JPS6144855A - 生物学的活性ポリペプチド類に対し拮抗活性を有するグルタミン酸誘導体およびアスパラギン酸誘導体およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は生物学的活性ポリペプチド類に対し拮−抗活性
を（ｆするグルタミン酸誘導体およびアスパラキン酸誘
導体およびその製造法に関４〜ろ。これらの誘導体は特
に、消化系や中枢神経系の疾病の治療に苦痛抑制剤（ｐ
ａｉｎ　　ｋｉｌｌｅｒ）として、および食欲不振や外
因または内因性の生物学的活性ポリペプチド類か関与す
る全ての疾患（例えば腫瘍）の治療に有用である。

発刊ｐ購蔦（１１運 本発明に係る新規なり、Ｌ−グルタミン酸誘導体および
Ｄ　、　Ｌ−アスパラギン酸誘導体は、下記一般式〔Ｉ
Ａ〕および（ＩＢ）で示され、またその医薬的に許容し
うる塩も本発明に包含される。

ＯＯＨ （ＣＩＬ）ｎ □ Ｃｌ−１−ＮＨ−Ｃｏ−Ｒ１（ＩＡ） □ ＣＯ−Ｒ２ Ｃ０−Ｒ３ （ＣＨ、）ｎ ＣＩ−ＮＨ−Ｃｏ−Ｒ，（ＩＢ） Ｃ００Ｈ 〔式中、ｎは１または２、Ｒ１はモノ、）もしくはトリ
置換フヱニル（同一もしくは異なる直鎖もしくは分枝状
ｃ、−Ｌｃ４のアルキル基で置換、ハロゲンて置換、ま
たはンアノ基もしくはトリフルオロメチル基で置換）、
およびＲ７はモルホリノ、ピペラジノまたはモノもしく
はジ置換アミノ（同一もしくは異なる炭素数１〜８の直
鎖、分枝状もしくは環式アルキル基で置換）である〕 本発明の保護対象とする化合物は、哨乳動物に関し興味
ある薬理学的性質を有することが認められる。これらの
性質のｌっはモルヒネや他の鎮痛剤の鎮痛活性を増強し
うろことである。

これらの性質は、少なくとも一部においてコレンストキ
ニン（ｃｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎ）（ｃ　ＣＫ）
または他の生物学的調整ペプチド類に対する強力な拮抗
活性（これは当該化合物の多くによって示さＡする）に
基づく′ものとして理解される。

従って、本発明に係る化合物は、消化系の疾病など、種
々の人間の疾病の治療、例えば大腸炎や胆管機能失調（
ｂｉｌｉａｒｙ　ｄｉｓｋｉｎｅｓｉａ）の治療に有利
に使用することができ、あるいは病因および強度の痛み
の治療に使用することができる。

また本発明化合物は、薬理学的特性に基づき、ＣＣＫま
たは他の生物学的ポリペプチド類の生理学的ノイロン（
神経単位）レベルの平衡失調による精神的障害の治療へ
の使用を予想することができ、また食欲不振の治療、農
業用動物の体重増加の促進あるいは生物学的活性ペプチ
ド類によって病的細胞発育が起こる疾患（例として多分
、腫瘍）の治療への使用も予想される。

本発明化合物は前述の如く、各種の実験モデルにおいて
、生体外および生体内の両方で強力な抗Ｃ’ＣＫ活性を
有ケる。従って、本発明化合物はモルモットの胆のうの
ＣＣＫによって誘発される収縮を生体外および生体内の
両方で縮減し、ウサギの結腸の誘発収縮を抑制し、およ
びラットの胆汁分泌を増大する。

また本発明化合物の興味のある点は、鎮痛性麻酔薬およ
び鎮痛性非麻酔薬の鎮痛活性に増強効果を有することで
ある。

この増強作用は事実、第１の段階において、麻酔剤の薬
量をかなりに減らすことができ、治療係数をあまり低下
させることなく、よく知られた望ましくない多数の副作
用を制限することができる。

また本発明の化合物は、麻酔剤においてよく知られてい
る耐性現象のために薬理効果が低下した場合に、その鎮
痛活性を再度安定化させるのに使用することもでき、こ
の場合治療用量を増大する必要はない。従って、このよ
うな都合のよい治療特性は麻酔薬の長期使用から中毒に
かかった患者を徐々に解毒させるためにも役立つ。

非麻酔性鎮痛剤の場合には、鎮痛活性の増大作゛用もさ
ることながら、一般にかかる薬物によって害される胃粘
膜の保護作用を有する点できわめて有用である。

とりわけ、鎮痛剤の活性増強作用は、強力な鎮痛活性を
有するエンケファリン類（ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎｓ）（
内因生理学的ペプチド類）の加水分解をブロックする本
発明の化合物の能力が関係している。これはエンケファ
リン類自体により大きな半減期およびより大きな活性を
付与する。

本発明化合物の医薬形態は通常の方法で調製され、例え
ば錠剤、カプセル剤、懸濁液剤、溶液剤および平削に製
剤することができ、また経口、非経口または直腸を介し
て投与４°ろことかできろ。

活性成分は患者に対し、例えば０．１〜１０ｍｇ、／体
重（ｋｇ）の量で投与される。

非経「１投１ｊの場合、当該化合物の水溶性塩（例えば
ナトリウム塩または他の非毒性の医薬的に許容しうる塩
）を用いるのが好ましい。また不活性成分として、医薬
用に一般に使用されている賦形剤、結合剤、芳香剤、分
散剤、着色剤、湿潤剤などの物質か用いられる。

本発明のグルタミン酸誘導体およびアスパラギン酸誘導
体の製造法は、 ａ）式。

〔式中、ｎおよびＲ８は前記と同意義〕で示される分子
内無水物を式：ＲＪＩ［式中、Ｒ３は前記と同意義］で
示されるアミンと、ｌ〜５のモル比および一２０℃〜３
０℃の温度にて反応さｕ１反応液から前記式（ＩＡ）お
よび（ＩＢＩの化合物を回収し、これらを分離する 工程を包含することを特徴とする。なお、反応温度は−
ｌＯ℃〜１０℃が好ましい。

上記式〔■〕の分子内無水物は、これまで製造されたこ
とのない新規な化合物である。かかる分子内無水物〔口
〕は、 ｂ）グルタミン酸またはアスパラギン酸をショツテン−
バウマン（ＳｃｈｏＬｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎ）の条件下
、当モル量の式・Ｒ，−ＣＯ−Ｃ１２（式中、Ｒ３は前
記と同意義）の塩化アンルと一２０℃〜３０℃の温度で
反応させて、式 Ｃ００１−１ □ □ ＣＯＯＨ のＮ−アノル化化合物を得、次いて Ｃ）該化合物（、［ｌＩ）をそのままあるいは相溶性の
不活性溶媒中、モル比１〜ｉｏの無水酢酸と一１Ｏ°Ｃ
〜還流温度にて反応させ脱水４−る工程によって、製造
される。

本発明に係る製Φ法の−・連の二［程の全体を、下記反
応工程に記載する。

［ｎ］ ＣＨ−ＮＨ−Ｃｏ−Ｒ。

　ＯＯＨ −に記アソル化１：程すは、０〜１５℃の温度、１〜２
４時間の条件で行うのか好ましく、約５℃の温度および
１２時間の時間か推奨される。

工程Ｃにおいて、反応時間は例えば約３０分〜１２時間
であって、約３時間が好ましく、無水酢酸の量は化合物
（ＩＩＩ）　１モルに対し３モルが好ましい。

アミド化工程ａにおいて、式。Ｒ２Ｈのアミンを分子内
無水物〔■〕とのモル比２５〜１て加えることが好まし
く、反応は約３０分〜１２時間、好ましくは３時間で行
う。

化合物〔ｌΔ〕および（ＩＢ）の相対割合は、使用する
Ｒ１およびＲ２置換基の種類によって変化する。異性体
ＩΔおよびＩＢは、分別結晶（下記表ＣおよびＤに示す
溶剤を使用）または塩基性媒体での抽出によって分離す
ることがてきるが、平均して多い方の酸は化合物〔ＩＢ
〕である。

次に実施例を挙げて、本発明をより具体的に説明する。

実施例１ ３．４−ジクロロ−Ｎ−ベンゾイルグルタミン酸（化合
物Ａ−４）の製造・− ２００好のＩＮ−炭酸ナトリウム中の１４．７＠（０１
モル）のし−クルタミン酸の溶液を５℃に冷却し、これ
に攪拌および冷却下、１００ｓ（！のｌＮ−炭酸ナトリ
ウムおよび２１ｙ（０，１モル）の３゜４−クロロベン
ゾイルクロリドを約３０分にわたって同時に添加する。

混合物を１２時間放置して反応させる。これをａＨｃρ
でコンゴ−赤色（Ｃｏｎｇ。

ｒｅｄ）となるまで酸性化し、生成する沈澱物を濾去す
る。残渣をＨ２０より再結晶する。融点１４１〜１４５
°Ｃ，ＴＬＣ（下記表参照）、Ｒｆ＝０．４６゜収量２
４．５９（収率７６４％）。

上記と同様な方法で式（ＩＩ［）の化合物（先の反応工
程参照）の全てを製造する。得られる化合物−を下記表
Ａに示す（なお、これらを同定する特性値、収率および
結晶化に用いる溶剤を併記）。

実施例２ ３．４−ジクロロベンゾイルグルタミン酸無水物（表１
３の化合物ｌ３−４　）の製造・−３０，６ＬＩ（０，
３モル）の無水耐酸および６０ｍ０のイソプロピルエー
テルを、３２．０ｇ（０，１モル）の３．４　シタ【Ｊ
［］ヘンゾイルクルタミン酸に加えろ。かかる反応液を
還流（７３〜７７°Ｃ）下で２時間加熱する。これを冷
却し、ろ過し、少量のエーテルで洗−で残留５１１（氷
酢酸を除去し、乾燥する。

このようにして２７．Ｏｆを得る（収率８９３％）。

融点１８８〜１９０℃。

■−記と同様な方法で式（ｎ）の化合物（先の反応工程
参照）の全てを製造ずろ。これらの化合物の多数の具体
例を下記表Ｂに示す（なお、これらを同定する特性値お
よび収率を併記）。

実施例３ １）、Ｌ−４−（３，４−ジクロロベンゾイルアミノ）
−５−（ジ−ｎ−ブチルアミノ）−５−オキソペンタン
酸（表Ｃの化合物Ｃ−６）の製造−３０，２ｙ（０，１
モル）の３．４−ジクロロベンゾイルグルタミン酸無水
物を反応器に充填し、＋００ｍＱの水中て懸濁４゛る。

反応液を約５℃に冷却し、３２．２９（０，２５モル）
のり一〇−ブチルアミノを１５分にイつたって滴千する
。

この温度で混合物を放置して３時間反応させ、水醋酸で
酸性化する。これを濾過し、水で中性になるまで洗い、
乾燥リーる。このようにして１６．４９を得ろ（収率３
８％）。融点８１〜８３℃（イソプ１ノピルエーテル上
り晶出）。ＴＬＣＪ（ｒ＝ｏ、９２゜１−記と同様な方
法て式（ＩＡ）およびＣＩＢ）の化合物（先の反応上程
参照）の全てを製造する。

これらの化合物の多数の具体例を［記表Ｃおよび【）に
示す（なお、これらを同定する特性値および収率を併記
）。

本発明の保護対象である化合物によって示される鎮痛活
性は、麻酔剤の鎮痛活性の増強作用および該増強作用を
達成するメカニズムの両方を実証する一連の薬理試験に
よって例示される。

実験Ｎｏ、１：テール・フリック・テスト（ＴａｉｌＦ
　ｌ　ｉｃｋ　　Ｔ　ｅｓｔ）によるラットの鎮痛性麻
酔薬の無痛覚の増大 かかる方法はハリスｒ　Ｊ　、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、
　Ｅｘｐ。

Ｔ　ｈｅｒ、」（１土−３，１４１−１４８頁、１９６
４年）に記載の方法である。

絶食していない体重的１５０〜２００ｇの雄のラットを
使用ケろ。ンッポに１つのポイントを選び、熱源（７５
℃）で照射し、ラットがノッポを動かさないてしっとし
ている時間（秒単位）を測定する。　熱繰下で最大時間
８秒間を選び、その後い４゛れの場合ら、ラットを取出
して組織障害を回避する。測定は、薬剤の処理の面（対
照）および後に行う。　本発明の薬剤（Ｉ　Ｏｍｙ／　
ｋｙ）の投与は、モルヒネ（２ｔａｇ／　ｋｆＩ）の投
与前１０分および直前に腹腔内に行う。個々のラットの
変化率は、次式で算出する。

変化率（％） 測定は鎮痛剤の処理から１０．２０．３０．４５．６０
および９０分後に行う。

得られる結果を表１に示す。該表に被処理グループおよ
び投与量、痛覚の潜伏する平均変化率（５匹のグループ
について計算）、１〜９０分間に計算した平均値（±Ｓ
　、Ｅ　、）およびモルヒネ単独または本発明化合物と
併用して投与した潜在徒死を記録する。

表１のデータから、試験用量（１０ｍ９／に９ｉ、ｐ、
）において、はとんどの活性生成物の場合モルヒネの活
性を増強し、その活性がモルヒネ単独の約３倍の活性ま
で上がるのが認められる。

実験Ｎｏ、２　ポット・プレート・テスト（Ｈｏｔ−ｒ
）ｌａｔｅ　　Ｌｅｓｔ） かかる方法は、エディらのｒ　Ｊ　、　Ｐｈａｒｍａｃ
、ＥｘｐＴｈｅｒ、　Ｊ（±準Ｌ、３８５頁、１９５３
年）に記載の方法である。

絶食していない体重的１５０ｇの雄のラットグループ（
５匹）を使用する。

透明な円柱容器の底の金属プレート〔共沸混合物（アセ
トン／キ酸エチル−１ｔ）で５５±１℃に加熱〕の上に
ラットを載せる。

反応時間は、ラットをホット・プレートに置いたときの
時点からラットが足をなめるかあるいは容器から飛び出
そうとするまでの間隔時間とする。

管理反応時間は、薬剤投与の１０分および５分前並びに
投与してから１０．２０．３０．４５．６０および９０
分後に測定する。最大時間３０秒間ラットをプレート上
に放置する。

生成物の投り、に対４゛る応答は、正常な反応時間の少
なくとも２倍であれば陽性とみなす。得られる結果を表
２８および２ｂに示す。かかる表に、被処理グループ、
投与量およびプレート上の滞在時間（陽性応答の数／処
理回数で表示）を記録する。

（以下余白） 上記表の結果から、化合物Ｃ−２０は３ｉ９／ｋｉｔｉ
ｐの投与量でも、プロポキシフェンの鎮痛活性の２倍に
及ぶことが認められる。実際の最大効果はＩ　Ｏｍｇ／
に９ｉ、ｐ、の投与量において得られる。

（以下余白） 表２ｂの結果から、本発明化合物は投与量１１１９／に
９ｉ、ｐでも、プロポキシフェンやメタトンの鎮痛活性
の少なくとも２倍に及ぶことが認められる。

非麻酔薬の鎮痛活性を増大するには、本発明薬剤の投与
量を多くする必要があり、一般に投与量が大きい程著し
い活性を示す。

実験Ｎｏ、　３　：ラットの経皮ショックによって解除
される内因麻酔剤の鎮痛活性に対する本発明化合物の影
響（テール・フリック・テストで測定）かかる方法は、
ルイスらの［ジエイ・ニューロスフ（Ｊ　、　Ｎｅｕｒ
ｏｓｃ、　）Ｊ（上、３５８頁、１９６１年）に記載の
方法である。絶食していない雄のラット（体重的２００
ｇ）を使用する。

ラットの前足に６０Ｈｚ−２，５ｍＡの電流を５秒毎に
１秒間の持続パルスで２０分間適用して、ラットにスト
レスを負荷する。

このストレス規制により、内因麻酔剤の解除を誘発する
。電気刺激後直ちに、ラットを表３に示す時間でテール
・フリック・テストに付す。

化合物は電気ショックの直前にｉ、■、（静脈内）投与
する（投与量は表３に示す）。

（以下余白） 注Ｘ＊）Ｐ＜０．０５　　（＊＊）Ｐ＜０．０１　　（
＊＊＊）Ｐ＜０σＯＩ表３（続き２） 注）　　　Ｏｋ）＋（Ｐ＞０．０５） （＊＊）：（Ｐ＞０．０１） （＊＊＊）：（Ｐ＞０．００１）　　　　’表３のデー
タから、本発明化合物は１ｖｒｇ／に！？の投与量でも
、内因エンケファリン類の鎮痛活性を極めて重要な程度
に増大しうろことが認められる。

この増大は投与量に依存し、この増大効果は実際上、強
度および持続性共に投与量に依存する。

害３Ｊ−ｔＱ　＜１．、４一本発明化合物によって誘発
されるエンケファリン類の鎮痛活性の増強作用本発明化
合物の作用メカニズムの１つ、即ち内因エンケファリン
類の酵素分解の抑制作用をチェックするため、以ドに示
す実験を行う。ノープルらの［ライフ・ザイエンス（Ｌ
ｉｆｅ　　５ｃｉｅｎｃｅ）Ｊ（６，２８１〜１９＋頁
、１９７０年）に記載の方法に従−て薬剤を脳内室（ｉ
、ｃ、ｖ、）投与を可能ならしめるため、体重１’　５
０〜２００ｇの雄ラット（５匹グループで使用）の右側
室にカニユーレを差し込む。

次いでラットに表４に示す投Ｌｉ１１＆の当該化合物を
注射（ｉ、ｃ、ｖ、）Ｌｋ後直ちに、３μ９の■〕−ア
ラーメヂオニンーエンケファリンアミド（ＤＡＬＡ）で
処理する。前記テール・フリック・テストで表４に示す
時間にて無痛覚を試験する。

表４のデータから、試験成分のエンケファリンアミド（
ＤＡＬＡ）の鎮痛効果に対する増強作用（強度および持
続性の両方において）を認めることができる。

投与量０．０１μｇ／ｋｇにおいても極めて重要なこの
活性は、エンケファリン類の物質代謝に応答する酵素（
１種または複数種）に対する抑制活性に関係すると思わ
れる。

（以下余白） 宋＃ｍｏ、ｓ　　：　　ラットにモルヒネ・ＨＣｇを繰
返し投与して誘発される耐性の発現に対する本発明化合
物の拮抗作用 モルヒネのよって誘発される耐性の発現を拮抗させる本
発明化合物の能力を測定するため、本発明化合物の試験
を行う。体重的２００〜２５０９の雄ラットグループ（
６匹）を使用する。

各ラット（生理的に処理した対照グループを除く）には
、第１処理（時間Ｏ）から２４時間の間隔で５ｍｇ／ｋ
Ｈのモルヒネ塩酸塩ｉ、　Ｉ）、と共に１０ｍ９／に９
ｉ、　ｐ　　の当該化合物（モルヒネのみで処理するグ
ループは除く）を与える。

処理から１５．３０．４５および６０分後に痛覚域値の
測定をテール・フリックテストで行う。

表５に示すデータは測定４回の平均値であって、薬剤処
理の前後の潜伏時間（痛み現出）の変化率を示す。

また表５には、薬剤処理グループを対照グループおよび
モルヒネ処理グループと比較して各種時間で測定したス
チコーデントのｔ値も示されている。

表５のデータおよび算出回帰直線によれば、第３処理か
ら実験の最後まで、グループＣ−Ｇはモルヒネのみで処
理しノニグループＢより活性が有意に大であるごとか認
められる。

更に第５処理後、モルヒネグループは有意に対ＩＱクル
ープと異なり、−・方グループＣ−Ｃは１６８時間の最
終処理まで、対照と比較して優れた活性を維持している
ごとか認められる。

また算出回帰直線から、モルヒネグループの活性は６１
−１目の処理て０に低下するのに対し、クループＣ−Ｇ
は９　ＦｌＦｌと１６０目の間に不活性のレベルに到達
するのか認められろ。

次に本発明化合物の抗ＣＣＫ活性、抗けいれん活性およ
び胆汁分泌促進活性を例示する。

供体外見邦り６−ｑ沙汚ヱー」−空プ征国ｑ以遥碍江 モルモット胆のうの縦片をタレブス（Ｋ　ｒｅｂｓ）の
存在下酸素／Ｃｏ２（９５・５、Ｖ／Ｖ）混合物で絶え
ず酸化処理しながら温度３２℃にて隔膜用浴に入れる。

等大収縮を力変換器（ｆｏｒｃｅ　ｔｒａｎｓｄｕｃｅ
ｒ）で検出し、記録する。

１０μ９／７Ｉσ濃度のＣＣＫ−８を用いて胆のうを収
縮さＵ−１該ＣＣＫの収縮効果に対する本発明化合物の
拮抗活性を異なる濃度て測定し、ＥＤ５０値（即し、Ｃ
ＣＫの収縮効果の５０％を拮抗しうる化合物濃度、μｇ
／ｍρ）を測定する。

得られた結果を下記表に記載する。該表に試験化合物お
よびＥＤ値（各化合物について少なくとも３回の実験テ
ストから回帰法で算出）を示す。

（以下余白） 表６　１体外に１川るモルモットの胆のうに対する本発
明化合物の坑ＣＣＫ　−８活性（１・〕ｌ）　５０　、
ノ１９／ｍＱ）表６　（続き） 表６のデータから、本発明化合物は活性の大きい化合物
（例えば化合物Ｃ−７）の場合、一定濃度でＣＣＫ−８
の活性を５０％拮抗し、これは特定拮抗剤の約１０倍に
達し、非常にすぐれた活性特異性を示す。

生体外の研究を確証するため、現場のモルモットの胆の
うに対し興味の高い化合物の幾つかを生体内で試験する
。

使用方法は、ルングベルグ（Ｌ　ｊｕｎｇｂｅｒｇ）の
ｒｓｖｅｎｓｋ、　Ｆａｒｍ、　Ｔｉｄｓｋｒ、　Ｊ（
６８，３５１−３５４頁、１９６４年）に記載されてい
る。

ウレタンで麻酔した体重的４００９のモルモットを使用
する。試験物質を頚静脈に注射する。

試験物質に対する胆のうの応答を、力変換器で検出し、
マイクロ力量計（ｍｉｃｒｏｄｙ’ｎａｍｏｍｅｔｅｒ
）で記録する。最適収縮用量をｌ０ｎｉ＋／＆ｇのＣＣ
Ｋ−８として選ぶ。試験する拮抗化合物をＥＤ５０の計
算ができるように投与量を増大して投与し、その量はｌ
　Ｏｎｇ／ｋｇ　ｔ、　ｖ　　のＣＣＫ−８の収縮効果
の５０％を抑制しうる用量（ｍ９／に９　ｉ、ｖ　　単
位）である。

得られる結果を表７に示す。該表に、使用量および効果
（ＣＣＫ、−８の収縮効果の抑制率で表示）並びにＥＤ
５０を記載する。

（以下余白） 表７　現場のモルモットの胆のうに対する本発明化合物
の抗ＣＣＫ−８活性（使用濃度ｉ　ｏ　ｍ９／ｋｇ、Ｅ
Ｄ５０（＊＊＊）＋３　＜０．００１ 表７　（続き） これらの結果から、先の生体外実験でわかったことが実
質的に確認される。即ち、本発明化合物は極めて強力な
ＣＣＫ拮抗剤であり、化合物Ｃ−６およびＣ−７の場合
の０　、　Ｉ　ｕ／ｋｇの如き低い濃度においても、Ｃ
ＣＫ−８によって誘発（生理学的濃度より明らかに高い
濃度でも）される胆のう収縮をブロックすることができ
る。

また本発明化合物が全消化系に対して及ぼす抗けいれん
活性も顕著に認められる。

この活性はマウスの植物性炭素テスト（ｖｅｇｅＬａ−
１＋１４　　ｃａｒｂｏｎ　　Ｌｃｓｔ）（胃腸間の移
行速度）で測定し、結果を次表に示４−６ 表８　マウスの腹膜内に投与した本発明化合物の抗けい
れん活性の具体例（値は炭素の腸移行を５０％縮小する
用量のＥ　Ｄ　５０　、ｔｓ９／　ｋｇ単位で表示）生
理学的状況に、１−り密接したより特異的な抗けいれん
活慴を、以下の実験で例示する。

麻酔しノコウサギの腹を切開して、横行結腸を顕示させ
る。固定したポイントに満水した小球を挿入し、これを
圧力変換器（ｐｒｅｓｓｕｒｅ　　ｔｒａｎｓｄｕｃｅ
ｒ）へ、満水したポリエヂレンカニューレで接続ずろ。

生理学的条件に関して最適感度を固定し、生成物を大腿
静脈に投与する。１００＋＋９／ｋｇのＣＣＫの投りて
収縮を誘発する。

本発明化合物の活性を表９に示す。

表９：　　ＣＣＫ−８で刺激したウサギの結腸における
抗けいれん活性 （＊＊＊）ｐ　＜０．００１ かかるデータにより、本発明の試験化合物は、先に胆の
うの場合に票したと同様に、ＣＣＫを高用量（１００ｎ
ｆｌ／に９）で投与して誘発される腸収縮に対し拮抗作
用をも有することが示される。

最良の化合物を使用した場合、抗けいれん活性は１〜３
ｕ／ｋｇの極めて低用量で示される。

これらの化合物の他の興味ある特徴は、それらが胆汁流
速をかなりに増大することである。

以下に示す実験を行う。ウレタンで麻酔したラットの胆
管にカニユーレを、ポリエチレンチューブに接続した小
針と共に挿入し、胆汁を採集する。

採集は、試験化合物の静脈内投句の前に１時間、更に投
与後に２時間行い、集めた試料の重量を３０分間隔では
かる。

ラットの脱水を防止するため、０　、５　ｍＱの生理溶
液を３０分間隔でトータル３ｔｔｒＱ以内にて投与する
。　本発明化合物の幾つかについて得られる結果を次表
に示す。ＥＤ５０で表示するが、これは対照値（薬剤処
理前の１時間採集中に測定した平均値）に対し、薬剤処
理後に胆汁流通の５０％増大を起こしうる単位ＲＱ／ｋ
ｇｉ、　ｖ　　の物質量（２時間にわたって測定した平
均値）である。

かかるデータより、当該化合物は強力な胆汁分泌促進活
性を有することが推察される。試験化合物の平均ＥＤ５
０は５〜２５ｔｔｒ９／に９で、投与量と薬理学的応答
が顕著に一致する（実際の相関係数は全ての場合０．９
０より大である入 （以下余白） 表１Ｏ・　本発明の化合物によって誘発されるラットの
胆汁流速の変化率 当該化合物のほとんどに・よって示される抗ｃｃ■（活
性が、人の食欲不振の治療にまたは農業用動物の食欲促
進剤として有利に使用しうるという仮説をヂエツクする
ため、以下に示す実験を行う。

１０匹のグループに分けた体重的１６０９の雄ラットを
使用する。各グループに３週間にわたって、表示用量の
薬剤を毎日与える。

ナトリウム塩形状の薬剤を水に溶解し、Ｈ，０１０ｍ（
１／に９の容量で投与し、一方、対照グループには同容
量の水のみを与える。

毎週計算した、飼料消費の平均値および各グループの平
均体重、並びに各種の処理グループおよび対照グループ
から計算したスチューデントのｔ値を次表に示す。

表Ｉ＋、および１２のデータから、１日用量ｏ。

３ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃ−７は対照と比較して飼利消−
費を約１５％増大させるのが認められる。この増大は他
の用量試験で約３０％であり、常に極めて重要である。

処理ラットの体重増加は、対照ラットの体重増加と比較
して類似の経過をとる。当該研究期間中、Ｃ−７で処理
しノこ全てのグループは対！！６ラツトより有意に大き
な体重増加をもたらす。

（以下余白） 注）　　＊＊　　（Ｐ＜０．０１） ＊＊＊　（Ｐ＜０．００１） ＣＣＫ−８によって誘発される膵臓の腺癌の増殖の抑制
作用 正常な膵臓細胞および膵臓腺癌のＣＣＫの栄養活性に対
し、抗コレシストキニン効果の最も強力な本発明化合物
、即ち化合物Ｃ−７について研究する。

雄ハムスターの頬のうに、膵臓腺癌のｌＸＩＯ３腫瘍細
胞の懸濁液を接種する。接種から５日後にハムスターを
ランダムに４つのｌＯ匹グツｂ−プに分ける。即ち、対
照グループ、１日３回ｌＯμ９／ｋｇのＣＣＫ−８で処
理するグループ、１日３回５ｓｇ／ｋｇ　ｉ、　ｐ　　
の化合物Ｃ−７で処理するグループ、および化合物Ｃ−
７とＣＣＫ−８でそれぞれ上記と同様にして同時に処理
するグループに分ける。

１５日間の処理後にハムスターを殺し、正常な゛膵臓お
よび頬のうの接種した膵臓腫瘍を集め、重量をはかる。

ＤＮＡを抽出し、通常の方法で測定する。得られる結果
を表１３に示す。平均値（±Ｓ、Ｅ、）で表示。

表１３のデータによれば、正常な膵臓細胞に対し栄養活
性を有するコレンストキニンホルモン（ＣＣＫ−８のホ
ルモンは生理学的活性成分である）は、膵臓腺癌の増殖
を刺激することがわかる。強力な特殊ＣＣＫ拮抗剤てあ
ろ化合物Ｃ−７は、これらのＣＣＫ８の作用を極めて存
念に拮抗する。

１−記の実験データによれば、本発明の保護対象である
化合物（、−７または他の抗コレンストキニン化合物の
使用か、内因性生物学的活性ボリペプヂ）・類（特にＣ
ＣＫ）によって持続される腫瘍、例えば胃腸腫瘍および
膵臓腫瘍の治療に特に好適な結果をもたらすことが確信
される。

またかかる実験データによれば、本発明の薬剤をモルヒ
ネあるいは他の鎮痛薬（麻酔性あるいは非麻酔性のいず
れをも含む）と共に使用することにより治療主著しい刷
新をもたらし、病因の苦痛を緩解させるために医者がき
わめて高い関心を持っている化合物を提供し得ることを
示している。この治療は特に麻酔剤の長期投与の場合に
必要となると思われ、この場合薬が習慣とならないか、
あるいは少なくとも許容しうる限界の範囲内に維持する
ことが極めて必要である。更に、麻酔薬の長期使用に依
存するようになった患者の解毒にこれらを用いることは
、多分、並はずれた治療社会の関心を呼ぶものと思われ
る。

また上記実験データから、これらの化合物が胃腸系の各
種病的症状の治療、例えば一般にけいれん性症候群の治
療や痛み軽減および特に胆管機能不全や過敏な結腸の治
療に有用であることが認められる。

以上のことから、本発明化合物に対し、その多数によっ
て示される強力な抗ＣＣＫ活性、食欲不振の治療または
生理学的ノイロンレベルのＣＣＫもしくは他の生物学的
活性ペプチド類の平衡失調に関連するＳＮＣの病的症状
の治療における好適な治療用途を確認することができる
。

特許出願人　ロック・レセアルキ・ラポラトリウム・ソ
シエタ・ベル・アヂオーニ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式、 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ａ〕 または ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ｂ〕 〔式中、ｎは１または２、Ｒ＿１はモノ、ジもしくはト
   リ置換フェニル（同一もしくは異なる直鎖もしくは分枝
   状Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキル基で置換、ハロゲンで置換
   、またはシアノ基もしくはトリフルオロメチル基で置換
   ）、およびＲ＿２はモルホリノ、ピペラジノまたはモノ
   もしくはジ置換アミノ（同一もしくは異なる炭素数１〜
   ８の直鎖、分枝状もしくは環式アルキル基で置換）であ
   る〕 で示される医薬的に活性なＤ，Ｌ−グルタミン酸誘導体
   またはＤ，Ｌ−アスパラギン酸誘導体、またはその医薬
   的に許容しうる塩。 ２ｎが２、Ｒ＿１が３，４−ジメチルフェニルまたは３
   ，４−ジクロロフェニル、およびＲ＿２がＣ＿４〜Ｃ＿
   ５の直鎖アルキル基でジ置換されたアミノである式〔
   I Ａ〕で示される前記第１項記載のグルタミン酸誘導体
   またはその医薬的に許容しうる塩。 ３、ｎが２、Ｒ＿１が４−シアノフェニル、およびＲ＿
   ２がＣ＿４〜Ｃ＿５の直鎖アルキル基でジ置換されたア
   ミノである式〔 I Ｂ〕で示される前記第１項記載のグ
   ルタミン酸誘導体またはその医薬的に許容しうる塩。 ４、活性成分として式、 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ａ〕 または ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ｂ〕 〔式中、ｎは１または２、Ｒ＿１はモノ、ジもしくはト
   リ置換フェニル（同一もしくは異なる直鎖もしくは分枝
   状Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキル基で置換、ハロゲンで置換
   、またはシアノ基もしくはトリフルオロメチル基で置換
   ）、およびＲ＿２はモルホリノ、ピペラジノまたはモノ
   もしくはジ置換アミノ（同一もしくは異なる炭素数１〜
   ８の直鎖、分枝状もしくは環式アルキル基で置換）であ
   る〕 で示される化合物またはその医薬的に許容しうる塩を包
   含する医薬組成物。 ５、生物学的活性ポリペプチド類、特にコレシストキニ
   ンの生理学的ノイロンレベルでの平衡失調に係るＳＮＣ
   の疾病の治療に用いる前記第４項記載の医薬組成物。 ６、抗けいれん薬として用いる前記第４項記載の医薬組
   成物。 ７、胆汁分泌促進薬として用いる前記第４項記載の医薬
   組成物。 ８、食欲不振の治療に用いる前記第４項記載の医薬組成
   物。 ９、コレシストキニンや同様の作用機序を有する生物学
   的活性ポリペプチド類が関与する腫瘍の治療に用いる前
   記第４項記載の医薬組成物。 １０、鎮痛薬を併用して包含する人の痛み抑制剤として
   用いる前記第４項記載の医薬組成物。 １１、農業用動物の体重増加速度を高めるため、該動物
   の食欲促進剤として使用され、活性成分として式、 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ａ〕 または ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ｂ〕 〔式中、ｎは１または２、Ｒ＿１はモノ、ジもしくはト
   リ置換フェニル（同一もしくは異なる直鎖もしくは分枝
   状Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキル基で置換、ハロゲンで置換
   、またはシアノ基もしくはトリフルオロメチル基で置換
   ）、およびＲ＿２はモルホリノ、ピペラジノまたはモノ
   もしくはジ置換アミノ（同一もしくは異なる炭素数１〜
   ８の直鎖、分枝状もしくは環式アルキル基で置換）であ
   る〕 で示される化合物の少なくとも１種を含有する動物飼育
   用製剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ａ〕 または ▲数式、化学式、表等があります▼〔 I Ｂ〕 〔式中、ｎは１または２、Ｒ＿１はモノ、ジもしくはト
   リ置換フェニル（同一もしくは異なる直鎖もしくは分枝
   状Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキル基で置換、ハロゲンで置換
   、またはシアノ基もしくはトリフルオロメチル基で置換
   ）、およびＲ＿２はモルホリノ、ピペラジノまたはモノ
   もしくはジ置換アミノ（炭素数１〜８の直鎖、分枝状も
   しくは環式アルキル基で置換）である〕 で示されるＤ，Ｌ−グルタミン酸誘導体またはＤ，Ｌ−
   アスパラギン酸誘導体、またはその医薬的に許容しうる
   塩の製造法であって、 ａ）式、 ▲数式、化学式、表等があります▼［II］ 〔式中、ｎおよびＲ＿１は前記と同意義〕 で示される分子内無水物を式：Ｒ＿２Ｈ〔式中、Ｒ＿２
   は前記と同意義〕で示されるアミンと、１〜５のモル比
   および−２０℃〜３０℃の温度にて反応させ、反応液か
   ら前記式〔 I Ａ〕および〔 I Ｂ〕の化合物を回収し、
   これらを分離する工程を包含する製造法。 １３、前記第１２項のａ）工程で用いる式〔II〕の分子
   内無水物を、 ｂ）グルタミン酸またはアスパラギン酸をショッテン−
   バウマンの条件下、当モル量の式：Ｒ＿１−ＣＯ＝Ｃｌ
   の塩化アシルと−２０℃〜３０℃の温度で反応させて、
   式： ▲数式、化学式、表等があります▼〔III〕 のＮ−アシル化化合物を得、次いで ｃ）該化合物〔III〕をそのままあるいは相溶性の不活
   性溶媒中、モル比１〜１０の無水酢酸と−１０℃〜還流
   温度にて反応させ脱水する 工程によって得る前記第１２項記載の方法。 １４、ｎが２、Ｒ＿１が３，４−ジメチルフェニルまた
   は３，４−ジクロロフェニル、およびＲ＿２がＣ＿４〜
   Ｃ＿５の直鎖アルキル基でジ置換されたアミノである前
   記第１２項または第１３項記載の方法。 １５、ｎが２、Ｒ＿１が４−シアノフェニル、およびＲ
   ＿２がＣ＿４〜Ｃ＿５の直鎖アルキル基でジ置換された
   アミノである前記第１２項または第１３項記載の方法。