JPS6211166A - アミノ窒素検出用試験紙 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 出願目的 本出願は、特許出願／Ｅｘ　５９−３９６５における不
備を改め、新な出願としたものである。

技術分野 本発明は、アミノ窒素特に尿中アミノ窒素を検出する試
験物に関する。

従来技術 尿たん白検査は、主に腎臓の糸球体機能検査として用ら
れ、腎臓の尿細管機能をみる試験和は、市販されていな
い。薬物、特にアミノ配糖体抗生物質、重金属による尿
細管機能障害を簡便にみることのできる検査法は確立さ
れていない。特に、核器移殖の手術において、拒絶反応
抑止薬であるサイ昶はリン、°・（登録商標）の尿細管
毒性の検査の重要性は大である。この薬毒性は、尿たん
白検査では検出できない。腎生検で薬毒性が確認された
尿において、たん白は検出されないのに、本発明に係る
試験物は陽性に検出される。

反応原理 アミノ糖、アミノ酸、たん白等の活性アミノ基を有スる
物質は、トリニトロベンゼンスルホンｆｔ１ｍと置換反
応を起し、その生成物は４２Ｏｎｍ付近吸収を有すルコ
とが○ｋｗｙａｍａ等によりＪ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ；　
４７　。

４５４　（１９６０）に述られている。　この反応は、
分子量の小いアミノ窒素程よく反応する。従って室温で
は、尿中たん白は低分子アミノ窒素によシ反応が阻害さ
れる。

発明が解決しようとする問題点 本発明は、腎臓の尿細管機能を簡便に検査する試験物を
提供するものである。従来このような検査物はなかった
。

上記したように、尿たん白試験紙では解決できない問題
点を解決するものである。

問題点を解決するための手段 野原細管は、低分子アミノ窒素を再吸収する。

従って、尿中のアミノ窒素の寝により野原細管の機能低
下を読むことができる。このことは、動物実験によって
も確認できる。ラッテにアミノ配糖体を有する薬物例は
ポリミキシンＢ（登録商標）を投与し、排拙された尿の
アミノ窒素を測定する。測定法は以下の通シである。

トリニトロベンセンスルホン酸ナトリウム５００■をｐ
ｈ　９のホウ酸ナトリウムー水酸化ナトリウム緩衝液に
溶す。この浴液と尿を等量混合し、３０分放置する。こ
の混合液を１０倍に希釈した液を比色する。スタンダー
ド（・（−は、グリシンの０．１ｇ／ｄ１溶液を用る。

前原細管機能障害があるとアミノ窒素濃度が、グリシン
に換算して１０　ｏｒｎｇ７ｄ１以上となる。

本発明は、上記定量性試験紙化したものである実施例 本発明に用る吸収性担体は、ろ紙が適しているが、その
他不触布等の親水性高分子担体等があるアルカリ性緩衝
液とは、ｐｈ７．５〜ｐｈ１２．５の領域で緩衝能を有
する溶液である。それは、リン酸二水素カリウム−水酸
化ナトリウム、ホウ酸−塩化カリウムー水酸化ナトリウ
ム、四ホウ酸ナトリウムー水酸化ナトリウム、リン酸二
水素カリウム−リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素
カリウム−四ホウ酸ナトリウム、四ホウ酸ナトリウムー
炭酸ナトリウム、ホウ酸−塩化カリウムー炭酸ナトリウ
ム、ホウ酸−塩化ナトリウム−四ホウ酸ナトリウム、炭
酸ナトリウム−炭酸水素ナトリウム等が用られる。さら
にＢｒ１ｔｔｏｎ−Ｒｏｂｌｎｓｏｎの広域緩衝液も用
られうる。これらの緩衝液のうち、四ホウ酸ナトリウム
ーリン酸二水素カリウムを含有する緩衝液が安定性の点
で好ましい。これらの緩衝液のイオン強度は、１０−５
００ｍ？ｖｉである。ｐｈ　ｓ以下であると室温での発
色がややおそくなる。ｐｈが１０以ではトリニトロペン
スルホン酸塩と混合シて試験紙に含浸させたとき乾燥工
程において、トリニトロベンスルホン酸塩分解のため、
トリニトロフェノールが発生する。このため、試験紙が
、自然発色してしまう。しかし、ｐｈは、高い程発色度
が　高い。最適ｐｈ域は、８．ζα３　である。

トリニトロベンゼンスルホン酸ナトリウムを昂る場合は
、緩衝液に０．３〜ｌ　Ｏｍｇ／ｍｌの割合で含ませる
。

０．３■廊１以下であると発色度が小く、発色完了目的
とするアミノ窒素試験紙は、上記の緩衡准にトリニトロ
ベンセンスルホン酸ナトリウムを溶解させ、これを上記
の吸収性担体に含浸して作製スル。緩衝とトリニトロベ
ンゼンスルホン酸項液とを別々に調製しておき、これを
吸収性担体に含浸させてもよい。トリニトロベンゼンス
ルホン酸塩をマイクロカプセル化した液を含浸させた後
に、緩衝液を含浸させてもよい。トリニトロベンゼンス
ルホン酸塩と緩衝液とが含浸された吸収性担体は、乾燥
時に水分を完全に除去することが安定性の点で望ましい
。このため含浸された吸収性担体は・凍結乾燥するのが
望ましい。乾燥して直に、吸収性担体を乾燥剤の入った
着色瓶、水分や光を防いだ容器等に保存する。

０．１Ｍリン酸二水素カリウム２容部と０．０５Ｍ四ホ
ウ酸ナトリウム８容部との混合液に、トリニトロベンセ
ンスルホン酸ナトリウムを３ｏｍｇ／ｄ工の濃度となる
ように加だ。この溶液に東洋ろ紙洗２（ａｃｍｘ２ｏｃ
ｍ）ヲ浸し直に凍結乾燥する。このろ紙を５ｍｍＸ５ｍ
ｍの小片に切断する。厚さ０．３ｍｍのポリスチレンフ
ィルムを６０ｍｍＸ５ｍｍの大きさに切ロノ「シたホリ
マーヌテックを準備し、このポリマーヌテックの先端に
上記ろ紙小片を両面テープで固定し、瓶に保存する。

発明の効果 本発明に係る上記小片は、体液特に尿中のアミノ窒素を
半定量するのに適する。グリシンに換算して１００■Δ
１以上のアミノ窒素が存在すれば黄色に発色する。

臨床的効果において、だん白試験紙とは全く異る。

アミノ窒素試験紙では、たん白質はほとんど発色に関与
しない。たん白試験紙の発色は腎臓の糸球体の障害を示
し、アミノ窒素試験紙の発色は腎臓の尿細管障害を示す
、アミノ窒素試験紙の発色は、低分子アミノ窒素に由来
し、低分子アミノ窒素が尿細管障害によシ尿中に増加す
るためである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. トリニトロベンゼンスルホン酸塩を含むアルカリ性緩衝
   溶液を吸収性担体に含浸させたアミノ窒素検出用試験物
   。