JPS61294333A - 粒子解析装置 - Google Patents
粒子解析装置Info
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- JPS61294333A JPS61294333A JP60136724A JP13672485A JPS61294333A JP S61294333 A JPS61294333 A JP S61294333A JP 60136724 A JP60136724 A JP 60136724A JP 13672485 A JP13672485 A JP 13672485A JP S61294333 A JPS61294333 A JP S61294333A
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- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 55
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- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
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- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、フローサイトメータ等において、測光用対物
レンズの合焦φ合軸状態の判定を可能とした粒子解析装
置に関するものである。
レンズの合焦φ合軸状態の判定を可能とした粒子解析装
置に関するものである。
【従来の技術１
フローサイトメータ等に用いられる従来の粒子解析装置
では、フローセルの中央部の例えば２００ ｇｍＸ ２
００ ＪＬｍの微小な断面を有する流通部内を、シース
液に包まれて通過する血球細胞などの検体に照射光を照
射し、その結果生ずる前方及び側方散乱光により、検体
の形状・大きさ・屈折率等の粒子的性質を得ることが可
能である。
では、フローセルの中央部の例えば２００ ｇｍＸ ２
００ ＪＬｍの微小な断面を有する流通部内を、シース
液に包まれて通過する血球細胞などの検体に照射光を照
射し、その結果生ずる前方及び側方散乱光により、検体
の形状・大きさ・屈折率等の粒子的性質を得ることが可
能である。
また、蛍光剤により染色され得る検体に対しては、照射
光とほぼ直角方向の側方散乱光から検体の蛍光を検出す
ることにより、検体を解析するための重要な情輯を求め
ることができる。
光とほぼ直角方向の側方散乱光から検体の蛍光を検出す
ることにより、検体を解析するための重要な情輯を求め
ることができる。
フローサイトメータ等において正確な測定を行うために
は、検体粒子以外の物体からの疑似信号が混入しないよ
うに、測光用対物レンズにより正確に検体粒子或いはそ
の極く近傍の−みを集光させると共に、検体粒子の流れ
の軸と光軸とを正確に一致させなければならない、その
ために、対物レンズの焦点及び光軸調整を行う必要があ
るが、従来装置においては測定前に標準サンプルを流し
ながら、操作者が目視により手動で焦点及び光軸調整を
行っているので、操作が繁雑である上に、操、作者によ
って個人差が生じ、十分に正確な焦点及び光軸調整を行
うことが困難であるのが現状である。
は、検体粒子以外の物体からの疑似信号が混入しないよ
うに、測光用対物レンズにより正確に検体粒子或いはそ
の極く近傍の−みを集光させると共に、検体粒子の流れ
の軸と光軸とを正確に一致させなければならない、その
ために、対物レンズの焦点及び光軸調整を行う必要があ
るが、従来装置においては測定前に標準サンプルを流し
ながら、操作者が目視により手動で焦点及び光軸調整を
行っているので、操作が繁雑である上に、操、作者によ
って個人差が生じ、十分に正確な焦点及び光軸調整を行
うことが困難であるのが現状である。
また、測定中に焦点及び光軸の移動が生じた場合に、そ
の確認が不可能なため、測定途中に疑似信号が混入した
か否かを判別できず、データの信頼性についての不安が
ある。更に、ノズルやフローセル等を交換するごとに、
標準サンプルを流しながらの焦点及び光軸調整を必要と
し９、測定に手間が掛かるという欠点を有している。
の確認が不可能なため、測定途中に疑似信号が混入した
か否かを判別できず、データの信頼性についての不安が
ある。更に、ノズルやフローセル等を交換するごとに、
標準サンプルを流しながらの焦点及び光軸調整を必要と
し９、測定に手間が掛かるという欠点を有している。
［発明の目的］
本発明の目的は、照準用の基準を設けた照準光学系を設
置し、合焦・合軸状態を確認可能とすることにより、焦
点及び光軸調整を容易にしかも正確に行い得る粒子解析
装置を提供することにある。
置し、合焦・合軸状態を確認可能とすることにより、焦
点及び光軸調整を容易にしかも正確に行い得る粒子解析
装置を提供することにある。
［発明の概要］
上述の目的を達成するための本発明の要旨は、フリーセ
ルの流通部を流れる検体粒子に光ビームを照射する照射
光学系と、該光ビームが検体粒子によって散乱された散
乱光を測定する測光光学系とを備え、該測光光学系内の
測光用対物レンズの光路内に合焦・合軸状態を検出する
照準光学系を設けたことを特徴とする粒子解析装置であ
る。
ルの流通部を流れる検体粒子に光ビームを照射する照射
光学系と、該光ビームが検体粒子によって散乱された散
乱光を測定する測光光学系とを備え、該測光光学系内の
測光用対物レンズの光路内に合焦・合軸状態を検出する
照準光学系を設けたことを特徴とする粒子解析装置であ
る。
［発明の実施例］
本発明を図示の実施例に基づいて詳細に説明する。
第１図は粒子解析装置の構成図であり、フローセル１の
中央部の紙面に垂直な流通部２内を、高速層流となった
シース液に包まれて流体力学的焦点合わせが行われた検
体粒子が通過し、この流れと直交する方向にレーザ光源
３が配置されている。このレーザ光源３から出射された
レーザ光りを流通部２に導光するために光軸０１上に結
像レンズ系４が配置されている。また、検体粒子に対し
てレーザ光源３と反対側の光軸０１上に、集光レンズ５
、ハーフミラ−６、光電検出器７が順次に配列されてい
る。更に、光軸０１上に斜設されたハーフミラ−６の反
射側の光軸上には、第１のピント板８、接眼レンズ９が
配置されている。
中央部の紙面に垂直な流通部２内を、高速層流となった
シース液に包まれて流体力学的焦点合わせが行われた検
体粒子が通過し、この流れと直交する方向にレーザ光源
３が配置されている。このレーザ光源３から出射された
レーザ光りを流通部２に導光するために光軸０１上に結
像レンズ系４が配置されている。また、検体粒子に対し
てレーザ光源３と反対側の光軸０１上に、集光レンズ５
、ハーフミラ−６、光電検出器７が順次に配列されてい
る。更に、光軸０１上に斜設されたハーフミラ−６の反
射側の光軸上には、第１のピント板８、接眼レンズ９が
配置されている。
また、第２図に示した検体粒子の流れの中心軸Ｚ、及び
レーザ光りの光軸０１のそれぞれに、はぼ直交する方向
の光軸０２に沿って、測光用対物レンズｌＯ、ハーフミ
ラ−１１、絞り１２．凸レンズ１３、波長選別手段１４
．１５、反射鏡１６が順次に配列されている。そして、
側方散乱光の光軸０２に対して斜設された波長選別手段
１４．１５及び反射鏡１６により反射される方向のそれ
ぞれの光路上に、（凸レンズ１７・バリヤフィルタ１８
・光ファイバ１９）、（凸レンズ２０・バリヤフィルタ
２１φ光フアイバ２２）、（凸レンズ２３・バリヤフィ
ルタ２４・光ファイバ２５）が対応して配置されている
。また、これらの光ファイバ１９．２２．２５の他端に
は、図示しない光電検出器がそれぞれ接続されている。
レーザ光りの光軸０１のそれぞれに、はぼ直交する方向
の光軸０２に沿って、測光用対物レンズｌＯ、ハーフミ
ラ−１１、絞り１２．凸レンズ１３、波長選別手段１４
．１５、反射鏡１６が順次に配列されている。そして、
側方散乱光の光軸０２に対して斜設された波長選別手段
１４．１５及び反射鏡１６により反射される方向のそれ
ぞれの光路上に、（凸レンズ１７・バリヤフィルタ１８
・光ファイバ１９）、（凸レンズ２０・バリヤフィルタ
２１φ光フアイバ２２）、（凸レンズ２３・バリヤフィ
ルタ２４・光ファイバ２５）が対応して配置されている
。また、これらの光ファイバ１９．２２．２５の他端に
は、図示しない光電検出器がそれぞれ接続されている。
これらの光電検出器としては、微弱光を増倍して検出す
ることが可能なフォトマルが常用されている。更に、光
軸０２に対して斜設されたハーフミラ−１１の反射側に
は、順次に第２のピント板２６、接眼レンズ２７が配さ
れている。
ることが可能なフォトマルが常用されている。更に、光
軸０２に対して斜設されたハーフミラ−１１の反射側に
は、順次に第２のピント板２６、接眼レンズ２７が配さ
れている。
結像レンズ系４としては、通常２組のシリンドリカルレ
ンズを直交させたものが用いられ、これによりレーザ光
りは任意の長径φ短径の結゛像ビームに成形され、検体
粒子に照射される。レーザ光りの検体粒子による散乱光
のうち、前方散乱光は集光レンズ５を介し、ハーフミラ
−６を透過して光電検出器７に集光され、検体粒子の性
状が測定される。光電検出器６における出力信号の強度
は検体粒子の大きさと相関しているので、前方散乱光は
通常検体粒子の大きさの決定に用いられる。
ンズを直交させたものが用いられ、これによりレーザ光
りは任意の長径φ短径の結゛像ビームに成形され、検体
粒子に照射される。レーザ光りの検体粒子による散乱光
のうち、前方散乱光は集光レンズ５を介し、ハーフミラ
−６を透過して光電検出器７に集光され、検体粒子の性
状が測定される。光電検出器６における出力信号の強度
は検体粒子の大きさと相関しているので、前方散乱光は
通常検体粒子の大きさの決定に用いられる。
ハーフミラ−６により反射された前方散乱光の一部は、
第１のピント板８、接眼レンズ９を介して観察眼Ｅによ
り観察される。なお−、ピント板８はハーフミラ−６を
介して光電検出器７と光学的に等価な位置に配されてお
り、ピント板８上には照準用マークが記されている。従
って、観察者はピント板８上の照準用マークと流通部２
とを合わせ、ピント板８上に流通部２が鮮明に見えるよ
うにすることによって、前方散乱光用の測光光学系の焦
点及び光軸調整を行うことができる。
第１のピント板８、接眼レンズ９を介して観察眼Ｅによ
り観察される。なお−、ピント板８はハーフミラ−６を
介して光電検出器７と光学的に等価な位置に配されてお
り、ピント板８上には照準用マークが記されている。従
って、観察者はピント板８上の照準用マークと流通部２
とを合わせ、ピント板８上に流通部２が鮮明に見えるよ
うにすることによって、前方散乱光用の測光光学系の焦
点及び光軸調整を行うことができる。
また、各種蛍光剤により染色された検体粒子については
、側方散乱光として測光用対物レンズ１０により絞り１
２に集光される。なお、絞り１２は検体粒子に共役な位
置に設置されており、側方散乱光及び蛍光をこの絞り１
２を通過させることにより、雑音の少ない測光信号を得
ることができる。蛍光染色された検体粒子についての測
定の際には、通常Ａｒ”４８８ｎｍのレー・ザ光が用い
られ、検体粒子は緑色又は赤色の蛍光を発する。
、側方散乱光として測光用対物レンズ１０により絞り１
２に集光される。なお、絞り１２は検体粒子に共役な位
置に設置されており、側方散乱光及び蛍光をこの絞り１
２を通過させることにより、雑音の少ない測光信号を得
ることができる。蛍光染色された検体粒子についての測
定の際には、通常Ａｒ”４８８ｎｍのレー・ザ光が用い
られ、検体粒子は緑色又は赤色の蛍光を発する。
また、Ａｒ”レーザの波長で９０’方向に散乱される光
の量は、検体粒子の内部の複雑性を反映することが知ら
れている。
の量は、検体粒子の内部の複雑性を反映することが知ら
れている。
近年、各種蛍光染料が開発されており、検査目的に応じ
て使い分けられるようになってきているが、通常では側
方散乱光を適当に波長選別し、それぞれの測定値を得る
ようにしている。即ち、絞り１２を通過後の光束を凸レ
ンズ１３により平行光束とし、適当な分光特性を持たせ
たグイクロイックミラー等の波長選別手段１４によって
側方散乱光と蛍光とに分光し、側方散乱光は凸レンズ１
７、バリヤフィルタ１８．光ファイバ１９を介して光電
検出器で検出され、検体粒子内部の顆粒性が観測される
。レーザ光源３としてＡｒゝ４８８ｎｍレーザ光が用い
られた場合には、波長選別手段１４は４８８ｎｍよりも
長波長の光を通す特性を有するものとし、バリヤフィル
タ１８は４８８ｎｍの光を通すバンドパスフィルタとす
ればよい。
て使い分けられるようになってきているが、通常では側
方散乱光を適当に波長選別し、それぞれの測定値を得る
ようにしている。即ち、絞り１２を通過後の光束を凸レ
ンズ１３により平行光束とし、適当な分光特性を持たせ
たグイクロイックミラー等の波長選別手段１４によって
側方散乱光と蛍光とに分光し、側方散乱光は凸レンズ１
７、バリヤフィルタ１８．光ファイバ１９を介して光電
検出器で検出され、検体粒子内部の顆粒性が観測される
。レーザ光源３としてＡｒゝ４８８ｎｍレーザ光が用い
られた場合には、波長選別手段１４は４８８ｎｍよりも
長波長の光を通す特性を有するものとし、バリヤフィル
タ１８は４８８ｎｍの光を通すバンドパスフィルタとす
ればよい。
一方、蛍光は波長選別手段１４を通過し、例えば緑色反
射、赤色透過の特性を有するグイクロイックミラー等の
波長選別手段１５によって緑色蛍光と赤色蛍光に分光さ
れ、緑色蛍光は凸レンズ２０、緑色のみを通すバンドパ
スフィルタであるバリヤフィルタ２１及び光ファイバ２
２を介して光電検出器で検出される。また、赤色蛍光は
反射鏡１６と凸レンズ２３．赤色を通すバンドパスフィ
ルタであるバリヤフィルタ２４及び光ファイバ２５を介
して光電検出器で検出され、検体粒子の生化学的性質が
観測される。
射、赤色透過の特性を有するグイクロイックミラー等の
波長選別手段１５によって緑色蛍光と赤色蛍光に分光さ
れ、緑色蛍光は凸レンズ２０、緑色のみを通すバンドパ
スフィルタであるバリヤフィルタ２１及び光ファイバ２
２を介して光電検出器で検出される。また、赤色蛍光は
反射鏡１６と凸レンズ２３．赤色を通すバンドパスフィ
ルタであるバリヤフィルタ２４及び光ファイバ２５を介
して光電検出器で検出され、検体粒子の生化学的性質が
観測される。
なお１通常蛍光を選別する波長選別手段１５としては緑
赤二色のグイクロイックミラーが使用されているが１例
えば波長を連続的に分光できる分光プリズム或いは回折
格子等の波長選別手段を用いてもよい、また、反射鏡１
６は赤色のみを反射するグイクロイックミラーとしても
支障はない。
赤二色のグイクロイックミラーが使用されているが１例
えば波長を連続的に分光できる分光プリズム或いは回折
格子等の波長選別手段を用いてもよい、また、反射鏡１
６は赤色のみを反射するグイクロイックミラーとしても
支障はない。
この側方散乱光光学系においては前方散乱光光学系と同
様に、ハーフミラ−１１により反射された側方散乱光の
一部は第２のピント板２６に結像し、接眼レンズ２７を
介して観察眼ｅにより観察される。
様に、ハーフミラ−１１により反射された側方散乱光の
一部は第２のピント板２６に結像し、接眼レンズ２７を
介して観察眼ｅにより観察される。
第２のピント板２６は絞り１２と光学的に等価な位置に
配され、ピント板２６上には照準用マークが記されてい
る。従って、前方散乱光の測光光学系の照準光学系の場
合と同様に、観察者はピント板２６を観察しながら照準
用マークと流通部２とを一致させ、焦点を合わせること
により、焦点及び光軸調整を行うことができ、精度の高
い測定を可能としている。
配され、ピント板２６上には照準用マークが記されてい
る。従って、前方散乱光の測光光学系の照準光学系の場
合と同様に、観察者はピント板２６を観察しながら照準
用マークと流通部２とを一致させ、焦点を合わせること
により、焦点及び光軸調整を行うことができ、精度の高
い測定を可能としている。
第３図は他の実施例の主要部の構成を示したものであり
、側方散乱光の光軸０２上に斜設されたハーフミラ−１
１の反射側の光軸上に、順次にピント板２８．結像レン
ズ２９、ＴＶカメラ３０が配置され、ＴＶカメラ３０に
ＴＶモニタ３１が接続されている。なお、この第２の実
施例は照準光学系以外は、第１の実施例の構成と全く同
様である。
、側方散乱光の光軸０２上に斜設されたハーフミラ−１
１の反射側の光軸上に、順次にピント板２８．結像レン
ズ２９、ＴＶカメラ３０が配置され、ＴＶカメラ３０に
ＴＶモニタ３１が接続されている。なお、この第２の実
施例は照準光学系以外は、第１の実施例の構成と全く同
様である。
この場合も先の第１の実施例と同様に、ピント板２８上
に結像された流通部２とピント板２８上の照準用マーク
とが、結像レンズ２９を介してＴＶ右カメラ０により撮
影され、ＴＶモニタ３１上に流通部２の像２′と照準用
マークの像２６゜として同時に表示される。従って、こ
れらの像２°、２８”を観察することにより、更に容易
に焦点及び光軸調整を行うことができる。
に結像された流通部２とピント板２８上の照準用マーク
とが、結像レンズ２９を介してＴＶ右カメラ０により撮
影され、ＴＶモニタ３１上に流通部２の像２′と照準用
マークの像２６゜として同時に表示される。従って、こ
れらの像２°、２８”を観察することにより、更に容易
に焦点及び光軸調整を行うことができる。
また、第３図には側方散乱光側の照準光学系のみを図示
したが、前方散乱光側の照準光学系として同様の装置を
設置してもよいことは云うまでもない、更に、ハーフミ
ラ−１１を全反射鏡とし、照準光学系を測光光学系の光
路かち取り外し自在としてもよく、これは第１の実施例
の照準光学系にも適用できる。
したが、前方散乱光側の照準光学系として同様の装置を
設置してもよいことは云うまでもない、更に、ハーフミ
ラ−１１を全反射鏡とし、照準光学系を測光光学系の光
路かち取り外し自在としてもよく、これは第１の実施例
の照準光学系にも適用できる。
［発明の効果］
本発明に係る粒子解析装置は、測光光学系内に照準光学
系を設置し、照準用マーク及び流通部を肉眼或いはＴＶ
モニタによって随時に観察可能にすることにより、測光
用対物レンズの焦点及び光軸調整を容易にかつ正確に行
うことを可能とし、測定精度を向上させ、より精密な検
体試料の解析を行うことを可能としている。
系を設置し、照準用マーク及び流通部を肉眼或いはＴＶ
モニタによって随時に観察可能にすることにより、測光
用対物レンズの焦点及び光軸調整を容易にかつ正確に行
うことを可能とし、測定精度を向上させ、より精密な検
体試料の解析を行うことを可能としている。
図面は本発明に係る粒子解析装置の実施例を示すもので
あり、第１図は第１の実施例の光学系配置図、第２図は
フローセルの垂直断面図、第３図は第２の実施例の主要
部の配置図である。 符号ｌはフローセル、２は流通部、３はレーザ光源、４
は結像レンズ系、５．１０は対物レンズ、６．ＩＫはハ
ーフミラ−１７は光電検出器。 ８．２６．２８はピント板、９．２７は接眼レンズ、１
２は絞り、３０はＴＶ右カメラ３１はＴＶモニタである
。 特許出願人 キャノン株式会社 第１図 第３図
あり、第１図は第１の実施例の光学系配置図、第２図は
フローセルの垂直断面図、第３図は第２の実施例の主要
部の配置図である。 符号ｌはフローセル、２は流通部、３はレーザ光源、４
は結像レンズ系、５．１０は対物レンズ、６．ＩＫはハ
ーフミラ−１７は光電検出器。 ８．２６．２８はピント板、９．２７は接眼レンズ、１
２は絞り、３０はＴＶ右カメラ３１はＴＶモニタである
。 特許出願人 キャノン株式会社 第１図 第３図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、フローセルの流通部を流れる検体粒子に光ビームを
照射する照射光学系と、該光ビームが検体粒子によって
散乱された散乱光を測定する測光光学系とを備え、該測
光光学系内の測光用対物レンズの光路内に合焦・合軸状
態を検出する照準光学系を設けたことを特徴とする粒子
解析装置。 ２、前記照準光学系は照準用マークを記したピント板を
有する特許請求の範囲第１項に記載の粒子解析装置。 ３、前記照準光学系内に設けたピント板は、前記測光光
学系内の測光検出素子と光学的に等価な位置に配置した
特許請求の範囲第２項に記載の粒子解析装置。 ４、前記照準光学系内にＴＶカメラを備え、前記ピント
板上に記した照準用マークと前記流通部とを同時にモニ
タ上に写し出すようにした特許請求の範囲第２項に記載
の粒子解析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60136724A JPS61294333A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | 粒子解析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60136724A JPS61294333A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | 粒子解析装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61294333A true JPS61294333A (ja) | 1986-12-25 |
Family
ID=15182012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60136724A Pending JPS61294333A (ja) | 1985-06-21 | 1985-06-21 | 粒子解析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61294333A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0486747A2 (en) * | 1990-11-22 | 1992-05-27 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Flow cell mechanism in flow imaging cytometer |
-
1985
- 1985-06-21 JP JP60136724A patent/JPS61294333A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0486747A2 (en) * | 1990-11-22 | 1992-05-27 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Flow cell mechanism in flow imaging cytometer |
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