JPS63210773A - 特異結合反応の促進方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ＥＩＡ、ＲＩＡ等の抗原抗体反応を利用した
測定方法若しくはアビジン−ビオチン結合反応またはホ
ルモン−レセプター反応を利用した測定方法等に利用可
能である、特異結合反応の促進方法に関する。

〔従来の技術〕

測定対象物質と特異的に結合する物質を固定化した微粒
子を利用した免疫物質、ホルモン、医薬品、免疫調節等
生体内微量成分の検出法として特異結合反応を利用した
免疫分析法がある。

この免疫分析法には大別して酵素や放射性アイソトープ
を標識物質として用いる標識免疫分析法と、抗原・抗体
複合対を直接測定する非標識免疫分析法との２つの方法
があり、前者の標識免疫分析法としては、ラジオイムノ
アッセイ（ＲＩＡ）、エンザイムイムノアッセイ　（Ｅ
ＩＡ）、フルオロイムノアッセイ　（Ｆ　Ｉ　Ａ）等が
よく知られている。また、後者の非標識免疫分析法とし
ては、免疫電気泳動法、免疫拡散法、沈降法等があり、
例えば「臨床検査法提要」（金井泉原著、金井正光纒著
、金属出版）や、「臨床検査Ｊ　　ＶＯｌ、２２．　Ｎ
ｌ　５　（１９７Ｂ）、第４７１〜４８７真に詳しく説
明されている。

非！Ｉ！！免疫分析法としては、ｒ　１ｗｍｕｎｏｃｈ
ｅ＊１−３ｔｒｙＪ　、Ｖｏｌ、１２．　Ｎａ　４　（
１９７５）、第３４９〜３５１　頁がある。これは抗体
または抗原を表面に固定させた微粒子を被測定液中の抗
原または抗体と反応させ、凝集粒子の大きさに比例して
減少するブラウン運動の指標となる平均拡散定数を、レ
ーザ光の゛拡散光のスペクトル幅の変化から求めること
により抗原または抗体を定量分析する方法が開示されて
いる。

また特開昭６１−２８８６６号公報には、抗体または抗
原を固定化した微粒子とサンプルとの反応液中に輻射線
を投射し、凝集粒子による散乱光を検出し、この散乱光
強度のパワースペクトル密度から測定対象物質を定量す
る方法が開示されている。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従来の標識免疫法及び非標識免疫法においては、抗原ま
たは抗体を固定化した微粒子と測定対象物質との反応に
長時間を要するため測定時間が長くなるという問題点が
あった。

本発明は、この問題点に着目してなされたもので、測定
対象物質と特異的に結合する物質を固定化した微粒子と
サンプルとの反応時間を短縮することを目的とする。

〔問題点を解決するための手段および作用〕本発明は、
測定対象物質と特異的に結合する物質を固定化した微粒
子とサンプル中に含まれる測定対象物質とを容器中で反
応させる方法において、微粒子として磁性体からなる粒
子を用い、サンプルと微粒子との懸濁液に磁界を加える
ものである。

サンプルと微粒子との懸濁液に磁界を加えることにより
、磁性体からなる微粒子が変位し微粒子に固定化した物
質と測定対象物質との反応が促進される。

〔実施例〕

第１図は本発明の方法を前方散乱光を直交偏光で検出す
る装置に適用した一実施例である。

セル１内に測定対象物質と特異的に結合する物質を固定
化した磁性体からなる例えば球形の微粒子とサンプルを
収容する。外部磁界発生装置２はセル１に接近して設け
られ、磁界を発生してセル１中に収容された微粒子を変
位させる。

微粒子とサンプルをセル１に収容した後一定時間外部磁
界発生装置２を働かせ磁界を懸濁液３に印加する６次に
測定操作に入る。光源４から光を放射し、この光を偏光
子５を経てセル１に投射する。セル３に収容された懸濁
液３中の微粒子により散乱されるが、その散乱光の偏光
状態は微粒子の凝集状態に応じて変化することになる。

互−いに凝集していない微粒子は球形であるため、直線
偏光された入射光の電磁波の電場ベクトルの振動方向と
同一方向に分極する。したがって、微粒子による散乱光
は入射光と同じ面内の直線偏光されたものとなる。一方
、特異結合反応が起こり、微粒子が互いに凝集すると、
粒子塊は球形とはならなくなるから光学的に異方性を呈
することになり、散乱光は入射光とは異なる偏光成分を
もつものとなる。

次にセル１内に収容された微粒子を外部磁界発生装置１
１ｆ２による磁界によって変位させる。ここで、磁界に
よる微粒子の変位を、例えば入射光の方向を軸とするそ
れと直交する平面内での周期的な回転運動とすると、未
反応の凝集していない微粒子は球形であるため回転運動
をしてもその散乱光の偏光方向は入射光の偏光方向と変
わらないが、互いに凝集した粒子塊の散乱光の偏光方向
は粒子塊の回転に伴って回転することになる。

したがって、散乱光を検光子６を経て光検出器７に入射
させると、その出力は懸濁液３中の微粒子の凝集状態に
応じて変化することになる。

すなわち、検光子６の偏光面を偏光子５の偏光面と同一
方向とすると、凝集しない微粒子の散乱光が凝集した粒
子塊の散乱光に重畳されて光検出器７に入射し、検光子
６の偏光面を偏光子５のそれと直交させると、凝集した
粒子塊の散乱光のみが光検出器７に入射することになる
。

また、いずれの場合においても、光検出器７に入射する
粒子塊の散乱光は、その回転の２倍の周波数でピークと
なる。したがって、光検出器７の出力の変化を検出する
ことにより、特異結合反応を測定することができる。

第２図は、本発明の方法を側方散乱光を検出する装置に
通用した一実施例である。第１図と共通の部材について
は同一番号を付しその説明を省略する。測定する前にセ
ル１に収容された微粒子とサンプルとの懸濁液３に外部
磁界発生装置２を働かせ磁界を印加する操作は全く同じ
である。測定時は第１図の場合と異なり外部磁界発生装
置は働かせない。

光１ｆ９１４から投射した光をセル１に投射する。

微粒子による散乱光を入射光軸に対し０°〈θ〈１８０
°例えばθ−９０°の方向に設置した光検出器７で検出
する。

第３図は第１図の特異結合反応検出装置の一実施例の構
成を示し、前方散乱を検出するようにしたものである。

この実施例では測定前及び測定時に外部磁界をセルに印
加するものである。

この実施例では、コヒーレント光を放出する光源として
波長６３２．８　ｎ−のＨｅ−Ｎ５ガスレーザ１１を用
いる。コヒーレント光を放射する光源としては、このよ
うなガスレーザの他に半導体レーザのような固体レーザ
を用いることもできる。光源１１から放射されるレーザ
光束１２は半透鏡１３により光束１４と光束１５とに分
離する。一方の光束１４は集光レンズ１６により集光し
た後、例えばグラントムソンプリズムより成る偏光子１
７に通して直線偏光された光として、透明なセル１８に
投射する。また、他方の光束１５はシリコンフォトダイ
オードより成る光検出器１９に入射させ、光Ｂ１１の出
力光強度の変動を表わすモニタ信号に変換する。

セル１８の中には、先ず表面に抗体または抗原を結合し
た磁性体より成る球形の微粒子、例えば表面に免疫グロ
ブリンを固定した粒径０．１μ〜０．０５４のＮｉ、Ｃ
ｏあるいはそれらの合金より成る強磁性体で自発磁化の
ないものを分散させた緩衝液を加えておき、その後抗原
を含む被検液を加えて抗原−抗体反応液２０を収容する
。

また、このセル１８の近傍には、外部磁界発生装置２１
を配置し、これにより微粒子を入射光の方向を軸として
それと直交する平面内で周期的に回転させるような磁界
を発生させる。外部磁界発生装置２１を測定前に一定時
作動させることで微粒子が変位しセル１８中で抗原抗体
反応が促進する。

セル１日中の微粒子によって散乱された散乱光を、一対
のピンホールを有するコリメータ２２に入射させ、前記
偏光子１７の偏光面とは異なる本実施例では直交する偏
光面を有する検光子２３を経て光電子増倍管より成る光
検出器２４に入射させる。この出力信号は低雑音増幅器
２５及び低域通過フィルタ２６を経てデータ処理装置２
７に供給する。また、このデータ処理装置２７には、光
検出器１９の出力モニタ信号も低雑音増幅器２８を経て
供給する。データ処理装置２７にはＡ／Ｄ変換部２９、
高速フーリエ変換部３０及び演算処理部３１を設け、後
述するような信号処理を行って、抗原−抗体反応の測定
結果を出力し、これを表示装置３２に供給して表示させ
る。

第４図は第３図に示す外部磁界発生装置２１の一例の構
成を示すものである０本例では、セル１８の入射光方向
と直交し、かつ互いに直交する方向にコイル３５．３６
を配置し、これらコイル３５゜３６に発振器３７により
周波数ｆｏ”１ＯＨｚで位相が９０°異なる正弦波状あ
るいはパルス状の交番電流を供給して、微粒子に入射光
方向と直交する平面内で、互いに直交する方向に９０’
の位相差をもって、すなわち磁界の方向が前記平面内で
回転するように交番磁界を作用させる。

このように微粒子に入射光方向と直交する平面内で互い
に直交する方向において９０”の位相差をもって交番磁
界を作用させると、微粒子は磁性体から成るので磁界が
作用したときの誘導磁化との相互作用により、入射光方
向と直交する平面内で、交番磁界の周波数と同じ周波数
で回転する。

第５図は第３図に示したコリメータ２２の詳細な構成を
示す図である６本例のコリメータ２２は空洞構造で、空
洞２２８は外光の影響を除くために暗箱構造となってお
り、その内面は反射防止構造となっている。空洞２２ａ
の前後にはピンホール２２ｂ及び２２Ｃを形成する。こ
のコリメータ２２は、光検出器２４の視野を限定するこ
とにより迷光を少なくするためのもので、本例では直径
０．３ｆｉのピンホール２２ｂ、２２ｃを３０ｃｉｅ離
して形成したものを用いる。

光検出器２４の検出する前方散乱光は、ブラウン運動に
よるランダムな成分と、回転磁界による周期的な成分と
、散乱体積への微粒子の出入りによって生じる粒子数の
ゆらぎによる成分とから成っている。

第３図において、セル１日中で反応液２０が抗原−抗体
反応を起さず、粒子が凝集しない場合には、球状の粒子
の持つ光学的等方性は失われないため、その回転運動中
の散乱光は入射光と同じ直線偏光をもつ、したがって散
乱光は検光子２３を透過せず、光検出器２４の出力は理
論上零となる。これに対し抗原−抗体反応が起こり、粒
子が凝集すると粒子塊は球状とはならず、光学的異方性
を呈することになり、したがって散乱光は入射光と直交
する偏光成分を持つようになるのでその一部は検光子２
３を透過するようになり、光検出器２４の出力は零では
なくなる。しかも、この粒子塊の散乱光は、磁界による
粒子塊の回転運動に伴ってその偏光方向が回転するので
光検出器２４で受光される散乱光はその回転の２倍の周
波数で変動する成分をもつようになる。

ここで血清試料等被検液中に存在する高分子その他の不
純物の散乱光は、偏光成分の直交する成分に寄与するが
それらは外部から印加される磁界によっては位置および
方向を変えないので抗原−抗体反応による散乱から区別
することができる。したがって、抗原−抗体反応をＳ／
Ｎ比良く、高感度で検出することができる。

データ処理装置２７において、光検出器２４の出力信号
を光検出器１９からのモニタ信号と共に処理して散乱光
の強度ゆらぎのパワースペクトル密度を求める過程を説
明する。ここで定常確率過程ｘ（ｔ）のパワースペクト
ル密度Ｓ　（１は、次のように表すことができる。

この式をもとに高速フーリエ変換を用いてパワースペク
トル密度の計算を行なう、すなわち、光検出器２４から
の出力信号を低雑音増幅器２５により、データ処理装置
２７におけるＡ／Ｄ変換の量子化レベルを信号の値域が
できるだけ広くおおうように増幅し、この量子化した≠
−夕をマイクロプロセッサによって演算処理してパワー
スペクトル密度を求め、このパワースペクトル密度にも
とづいて免疫反応を検出してその結果を表示装置３２に
表示する。ここで、凝集粒子が周波数ｆ０で回転すると
その光学的異方性は周波数２ｆｅで変化するので、パワ
ースペクトル密度は、粒子の凝集に応じて変化する。し
たがって、このパワースペクトル密度の周波数２ｆ。

成分の強度あるいは２ｆｏ近傍のパワースペクトル密度
の形状から、抗原−抗体反応が起こったか否かを検出し
て抗原の有無を同定したり、抗原濃度を定量することが
できる。

第６図は、第２図の特異結合反応検出装置の一実施例の
構成を示し、側方散乱光を検出するものである。

外部磁界発生装置としてヘルムホルツコイル３３ａ、３
８ｂをセル１８の両側に対向して設置する。

ヘルムホルツコイル３８ａ、３８ｂは発振器に接続され
ており、一定周波数の交番電流が流れると、セル１８中
には、交番磁界が均一に印加されるため、磁性体からな
る微粒子は揺動し反応が促進する。

光束１４はＮＤフィルター３９を通過し集光レンズ１６
により集光した後、セル１８に投射する。セル１８に収
容された抗原抗体反応液中の微粒子からのθ−９０°側
方散乱光を中空のへルムホルツコイル３８ｂ、コリメー
タ２２を経て、光検出器２４に入射させる。他の構成は
第３図に同一番号を付した構成と同一である。側方散乱
で測定時に交番磁界を印加する場合は、光束１４の中に
偏光板を、かつ、光束４０の中に光束１４中の偏光板と
偏光面の異なる検光子を配置する。

第７図は、第３図及び第６図の特異結合反応検出装置の
他の実施例を要部を示すものである。

この実施例では、光検出器２４の出力信号を同期検出袋
Ｗｔ４１において発振器３７からの周波数ｆ０をもった
参照信号により周波数２ｆｏをもった成分を同期検波し
、その出力を表示装置３２に表示させるようにした点が
第３図及び第６図と異なる。

このようにすれば、同期検出装置４１の出力は粒子の凝
集状態すなわち抗原濃度にのみ依存することになる。し
たがって、抗原濃度既知の試料について予め検量線をも
とめておけば、未知試料における同期検出装置４１の出
力からその抗原濃度を求めることができる。

第８図は第４図に示した磁界発生装置の他の構成を示す
ものである。第４図においては、コイル３５．３６を入
射光方向と直交し、かつ互いに直交する方向においてセ
ル１８の一方の側にそれぞれ配置したが、第８図Ａに示
すようにコイル３５ａと３５ｂ及びコイル３６ａと３６
ｂとをそれぞれセル１８を介して対向するように２対に
して配置することもできる。また、第８図Ｂは、セル１
８の上下に対向してコイル３５ａ、３５ｂを配置し、発
振器３７から周波数ｆ０の交番電流が流れるように接続
されている。交番電流をコイル３５ａ。

３５ｂに流すと、セル１８中に交番磁界が印加される。

したがって、磁性体からなる微粒子は揺動する。

第９図及び第１０図は、それぞれ磁界を加えない条件で
反応前及び反応後のパワースペクトル密度を示すグラフ
である。測定には第６図の装置を使用した。第９図、第
１０図の他、すべての実験に磁性体微粒子として、平均
粒径０．８７ｔｍＦｅ、Ｏ，含有率１４％（Ｗ／Ｗ）の
ボリスチレンラテックスエスタポールＬ　Ｍ　Ｐ　Ｚ６
６を使用した。

抗ＣＲＰ抗体を固定化したＬ　Ｍ　Ｐ２Ｓ５０．２５ｗ
ｔ％（粒子密度５．５　ＸＩＯ’個／ｃｄ）懸濁液１５
０μｌをセル１８に分注した状Ｂ（反応前）で９０”側
方散乱光を検出した。この検出強度のパワースペクトル
密度を第９図に示す。

セル１８に濃度１０−’　ｇ　／−のＣＲＰ溶液１５μ
ｌを注入した。注入後、ヘルムホルツコイル３８ａ。

３８ｂ非作動で１５分間インキエベートした後に９０゜
側方散乱光を検出した。この検出強度のパワースペクト
ル密度を第１０図に示す。

キ 第１１図は磁界を加えた状態でインチェベートした反応
後のパワースペクトル密度を示すグラフである。

抗ＣＲＰ抗体固定化Ｌ　Ｍ　Ｐ２Ｓ５０．２５ｗｔ％懸
濁液１５０μｌを収容したセル１８に１０−’ｇ／−の
ＣＲＰ溶液１５ｐｌを注入した。注入後、ヘルムホルツ
コイル３８ａ、３８ｂに１５Ｈｚの交番電流を流し、セ
ル１８中に７０エルステンド（Ｏｅ）の交番磁界を印加
した状態で１５分間インキュベート後９０゜側方散乱光
を検出した。この検出強度のパワースペクトル密度を第
１１図に示す０反応前（第９図参照）の緩和周波数は１
０１Ｈｚである０反応後の緩和周波数は磁界を印加しな
かった場合は８２ＨｚＣ第１０図参照）で、磁界を印加
してインキュベートした場合は３１Ｈｚ（第１１図参照
）であった、ＣＲＰ溶液と抗ＣＲＰ抗体固定化ＬＭＰ２
６６の懸濁液に磁界を加えることで反応が促進されてい
る。

第１２図は、相対ゆらぎ比と、ＣＲＰの濃度（ｇ／ｉｄ
）　　との相関を示す図である。

■は散乱光強度、〈δｒ震＞−＜（ｒ−＜ｒ＞”）＞で
ある、相対ゆらぎは光検出器の出力データから直接水め
る他に、パワースペクトル密度の緩和周波数を利用して
求めることができる。その場合、 γは比例定数、ｆｃは低域通過フィルタのカットオフ周
波数、ｆ、、は緩和周波数である。

相対ゆらぎ比は次式で表わされる。

抗ＣＲＰ抗体固定化Ｌ　Ｍ　Ｐ２Ｓ５０．２５ｗｔ％懸
濁液１５０ｇ７に、種々の濃度のＣＲＰＷＩ液１５ｐｌ
を添加して前方散乱光の直交偏光を第３図及び第８図Ｂ
の装置を使って測定した。

データから直接求めた０反応前１反応後の相対ゆらぎの
比を第１２図に示す０図中、記号Ｏはインキュベート中
に１．５Ｈｚで６６エルステツドの交番磁界を印加した
場合、また記号△はインキュベート中に磁界を印加しな
い場合の相対ゆらぎ比をそれぞれ表わす、磁界を印加し
た場合の方が相対ゆらぎ比が大であり、反応が促進され
ている。

第１３図は、前方散乱の直交偏光を検出した強度のパワ
ースペクトル密度である。

測定は、抗ＣＲＰ固定化Ｌ　Ｍ　Ｐ　２６６０．２５ｗ
ｔ％（粒子数密度５．５　ＸＩＯ”個／ｃｄ）懸濁液１
５０ｐｆと１０−６ｇ／ｄのＣＲＰ溶液１５μｌ用いて
、第３図及び第８図Ｂの装置を使用して実施した。イン
キュベート中、発振器３７で１．５Ｈｚの交番電流をコ
イル３５ａ、３５ｂに流し、セル１８中に１９０　エル
ステッドの交番磁界を印加した。

図中、記号Ａは反応前のＬＭＰ２６６！％Ｊ、濁液のパ
ワースペクトル密度を示し、記号Ｂは反応１５分後のパ
ワースペクトル密度を示す。

第１４図及び第１５図は、前方散乱の直交偏光を検出し
た強度のパワースペクトル密度である。

測定は抗ＣＲＰ固定化Ｌ　Ｍ　Ｐ２Ｓ５０．２５ｗｔ％
懸濁液１５０ｐ７と１０−＠ｇ／Ｎ＃１のＣＲＰ熔液１
５μ！用いて、第３図及び第８図Ｂの装置を使用して実
施した。第１３図の測定と同様にインキュベート中セル
１８に１９０エルステツドの交番磁界を印加した。さら
に反応前及び反応１５分後の測定時にも１．５　Ｈｚ　
１９０エスルテツドの交番磁界を印加した６反応前のＬ
ＭＰ２６６！！！濁液を測定した前方散乱光の直交偏光
成分のパワースペクトル密度を第１４図に、反応１５分
後のパワースペクトル密度を第１５図にそれぞれ示す、
明らかに測定時に印加した交番磁界の倍周波数３．０Ｈ
ｚにパワースペクトルとのピークが出ている。

測定時に交番磁界を印加した場合のスペクトルピークと
抗原濃度との相関を調べた。測定は第１４．第１５図と
同様に、種々の濃度のＣＲＰ溶液を用いて繰り返し実施
した。第１６図にその結果を示す０図中、横軸にＣＲＰ
の濃度（ｇ／ｄ）をとり、縦軸に　スペクトルピーク比 反応前のスペクトルピーク値 をとった、スペクトルピーク値は１．５Ｈｚの交番磁界
を印加したので、３．０Ｈｚのスペクトルピーク値をと
った 上述した実施例では反応液をセルに収容して測定を行う
バッチ方式としたが、抗原−抗体反応を連続的に流しな
がら測定を行うフロ一方式とすることも勿論可能である
。さらに上述した実施例では光源を用いたが、インコヒ
ーレントな光を放射する光源を用いることもできる。

また、磁性体より成る微粒子は球形に限らず、入射光の
波長の数十分の−の大きさを持つ超微粒子を用いれば、
球形でなくともよい。

また、上述した第３図に示す実施例では検光子２３の偏
光面を偏光子１７のそれに対して直交させたので、光検
出器２４には凝集しない微粒子の散乱光は入射しない、
したがって、光検出器２４の出力強度、あるいはその平
均値から免疫反応を高精度で検出することもできる。さ
らに、検光子２３の偏光面は偏光子１７の偏光面に対し
て任意に設定することができる。

また第６図Ａでは、微粒子を入射光方向を軸としてそれ
と直交する平面内で回転させるようにしたが、任意の方
向に回転させても同様にして免疫反応を検出することが
できる。また、このような微粒子の磁界による変位は、
コイルに直流電流を断続的に供給して行うこともできる
し、またコイルを用いる代わりに永久磁石を回転させて
行うこともできる。また、測定に先立って外部磁界発生
袋ｙ１２１により反応液２０に均一または不均一な磁界
を断続的に作用させることもでき、これにより同一装置
で断続的に微粒子を磁界の方向に配向させて特異結合反
応を促進させることもできる。

〔発明の効果〕

本発明によれば、サンプルと磁性体からなる微粒子と懸
濁液に磁界を加えるので、反応が促進され短時間で測定
を行なうことができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明を前方散乱光を検出する装置に適用し
た実施例を示す図、 第２図は、本発明を側方散乱光を検出する装置に適用し
た他の実施例を示す図、 第３図は、第１図の装置の一実施例の構成を示す図、 第４図は、第３図に示す外部磁界発生装置の一例の構成
を示す図、 第５図は、同じくコリメータの詳細な構成を示す図、 第６図は、第２図の装置の一実施例の構成を示す図、 第７図は、第３図及び第６図の装置の他の実施例の要部
を示す図、 第８図Ａ、Ｂは、第４図の外部磁界発生装置の他の例を
示す図、 第９図は、反応前の側方散乱光強度のパワースペクトル
密度を示すグラフ、 第１０図は、反応１５分後の側方散乱光強度のパワース
ペクトル密度を示すグラフ、 第１１図は、磁界を印加してインキエベートした場合の
側方散乱光強度のパワースペクトル密度を示すグラフ、 第１２図は、相対ゆらぎ比とＣＲＰ　ｔ１度の関係を示
すグラフ、 第１３図は、前方散乱光の直交偏光成分のパワースペク
トル密度を示すグラフ、 第１４図は、反応前に前方散乱光の直交偏光成分を磁界
を印加した状態で検出したパワースペクトル密度を示す
グラフ、 第１５図は、同じ（反応後のパワースペクトル密度を示
すグラフ、 第１６図は、スペクトルピーク比とＣＲＰ　ｆＲ度との
関係を示すグラフである。 １．１８−・・・−セル　　２．２１・−・・−外部磁
界発生装置３−・・−・・−・・懸濁液　　４．１１・
・・−光源５．１７−・・−偏光子　６，２３・−・検
光子！・・・セル ４・・−九滉 ５・−・４＆九子 ６−・・検光子 第２図 第　４因 第　５区 第　７　凶 Ａ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｂ第８図 Ｆｉ３逼数　（Ｈｚ） 第９　区 １Ｗ１５ＩＩＥ数　（Ｈｚ） 第１０図 ＩＩＩ：ＪＩ数　（Ｈｚ） 第１１図 ＩＯ′＋ｏ’　　　ｌｏ−７ｔｏ−’　　　Ｋｆ５ｔｏ
″机＃遭戊　　　（９／ｍｌ） 第１２区 周５Ｉｌ数　（Ｈｚ） 第１３　区 周遍数（Ｈｚ） 第１４６

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）測定対象物質と特異的に結合する物質を固定化し
   た微粒子とサンプル中に含まれる測定対象物質とを容器
   中で反応させる方法において、前記微粒子として磁性体
   からなる粒子を用い、サンプルと微粒子との懸濁液に磁
   界を加えることを特徴とする特異結合反応の促進方法。