JPS62255428A - 哺乳動物へのヒアルロン酸の遠隔投与 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、公知の治療剤、ヒアルロン酸が、この高分子
呈薬剤を作用場所に輸送する哺乳動物の体内プロセスを
必要とする技術により、哺乳動物に効果的に投与し得る
ことの発見に関するものである。

ヒアルロン酸は哺乳動物の関節組織および目のガラス体
液（ｖｉｔｒｅｏｕｓ　ｈｕｍｏｒ）に見いだされる周
知のムコ多糖類である。これは雄鶏のとさか、およびヒ
トの腰帯、ならびに溶血性グループＡおよびＣのストレ
プトコッカス種（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ　）などの
細菌培養液から抽出し、種々の治療目的に用いられてい
る。この物質の最初の治療的使用は、眼外科における、
特にＭ４膜剥離の処置における補助手段として、ヒトの
目のガラス体液に置き換えるものであった。また、ヒト
を含む哺乳動物の関節組織の外傷性症状（ｔｒａｕｍａ
　）または炎症の軽減のために、関節の滑液（ｓｙｎｏ
ｖｉａｌ　ｆｌｕｉｄ）に注射することにも用途を見い
だしている。この物質は主要医薬として、および他の関
節医薬の補助剤としての、双方に用いることが提案され
ている。その多様な用途に関する広範な議論がバラス（
Ｂａｌａｚｓ）の米国特許第４，１４１，９７３号に見
られる。種々の動物、特にウマの関節にヒアルロン酸を
単独で、また、コーチシンとともに用いることがリプル
ら（Ｒｙｄｅｌｌ　ｅｔ　ａｌ、）により、“ヒアルロ
ン酸の関節的注射の骨関節炎の臨床症状に対する、およ
び肉芽組織形成に対する効果（Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｉ
ｎＬｒａ−ａｒｔｉｃｕｌａｒ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　
ｏｆ　１ｌｙａｌｕｒｏｎｉｃ　Ａｃ１ｄ　ｏｎｔｈｅ
　Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　Ｓｙｍｐｔｏｍ　ｏｆ　０ｓｔｅ
ｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ　ａｎｄｏｎ　Ｇｒａｎｕｌａｔ
ｉｏｎ　、Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）“にお
いて議論されており、臨床整　外科および関連研７の１
９７１年＜８（１巻）　１０月号の２５ないし３２ペー
ジに見える。ヒアルロン酸のヒトの関節における使用は
、ペイロンら（Ｐｅｙｒｏｎ　ｅｔ　ａｌ、）により、
゛ヒトの関節炎罹患関節へのヒアルロン酸ナトリウムの
注射の予備的臨床評価（Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　Ｃ１
１ｎｉｃａｌ＾ｓＳｅｓｓｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎａ　Ｈｙ
ａｌｕｒｏｎａｔｅ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｏ　Ｈ
ｕｍａｎ　Ａｒｔｈｒｉｔｉｅ　Ｊｏｉｎｔｓ）”に報
告され、１理生　−Ｐｔｈｏｌｏ　ｉｅ　Ｂｉｏｌｏ　
ｉｅ　　の１９７４年１０月号（２２巻、８号）の７３
１ないし７３６ページに見える。最後に、ヒアルロン酸
の、繊維症的外傷反応（ｆｉｂｒｏｔｉｃ　ｗｏｕｎｄ
　ｒｅａｃｔｉｏｎ）を軽減するための使用は、リプル
により、“ヒアルロン酸適用後における肉芽組織反応の
軽減（Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　Ｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ　
Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　Ｉｎｓ
ｔａｌｌｍｅｎｔ　ｏｆＨｙａｌｕｒｏｎｉｃ　Ａｃ１
ｄ）　”に報告され、スカンジナビア°　メ外４　　　
＾ｅｔａ　０ｒｔｈｏ　、　５ｃａｎｄｉｎａｖ、　　
の４１巻、３０７ないし３１１ページに見える。

ヒアルロン酸のウマの関節における関節的使用は、ファ
ルマシア（Ｐｈａｒｍａｃ　ｉａ　）社のヒラルチル（
■ｙｌａｒｔｉｌ）　＠　およびヒラルチンＶ　（　Ｈ
ｙｌａｒｔｉｎｖ）０製品、ならびにステリベット（　
Ｓｔｅｒｉｖｅｔ　）社のシナジッド（Ｓｙｎａｃｉｄ
）製品との関連で商業的に推進されている。しかし、罹
患関節への注射によりこれらの製品を投与する必要があ
るために、市販品の魅力は限定されたものになる。

関連する物質、ポリ硫酸グリコサミノグリカンが、最近
、ウマの関節炎罹患関節の処置用として、アゾカン（＾
ｄｅｑｕａｎ）　’　の商品名で（ヨーロッパでもアル
テバロン（＾ｒｔｅｐａｒｏｎ）　”　の商品名で知ら
れている）、リドボルド薬品（Ｌｕｉｔｐｏｌｄ　Ｐｈ
ａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）社により米国市場に導入
された。最初推奨された投与経路は、毎週２５Ｏ　ｎａ
ｇ、５週間の関節的注射であった．　　学（　Ｖｅｔｅ
ｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ−しの１９８４年４月
号の４４６ないし４４７ページに見えるレターは、この
物質が、はぼ２倍の投与量で、４日間隔で４ないし５週
間、筋肉内に投与し得ることを示唆している。

ポリ硫酸グリコサミノグリカンはまた、ウサギの＃：ｉ
５！１′ＷＪの滑液膜（ｓｙｎｏｖｉａｌ　ｍｅｎｂｒ
ａｎｅ）におけるヒアルロン酸の生合成を刺激すること
も報告さｔし、したがって、作用様式はヒアルロン酸と
は異なっている一ｕｌ能性はあるが、同一の条件で有利
な効果が得られることを示唆している。興味あることに
は、生３Ａ−一・生物物理学報　集（静ａｈ、眼匹屁し
一旦剌工ユの１９８５年（２４０巻）７月号の１４６な
いし１５３ページにあるニジカワら（Ｎｉｓｈｉｋａｗ
ａ　ｅｔ　ａｔ、）の報文、゛°ウサギの膝関節滑液膜
のヒアルロン酸生合成に対する硫酸グリコサミノグリカ
ンの影’Ｉｐ（Ｉｒ＋ｆｌｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｓｕｌ
ｆａｔｅｄＧＩｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｓ　ｏ
ｎ　Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｈｙａｌｕｒｏ
ｎｉｃ　Ａｃ１ｄ　ｉｎ　ＲａｂｂｉｔＫｎｅｅ　５ｙ
ｎｏｖｉａｌ　Ｍｅｍｂｒａｎｅ）”は、ヒアルロン酸
自体はその種の効果を持たないことを示している。

この刺激剤はヒトに対して筋肉内に、また、ラットに対
して皮下に投与したときに有効であることが報告されて
いる。前者の効果はジーグメットら（Ｓｉｅｇｍｅｔｈ
　ｅｔ　ａｌ、）により、“大関節の関節症に対するポ
リ硫酸グリコサミノグリカン（アルテバロン）と生理食
塩水との比較、多巾心二−イ（Ｘイ検法の結果（Ｖｅｒ
ＨＩｅｉＣｈ　ｖｏｎ　ＧｌｙｋｏＳａ＋ｌ＋ｉｎｏｇ
ｌｙｋａｎｐｏｌｙｓｕｌｆａｔ　（＾ｒｔｅｐａｒｏ
ｎ）　ｕｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｓｅｈｅｒ　Ｋｏ
ｃｈｓａｌｚｌｏｅｓｕｎｇ　ｂｅｉ　Ａｒｔｈｒｏｓ
ｅｎ　ｇｒｏ！！ｓｅｒ　（：ｅｌｅｎｋｅ。

Ｅｒｇｅｂｏｉｓｓｅ　　ｅｉｎｅｒ　　ｍｕｌＬｉｚ
ｅｎｔｒｉｓｃｈｅｎ　　Ｄｏｐｐｅｌｂｌｉｎｄｓｔ
ｕｄｉｅ）　”に記載され、シーユウマ九字皿−１珈！
鄭旦迂の１９８３年７７８月号　（４２９，４号）の２
２３ないし２２８ページに見える、後者の効果はブフマ
ンら（ＢｕｃｂＩＩｌａｎｎ　ｅｔ　ａｌ、）により、
゛ラットの動物実験的関節症およびそのポリ硫酸グリコ
サミノグリカンによる治療（Ｄｉｅ　Ｔｉｅｒｅｘｐｅ
ｒｉｍｅｎｔｅｉｌｅ　Ｇｏｎａｒｔｈｒｏｓｅ　ｄｅ
ｒ　Ｒａｔｔｅ　ｕｎｄ　Ｉｈｒｅ　Ｔｈｅｒａｐｉｅ
ｗｉｔ　Ｇｌｙｋｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｋａｎｐｏｌｙ
ｓｕｌｆａｔ）”において議論されており、リュウマチ
学雑誌（Ｚ、Ｒｈｅｕｍａｔｏｌユの１９８５年号（４
４巻２３号）の１００ないし１０７ページに見える。

この刺激剤が広い範囲の低分子菫領域を有することも報
告されている。リュウマチ学雑誌（Ｚ。

引■見記すＲ上Ω−の１９８２年３７４月号（４１巻、
２号）の５０ないし５３ページにある、ミクリコーヴア
（Ｍｉｋｕｌ　１ｋｏｖａ　）の“ヒトの多形核白血球
からのりソゾーム酵素の放出に対するポリ硫酸グリコサ
ミノグツカン（アルテバロン）の影響（Ｉｎｆ　１ｕｅ
ｎｃｅｏｆ　　Ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ　
　Ｐｏ１ｙｓｕｌｆａｔｅ（八ｒｔｅｐｔｒｏｎ　）ｏ
ｎ　ＬｙｓｏｓｏＩｌａｌ　Ｅｎｚｙｍｅ　Ｒｅ１ｅａ
ｓｅ　ｆｒｏｔｈ　Ｈｕ蒙ａｎ　Ｐｏ１ｙ＋＊ｏｒｐｈ
ｏｎｕｃｌｅａｒ　Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ）”には、ア
ルテバロンが分子ｉ　３０００ないし分子ｆ１ｃ１７，
０００の分画に分けられることが示されている。咽−医
】［ユヱ免すエ土す。

α−り旦恒ユ（転）−の１９８４年６月号の８１１ない
し８１６ページに見えるハム（ｌ（ａｍｍ）　、ゴール
ドマン（Ｇｏｌｄ＋ｎａｎ　）およびジョーンズ（Ｊｏ
ｎｅｓ　）の゛°ポリ硫硫酸グリコミミノグリカンウマ
の四肢不斉に対する新規な関節内処置（ｒ’ｏｌｙｓｕ
ｌｆａｔｅｄ　ＧｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇＩｙｃａｎ　
：　ａ　Ｎｅｗ　Ｉｎｔｒａ−ａｒｔｉｃｕｌｎｒ　Ｔ
ｒｅａｔＩＩＩｅｎｔｆｏｒ　Ｅｑｕｉｎｅ　Ｌａｍｅ
ｎｅｓｓ）にはアゾカンが約ｉｏ、ｏｏ。

の平均分子量を有すると報告されているにの点において
は、上記共著者の一人ゴールドマン博士が、この製品の
米国販売業者、ルテイボルド薬品（Ｌｕｔｉｐｏｌｄ　
Ｉ’ｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）社と共同作業して
いＺ）− ヒアルロン酸の直接使用は、関節組織におけるヒアルロ
ン酸の生産を刺激する上記ポリ硫酸グリコサミノグリカ
ンよりも低い投与−址で有効であることが見いだされて
いる。たとえば、ポリ硫酸グリコサミノグリカン“アゾ
カン゛′はウマへの関節的投与に関して２５０　ｍｇの
投与量を推奨して市販されているが、一方、ファルマシ
ア社はヒアルロン酸を゛′ヒラルテイル”の商品名で、
関節的投与に関して２０　Ｂの投与量を推奨して市販し
ている。アゾカン製品は２倍の投与ｆｊｋ　（５００ｍ
ｇ）で筋肉内投与すれば有効であることが報告されてい
るが、高分子量のピアルロン酸ナトリウムに関しては、
同様の効果は期待されていなかった７ヒアルロン酸ナト
リウムは、その主要な作用が潤滑であると考えられてい
たため、および、その分子域が典型的にはＩ　Ｘ　１０
’　ドルトンを十分に超えているために、遠隔投与に利
用し得ると（まＪＵＩ待されていなかった。このような
分子域の大き過ぎる分子が哺乳動物の組織を通って遠い
外傷的症状の箇所に輸送されるとは考えられていなかっ
たのである。したがって、合理的な投与量の遠隔投与で
は、有効址のヒアルロン酸ナトリウムが哺乳動物の体を
通って作用場所に輸送されることはあり得ないと考えら
れていた。

ヒアルロン酸の遠隔投与が、外傷性症状の（ｔｒａｕｍ
ａｔ　１ｚｅｄ　）　、または、刺激を受けた（ｉｒｒ
ｉｔａｔｅｄ）’ｌ乳動物の組織、特に関節組織の痛み
および腫れの＠減に有効であることが、ここに見いださ
れた。

ヒアルロン酸またはその薬学的に許容し得る塩の遠隔投
与により、刺激を受けたまたは炎症を起こした（ｉｎｆ
ｌａｍｅｄ）　Ｗａ乳動物の組織の外傷性症状の後遺症
（ｓｅｑｕｅｌｌａ）を軽減する方法が発見された。（
以後、便宜上、これと明らかに異なる指示がない限り、
ヒアルロン酸の語を用いて遊離の酸およびその薬学的に
許容し得る塩の双方を互換的に表す）。ヒアルロン酸は
哺乳動物体の外傷性症状の箇所以外の場所に導入され、
体内プロセスにより、作用場所に効果的に輸送される。

このため、筋肉内、静脈内、皮下、および局所的投与の
ような便利な投与経路を用いることが可能になる。特に
好ましい２Ｎｉの投与経路は、周知の皮膚通過性担体中
での筋肉注射および局所適用であり、この種の処置を特
に受は入れ易い条件は刺激を受けたまたは炎症を起こし
た（ｉｒｒｉｔａｔｅｃｌ　ｏｒｉｎｆｌａｍｅｄ　）
関節組織である。

炎症を起こした哺乳動物の外傷性症状は、罹患組織への
直接投与を除くいかなる許容し得る投与経路によるもの
であっても、ヒアルロン酸の適用により軽減される。特
に興味ある具体例には関節組織の処置が含まれる。ヒア
ルロン酸の直接適用には関節的注射が含まれるが、これ
は、大形哺乳動物の大関節、たとえばウマの四肢関節に
おいても、かなりの注意と熟練とが要求される方法であ
る。小形哺乳動物たとえばイヌおよびネコの処置、なら
びに大形哺乳動物の小関節たとえばヒトの指関節の処置
には、それに相応する、より大きな注意と熟練とが要求
される。このような場合には、遠隔投与、たとえば筋肉
内、静脈内もしくは皮下注射、または皮膚透過性（ｔｒ
ａｎｓｄｅｒｍａｌ　）担体中での局所適用による処置
ははるかに便利であり、魅力的である。しかし、哺乳動
物の体内輸送系がヒアルロン酸を罹患箇所に運ぶのに有
効であるという事実は、外傷性症状を持つ他の組織を遠
隔適用により同様に処置することを可能にする。したが
って、遠隔投与はヒアルロン酸を利用し得る他の条件、
たとえば、　床　　　　および　−ＩＣ１ｉｎｉｃａｌ
　０ｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓ　ａｎｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ
　Ｒｅ５ｅａｒｃｂの１９７１年１０月号の２５ないし
３２ページに見えるリプルらの上記文献に報告された、
切開およびを修復に関連する術後癒着などの処置に用い
ることができる。

刺激を受けたまたは炎症を起こした組織の遠隔適用によ
る処置に有用なヒアルロン酸は、この種の目的に有用で
あることが既に認められているいかなる型のものであっ
てもよい。ヒアルロン酸は動物の組織、たとえば雄鶏の
とさか、もしくは腰帯から、または溶血性グループＡお
よびＣのストレプトコッカス種（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃ　ｉ　）などの細菌培養液から抽出１−得る。ヒアル
ロン酸は、処置される哺乳動物に有害な、ま赴は有毒な
反応を引き起こすのを避けるのに十分なほど純粋でなけ
ればならない。これは、発熱性物質が存在せず、タンパ
ク質および核酸が十分に低い水準にあって、免疫反応が
実質上引き起こされないことを意味する。ヒアルロン酸
は好ましくは高分子量のものであり、かつ、注射経路に
よる場合には、好ましくは低粘性のものでもある。この
重合体は遊！酸の形態であっても薬学的に許容し得るい
かなる塩の形態であってもよい。

好まし、いヒアルロン酸源は適当な微生物の培養液であ
る。ヨーロッパ公開特許出願第１４４．０１９号に記載
された培養技術および収穫技術の使用は、所望の純度お
よび分子量を有する物質を得るのに特に価値がある。こ
の技術を適用できる微生物の中で、グループＡおよびＣ
のストレプトコッカス属が好ましく、グループＣが特に
好ましく、ストレプトコッカス・エキ（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ　ｅｑｕｉ）が最も好ましい。その他の好
ましいものは、同時に係属中の１９８８年１月６日付け
の米国特許出願第８１６，５４８号の示唆に従って得ら
れるヒアルロン酸である。

ヒアルロン酸のタンパク質およびアミノ酸含有量ならび
に核酸含有量は、これらの物質がいずれも吐乳動物中で
抗原活性を示すことが知られているので、どちらも注意
深く制御しなければならない。上記の含有量は、いずれ
も、ＵＶ吸収法により好都合に追跡、評価することがで
き、前者は２８０ナノメーターでの光学濃度に、後者は
２５７ナノメーターでの光学濃度に相関がある。前者の
含有量は約１．２５、特に約０．１　ｍｇ７ｍ１以下で
あることが、後者の含有量は約０．６、特に約０．００
５ｍ　ｇ　７ｍ　１以下であることが好ましい。この点
に関して、２８０ナノメーターの吸光度はアミノ酸とタ
ンパク質とを区別しない、しかし、アミノ酸は単独では
非抗原性であるが、ヒアルロン酸と容易に複合体を形成
し、この複合体は開孔動物に容易に免疫反応を引き起こ
す、したがって、本件技術の関連ではアミノ酸とタンパ
ク質との双方の含有量を制御することが望ましく、特定
のＵＶ吸収と相関さぜな双方のき計どしての社大含有策
き特定するのがｗ当でＡる。特に好ましいヒアルロン酸
においては、オルトノタルアルデヒド蛍光法（本質的に
、存在する全てのタンパク質の成分アミノ酸への加水分
解を伴う）により測定した全アミノ成金４’ｉ旦は約０
．４　ｍｇ１ｍｌ以下であり、臭化エチジウム蛍光法に
より測定した核酸含有、に！２は約０．０６Ｉｍｇ　／
　＋ａ　１以下である。

ヒアルロン酸は、その遊離の酸の形状でも、薬学的に許
容し得るいかなる塩の形状でも利用することができる。

この重合体がエタノールまたは他の有機溶媒中での逐次
沈澱と水への溶解とにより典型的に精製され、かつ、そ
のナトリウム塩が上記の方法に特に適しているので、最
も便利な形状の一つはナトリウム塩である。実際に、本
明細書中で論する純度、粘性および分子量に関する制限
は、以訃に論する個々の適用データと同様に、ナトリウ
ム塩に関して明らかになったものである。

しかし、遠隔適用の展開は他の形状、たとえば遊離酸ま
たはカリウム塩についても同様に適合するものである。

便宜上、ここでの議論においては、これらの全ての形状
をヒアルロン酸の語に包含させる。

ヒアルロン酸は大きな平均分子量を有するものでなけれ
ばならない。５５，０００またはそれ以下の平均分子量
を有する種々の形状のこの物質が公知であるが、好まし
いヒアルロン酸は、１９８６年１月６日付の、同時係属
中の米国特許上ＭＳ／Ｎ８１８．５４８に開示された技
術に従い、ＦＰＬＣ（高速タンパク液体クロマトグラフ
ィー）法により測定して、少なくとも５　Ｘ　１０５の
平均分子量を有するものである。約１．ＯＸ　１０’、
好ましくは１．２　Ｘ　　１０’を超える、特に約１．
８　ｘ　１０＠を超える平均分子量が特に好ましい。さ
らに、ヒアルロン酸が十分に狭い分子量分布を示すこと
が好ましく、また、単一のゲル浸透ピークを有する分布
が特に好ましい。９８％の分子が約１．２　Ｘ　１０’
ないし４．０　Ｘ　１．０’の分子量を有する単一の対
称１ｉ’　Ｐ　Ｌ　Ｃビークがとりわけ好ましい。

ヒアルロン酸は、所望の処置経路での便利さに応じて、
高い粘性を有するものがよい場合もあり、低い粘性を有
するものがよい場合もある。高めの粘性の６のは局所適
用に便利であり、一方、低ｙ）の粘性のものは注射経路
による、すなわち、筋肉内、静脈内または皮下の投与に
便利である。高めの分子量のヒアルロン酸は、３７℃に
おいて毎秒約９００ないし５０００センチストークス（
ｃ／ｓ）の粘性を存するものが局所適用に有利であり、
３７℃において約５００　ｃ／ｓ以下、好ましくは１５
０　ｃ／ｓ未満の粘性を有するものは他の投与経路に有
利である。いずれの場合にも、粘性は、ＡＳＴＭ　Ｄ４
４５およびＤ　２５１５の方法に従い、キャノン・マン
ニング（Ｃａｎｎｏｎ−Ｍａｎｎ　ｉｎｇ）セミミクロ
粘度計中で、ナトリウム塩の１重量％水溶液として簡便
に測定される。低粘性の物質は、たとえば実際的な投薬
量の、かなり濃縮したヒアルロン酸ナトリウムの水溶液
が使用できるので、注射経路での投与を極めて容易にす
る。したかっＣ１その粘性が３７°Ｃにおいて約２００
　ｃ／ｓ以下であるならば、約１００ミリグラムの活性
成夕１を片有する約１０ミリリットルの注射量で、ヒア
ルロン酸ナトリウムの１％水溶液を容易に使用すること
かできる。

１■乳動物の炎症を起こした組織を遠隔投与により処置
するには、外傷性症状を軽減するのに有効な投与量また
は、規則的投与の全投与量（ｔｏｔａｌｄｏ！！ｅ　ｒ
ｅｇｉｍｅｎ）を必要とする。処置する哺乳動物の体重
１ボンドあたり、少なくとも約０．０２ミリグラムのヒ
アルロン酸を投与するのが好ましい。

これは１キログラムあたり約０．０４４ミリグラムと同
等である。体重１ボンドあたり少なくとも０．０４、特
に０．０８ミリグラムを使用するのが特に好ましい。局
所適用の場合には、体重１ボンドあたり約０．１０、特
に約　０．１５ミリグラムを超えて用いるのが特に望ま
しい、ヒアルロン酸は天然に、！甫乳動物中で生産され
る物質であるので、許容投与量に本質的な上限はないと
考えられる。しかし、全ての医療処置において、所望の
効果を達成するのに必要な菫を超えることなく用いるの
が賢明である。さらに、有効投与量では良好に許容し得
る程度に十分低い水準にある不純物のいかなるものでも
、不当に高い投与量では有害な反応を引き起こし得るの
である。

局所的処置は、ヒアルロン酸を適合する皮膚透過性担体
とともに適用して行わなければならない。

公知の担体、たとえばサリチル酸メチル、サリチル酸ナ
トリウム、ベンジルアルコール、オレイン酸、１０％プ
ロピレングリコール、１％グリコール酸ナトリウム、１
％ポリオキシエチレン−１０−セチルエーテル、０．１
％Ｅ　Ｄ　’ｌ’　Ａナトリウム、１％ドデシルｔａ＊
ナトリウム、またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）
のいずれもが適しており、ＤＭＳＯが特に好ましい。好
都合な適用配合剤は、約３重量％以下の、特にヒアルロ
ン酸ナトリウムとしてのヒアルロン酸水溶液と、有効謙
の皮膚透過性担体との混合物である。好ましい配合剤は
約０．５ないし２．５重電％のヒアルロン酸水溶液と約
３０体積％までの皮膚透過性担体とを含有するものであ
る。上記ヒアルロン酸塩溶液も全配合剤も、ともに好都
合に、３７℃で約１０００　ｃ／ｓを超える粘性を示す
。

本件処置は、関節炎症状に起因するものを含む大形哺乳
動物の関節障害の処置に特に有効であることが見いださ
れている。特に好ましい応用には、筋肉注射および皮膚
透過性担体中での局所投与によるウマおよびヒトの処置
が含まれる。四肢関節、特にウマの手根（ｃａｒｐａｌ
　）および足根（ｔｉｂｉｏＬａｒｓａｌ）　　（また
は荒節（ｈｏｃｋ）　）関節の関節性苦痛に対する特に
効果的な処置は、好ましくは頚の筋肉への筋肉注射であ
る。ヒトの筋肉骨格性苦痛に対して特に効果的な処置は
皮膚透過性担体、たとえばジメチルスルホキシド（ＤＭ
ＳＯ）中での局所適用である。適用は罹患関節組織の近
傍にでもよく、かなり遠い場所にでもよい。

本発明記載の遠隔適用技術はヒアルロン酸が有効である
と認められている他のいかなる症状の軽減にも利用する
ことができる。この中には外科的侵襲箇所の、特に鍵を
含む手術の場合の癒着の軽減および防止がある。

本発明記載の遠隔適用技術は、通常、人類の仲間である
と認めちれているような噌■動物に間して特に利益があ
る。この種の仲間の動物の苦痛または不快を軽減するこ
とには大きな利益があり、全ての処置可能な哺乳動物の
中で最も実際的である。このグループで特に興味あるも
のはネコ、イヌおよびウマである。

以下の実施例により本発明をさらに説明するが。

限定を意図したものではない。

■健−Ｌ ウマの筋肉的処置の考察 ヒアルロン酸ナトリウムの筋肉注射が、手根間関′ｇｔ
Ｊ（Ｉｎｔｅｒｃａｒｐａｌ　ｊｏｉｎｔ）へのフロイ
ントの完全アジュバント（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ　Ｃｏｎｐ
ｌｅｔｅ　Ａｄｊｕｖａｎｔ）の関節内注射により誘起
された症状を軽減し得るか否かを測定するために、８頭
の雑種のメスのウマおよび去勢ウマを用いる検討を行っ
た。これは、ウマの関５ｌＩａ害、特に関節炎症状の研
究に対する通常の、かつ、広く受は入れられているモデ
ルである。この検討は、０．７ミリリツトルの上記アジ
ュバントの注射による関節障ｉμの誘起の５．９および
１３日後に、頂の筋肉に行う、ウマの体重１ボンドあた
り０．０８ミリグラムの筋肉内注射３回が、有効である
ことを立証した。

上記８頭のウマは、最初数日間、厩舎の設備および試験
用装置に順応させ、ついで、関節周囲長、運動に！囲、
歩幅および四肢不斉（ｌａｍｅｎｅｓｓ　）の試験規準
について評価し、基準値を求めた。次の日に、８頭全て
のウマの左の手根間関節にフロイントの完全アジュヴア
ント０．７ミリリツトルを注射した。これらのウマは次
の４日間、左の前肢に痛みを表現した。発症剤（１ｒｒ
ｉｔａｎｔ　）の関節内注射の４日後、上記と同じ４種
の規準について、各ウマ分再測定する。各ウマについて
、歩幅を除く各パラメータの上記２回の測定における差
の総和よりなる合計点を算出した。ついで、この点分用
いて４頭を対称グループに、４頭を処置グループに指定
した。最高点のウマを一つのグループに、次の点の２頭
を他のグループに、次の点の２頭を第１グループに、次
の点の２頭を第２グループに、最後のウマを第１グルー
プに入れる。随意にコインを投げて、第１グループを対
称グループに指定１−な。測定値の衣は、随意に測定の
１」付を−６および−１４こ指定して、以下に示すよう
なものであった。

次の日（１」付０）に、各ウマの頚の筋肉に、体重に応
じ、て７．５ないし９．５ミリリットルを注射した。各
ウマは、０．５ｘ１刻みで、体重１ボンドあたり０．０
０８ミリリツトルに最も近い菫の注射な受けた。処置用
ウマの注射液は、ＦＰＬＣ法で８（１１定した平均分子
量１．８８　Ｘ　１０’、臭化エチジウム蛍光法による
核酸含有Ｊｉ　Ｏ，００３Ｂ７ｍ１未満、オルトフタル
アルデヒド蛍光法によるアミノ酸合計含有量０．００５
　ｍｅｎｔａ１未満、および、３７℃での粘性１４７　
ｃ／ｓのヒアルロン酸ナトリウムの１，１９重量％滅菌
水溶液よりなるものであった。一方、対照用ウマの注射
液は滅菌リン酸塩緩衝溶液よりなるものであった。各ウ
マの体重ならびにこの時点、および、それに続く日付４
および８における投薬量は以ドの通りであった。

１工　　　　　体重くボンド）　　碌メＥ麗二（リリ−
１１１９０９，５ ２１０１５８，０ ３９８５８，０ ４１２１５９，５ ５１０３０８，０ ６１２１０９，５ ７９４５７，５ ８１１８０９，５ 第１の注射後の３日間、ならびに、第２および第３の注
射の時点、最後に第３の注射後の４日間、１日に１回、
注射箇所を触診し、体温を測定した。ＩＭ処装により、
有害な効果は生じなかった。体温は全て正常値に留まり
、臨床的に有意な注射箇所の反応はなかったくフロイン
トの完全アジュヴアントは“公知の発熱源”であるので
、体温が正常であることより、処置用の注射が何等の体
温上昇を伴うものでもなく、また、外傷性症状用の注射
により誘起されたピーク値から体温が降下するのを妨げ
るものとも考えられないと判断される）。

第１の注射後７．１４．２１、Ｚ８．３５および４２日
に各ウマの関節周囲長、運動範囲、歩幅長および四肢不
斉観測値の各規準について評価した。これらは、各ウマ
を処置グループと対照グループとに分類するのに用いた
ものと同様のパラメータであり、以゛ドのようにして定
義される。

阻厘ｊＬＩＬＬ １、関節周囲長 関節周囲長は厩舎内で、訓練運動の前に測定した。付属
手根骨（ａｃｃｅｓｓｏｒｙ　ｃａｒｐａｌ　ｂｏｎｅ
）の直上の点で測定した。布製テープで測定し、センナ
メートルで記録した。

２、運動範囲 運動範囲は厩舎内で測定した。これは、罹患した肢の静
止状態と屈折状態との角度の差である。３回の測定値を
全て記録した。角度の測定にはゴニオメータ−を用いた
。

ａ、静止状態の肢：立位のウマにつＣ）て、手根骨の角
度をゴニオメータ−を用いて測定した。

ｂ、屈折角：肢を床から上げて罹患した関節を屈折させ
た。ウマが尻込み、後じさりまたは引き戻しなどにより
屈折に反発した点での角度をゴニオメータ−で測定した
。

３、歩幅長 歩幅長は歩行機に入れる前に測定した。長いロール紙（
２０フイート）を用いて足跡間の距離を記録した。紙の
上を歩かせる前に、罹患した肢の爪先を水または植物油
で濡らしておく。２歩を記録し、罹患した肢の足跡間の
距離をセンチメートルで測定した。ウマを紙の上を３回
歩かせた。３回の測定値の平均値を最終値として用いた
。

４、四肢不斉観測値 ウマを歩行機に入れ、６　ｍ、ｐ、ｈ、で５分間歩かせ
た。得点は歩行機にいる間に測定した。

歩行機の向きは罹患した肢が内側になるようにした。

０＝四肢不斉なし。

１−観察困難；状況（ずなわち、重量負荷、旋回、傾斜
、硬い表面等）に無関係に、−ぼしては現れない。

２・−直線上を歩行または速歩するどきには観察困難；
ある種の状況（すなわち、重址負荷、旋回、傾斜、硬い
表面等）下では一貫して現れる。

３−全ての状況下で、速歩するときに観察可能。

４＝明白な四肢不斉；顕著な揺動（ｎｏｄｄｉｎｇ）、
びっこ（ｈｉｔｃｈｉｎｇ）または歩幅短縮。

５−移動および／または静止中の最小負荷：移動不能。

ウマが移動を甚だしく嫌い、歩行機に入れることが勧め
られない場合には、得点５を記録してウマを厩舎に戻す
。

これらのパラメータの分析は、ヒアルロン酸の筋肉内注
射がフロイントの“′完全アジュヴアント″により誘起
された外傷的症状の軽減に有利な結果を与えることを明
確に示した。処置したウマは、全てのパラメータについ
て、対照例のウマより明らかに優れた成績を挙げた。例
外は関節周囲長であるが、これに関しては、結果は結論
的なものではない。この点はウマの関節の外傷的症状の
軽減に関する他の研究とも一致する。そこでも、関節周
囲長は特に敏感な測定パラメータであるとはされていな
いのである。結果は次表に表示した。表中の“’Ｅｌ”
′は第１の注射面、または後のＩ」付である。

処置　　８　　　四肢不斉　　　　　　０　　　　５　
　　　　４ラ　　　　　　　　　　　　　　　　　０　
　　　　　４　　　　　　　４対照　　　３　　　　　
　　　　　　　　　　０　　　　　５　　　　　　４処
置　　８　　　歩　　錨　　　　１５４．９　　Ｌｉ２
．７　　１３６．７２　　　　（インチ）　　　　　１
６１．５　　７６．１　　１４８．８５　　　　　　　
　　　　　　　　１６Ｂ、１　　１２６．７　　　１３
５．８６　　　　　　　　　　　　　　１６１．３　１
４５．７　　　１４９．２対！Ｗ　　　３　　　　　　
　　　　　１５７’、３　　７４．５　　１０６．５４
　　　　　　　　　　　　　　１６０．４　　　　０”
　　　　　１０ｇ、９Ｌ　　　　　　　　　　　　　　
　　１５７’、７　　１Ｂ９．５　　　１４５．２７　
　　　　　　　　　　　　　　１４５．４　　１００．
９　　　１４２．５０はウマが罹、邑した肢？紙に置こ
うとせず、歩幅が測定できなかつたこＬ　　　　　　　
　　Ｏ１００ １１Ｌ　　　　　　　　　ＯＯ ｏ　　　　　　　　ｏ　　　　　　　　ｏ　　　　　　
　　ｏ　　　　　　　　。

４　　　　　　　　４　　　　　　　　４　　　　　　
　　３　　　　　　　　　Ｂ１４８．２　　　１４４．
９　　　１４９．０　　　１４９．５　　　１５４．０
１５５．０　　　１４５．３　　　１５７．４　　　１
５６．８　　　１６２．６．１５６．９　　　１５３．
４　　　１５５．４　　　１５９．８　　　１６９．３
１６１．８　　　１６８．２　　　１６４．７　　　１
６５．２　　　１６７．１１２３．６’　　１２８．５
　　１３０．０　　１１１．２　　１２８．２１４’２
．９　　　１４３．７　　１５２．１　　　１４７．１
　　　１５１．７１６３．８　　１６０．７　　　１５
２．０　　　１６４．９　　　１６５．０１３３、’３
　　　１４４．９　　　１３９．３　　　１５９．０　
　　１４５．９とを示す。

こｔしらの結果の分析は各パラメータについて、フ１フ
ィン１への完全アジュバントの注射により同様に外傷性
症状を起こしたウマの関節の関節内処置の幾つかのテー
クとともにプロットした。しかし、誘起された外傷性症
状は本件検討のものよりもｇ＜篤度が幾分低いので、こ
の検討の対照例のウマの運動範囲は本１′ト検討の処置
ずみのウマのものとそれほどは異ならない。しかし、よ
り重要なことは、処置ずみのウマと対照例のウマとの運
動範囲および四肢不斉の回復における差が、以前の研究
において観察さｔしたちのと密接に平行的であることで
ある。したがって、筋肉注射により得られた効果は、以
１Ｆ１に関節内投与により得られたものと高度に類１以
していた。

これらの分析結果は第１図ないし第６１１に示しである
。こｔしらの図において、白い四角形は４Ｊ口の隅、ハ
したウマについての平均値を表し、白い三角ノ１３はこ
σ）検ｄ・１の対照例の４頭のウマについての平均値を
表す６六角形と黒い四角形とは、そｔＬそれ、４０およ
び２０ミリグラムの同様なしアルロン酸ナトリウム水溶
液を１回投与することにより関節内処置した、同様に誘
起した関節の外傷性症状を有するウマについての平均値
表し、一方、黒い三角形はこの初期の研究における未処
置の対照例のウマについての平均値である。

第１図は、第１の注射の前日から、４３日後の本検討の
最終日までの“関節周囲長パの変化を示ず（便宜上、″
日付−１″の値を軸上の０にプロブｌ−Ｌ、外傷性症状
用の注射の前日、すなわち目付−６から、関節周囲長の
増加を（インチで）表しである）６関節の腫れは完全に
は回復していないが、ヒアルロン酸処置により、低い水
準に安定したか、または、部分的に軽減された。この（
筋肉内）投与経路での効果はそれほど劇的ではないが明
らかに存在１−１他のパラメータにより関節内装置のも
のよりらポ篤に外傷性症状を有することが示された関節
に対しても存在する。

第２図は、第を図と同一の期間での“運＃Ｊ範囲°′（
Ｉｔ　ＯＭ　）の変化を示す、　１００　％の値は外傷
性症状用現の；ｉ目］の、すなわち目付−６において示
さＩｔた　ＲＯＭ　を基準にしたちのである。比較例の
関節内投−ＩＨの検討においてｒｐｖ価した関節が、処
ｉｉＴ萌のＲＯＭ　のト１１害かそれほど重篤ではなか
ったために、外傷性症状が軽度て′あったものであるこ
とは明らかである。

筋肉内および関節的処置かそｒｃ４’れの対照例と比較
し′Ｃ１乎行的な改善をもたらずことも明らがで＋Ｐ＋
る。しかし、フロイントの完全アジエハン■・が極端な
外傷性症状を引き起こすので、本発明記載の処置も比較
例の処置も、誘起された病状を完全には軽減することが
できなかった。

第３および第４図は、最初の注射処置の前ｌ］の状態に
対する改善百分率を評価したＲＯＭデータのその他の分
析結果を示す。時間スケールは第１および第２図と同一
である６％４図においては、全°（のた°Ｃ軸の値に２
３．７％を加算して、グラフを随怠に−１一方に調、、
ｌｆｉ　ｌ、である。ここでは、本発明記載の筋肉内投
Ｊ４−が対称例に対して、関節内投与の場合よりも大き
な改善をもたらずことが見られる。

第５図は、以上の各図と同様の１９１間における゛四肢
不斉観察値″の変化を２バす６筋肉内および関節内の投
与経路は、はぼ同等の効果を示した。

本検討の対照例は幾分晶めの四肢不斉度を示し、本検Ｊ
・［の外傷性症状か先行の関節内研究のものよりも幾分
２ｊｒ　３ｇであることを示している。どちらの投与経
路でも同一水準の四肢不斉が得られるという事実は、本
検討の経路が幾分、より効果的であることを示している
。

第６図は、以上の各図と同一の期間におけるパ歩幅長″
の変化を示す、それぞれの評価において、歩幅は外傷性
症状用の注射の面目、すなわち日付−６に示した平均値
と比較して、回復百分率を得た。本発明の方法に従って
処置したウマ、および関節内注射により処置したウマは
どちらも、それぞれの対称例と比較して、より迅速な、
かつ、より大きな歩幅の最終的回復を示す。

０例　２ ４８歳、体重１５５ボンドの男性の背部の痛みを、１０
ないし３０体績パーセントのジメチルスルホキシド（１
）　Ｍ　Ｓ　Ｏ）と混合したヒアルロン酸すｌ・リウム
の水溶液の局所通用により緩和した。個々の配合剤は、
１０．２０および３０体桔パーセントのｌ’、）　Ｍ　
ｒ＞　Ｏと残部の、３７℃において５００　ｅ／ｓを超
ノーる粘性およびＦ　Ｉ）　Ｌ　Ｃ”Ｃ″測定て２　ｘ
　１０＠トルトンの分子量を有し、核酸含有量０゜００
１３７ｍＨ／ｎ＋（１−オル１−フタルアルデヒド蛍光
法による全アミノ酸金石−ｊｌｒ、　０．００４７　ｔ
ａｇ／ｍＮのヒアルロン酸すＩ・リウムの１．７重−ｉ
ｆパーセンｌ〜溶液とより、ＪＳｌ製Ｌ７た。約２　ｚ
（ｌの配合剤を背部の苦痛箇所の近傍に毎）−１２回、
２週間にわたって適用した。いずれの場合にも、痛みは
約１５分で軽減し、軽減は約８ないし１０時間ｍ続した
。ついで処置を中断すると、痛みは約４ないし５［］後
に再現した。

この時点で、約２　ｘｌの配合剤を手の指関節に毎ｔＪ
ａ用することにより処置を再開すると、苦痛か効果的に
軽減された。：］Ｆｊ後に処ｉ４を中止１．でも、次の
Ｚ週間半の間、Ｊｌ丘みは再発しなかった。したかつて
、体重１ボンドＪＩンたり約０．１！５ミリグシム（２
肩ｉ２．１，７重量ゾ≦　×７０体祐％　ｘｌ（１００
ｍｇ／ｗ＋１　）の局所投与量で、苦痛箇所の近傍また
はより遠い場所に適用することにより、痛みが効果的に
処置されたことになる。

この処置により軽減された痛みは、処置を開始する萌、
約２年間は一定に近い状邪、にあったのである。処置後
は、長時間一定の体位で座り続け、または眠り続けたの
らに、はるかに低い強度て涌みが観察されるのみであっ
た。

ヒアルロン酸すトリウムの皮膚透過性担体なしての局所
適用は無効であった。ヒアルロン酸塩溶液は単に蒸発し
て乾燥状態になり、対象物の皮膚上にフィルムを残すの
みであった。

ＤＭＳＯの同等量を単独で適用しても、背部の痛みの軽
減には無効であった。実際に、これを適用した皮Ｊｉ領
域の、ある種の炎症の原因となったのである。ヒアルロ
ン酸ナトリウム溶液とともに適用ｊ−た場合には皮膚の
炎症は観察されないのであるから、これは極めて対照的
な結果である。

芝′−旋五−ｙ ５４歳、体重２５０ボンドの男性の種々の関節および筋
肉の１４みを、実施例２で用いたものと同一のヒアルロ
ン酸ナトリウム水溶液と、全体積を基準にして２０体桔
％のＤＭＳ○との混・ｈ物を局所適用することにより軽
減した。数年前の軟骨損傷により膝に生じた痛みが、こ
の配合剤４ミリリツ１〜ルによる処置で、３０分以内に
軽減することが観察された。痛みを十分に制御するため
に、処置を４１−１間隔で約２Ｊ間繰り返した。屑の滑
液包炎（ｂｕｒｓｉＬｉｓ）の痛みは、この同一の配合
剤約５１１の局所適用により、２．３分で十分に軽減し
た。

痛みは約４［１で再発し、同一の処置により軽減した。

このサイクルを４回繰り返した。鎖骨領域の筋肉の苦痛
は、この配合剤３ミリリツトルの適用により軽減した。

一方の側のみに適用すると痛みは未処置の側で持続した
。

ソ４族Ｍ−± 腰部に多重脱出板を有し、筋肉が痙挙する５７歳、体重
１９５ボンドの男性の背部の激しい痛みが、実施例２に
記載した２０体積パーセントのＤＭ　Ｓ　Ｏを含有する
配合剤２ミリリツトルの局所適用により軽減した。配合
剤を腰椎上の皮膚に適用すると１時間以内に痛みが軽減
し、約８時間持続した。１２時間間隔で数日間、時には
飛ばしながら処置を継続した。ある場合には処置が有効
でなかったが、その場合でも次の処置は有効であった。

この障害は、１年以上前には酵素注射療法により処置さ
れていた。本件処置が開始された時点では、随意手術が
考慮されていた。

夾凧え−ｉ 通常は樽引きレースに活発に従事していたが、両後肢の
屈筋ｎに鍵炎を起こした２頭のクォーターホースを、皮
膚透過性担体と混合した実施例２のヒアルロン酸ナトリ
ウム水溶液の局所適用により処置して、成功を収めた。

８０体積％のヒアルロン酸塩／２０体積％のジメチルス
ルホキシドの混合物は、市販の局所薬剤アブソルビンよ
りも効果的であった。各ウマの一方の肢をヒアルロン酸
塩混合物で処置し、他方の肢はアブソルビンで処置した
。ヒアルロン酸塩は毎日２回、３日間、第Ｌ　ＩＩには
３ミリリツトル、続＜２ＩＪ間は１ミリリツ）・ルを用
いて適用したくいずれの場合にも各適用油のへずつを肢
の両側から適用した）。

３日の終わりには諸症状、祢および鞘の腫れ、ならびに
種−ｒ・骨の痛みは消失していた。Ｍ大のｌｌＩ！害か
去ったのである。一方、アブソルビンを用いる推奨され
る手法の処置では、完全な快癒には６Ｌ１の処置を要し
、た。

、Ｌ牧且−Ｌ ヒアルロン酸の遠隔投与の限界を示すために、２種の実
験を行った。実施例１に報告した検討の対照用のウマの
関節の外傷性症状が慢性化したのちに、２頭を局所的に
、他の２頭を静脈内的に処２＋−なか、病状に有意の改
善は見られなかった。

フロイントの完全アジュヴアントにより誘起された慢性
症状の若干の軽減が、ヒアルロン酸ナトリウムの関節内
注射について、ヨーロッパ公開特許明ａｌ　ｒ！Ｆ第１
４４，０１９　ＪＩ＋に報告されてはいるが、このモデ
ルは通常は急性症状の処置の評価に限定さｒｔているの
で４らる。外傷性症状発現後置時間を経て進展した障害
は極めて重篤で、通常は、処置に反応することを期待で
きない。したがって、この結果は遠隔投与の重要な限界
とは判断されず、実際は、誘起された外傷性症状の重篤
さの反映に過ぎないのである。

局所処置は実施例１の検討の“日付２８”　、すなわち
外傷性症状の誘発後３１日目から始めて６日間、毎日、
８０体積％のヒアルロン酸溶液／２０体積％のジメチル
スルホキシドの混合物１０ミリリツトルを罹患した関節
に適用することにより行った。ヒアルロン酸水溶液は実
施例２で使用したものと同一であった。実施例１の４種
の規準のいずれにおいても、処置直前の状態または他の
２頭の対照用のウマと比較して有意の改善は観察されな
かった６ 静脈内処置は、実施例１の検討の“日付３５°“、ずな
わち、外傷性症状の誘発後４１日目から始めて８０間、
１日おきに、実施例１で用いたヒアルロン酸ナトリウム
水溶液４ミリリツトルを頭部の静脈に注射することによ
りおこなった。ここてちまた、４種の規準のいすｔＬに
おいても有意の改心は見られなかった。

以上、本発明を説明の目的で詳細に記述してきたが、１
−記詳細は単に上記目的のためのものであって−′ｉ’
ｔ　’＋Ｔ請求の範１川により限定されているもの以外
にも、本発明の精神および範囲からはずれることなく、
当業者により変形がなされ得るものと理１１イさｒしる
ノ＼きものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、毛根関節にフロイントの完全アジュウ′ｒン
トに起因する外傷性症状を存する、処置用のウマと対照
用のウマとの手根関節周囲長の変化を、ヒアルロン酸に
よる処置後の時間に対してブロワ１−シたものである。 第２図は、第１　［ｇに用いたものと同じウマについて
、運動範囲の変化を処置後の時間に対してブ１７ツｌ−
１，たちのである。 第３１Ａは、第１図に用いたものと同じウマについて、
処ｉ〃１］を基準にした運動範囲の変化を処置後の時間
に対してプロットしたものである。 第４１Ｚは、第３図のものと同一のプロットであるが、
最低点を０％にセットして、たて軸の値を随意に２３．
７％増加させたものである。 第５図は、第１図に用いたものと同じウマについて、四
肢不斉の指数を処置後の時間に対してプロットＬまたも
のである。 第６図は、第１図に用いたものと同じウマについて、歩
幅の％改善度を処置後の時間に対してプロットしたもの
である。 １屯」１ ＦＩＧ、　１　　　　　周回表１．討を串Ａ０勧果０　
５　　ｔｏ　１５２ｏ　２ｓ　３ｏ　３＝、　４ｏ　４
ｓ　５゜処！を受のヨ状 ＦＩＧ、　２　　　　　運動砲口１：釧’１３１−ＩＡ
のθ果笠１（（の日数 口ＨＩＭΔＨＣ０００４０口Ｂ２０ΔＳ　　ＣＯ（逆手
ｏｉとｈＬ午１１　　（ｇ（”Ｉ　−６ンＩ：１丁？３
Ｔ戸ｑ、ｙ　８ｒｉ　）０　５　１ｏ　１５２Ｃ］　２
５３０３５’ｏ　’ｓ　５゜処１ｆ支め日数 口Ｍ　　ＩＭ　ＱＭ　　ＣＯ０日−１０Ｈ（Ｅ１９２０
　　ＨＡＨＣ０（ＪＫ、、’１日−ロイゴ０．日イ丁０
４ｆ）返Ｘ友ＡＥ状

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容し得る塩の有
   効量を哺乳動物の体内または体上の刺激を受けている組
   織から離れた場所に投与することよりなる上記組織の炎
   症、苦痛またはその他の外傷の結果の軽減方法。 ２、投薬量を局所的に、皮下に、筋肉内に、または静脈
   内に投与することを特徴とする特許請求の範囲第１項記
   載の方法。 ３、投薬量が処置すべき対象の体重１ｋｇあたり少なく
   とも約０．０４４ｍｇであることを特徴とする特許請求
   の範囲第１項記載の方法。 ４、投薬量が処置すべき対象の体重１ｋｇあたり少なく
   とも０．０８８ｍｇであることを特徴とする特許請求の
   範囲第１項記載の方法。 ５、ヒアルロン酸を３７℃において約２００ｃ／ｓ以下
   の粘性を有する０．５ないし３．０重量パーセントの水
   溶液として注射経路で投与することを特徴とする特許請
   求の範囲第１項記載の方法。 ６、ヒアルロン酸がＦＰＬＣで測定して１．５ないし４
   ミリオンドルトンの範囲にほとんど全部がはいるような
   分子量分布を有するものであることを特徴とする特許請
   求の範囲第１項記載の方法。 ７、ヒアルロン酸が非発熱性のものであり、ＵＶ吸収に
   よれば、結合したアミノ酸を有し、かつ、約１．２５ｍ
   ｇ／ｍｌ以下のタンパク質含有量と約０．０６ｍｇ／ｍ
   ｌ以下の核酸含有量とを有するものであることを特徴と
   する特許請求の範囲第１項記載の方法。 ８、３７℃において約２．０ｃ／ｓ以下の溶液粘性を有
   し、かつ、ＦＰＬＣで測定して約１．５ないし４．０ミ
   リオンドルトンの範囲に単一の顕著なピークを示すよう
   な分子量分布を有するヒアルロン酸ナトリウムの約１重
   量パーセント水溶液を、ウマの体重１ｋｇあたり少なく
   とも約０．０８８ｍｇのヒアルロン酸塩投与量で筋肉内
   注射することよりなるウマの関節の炎症もしくは苦痛ま
   たはその双方を少なくとも部分的に軽減する方法。 ９、ヒアルロン酸を皮膚透過性担体とともに局所的に投
   与することを特徴とする特許請求の範囲第２項記載の方
   法。 １０、ヒアルロン酸が約０．５ないし３．０重量％の水
   溶液であり、かつ、これを約３０体積％までの皮膚透過
   性担体と混合することを特徴とする特許請求の範囲第９
   項記載の方法。