JPS63202397A - 光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、一般式 ％式％（１） （式中Ｒ，はアルキル基、アラルキル基又はアリール基
、Ｒ２はアルキル基、ｎは１又は２を示す）で表わされ
る光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製造法
に関する。

式Ｉのカルボン酸及びその対掌体エステルは光学活性を
有する種々の生理活性物質を合成するための原料として
利用されている。

従来、式■の光学活性カルボン酸の製造方法としては、
予め有機合成的にラセミ体のカルボン酸を合成したのち
、光学分割剤を用いて分割する方法、すなわち物理化学
的に一方の光学活性体とその対掌体とに分別する方法が
知られている（特開昭５５−１１８４５５号、同５６−
８１５５７号、同５７−１８８５６３号、ヨーロッパ特
許公開筒７９２００４７７最善公報参照）。

一方、光学活性カルボン酸エステルは、カルボン酸を光
学分割したのちエステル化反応を行い、光学活性エステ
ルに導く方法などが採られている。

しかし、これらの方法では、高価な分割剤が多量に必要
とされること、この分割剤が不純物として製品中に混入
しやすいこと、分割工程が複雑であることなどの欠点が
あり、工業的な製法としては必ずしも満足できるもので
はない。

これらの欠点を改良する方法として、最近、式■で表さ
れる光学活性を有するカルボン酸やその対掌体エステル
を微生物の作用により製造する方法が提案されている（
特開昭６０−１２９９３号、同６〇−３０６９２号、同
６０−１４１２９７開示公報参照）。

本発明者らは、さらに微生物の作用により　ＯＬ−カル
ボン酸エステルを不斉加水分解する方法に関して鋭意研
究を行った結果、新たに、エンテロバクタ−（Ｅｎ　ｔ
ｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属の微生物を用いることにより、
式Ｉで表される光学活性カルボン酸及びその対掌体エス
テルを効率よく製造できることを見出した。

すなわち、本発明は、一般式 ％式％） （式中Ｒ１はアルキル基を示し、Ｒ，、ｈｚ及びｎは前
記の意味を存する）で表わされるエステルにエステル結
合を不斉加水分解する能力を存するエンテロバクタ−（
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属に属する微生物の培養液
、菌体又は菌体処理物を作用させることを特徴とする一
般式 ％式％（ （式中Ｒ３、Ｒｔ及びｎは前記の意味を有する）で表わ
される光学活性カルボン酸及びその対掌体エステルの製
造法である。

式Ｉ及び式■の化合物のｒｉｌｔＡ　ａ　Ｒ、のアルキ
ル基としては、例えばメチル基、エチル基など、アラル
キル基としては、例えばベンジル基、アリール基として
は、例えばフェニル基が挙げられる。

本発明に用いられる式■のエステルとしては、例えばＳ
−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル、Ｓ−アセ
チル−Ｔ−メルカプト−α−メチル−ｎ−酪酸メチル、
Ｓ−ベンゾイル−β−メルカプトイソ酪酸メチル、Ｓ−
フェニルアセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチルなど
が挙げられる。これらエステルのＤ一体とし一体の混合
割合は特に限定されない。

本発明で用いられる微生物は、エンテロバクタ−属に属
し、前記の化合物のエステル結合を不斉加水分解する能
力を有する微生物であって、例えばエンテロバクタ−・
クロアッセ（Ｅｎｔｓｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ
　）　ＩＡＭ　１６２４が挙げられる。この微生物は公
知の微生物であり、東京大学応用微生物研究所（ＩＡＭ
）の菌株保存機関を通じて容易に入手することができる
。

本発明における微生物の培養は、通常液体培養で行う、
培地としては、微生物が資化し得る炭素源、窒素源、ビ
タミン、無機塩類等を適宜使用するが、微生物の加水分
解能を向上させるために、エステル等を培地に少量添加
することも可能である。培養は微生物が生育可能である
温度及びｐＨで行われるが、通常、温度５〜５０℃、ｐ
１１２〜１１、好ましくは５〜８の範囲である。微生物
の生育を促進させるために通気撹拌を行っても良い。

加水分解反応を行うに際しては、培養の開始時又は途中
で培地にエステル（式■）を添加しても良く、予め微生
物を培養したのち培養液にエステル（式■）を添加して
も良い、また、増殖した微生物の菌体を遠心分離等によ
り採取し、これをエステルを含む反応媒体に加えても良
い、この場合、菌体は取り扱い上の便宜から乾燥菌体、
例えば凍結乾燥菌体、噴霧乾燥菌体又は有機溶媒、例え
ばアセトン、トルエン等で処理した国体、あるいは菌体
破砕物、菌体抽出物等の菌体処理物を用いることもでき
る０反応媒体としては、例えばイオン交換水又は緩衝液
が用いられる０反応媒体又は培養液中のエステルの濃度
は０．０１〜５０重景％が好ましい、エステルは水に懸
濁した状態で加えることもできる。また、メタノール、
アセトンなどの有機溶媒を反応液に加えてエステルの溶
解性を向上させることもできる０反応液のｐｉ（は２〜
１１、好ましくは５〜８の範囲である０反応が進行する
に伴い生成したカルボン酸により反応液のｐＨが低下し
てくるが、この場合は適当な中和剤で最適ｐＨに維持す
ることが好ましい。反応温度は５〜５０°Ｃが好ましい
。

反応液又は培養液からの生成物の分離精製は通常の方法
、例えば抽出、再結晶、カラムクロマトグラフィ等によ
り行うことができる。

以下、実施例に従って本発明を詳述する。

なお、下記実施例中の％は特定してない限り重量％を意
味する。

実施例１ エンテロバクタ−・クロアッセ（Ｅｎ　ｔｅｒｏｂａｃ
　ｔｅｒｃｌｏａｃａｅ）ＩＡＭ　１６２４を肉エキス
１．０χ、ペプトン１．０χおよびＮａＣ１０，５％か
らなる液体培地（ｐＨ７，２）　１００　ｉｄに植苗し
、３０°Ｃ１日間振盪培養を行った。培養終了後、培養
国体を全ｉ集菌し、１／ＩＯＭりん酸緩荷液（ｐＨ７）
１００　ｄに懸濁した。この菌体懸濁液に（±＞−Ｓ−
アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル２−を加え、
３０°Ｃで４８時間振盪して反応させた０反応終了後、
反応液５ｄを除菌し高速液体クロマトグラフィーにより
反応生成物がＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸で
あることを確認した。この時のＳ−アセチル−β−メル
カプトイソ酪酸メチルの分解率は４８％であった。

反応液をＮ　ａ　ＯＩＩでｐＨ７，０に調整し、Ｓ−ア
セチル−β−メルカプトイソ醋酸メチルを酢酸エチルで
抽出分離した０次いで水層を硫酸でｐＨ２，０に下げた
のち、水層中のＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸
を酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液に無水硫酸
ナトリウムを加えて脱水処理したのち溶媒を蒸発除去し
た０分離抽出されたＳ−アセチル−β−メルカプトイソ
酪酸及びＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル
の比旋光度を日本分光製旋光度針（ＤＩＰ−３６０型）
で測定した。

結果を表１に示す、この表より光学活性カルボン酸とそ
の対掌体エステルが生成していることが判る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１はアルキル基、アラルキル基又はアリール
   基、Ｒ＿２及びＲ＿３はアルキル基、ｎは１又は２を示
   す）で表わされるエステルに、エステル結合を不斉加水
   分解する能力を有するエンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏ
   ｂａｃｔｅｒ）属に属する微生物の培養液、菌体又は菌
   体処理物を作用させることを特徴とする、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１、Ｒ＿２及びｎは前記の意味を有する）で
   表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エステル
   の製造法。