JPS6377823A

JPS6377823A - 抗癌剤

Info

Publication number: JPS6377823A
Application number: JP61222998A
Authority: JP
Inventors: Daijiro Hagiwara; 萩原　大二郎; Shinji Hashimoto; 眞志橋本; Masahiro Kei; 正博閨; Masakuni Okuhara; 正國奥原; Kozo Nakamura; 中村　光三; Koichi Rikimaru; 力丸　浩一
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1986-09-19
Filing date: 1986-09-19
Publication date: 1988-04-08

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】「産業上の利用分野Ｊこの発明の下記式（■〜■）で示される化合物およびそ
の医薬として許容きれる塩は抗癌作用を有し、医薬とし
て有用である。

「従来の技術。

下記式（Ｉ）で示きれる化合物は公知化合物（例えば、
特開昭６０−２４８６９９号公報に記載）であるが抗癌
作用を有することは知られていない、又、下記式（ＩＦ
）で示される化合物はＭｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｐｈａｒｍ
ａｃｏｌｏｇｙ、　１７．３１４−３２０　（１９８０
）により公知であるが合成法も抗癌作用を有することも
知られていない、さらに下記式（ＩＩＩ）の化合物は新
規化合物である。

「発明が解決しようとする問題点」この発明は侵れた抗癌剤の開発を意図してなされたもの
である。

ｒ問題点を解決するための手段」この発明は、下記式（Ｉ〜■）で示される化合物群から
選択された化合物またはその医薬として許容される塩を
有効成分として含有することを特徴とする抗癌剤に関す
る。

この発明の有効成分である化合物は次の式１式％（以下、ｈ−ＥＧＦと略称する）Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−ＯＨ（以下、ｈ−ＥＧＦ（１−４７＞と略称する）５ｎ−Ｏ
Ｈ（以下、ｈ−ＥＧＦ（６−３２＞と略称する）この発明
のｈ−ＥＧＦは、通常のヒトの十二指腸および唾液腺で
合成されるポリペプチドホルモンとして知られ、特開昭
６０−２４８６９９号公報には全合成法が記載きれてい
る。

ｈ−ＥＧＦ（１−４７＞はｈ−ＥＧＦのＮ末端のほうか
ら数えて１番＠〜４７番目までのアミノ酸を有するポリ
ペプチドであり、Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ。

１７、３１４−３２０　（１９８０）に記載された公知
化合物である。しかしながら本願発明者等によって初め
て合成によって製造きれた化合物である。

ｈ−ＥＧＦ（６−３２＞はｈ−ＥＧＦのＮ末端のほうか
ら数えて６番目〜３２番目までのアミノ酸を有するポリ
ペプチドであり、本願発明者等によって初めて合成きれ
た新規化合物である。

本発明のｈ−ＥＧＦ、　ｈ−ＥＧＦ（１−４７＞および
ｈ−ＥＧＦ（６−３２）の医薬として許容される塩とし
ては、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、
カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウ
ム塩等）、アンモニウム塩、エタノールアミン塩、トリ
エチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩等の無機ま
たは有機塩基との塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオ
ロ酢酸塩、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、りん酸塩等の有機
または無機酸との酸付加塩等が挙げられる。

なお、本明細書中に記載の略記号は次の意味を有する。

Ａｓｎ　：アスパラギンＳｅｒ　：セリンＡｓｐ　：アスパラギン酸Ｇｌｕ　：グルタミン酸Ｃｙｓ　ニジスティンＰｒｏ　ニブロリンＬｅｕ　：ロイシン、　Ｈｉｓ　：ヒステジンｃｘｙ　ニゲリシンＴｙｒ　：チロシンＶａｌ　：バリンＭｅｔ　：メチ才二ン１１ｅ：インロイシンＡｌａ　：アラニンＬｙｓ　：リジンＡｒｇ　：アルギニンＧｉｎ　：グルタミンＴｒｐニトリブトファンＡｃｍ　：アセトアミドメチルＢｚｌ：ベンジル０ｃＨｅｘ　；シクロヘキシルエステル０Ｂｚｌ　：ベ
ンジルエステルＣｌ２ＢＺ１　：　２．６−ジクロロベンジルＣＩＺ：
ｏ−クロロベンジルオキシカルボニルτＯｓニドシルＰａｃ　：フエナシルＢｏｃｓｔ−ブトキシカルボニルなお、本願明細書中の各アミノ酸はＬ型化合物である。

この発明の抗癌剤は、癌の治療を目的として種々の製剤
組成物の形態で使用される。種々の製剤組成物とはｈ−
ＥＧＦ、　ｈ−ＥＧＦ（１−４７＞またはｈ−ＥＧＦ（
６−３２）またはそれらの医薬として許容きれる塩を有
効成分とし、これに医薬上許容諮れる担体、例えば経口
もしくは非経口の有機もしくは無機、固体または液体の
賦形剤を加えた製剤の形としたものであって、そのよう
な製剤としてはカプセル、錠剤、顆粒剤などの固体製剤
および液剤、けんだく剤、乳剤などの液体製剤のほか層
剤などが含まれる。きらに必要に応じて前記製剤中に補
助剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝液、その他繁用さ
れる添加剤を含有きせることができる。

ｈ−ＥＧＦ、　ｈ−ＥＧＦ（１−４７）またはｈ−Ｅｃ
Ｆ（６−３２）またはそれらの塩の投与量は投与方法、
患者の年令、状態、疾病の種類および病状により異なり
、特に限定きれないが、例えば静脈内注射では１日当り
、体重１ｋｇにつき０．００１〜１ｍｇ、筋肉内注射で
は１日当り、体重１ｋｇにつき０．０１〜１ｍｇの量を
投与すれば、癌の治療に有効である。１回の投与量は、
例えば静脈内注射では０．０１〜５０ｍｇ、筋肉内注射
では０．１〜ｂ次に本願化合物の抗癌作用を試験例によって説明する。

［試験例コ（１）ヒト扁平上皮癌に対するｉｎ　ｖｉｔｒｏ増殖抑
制効果：に験迭ヒト扁平上皮癌細胞株（Ｃａ−９−２２、Ａ４３１．　
Ｈ５Ｃ−２、ＮＡ、　Ｔｌ−２、Ｔｌ−４、Ｔｌ−９）
を９６穴組織培養プレートにて培養する。培養は各大当
り４×１０３個の細胞を１０％ウシ胎児血清を加えたダ
ルベツコ改変イーグル最小必須培地２００鴻に懸濁し、
５％炭酸ガス、１００％湿度、３７℃にて培養した。２
４時間後、薬物を所定の濃度に培地に溶解し、その５Ｏ
Ｎを各穴にくわえた。薬物添加３．５．７日後に細胞数
を測定した。算定法はＭＴＴ［３−（４，５−ジメチル
−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テト
ラゾリウム　ブロミドコ法を用いた。すなわち、各穴に
５０４の３１１Ｉｇ／　ｍＱのＭＴＴを添加し４時間３
７℃で培養したのち、培地を陣去し、１００−の０，０
４規定の塩酸を含むイソプロパツールを添加し５５０ｎ
ｍの吸光度を測定した。

癌細胞に対する増殖抑制効果を、薬物投与における５５
０ｎｍの吸光度（０，Ｄ、５５ｏ）の対照（薬物無投与
）における５５０ｎｍの吸光度〈ｏ”　、５５０　ｃｏ
ｎｔｒｏｌ）に対する百分率（ｏ”　’５５０／”　Ｄ
、５５０　ｃｏｎｔｒｏｌ×１００）で示した。

植困表１表２表３表４表５表６（２）ヒト扁平上皮癌に対するｉｎ　ｖｉｖｏ増殖抑制
効果：区に基ヒト扁平上皮癌細胞株Ａ４３１をｂａｌｂ／ｃ　ｎｕ／
ｎｕマウスの皮内にて継代移植してできた癌塊を１．５
ｃｍ角に細切し、トロカ針でｂａｌｂ／ｃ　ｎｕ／ｎｕ
マウス（７週令、メス、体重約２０ｇ）の側腹部に移植
した。移植１２日後から毎日（１０日目金除く）、０．
６６７ｍｇ／　ｎｉｌになるようにリン酸緩衝生理食塩
水に溶解したｈ−ＥＧＦ溶解液（３０Ｐ１１）またはリ
ン酸緩衝生理食塩水（３０４）を癌塊内に投与した。

移植後適当な日に皮膚外よりノギスを用いて癌の大きさ
を測定した。

計算方法表７次にこの発明の抗癌剤の有効成分であるｈ−ＥＧＦ（１
−４７＞およびｈ−ＥＧＦ（６−３２）の製造例を以下
に示製ＪＣｉ上（１）　Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ
　（１７，２８ｇ　）をトリフルオロ酢酸（１５０ｍ１
　）に溶解し、冷却下３０分間攪拌する０反応液を減圧
下に濃縮後５．３Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（６，
６ｍりを加え、室温下２０分間攪拌し、濃縮後ジエチル
エーテルを加えて粉末化し、濾取して、）ｌ−Ｃｙｓ（
Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（９，６１ｇ）を
得る。

（２）　Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩ
Ｚ）−Ｉｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−ｏＨ（５，Ｏ
Ｏｇ　）、Ｈ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの
塩酸塩（２，１５ｇ）および１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール（０，７３９ｇ　）をＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド（８０誠）に溶解し、Ｎ−エチル−Ｎ’　　−（
３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（０，８
５ｇ）のＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＡ）溶液
を一５℃にて１０分間で滴下し、−５〜０℃で６時間５
℃で終夜攪拌する。

反応液を濃縮し、０．５Ｎ塩酸を加えて粉末化し濾取し
た後、０．５Ｎ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液お
よび水で順次洗浄して、１３ｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ
）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌ
ａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（６，５２
ｇ　）を得る。

（３）　Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩ
Ｚ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（６，４０ｇ　）をアニソー
ル（７ｍＱ）を含むトリフルオロ酢酸（６０ｍ１１　）
に溶解し、水冷下３０分間攪拌した後濃縮する。残渣に
５．３Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（１７４ｒｎｆＬ
）を加え、再び濃縮し、ジエチルエーテルで粉末化して
、　Ｈ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔ
ｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａ　１　ａ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ
　）−Ａｓｎ−ＯＢｚ　１の塩酸塩（５，８７ｇ）を得
る。

（４）　Ｂｏｃ−Ｖａｔ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−
Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）
−Ａｌａ−Ｌｅｕ−ＯＰａｃ　（１０，０ｇ　）および
アントラニル酸（９゜２７ｇ）をＮ−メチルピロリドン
（１００ｍ１１　）に溶解し、ピリジン（３０ｍｍ　）
を加えたのち、窒素気流下５０℃で亜鉛末（Ｌｏｇ）を
加え、同温で２時間攪拌後濾過する。濾液を濃縮後０．
５Ｎ塩酸（５００ｍｆｔ　）を加えて粉末化、濾取し、
０．５Ｎ塩酸、水およびジエチルエーテルで順次洗浄し
て、Ｂｏａ−Ｖａｔ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙ
ｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａ
ｌａ−Ｌａｕ−ＯＨ（８，８４ｇ）を得る。

（５）　ＢｏＣ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−
Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１＠−Ｇｌｕ（ＯＢ＊１）
−Ａｌａ−Ｌｅｕ−ＯＨ（５，９８ｇ　）、Ｈ−Ａｓｐ
（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−ｒｙｒ（Ｃ１２Ｂ
ｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ
の塩酸塩（ｓ、ｓｏｇ）および１−ヒドロキシベンゾト
リアゾール（０，６５３ｇ）をＮ−メチルピロリドン（
１１０ｆｆＬＩＩ　）に溶解し、Ｎ−エチル−Ｎ′＝（
３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（０，７
５ｇ）のＮ−メチルピロリドン（１０ｍｍ　）溶液を一
５°Ｃにて滴下し、−５〜０℃で１０時間攪拌後５℃で
終夜攪拌する。反応液を濃縮し、０．５Ｎ塩酸を加えて
粉末化し濾取した後、０．５Ｎ塩酸、水、炭酸水素ナト
リウム水溶液、水および酢酸エチルで順次洗浄して、Ｂ
ｏｃ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｉｙｒ（Ｃ
１２Ｂｚｌ）−１１ａ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−
Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−
Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−
Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（１１，４７ｇ　）を得る。

（６）　Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−
Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　
）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（
ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（
Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（１１，Ｏｇ　）、トリ
フルオロ酢酸（９０１！１Ｑ　）およびアニソール（１
０ｍ１１　”）の混合物を水冷下３０分間攪拌した後濃
縮する。残渣に５．３Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（
１゜６戚）で処理後再び濃縮し、ジエチルエーテルで粉
末化した後濾取して、Ｈ−Ｖａｔ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−
Ｍａｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）（１ａ−Ｇｌｕ　（
ＯＢｚｌ　）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）
−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ
−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（１０
，３３ｇ　）を得る。

（７）　Ｂｏａ（ｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ
−ＯＨ（４，５５ｇ　）、Ｈ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ
）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ
（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）
−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）（ｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−
Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（ｉｏ、
１０ｇ　）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（
０，５８５ｇ）をＮ−メチルピロリドン（１５０１ｎＩ
ｌ）に溶解し、Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミ
ンプロピル）カルボジイミド（０，６７３ｇ　）のＮ−
メチルピロリドン（５ｍＡ　）溶液を−１０〜−５°Ｃ
で滴下し、同温で４時間攪拌後５°Ｃで終夜攪拌する。

反応液を濃縮し、０．５Ｎ塩酸を加えて粉末化し濾取し
た後、０．５Ｎ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液お
よび水で順次洗浄して乾燥し、きらに酢酸エチルで洗浄
し、乾燥して、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）＜ｙｓ
（Ａｃｍ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−
Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（
Ｃ１２Ｂｚｌ　＞−Ｉ　１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−
Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩ
Ｚ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（１４，２ｇ　）を得る。

［αコ２６“５−−１７．５３°（Ｃ−１，０，ＤＭＳ
Ｏ）（８）　Ｂｏａ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ
（Ａｃｍ）−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）
−Ｇｌｙ−Ｖａｔ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ
（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａ
ｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ
）−−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（１１，６１ｇ）、トリフル
オロ酢酸（９０１ｄ　）およびアニソール＜　ｔｏｍｉ
　）の混合物を水冷下３０分間攪拌後濃縮する。残渣に
５．３Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（１，２１１１１
１）を加えて濃縮し、ジエチルエーテルで粉末化した後
濾取して、Ｈ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（Ｏｃｔ（ｅｘ）−Ｇｌ
ｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍａｔ（ｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−１１ａ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ｌａ
ｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ
（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ａｌａ−ＣｙＳ（Ａｃｍ）−Ａｓ
ｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（ＬＬ、５０ｇ）を得る。

［α］２６−−１９．６６°（Ｃ−１、ＤＭＳＯ）（９
）　Ｂｏｃ−（ｙｓ（Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅ
ｒ（Ｂｚｌ）−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ　）−Ｇｌ
ｙ−ＯＨ（３，３２ｇ　）　、　Ｈ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂ
ｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（
ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍ
ｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ａ−Ｇｌｕ（ＯＢ
ｚｌ）−Ａｌａ−Ｌａｕ−Ａｓｐ　（ＯｃＨａｘ　）−
Ｌｙｓ　（ＣＩＺ　）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ａ
ｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（
１０，８ｇ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
（０，４５［）をＮ−メチルピロリドン（１５０１１１
１１）に溶解し、Ｎ−ニブル−Ｎ’−（３−ジメチルア
ミノプロピル）カルボジイミド（０，５１２ｇ）のＮ−
メチルピロリドｙＣ５ｍｌｌ）ｍ液を一５℃で滴下し、
同温で４時間攪拌後、トリエチルアミン（０，２ｍＱ）
およびＮ−ニブル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピ
ル）カルボジイミド（０，２５ｆｆｋＱ　）を追加し５
℃で終夜攪拌する０反応液にＮ−エチル−Ｎ’−（３−
ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（０，２７５
ｆｆｌｌｌ　）をさらに追加し、室温で８時間攪拌した
後濃縮する。残渣に０．５Ｎ塩酸を加えて粉末化して濾
取し、０．５Ｎ塩酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液、
水および酢酸エチルで順次洗浄して、Ｂｏａ−Ｃｙｓ（
Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅｔ（Ｂｚｌ）−Ｈｉｓ
−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚ
ｌ　）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（
ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍ
ａｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢ
ｚｌ）−Ａｌａ−−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌ
ｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１ｚＢｚｌ＞−Ａｌａ−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌ　（１２，０５ｇ　
）を得る。

［αコ２６−−２３．５３°（Ｃ−１、ＤＭＳＯ）（１
０）　Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５
ｅｒ（Ｂｚｌ）−）１ｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇ
ｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ
）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ｌａｕ−Ａ
ｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１
２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢ
ｚｌ（６，２ｇ）、トリフルオロ酢酸（１ｏｏｍｕ　）
およびアニソール（１ｏｍａ　）の混合物を水冷下３０
分間攪拌後濃縮する。残渣に５．９Ｎ−塩化水素のジオ
キサン溶液（Ｑ、９２ｍ１ｌ　）を加え１０分間攪拌後
濃縮し、ジエチルエーテルを加えて粉末化し、濾取して
、　Ｈ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅ
ｔ（Ｂｚｌ　）−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｇｌ
ｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌａ
ｕ−）１ｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ
−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）
−１１ａ−ＧＬｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓ
ｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚ
ｌの塩酸塩（６，１３ｇ）を得る。

アミノ酸分析：［目的物をフェノール存在下、６Ｎ塩酸中２４時間１１
０°Ｃで加水分解する］Ａ９ｐ（４）　４．０５、Ｓｅｔ　（１）　０．８１、
Ｇｌｕ　（１）　１．０６、ｃｔｙ　　（２）　　１．
９９、　Ａｌａ　　（２）　　２．１０、　Ｖａｌ　　
（１）　　１．０９、Ｍｅｔ　（１）　０．７Ｌ、Ｉｌ
ａ　（１）　１．０１、Ｌａｕ　（３）　３．００、Ｔ
ｙｒ　（３）　３．１４、Ｌｙｓ　（１）　１．０８、
Ｈｉｓ　（２）　２．０３、Ｐｒｏ　（１）　０．９８（１１）　）ｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌａｕ−
５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇ
ｌｙ−Ｔｒｙ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌ
ａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂ
ｚ　１　）−Ｉ　１ａ−Ｇｌｕ　（ＯＢｚｌ　）−Ａｌ
ａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ　（ＯｃＨｅｘ　）−Ｌｙｓ（ＣＩ
Ｚ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−ＯＢｚｌの塩酸塩（６，０ｇ）をｐ−ク
レゾール（５，ＯｍＱ）およびジメチルスルフィド（２
，５ｍ１１）の存在下無水フッ化水素（４２，５！＋１
１１　）で水冷下１時間処理する。減圧下フッ化水素を
除いたのち、残渣にジエチルエーテル（１６０ｍ１１　
）を加えて粉末化して、粗生成物（４，６８ｇ）を得る
。この粗生成物（ｔ、ｓ９ｇ）を６Ｍ尿素水溶液中０．
０２Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ５，４）　（４０
戚）に溶解し、同緩衝液で平衡化したＷｈａｔｍａｎ　
ＤＥ−５２のカラム（５００ｍｍ、３．２ｃｍ（６Ｆ　
Ｗｈａｔｍａｎ社製）に付し、６Ｍ、ＩＴ素氷水溶液中
００２Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液ｃ　ｐＨ５，４）から
６Ｍ尿素水溶液中０．２Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液（ｐ
Ｈ５，４）による直線濃度勾配（各１りで展開し各１２
ｇづつ分画する０分画番号６８〜７５を集め、さらにダ
イヤイオンＨＰ−２０（１５０ｍｍ　；三菱化成工業社
製）を用いて脱塩し、よく水洗後３Ｍ酢酸−メタノール
（１：２）の混合溶媒で溶出する。目的物を含む分画を
集めて濃縮後凍結乾燥して、Ｈ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｐ
ｒ。

−Ｌｅｕ−５ｅｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇ１ｙ４ｙｒ−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌａｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖ
ａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（ｌｅ−Ｇｌ
ｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｌａ
−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＨ（３５４ｍｇ）を得
る。

（１２）　　）Ｉ−Ｃｙｓ＜Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ
−５ｅｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ（ｙｒ−Ｃｙｓ　（
Ａｃｍ　）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ
−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−１１ａ−Ｇｌｕ
−Ａｌａ−Ｌａｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−
Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−ＯＨ（３４０ｍｇ　）を５
０％酢酸水溶液（５０ｍＭ）に溶解し、窒素気流下室温
で酢酸第二水銀（３９４ｍｇ）を加え、同温で５時間攪
拌する。反応液にβ−メルカプトエタノールを窒素置換
して加え、密栓して２日間放置する。

析出物を濾去し、少量のＩＮ酢酸で洗浄し、濾液および
洗液を合わせてｌＱｍＱまで濃縮する。

濃縮液をＩＮ酢酸で平衡化したカラム（３，ｌＸ１２４
ｃｍ、　５ｅｐｂａｄｅｘ　Ｇ　−２５）に付し、ＩＮ
酢酸で溶出し１０ｇづつ分画する０分画番号３０〜５８
［紫外吸収（２８０ｎｍ　）にて検出コを合わせ、水で
３２に希釈し、ＩＮアンモニア水にてｐＨ７，６に調整
する。この溶液を５日間攪拌した後、ダイヤイオンＨＰ
−２０（１０１００ｌ１１の力２ムに吸着させ、水（１
り）で洗浄後３Ｎ酢酸−メタノール（１：２）の混液で
溶出する。最初の溶出液（４００ｍｇ）を集め、濃縮後
水に再溶解し、凍結乾燥して粗生成物（２９（１ｍｇ）
を得る。

粗生成物Ｃ５００＋ｕｇ）を０．０２Ｍ酢酸アンモニウ
ムＢ’ｔｒ液（ｐＨ５，６）　（５０ｍＭ　）に溶解し
、同緩衝液で平衡化したＷｈａｅｍａｎ　ＤＦ−５２カ
ラム（３，２Ｘ６０ａｍ）に付し、０．０２Ｍ酢酸アン
モニウム緩衝液から０．２５Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液
による直線濃度勾配（各１β）および０．２５Ｍ酢酸ア
ンモニウム緩衝液から０．３０Ｍ酢酸アンモニウム緩衝
液による直線濃度勾配（各５ＱＯｍｆｌ　）で展開し各
１０ｇつつ分画する。

目的物を含む分画番号１７０〜２０９を集めて濃縮した
のち、５ｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ　−２５（２，６Ｘ　１０
０ｃｍ、　　Ｉ　Ｍ酢酸で溶出）で脱塩し凍結乾燥して
、ｈ−ＥＧＦ（６−３２）　（１０６ｍｇ　）を得る。

過ギ酸酸化後のアミノ酸分析結果：Ｌ〜システィン酸（４）　３．８４．　　Ｌ−メチオニ
ンスルホン（１＞　０．９６、Ａｓｐ　（４）　４．０
０．５ａｒ（１）０．８０．　Ｇｌｕ　（１）　１．０
５、Ｇｌ）’　（２）　２．００、Ａｌａ　（２）２．
１５、Ｖａｌ　（１）　１．０４、Ｉｌｅ　（１）　１
．００、Ｌｅｕ　（３）３．００．　Ｔｙｒ　（３）　
３．０２、Ｌｙｓ　（１）　１．０８、Ｈｉｓ　（２）
１．９０．　Ｐｒｏ　（１）　１．０４ＨＰＬＣ：保持時間−２２，８分カラム：　４　Ｘ　１５０ｍｍ、　Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ
　５　ＣＬＢ溶出液：１％アセトニトリル水溶液中の０
，１％トリフルオロ酢酸から５０％アセトニトリル水溶
液中の０．１％トリフルオロ酢酸による直線濃度勾配（
３０分）流　速：１ｆｆｌＱ／分検　出：紫外吸収（２１０ｒ＋＋ｎ）％７製ｊ１江主（１）　　Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｉｏ
ｓ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚ
ｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｅ
ｕ−ＯＢｚｌ（６６，９ｇ）、トリフルオロ酢酸（６３
０賊）およびアニソール（７０ｍＡ　）で水冷下３０分
間、室温で３０分間攪拌する。反応液を濃縮し、５８９
Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（１１，４１ｎＱ　）を
加えて攪拌し、ジエチルエーテル（ＩＰ）を加えて粉末
化し、濾取した後五酸化リン上で乾燥して、ｌ（−Ｇｌ
ｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）
−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
　）−Ａｓｐ（Ｏｃ）ｔｅｘ）−Ｌｅｕ−ＯＢｚｌの塩
酸塩（６３，７ｇ）を得る。

（２）　　［（−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｉｎ−’ｒｙｒ（Ｃ１２Ｂｚ
ｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｅ
ｕ−ＯＢｚｌの塩酸塩（９，０ｇ）、Ｂｏａ−Ｔｙｒ（
Ｃ１２Ｂｚｌ　）−１１ａ−Ｇｌｙ−ＯＨ（３，１５ｇ
　）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０，７
０ｇ）をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍ　）
に溶解し、−５〜０℃でＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメ
チルアミンプロピル）カルボジイミド（０，８０ｇ）の
Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０１１）溶液を滴下
し、同温で５時間５℃で終夜攪拌する。

反応液を濃縮し、残渣に０．５Ｎ塩酸を加えて粉末化し
濾取する。この粉末を水、０．５Ｎ塩酸、水、炭酸水素
ナトリウム水溶液および水で順次洗浄し、五酸化リン上
で乾燥し、ジエチルエーテルで洗浄した後減圧乾燥して
、　Ｂｏａ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ｃｙｓ
（Ａｃａ＋）−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｒ
ｇ（Ｉｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｅｕ−ＯＢｚ
ｌ　（１０，８９ｇ　）を得る。

（３）　　Ｂｏａ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ａ−
Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａ
ｒｇ（ｒｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｅｕ−ＯＢ
ｚｌ　（１０，０ｇ　）、トリフルオロ酢酸（９０ｍ党
）およびアニソール（１（＋ｍ＋１）の混合物を水冷下
３０分間室温で３０分間攪拌した後濃縮する。残渣に５
．９Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（１，４ｍ）を加え
て１５分間攪拌後減圧濃５縮し、ジエチルエーテルで粉
末化して濾取し、減圧下乾燥して、Ｈ−Ｔｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−１１ａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−Ａ
ｒｇ（Ｉｏｓ　）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ＞−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ
（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ａｓｐ（Ｏ
ｃＨｅｘ　）（ｅｕ−ＯＢｚｌの塩酸塩（９，６０ｇ）
を得る。

’（４）　　Ｈ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ａ−Ｇ
ｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ｃｙ
ｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ（ｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｒｇ
（ｒｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃｔＩｅｘ）−Ｌｅｕ−ＯＢｚ
ｌの塩酸塩（７，０ｇ）、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ
）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌ
ａ−Ｃｙｓ−（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−
Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨ（５，０ｇ　）および１
−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０，４３ｇ）をＮ−
メチルピロリドン（１００誠）に溶解し、−５℃でＮ−
エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボ
ジイミド（０，５ｇ）のＮ−メチルピロリドン（３ｍＱ
）ＷＩ液を５分間で滴下し、同温で５時間５°Ｃで終夜
攪拌する。反応液を濾過し、濾液を濃縮し、０．５Ｎ塩
酸を加えて粉末化して濾取し、水、メタノールおよびジ
エチルエーテルで順次洗浄した後減圧乾燥して粗生成物
を得る。この粗生成物をＮ−メチルピロリドン（１００
ｆｆｌＱ　）に溶解し、粘稠となるまで濃縮し、メタノ
ールを加えて粉末化した後濾取し、さらにメタノールお
よびジエチルエーテルで洗浄して、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ
ｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ
）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ＞−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ
）−１１ｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−Ａｒｇ（
Ｉｏｓ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−
Ｌａｕ−ＯＢｚｌ（１１，３ｇ）を得る。

アミノ酸分析：〔目的物を６Ｎ塩酸中２４時間１１０°Ｃで加水分解す
るコＡｓｐ　（３）　３．００ＸＧｌｕ　（２）　１．９６
、Ｇｌｙ　（２）　１．９７、Ａｌａ　（１）　０．９
９、Ｖａｔ　（２）　１．９２、Ｉｌａ　（１）　０．
９０、Ｌｅｕ　（１）　１．００、Ｔｙｒ　（３）　２
．８５、Ｌ）’Ｓ　（１）　１．００、Ａｒｇ　（２）
　１．９７（５）　　Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（Ｃ
ＩＺ）−Ｉｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａ
ｃｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ｉ　１ｅ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ｃｙｓ
（Ａｃｍ　）−Ｇｉｎ−Ｔｙｒ（Ｃｌ２Ｂｚｌ　）−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）−・Ｌｅｕ
−ＯＢｚｌ（１１，０ｇ　）をトリフルオロ酢酸（９０
１）およびアニソール（１０ｎＱ　）で氷冷下３０分間
室温で３０分間処理し、反応液を濃縮後５．９Ｎ−塩化
水素のジオキサン溶液（０，９２ｎＱ　）を加えて攪拌
し、ジエチルエーテルを加えて粉末化した後濾取し、減
圧乾燥して、Ｈ−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩ
Ｚ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｙ−Ｇ　
ｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（工ｏｓ　）−Ｃｙｓ　（Ａ
ｃｍ　）−Ｇｉｎ（ｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｅｕ−ＯＢｚｌの塩
酸塩（１０，６ｇ　）を得る。

（６）　　Ｈ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ
）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−−Ｃｙｓ　（Ａ
ｃｍ　）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｖａｌ−Ｖ
ａｔ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）　−１１ｅ　−
Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａ
ｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−−Ｌｅｕ−Ｏ
Ｂｚｌの塩酸塩（８，０ｇ）、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ
（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−
Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−ＯＨ（４，７７ｇ　）およ
び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０，３ｇ）をＮ
−メチルピロリドン（１５０緘）に溶解し、−５〜Ｏ℃
でＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）
カルボジイミド（０，３４ｇ）のＮ−メチルピロリドン
（３１１１９）溶液を滴下し、−５〜５℃で６時間４℃
で終夜攪拌する。２０ット分の反応液を合わせ、濾過後
渡圧下濃縮する。残渣に０．２５　Ｎ　ｍ酸を加えて粉
末化し濾取し、０．５Ｎ塩酸、水および炭酸水素ナトリ
ウム水溶液で順次洗浄後五酸化リン上減圧乾燥する。得
られた粉末をメタノール（約５ｏｏ−）およヒシエチル
エーテルで順次洗浄し、減圧乾燥して、Ｂｏａ−Ｔｙｒ
（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｌｅｕ−Ｈ
ｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙ
ｓ（Ａｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１
ａ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（Ｏ
ｃＨｅｘ）−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ
）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ
）−１１ａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔ
ｏｓ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ＞−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂ
ｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌ
ｅｕ−ＯＢｚｌ　（１５，２８ｇ　）を得る。

［αコ２０，１１．３４°（Ｃ−１、ＤＭＳＯ）アミノ
酸分析：・［目的物をフェノール存在下、６Ｎ塩酸中２４時間１
１０℃で加水分解する］Ａｓｐ　（３）　４．００、Ｇｌｕ　（３）　２．９７
、Ｇｌｙ　（３）　２．９９、Ａｌａ　　＜２）　　２
．０２、　Ｖａｌ　　（３ン　２．８９、　Ｍｅｔ　　
（１）　　０．８９、ＩＩｓ　（２）　１．８４、Ｌｅ
ｕ　（３）　３．０２、Ｔｙｒ　（５）　４．９２、Ｌ
ｙｓ　（１）　１．０２、Ｈｌｓ　（１）　１．３８、
Ａｒｇ　（２）　１９８（７）　　製造例２−（６）で
得られた化合物（１４，１０ｇ）をトリフルオロ酸Ｈ（
ｔｚｓｍｎ　）およびアニソール（１４ｍ１１）で水冷
下３０分間室温にて３０分間処理する０反応液を濃縮後
６Ｎ−塩化水素のジオキサン溶液（０，７３ｍρ）を加
えて攪拌後減圧濃縮しジエチルエーテルを加えて粉末化
する。この粉末を減圧下乾燥して、Ｈ−Ｉｙｒ（Ｃ１２
Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｌｅｕ−１（ｉｓ−Ａｓ
ｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）
−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−１１ａ−Ｇｌｕ
（ＯＢｚｌ　）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ
）−Ｌｙｓ＜ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌ
ａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）
−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−
１１ｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏ
ｓ）−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚ
ｌ　）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ　）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ　）
−Ｌｅｕ−ＯＢｚｌの塩酸塩（１３，６ｇ　）を得る。

［αコＤ　−−１３，７１°（Ｃ−１、ＤＭＳＯ）（８
）　　Ｂｏｃ−Ａｓｎ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（Ｏ
ｃＨｅｘ）−５ａｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−
Ｃｙｓ（Ａｃｍン−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）
−ＨＬｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−ＯＨ（３，
１３ｇ　）、製造例２−（７）で得られた化合物（１０
，０ｇ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ｏ
、ｚ３ｇ）をＮ−メチルピロリドン（１ｓｏｍ　）に溶
解し、−５〜ｏ℃でＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチル
アミノプロピル）カルボジイミド（０，２７ｇ）のＮ−
メチルピロリドン（０，５ｍ１１　）溶液を加える。１
０’Ｃで終夜攪拌後トリエチルアミン（０，２２１１１
１１）を追加し、きらに同温で１日反応後さらにトリエ
チルアミン（０，２２ｍ１＋　）を追加する。１０’Ｃ
でさらに６時間攪拌し、反応液を濾過後濃縮する。残渣
に０．５Ｎ塩酸を加えて粉末化し、濾取し、０．５Ｎ塩
酸、水、炭酸水素ナトリウム水溶液、水およびメタノー
ルで順次洗浄し、減圧乾燥した後きらにメタノールおよ
びジエチルエーテルで洗浄し乾燥して粗生成物（１２，
１ｇ）を得る。この粗生成物をＮ−メチルピロリドン（
１００＋ｎｕ　）に溶解し、大部分のＮ−メチルピロリ
ドンを減圧下留去して油状としメタノールを加えてゲル
状にしたのちジエチルエーテルを加えて粉末化し濾取し
て、Ｂｏｃ−Ａｓｎ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅ
ｘ）−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ｃｙｓ
（Ａｃｍ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｈｉ
ｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂ
ｚｌ）−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ
（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−
Ｍｅｔ−Ｉｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌ
ｙｓ（ＣＩＺ）−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｉｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇ
ｌｙ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｃｙｓ
（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｌａｕ−ＯＢｚｌ
（８，９ｇ）を得る。

（９）　　製造例２−（８）で得られた化合物（１１７
６ｇ）をトリフルオロ酢酸（１０８ｍＱ　）およびアニ
ソール（ｔｚｍｕ　）にて水冷下３０分間室温で３０分
間処理する。反応液を濃縮し、６Ｎ−塩化水素のしオキ
サン溶液（１，４ｇｍａ　）を加えて攪拌したのち減圧
下濃縮する。残渣にジエチルエーテルを加えて粉末化し
濾取した後減圧乾燥して、Ｈ−Ａｓｎ−５ｅｒ（Ｂｚｌ
）−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ＞−５ｅｒ（Ｂｚｌ）−Ｇｌｕ
（ＯＢｚ　１　）−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｐｒｏ−Ｌ
ａｕ−５ｅｒ（Ｂｚｌ　）−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅ
ｘ）−Ｇｌｙ−’ｒｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ｃｙｓ（Ａ
ｃｍ）−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−Ｇｌ
ｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａｃ＋＋＋）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ（
Ｃ１２Ｂｚｌ）−１１ｅ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ
−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯｃＨｅｘ）−−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）
−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）
−Ａｓｎ−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｖａｌ−Ｖａ　１−
Ｇｌｙ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ　）−Ｉ　ｌｅ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｒｇ（ｒｏｓ）−Ｃｙｓ（Ａ
ｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）−Ａｒｇ（ｒ
ｏｓ　）−Ａｓｐ（ＯｃＨａｘ）−Ｌｅｕ　−０Ｂｚｌ
の二塩酸塩（１１，２ｇ　）を得る。

（１０）　　製造例２−（９）で得られた化合物（５，
０ｇ）を−５〜０℃の外温を保ち、ｐ−クレゾール（５
戚）の存在下無水フッ化水素（５０１ｄ　）にて１時間
処理する。減圧下フッ化水素を除去したのちジエチルエ
ーテルを加えて粉末化し濾取し減圧乾燥して粗生成物（
３，６２ｇ）を得る。

この粗生成物（６，７７ｇ）を６Ｍ尿素水溶液中０、０
２Ｍ２Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液ｐｕｓ、　６　）　（
２５０ｍｌ１）に加え４８時間５°Ｃで攪拌する。不溶
物をセルロースパウダーで濾過する。

残ったセルロースパウダーは再び同緩衝液（２５０ｍＡ
　）で超音波処理して抽出し濾過する。

濾液を合わせ、同緩衝液で平衡化したシｈａｔｍａｎＤ
Ｅ−５２（４Ｘ　７５ｃｍ　）のカラムに通じて吸着さ
せる。吸着後回緩衝液から６Ｍ尿素水溶液中Ｏ，ＯＳＭ
酢酸アンモニウム緩衝液による直線濃度勾配（各８００
１ｎＱ　）にて溶出させた後、６Ｍ尿素水溶液中０．０
８Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液から６Ｍ尿素水溶液中０．
２Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液による直線濃度勾配（各１
１２）で展開し各１５ｇづつ分画する。分画番号５３〜
８５を集め、ダイヤイオンＨＰ−２０（１００ｍＡ　）
に通じて尿素およびアンモニウム塩を除きよく水洗し、
３Ｍ酢酸−メタノール（１：２）で溶出して濃縮後凍結
乾燥してＨ−Ａｓｎ−５ｅｒ−Ａｓｐ−５ｅｒ−Ｇｌｕ
−Ｃｙｓ　（Ａｃｍ　）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−５ｅｒ−Ｈ
ｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−τｙｒ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ　）−
Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ａ
ｃｍ）−Ｍｅｔ−Ｔｙｒ−１１ｅ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｌ
ｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ａｃ
ｍ）−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−’ｒｙｒ−１１ｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｃ
ｙｓ（Ａｃｍ）−Ｇｌｎ−Ｔｙｔ−−Ａｒｇ−Ａｓｐ−
Ｌｅｕ−ＯＨ（３６５ｍｇ）を得る。

ＨＰＬＣ：保持時間−２０，０分カラム：　４　Ｘ１５０ａ、　Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ　５
　ＣＩＢ溶出液：１０％アセトニトリル水溶液中０．１
％トリフルオロ酢酸から７０％アセトニトリル水溶液中
０．１％トリフルオロ酢酸による３０分の直線濃度勾配流速：１ｍＱ／分（１１）　　製造例２−（１０）で得られた化合物（１
５０ｍｇ）を５０％酢酸（２ｏｍｌＩ）に溶解し、窒素
気流下酢酸第二水銀（１４９，７ｍｇ　）を加え室温下
５時間攪拌し、β−メルカプトエタノール（４，８９ｇ
）を窒素気流下加え終夜攪拌する。不溶物を濾去し、濾
液を約５賊まで濃縮したのち５ｅｐｈａｄｅｘＧ−２５
（３Ｘ１００ｃｍ）　（１Ｍ酢酸にて平衡化）に付し、
１Ｍ酢酸で溶出し６ｇづつ分画する。

第２４〜４２番目の分画をあつめ、水で３．１１　ｆに
希釈し、アンモニア水にてｐＨ７，６にｌｉｔし、２０
℃で７日間攪拌する。反応液を酢酸にてｐＨ５，４にｉ
ｔし、ａ過後０．０２Ｍ酢酸アンモニウム（ｐＨ５４）
で平衡化させたＷｈａｔｍａｎ　ＤＥ−５２（１５０ｍ
ｕ　）カラムに通しる。０．０２Ｍ酢酸アンモニウムか
ら０．３Ｍ＃酸アンモニウムの直線濃度勾配で溶出し、
６ｇづつ分画する。

第１８０〜１９８番の分画を集めて濃縮後５ｅｐｈａｄ
ｅｘＧ　−２５（１５０ｍＭ　）　ツカラムに付し、１
Ｍ酢酸にて溶出して目的物を含む分画を集めて凍結乾燥
して、ｈ−ＥＧＦ（１−４７）　（８，２ｍｇ）を得る
。

ＨＰＬＣ：保持時間−１５，３分カラム：４ｘ１５０ｓ、Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ　５　Ｃ１
８溶出液：２０％アセトニトリル水溶液中０．１％トリ
フルオロ酢酸から５０％アセトニトリル水溶液中０．１
％トリフルオロ酢酸による直線濃度勾配流速：　１眠／分次にこの発明を実施例により説明するがこれに限定され
るものではない。

実施例１下記の様な処方により、筋注用懸濁性注射剤を作成する
。

ｈ−ＥＧＦ　　　　　　　　　　　　　　　５　　ｍｇ
ポリソルベート８０　　　　　　　　　１０　　ｍＢ塩
化ナトリウム　　　　　　　　　０．０９　ｇ注射用蒸
留水で全量を４ｍＱとする。

実施例２下記の様な処方により、静注用乳濁性注射剤を作成する
。

ｈ−ＥＧＦ　　　　　　　　　　　　　　　５　　ｍｇ
ゴマ油　　　　　　　　　　　　　１００　　ｍｇポリ
ソルベーｈ８０　　　　　　　　　１０　　ｍｇ塩化ナ
トリウム　　　　　　　　　　０．０９　ｇ注射用蒸留
水で全量を１０ｍＱとする。

実施例３下記の様な処方により、持続性の筋注用注射剤を作成す
る。

ｈ−ＥＧＦ　　　　　　　　　　　　　　１　　■ゴマ
油で全量を４誠とする。

ｈ−ＥＧＦ（１−４７）およびｈ−ＥＧＦ（６−３２＞
も上記実施例１〜３と同様にして作成できる。

Claims

【特許請求の範囲】式【遺伝子配列があります】で示される化合物群から選択された化合物またはその医
薬として許容される塩を有効成分として含有することを
特徴とする抗癌剤。