JPS6392646A

JPS6392646A - 親水性多孔性架橋重合体粒子の製造法

Info

Publication number: JPS6392646A
Application number: JP61238652A
Authority: JP
Inventors: Osamu Hirai; 修平井; Yoshiyuki Mukoyama; 向山　吉之
Original assignee: Hitachi Chemical Co Ltd
Current assignee: Resonac Corp
Priority date: 1986-10-07
Filing date: 1986-10-07
Publication date: 1988-04-23

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、液体クロマトグラフィー用充填剤、特に水系
用液体クロマトグラフィー用充填剤或いはそれらの合成
用中間体として有用な、オキシラン環を有する多孔性架
橋重合体粒子の製造法に関する。

（従来の技術）従来、液体クロマトグラフィー用充填剤としては、■ス
チレンと架橋性単量体の共重合体ゲル〔ジェー・シー・
ムーア、ジャーナル・オブ・ポリマー・サイエンス（Ｊ
、　Ｃ，Ｍｏｏｒｅ、　Ｊ、　Ｐｏｌｙｍ。

Ｓｃｉ、　）、Ａ２．８３５　　（１９６４））、■ア
クリル酸エステル系単量体と架橋性単量体ポリアルキレ
ンゲリコールのポリアクリル酸エステルの共重合体ゲル
（特開昭５５−９９０６８号公報）、■ポリビニルアル
コールをエピクロルヒドリンで架橋したゲル（特開昭５
２−１３８０７７号公報）、■酢酸ビニルとトリアリル
イソシアヌレートの共重合体ゲルを加水分解したポリビ
ニルアルコールゲル（特開昭５７−３０９４５号公報）
、■アクリル酸エステル系単量体又はアクリルアミドと
架橋性単量体メチレンビスアクリルアミドの共重合体ゲ
ル（鈴木輝−他、日本化学会誌、１９７５．１７５６）
、■デキストランをエピクロルヒドリンで架橋したゲル
（特公昭４７−２１４０５号公部）１■シリカゲルやガ
ラス等の無機系ゲルを化学修飾したもの〔ニス・エイチ
・チャン、アール・ノニル、エフ・イー・レグニール、
アナリティカル・ケミストリー（Ｓ、　Ｈ，Ｃｈａｎｇ
　、　Ｒ，Ｎｏｅ１、Ｆ、　Ｅ、　Ｒｅｇｎｉｅｒ　、
　Ａｎａ１、　Ｃｈｅｍ、　）　　４８．１８３９（１
９７６））等が知られている。

更に、オキシラン環を有する液体クロマトグラフィー用
充填剤としては、■シリカゲルにＴ−グリシドキシプロ
ピルトリメトキシシランを反応させたもの〔ニス・エイ
チ・チャン、ケイ・エム・グツディング、エフ・イー・
レグニール、ジャーナル・オブ・クロマトグラフィー（
Ｓ、　Ｈ，Ｃｈａｎｇ　。

Ｋ、　Ｈ，Ｇｏｏｄｉｎｇ　、、　Ｆ、　Ｅ、　Ｒｅｇ
ｎｉｅｒ　、　Ｊ。

Ｃｈｒｏｍａ　ｔｏｇｒ、）、１２０．３２１（１９７
’６））、■グリシジルメタクリレートと架橋剤を含む
他の重合可能な単量体とを共重合させたゲル、粒子（特
開昭５３−１０８７号公報）等が知られている。

（発明が解決しようとする問題点） ■のゲルは、有機溶媒系では、優れた充填剤となり得る
が、水とのなじみが良くないため、水系では使用できな
い。■、■及び■のゲルは、若干疎水性が残っているた
め、被分離物質に疎水性があると、疎水性吸着を起こし
、分子ふるい分離を行う場合には、都合が悪い。

■及び■のゲルは、疎水性ではないが、機械的強度に乏
しく、高圧がかかる高速液体クロマトグラフィー用カラ
ム充填剤として用いることはできない。また、■のゲル
は、疎水性でなく、機械的強度もあるが、アルカリに弱
く、耐久性に劣るという欠点があった。

また、■のゲルは、アルカリに弱く、耐久性に劣るとい
う欠点があり、■のゲルは、オキシラン環の含量を増加
させると、機械的強度が低下し、機械的強度を保ったま
まで、多くのオキシラン環を導入することは困難であっ
た。

従って、本発明は、このような従来技術の欠点を解決し
、親水性、耐圧性及び耐アルカリ性を有し、液体クロマ
トグラフィー用充填剤或いは液体クロマトグラフィー用
充填剤合成用の中間体として有用な多孔性架橋重合体粒
子を提供することを目的とする。

（問題点を解決するための手段）本発明は、脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエー
テルに重合可能な二重結合を有するカルボン酸を付加反
応させて得られた重合可能な二重結合を１分子中に平均
して２個以上有する化合物を、必要に応じて他の重合可
能な二重結合を有する化合物と共に、非反応性有機溶媒
の存在下で水性懸濁重合させ、得られた多孔性架橋重合
体粒子にオキシラン環を有するアルキルハライドを反応
させてオキシラン環を導入し、このオキシラン環にオキ
シラン環を有する化合物をグラフト重合させ、更にオキ
シラン環を有するアルキルハライドを反応させてオキシ
ラン環を導入することを特徴とする親水性多孔性架橋重
合体粒子の製造法に関する。

本発明において、脂肪族多価アルコールのポリグリシジ
ルエーテルに重合可能な二重結合を有するカルボン酸を
付加させて得られた重合可能な二重結合を１分子中に平
均して２個以上有する化合物を用いるのは、グリシジル
基の開環により水酸基が生成し、この水酸基が重合体粒
子の親水性に寄与することと、１分子中に平均して２個
以上の重合可能な官能基を一つの化合物に導入できるた
め、これらが橋かけ剤となり、重合体粒子の耐圧性に寄
与するためである。上記重合可能な二重結合を有する化
合物は、平均して１分子中に３個以上の重合可能な二重
結合を有するのが好ましい。

本発明に用いられる脂肪族多価アルコールとしては、水
に可溶で、水酸基当量（分子四／水酸基数）が４０以下
のものが好ましい。水酸基当量が大きすぎると、親水性
が低下し、架橋密度も低下する。該アルコールとしては
、例えばエチレングリコール、ジエチレングリコール、
グリセリン、ジグリセロール、ポリグリセロール、ソル
ビット、マンニット、キシリフト、ペンタエリドリフト
が挙げられる。また、これらの多価アルコールの水酸基
の１分子当たり２個以上をグリシジルエーテル化したも
のを、脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテル
として用いる。このうち、水性懸濁重合して得られる多
孔性架橋重合体粒子の親水性及び耐圧性を考慮すると、
１分子当たりグリシジル基を３個以上有するものが好ま
しく、特にＣｂ　Ｈ＋　ａ　Ｏｂで示されるソルビット
：マンニット等の糖アルコールであって、その６個の水
１のうち１分子当たり平均して３個以上がグリシジルエ
ーテル化されたものが好ましい。

重合可能な二重結合を有するカルボン酸としては、メタ
クリル酸、アクリル酸、クロトン酸等の一塩基酸が好ま
しく、生成した粒子の耐アルカリ性を考慮すると、メタ
クリル酸が好ましい。

脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルと二重
結合を有するカルボン酸の反応は、触媒の存在下で５０
℃〜１５０℃で５時間以上行うことにより進行する。

ここで用いられる触媒としては、ピリジン、トリエチル
アミン、トリエチレンジアミン、ヘンシルジメチルアミ
ン、トリブチルアミン、トリス（ジメチルアミノ）メチ
ルフェノール等の五級アミン、トリエチルベンジルアン
モニウムクロリド、テトラメチルアンモニウムクロリド
等の四級アンモニウム塩、２−メチル−４−エチルイミ
ダゾール、２−メチルイミダゾール等のイミダゾール類
等であり、二重結合を有するカルボン酸に対して０．０
１〜１０モル％使用される。

本反応に用いられる溶媒としては、反応試薬をすべて溶
解するものであれば特に制限はないが、ジメチルスルホ
キシド、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルアセトアミド等の極性溶媒が好ましい。

脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルと二重
結合を有するカルボン酸は、前者のグリシジル基の当量
数（Ａ）と、後者のカルボキシル基の当量数（Ｂ）が、
＜Ａ）／　（Ｂ）でＩｌｏ、５〜１　／　１．５になる
ように配合されるのが望ましい。

必要に応じて他の重合可能な二重結合を有する化合物、
例えば、アクリル酸系単量体及びその他のビニル系単量
体を使用することができる。

アクリル酸系単量体としては、アクリル酸又はメタクリ
ル酸の誘導体がある。誘導体としては、アクリル酸メチ
ル、アクリル酸エチル、アクリル酸ブチル、アクリル酸
ラウリル等のアクリル酸アルキルエステル、メタクリル
酸メチル、メタクリル酸エチル、メタクリル酸ブチル、
メタクリル酸ラウリル等のメタクリル酸アルキルエステ
ル、アクリル酸２−ヒドロキシエチル、アクリル酸２−
ヒドロキシプロピル、アクリル酸ヒドロキシブチル等の
アクリル酸ヒドロキシアルキルエステル、トリメチロー
ルプロパン、トリメチロールエタン、テトラメチロール
メタン等の多価アルコールのアクリル酸モノエステル、
ジエステル又はトリエステル、ポリエチレングリコール
モノアクリレート、ポリプロピレングリコールモノアク
リレート等のポリアルキレングリコールのアクリル酸モ
ノエステル、ジエステル又はトリエステル、メタクリル
酸２−ヒドロキシエチル、メタクリル酸２−ヒドロキシ
プロピル、メタクリル酸ヒドロキシブチル等のメタクリ
ル酸ヒドロキシアルキルエステル、トリメチロールプロ
パン、トリメチロールエタン、テトラメチロールメタン
等の多価アルコールのメタクリル酸モノエステル、ジエ
ステル又はトリエステル、ポリエチレングリコールモノ
アクリレート、ポリプロピレングリコールモノメタクリ
レート等のポリアルキレングリコールのメククリル酸モ
ノエステル又はジエステル、ジエチルアミノエチルアク
リレート等のジアルキルアミノアルキルアクリレート、
ジエチルアミノエチルメタクリレート等のジアルキルア
ミノアルキルメタクリレート、アクリルアミド、メタク
リルアミド、グリシジルアクリレート、グリシジルメタ
クリレート等、更に上記のアクリル酸ヒドロキシアルキ
ル、上記のメタクリル酸ヒドロキンアルキル、上記の多
価アルコールのアクリル酸モノエステル、上記の多価ア
ルコールのメタクリル酸モノエステル、上記のポリアル
キレングリコールのアクリル酸モノエステル及び上記の
ポリアルキレングリコールのメタクリル酸モノエステル
のメチルエーテル、エチルエーテル、プロピルエーテル
、ブチルエーテル、ペンチルエーテル等のアルキルエー
テル等がある。

トリス（β−ヒドロキシエチル）イソシアヌレートのア
クリル酸モノエステル、ジエステル又はトリエステル、
同様のメタクリル酸のモノエステル、ジエステル又はト
リエステルも使用できる。

アクリル酸系単量体以外のビニル系単量体としては、マ
レイン酸、フマール酸、イタコン酸及びこれらのアクリ
ル酸又はメタクリル酸誘導体と同様の誘導体、ビニルピ
リジン、ビニルピロリドン、酢酸ビニル、アクリロニト
リル、スチレン又はクロロスチレン、クロロメチルスチ
レン、ビニルトルエン、エチルビニルベンゼン、α−メ
チルスチレン、ジビニルベンゼン等のスチレンｍ’Ａ体
等がある。

脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルに重合
可能な二重結合を有するカルボン酸を付加反応させて得
られた重合可能な二重結合を有する化合物以外の重合可
能な二重結合を有する化合物としては、液体クロマトグ
ラフィー用充填剤の用途等を考慮して適宜決めればよい
。

やや疎水性の充填剤を得るためには、スチレン、ジビニ
ルベンゼン、メタクリル酸ラウリル等の疎水性の単量体
を併用するのが好ましく、逆に親水性の充填材を得るた
めには、ポリアルキレングリコールのアクリル酸エステ
ル、テトラメチロールメタントリアクリレート等の親水
性単量体を併用することが好ましい。

脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルに重合
可能な二重結合を有するカルボン酸を付加反応させて得
られた重合可能な二重結合を有する化合物（Ｃ）と、そ
れ以外の重合可能な二重結合を有する化合物（Ｄ）の量
は、生成した重合体粒子の親木性及び耐圧性を考慮する
と、重量比で（Ｃ）／　（Ｄ）１００１０〜５０１５０
になるようにするのが好ましい。

本発明においては、このような重合可能な二重結合を有
する化合物〔前記（Ｃ）＆び（Ｄ）〕を非反応性有機溶
媒の存在下に水性媒体中で懸濁重合させる。

非反応性有機溶媒としては、トルエン、ジエチルベンゼ
ン、ドデカン、イソプロピルアルコール、イソアミルア
ルコール、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等が
ある。これらの使用量は、前記二重結合を存する化合物
の総量に対して５０〜３００重量％であるのが好ましい
。非反応性有機溶媒が少なすぎると、得られる粒子を多
孔性にし難（なり、多すぎると、得られる粒子の空隙率
が大きくなり、耐圧性に乏しくなる。

非反応性有機溶媒の添加時期は、反応前にすべて添加す
るか又は重合率が２０重量％に達するまでに添加するの
が好ましい。添加方法としては、分割して行ってもよい
。

上記懸濁重合において使用するため好適な重合開始剤と
しては、過酸化ベンゾイル、過酸化ジクロロベンゾイル
、ジクミルペルオキシド、ジー第３−ブチルペルオキシ
ド、２．５−ジ（ペルオキシベンゾエート）ヘキシン−
３，１，３−ビス（第３−ブチルペルオキシイソプロビ
ル）ベンゼン、過酸化ラウロイル、第３−ブチルペルア
セテート、２，５−ジメチル−２，５−ジ（第３−ブチ
ルペルオキシ）ヘキシン−３，２，５−ジメチル−２，
５−ジ（第３−ブチルペルオキシ）ヘキサン及び第３−
プチルペルベンゾエ−１・、メチルエチルケトンペルオ
キシド、メチルシクロヘキサノンペルオキシド等の有機
過酸化物、アゾビス−イソブチロニトリル及びジメチル
アゾジイソブチレート等のアゾ系化合物があり、これら
の一種又は二種以上を使用できる。この使用量はビニル
系単量体の種類及び得られる重合体の目的とする分子量
により決められるものであるが、好ましくはビニル系単
量体に対して０．１〜４．０重量％使用される。

また、前記′Ａ！、ｉ重合において、分散剤として難溶
性燐酸塩、水溶性高分子保剃コロイド等を重合系に添加
することができる。

難溶性燐酸塩としては、燐酸三カルシウム、燐酸マグネ
シウム等がある。高分子保護コロイドとしては、ポリビ
ニルアルコール、アルキルセルロース、ヒドロキシアル
キルセルロース、カルボキシアルキルセルロース等の水
溶性セルロース誘導体、ポリアクリル酸ナトリウム等が
ある。難溶性燐酸塩は、重合系に存在する物質全量に対
して０．０１重量％以上、水溶性高分子保護コロイドは
ｌＯ〜ｏ、ｏｏｌａ量％の範囲で使用されるのが好まし
い。

その他、陰イオン系界面活性剤、硫酸ナトリウム、塩化
ナトリウム等の水溶性無機塩等の助剤を使用することが
できる。

オキシラン環を導入するため、水性懸濁重合して得られ
た多孔性架橋重合体粒子に反応させるオキシラン環を有
するアルキルハライドとしては、エピクロルヒドリン、
エビブロモヒドリン、エビフルオルヒドリン、エビヨー
ドヒドリンが挙げられる。これらの化合物は、水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウム等の水酸化物の存在下で、ジ
メチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、
Ｎ、Ｎ−ジメチルアセトアミド等の極性溶媒中で多孔性
架橋重合体粒子を膨潤させて反応させる。

オキシラン環を有するアルキルハライドは、良く乾燥し
た多孔性重合体粒子１ｇ当たり１０−４モル以上使用す
るのが好ましい。

水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化物は、オ
キシラン環を有するアルキルハライドと等モル以上あれ
ば良く、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアセトアミド等の極性溶媒
は、反応系を攪拌できるのに充分な量あれば良く、特に
制限はない。

反応は３０〜１００℃の範囲で１時間以上行う。

このようにして得られるオキシラン環を有する多孔性架
橋重合体粒子は、該粒子１ｇ当たり、オキシラン基を０
．１〜２ｍｅｑ有するように調整されるのが好ましい。

この値が小さすぎる七、次の工程において、オキシラン
環を有する化合物を充分グラフトさせることができず、
多すぎるオキシラン環の導入は困難である。

なお、水性懸濁重合して得られた多孔性架橋重合体粒子
のオキシラン環を有するアルキルハライドとの反応点は
、主に該粒子中に存在する水酸基である。

オキシラン環が導入された多孔性架橋重合体粒子にグラ
フト重合させる、オキシラン環を有する化合物としては
、充分な親水性を有することが必要であり、親水性基、
ずなわら水酸基やエーテル基を多く含有しているものが
望ましく、また、共重合反応によって、細孔表面が親水
性の側鎖で覆われるように一定数以上のオキシラン環を
有している必要がある。

また、分子量が大きすぎると、多孔性架橋重合体粒子内
の細孔容積を減少させるので、好ましくない。

このため、本発明に使用する、オキシラン環を有するＪ
ヒ合物としては、水への溶解度が２ｇ／１００−水（２
５℃）以上であり、分子量１０００以下で、かつエポキ
シ基当量（分子量／オキシラン環の数）が３００以下の
ものが好ましく、例えばエチレンオキシド、グリシドー
ル、１，２，３゜４−ジェポキシブタン、ジグリシジル
エーテル、エチレングリコール（モノ−若しくはジ）グ
リシジルエーテル、グリセリンポリグリシジルエーテル
、ソルビットポリグリシジルエーテル、ジグリセロール
ポリグリシジルエーテル、ポリエチレングリコール（モ
ノ−若しくはジ）グリシジルエーテル（ポリエチレング
リコールの重合度９以下）、ポリプロピレングリコール
（モノ−若しくはジ）グリシジルエーテル（ポリプロピ
レングリコールの重合度３以下）、１．４−ブタンジオ
ール（モノー若しくはジ）グリシジルエーテル、１．３
−プロパンジオール（モノ−若しくはジ）グリシジルエ
ーテル等が挙げられる。

これらの化合物のグラフト量は、前記のオキシラン環が
導入された多孔性架橋重合体粒子１ｇに対して０．０５
〜１ｇになるように調整されるのが好ましい。グラフト
量が多すぎると、最終的に得られた粒子の膨潤度が増し
、該粒子をカラムに詰めて分析を行う場合にカラム圧を
高くしなければならず、該粒子の破壊が起こりやすくな
る。グラフト量が少なすぎると、オキシラン環を有する
化合物をグラフトさせることによる親水性の付与効果が
小さくなる。

グラフト重合に使用される触媒としては、硫酸、塩酸、
過塩素酸、燐酸等のプロトン酸、三弗化硼素、三弗化硼
素エーテラート、四弗化硼素亜鉛等のルイス酸及び塩化
第一錫、塩化第二錫、四塩化チタン、塩化アルミニウム
等の金属ハロゲン化物等が挙げられるが、特に三弗化硼
素エーテラートが好ましい。また、触媒の使用量は、オ
キシラン環を存する化合物に対して０．０１〜３０重量
％であるのが好ましい。

グラフト重合を実施する際には、溶媒の存在は必須では
ないが、表面の均一性や操作性の点から、通常、溶媒の
存在下で反応を行う方が有利である。

溶媒としては、多孔性架橋重合体粒子やオキシラン環を
有する化合物に対して不活性であればよく、脂肪族又は
脂環式のエーテル類、ケトン類、エステル類、炭化水素
類、ハロゲン化炭化水素類、ニトリル類、スルホキシド
類等を挙げることができる。特に好ましい溶媒としては
、エチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエー
テル、エチレングリコールジブチルエーテル、テトラヒ
ドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル類、１゜
２−ジクロロエタン、１，４−ジブロモエタン、１．２
−ジクロロプロパン、１，１．２−トリクロロエタン等
のハロゲン化炭化水素類、ジメチルスルホキシド等のス
ルホキシド類等を挙げことができる。

グラフト重合は、低温でも反応速度が速いものもあるが
、一般には、低温では反応速度が遅くなり、実用性に乏
しく、逆に高温では、種々の副反応が起こり、吸着性に
対して好ましくないので、−２０°Ｃ〜２００℃の温度
範囲で行う。最適な反応温度は、オキシラン環を有する
化合物の種類、溶媒の種類、触媒の種類等によって選択
されるが、通常、０〜１５０°Ｃの範囲である。

グラフト重合した多孔性架橋重合体粒子に更にオキシラ
ン環を導入するため反応させる、オキシラン環を有する
アルキルハライドは、前記のエピハロヒドリンであって
よい。オキシラン環を有するアルキルハライドは、前記
の多孔性架橋重合体粒子との反応と同様の方法及び反応
条件で、グラフト重合体粒子に反応させる。

この場合、オキシラン環を有するアルキルハライドは、
最終的に得られる多孔性架橋重合体粒子が、該粒子１ｇ
当たり、グリシジル基が０．１〜２ｍｅｑになるように
反応させられる。この値が小さずぎると、オキシラン環
を有するアルキルハライドを反応させることによる反応
基の導入が不充分となり、多すぎる導入は困難である。

以上のようにして得られた球状粒子は、粒径ｌ〜５０μ
ｍ、好ましくは１〜１５μｍに分級し、ゲルパーミェー
ションクロマトグラフィー用又は分配吸着型クロマトグ
ラフィー用充填剤として使用することができる。更に、
酸処理してオキシラン環を開環させたり、オキシラン環
を有する化合物をグラフトさせたり、イオン交換基、長
鎖アルキル基、アフィニティリガンド等を導入して、充
填剤としての性質を変えたり、アフィニティクロマトグ
ラフィーやイオン交換クロマトグラフィー用担体として
も使用することもできる。

（作用）脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルに二重
結合を有するカルボン酸を付加させて得られた二重結合
を有する化合物は、グリシジル基の開環により親水性を
付与する水酸基が存在し、また、二重結合を多く導入で
き、従って上記化合物より合成した重合体粒子は、親水
性及び耐圧性を兼ね備えたものとなる。

また、オキシラン環を有する化合物をグラフト重合させ
ることにより、更に親水性を増加させることができる。

更に、最終的にオキシラン環を有するアルキルハライド
を反応させることにより、架橋重合体粒子中にオキシラ
ン環を導入できる。このオキシラン環は、イオン交換体
、アフィニティクロマトグラフィー用担体の前駆体等と
して有効である。

（実施例）次に、実施例に基づいて本発明を詳述するが、本発明は
これに限定されるものではない。

実施例１（１）脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテル
に重合可能な二重結合を有するカルボン酸を付加反応し
て得られた二重結合を有する化合物（以下、エポキシメ
タクリレートと称する）の合成ソルビットポリグリシジルエーテル（エポキシ当１：１
７０、平均分子量６３２．１分子当たりのグリシジル基
は平均して３．７２個、商品名ブナコールＥＸ−６１１
、ナガセ化成製）１０００ｇ。

メタクリル酸５０６　ｇ、ピリジン５ｇ、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド１５００ｇ及びブチルヒドロキシトル
エン５ｇを攪拌羽根及び温度調節機を付けたガラスフラ
スコ中に仕込み、８０℃で反応を約６時間続けて反応を
停止した。このときのメタクリル酸の残存量はガスクロ
マトグラフィーで測定したところ、メタクリル酸の仕込
み量の８重量％であった。この反応液中のジメチルホル
ムアミドをロータリーエバポレータで減圧下に留去し、
残渣に酢酸エチル３０００ｇを加え、不溶物を口利した
。０．２Ｍの硫酸ナトリウムを含む０．ＩＮ水酸化ナト
リウム水溶液１０００ｇで酢酸エチル溶液を３回抽出洗
浄し、次いで０．２　Ｍの硫酸ナトリウムを含む０．　
Ｉ　Ｎ塩酸ｔｏｏｏｇで酢酸エチル溶液を３回抽出洗浄
した。酢酸エチル溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥した
後、減圧下で酢酸エチルを留去した。得られたエポキシ
メタクリレートは、１分子当たり平均して重合可能な二
重結合を３．３個存するものであった。

（２）重合体粒子の製造無水硫酸ナトリウム３３ｇ及びポリビニルアルコール（
重合度１５００）２０ｇを水２０００顎に溶解し、これ
にエポキシメタクリレート２００ｇ１イソアミルアルコ
ール１００ｇ、酢酸ブチル１００ｇ及びアゾビスイソブ
チロニトリル１．０ｇを仕込み、ホモミキサーを使用し
て高速撹拌下に室温で１分間、混合し、その後、ｆｉＪ
ｌの攪拌釜に移して、８０’Ｃで７時間反応させ、有機
溶媒に不溶な多孔性架橋重合体粒子を得た。

（３）オキシラン環の導入（２）で合成し、８〜１５μｍに分級したゲル粒子２５
ｇ、エピクロルヒドリン１７４　ｇ、ジメチルスルホキ
シド２２５　ｒｎＥ及び３０％水酸化ナトリウム水溶液
１８ｇを１１のフラスコに仕込み、４０℃で６時間反応
させた。反応後、口過してゲルを集め、順次、ジメチル
スルホキシド、水及びアセトンで洗浄して、オキシラン
環を有する多孔性架橋重合体粒子を得た。

塩酸・塩化カルシウム法でオキシラン環を定量したとこ
ろ、１．１　ｍｅｑ／　ｇ粒子であった。

（４）グラフト重合（３）で合成したオキシラン環を有する多孔性架橋重合
体粒子５０ｇ、エチレングリコールジグリシジルエーテ
ル（水への溶解度Ｌｏｇ／１００−水、２５℃）５０ｇ
、三弗化硼素エチルエーテル錯体５−及び１，４−ジオ
キサン５００ｇを１１のフラスコに仕込み、８０℃で５
時間反応させた。反応後、生成粒子を口過して集め、順
次、１゜４−ジオキサン及びアセトンで洗浄し、６０℃
で３時間、減圧乾燥した。得られた多孔性架橋重合体粒
子の収量は５８．７　ｇであった。この粒子について、
塩酸・塩化カルシウム法でオキシラン環を定量したとこ
ろ、０．１　ｍｅｑ／　ｇ粒子であった。

（５）オキシラン環の導入（４）で合成した多孔性架橋重合体粒子を８〜１５μｍ
に分級したちの２５ｇ、エピクロルヒドリン１７４ｇ、
ジメチルスルホキシド２２５ｍ１及び３０％水酸化ナト
リウム水溶液１８ｇを１１のフラスコに仕込み、４０℃
で６時間反応させた。

反応後、口過して粒子を集め、ジメチルスルホキシド、
水及びアセトンで順次、洗浄した。このようにして得ら
れた多孔性架橋重合体粒子は、塩酸・塩化カルシウム法
でオキシラン環を定量したところ、０．７　ｍｅｑ／　
ｇ粒子であった。

こうして得られた粒子をふるい分けして８〜１５、ｃｚ
ｍの粒度とし、直径８．０　ｇｍ、高さ３００　Ｉｎの
ステンレンカラムに充填した。このカラムを用いて蛋白
質、アミノ酸の測定を行った。測定条件は、移動相に０
．５　Ｍの塩化ナトリウムを含む２０ｍＭｆｉ酸緩衝液
（ｐＨ７）、流Ｉｔ　１．０　ｍｌ　７分、温度は２５
℃とし、検出器には、ＵＶ検出器（２８０ｎｍ）を使用
した。

蛋白質（チログロブリン、γ−グロブリン、牛血清アル
ブミン、α−キモトリプシノーゲン、チトクロームＣ１
インシユリン、β−アラニン）の分子量と溶出容量との
関係を示した較正曲線を第１図に示した。符号１〜８は
、順次、上記記載順の物質のプロットを示す。

応用例１実施例１で合成したオキシラン環を有する多孔性架橋重
合体粒子３ｇ及びコンカナバリンＡ３０ｍｇを２Ｍ炭酸
カリウム緩衝剤（ｐＨ１０）　　５０ｍｌ中に懸濁する
。改めて、ｐＨを１０に調整し直し、６日間放置する。

口過後、直径４．５ｍｍＸ　１５０ｍｍのステンレスカ
ラムに充填した。このカラムを用いて、Ｄ−グルコース
、Ｄ−マンノースを分析した結果を第２図及び第３図に
それぞれ示す。第２図及び第３図において、ピーク９は
β−Ｄ−グルコース、ピーク１０はα−Ｄ−グルコース
、ピーク１１はβ−Ｄ−マンノース及びピーク１２はα
−Ｄ−マンノースである。測定条件は、流量Ｑ、　５　
ｍ１７分、温度は２５℃、移動相は１０ｍＭｊ：′ｊＰ
酸緩衝液（ｐＨ７，１）、検出器は示差屈折計である。

コンカナバリンＡを固定化する以前の多孔性架橋重合体
粒子を直径４．６１ｍｘＬ５０ｆｌのステンレスカラム
に充填し、同じ条件で分析した場合、Ｄ−グルコースも
、Ｄ−マンノースもピークは１木しか出す、コンカナバ
リンＡのアフィニティが働いていないことが判る。

応用例２実施例１で最終的に合成したオキシラン環を有する多孔
性架橋重合体粒子１０ｇを１０％ジエチルアミン水溶液
１００社中に懸濁させ、４０℃で５時間反応させた。口
過後、直径８．０龍、高さ１００ｎのステンレンカラム
に充填した。このカラムを用いて、トリプシンインヒビ
ターと卵白アルブミンを分離した。溶出は、２０ｍＭト
リス−塩酸緩衝液（ｐ）Ｉ　８　）中での塩化ナトリウ
ムの濃度０から０．５Ｍへの４０分間直線勾配溶出とし
、流量１．０　ｍｌ　７分、温度は２５℃とし、検出器
には、ＵＶ検出器（２８０ｎｍ）を使用した。

トリプシンインヒビター（ピーク１３）と卵白アルブミ
ン（ピーク１４）のイオン交換クロマトグラムを第４図
に示した。

（発明の効果）本発明によれば、耐圧性及び親水性に優れた多孔性球状
粒子が得られる。本発明により得られる多孔性架橋重合
体粒子は、液体クロマトグラフィー用充填剤又は液体ク
ロマトグラフィー用充填剤合成用の中間体として好適で
ある。

【図面の簡単な説明】

第１図は、実施例１において測定した較正曲線、第２図
は、応用例１のＤ−グルコースのアフイニティクロマト
ダラム、第３図は、応用例１のＤ−グルコースのアフィ
ニティクロマトグラム、第４図は応用例２のトリプシン
インヒビターと卵白アルブミンのイオン交換クロマトグ
ラムである。符号の説明ｌ・・・チログロブリン２・・・γ−グロブリン３・・・牛血清アルブミン４・・・卵白アルブミン５・・・α−キモトリプシノーゲン６・・・チトクロームＣ７・・・インシュリン８・・・β−アラニン

Claims

【特許請求の範囲】１、脂肪族多価アルコールのポリグリシジルエーテルに
重合可能な二重結合を有するカルボン酸を付加反応させ
て得られた重合可能な二重結合を１分子中に平均して２
個以上有する化合物を、必要に応じて他の重合可能な二
重結合を有する化合物と共に、非反応性有機溶媒の存在
下で水性懸濁重合させ、得られた多孔性架橋重合体粒子
にオキシラン環を有するアルキルハライドを反応させて
オキシラン環を導入し、このオキシラン環にオキシラン
環を有する化合物をグラフト重合させ、更にオキシラン
環を有するアルキルハライドを反応させてオキシラン環
を導入することを特徴とする親水性多孔性架橋重合体粒
子の製造法。２、脂肪族多価アルコールがＣ＿６Ｈ＿１＿４Ｏ＿６で
示される糖アルコールである特許請求の範囲第１項記載
の架橋重合体粒子の製造法。３、重合可能な二重結合を有するカルボン酸がメタクリ
ル酸である特許請求の範囲第１項又は第２項記載の架橋
重合体粒子の製造法。４、オキシラン環を有する化合物が水への溶解度が２ｇ
／１００ｍｌ水（２５℃）以上であり、分子量１０００
以下で、エポキシ当量（分子量／オキシラン環の数）が
３００以下の化合物である特許請求の範囲第１項、第２
項又は第３項記載の架橋重合体粒子の製造法。