JPS63188627A - 抗アレルギ−・抗炎症剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、既知化合物の新規な医薬への応用に関し、更
に詳しくは、フラビンアデニンジヌクレオヂド（以下、
ＰＡＤと略称する）、フラビンモノヌクレオチド（以下
、ＦＭＮと略称する）およびリボフラビン（以下、ＦＲ
と略称する）からなる群から選ばれる成分を必須成分と
して含有する抗アレルギー・抗炎症剤に関する。

従来、優れた抗アレルギー剤または抗炎症剤として副腎
皮質ホルモンが繁用されてきたが、この薬剤は長期間連
用すると重篤な副作用を発現するため、最近では、かか
る副作用の少ない、あるいは全くない非ステロイド系薬
剤の開発に力が注がれる様になった。本発明者らも、こ
の様な立場で鋭意研究を重ねた結果、従来、主としてビ
タミンＢｔ補給の目的にのみ使用されてきたＦＡＤ、お
よびその生体内誘導体であるＰＭＮおよびＰＲに、優れ
た抗アレルギー・抗炎症作用のあることを見い出し、本
発明を完成するに至った。

ＦＡＤに限って言えば、これは眼科領域において、種々
の角膜疾患に対する基礎的治療薬の一つとして今日広く
使用されており、その薬効評価も確定している（山之内
卯−他：眼臨、７５．３３８．１９８１）。しかしなが
ら、その薬効評価の対象は角膜疾患であり、実験モデル
としては、例えば角膜上皮の創傷治癒を指標としており
、所謂炎症そのもの、さら（こはアレルギー性炎症に対
する作用は全く検討されておらず、従って、アレルギー
および／または炎症の治療に用いられたことはない。

ＦＡＤ、ＦＭＮおよびＦ’Ｒ（以下、簡略化のためｒＰ
ＡＤなど」という）は、抗アレルギー・抗炎症作用を有
しており、従って、抗原抗体反応が原因となっている諸
症状の治療、特にアレルギー性結膜炎、外因性喘息、枯
草熱、じんま疹、湿疹、アトピー性皮膚炎およびアレル
ギー性鼻炎の様な上部呼吸器疾患などの各種アレルギー
性疾患の治療に有用である。

ＦＡＤなどは、そのままの形で、ヒトを含む哺乳動物に
投与することもできるが、通常は、薬学的に許容し得る
種々の担体または補助剤、あるいは場合により他の活性
物質と共に、医薬製剤の形に調製して投与するのが好ま
しい。この様な製剤の例としては、カプセル剤、顆粒剤
、散剤、錠剤、トローチ剤、火剤、軟膏剤、シロップ剤
、注射剤、坐剤、エーロゾル剤、吸入剤などが挙げられ
る。

ＦＡＤなどの投与量は、年令、症状、投与方法などによ
って異なる。例えば点眼剤の場合、０．１〜ｌ０９０重
量％溶液、好ましくは０．５〜２．５重量％溶液を用い
、ＦＡＤなどの１日当たりの投与量を０．１５〜１２０
ｍｇ、好ましくは０６７５〜３０ｍｇ１日とする（通常
３〜５回に分割投与）。経口および直陽内投与の場合の
投与量は、１．０〜３００　Ｈ／ｋｇ／日であり、好ま
しくは５０〜１００１１ｒ９／に９／日である。

この様に、抗アレルギー・抗炎症剤としてのＦＡＤなど
の使用量は、従来の使用量に比較して著しく高い（通常
１０−１００倍）。しかしながら、ＦＡＤなどの毒性は
極めて低く、従って、ＦＡＤなどを抗アレルギー・抗炎
症剤として使用することに何ら不都合はない。例えばＦ
ＡＤの急性毒性：ＬＤｓ。（マウス）は、経口で７００
０　Ｈ／ｋＬｉ以上、静脈内投与で５８９ｍ９／に９で
あり、ＰＲの急性毒性：ＬＤｓｏ（ラット）は、経口で
１００００　ｍｇ／ｋｇ以上、腹腔的投与で５６０ｍ９
７ｋｇ以上である。

以下に、ＦＡＤなどの抗アレルギー作用および抗炎症作
用に関する薬理実験の結果を示す。

試験例（＋） ラットの受動性皮膚アナフィラキシ−（ＰＣＡ）反応抑
制試験 体重１５０〜２００９のラット背部皮内に、抗卵白アル
ブミンマウスモノクローナル■ｇＥ抗体（Ｓｅｒａ−ｊ
ａｂ社製　力価４０００）を１００ｄの生理食塩水に溶
解したものの２０倍希釈ＫＯ，１ｎＱを注射して受動的
に感作した。２４時間後、卵白アルブミン３麓９を含む
２％エバンスブルー液０゜５１を尾静脈内投与した。３
０分後動物を放血致死させ、皮膚を剥離して青染部の漏
出色素量をＵ　ｄａｋａらの方法（Ｐｒｏｃ、Ｓｏｃ、
Ｅｘｐ、Ｂｉｏｌ、Ｍｅｄ、。

±３３，３８４（＋　９７０））に準じて測定した。

すなわち、青染部を細片後、ホルムアミド（和光純薬）
にて２４時間抽出し、分光光度計により波長６２０ｎｍ
における吸光度を測定し、予め作成した検量線より定量
した。薬物は抗原投与の３０分前に腹腔的投与した。陽
性対照には市販の抗アレルギー剤であるトラニラストを
用いた。実験の結果、以下の表１に示すようにＦＡＤ（
６ＯＮ９／に９）、ＰＭＮ（１００Ｒｇ／ｋｇ）、Ｐ　
Ｒ（２００ｙｔ９／に９）（１）投与によりそれぞれ有
意な抑制が認められた。陽性対照薬であるトラニラスト
は６０ｙｒｇ／ｋｇの投与において有意な抑制作用を示
した。ＦＡＤは１ＯＯｎ／に９の投与においては約９０
％の阻害を示しその抑制作用はトラニラストと同等であ
った。

紅 対照　　　　　　　　　５０．５±５．０　　　１５＊
＊＊ ＦＡＤ　　　　　１００　　　４．９±２．４６６０　
　　１９．２±５．５＊＊＊　　　。

ＦＭＮ　　　　　１００　　３２．２±３．９＊７ＦＲ
２００２９，２±５．７＊７ トラニラスト　１００　　　　４．９±２．０＊＊＊　
　　８６０　　１１．１±ｇ、０＊＊＊　　ｇａ）平均
値上標準誤差 対照からの有意差；　＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜　０
．００１試験例（２） アレルギー性結膜炎に対する影響 体重１５０〜２００ｇのウィスター系雄性ラットの上眼
瞼結膜下に卵白アルブミンに対するマウスモノクローナ
ルＩｇＥ抗体（Ｓｅｒａ−Ｊａｂ社、力価２０に希釈）
１０μＱを注射し、受動感作した。２４時間後に披検薬
（ＦＡＤｌＦＭＮ、ＰＲおよびクロモグリク酸ナトリウ
ム（ＤＳＣＧ）、ｌＯμＱ）を両眼に点眼し、その１５
分後に色素・抗原溶液（エバンスブルー６　、２５　ｍ
９．／ｌ（１・卵白アルブミン１２．５＋ｇ／１ｌ１２
）を用ｍ２ｘＱ／に９の割合で尾静脈より投与し、アレ
ルギーを惹起した。静注３０分後に色素漏出部分を切取
り、Ｕ　ｄａｋａらの方法で色素量を測定した。対照に
は生理食塩水を用いた。

その結果、表２に示すように結膜肥満細胞を感作してア
レルギー反応を惹起した時には２４．８±０．８μ９の
色素が漏出した。このアレルギー反応による色素漏出は
ＦＡＤ（０，５％〜５．０％）、ＰＭＮ（５，０％）、
ＰＲ（５，０％）の点眼により有意に抑制された。陽性
対照薬であるＤＳＣＧは２％において有意な抑制作用を
示した。

表２ 対照　　　　　−２４，８±０．８　　　３３Ｆ’ＡＤ
　　　　　５．０　　　１？、６±０．８＊＊＊１５＊
＊ Ｑ、５　　２１．１±０．７　　　１１ＰＭＮ　　　　
５．０　　１ｇ、７±１．９”　　　７ＦＵｔ　　　　
　　５．０　　　２０．５±１．５＊８ＤＳＣＧ　　　
　５．０　　　１７．０±１，９＊＊＊８２．０　　　
２０．６±１．４＊６ ａ）平均値上標準誤差 対照からの有意差；　＊ｐ＜０．０５、ｉｐ＜　ｏ、ｏ
ｔ。

＊Ｈｐ＜　０．００１、 試験例（３） アレルギー性鼻炎に対する作用 体重１８０〜２５０９のウィスター系雄性ラット１群７
〜１６匹に卵白アルブミン（ＯＡ）に対するマウスモノ
クローナルＩｇＦ抗体（Ｓｅｒａ−Ｊａｂ社、）２価１
０に希釈）を尾静脈内投与し、受動感作ラットを作成し
た。、小島らの方法（アレルギー、３５．１８０（１９
８６））に従い、感作の翌日にベントバルヒタール麻酔
□＜５０１１９／に９．　ｉ、ｐ、）下でラットの気管
切開を行った。気道確保後、外径Ｌ＋＋ｉのポリエチレ
ンチューブを、気管から鼻腔へ向けて挿入し、さらに食
道と気管挿入部位を結紮した。３７℃に加温した生理食
塩水を、ベリスフリックポンプを用いて、毎分Ｑ、ｌ２
ｚ１２の流速で送液し、鼻腔より流出する潅流液を１０
分間隔で採取した。

なお、潅流液の組成は下記のように経時的に変え、これ
をＰ−１からＰ−５とした。採取した潅流液中の漏出し
たボンタミンスカイブルー（以下、ＰＳＢと略す）の色
素量を、６２０ｎｍにおける吸光度により測定した。結
果を以下の表３に示す。

０期（Ｐ−Ｑ）　：鼻腔内の洗浄と安定化のために１０
分間生理食塩水で潅流 １期（１’−１）　：　４％ＰＳＢ生理食塩水を０　、
５　ｍＱ／１００９（体重）の割合で静注した後、自然
漏出するＰＳＢを測定する目的 で１０分間生理食塩水で潅流 ２期（Ｐ−２）　＋　２０ｔｔｔ９／に９０Ａ生理食塩
水を１０分間潅流しアレルギー反応を誘発 ３期（Ｐ−３）　：　　１６分間生理食塩水潅流４期（
Ｐ−４）　＋　　１０分間生理食塩水潅流５期（Ｐ−５
）　：　　１０分間生理食塩水潅流表３（り 色素量（μ９）ａ） 対照　　　ＦＡＤ（１００ｍｇ／　ｋｇ、　ｉ、ｐ、）
（ｎ＝　１６）　　　　　（ｎ＝　１５）Ｐ−２０，５
６±０．１１　　　０．２２＋０．０８＊Ｐ　−３１，
９０＋０．４７　　　０．６４＋０．１２＊Ｐ　−４３
，４１＋０．９１　　　１．０９＋Ｏ，１ｌｌｔ＊Ｐ−
５４，７７±１．２４　　　１．７６＋０．３０＊Ｔｏ
ｔａｌ　　　１０．７０＋２．６３　　　　’３．７０
±０．６０＊表３（２） 色素量（ｋｇ）ａ） 対照　　　ＦＭＮ（１００肩９／に９．ｉ、ｐ、）（＋
＋　＝　９）　　　　　　Ｃｎ　＝　７）Ｐ−２０，６
０＋０．１５　　　０．２６±０．０７＊Ｐ−３１，９
８±０．７１　　　０．６５±０．１４Ｐ−４２，９１
±０．７０　　　１．１０±０．３１＊Ｐ−５３，６４
±α、７７　　　１．４１±０；４５＊Ｔｏｔａｌ　　
　９．ｌａ±２．０４　　　３．４１±０．９３＊ａ）
平均値上標準誤差 対照からの有意差；＊ｐ＜ｏ、ｏｓ ＰＡＤ（１００ｍ９／に９）投与群においては２期〜５
期のいずれの期間においても対照群との間に有意な抑制
が認められ、２期〜５期の総漏出量で６５％の抑制を示
した（ｐ＜０．０５）。Ｆ’ＭＮ（１００ＩＩ！９／ｋ
ｇ）投与群においては２．４および５期と２〜５期の総
漏出量とで対照群との間に有意差が認められ、また総漏
出量で６３％の抑制を示した（ｐ＜０．０５）。

試験例（４） 家兎眼におけるｎ−ブタノールを用いた抗炎症活性の測
定 家兎の片眼に被検薬を、地銀に生理食塩水（対照）を５
０μσ点眼し、１５分後に５０％ｎ−ブタノールを１０
μＱ点眼して炎症を惹起した。ｎ−ブタノール点眼の４
５分、３０分、および１５分面、並びに０分、１０分、
２０分、３０分、６０分、１２０分、１８０分、２４０
分、３００分、３６０分後に角膜表面温度を測定した。

また、点眼前、および３０．６０．１８０．３６０分後
にドレイズ法（Ｊ　、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　Ｅｘｐ、
Ｔｈｅｒ６，８２．３７７（１’９４４））による肉眼
的観察を行った。なお、陽性対照にはステロイド系抗炎
症剤であるデキサメタシンを用いた。

角膜表面温度に基づく薬効評価は、対照投与眼と薬物投
与眼について、時間一温度曲線上面積（ＡＵＣ）を求め
、これから以下の式により炎症の抑制率を算出すること
により行った。

抑制率（％’）＝　［１−ＡＵＧ（薬物）／ＡＵＧ（対
照）］　Ｘ　１００結果を以下の表４に示す。

表４ 薬物名　　　濃度（％）　　抑制率（％）ａ）例数＊＊ ＰＡＤ　　　　　　　５．８　　　　　３５．９±８，
０６０．５　　　２９．（１±４．６”　　　６＊＊ デキサメタシン０．１　　　４０．２±６．０６＊＊＊ ０．０１　　　２８．７±２．２６ ＊＊ ０．８０１　　１４．４±６．５６ ａ）平均値士標準誤差 対照からの有意差、　Ｕｐ＜Ｏ，吋、＊＊＊ｐ＜０．０
０１ＦＡＤでは、０．５％から用量依存的な炎症の有意
な抑制が認められた。一方、陽性対照であるデキサメタ
シン０．００１％〜０．０１％の抑制率は良好な用量−
作用曲線を示した。また、Ｆ’ＡＤ点眼による眼刺激性
は、検討した各濃度において認められなかった。

試験例（５） 血管透過性に対する作用 ＩＣＲ系マウス（体重２５〜３３ｇ）’ｉ用い、Ｗｈｉ
ｔｔｌｅの方法（Ｂｒｉｔ、Ｊ　、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
、、　２２　。

２４６（１９６４））に従って試験を行った。すなわち
、４％ボンタミンスカイブルー溶液を０．１ｒｎＱ／１
０９静脈内投与し、５分後に０．６％酢酸を０．１Ｊ１
１２／１０９腹腔内投与した。更に３０分後に、マウス
を断頭放血し、腹腔内を１０ｍ１２の生理食塩水に゛て
洗浄し、洗液を集めて３０００　ｒｐｍ、５分間遠心分
離し、上清の６１６ｎｍにおける吸光度を測定し、予め
作成した検量線から漏出色素量を求めた。このとき、血
液の混入したサンプルは除外した。尚、薬物投与は色素
投与２５分前に行った。

陽性対照には非ステロイド系抗炎症剤であるインドメタ
シンを用いた。結果を表５に示す。

表よ 対照群　　　　−４８４，２±２４，７　　　２５ＦＡ
Ｄ　　　　　５０　　３３９．６±４７．９”　　　ｔ
。

ＰＲ５０３９２，３±２７．４”　　　　９ａ）平均値
士標準誤差。

対照からの有意差；　＊Ｉ）＜０．０５、＊＊ｐ＜ｏ、
ｏｔ。

＊＊＊ｐ＜　０．００１ 各薬物を静脈内投与した場合、対照群の色素漏出量（３
２４，５±２４．４μｇ）に対し、ＦＡＤは用量依存的
に色素の漏出を抑制し、５０Ｈ／ｋｇではその作用は有
意なものであった（ｐ＜０．０５）。

ＦＲ投与群では、５０ｍ９７に９で約２０％の抑制を示
し有意（ｐ＜０．０５）であった。なお、陽性対照であ
るインドメタシンは１０ｍ９／ｋｇの投与において約４
１％の抑制率を示した。

試験例（６） カラゲニン浮腫に対する作用 体重１５０ｇ前後のウィスター系雄性ラットの右足上皮
下に２％カラゲニン（逗子化学）溶液を０゜０６ｔｎＱ
／ＰＡＷ投与した。３時間後の定容積をデジタルボリュ
ウムメーター（室町機械製）で測定し、浮腫率を算出し
た。尚、薬物はカラゲニン投与３０分前に腹腔内に投与
した。陽性対照には非ステロイド系抗炎症剤であるイン
ドメタシンを用いた。

結果を以下の表６に示す。

表ｉ 対照群　　　　　　　　３７．２±２，１　　　　２５
ＦＡＤ　　　　１００　　１７．０±、３＊＊＊　　　
ｔ。

５０　　２８．０±２．７＊１５ Ｆ　Ｍ　Ｎ　　　　３００　　２１．７±２．２＊＊＊
７ＦＲ３００２６Ｊ±３．３”　　　　？インドメタシ
ン１０　　　２２．８±３．２”　　　ｔ。

ａ）平均値上標準誤差 対照からの有意差；　＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜　０．
０１、＊＊＊ｐ＜　０．００１ ＦＡＤは用型依存的に浮腫を抑制した。カラゲニン投与
３時間目における抑制率は、ｌ００１１ｇ／に９投与時
で５４％、５０ｙｐｇ／ｋｇ投与時で２５％であった。

Ｆ’ＭＮ、ＰＲは３００巧／に９の投与においてそれぞ
れ有意な抑制を示した（Ｆ　Ｍ　Ｎ　：　ｐ＜　０　。

００１、Ｐｎ：　ｐ＜０．０５）。

ＦＡＤを含む典型的な製剤組成物の実施例を以下に示す
。

製剤例１ （１）点眼剤（１％水溶液） ＦＡＤ　　　　　　　　　　　　ｎ ＥＤＴＡ　　　　　　　　　　　Ｏ，００２９クロロブ
タノール　　　　　　０．５０９燐酸塩緩衝液（ｐＨ５
，９）　　　　適　全会量　　　　　１００．ＯＪ！（
７ （２）カプセル（１００晃ｇ） ＦＭＮ　　　　　　　　　　　　１００ｍｇマンニット
　　　　　　　　　１９５ｘｇステアリン酸マグネシウ
ム　　　　５１１９全’１１　　　　　３００ｍｇ （３）錠剤（１００所） ＰＲ１００３１９ デンプン　　　　　　　　　　　１００肩タステアリン
酸マグネシウム　　　１５ｕ乳糖　　　　　　　　　　
　　　８５ｘｇ全ｉｉ　　　　　　３００ｍ９ 上記の各製剤を、常法に従って製造した。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、フラビンアデニンジヌクレオチド、フラビンモノヌ
   クレオチドおよびリボフラビンからなる群から選ばれる
   少なくとも１種の成分を必須成分とする抗アレルギー・
   抗炎症剤。