JPS63279797A - ケフィアグレインからゲル化多糖類の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はケフィアグレインからゲル化多糖類を製造する
方法に関する。

［発明の背景と従来技術］ ケフィアグレインは、淡黄色乃至は乳白色の弾力性のあ
る画境であって、ストレプトコツカス属、ラクトバチル
ス属等の乳酸菌と、サツカロマイセス属、トルラ属等の
酵母を主要微生物として含有する。このケフィアグレイ
ンは古くからコーカサス地方の伝統的な発酵乳であるケ
フィール（ｋｅｆｉｒ、ケフィアともいう）のスタータ
ーとして使用されているが、現在では、例えばクリスチ
ャンハンセン社（Ｃｈｒ、Ｈａｎｓｅｎ’ｓ　Ｌａｂｏ
ｒａｔｏｒｙ）から容易に市販品を入手できる外、天然
培地もしくは合成培地で簡単に成育増殖させることがで
きる。

発酵乳のスターターに使用する以外のケフィアグレイン
の活用法としては、ケフイアグレイン可溶分乃至はケフ
ィアグレイン不溶分が抗腫瘍剤として有効であることが
、特公昭５６−４０９号公報及び同５６−４１０号公報
にそれぞれ記載されている。それによれば、ケフィアグ
レイン可溶分は、ケフィアグレインの粉砕物を水に分散
させて熱処理した後、遠心分離して上澄み液を採取し、
得られた上澄み液をエタノールと混合して沈澱物を生成
させ、次いでこの沈澱物に水を加えて加熱溶解後、遠心
分離して再び上澄み液を採取し、しかる後、この上澄み
液をイオン交換樹脂処理と透析処理で精製して取得され
る。一方、ケフィアグレイン不溶分は、ケフィアグレイ
ンの粉砕物を水に分散させて熱処理した後、遠心分離し
て沈澱を採取し、この沈澱に熱水処理と遠心分離をそれ
ぞれ３回以上施し、最終回の遠心分離操作で沈澱として
回収される。

［発明の詳細な 説明は、ケフィアグレインからゲル化多糖類を製造する
方法を提供するものであって、その方法の一つは、ケフ
ィアグレインの粉砕物を水に分散させて煮沸し、次いで
この分散液を遠心分離して上澄み液（Ａ）と沈澱（Ａ）
を採取し、この上澄み液（Ａ）を冷却後エタノールを加
えて沈澱を生成させ、得られた沈澱に対して同様な再溶
解−沈澱生成の操作を少なくとも２回反復して沈澱を生
成させ、次いでこの沈澱を乾燥後、蒸留水に１重量％以
上の濃度で溶解して、そのまま放置するか、５℃程度の
温度で放置することからなり、また他の一つは、ケフィ
アグレインの粉砕物を水に分散させて煮沸し、次いでこ
の分散液を遠心分離して上澄み液（Ａ）と沈澱（Ａ）を
採取し、この沈澱（Ａ）にｐＨ３の０．２Ｍクエン酸緩
衝液を加えて煮沸した後、遠心分離して上澄み液（Ｂ）
を採取し、この上澄み液を冷却後エタノールを加えて沈
澱を析出させ、得られた沈澱に対して同様な再溶解−沈
澱生成の操作を少なくとも２回反復して沈澱を生成させ
、次いでこの沈澱を凍結乾燥後、蒸留水に１重量％以上
の濃度で溶解して、そのまま放置するか、５℃程度の温
度で放置することからなる。

上記したところから明らかな通り、上澄み液（Ａ）に対
する処理と、上澄み液（Ｂ）に対する処理とは、その内
容が同一であるので、上澄み液（Ａ）と上澄み液（Ｂ）
とは、必要に応じて混合して処理することができること
は勿論である。

以下本発明の方法を工程順に詳述すると、まず原料ケフ
ィアグレインをできるだけ細かく粉砕して水に分散させ
、分散液を煮沸する。この煮沸処理は本発明にｙって重
要である。煮沸処理は少なくとも３０分間位行なうこと
が好ましい。

煮沸処理後、分散液を遠心分離して上澄み液（Ａ）と沈
澱（Ａ）とに分離する。ここで得られる沈澱（Ａ）は、
本発明の第２に方法で使用されるものであるが、これに
含まれる多糖類をさらに抽出する目的で、この沈澱（Ａ
）に上と同様な煮沸処理と遠心分離を複数回旋しても差
し支えなく、この場合、各遠心分離で回収される上澄み
液は、前記の上澄み液（Ａ）と合体させて爾後の処理に
供することができ、また沈澱は本発明の第２方法で処理
することができる。

上澄み液を混合するか否かにかかわりなく、本発明の第
１の方法によれば、上澄み液（Ａ）は冷却されてエタノ
ールと混合攪拌される。エタノールの混合量は液中の多
糖類を沈澱させるに充分な量であることを可とし、一般
的には上澄み液と同容量以上のエタノールが使用される
。

沈澱した多糖類を水に再溶解した後、これにエタノール
を添加して再び沈澱を生成させる。得られた沈澱に対し
て上と同様な再溶解−沈澱生成の操作を少なくとも２回
繰り返し、最終回の沈澱生成工程で得られた沈澱は遠心
分離によって回収される。次いでこの沈澱物を例えば凍
結乾燥してエタノールを揮散させることにより、多糖類
の乾燥物を得ることができる。

本発明の第２の方法は上澄み液（Ａ）を取得した際に副
生される沈澱から多糖類を抽出する方法であって、この
方法では沈ＩＮ（Ａ）にｐＨ３の０．２阿クエン酸緩衝
液を加えて煮沸した後、遠心分離して上澄み液（Ｂ）を
採取し、この上澄み液を上記した上澄み液（Ａ）と全く
同様操作で処理して多糖類の乾燥物を得るものである。

第２の方法では、上澄み液（Ｂ）を取得する際に副生さ
れる沈澱に対して沈澱（Ａ）と同様なりエン酸緩衝液を
加えた煮沸処理と遠心分離を複数回繰り返しても差し支
えなく、各遠心分離で回収される上澄み液は、前記の上
澄み液（Ｂ）と合体させて爾後の処理に供することがで
きる。

上記した第１の方法及び第２の方法で得られる多糖類の
乾燥物は、いずれも容易に水に溶解する。そして、多糖
類の濃度が１重量％以上である水溶液は、これを放置す
ることでゲル化し、ゼリー状物を得ることができる。し
かし、水溶液がゲル化に至るまでの所要時間は、水溶液
の濃度とその環境温度によって異なり、一般に水溶液が
低濃度であると、これを短時間でゲル化させるためには
水溶液を５℃程度に冷却する必要があるが、一旦ゲル化
したものは、室温でもゾルに戻ることはない。

表１に多糖類水溶液のゲル化所要時間と、その水溶液の
濃度及び温度との関係を示す。

表１ 放置条件　　　　　水溶液濃度　　（重量％）１％以下
　１％　２％　３％　５％ 室温、６時間　　　　×　　Δ　Δ　Δ　０室温、２４
時間　　　Ｘ　　Δ　Δ　ｏ。

５℃　　６時間　　　×　　Δ　Δ　００５°Ｃ２４時
間　　　　×　　Δ　ｏ　Ｏ。

×＝ニゲルせず　Δ：はぼゲル化　Ｏニゲル化本発明の
方法で得られるゲル化多糖類は、加工食品の分散安定剤
、増粘剤、ゲル化剤等に使用できるほか、これを薄くス
ライスして乾燥することにより、天然高分子膜とするこ
とができ、紡糸することにより繊維状物にすることも可
能である。

実施例１ 高圧滅菌した１０％脱脂乳に５〜１０％のケフィアグレ
インを加えて２０℃に保持し、１時間当り１分間緩やか
に攪拌する操作を２０〜２４時間続けて発酵を行なった
。発酵停止後、ケフィアグレインを目開き１ｎＩ１１程
度の金網で濾別してケフィアグレインを採取した。

得られたケフィアグレイン１００ｇを蒸留水で充分洗浄
し、凍結乾燥後粉砕した。この粉砕物にその１０倍容量
程度の蒸留水を加えて分散液とし、これを３０分間ウォ
ータバス上で煮沸した。次いで、煮沸した分散液を１１
０００Ｏｒｐで２０分間遠心分離し、上澄み液と沈澱を
回収した。ここで得られた沈澱を蒸留水に分散させて上
と同様に３０分間煮沸し、遠心分離する操作を２回繰り
返して各回の上澄み液を集め、これを先に採取した上澄
み液と混合した。

次にこの上澄み液を冷却し、ゆっくり攪拌しながらこれ
に等容量の冷エタノールを添加して沈澱を生成させた。

この沈澱を回収して蒸留水に再溶解し、上と同様等量の
エタノールを加えて沈澱を生成させる操作を３回繰り返
してゾル状の沈澱を得、これを乾燥して多糖類の乾燥物
８ｇを得た。

この多糖類乾燥物の糖組成をガスクロマトグラフィーで
分析した結果、グルコースとラクトースの存在だけが検
出され、その比は１：１であった。また元素分析値は次
の通りであった。

Ｃ：　４１．８％、Ｈ：６．４％、Ｎ：０．１％以下、
上記の多糖類乾燥物を水に溶解して濃度１重量％の水溶
液と、濃度３重量％の水溶液を調製したところ、前者は
５℃で２４時間放置することにより、後者は室温で２４
時間放置することによりいずれもゲル化した。

実施例２ 実施例１と同様に発酵液から採取されたケフィアグレイ
ンを蒸留水で洗浄し、凍結乾燥して粉砕した。この粉砕
物を蒸留水に分散させ、その分散液を３０分間煮沸処理
して遠心分離し、沈澱物を採取した。

この沈澱ａｏｇをｐＨ３の０．２Ｍクエン酸緩衝液１０
０ｍＱに分散させ、これを３０分間ウォータバス上で煮
沸した。次いで、煮沸した分散液を１１０００Ｏｒｐで
２０分間遠心分離して上澄み液を回収した。ここで得ら
れた沈澱は、これを上と同様クエン酸緩衝液に分散させ
て３０分間煮沸した後、遠心分離する操作を３回繰り返
して各回の上澄み液を集め、これを先に採取した上澄み
液と混合した。

こうして得られた上澄み液を５℃に冷却し、ゆっくり攪
拌しながらこれに等容量の冷エタノールを添加して沈澱
を生成させた。この沈澱を回収して蒸留水に再溶解し、
上と同様等量のエタノールを加えて沈澱を生成させる操
作を３回繰り返してゾル状の沈澱を得、これを乾燥して
多糖類の乾燥物を得た。

この乾燥物からさらに微量蛋白質を除去するため、ゲル
クロマトグラフィー（トヨパールＨ１ｌ１７５Ｆ）及び
イオン交換クロマトグラフィー（セパデックスＡ−５０
）で前記の多糖類を精製した。こうして多糖類乾燥物１
．５　ｇを得た。このものの糖組成及び元素分析値は、
実施例１で得た乾燥物とほぼ同一であった。また、この
乾燥物の１重量％水溶液及び３重量％水溶液は、実施例
１と同じ条件でゲル化した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ケフィアグレインを水に分散させて煮沸し、次いで
   この分散液を遠心分離して上澄み液と沈澱を採取し、こ
   の上澄み液を冷却後エタノールを加えて沈澱を析出させ
   、得られた沈澱を乾燥後、蒸留水に１重量％以上の濃度
   で溶解して、そのまま放置又は５℃程度の温度で放置す
   ることからなるゲル化多糖類の製造法。 ２、ケフィアグレインを水に分散させて煮沸し、次いで
   この分散液を遠心分離して上澄み液と沈澱を採取し、こ
   の沈澱にｐＨ３の０．２Ｍクエン酸緩衝液を加えて再度
   煮沸した後、遠心分離して上澄み液を採取し、この上澄
   み液を冷却後エタノールを加えて沈澱を析出させ、得ら
   れた沈澱を乾燥後、蒸留水に１重量％以上の濃度で溶解
   して、そのまま放置又は５℃程度の温度で放置すること
   からなるゲル化多糖類の製造法。