JPS6399019A - ワクチン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は家禽類のコクシジウム症に対して活性なワクチ
ン、およびかかるワクチンに使用するためのエイメリア
（Ｅｉｍａｒｉａ　）の弱毒化された系統に関する。

家禽類特にニワトリであるガルス・ドメステイクス（ｇ
ａｌｌｕａ　ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ　）　（以下簡単に
鶏と称す）のコクシジウム症は、腸の上皮細胞内で発育
および繁殖することによりそこに病変を惹起する７種の
エイメリアのいずれかによりひき起される経済的に重要
な疾患である。大抵の家禽類生産者は、疾病発生を阻止
するために予防薬剤を使用している。その疾患の代表的
な徴候　　。

は貴志不振、体重減少、下痢および糞便中における出血
である。しかしながら、かかる薬物の使用にも拘らず、
コクシジウム症は主要な問題として残りそして七〇家禽
産業に対する年間経費は５００，０００，０００ドルと
見積られており、その半分は投薬経費であるとされる。

しかしながら、多くの抗コクシジウム剤の寿命は抵抗性
菌株の出現によるかあるいはエイメリアのすべての菌株
または種に対する活性がないゆえに比較的短いことが判
明している。ブロイラー以外の鳥類では、投薬は産卵期
間中は一種の薬物のみ（アンプロリウム（ａｍｐｒｏｌ
ｉｕｍ））　Ｌか許容されない、さらに、養育期間にお
けるかかる処置はしばしば免疫獲得を妨げ、かくして薬
物がとりやめられた場合に鳥類が病気にかかり易くなる
。

エイメリア１の完全に毒性を備えたオーシスト　（０Ｏ
Ｃ７ａｔｓ　）の悪濁液からなる生ワクチンを用いてコ
クシジウム症を免疫学的に制御することも提案されてい
る。しかしながら、この方法は最初の投与により生ずる
オーシストでの自己再感染に依るものであり、そしてオ
ーシストの生存および胞子形成にとって好適な条件を提
供するように利用されねばならない敷きわらの上で保育
される鳥類にとってのみしか適さない。もう一つの問題
はそれぞれの鳥が正確な初期量を受容するよう確保する
ことである。ある種の接種物が多過ぎると病的作用を惹
起し一方接種物が少なすぎると敷きわら中の有毒なオー
シストからの挑戦を迎えうつには不充分な免疫化しか生
じないであろう。これらの困難性が恐らく、かかるワク
チンがブロイラーに使用された場合に経験する失敗の大
部分の原因であろう。

すべてのエイメリア種のライフサイクルは、それぞれが
腸内で発育するための好ましい部位を有してはいるが、
本質的には同一である。感染は胞子形成されたオーシス
トの摂取により起り、このオーシストは腸内でスポロシ
ストを放出し、このものが次にスポロシイ）ｆ放出する
。

この後者自身は上皮中に存在し、そして栄養型に変形す
る。これらは卯月発生の過程を受けて、第一世代シゾン
トとなる。次にメロゾイトが放出されそして再びそれら
自身が腸上皮中に存在し生育して第二世代シゾントヲ形
成する。第三世代またはさらに第四世代のシゾントさえ
も同じ経路で生成しうる。これらシゾント、またはそれ
から発達した有性段階物は比較的大きくて、感染の主要
な病的作用である組織損傷の原因である。

次に、メロゾイトが大配偶子母細胞および小配偶子母細
胞を生成し、このものが小配偶子を放出する。前者が小
配偶子により受精して胞子形成してないオーシストラ形
成し、このものが腸内に放出されそして糞便と共に排出
される。

胞子形成は敷わら中でおこり、この物質が必然的に鳥類
により摂取されて胞子形成されたオーシストによる感染
がさらにおこる。

糞便中におけるオーシストの出現は開通性として知られ
ている。胞子形成されたオーシストの摂取から糞便中に
おけるオーシストの出現までの時間を発症前時間と呼ぶ
。これは種々のエイメリア種の間で相異する。

オーシストの早期出現を選択して反復して鶏に通過させ
ることにより寄生虫の病原性がいくらか弱毒化されうろ
ことが見出されている。この方法で発症前時間が大きく
減少しかつ病原性が大きく減少した集団が選択されうる
。かかる弱毒化のメカニズムは完全には理解されていな
いが、一般的には少くとも一つのシゾント世代における
寸法の減損および／または減少、従って組織損傷の減少
によるものと考えられている。

発症前時間が短縮されたかかる弱毒化された系統は通常
「早熟系統」と呼ばれる。

かかる弱毒化が免疫原性を保持したｔまで達成できるこ
とが見出され、従って、それにより生きた、弱毒化され
たエイメリアの早熟系統に基づくワクチンを用いてコク
シジウム症を免疫学的に制御する可能性が提供される。

これは一般に推奨される量全超過しても病的作用を招来
し雅いこと、および敷きわら中における非毒性オーシス
トの蓄積がまだ免疫が発達してない少食投与された鳥類
に病原性感染を生じない点で、弱毒化されてない生ワク
チンに関連するいくつかの問題点が回避されることにな
る。

早熟系統は、それぞれ発症後最初の数時間内に糞便また
は均質化された盲腸組織のいずれかからオーシストを収
集し々がら鶏に連続して通過させることにより、毒性の
ある親株から前記し念ようにして得られうる。この方法
で発症前時間が段階的に減少される。

この型の通過は適訳通過と呼ばれる。利用しうるオーシ
ストの数を増大させるためには、発症開始と親株のおよ
その発症前時間との間の時点でオーシストを収集するか
（中性通過）、または親株の発症前時間以後のものも含
めて実際上すべてのオーシストラ収集する（弛緩性通過
）ことが好都合でありうる。

種々のエイメリア種の罹患数および病原性を考慮して、
効果的な弱毒化された抗コクシジウムワクチンはエイメ
リア・アセルブリナ（Ｅ。

ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ　）、エイメリア・マキシ？　（
Ｅ、ｍａｘｉｍａ）およびエイメリア・テネラ（Ｅ、　
ｔｅｎｅｌｌａ　）の少くとも生きた、弱毒化された早
熟系統を含有すべきであると結論した。笠イメリア・ネ
カトリックス（Ｅ、　ｎｅｃａｔｒｉｘ　）、エイメリ
ア・ミテイス（Ｅ。

ｍ１ｔｉｓ　）およびエイノ“リア・プルネツテイ（Ｅ
。

ｂｒｕｎｅｔｔｉ　）の生きた、弱毒化された、早熟系
統が存在することが事実好都合である。エイメリア・プ
レコックス（Ｅ、　ｐｒａｅｃｏｘ　）の弱毒化された
、早熟系統も存在するのが望ましい。

ある種のエイメリア種、特にエイメリア・マキシマが著
明な相互の抗原的相違性を示し、従っである菌株で感染
しても同じ種のある種の他の菌株の挑戦に対して限定さ
れた程度にしか鶏を保護しないことが見出された。その
結果、抗コクシジウムワクチン中には相互に免疫学的に
異なるエイメリアの菌株、特にエイメリア・マキシマに
由来する２種またはあるいはそれ以上の系統を包含させ
ることが望ましい。

エイメリア種の多数の弱毒化された系統を含有するワク
チンに’Ａ剤化する場合、それらの系統が重大な病原性
作用を伴うことなく関連するエイメリア種て対して満足
できる免疫レベルを生成するに適した割合で存在するこ
とが重要である。従って適切な割合は、なかんずく弱毒
化された系統の免疫原性および病原性に基づくものであ
る。これらのパラメーターはすべての関連するエイメリ
ア種の弱毒化された、早熟系統に関連して決定される。

かかるパラメーターに関するいくつかの情報は個別のエ
イメリア種に関して刊行されているが、これは抗コクシ
ジウムワクチンに包含させるためのそれぞれの弱毒化さ
れた系統に関する最も適切な割合について計算できる形
態をしていない。

一般に、ワクチン中における別々の弱毒化された、早熟
系統のそれぞれの胞子形成されたオーシスト数（存在す
る場合）の好ましい比率は、好都合にはエイメリア・ア
セルブリナの胞子形成されたオーシスト１００当りの胞
子形成されたオーシストの数によって表わされうる、す
なわち次のとおりである。

エイメリア・マキシマ１５〜３０．好１Ｌ＜は１５〜２
５、より好ましくは１８〜２２例えば約２０゜ エイメリア・テネラ７０〜１１ｏ１好ましくは７５〜１
０５、より好ましくは９５〜１０５、例えば９０゜ エイメリア・プルネツティ１５〜３０、好１しくは１５
〜２５、より好ましくは１８〜２２０）例えば約２０゜ エイメリア・ミテイス１８０〜２２０、好ましくは１９
０〜２１０、より好ましくは約２００゜エイメリア・ネ
カトリックス７０〜１１０、好ましくは９０〜１１０、
より好ましくは７５〜１０５、例えは９０゜ エイメリア・プレコックス１５〜２５、好ましくは１８
〜２２０）より好ましくは約２０゜前記したように、２
種またはそれ以上の免疫学的に異なる弱毒化された系統
のエイメリア種、例えばエイメリア・マキシマを包含す
るのが望ましく、そして前出の数値は別の系統が存在す
る場合はそのそれぞれにめではまる。

それゆえ本発明の特徴の一つによれば、少なくともエイ
メリア・アセルブリナ、エイメリア・マキシマおよびエ
イメリア・テネラの生きた、弱毒化された早熟系統を含
有しており、エイメリア・アセルブリナの胞子形成され
たオーシスト１００当り存在する各個別のエイメリア系
統の胞子形成されたオーシスト数がエイメリア・マキシ
マで１５〜３０そしてエイメリア・テネラで７０〜１１
０である、弱毒化された抗コクシジウムワクチンが提供
される。

他の、生きた、弱毒化された早熟性エイメリア系統の胞
子形成オーシストが存在する場合は、エイメリア・アセ
ルブリナに関連する数は前記した数値によろう。

弱毒化は標準的な鶏の品種における発症前時間によって
好都合に表わされうる。本明細書の目的にとっては、発
症前時間とは洗浄された胞子形成されたオーシストのラ
イト・サセックス（Ｌｉｇｈｔ　５ｕｓｓｅｘ　）系８
（接種前はコクシジウム症のない状態て保持され、次に
ワイヤー床のケージに移されて実験された）による口か
らの摂取と糞便中におけるオーシストの最初の出現との
間の時間と定義される。

一般に、有用な弱毒化度を達成するには、弱毒化された
系統の発症前時間は弱毒化されてない親株のそれより短
縮されていなければならない。しかしながら、過度に短
い発症前時間を選択することは、必要な免疫学的応答を
生皮させるに不充分な寄生虫しか腸内に存在しない程度
にまで繁殖が低下することになる。従って、選択された
系統の発症前時間が比較的狭い範囲内にあるべきことが
重要である。

ワクチンに使用するためのエイメリア種の態別の弱毒化
された、早熟系統の発症前時間についての好適な範囲を
以下に列記する。親株と比較した発症前時間の低下を渚
短発症前時間でカツフ内に示す。

Ｅ、アセルブリナ ６０〜８４時間（親株の発症前時間９７時間から３７時
間まで減少）、好ましくは６４〜７８時間、より好まし
くは６６〜７２時間。

Ｅ、マキシマＭＦＰ ８０〜１１８時間（親株の発症前時間１２１時間から６
１時間まで減少）、好ましくは１０４〜１１０時間、よ
り好ましくは１０８〜１１０時間。

Ｅ、マキシマＣＰ ９０〜１２０時間（親株の発症前時間１２６時間から′
５６時間まで減少）、好ましくは１００〜１１８時間、
より好ましくは１１０〜１２０時間。

Ｅ、テネラ ９０〜１２５時間（Ｒ株の発症前時間１６２時間から４
２時間まで減少）、好ましくは１０７〜１２０時間。

Ｅ、ネカトリックス ９０〜１２６時間（親株の発症前時間１３８時間から４
８時間まで減少）、好ましくは１００〜１２０時間。

Ｅ、ミテイス ６０〜８４時間（親株の発症前時間１０１時間から４１
時間まで減少）、好ましくは６４〜７８時間、より好ま
しくは６４〜７２時間。

Ｅ、プルネツテイ ７０〜１００時間（親株の発症前時間１２０時間から５
０時間まで減少）、好ましくは７０〜９０時間、より好
ましくは７５〜８８時間。

Ｅ、プレコックス ４４〜７５時間（親株の発症前時間８４時間から４０時
間まで減少）、好ましくは６４〜７５時間、より好まし
くは６４〜７０時間。

本発明の第２の特徴によれば発症前時間６０〜８４時間
を有するエイメリア・アセルブリナ、発症前時間８０〜
１２０時間を有するエイメリア・マキシマおよび発症前
時間９０〜１２５時間を有するエイメリア・テネラの少
くとも弱毒化された、早熟系統を含有する弱毒化された
抗コクシジウムワクチンが提供される。

他の弱毒化された早熟性エイメリア系統が存在する場合
は、それらの発症前時間は前記した発症前時間によるの
が望ましい。

一般に、前記した発症前時間により選択される弱毒化さ
れた系統は、通常必然的であるように、ワクチン投４後
に糞便中に出現する胞子形成されたオーシストが摂取さ
れ、かくして鳥類が満足のいく程度に免疫されるまでに
何回も通過する場合は毒性への反転戻りを回避するため
に層中における通過に際して安定でなければならない。

毒性への反転戻りは病原感染を招来しうる。もし鳥類が
糞便を摂取することを阻止される、例えばワイヤー床の
ケージに収容されるならば、この問題は起らず、そして
弱毒化の安定性は重要でなくなりうる。さらに、ある種
のものは充分に免疫原性があるのでオーシストが１回か
２回通過した時点で免疫される。しかしながら一般に、
選択される弱毒化された菌株の最適のものは宿主鶏に少
くとも５回、望ましくは少くとも７回の弛緩通過で安定
であると判明したものである。

本発明で使用するのに適する多数の弱毒化された早熟な
エイメリア系統は特許手続上の微生物の寄託の国際的承
認に関するブダペスト条約の下に特許寄託物として英国
ＰＥＬＳ　Ｃｅｎｔｒｅ　ｆｏｒＡｐｐｌｉｓｄ　Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　＆ｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈのＥｕ
ｒｏｐｅａｎ　Ｃｏ１１ｅｃ−ｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｎｉ
ｍａｌ　Ｃｅ１ｌ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓにスポロシストの
形態で下記の番号および日付で寄託されている。

マー　　　　ＬＮ　　　　　ＬＮ　　　　　ＮＪ　　　
　　ＮＪ　　　　　ｆｆ　　　　　ｕＪ　　　　　’Ｑ
　　　　　Ｉ％弱毒化された系統は下記コードに従い同
定される。すなわち親株にその起原を示すコード文字、
例えばエイメリア・アセルブリナＩＩまたはエイメリア
・マキシマＣを付与する０弱毒化されたかまたは早熟な
系統に付加的な文字Ｐ１続いてそれらについてなされた
連続通過の数を示す数字全つける。その系統の単一のオ
ーシストからサブ系統が確立された場合は文字Ｓがつけ
られ、そしてサブ系統を連続的な中性または弛緩性通過
させた場合は、かかる通過の数に相当する数字がさらに
付は加えられる。従ってＥ、アセルブリナＦＩＰ　７１
８−１−１３はオーシストの早期発達分を適訳しながら
エイメリア・アセルブリナのＨ菌株を７１回通過させ、
続いて単一オーシストからの通過および次に１３回の連
続した弛緩または中性通過させることにより誘導される
早熟系統を指す。単一オーシストまたはスポロゾイトか
らの通過が反復される場合は＠２ｓ＃が示され、続いて
第２０″′Ｓ”通過後の弛緩または中性通過の数が示さ
れる。

本発明のもう一つの観点によれば、前記したそれぞれの
系統、ならびに早熟性の弱毒化されたその免疫原性突然
変異体および変種が提供される。例えばこれらは前記し
た範囲内の発症前時間を有することができ、それにより
それらの親である弱毒化されてない菌株から区別されう
る。かかる変株系統にはさらに通過させることから生ず
る子孫、および寄託された系統とは区別できない他の変
種が包含される。突然変異体には天然またはその他の突
然変異により生ずるものが包含される。本発明による系
統には微生物のライフサイクルにおけるすべての形態が
包含され、従って胞子形成されたかおよび胞子形成され
てないオーシスト、スポロシスト、スポロゾイト、栄養
型、シゾント、メロゾイト、小配偶子母細胞、小配偶子
、および大配偶子母細胞が包含される。

早熟性系統の形質を安定化させるには、早熟性系統の単
一のオーシスト、または所望の場合はその単一のスポロ
シストまたはスポロゾイトを通過させることによりサブ
系統を確立することが有用であると判明した。本発明に
は特に前記系統と並立する早熟系統（則し親から誘導さ
れる）またはその子孫（さらに通過、特に前記したよう
な中性または弛緩通過させることにより、寄託された系
統から誘導される）のようなサブ系統が包含される。

本発明には前記各系統およびそれぞれの変種、および鶏
全コクシジウム感染に対して予防接種する場合のそれら
の使用が包含される。Ｏれらは個々に使用されうるし、
２槁またはそれ以上を任意に組み合せて、または本発明
の１種またはそれ以上の系統と他の生きた、弱毒化され
たエイメリア細菌の１種またはそれ以上とを任意に組み
合せて、任意の割合でしかし最も好ましくは前記した割
合で使用されつる。本発明にはさらに生きた、弱毒化さ
れた系統の寄生虫を含有する鶏用飼料、または水を含め
た飲料が包含される。

前記寄託された系統およびそれらの突然変異体および変
種のオーシストは形態学的には親株のそれと区別できな
い。早熟系統は親株とはそれらの発症前時間、内的発育
、病原性および繁殖能力の点で異なる。種々のエイメリ
ア槙の特性はＬｏｎｇ　Ｐ、Ｌ、氏他（１９８２：Ａ　
Ｇｕｉｄｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅＤｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ
　Ｃｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓ　ｉｎ　ＣｈＩＣｋｅｎｓ　
：Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｅｏｒｇｉａ　Ｒｅ
５ｅａｒｃｈ　Ｒｅｐｏｒｔ、　４０４）およびＪｏｙ
ｎｅｒ　Ｌ、Ｐ、（１９７８：　工ｄｅｎｔｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎａｎｄ　Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、Ａｖｉａｎ　Ｃ
ｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓ　、ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃ
ｅ　　８量ｍｐｏａｉｕｍ　＆　１３、Ｂｒ１ｔｉｓｈ
　ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅ　Ｌｔｄ　）により充
分に示される。ｔｚ々の踵を同定する一つの方法は１例
えば酵素グルコース　ホスヘート　イソメラーゼおよび
ラクテート　デヒドロゲナーゼの異型を検出するための
酵素電気泳動である。特徴的な異型は５ｈｉｒｌｅ７　
Ｍ。

Ｗ、　（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇｅ
ｏｒｇｉａ　ＣｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓＣｏｎｆｅｒｅｎ
ｃｅ　１９８５　）氏により頷別された。弱毒化された
系統はこれらの特徴的な酵素異型の点で親株と同一であ
る。

前記寄託された系統の突然変異体は例えば前記した選択
法または他の技法をさらに適用することにより得られう
る（　（）ｏｏｄｅｎｏｕｇｈ　ａｎｄ　Ｌｅｖｉｎｅ
。

Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　、　Ｂｏｌｔ　、　Ｒｌｎｅｈａｒ
ｔ　ａｎｄ　Ｗｉｎｓｔｏｎ　Ｉｎｃ。

１９７４）。

寄°託された系統およびその突然変異体および変種の無
性段階のいくつかの特徴を、感染した消化管の染色およ
び固足した断片を測定することにより判定して下記に示
す。

Ｅ、アセルブリナ 配偶子母細胞の大多数はシゾントの第三世代から直接発
育する。シゾントの平均寸法およびその中のメロゾイト
の平均数は親株のそれと実質的に同じである。

Ｅ、ゾルネツテイ 配偶子母細胞の大多数はシゾントの第一または第二世代
から直接発育する。シゾントの第一および第二世代の平
均寸法は親株のそれよりわずかに低く、一方シゾント当
りのメロゾイトの数はほぼ同じである。

Ｅ、マキシマＭＦＰおよヒＥ、マキシマＣＰ配偶子母細
胞は感染後約７２時間またはそれより早くに出現する。

シゾントの平均寸法およびその中のメロゾイトの平均数
は親株のそれと実質的に同じである。

Ｅ、ミテイス 配偶子母細胞は約６６時間で出現し、そして主に第三世
代メロゾイトから発育する。シゾントの第一世代の平均
寸法およびその中のメロゾイトの平均数は親株の場合よ
り低い。

Ｅ、ネカトリックス シゾントの第二世代の平均寸法およびその中のメロゾイ
トの平均数は親株の場合よりかなり低い。

Ｅ、プレコックス 配偶子母細胞の大多数はシゾントの第三世代から直接発
育する。シゾントの平均寸法およびその中のメロゾイト
の平均数は親株のそれと実質的に同じである。

Ｅ、テネラ 配偶子母細胞の大多数は第三世代メロゾイトから直接発
育する。シゾントの第二世代の平均寸法およびその中の
メロゾイトの平均数は親株の場合におけるよりもかなり
低い。

ワクチンの１量”は鳥−羽に対して提供される量である
。一般に、ワクチン１回量当りの胞子形成されたオーシ
ストの総数は約２．５Ｘ１０２〜２Ｘ１０５、より好ま
しくは５Ｘ１０２〜６Ｘ１０５でありうる。すなわち一
般に、ワクチン１回量は存在するエイメリアの各早熟系
統の胞子形成オーシストを下記の数含有しうる。

Ｅ、アセルブリナ　　５０〜２５，０００　　好１しく
はｉｏ。

〜２．０００ Ｅ、マキシマ　　　　１０〜５，０００　　好ましくは
２０〜Ｅ、テネラ　　　　　５０〜２５，０００　　好
ましくは８０〜２．０００ Ｅ、プルネツテイ　　１０〜５．０００　　好ましくは
２０〜Ｅ、ミテイス　　　１００〜５Ｃ１，０００好ま
しくは２００〜４．０００ Ｅ、ネカトリックス　５０〜２５，０００　　好ましく
は１００〜２，０００ エイメリア・マキシマの２つの系統例えばＭＦＰ１５ｓ
およびｃＰ１２ｓが存在する場合は、それぞれ１０〜５
，０００好ましくは２０〜４００なる量が使用されうる
。

Ｅ、プルネツテイＥＣＡＣＣ８６１１２０１５は鳥類に
おける通過の結果弱毎化の安定性が改良されているゆえ
に並行系統８６０７２２０４より好ましい。

一般に、ワクチンは懸濁剤を含有する滅菌蒸留水中にお
けるオーシストの懸濁液？含有するものであろう。懸濁
剤の例をあげれば、多糖類懸濁剤例えばキナフタ／ガム
またはアラビアゴムのようながム、カル〆キシメチルセ
ルロース、ヒＰロキシプロビルメチルセルロースまたは
微品質セルロースのようなセルロース誘導体、カラゲエ
ニン、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、または澱粉、
ゼラチンのようなポリペプチド懸濁剤、ポリアクリル酸
のよう−な合成ポリマー懸濁剤、またはけい酸アルミニ
ウムマグネシウムのようなけい酸塩懸濁剤である。一般
に、ワクチン中の懸濁剤の量は１〜２５　ｆ／／Ｊ、好
ましくは１．５〜１２　ｆ／ｌ、であろう。他の細菌に
よる汚染を阻止するために保存剤例えばＱ、０１％ｗ／
ｗの濃度のホルマリンが存在することもできる。

ワクチン中における胞子形成されたオーシストの濃度は
例えば１０７〜１０８／Ａの範囲内であることができる
。

一般に、ワクチンは最も好都合には鳥類の飼料および／
または飲料水中にて経口投与されよう。ワクチンは飲料
水中にて投与される場合に効果的である。好都合には６
〜１０日令、好ましくは５〜１０日令の若い鶏に一回量
が投与されうる。しかしながらいわゆる６細流″法によ
り接稲する、すなわち非常に少量の微生物を連日投与し
て免疫性を確立することも有益でありうる。鳥類が敷き
わら上に置かれている場合＆よ、早熟微生物の排出され
たオーシストを摂取することによる再感染により免疫化
が高められうる。

本発明によるワクチンの使用は繁殖および重量のあるブ
ロイラー（例えば５５日またはそれ以上飼育された家禽
類）の生産を意図するべ書類の処置において特に価値が
ある。

ワクチンを受容する鳥類は１ａまたはそれ以上の抗生物
質生長促進剤例えばアポ・ゼルシン（ａｖｏｐａｒｃｉ
Ω）およびバ１ソニアマイシン（ｖｉｒｇｉｎｉａｍｙ
ｃｉｎ　）　ｆ供給されるのが好都合でありうる。これ
らは好都合には飼料中に１５〜１２．５ｐ戸の濃度範囲
、例えば約１０　ｐｐｍで存在しうる。

早熟系統の病原性は感染した鶏の体重変化を野生型エイ
メリア種に感染した鳥類の体重変化と比較して検査する
ことにより判定されうる。

満足できる程度に弱毒化された系統が得られた場合は、
集団の均一性を高めそれにより毒性への反転戻りの確軍
、すなわち不安定性、を低下させるために、単一オーシ
スト、スポロシストまたはスポロゾイトを通過させるこ
とによりサブ系統を確立することが望ましい。この工程
を反復するのが望１しくありうる。従って、サブ系統は
安定性を試験するために多数の連続的弛緩通過にかけら
れうる。安定した刺青化されたサブ系統が得られた場合
は、このものは比較的多数生産してワクチンに混入する
ために弛緩通過にかけられうる。

収集されたオーシストは通常胞子形成されておらずそし
て再接種に先立ち例えば２チ重クロム酸カリウム水溶液
のよりなオキシダントの水溶液中への懸濁および例えば
２９℃で強制通気しながらインキュベーションすること
による胞子形成を必要としよう（酸素に富んだ環境によ
り胞子形成が促進されかつ細菌生育も阻止される）。胞
子形成後、オーシストは他の微生物による汚染を回避す
るために１種またはそれ以上の抗菌物質で処理されうる
。オーシストは塩浮遊により糞便からまたは均質化され
た盲腸組織から収集されうる（　Ｌｏｎｇ氏のｐｒｏｃ
ｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆｔｈｅ　９ｔｈ　Ｓｙｍｐｏｓｉ
ｕｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂｒ１ｔｉｓｈ　５ｏｃｉｅｔｙ
ｆｏｒ　Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ、第３５〜６７頁、
１９７１年、参照）。

以下の実施例により本発明をさらに説明するが本発明は
それらに限定されるものではない。

実施例１−ワクチンの調製 接種たねロット系 使用する弱毒化されたエイメリアの各系統のマスターた
ねを液体窒素冷凍下に保持する。各マスターたねの試料
からＳＰＦ系鶏への経口接種により操作用たねが調製さ
れる。オーシストが糞便および／または盲腸から回収さ
れて操作用たねとなされる。操作用たねは４℃で貯蔵さ
れ、そして各ワクチン生産を開始するのに使用される。

操作用たねは保存寿命６か月を有し、その後はとり代え
られる。

操作用たねが調製されると、オーシストはその種にとっ
ての野生型親株のおよその発症前時間すなわち中性通過
までのみ収穫される。

ワクチンが調製されると、オーシストは感染の発症期間
全体にわたり、すなわち弛緩通過全体にわたり収穫され
る。

鶏の飼育 証明書つきＳＰＦ群から得られた卵から鶏をＳ化させた
。これらを４〜６週令となるまでロペニゾン（ｒｏｂｅ
ｎｉｄｉｎｅ　）　ｆ含有する食餌で隔離して飼育する
１次にこれらをワクチン生産用施設に移し、各エイメリ
ア種用に計画された別々の室に群にして割り当て、そし
て感染２日前に食餌からロベニゾンを除去する。

接種 鳥の各群を予め定められた量の操作用たねで経口により
接種する。接種はエイメリアの１種のみが１操作日で収
穫および処理されるように時差スケジュールに従い配置
されるのが好ましい。

収穫 収集の時刻および接続期間は種によって変るが、糞便を
収集する。糞便（および／または盲腸内容物）のスラリ
ーを水中に調製し、次にこれを均質化する。ホモシネ−
）’１１５０ミクロンの篩を通して洗い、洗液を連続流
水デウル遠心器で遠心分離する。遠心分離された沈積物
を飽和塩溶液中に再懸濁して再遠心分離する。上澄みを
集める。これを水で希釈し、３度目の遠心分離にかける
。沈積物を重クロム酸カリウムの２チ溶液中に再懸濁す
る。

胞子形成 重クロム酸カリウム溶液中のオーシスト懸濁液を強制通
気しながら２９℃で４８時間インキュベーションしてオ
ーシストを胞子形成させる。

胞子形成後重クロム酸塩溶液を遠心分離により除去しそ
してオーシストを１０％クロロツクス（ｃｈｌｏｒｏｘ
　）　（次亜塩素酸ナトリウム溶液）で１０分間処理す
る。処理されたオーシストラ水に再懸濁し、そしてホル
マリン’（ｉ−０，０５％の濃度１で添加する。この懸
濁液を４℃で貯蔵する。

配合 それぞれの量のオーシスト数を含有する懸濁液を調製し
、そしてそれぞれの懸濁液の計算された量を懸濁剤と混
合してそれぞれの踵のオーシストが所望の割合で存在す
る多成分ワクチンとなす。このワクチンを最終容器に充
填し、４℃で貯蔵する。

実施例　２ ４０００回量分を含有するワクチン１！が以下のように
して調製されうる。すなわちＥ、アセルゾリナ　　　）
（Ｐ　　　　２Ｘ１０’オーシストＥ、プルネッテイ　
　　　ＨＰ　　　　４ｘ１０５オーシストＥ、マキシマ
　　　　　ＭＦＰ　　　　４ＸＩＱ５オーシストＥ、マ
キシマ　　　　　　ＣＰ　　　４Ｘ１０５オーシストＥ
、ミテイス　　　　　　ＨＰ　　　　４ｘ１０６オー７
ストＥ、ネカトリックス　　　ＵＰ　　　　　２Ｘ１０
６オーシストＥ、プレコックス　　　）（Ｐ　　　　４
Ｘ１０５オーシストＥ、テネラ　　　　　　　ＨＰ　　
　　　２Ｘ１０６オーシストキサンタンがム　　　　　
　６を 水　　　　　　　　加えて１！となす このワクチン２５１を飲料水５００祷に添加して最終濃
度ＣＬ　０３　％　ｗ／ｖのキサンタンガム中における
、鶏１００羽に光分な量のワクチンとなす。

実施例　３ ５０００回量分を含有するワクチ１５０Ｃ１７！が以下
のようにして調製されうる。すなわちＥ、アセルブリナ
　　ＨＰ７１ｓ＋９　２．５Ｘ１０６オーシストＥ、プ
ルネツテイ　　ＨＰ２７ｓ＋ｄ　　　５ｘ１０５　　オ
ーシストＥ、マキシマ　　　ＭＦＰ１５ｓ＋５　　５　
Ｘ　１０５オーシストＥ、マキシマ　　　ＣＰ１２ｓ＋
５　　５　Ｘ　１０５オーシストＥ、ミテイス　　　Ｉ
（Ｐ１２ｓ＋７　　５ｘｉｏ６オーシストＥ、ネカトリ
ツクス　ＨＰ４２ｓ＋５　２．５　Ｘ　１０’オーシス
トＥ、プレコックス　　１（Ｐ２１ｓ＋３　　５　Ｘ　
１０５オーシストＥ、テネラ　　　　ＨＰ３８ｓ＋２　
２．５ｘ１０６オーシストキサンタンガム　　　　　　
　７．５２水　　　　　　　加えて５００Ｍとなすこの
ワクチン１Ｑｍｌを飲料水５００ｍ１中に添加して最終
３度０．０３％　ｗ／ｖのキサンタンがム中における、
鶏１００羽に光分な量のワクチンとなす。

実施例　４ ｔａｌ　　５０００回量分を含有するワクチン５０ＯＮ
が以下のようにして調製されうる。すなわちＥ、アセル
プリナ　　ＨＰ７１ｓ＋９　　２．５ｘ１０６オーシス
トＥ、プルネツテイ　　ＨＰ２７ｓ＋４　　　５Ｘ１０
５オーシストＥ、マキシマ　　　ＭＦＰ１５Ｓ　＋５　
　５ｘ１０５オーシストＥ、マキシマ　　　ＣＰ１２ｓ
＋５　　　５ｘ１０５オーシストＥ、ミテイス　　　Ｈ
Ｐ１２ｓ＋７　　　５ｘ１０６オーシストＥ、ネカトリ
ツク、ｘ、　　ＨＰ４２ｓ＋５　　２．５ｘ１０６オー
シストＥ、プレコックス　　ＨＰ２１ｓ＋３　　　５Ｘ
１０５オーシストＥ、テネラ　　　　ＨＰ５８ｓ＋２　
２．５Ｘ１０’オーシストキサンタンがム　　　　　　
　五〇？ 水　　　　　　　加えて５００ｍ１となすこのワクチン
１０ゴを飲料水５００ｍ１中て添加して最終濃度０．０
１２　％　ｗ７〜のキサンタンがム中における、鶏１０
０羽に充分な量のワクチンとなす。

（１）＋　　５０００回量分を含有するワクチン５００
ゴが以下のようにしそ調製されうる。すなわちＥ、アセ
ルブリナ　　ＨＰ７１ｓ＋１３　　　ＥＣＡＣＣ８６０
７２２０３２，５Ｘ１０６オーシスト Ｅ、ゾルネツテイ　　ＨＰ２７ｓ＋８　　　　ＥＣＡＣ
Ｃ８６１１２０１５５Ｘ１０５オーシスト Ｅ、マキシマ　　　ＭＦＰ１５ｓ＋１１　　ＥＣＡＣＣ
８６１１２０１１５Ｘ１０５オーシスト Ｅ％７キシマＣＰ１２ｓ＋１１　　　ＥＣＡＣＣ８６１
１２０１２５Ｘ１０５オーシスト Ｅ、ミテイス　　　ＨＰ１２ｓ＋１１　　　ＥＣＡＣＣ
８６０７２２０６５Ｘ１０６オーシスト Ｅ、ネカトリックスＨＰ４２．２ｓ＋８　　　ＥＣＡＣ
Ｃ８６０７２２０２２，５Ｘ１０’オーシスト Ｅ、プレコックス　　ＵＰ２１．２ｇ＋２　　　ＥＣＡ
ＣＣ８６０７２２０５５Ｘ１０５オーシスト Ｅ、テネ５　　　　　）ＩＰ３８ｓ＋１０　　ＥＣＡＣ
Ｃ８６０７２２０１２，５×１０６オーシスト Φサンタンガム　　　　　　　　五〇ｆ水　　　　　　
　加えて５００ＷＬｔとなすこのワクチン１０成を飲料
水５００ａ中に添加して最終濃度０．０１２’ｌ　ｗ／
ｖのキサ／タンガム中における、鶏１００羽に充分な量
のワクチンとなす。

実施例　５ ７種のエイメリア橋の親株を前記したように最短発症前
時間を選択して連続通過させた。種徨の弱毒化された系
統の繁殖はライト・サセックス系鶏の一群を経口により
接種しセして各鳥により生成されるオーシストの平均数
を数えることにより判定された。弱毒化された系統の免
疫原性も、最初にオーシストを接種された鶏に親株のオ
ーシストを挑戦させる実験により判定された。鳥−羽当
りの平均オーシスト排出量を測定しそして保オチが挑戦
対照によるオーシスト排出量に関連して計算された。親
株に比較した弱毒化された系統の病原性も、体重が揃っ
たライト・サセックス系鶏の一群に標準量の各寄生虫を
接種し、そして１２〜１４日後の体重を未感染対照およ
び非弱毒化親株を投与された群の体重と比較して測定す
ることにより判定された。

その結果を下記第１表および第２表に示す。

実施例６　ワクチン試行 床囲い中に入れられたコツプ（Ｃｏｂｂ　）ブロイラー
鶏４４８０羽に実施例３記載のワクチンを試用した。ワ
クチン中におけるキサンタンガムの濃度は各飲料容器に
ワクチン１４０回景を投与すると最終キサンタンガム儂
度がＱ、０３［トなるように調整した。この試行は本発
明の生きた、弱毒化コクシジウムワクチンで予防接種さ
れた烏の実験結果を、エイメリアの７種それぞれの７劇
の同［または異種性菌株での挑戦にあたり、制コクシノ
ウム剤モネンシン（ｍｏｎｅｎｓ　ｉｎ　）を４見られ
た鳥と比較することが計画された。

異種性菌株はそれらが同種性のものより病原性が高いと
思われているかまたは抗原性が異なるかのいずれかに基
つき適訳された。

烏は１４０羽の群で収容された。それぞれの処置につき
４棟が割当てられ、そして各対照群につき２棟が割当て
られた。それゆえ各処置につき５６０羽が包含されそし
て各対熱には２８０羽が包含された。処置に対する収容
棟の割当てはブロイラー宿舎全体を通して無作為的にな
された。試行の計画は次のとおりである。

第３表 ワクチン（第７日）　　　第１群　　　第２群２８日）
　３３　ｐｌ）ｍ １〜４群＝５６０羽 ５〜６群＝２８０羽 ワクチンは飲料水経由で投与された。抗生物質生長促進
剤アぜ・９ルシンｆ　Ｉ　Ｄ　ｐｐｍ含有する市販の処
方物に基づき定量を与えられた。抗コクシジウム薬剤は
飼料中にて投与された。

野生エイメリア種による感染およびそれゆえの免疫発生
を防止するために２つの対照群にロペニジン（５０ｐｐ
ｍ　）が２８日間与えられたことく注意すべきである。

一方の群には異種挑戦がなされ、もう一方の群には同種
挑戦がなされた。

すべての鳥はｉ３１３１日目物に接種することによりそ
れぞれ経口挑戦を受けた。挑戦量中におけるそれぞれの
糧のオーシスト数は次のとおりであった。

第　　４　　表 Ｅ、アセルブリナ　　Ｈ２００ ＨＧ　　　　　　　　２００ Ｅ、プルネツテイ　　Ｈ１０ ＦＳ３３９　　　　　　　１０ Ｅ、マキシマ　　ＭＦ　　　　　　　　　　　　　　　
５Ｅ、ネカトリツクス　Ｈ４０ Ｅ、プレコックス　　Ｈ２００ ５Ｍ８　　　　　　　２００ Ｅ、テネラ　　　　Ｈ３０ ＦＤ　　　　　　　　３０ 第３０、！＋７および４９日目に生体重および累積飼料
摂取量を測定した。飼料転化率は飼料摂取量を第１８目
からの生体重増加で割ることにより計算された。敷きわ
ら中のオーシストの数は毎週各収容棟当り計測された。

第３７８目に、各収容棟から５羽ずつ（合計１６０羽）
とり出してコクシジウム症による病変得点を測定した。

得点はＥ、アセルブリナ、Ｅ、プルネッテイ、Ｌマキシ
マ／ネカトリックス（これらは区別し難いので一緒にし
て類別）およびＥ、テネラによる感染の症候である病変
の重さが高くなるに従い０〜五５の尺度でつけられた。

平均病変得点を計算した。

結果 生体重 試行の終了時（第４９８目）には予防接種された群はす
べてモネンシンで処置された群よりわずかに重かったが
、その差は有意でなかった。

烏のそれぞれの群の生体重を下記第５表に示す。

飼料摂取および飼料転化率 試行の終了時で、予防接種された群とモネンシン処置さ
れた群との間の飼料摂取および試料転化率における差は
統計的に有意ではなかった。

病変得点 予防接種およびモネンシン処置のいずれも同種挑戦また
は異種挑戦後の病変得点が低かった。

しかしながら、ワクチンにより付与された、異種挑戦に
対する保護はＥ、アセルブリナ、Ｅ、プルネッテイおよ
び特Ｋ　Ｅ、テネラに関してはモネンシンにより付与さ
れた保護より優れていた。

予防接種された鳥およびモネンシン処置された烏のいず
れにおいても異種性Ｅ、マキシマ／ネヵトリツクスに対
しわずかな得点上昇が観察されたが、それぞれ対照より
も低かった。それぞれの鳥群て関する病変得点を下記第
３表に示す。

これらの計測に関しては収容線毎に非常に変動が大きか
った。しかしながら、異種菌株での挑戦後は、モネンシ
ン処置ぢれた鳥の収容棟における数は予防接柱された烏
の収容棟における数より平均２〜３倍高かった。

結論 鳥での実験結果は、全体的にみて本発明のワクチンとモ
ネンシンとはコクシジウム挑戦に対する保饅においては
等しく効果があることが示された。ワクチンは異糧挑戦
に対してよく抵抗し、そして異種性Ｅ、テネラ挑戦に関
してモネンシンより特別に優れた長ＰＪＴを示した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）エイメリア・アセルブリナ、エイメリア・マキシマ
   およびエイメリア・テネラの生きた、弱毒化された早熟
   系統を含有しており、エイメリア−アセルブリナの胞子
   形成されたオーシスト１００当り存在する各個別のエイ
   メリア系統の胞子形成されたオーシスト数がエイメリア
   ・マキシマで１５〜６０そしてエイメリア・テネラで７
   ０〜１１０である、弱毒化された抗コクシジウムワクチ
   ン。 ２）エイメリア・アセルブリナの胞子形成されたオーシ
   スト１００当り、エイメリア・ブルネッテイの生きた、
   弱毒化された早熟系統の胞子形成オーシスト１５〜３０
   、エイメリア・ミテイスの生きた、弱毒化された早熟系
   統の胞子形成オーシスト１８０〜２２０、およびエイメ
   リア・ネカトリックスの生きた、弱毒化された早熟系統
   の胞子形成オーシスト７０〜１１０を含有する特許請求
   の範囲第１項記載のワクチン。 ３）エイメリア・アセルブリナの胞子形成されたオーシ
   スト１００当り、エイメリア・プレコックスの生きた、
   弱毒化された早熟系統の胞子形成オーシスト１５〜２５
   を含有する特許請求の範囲第２項記載のワクチン。 ４）エイメリア・アセルブリナの胞子形成されたオーシ
   スト１００当り存在する各個別のエイメリア系統の胞子
   形成オーシストの数がエイメリア・マキシマで１８〜２
   ２そしてエイメリア・テネラで７５〜１０５である特許
   請求の範囲第１項記載のワクチン。 ５）エイメリア・アセルブリナの胞子形成されたオーシ
   スト１００当り、エイメリア・ブルネッテイの生きた、
   弱毒化された早熟系統の胞子形成オーシスト１８〜２２
   、エイメリア・ミテイスの生きた、弱毒化された早熟系
   統の胞子形成オーシスト１９０〜２１０、およびエイメ
   リア・ネカトリックスの生きた、弱毒化された早熟系統
   の胞子形成オーシスト７５〜１０５を含有する特許請求
   の範囲第４項記載のワクチン。 ６）エイメリア・アセルブリナの胞子形成されたオーシ
   スト１００当りエイメリア・プレコックスの生きた、弱
   毒化された早熟系統の胞子形成オーシスト１８〜２２を
   含有する特許請求の範囲第５項記載のワクチン。 ７）鶏で発症前時間６０〜８４時間を有するエイメリア
   ・アセルブリナの菌株、鶏で発症前時間８０〜１２０時
   間を有するエイメリア・マキシマの菌株および鶏で発症
   前時間９０〜１２５時間を有するエイメリア・テネラの
   菌株、の生きた胞子形成されたオーシストを有効濃度で
   含有する、鶏のコクシジウム症駆除用の生ワクチン。 ８）鶏で発症前時間９０〜１２６時間を有するエイメリ
   ア・ネカトリックス菌株、鶏で発症前時間６０〜８４時
   間を有するエイメリア・ミテイスの菌株、および鶏で発
   症前時間７０〜１００時間を有するエイメリア・ブルネ
   ッテイの菌株の生きた、胞子形成されたオーシストを有
   効濃度で付加的に含有する特許請求の範囲第７項記載の
   ワクチン。 ９）鶏で発症前時間４４〜７５時間を有するエイメリア
   ・プレコックスの菌株の生きた、胞子形成されたオーシ
   ストを有効濃度で付加的に含有する特許請求の範囲第８
   項記載のワクチン。 １０）各投薬単位がエイメリア・アセルブリナの前記オ
   ーシスト５０〜２５，０００、エイメリア・マキシマの
   前記オーシスト１０〜５，０００、およびエイメリア・
   テネラの前記オーシスト５０〜２５，０００を含有する
   、投薬単位形態をした特許請求の範囲第１項記載のワク
   チン。 １１）各投薬単位がエイメリア・アセルブリナの前記オ
   ーシスト５０〜２５，０００、エイメリア・マキシマの
   前記オーシスト１０〜５，０００、エイメリア・テネラ
   の前記オーシスト５０〜２５，０００、エイメリア・ブ
   ルネッテイの前記オーシスト１０〜５，０００、エイメ
   リア・ミテイスの前記オーシスト１００〜５０，０００
   およびエイメリア・ネカトリックスの前記オーシスト５
   ０〜２５，０００を含有する特許請求の範囲第２項記載
   のワクチン。 １２）各投薬単位がエイメリア・アセルブリナの前記オ
   ーシスト５０〜２５，０００をエイメリア・マキシマの
   前記オーシスト１０〜５，０００、エイメリア・テネラ
   の前記オーシスト５０〜２５，０００、エイメリア・ブ
   ルネッテイの前記オーシスト１０〜５，０００、エイメ
   リア・ミテイスの前記オーシスト１００〜５０，０００
   、エイメリア・ネカトリックスの前記オーシスト５０〜
   ２５，０００、およびエイメリア・プレコックスの前記
   オーシスト１０〜５，０００を含有する特許請求の範囲
   第３項記載のワクチン。 １３）前記エイメリア菌株が選択をしないで鶏を５回通
   過させた後に安定である特許請求の範囲第１項記載のワ
   クチン。 １４）エイメリア・アセルブリナの前記菌株がエイメリ
   ア・アセルブリナＥＣＡＣＣ８６０７２２０３であり、
   エイメリア・テネラの前記菌株がエイメリア・テネラＥ
   ＣＡＣＣ８６０７２２０１でありそしてエイメリア・マ
   キシマの前記菌株がエイメリア・マキシマＥＣＡＣＣ−
   ８６１１２０１１および／またはＥＣＡＣＣ８６１１２
   ０１２である特許請求の範囲第１項記載のワクチン。 １５）エイメリア・ミテイスの前記菌株がエイメリア・
   ミテイスＥＣＡＣＣ８６０７２２０６であり、エイメリ
   ア・ネカトリックスの前記菌株がエイメリア・ネカトリ
   ックスＥＣＡＣＣ８６０７２２０２であり、そしてエイ
   メリア・ブルネッテイの前記菌株がエイメリア・ブルネ
   ッテイＥＣＡＣＣ８６１１２０１５である特許請求の範
   囲第２項記載のワクチン。 １６）エイメリア・ミテイスの前記菌株がエイメリア・
   ミテイスＥＣＡＣＣ８６０７２２０６であり、エイメリ
   ア・ネカトリックスの前記菌株がエイメリア・ネカトリ
   ックスＥＣＡＣＣ８６０７２２０２であり、そしてエイ
   メリア・ブルネッテイの前記菌株がエイメリア・ブルネ
   ッテイＥＣＡＣＣ８６０７２２０４である特許請求の範
   囲第２項記載のワクチン。 １７）エイメリア・プレコックスの前記菌株がエイメリ
   ア・プレコックスＥＣＡＣＣ８６０７２２０５である特
   許請求の範囲第３項記載のワクチン。 １８）エイメリア・アセルブリアＥＣＡＣＣ８６０７２
   ２０３エイメリア・ブルネッテイＥＣＡＣＣ８６０７２
   ２０４エイメリア・ブルネッテイＥＣＡＣＣ８６１１２
   ０１５エイメリア・マキシマＥＣＡＣＣ８６１１２０１
   １エイメリア・マキシマＥＣＡＣＣ８６１１２０１２エ
   イメリア・ミテイスＥＣＡＣＣ８６０７２２０６エイメ
   リア・ネカトリックスＥＣＡＣＣ８６０７２２０２エイ
   メリア・プレコックスＥＣＡＣＣ８６０７２２０５エイ
   メリア・テネラＥＣＡＣＣ８６０７２２０１およびそれ
   らの早熟性の弱毒化された免疫原性突然変異体および変
   種からなる群から選択された弱毒化された早熟性エイメ
   リア菌株。 １９）前記エイメリア菌株のオーシストを胞子形成させ
   そして次にこのものを担体および／またはアジユバント
   と混合することからなる特許請求の範囲第１項記載のワ
   クチンの製法。 ２０）特許請求の範囲第１項記載のワクチンの有効量を
   鶏に投与することからなる鶏のコクシジウム症の阻止法
   。 ２１）ワクチンが鶏の飲料水中に投与される特許請求の
   範囲第１９項記載の方法。