
全血検体、血清検体、血漿検体について、室温で所定時間静置保存した後、実施例1の測定方法に従って、ヒトsCD14−STの測定を実施した。
具体的には、抗凝固剤(ヘパリン又はEDTA)を含む採血管を用いて健常人3人から採取した全血検体、血漿検体、血清検体を、室温で0時間、1時間、2時間、3時間、4時間、5時間、6時間、8時間、もしくは10時間(全血検体及び血漿検体のみ)静置保存し、その都度、測定を行うことで各検体の測定値経時変化を確認した。血清検体としては、プレイン採血管(テルモ社製)で採取した後、遠心し血清分離した試料を用いて行った。EDTA血漿検体はEDTA採血管(テルモ社製)を使用し、ヘパリン血漿検体はヘパリン採血管(テルモ社製)を使用して調製した。全血検体については上記の採血管で採取した後、血漿分離せずにそのまま使用した。
なお、データは示さないが、全血検体に過度な物理的衝撃、例えば、撹拌操作を実施すると、顕著な測定値の上昇が認められた。
血清検体の結果を図7に示す。同条件で静置保存していた血清検体の測定値には変化が見られなかった。
また、データは示さないが、血清検体および血漿検体の測定値は、少なくとも24時間まで室温静置した場合についても、充分な安定性を示すことを確認した。
全血検体の測定値の不安定性が何に由来しているものなのか検討した。
条件1:全血検体
条件2:全血検体を室温で各時間静置保存し、測定前に血漿分離を行った血漿
条件3:血漿検体
検体の調製方法及び測定方法は、いずれもヘパリン採血管を使用して実施例2に従った。結果を図8に示す。実施例1と同じように、全血検体(条件1)は4時間以降測定値の上昇が認められるものの、血漿検体(条件3)は8時間まで安定であった。一方、条件2で各時間保存した全血検体から分離した血漿検体は、全血検体(条件1)と同様に測定値の上昇が認められた。
以上より測定値の上昇は、血漿成分由来ではなく血球成分由来であることが示唆された。全血検体を採取後4時間以内にそのまま測定する必要があるのに加え、全血検体を採取後4時間以内に血漿分離しなければ、分離後の測定値の上昇が認められることから、正確な測定値を得るためには採取後4時間以内に血漿分離が必要であることがわかった。
健常人3人から抗凝固剤(ヘパリン又はEDTA)を含む採血管を用いて全血検体を採取し、室温で0時間、2時間、4時間、8時間静置保存し、その都度、市販のCRP測定試薬(PATHFAST hs CRP測定試薬;三菱化学メディエンス社製)を用いて、測定値経時変化を確認した。検体の調製方法及び測定方法は、試薬がCRP測定試薬であることを除き実施例2と同様に行った。
結果を図9(ヘパリン採血管)及び図10(EDTA採血管)に示す。実施例2のヒトsCD14−STの場合のように、採血後4時間以降に測定値が上昇するような傾向はなく、CRPは全血検体中で安定であることが確認された。
以上、本発明を特定の態様に沿って説明したが、当業者に自明の変形や改良は本発明の範囲に含まれる。
Claims (4)
- 全血検体の採取から6時間以内に前記検体中のヒトsCD14−STを分析することを特徴とする、ヒトsCD14−STの分析方法。
- 全血検体の採取から4時間以内に前記検体中のヒトsCD14−STを分析する、請求項1に記載のヒトsCD14−STの分析方法。
- 全血検体のまま分析を実施する、請求項1又は2に記載のヒトsCD14−STの分析方法。
- 全血検体の採取を、ヘパリン採血管又はEDTA採血管を使用して実施する、請求項1〜3のいずれか一項に記載のヒトsCD14−STの分析方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2011551936A JP5789520B2 (ja) | 2010-01-29 | 2011-01-28 | ヒトsCD14−STの分析方法 |
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010018340 | 2010-01-29 | ||
JP2010018340 | 2010-01-29 | ||
PCT/JP2011/051778 WO2011093459A1 (ja) | 2010-01-29 | 2011-01-28 | ヒトsCD14-STの分析方法 |
JP2011551936A JP5789520B2 (ja) | 2010-01-29 | 2011-01-28 | ヒトsCD14−STの分析方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2011093459A1 true JPWO2011093459A1 (ja) | 2013-06-06 |
JP5789520B2 JP5789520B2 (ja) | 2015-10-07 |
Family
ID=44319438
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011551936A Active JP5789520B2 (ja) | 2010-01-29 | 2011-01-28 | ヒトsCD14−STの分析方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20120309025A1 (ja) |
EP (1) | EP2530468B8 (ja) |
JP (1) | JP5789520B2 (ja) |
KR (1) | KR101904497B1 (ja) |
CN (1) | CN102713636B (ja) |
ES (1) | ES2693098T3 (ja) |
WO (1) | WO2011093459A1 (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2578160T3 (es) | 2011-08-12 | 2016-07-21 | Lsi Medience Corporation | Procedimiento de diagnóstico de infecciones de sitio quirúrgico |
ES2623879T3 (es) * | 2012-12-28 | 2017-07-12 | Lsi Medience Corporation | Uso de sCD14, sus fragmentos o sus derivados para la estratificación, diagnóstico y pronóstico del riesgo |
CN106255751B (zh) * | 2014-02-26 | 2020-04-10 | 持田制药株式会社 | 新的抗普莱晒谱星抗体 |
CA2996395A1 (en) | 2015-08-25 | 2017-03-02 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Specifically purified anti-presepsin antibody |
EP3649474A1 (en) * | 2017-07-03 | 2020-05-13 | Abbott Laboratories | Improved methods for measuring ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 levels in blood |
JP7288428B2 (ja) * | 2018-02-27 | 2023-06-07 | 持田製薬株式会社 | プレセプシン測定に有用な抗cd14抗体の使用 |
CN113939314B (zh) * | 2019-11-19 | 2022-09-30 | 武汉全景生物技术有限公司 | 新的抗可溶性cd14亚型抗体及其应用 |
CN112129952B (zh) * | 2020-09-21 | 2023-06-06 | 普健生物(武汉)科技有限公司 | 一种检测人可溶性cd14的化学发光试剂盒 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6071961A (ja) | 1983-09-28 | 1985-04-23 | Hioki Denki Kk | 時間軸レンジ自動設定波形観測装置 |
JP3115501B2 (ja) | 1994-06-15 | 2000-12-11 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | 分注機を利用した磁性体の脱着制御方法及びこの方法によって処理される各種装置 |
CN100451651C (zh) * | 2001-03-09 | 2009-01-14 | 株式会社三菱化学药得论 | 测试全血的方法 |
US6984503B1 (en) | 2002-06-27 | 2006-01-10 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Agriculture | Use of recombinant bovine CD14 in the treatment and prevention of coliform mastitis in dairy cows |
US7608684B2 (en) * | 2002-11-12 | 2009-10-27 | Mochida Pharmaceuticals Co., Ltd. | Soluble CD14 antigen |
EP1746104B1 (en) * | 2004-05-11 | 2013-03-20 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel soluble cd14 antigen |
US7776583B2 (en) | 2004-06-03 | 2010-08-17 | Meso Scale Technologies, Llc | Methods and apparatuses for conducting assays |
EP1889908A4 (en) * | 2005-06-03 | 2012-04-25 | Mochida Pharm Co Ltd | PROTEIN FUSED WITH ANTI-CD14 ANTIBODY |
US9476872B2 (en) * | 2008-05-23 | 2016-10-25 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd | Method for evaluation of function of phagocyte |
-
2011
- 2011-01-28 KR KR1020127022082A patent/KR101904497B1/ko active IP Right Grant
- 2011-01-28 CN CN201180007385.9A patent/CN102713636B/zh active Active
- 2011-01-28 JP JP2011551936A patent/JP5789520B2/ja active Active
- 2011-01-28 ES ES11737169.0T patent/ES2693098T3/es active Active
- 2011-01-28 EP EP11737169.0A patent/EP2530468B8/en active Active
- 2011-01-28 US US13/575,604 patent/US20120309025A1/en active Pending
- 2011-01-28 WO PCT/JP2011/051778 patent/WO2011093459A1/ja active Application Filing
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2530468A1 (en) | 2012-12-05 |
WO2011093459A1 (ja) | 2011-08-04 |
EP2530468B1 (en) | 2018-08-01 |
US20120309025A1 (en) | 2012-12-06 |
ES2693098T3 (es) | 2018-12-07 |
CN102713636B (zh) | 2015-06-17 |
JP5789520B2 (ja) | 2015-10-07 |
EP2530468B8 (en) | 2018-10-17 |
KR20120129924A (ko) | 2012-11-28 |
KR101904497B1 (ko) | 2018-10-04 |
CN102713636A (zh) | 2012-10-03 |
EP2530468A4 (en) | 2013-08-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5789520B2 (ja) | ヒトsCD14−STの分析方法 | |
JP6169619B2 (ja) | 細菌感染または細菌とウイルスの同時感染を検出するためのキット | |
CN101825627B (zh) | 心力衰竭的生物标志物的联合并行检测方法及诊断试剂盒 | |
CN102507918B (zh) | 抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒 | |
Qi et al. | Determining the concentration of procalcitonin using a magnetic particles-based chemiluminescence assay for the clinical diagnosis of sepsis | |
JP6901719B2 (ja) | 検査方法及び肝内胆管がん用検査試薬 | |
KR102228440B1 (ko) | 황산화 다당류를 이용한 면역학적 측정법 | |
CN117434276A (zh) | 一种thsd7a抗体检测试剂盒及其用途 | |
CN109633163B (zh) | 降钙素原/c反应蛋白二合一检测试剂盒 | |
CN115902240A (zh) | 一种抗磷脂抗体谱检测试剂盒及其应用 | |
CN111239403B (zh) | 一种β2微球蛋白胶乳增强免疫比浊试剂盒及应用 | |
CN110687285B (zh) | 诊断试剂盒及mak16在制备系统性红斑狼疮早期诊断试剂中的应用 | |
WO2015032414A2 (en) | Methods and tools for predicting liver fibrosis | |
JP4567326B2 (ja) | 全血を用いる測定法 | |
Slavik et al. | The advantages and limitations of impedance aggregometry in detection of heparin-induced thrombocytopenia | |
CN108241052A (zh) | 一种检测结核抗体的多重液相芯片 | |
JP2010286375A (ja) | 重症薬疹易罹患性診断用マーカー、重症薬疹易罹患性の診断方法および重症薬疹易罹患性診断用キット | |
Yi et al. | Determination of C-reactive protein concentration in serum based on chemiluminescence analysis | |
JP5716501B2 (ja) | 検体の前処理方法 | |
US11231422B2 (en) | Methods and kits for predicting the risk of having or developping hepatocellular carcinoma in patients suffering from cirrhosis | |
JP5500423B2 (ja) | アレルギー検査方法 | |
WO2021231391A1 (en) | Laboratory-based assessment of covid infection | |
Kim et al. | Common in vitro tests for allergy and immunology. | |
JP2006105910A (ja) | 標的物質の測定方法および測定試薬 | |
EP3882631A1 (en) | Method for suppressing abnormal detection in immunoassay by automatic analysis device, and immunoassay reagent |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20131205 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20141216 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150707 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150803 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5789520 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |