JPWO2004096785A1

JPWO2004096785A1 - （２ｓ，３ｓ）−３−［［（１ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸の塩

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Publication number: JPWO2004096785A1
Application number: JP2005505862A
Authority: JP
Inventors: 天童　温; 温天童; 高橋　俊弘; 俊弘高橋; 山川　富雄; 富雄山川; 一喜岡井; 進二橋
Original assignee: Nippon Chemiphar Co Ltd
Current assignee: Nippon Chemiphar Co Ltd
Priority date: 2003-04-25
Filing date: 2004-04-22
Publication date: 2006-07-13
Anticipated expiration: 2024-04-22
Also published as: US20060252826A1; EP1619190A4; CN1809549A; CA2523233C; KR101070587B1; ATE493393T1; DE602004030780D1; US7795458B2; ES2358669T3; KR101124180B1; US8163942B2; CA2523233A1; US7585988B2; AU2011201257B2; KR20060004960A; US20090312563A1; US20110003993A1; EP1619190B1; CN100506811C; AU2011201257A1

Abstract

本発明は（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（以下、カルボン酸という）とピペラジン、アダマンタンアミン類等から選ばれる有機アミンとの塩を用いて前記カルボン酸を精製すること並びに下記の物性を有する医薬品原料として使用できる保存安定性が向上した前記カルボン酸のナトリウム塩の結晶を提供することに関する。ＤＳＣ：１７０〜１７５℃に減量を伴う発熱ピーク赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：３２５５，２９５０，２８６０，１６７０，１６３０，１５５０，１４６０，１４３５，１３９５，１３６５，１３１０，１２６０，１１１０，８９０ｃｍ−１

Description

本発明は、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸の塩に関する。

次式、

で表される（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩（以下、化合物Ａと略す。）はカテプシン阻害作用を有し、慢性関節リウマチ、骨粗鬆症の治療薬等として有用である。（国際公開第９９／１１６４０号パンフレット（以下、特許文献１という）参照）
ところで、特許文献１では、化合物Ａを次の反応スキームで得ている。（特許文献１の実施例４８参照）

ここで化合物Ａの精製法としては、上記反応スキームの出発原料であるエステル体の段階でのカラムクロマトグラフィの使用が一般的である。

非晶質状態の化合物Ａは吸湿性が強く、熱安定性が悪いことから、製剤化における様々なトラブルが予想され、医薬品の原料としては扱いにくいものである。そこで長期保存に耐え、熱安定性の良い結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸塩を提供することが望まれている。
ところで結晶質の化合物Ａを得る方法として、化合物Ａのフリー体から化合物Ａへの通常の塩化操作や再結晶法を用いた場合、濾過性の悪い細かな結晶が析出したり、場合により寒天状物が析出することがある。また化合物Ａは吸湿性が強く、結晶を濾取する際、空気中の水分により結晶が非晶質状態に変化し、濾過性が低下するという問題がある。
一方、化合物Ａを工業的規模で製造する際、カラムクロマトグラフィの使用は煩雑であり、より簡便な方法で、化合物Ａを精製する方法を提供することも望まれている。
そこで化合物Ａを工業的規模で製造する際に、化合物Ａの遊離酸の精製が重要な課題となる。すなわち後述する有機アミン塩にした後、化合物Ａの遊離酸を得ることは極めて簡便で工業的に有利な方法となる。また、化合物Ａのエステル体を塩基性のナトリウム又はカリウム化合物で加水分解し、直接化合物Ａのナトリウム塩またはカリウム塩に導くことは更に簡便且つ有利な方法となる。
従って本発明の目的は長期保存に耐え、熱安定性に優れた結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム又はカリウム塩を提供すること、並びに工業的に有利に且つ簡便に前記結晶を得る方法を提供すること及びその製造の際、使用される有機アミンとの塩を提供することにある。
本発明は下記の物性を有する（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩の結晶に関する。
ＤＳＣ：１７０〜１７５℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：
３２５５，２９５０，２８６０，１６７０，１６３０，１５５０，１４６０，１４３５，１３９５，１３６５，１３１０，１２６０，１１１０，８９０ｃｍ^−１
また本発明は下記の物性を有する（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩の結晶に関する。
ＤＳＣ：１７７℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：
３２７０，３０８０，２９５０，２８７０，１６８０，１６２５，１５６０，１４６０，１３８０，１３００，１２４０，１１１０，８９５ｃｍ^−１
また本発明は下記の（１）〜（６）の工程による（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム又はカリウム塩の結晶の製造方法に関する。
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のエステル体を加水分解反応に付し、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸を得る。
（２）前記工程で得られたカルボン酸と有機アミンとを反応させ（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と有機アミンとの塩を得る。
（３）前記工程で得られた塩に酸を加え、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸を得る。
（４）前記工程で得られたカルボン酸に脂肪族アルコール又はアセトンと水との混合溶媒中で、塩基性のナトリウム化合物又はカリウム化合物を反応させ、ナトリウム又はカリウム塩を得る。
（５）前記工程で得られたナトリウム塩又はカリウム塩を脂肪族アルコールを用いて再結晶する。
（６）前記工程で得られた再結晶品を減圧乾燥に付す。
また本発明は下記の（１）〜（４）の工程による（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム又はカリウム塩の結晶の製造方法に関する。
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のエステル体に塩基性のナトリウム化合物又はカリウム化合物を作用させ（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム又はカリウム塩を得る。
（２）前記工程で得られたナトリウム又はカリウム塩を用い、アセトンと水の混合溶媒から結晶を得る。
（３）前記工程で得られたナトリウム塩又はカリウム塩の結晶を脂肪族アルコールを用いて再結晶する。
（４）前記工程で得られた再結晶品を減圧乾燥に付す。
また本発明は（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と有機アミンとの塩に関する。
また本発明は（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と次の一般式、
（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）Ｎ
（式中、Ｒ^１は水素原子又は直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基を表し、Ｒ^２は水素原子、直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基、又はアラルキル基を表し、そしてＲ^３は置換基としてハロゲン原子、ニトロ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、グアニジノ基、アミノ基、若しくはアラルキルアミノ基から選ばれる基若しくは原子を有していても良い直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基を表すか、又はＲ^２とＲ^３が一緒になって、Ｒ^２及びＲ^３が結合している窒素原子と共に５〜７員環（さらに環構成原子として別の窒素原子を有していても良い。）を形成していても良い。）で表される有機アミンとの塩に関する。
さらにまた本発明は（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸とピペラジン、アダマンタンアミン類、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、アルギニン、リジン、ベンザチン又はメグルミンから選ばれる有機アミンとの塩に関する。

以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明の結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩又はカリウム塩は以下のフローチャートに従い得ることができる。
＜フローチャート＞
方法１
エステル体（Ａ）→フリー体（Ｂ）→有機アミンとの塩（Ｃ）→フリー体（Ｄ）→Ｎａ塩又はＫ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）→即時乾燥による結晶（Ｇ）
又は
方法２
エステル体（Ａ）→Ｎａ塩又はＫ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）→即時乾燥による結晶（Ｇ）の取得
次に各工程について説明する。
＜方法１＞
▲１▼エステル体（Ａ）→フリー体（Ｂ）の工程
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エステル（Ａ）をメタノール，エタノール又はイソプロピルアルコール等の脂肪族アルコールと水の混合溶液中、水酸化カリウム又は水酸化ナトリウム等塩基の存在下、加水分解反応に付した後、中和することにより（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（フリー体（Ｂ））が得られる。
ここで、原料の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エステルとしては、脂肪族アルコールのエステル体、好ましくは炭素数が１〜６の１級、２級又は３級アルコール、さらに好ましくはエタノール、メタノール、ｎ−プロピルアルコール，イソプロピルアルコールのエステル体が挙げられる。
ここで出発原料であるエステル体は（２Ｓ，３Ｓ）−３−アルコキシカルボニルオキシラン２−カルボン酸と（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチルアミンを通常の縮合法（ＤＣＣ−ＨＯＳｕ法、酸クロリド法、酸無水物法など）に従い合成したものを使用できる。
▲２▼フリー体（Ｂ）→有機アミンとの塩（Ｃ）の工程
▲１▼で得られたフリー体（Ｂ）をメタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の脂肪族アルコール、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル等の脂肪族エーテル、酢酸エチル等の脂肪族エステル、アセトン、エチルメチルケトン等の脂肪族ケトン若しくは水の単独、又はこれらの混合液中で、好ましくは引火性や毒性の観点から酢酸エチル、アセトン若しくは水の単独又はこれらの混合液中で、有機アミンと反応させることで、所望の有機アミンとの塩を得ることができる
ここで、有機アミンとしては、一般式
（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）Ｎ
（式中、Ｒ^１は水素原子又は直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基を表し、Ｒ^２は水素原子、直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基、又はアラルキル基を表し、そしてＲ^３は置換基としてハロゲン原子、ニトロ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、グアニジノ基、アミノ基、若しくはアラルキルアミノ基から選ばれる基若しくは原子を有していても良い直鎖状、分岐状若しくは環状（アダマンチル等の架橋環式炭化水素を含む。）の炭素数１〜１０のアルキル基を表すか、又はＲ^２とＲ^３が一緒になって、Ｒ^２及びＲ^３が結合している窒素原子と共に５〜７員環（さらに環の途中で別の窒素原子で中断されていても良い。）を形成していても良い。）が挙げられ、経済性や毒性、更に結晶性を考慮しピペラジン、アダマンタンアミン類、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、アルギニン（好ましくはＬ体）、リジン（好ましくはＤ又はＤＬ体）、ベンザチン又はメグルミンが好ましい。
なおＤ又はＤＬ−リジン、ベンザチンやメグルミンおよびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの塩はそのまま医薬品として使用可能である。
▲３▼有機アミンとの塩（Ｃ）→フリー体（Ｄ）の工程
▲２▼で得られた有機アミンとの塩（Ｃ）は常法に従い酸（塩酸等）で処理することで、高純度の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（Ｄ）が得られる。このフリー体（Ｄ）は、エステル体（Ａ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製後、加水分解して得られるフリー体やその金属塩で観察される分解物ピーク（９．８分）は観察されなかった。（実施例１４参照）
＜ナトリウム塩の場合＞
▲４▼フリー体（Ｄ）→Ｎａ塩（Ｅ）の工程
ナトリウムソースとして金属ナトリウム、ナトリウムメトキシド若しくはナトリウムエトキシド等のナトリウムアルコキシド、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム等のナトリウム炭酸塩又は有機カルボン酸ナトリウムを用い、フリー体（Ｄ）が溶ける有機溶媒又は含水の有機溶媒中でナトリウム塩化する。
ここで用いられる有機溶媒として引火性や毒性の観点からメタノール、エタノール又はアセトンと水の混合溶媒が好ましい。尚、水の含有度は１〜５％の範囲が高収率をもたらす。
ここで得られた固形物は濾過性がよいので、通常の方法で濾取できる。
▲５▼Ｎａ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）の工程
▲４▼で得られたナトリウム塩の固形物（Ｅ）を室温〜６０℃でメタノール等の脂肪族アルコールに溶解し、有機溶媒を加え結晶を析出させる。用いられる有機溶媒としては引火性や毒性の観点からメタノール、エタノールと酢酸エチルとの混合溶媒が好ましい。尚、混合比は酢酸エチルとアルコールの比が１０対１から５対１の割合が高収率をもたらす。ここで得られた再結晶品（Ｆ）は濾過性がよいので、通常の方法で濾取できる。
▲６▼再結晶品（Ｆ）→即時乾燥による結晶（Ｇ）の取得
▲５▼で得られた再結晶品（Ｆ）を窒素気流中濾取、即時乾燥することで収率良く下記の物性値を有する高純度で、結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩（Ｇ）が得られる。
ＤＳＣ条件（実施例１５と同じ）：１７０〜１７５℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：
３２５５，２９５０，２８６０，１６７０，１６３０，１５５０，１４６０，１４３５，１３９５，１３６５，１３１０，１２６０，１１１０，８９０ｃｍ^−１
なお、性状は白色針状晶が望ましい。
濃縮乾固により得られたもの及び再結晶の後、濾取したものを室温に放置したものとの８０℃３日間の比較安定性試験を行ったところ、本発明のＮａ塩の結晶（実施例９記載）はこれらに比べ優れた保存安定性を示した。（実施例１５参照）
＜カリウム塩の場合＞
▲７▼フリー体（Ｄ）→Ｋ塩（Ｅ）の工程
カリウムソースとして金属カリウム、カリウムメトキシド若しくはカリウムエトキシド等のカリウムアルコキシド、水酸化カリウム、炭酸カリウム等のカリウム炭酸塩又は有機カルボン酸カリウム塩を用い、フリー体（Ｄ）が溶ける有機溶媒又は含水の有機溶媒中でカリウム塩化する。
ここで用いられる有機溶媒として引火性や毒性の観点からメタノール、エタノール又はアセトンと水の混合溶媒が好ましい。尚、水の含有度は１〜５％の範囲が高収率をもたらす。
ここで得られた固形物は濾過性がよいので、通常の方法で濾取できる。
▲８▼Ｋ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）の工程
▲７▼で得られたＫ塩の固形物（Ｅ）を室温〜６０℃でメタノール等の脂肪族アルコールに溶解し、有機溶媒を加え結晶を析出させる。
用いられる有機溶媒として引火性や毒性の観点からメタノール、エタノールと酢酸エチルとの混合溶媒が好ましい。尚、混合比は酢酸エチルとアルコールの比が３０対１から１０対１の割合が高収率をもたらす。ここで得られた再結晶品（Ｆ）は濾過性がよいので、通常の方法で濾取できる。
▲９▼再結晶品（Ｆ）→即時乾燥による結晶（Ｇ）の取得
▲８▼で得られた再結晶品（Ｆ）を窒素気流中濾取、即時乾燥することにより収率良く下記の物性値を有する高純度で結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩（Ｇ）が得られる。
ＤＳＣ条件（実施例１５と同じ）：１７７℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯
３２７０，３０８０，２９５０，２８７０，１６８０，１６２５，１５６０，１４６０，１３８０，１３００，１２４０，１１１０，８９５ｃｍ^−１
なお、性状は白色針状晶が望ましい。
本発明のＫ塩の結晶（実施例１１記載）は８０℃３日間の安定性試験において良好な保存安定性を有することが明らかになった。（実施例１５参照）
＜カルシウム塩、リチウム塩の場合＞
上記の▲４▼〜▲９▼と同様な工程により収率良く高純度の結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カルシウム塩又はリチウム塩が得られる。
＜方法２＞
▲１▼エステル体（Ａ）→Ｎａ塩又はＫ塩（Ｅ）
＜Ｎａ塩（Ｅ）の取得＞
Ｎａ塩（Ｅ）は方法１の▲１▼に記載のエステル体（Ａ）に塩基性のナトリウム化合物（炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなど）を作用させ、加水分解後、反応液を濃縮し、アセトン等の水と混和する有機溶媒を加え、結晶化させることにより得ることができる。尚、水の含有度は１〜５％の範囲が高収率をもたらす。
＜Ｋ塩（Ｅ）の取得＞
同様にＫ塩（Ｅ）もエステル体（Ａ）に塩基性のカリウム化合物（炭酸カリウム、水酸化カリウムなど）を作用させ、加水分解後、反応液を濃縮し、アセトン等の水と混和する有機溶媒を加え、結晶化させることにより得ることができる。尚、水の含有度は１〜５％の範囲が高収率をもたらす。
▲２▼Ｎａ塩又はＫ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）→即時乾燥による結晶（Ｇ）の取得
Ｎａ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）→即時乾燥によるＮａ塩の結晶（Ｇ）の取得の工程は上記方法１の▲５▼▲６▼と同様な方法を用いることができる。
Ｋ塩（Ｅ）→再結晶品（Ｆ）→即時乾燥によるＫ塩の結晶（Ｇ）の取得は上記方法１の▲８▼▲９▼と同様な方法を用いることができる。
上述したように（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸の精製方法として、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と有機アミンとの塩を用いて精製する方法、または、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のエステル体を塩基性のナトリウム又はカリウムの化合物で加水分解し、直接（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩またはカリウム塩に導く方法も、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによるエステル体の精製操作が必要なく、また簡便な操作で精製品を得ることができる工業的に有用な方法である。
また、本発明の結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩又はカリウム塩は長期保存に耐え、熱安定性に優れており医薬品の原料として有用である。
かくして得られた結晶質の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩又はカリウム塩を用いて医薬品製剤を得ることができる。
製剤化するためには、製剤の技術分野における通常の方法で錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、懸濁剤、注射剤、坐薬等の剤型に製造することができる。
これらの調製には、通常の賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、色素、希釈剤などが用いられる。

次に、実施例によって、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

フリー体（Ｂ）の製造
特許文献１記載の方法により合成した粗体の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチルエステル（１６４．５４ｇ）をエタノール（５２０ｍＬ）に溶解し、氷冷下（１０℃以下で）１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（５２２ｍＬ）を滴下し、同温にて１．５時間撹拌した。減圧下エタノールを留去後、水（３４０ｍＬ）を加えセライトで不溶物を濾別し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で２回洗浄した。水層に氷冷下、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液（１１０ｍＬ）を滴下しｐＨを１とし酢酸エチル（３００ｍＬ）で２回抽出した。酢酸エチル層を水（３００ｍＬ）及び飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。減圧下溶媒を留去して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（１３９．６１ｇ；９３．１％）を橙色油状物として得た。ＮＭＲデータは実施例６記載のものと一致した。

有機アミンとの塩（Ｃ）の製造−１
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（１３９．６１ｇ）を酢酸エチル（６３０ｍＬ）に溶解し、氷冷下（１０℃以下で）シクロヘキシルアミン（４８．１９ｇ）と酢酸エチル（１９０ｍＬ）の溶液を加え室温で一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、酢酸エチルにて洗浄後風乾して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のシクロヘキシルアミン塩（１６５．２２ｇ；８８．０％）を白色粉末として得た。本成績体（１．０ｇ）をエタノール／含水酢酸エチルより再結晶して燐ぺん状晶（９２５ｍｇ；９２．５％）を得た。
融点；１２８〜９℃
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；３３１０，２９５０，２８５０，１６６０，１６２０，１５７０，１５４０，１４６０，１４４５，１３８０，１３６０，１３４０，１２９５，１２５０，１２２０，１１２０，９４５，８９０．
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ；
０．９−１．０（１２Ｈ，ｍ），
１．２−１．８（９Ｈ，ｍ），
１．８−１．９（３Ｈ，ｍ），
２．０−２．１（２Ｈ，ｍ），
２．９−３．１（１Ｈ，ｍ），
３．２−３．３（２Ｈ，ｍ），
３．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），
３．３９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ），
３．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．１−４．２（１Ｈ，ｍ），
６．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），
７．７−８．５（１Ｈ，ｂｒｏａｄｓ）．

有機アミンとの塩（Ｃ）の製造−２
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（６．５９ｇ）をジエチルエーテル（６７ｍＬ）に溶解し、室温撹拌下ベンザチン（２．７５ｇ）とジエチルエーテル（１８ｍＬ）の溶液を加えた。析出した油状物をエタノール（６ｍＬ）を加え溶解し、更にジエチルエーテル（８４ｍＬ）を加え氷冷下一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、ジエチルエーテルにて洗浄後、減圧下室温で乾燥して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のベンザチン塩（７．４３ｇ；７９．６％）を白色粉末として得た。本成績体２ｇをエタノールと水より再結晶し燐ぺん状晶のベンザチン塩（１．８ｇ；９０．０％）を得た。
融点；６３℃
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；３４００，３２６０，２９５０，２８５０，１６５０，１４５０，１３８０，１２９５，１２４０，１１１０，８９０，７４０．
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ；
０．９−１．０（１２Ｈ，ｍ），
１．３−１．５（２Ｈ，ｍ），
１．５−１．６（１Ｈ，ｍ），
１．８−１．９（１Ｈ，ｍ），
３．１−３．２（４Ｈ，ｍ），
３．９−４．０（２Ｈ，ｍ），
４．１−４．２（１Ｈ，ｍ），
６．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），
７．３９（５Ｈ，ｓ）．

有機アミンとの塩（Ｃ）の製造−３
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（１．３１ｇ）をアセトン（６ｍＬ）に溶解し、室温撹拌下メグルミン（０．８５ｇ）と水（１．５ｍＬ）の溶液を加え、更にアセトン（１４ｍＬ）を加え室温で一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、アセトンにて洗浄後、風乾、減圧下室温で乾燥して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のメグルミン塩（１．２８ｇ；６１．０％）を白色板状結晶として得た。
融点；９６−８℃
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；３３００，２９５０，１６６０，１６２０，１５９０，１４６０，１３９０，１３０５，１２５０，１１００，１０８０，１０３０，８９０．
ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ） δ；
０．７−０．９（１２Ｈ，ｍ），
１．２−１．４（２Ｈ，ｍ），
１．５−１．６（１Ｈ，ｍ），
１．７−１．８（１Ｈ，ｍ），
２．６９（３Ｈ，ｓ），
３．１−３．６（１５Ｈ，ｍ），
３．７−３．８（３Ｈ，ｍ），
４．０−４．１（２Ｈ，ｍ）．

有機アミンとの塩（Ｃ）の製造−４
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（６６０ｍｇ）をエタノール（３ｍＬ）に溶解し、室温撹拌下ＤＬ−リジン（３３６ｍｇ）と水（１．０ｍＬ）の溶液を加えた。減圧濃縮後、エタノール（１０ｍＬ）を加え室温で一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、エタノールにて洗浄後、風乾、減圧下室温で乾燥して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のＤＬ−リジン塩（７８３ｍｇ；７８．６％）を白色粉末として得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；２９５０，１６４０，１４６０，１３８０，１１１０，８９０．
ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ） δ；
０．７−０．９（１２Ｈ，ｍ），
１．２−１．９（１０Ｈ，ｍ），
２．９３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），
３．２−３．５（６Ｈ，ｍ），
３．６６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），
４．０−４．１（１Ｈ，ｍ）．

フリー体（Ｄ）の製造−１
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のシクロヘキシルアミン塩（１６５．２２ｇ）を水（４００ｍＬ）と酢酸エチル（４００ｍＬ）の混液に懸濁し氷冷下（１０℃以下で）３ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液（１４０ｍＬ）を滴下しｐＨを約３に調整した。酢酸エチル層を分取し、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出し前酢酸エチル層と合わせ、水（２００ｍＬ）及び飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。減圧下溶媒を留去して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（１２２．８３ｇ；９９．９％）を微黄色油状物として得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ；
０．９−１．０（１２Ｈ，ｍ），
１．３−１．６（３Ｈ，ｍ），
１．８−１．９（１Ｈ，ｍ），
３．１−３．３（２Ｈ，ｍ），
３．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ），
３．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），
３．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．１−４．２（１Ｈ，ｍ），
６．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），
９．６０（１Ｈ，ｂｒｏａｄｓ）．

フリー体（Ｄ）の製造−２
実施例６と同様にして、ベンザチン塩、メグルミン塩、ＤＬ−リジン塩などの有機アミン塩から（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸を微黄色油状物として得た。ＮＭＲデータは実施例６記載のものと一致した。

Ｎａ塩（Ｅ）の製造
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（４８．５９ｇ）をアセトン（２４５ｍＬ）に溶解し、炭酸ナトリウム（８．５１ｇ）と水（３２．９ｍＬ）の溶液をゆっくりと加えた。析出した無機塩が溶けるまで室温から５０℃で３時間撹拌した。同温でアセトン（２００ｍＬ）を滴下し、種結晶を加えそのまま３０分間撹拌した。次いでアセトン（５１０ｍＬ）を滴下後、同温にて１時間撹拌し、徐々に室温に戻しながら一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、３％水−アセトン混液（７０ｍＬ）で洗浄後、風乾して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩（４６．１ｇ；８７．９％）を白色固形物として得た。本固形物のＮＭＲは実施例９のデータに一致した。

再結晶品（Ｆ）及び即時乾燥によるＮａ結晶（Ｇ）の製造
実施例８で得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩（２５．１８ｇ）にメタノール（８５ｍＬ）を加え５０℃で溶液とし、同温にて酢酸エチル（１００ｍＬ）を滴下した。これに種結晶を加え同温にて１時間撹拌後、更に酢酸エチル（１５０ｍＬ）を滴下した。次いで同温にて酢酸エチル（１００ｍＬ）、更に酢酸エチル（７５ｍＬ）を滴下後、同温にて１時間撹拌し、徐々に室温に戻しながら一夜撹拌した。析出した結晶を濾取し、窒素気流中酢酸エチル／メタノール＝５／１の混液（４０ｍＬ，２５ｍＬ，２５ｍＬ）でそれぞれ洗浄した。結晶が生乾きの時点でそのまま４０℃で一夜減圧乾燥して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩（２１．１ｇ；８３．９％）を白色針状晶として得た。
融点：１７０〜５℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；３２５５，２９５０，２８６０，１６７０，１６３０，１５５０，１４６０，１４３５，１３９５，１３６５，１３１０，１２６０，１１１０，８９０．
ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ） δ；
０．７−０．９（１２Ｈ，ｍ），
１．２−１．４（２Ｈ，ｍ），
１．５−１．６（１Ｈ，ｍ），
１．７−１．８（１Ｈ，ｍ），
３．１−３．３（２Ｈ，ｍ），
３．３−３．５（４Ｈ，ｍ），
４．０−４．１（１Ｈ，ｍ）．

Ｋ塩（Ｅ）の製造
実施例６又は７で得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸（４．８３ｇ）をアセトン（２３ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（１．１１ｇ）と水（４．５ｍＬ）の溶液をゆっくりと加えた。析出した無機塩が溶けるまで室温で撹拌した。次いで５０℃のバス中でアセトン（１００ｍＬ）を滴下し、種結晶を加えそのまま３０分間撹拌した。次いでアセトン（９４ｍＬ）を滴下後、同温にて１時間撹拌し、徐々に室温に戻しながら一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、２％水−アセトン混液（２０ｍＬ）で洗浄後、風乾して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩（４．２８ｇ；８１．７％）を白色固形物として得た。本固形物のＮＭＲは実施例１１のデータに一致した。

再結晶品（Ｆ）及び即時乾燥によるＫ結晶（Ｇ）の製造
実施例１０で得られた（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩（５００ｍｇ）にメタノール（３．５ｍＬ）を加え溶液とし、５０℃のバス中酢酸エチル（１２ｍＬ）を滴下した。これに種結晶を加え同温にて１時間撹拌後、更に酢酸エチル（２３ｍＬ）を滴下し、同温にて１時間撹拌し、徐々に室温に戻しながら一夜撹拌した。析出した結晶を濾取し、窒素気流中酢酸エチル／メタノール＝１０／１の混液（１０ｍＬ）で洗浄した。結晶が生乾きの時点でそのまま４０℃で一夜減圧乾燥して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩（４４５ｍｇ；８９．０％）を白色針状晶として得た。
融点：１７７℃（分解）
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ^−１；３２７０，３０８０，２９５０，２８７０，１６８０，１６２５，１５６０，１４６０，１３８０，１３００，１２４０，１１１０，８９５．
ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ） δ；
０．８−０．９（１２Ｈ，ｍ），
１．２−１．４（２Ｈ，ｍ），
１．５−１．６（１Ｈ，ｍ），
１．７−１．８（１Ｈ，ｍ），
３．２−３．３（２Ｈ，ｍ），
３．３−３．４（４Ｈ，ｍ），
４．０−４．１（１Ｈ，ｍ）．

Ｎａ塩（Ｅ）の製造（方法２）
特許文献１記載の方法と同様な方法（酸クロリド法）で合成した粗体の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチルエステル（１５．２９ｇ）をエタノール（２４ｍＬ）に溶解し室温撹拌下、炭酸ナトリウム（２．４４ｇ）と水（２４ｍＬ）の溶液を滴下し室温で１時間撹拌後、さらに９０〜９５℃で２時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回洗浄後、減圧下水を留去した。得られた残渣にアセトン（４００ｍＬ）を滴下後、室温で一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、３％水−アセトン混液（３０ｍＬ）次いでアセトン（３０ｍＬ）で洗浄後、風乾して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩（１０．５５ｇ；７０．３％）を白色固形物として得た。本固形物のＮＭＲは実施例９のデータに一致した。

Ｎａ塩（Ｅ）の製造（方法２）
特許文献１記載の方法と同様な方法（酸クロリド法）で合成した粗体の（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エチルエステル（７．８２ｇ）をエタノール（２４ｍＬ）に溶解し氷冷撹拌下、１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（２３．５５ｍＬ）を滴下し同温で１．５時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣に水（３９ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３９ｍＬ）で２回洗浄後、減圧下水を留去した。得られた残渣にアセトン（１５７ｍＬ）を滴下後、室温で一夜撹拌した。析出した結晶を濾取、３％水−アセトン混液（３０ｍＬ）次いでアセトン（３０ｍＬ）で洗浄後、風乾して（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩（５．３６ｇ；６９．９％）を白色固形物として得た。本固形物のＮＭＲは実施例９のデータに一致した。

フリー体（Ｄ）の純度試験
実施例６及び７で得られたフリー体（Ｄ）について、純度試験を行ったところ、フリー体（Ｄ）は、下記に示すＨＰＬＣ条件ではエステル体（Ａ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製後、加水分解して得られるフリー体やその金属塩で観察される分解物ピーク（９．８分）は観察されなかった。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム；ＹＭＣ−Ａ３０２（１５０×４．５ｍｍ）
移動相；ｐＨ３．０の０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素ナトリウム試液／アセトニトリル混液（５：２）
流速；（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸の保持時間が約１３分になるように調整する。
検出器；ＵＶ（２１０ｎｍ）

安定性比較実験
＜試験方法＞
試料（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩又はカリウム塩）１０ｍｇを試験管に計り取り、遮光気密条件下８０℃恒温槽に３日間放置後、ＨＰＬＣにてその残存量を観察した。
＜ＨＰＬＣ条件＞
実施例１４記載の方法と同じ
＜ＤＳＣ示差走査熱量測定条件＞
試料（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム塩又はカリウム塩）及びαアルミナ（基準物質）０．０１ｇをそれぞれ試料容器に充填した後、加熱速度２℃／分で室温から約２００℃まで昇温する。（示差走査熱量天秤：ＴＡＳ１００，ＴＧ−ＤＳＣ型（理学電気株式会社）を使用）
＜結果＞
試験結果を表１に示す。

１）濃縮乾固
２）再結晶・濾過後室温にて放置
３）アモルファス体の方が結晶質より多いと推察している。
表１から実施例９記載のＮａ塩の結晶（即ち、再結晶後、窒素気流中濾取したものを即時乾燥したもの）は濃縮乾固により得られるもの（従来法）や再結晶後、風乾により得られたものに比べ、優れた保存安定性を有することが明らかになった。また同じく表１から実施例１１記載のＫ塩の結晶も優れた保存安定性を有することが明らかになった。

Claims

下記の物性を有する（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム塩の結晶。
ＤＳＣ：１７０〜１７５℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：
３２５５，２９５０，２８６０，１６７０，１６３０，１５５０，１４６０，１４３５，１３９５，１３６５，１３１０，１２６０，１１１０，８９０ｃｍ^−１
下記の物性を有する（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸カリウム塩の結晶。
ＤＳＣ：１７７℃に減量を伴う発熱ピーク
赤外吸収スペクトル（臭化カリウム錠剤法）における特性吸収帯：
３２７０，３０８０，２９５０，２８７０，１６８０，１６２５，１５６０，１４６０，１３８０，１３００，１２４０，１１１０，８９５ｃｍ^−１
下記の（１）〜（６）の工程による（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム又はカリウム塩の結晶の製造方法。
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のエステル体を加水分解反応に付し、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸を得る。
（２）前記工程で得られたカルボン酸と有機アミンとを反応させ（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と有機アミンとの塩を得る。
（３）前記工程で得られた塩に酸を加え、（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸を得る。
（４）前記工程で得られたカルボン酸に脂肪族アルコール又はアセトンと水との混合溶媒中で、塩基性のナトリウム化合物又はカリウム化合物を反応させ、ナトリウム又はカリウム塩を得る。
（５）前記工程で得られたナトリウム塩又はカリウム塩を脂肪族アルコールを用いて再結晶する。
（６）前記工程で得られた再結晶品を減圧乾燥に付す。
下記の（１）〜（４）の工程による（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸ナトリウム又はカリウム塩の結晶の製造方法。
（１）（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸エステルに塩基性のナトリウム化合物又はカリウム化合物を作用させ（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸のナトリウム又はカリウム塩を得る。
（２）前記工程で得られたナトリウム又はカリウム塩を用い、アセトンと水の混合溶媒から結晶を得る。
（３）前記工程で得られたナトリウム塩又はカリウム塩の結晶を脂肪族アルコールを用いて再結晶する。
（４）前記工程で得られた再結晶品を減圧乾燥に付す。
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と有機アミンとの塩。
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸と次の一般式、
（Ｒ^１）（Ｒ^２）（Ｒ^３）Ｎ
（式中、Ｒ^１は水素原子又は直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基を表し、Ｒ^２は水素原子、直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基、又はアラルキル基を表し、そしてＲ^３は置換基としてハロゲン原子、ニトロ基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、グアニジノ基、アミノ基、若しくはアラルキルアミノ基から選ばれる基若しくは原子を有していても良い直鎖状、分岐状若しくは環状の炭素数１〜１０のアルキル基を表すか、又はＲ^２とＲ^３が一緒になって、Ｒ^２及びＲ^３が結合している窒素原子と共に５〜７員環（さらに環構成原子として別の窒素原子を有していても良い。）を形成していても良い。）で表される有機アミンとの塩。
（２Ｓ，３Ｓ）−３−［［（１Ｓ）−１−イソブトキシメチル−３−メチルブチル］カルバモイル］オキシラン−２−カルボン酸とピペラジン、アダマンタンアミン類、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、アルギニン、リジン、ベンザチン又はメグルミンから選ばれる有機アミンとの塩。