JPS6259781B2 - - Google Patents
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- JPS6259781B2 JPS6259781B2 JP55139435A JP13943580A JPS6259781B2 JP S6259781 B2 JPS6259781 B2 JP S6259781B2 JP 55139435 A JP55139435 A JP 55139435A JP 13943580 A JP13943580 A JP 13943580A JP S6259781 B2 JPS6259781 B2 JP S6259781B2
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
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- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/108331—Preservative, buffer, anticoagulant or diluent
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血液試料中の血小板フアクター4
(PF4)の安定化法に関する。本発明によれば生
体内から採集されたPF4含有血液試料が試験管内
でPF4の様な血小板遊離成分を更に生成させるこ
とが抑制され、これによつてPF4の分析に室温で
血液試料を操作することが可能になり然も試料の
PF4の測定値は生体内の血液中のPF4値を正確に
反映する。
(PF4)の安定化法に関する。本発明によれば生
体内から採集されたPF4含有血液試料が試験管内
でPF4の様な血小板遊離成分を更に生成させるこ
とが抑制され、これによつてPF4の分析に室温で
血液試料を操作することが可能になり然も試料の
PF4の測定値は生体内の血液中のPF4値を正確に
反映する。
血小板フアクター4(PF4)は細胞が遊離反応
をうけるとき血小板のα−粒子から分泌される小
分子量蛋白質である。血小板が活性化された後内
皮下組織およびトロンビン、アデノシンジホスフ
エイトおよびエピネフリンを含む他の生理学的薬
剤と接触させられた際この現象がおこる。血液試
料中のPF4は従来からの放射線免疫試験法を使つ
て測定される。困つたことに従来の血液採集法は
採血試料中の遊離機構の活性化となる。測定され
た遊離反応が試験管内でなく生体内の遊離反応活
性化の結果であることを保証するため最大の注意
を払う必要がある。
をうけるとき血小板のα−粒子から分泌される小
分子量蛋白質である。血小板が活性化された後内
皮下組織およびトロンビン、アデノシンジホスフ
エイトおよびエピネフリンを含む他の生理学的薬
剤と接触させられた際この現象がおこる。血液試
料中のPF4は従来からの放射線免疫試験法を使つ
て測定される。困つたことに従来の血液採集法は
採血試料中の遊離機構の活性化となる。測定され
た遊離反応が試験管内でなく生体内の遊離反応活
性化の結果であることを保証するため最大の注意
を払う必要がある。
従来法は広く種々の方法があり、血小板遊離反
応に対して採血試料を安定化する方法である。
応に対して採血試料を安定化する方法である。
血小板遊離反応抑制のため血液試料の注意深い
取扱いが必要である。一般に標準EDTA(エチレ
ンジアミンテトラ酢酸)の入つた真空採血容器を
使う静脈穿刺法によつて採血される。血液は容器
中でEDTAと静かに転倒させて混合し容器を氷浴
中におく、30分後に試料を2〜4℃で20分間2500
×gにおいて遠心分離する。遠心分離は採血後2
時間以内に行なわねがならない。血漿は分離し直
ちに分析するか又は2〜4℃で24時間又は−20℃
で3ケ月迄貯蔵できる。
取扱いが必要である。一般に標準EDTA(エチレ
ンジアミンテトラ酢酸)の入つた真空採血容器を
使う静脈穿刺法によつて採血される。血液は容器
中でEDTAと静かに転倒させて混合し容器を氷浴
中におく、30分後に試料を2〜4℃で20分間2500
×gにおいて遠心分離する。遠心分離は採血後2
時間以内に行なわねがならない。血漿は分離し直
ちに分析するか又は2〜4℃で24時間又は−20℃
で3ケ月迄貯蔵できる。
Thrombosis Research、6、543−548
(1975)はEDTAおよびテオフイリンの存在にお
ける採血を発表しているが、0℃における遠心分
離を必要とする。
(1975)はEDTAおよびテオフイリンの存在にお
ける採血を発表しているが、0℃における遠心分
離を必要とする。
Thrombosis Research、12、851−861
(1978)は血小板遊離抑制剤EDTA、プロストグ
ランデインEおよびテオフイリンの存在における
PF4用血液採取を発表している。この方法も低温
における不便な遠心分離を必要としている。
(1978)は血小板遊離抑制剤EDTA、プロストグ
ランデインEおよびテオフイリンの存在における
PF4用血液採取を発表している。この方法も低温
における不便な遠心分離を必要としている。
ニーメツツらはProc.Soc.Exp.Biol.Med.、
128、658(1968)に血餌収縮、アデノシンジホス
フエイト(ADP)とトロンビンによりおこる血
小板凝集に対する種々の麻酔薬の影響を記載して
いる。この研究でp−アミノベンゾイルジエチル
アミノエタノール塩酸塩(プロカイン)とp−ア
ミノベンゾイルジブチルアミノエタノール(ブタ
カイン)およびp−ブチルアミノベンゾイルジメ
チルアミノエタノール(テトラカイン)の様な関
連同族体とがトロンビンによりおこる血小板凝集
を防止することがわかつたのである。ブタカイン
とテトラカインはADPによりおこる血小板凝集
を防止するが、プロカインは防止しない。ブタカ
イン、テトラカインおよびプロカインはトロンビ
ンによりおこる血小板凝集を防止する。今や意外
なことにプロカインは採血操作中血小板フアクタ
ー4の遊離を抑制するが、ブタカインとテトラカ
インはしないことがわかつたのである。
128、658(1968)に血餌収縮、アデノシンジホス
フエイト(ADP)とトロンビンによりおこる血
小板凝集に対する種々の麻酔薬の影響を記載して
いる。この研究でp−アミノベンゾイルジエチル
アミノエタノール塩酸塩(プロカイン)とp−ア
ミノベンゾイルジブチルアミノエタノール(ブタ
カイン)およびp−ブチルアミノベンゾイルジメ
チルアミノエタノール(テトラカイン)の様な関
連同族体とがトロンビンによりおこる血小板凝集
を防止することがわかつたのである。ブタカイン
とテトラカインはADPによりおこる血小板凝集
を防止するが、プロカインは防止しない。ブタカ
イン、テトラカインおよびプロカインはトロンビ
ンによりおこる血小板凝集を防止する。今や意外
なことにプロカインは採血操作中血小板フアクタ
ー4の遊離を抑制するが、ブタカインとテトラカ
インはしないことがわかつたのである。
本発明は試験管内での血液飼料の取り扱いによ
つておこる血小板の遊離反応を抑制して血液試料
中の血小板フアクター4(PF4)を安定化する方
法を提供するものである。本発明によれば、PF4
の様な血漿成分が生体内での遊離反応の結果その
ものである血液試料を試験管内に室温で安定に採
集することが可能になり、従つて試料のPF4の測
定値は生体内の血液中のPF4値を正確に反映す
る。
つておこる血小板の遊離反応を抑制して血液試料
中の血小板フアクター4(PF4)を安定化する方
法を提供するものである。本発明によれば、PF4
の様な血漿成分が生体内での遊離反応の結果その
ものである血液試料を試験管内に室温で安定に採
集することが可能になり、従つて試料のPF4の測
定値は生体内の血液中のPF4値を正確に反映す
る。
本発明は、血小板フアクター4の遊離を抑制す
るに有効な量のp−アミノベンゾイルジエチルア
ミノエタノール又はその生物学的に許容される酸
付加塩で血液試料を処理することを特徴とする血
液試料中の血小板フアクター4の安定化法、を提
供する。
るに有効な量のp−アミノベンゾイルジエチルア
ミノエタノール又はその生物学的に許容される酸
付加塩で血液試料を処理することを特徴とする血
液試料中の血小板フアクター4の安定化法、を提
供する。
更にまた本発明は、凝固防止剤としてのEDTA
および血小板フアクター4の遊離を抑制するに有
効な量の(i)2−クロロアデノシンと(ii)p−アミノ
ベンゾイルジエチルアミノエタノール又はその生
物学的に許容される酸付加塩を含む減圧された栓
付きガラス管内で血液試料を処理することを特徴
とする血液試料中の血小板フアクター4の安定化
法、を提供する。
および血小板フアクター4の遊離を抑制するに有
効な量の(i)2−クロロアデノシンと(ii)p−アミノ
ベンゾイルジエチルアミノエタノール又はその生
物学的に許容される酸付加塩を含む減圧された栓
付きガラス管内で血液試料を処理することを特徴
とする血液試料中の血小板フアクター4の安定化
法、を提供する。
p−アミノベンゾイルジエチルアミノエタノー
ルおよびその生物学的に許容される酸付加塩類は
血小板遊離反応抑制に特に効果あることが発見さ
れたのである。一般に血液中に約10〜30ミリモル
の最終濃度が血小板遊離反応抑制に有効であり、
約15ミリモルが好ましい量である。生物学的に許
容される酸付加塩類とはPF4の様な蛋白質の生物
学的活性を損なわない付加塩類製造に有用な多数
の有機酸および鉱酸、例えば塩酸、臭化水素酸、
よう化水素酸、硫酸、りん酸、硝酸、安息香酸、
トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸等の塩類をい
う。
ルおよびその生物学的に許容される酸付加塩類は
血小板遊離反応抑制に特に効果あることが発見さ
れたのである。一般に血液中に約10〜30ミリモル
の最終濃度が血小板遊離反応抑制に有効であり、
約15ミリモルが好ましい量である。生物学的に許
容される酸付加塩類とはPF4の様な蛋白質の生物
学的活性を損なわない付加塩類製造に有用な多数
の有機酸および鉱酸、例えば塩酸、臭化水素酸、
よう化水素酸、硫酸、りん酸、硝酸、安息香酸、
トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸等の塩類をい
う。
好ましい実施態様において約0.05乃至1ミリモ
ル、好ましくは約0.1ミリモルの2−クロロアデ
ノシンはp−アミノベンゾイルジエチルアミノエ
タノール塩酸塩と共に使用して特に有効な安定剤
となる。
ル、好ましくは約0.1ミリモルの2−クロロアデ
ノシンはp−アミノベンゾイルジエチルアミノエ
タノール塩酸塩と共に使用して特に有効な安定剤
となる。
これらの試薬はエチレンジアミンテトラ酢酸
(EDTA)の様な凝固防止剤を含む普通の減圧血
液採集装置中に便利に使われる。したがつて普通
の血液採集装置に上記血小板遊離抑制剤の有効量
を注入することができるし又はこの成分を初めか
ら入れて装置をつくることもできる。
(EDTA)の様な凝固防止剤を含む普通の減圧血
液採集装置中に便利に使われる。したがつて普通
の血液採集装置に上記血小板遊離抑制剤の有効量
を注入することができるし又はこの成分を初めか
ら入れて装置をつくることもできる。
本発明の広い範囲にはp−アミノベンゾイルジ
エチルアミノエタノール又はその生物学的に許容
される酸付加塩類の血小板遊離反応の抑制有効量
を含む減圧された血液採集装置の使用を包含す
る。特に本発明は凝固防止剤としてEDTAと2−
クロロアデノシンおよびp−アミノベンゾイルジ
エチルアミノエタノール又はその生物学的に許容
される酸付加塩類の血小板遊離反応の抑制有効量
とを含む減圧されたシリコーンゴム栓付ガラス管
の使用を包含する。
エチルアミノエタノール又はその生物学的に許容
される酸付加塩類の血小板遊離反応の抑制有効量
を含む減圧された血液採集装置の使用を包含す
る。特に本発明は凝固防止剤としてEDTAと2−
クロロアデノシンおよびp−アミノベンゾイルジ
エチルアミノエタノール又はその生物学的に許容
される酸付加塩類の血小板遊離反応の抑制有効量
とを含む減圧されたシリコーンゴム栓付ガラス管
の使用を包含する。
最も好ましい血液試料採集装置最も好ましい血
液試料採集装置はEDTA2.50%、2−クロロアデ
ノシン0.025%、p−アミノベンゾイルジエチル
アミノエタノール塩酸塩6.60%、塩化ナトリウム
0.3%より成り水酸化ナトリウムでPH6.5に調整さ
れた試薬0.6mlが入つている10ml減圧栓付血液採
集用ガラス管である。上記パーセントは重量/容
量パーセントである。
液試料採集装置はEDTA2.50%、2−クロロアデ
ノシン0.025%、p−アミノベンゾイルジエチル
アミノエタノール塩酸塩6.60%、塩化ナトリウム
0.3%より成り水酸化ナトリウムでPH6.5に調整さ
れた試薬0.6mlが入つている10ml減圧栓付血液採
集用ガラス管である。上記パーセントは重量/容
量パーセントである。
本発明の方法は試料採集および操作が例えば低
温遠心分離を要しない点で非常に便利であり血小
板フアクター4測定に特に有用である。
温遠心分離を要しない点で非常に便利であり血小
板フアクター4測定に特に有用である。
実施例
多数試料採取に標準静脈穿刺法を用いて2つの
血液試料をとつた。第1の血液試料は活性化フア
クターの系を静浄にするためとり、第第2の血液
試料は上記の最も好ましい血液試料採集装置内に
とつた。試料をしずかに転倒して混合し管を氷浴
中に移し少なくも30分間(2時間より長くないこ
と)培養した。次いで血漿分離器を用いて管を室
温で2500×gにおいて20分間又は1500×gにおい
て30分間遠心分離した。血漿をプラスチツクピペ
ツトでプラスチツク管に移した。試料は2〜4℃
で24時間又は−20℃で3ケ月まで貯蔵できる。
血液試料をとつた。第1の血液試料は活性化フア
クターの系を静浄にするためとり、第第2の血液
試料は上記の最も好ましい血液試料採集装置内に
とつた。試料をしずかに転倒して混合し管を氷浴
中に移し少なくも30分間(2時間より長くないこ
と)培養した。次いで血漿分離器を用いて管を室
温で2500×gにおいて20分間又は1500×gにおい
て30分間遠心分離した。血漿をプラスチツクピペ
ツトでプラスチツク管に移した。試料は2〜4℃
で24時間又は−20℃で3ケ月まで貯蔵できる。
血小板フアクター4は普通の放射線免疫試験法
で測定される。この実施例によつて安定化された
血液試料中の血小板フアクター4の通常濃度は普
通の放射線免疫試験法で測定したとき5ng/ml
以下である。これは明らかに本発明の安定化効果
を実証している。冠状動脈症、心臓弁膜手術後、
冠状バイパス手術後、心筋硬塞形成後および糖尿
症の患者は100ng/ml適度の高い血小板フアク
ター4濃度をもつ。
で測定される。この実施例によつて安定化された
血液試料中の血小板フアクター4の通常濃度は普
通の放射線免疫試験法で測定したとき5ng/ml
以下である。これは明らかに本発明の安定化効果
を実証している。冠状動脈症、心臓弁膜手術後、
冠状バイパス手術後、心筋硬塞形成後および糖尿
症の患者は100ng/ml適度の高い血小板フアク
ター4濃度をもつ。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 血小板フアクター4の遊離を抑制するに有効
な量のp−アミノベンゾイルジエチルアミノエタ
ノール又はその生物学的に許容される酸付加塩で
血液試料を処理することを特徴とする血液試料中
の血小板フアクター4の安定化法。 2 凝固防止剤としてのEDTAおよび血小板フア
クター4の遊離を抑制するに有効な量の(i)2−ク
ロロアデノシンと(ii)p−アミノベンゾイルジエチ
ルアミノエタノール又はその生物学的に許容され
る酸付加塩を含む減圧された栓付きガラス管内で
血液試料を処理することを特徴とする血液試料中
の血小板フアクター4の安定化法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/082,840 US4311482A (en) | 1979-10-09 | 1979-10-09 | Method and apparatus for collecting blood samples |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5661651A JPS5661651A (en) | 1981-05-27 |
JPS6259781B2 true JPS6259781B2 (ja) | 1987-12-12 |
Family
ID=22173787
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP13943580A Granted JPS5661651A (en) | 1979-10-09 | 1980-10-07 | Method of and apparatus for sampling blood |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4311482A (ja) |
JP (1) | JPS5661651A (ja) |
BE (1) | BE885585A (ja) |
CA (1) | CA1136030A (ja) |
DE (1) | DE3038010C2 (ja) |
FR (1) | FR2466976B1 (ja) |
GB (1) | GB2060877B (ja) |
IT (1) | IT1132927B (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0968167A (ja) * | 1995-08-30 | 1997-03-11 | Nec Yamaguchi Ltd | 送液用ベローズポンプ |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6315161A (ja) * | 1986-07-07 | 1988-01-22 | Terumo Corp | 血液検査用採血管 |
US5925570A (en) * | 1991-12-25 | 1999-07-20 | Iatron Laboratories, Inc. | Method of measuring metals in samples of living body |
DE19836559A1 (de) | 1998-08-12 | 2000-03-23 | Antigen Gmbh | Gefäß zur Entnahme von Blut |
JP2005524850A (ja) * | 2002-05-07 | 2005-08-18 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 採集装置 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3962125A (en) * | 1975-01-13 | 1976-06-08 | Coulter Diagnostics, Inc. | Multi-purpose diluent for use in blood analysis by electronic instrumentation of the coulter type |
US4090977A (en) * | 1976-11-22 | 1978-05-23 | Research Corporation | Osmotically balanced anticoaglant |
US4134512A (en) * | 1977-06-08 | 1979-01-16 | Becton, Dickinson And Company | One-way evacuated tube stopper |
US4219440A (en) * | 1979-06-06 | 1980-08-26 | Coulter Electronics, Inc. | Multiple analysis hematology reference control reagent and method of making the same |
US4195072A (en) * | 1978-07-05 | 1980-03-25 | Abbott Laboratories | Stabilized platelet factor 4 immunoassay standards |
US4213876A (en) * | 1978-08-22 | 1980-07-22 | Coulter Electronics, Inc. | Multi-purpose blood diluent for use in electronic blood analysis instrumentation |
-
1979
- 1979-10-09 US US06/082,840 patent/US4311482A/en not_active Expired - Lifetime
-
1980
- 1980-09-11 GB GB8029339A patent/GB2060877B/en not_active Expired
- 1980-09-22 CA CA000360699A patent/CA1136030A/en not_active Expired
- 1980-10-07 JP JP13943580A patent/JPS5661651A/ja active Granted
- 1980-10-08 BE BE0/202373A patent/BE885585A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-10-08 IT IT25201/80A patent/IT1132927B/it active
- 1980-10-08 DE DE3038010A patent/DE3038010C2/de not_active Expired
- 1980-10-08 FR FR8021500A patent/FR2466976B1/fr not_active Expired
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0968167A (ja) * | 1995-08-30 | 1997-03-11 | Nec Yamaguchi Ltd | 送液用ベローズポンプ |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IT8025201A0 (it) | 1980-10-08 |
BE885585A (fr) | 1981-04-08 |
US4311482A (en) | 1982-01-19 |
FR2466976A1 (fr) | 1981-04-17 |
GB2060877B (en) | 1983-06-22 |
IT1132927B (it) | 1986-07-09 |
JPS5661651A (en) | 1981-05-27 |
DE3038010C2 (de) | 1984-11-29 |
DE3038010A1 (de) | 1981-04-23 |
CA1136030A (en) | 1982-11-23 |
FR2466976B1 (fr) | 1985-11-22 |
GB2060877A (en) | 1981-05-07 |
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