JPS61280566A - ２’−５’−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法 - Google Patents
２’−５’−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法Info
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- JPS61280566A JPS61280566A JP18287284A JP18287284A JPS61280566A JP S61280566 A JPS61280566 A JP S61280566A JP 18287284 A JP18287284 A JP 18287284A JP 18287284 A JP18287284 A JP 18287284A JP S61280566 A JPS61280566 A JP S61280566A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は２’−５’−オリゴアデニル酸（以下２−５Ａ
と略す）の免疫学的直接定量法に関する。
と略す）の免疫学的直接定量法に関する。
２−５人は）生体内でインターフェロンの作用を受けた
細胞において一％２本鎖ＲＮＡの存在下ＡＡＴＰ（アデ
ノシン３燐酸）を基質として２−５Ａ合成酵素によシ合
成される、蛋白合成阻喪活性を有する物質である。
細胞において一％２本鎖ＲＮＡの存在下ＡＡＴＰ（アデ
ノシン３燐酸）を基質として２−５Ａ合成酵素によシ合
成される、蛋白合成阻喪活性を有する物質である。
（宗用冑汗Ａ免疫薬理Ｖｏｌ、１ｍｌ Ａ １． ８０
〜８８．１９８３） この２−５人を定量することはＡイ／ターツエロン°２
−５Ａ合成＃素系の機能を解明するために駕あるいは感
染症Ｘ特にウィルス性疾患の診断においても大きな意義
を有するものと考えられ、注目されている。
〜８８．１９８３） この２−５人を定量することはＡイ／ターツエロン°２
−５Ａ合成＃素系の機能を解明するために駕あるいは感
染症Ｘ特にウィルス性疾患の診断においても大きな意義
を有するものと考えられ、注目されている。
現在一般に１２−５人は１ Ｐで放射標識した２−５Ａ
を用いる、いわゆる２ジオイムノアツセイ（以下ＲＩＡ
と略す）Ｋよって測定されている。
を用いる、いわゆる２ジオイムノアツセイ（以下ＲＩＡ
と略す）Ｋよって測定されている。
ところが生体液中）特に血液中の２−５人を定量する場
合には為共存する２−５人分解酵素の作用によ、Ｄ、２
−５Ａが急速に分解消失するため、通常のＲＩＡでは正
確な定量を行うことは困難である。そのため）血液中の
２−５Ａの定量は飄臨床的に大きな意義を有するのくも
かかわらず）正確な翫信頼できる定量法は確立されてい
ない、二三の文献には（Ｎａｔｕｒｅ Ｖｏｌ、 ２８
８ ％ ＪＩ６１３−＋１８９−１９２ ： １９８０
．Ｊ＊ｏｆ ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｖｏｌ、 ２５９、屋３、１７２７−１７３０：１
９８４）２−５Ａの定量に関する記■が有るが、これら
の方法で血液中の２−５Ａの定量を行った場合には、２
−５Ａ分解酵素の影響を避ける手段が講じられていない
ため正確な定量を望めなかったり、あるいは、その影響
を避は得たとしても、抽出等の操作を要するため手技が
繁雑なものとなっていた。
合には為共存する２−５人分解酵素の作用によ、Ｄ、２
−５Ａが急速に分解消失するため、通常のＲＩＡでは正
確な定量を行うことは困難である。そのため）血液中の
２−５Ａの定量は飄臨床的に大きな意義を有するのくも
かかわらず）正確な翫信頼できる定量法は確立されてい
ない、二三の文献には（Ｎａｔｕｒｅ Ｖｏｌ、 ２８
８ ％ ＪＩ６１３−＋１８９−１９２ ： １９８０
．Ｊ＊ｏｆ ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｖｏｌ、 ２５９、屋３、１７２７−１７３０：１
９８４）２−５Ａの定量に関する記■が有るが、これら
の方法で血液中の２−５Ａの定量を行った場合には、２
−５Ａ分解酵素の影響を避ける手段が講じられていない
ため正確な定量を望めなかったり、あるいは、その影響
を避は得たとしても、抽出等の操作を要するため手技が
繁雑なものとなっていた。
本発明は、上記のような特別な操作を要しない、簡便で
、かつ十分に２−５Ａの分解消失を抑え得る２−５Ａの
免疫学的直接定量法の提供を目的としている。
、かつ十分に２−５Ａの分解消失を抑え得る２−５Ａの
免疫学的直接定量法の提供を目的としている。
本発明は、生体試料中の２−５Ａの免疫学的直接定量法
において、予め試料にエチレンジアミン４酢酸塩（以下
ＦＸＤＴＡと略す）を添加し、該試料を金属イオンの存
在下で抗２−５Ａ４Ｉ異抗体と反応させることを特徴と
する、２−５Ａの免疫学的直接定量法である。
において、予め試料にエチレンジアミン４酢酸塩（以下
ＦＸＤＴＡと略す）を添加し、該試料を金属イオンの存
在下で抗２−５Ａ４Ｉ異抗体と反応させることを特徴と
する、２−５Ａの免疫学的直接定量法である。
上記ＥＤＴＡとしては、ナトリウム塩、カリウム塩等が
挙げられる。又その添加量は、試料１ｍｌ当シ１〜５′
！ｑの範囲で用いることができるが、特に２可程度が好
ましい。
挙げられる。又その添加量は、試料１ｍｌ当シ１〜５′
！ｑの範囲で用いることができるが、特に２可程度が好
ましい。
又、その添加方法としては、試料採取後できるだけ早く
添加することが好ましく、たとえば、試料採取用容器に
必要量を予め充填してかくと、試料の採取とＫＤＴＡと
の混和を、はぼ同時に行なうことができるので便利であ
る。
添加することが好ましく、たとえば、試料採取用容器に
必要量を予め充填してかくと、試料の採取とＫＤＴＡと
の混和を、はぼ同時に行なうことができるので便利であ
る。
又、ＥＤＴＡの効果を・よｐ確実なものとするために、
検体試料の希釈が必要な場合には、この希釈操作に用い
る希釈溶液にもＫＤＴＡを含有させることが好ましい。
検体試料の希釈が必要な場合には、この希釈操作に用い
る希釈溶液にもＫＤＴＡを含有させることが好ましい。
次に金属イオンとしては、マグネシウムを塩化マグネシ
ウムとして用いるのが有利でちるが、他の金属イオンを
利用することも可能である。又その添加量は、上記ＥＤ
ＴＡの使用量によって左右されるが、ＫＤＴＡの使用量
が試料１ｍｌ当シ、１〜５■の範囲であれば、反応液１
ｍｌ当シ、塩化マグネシウムとして０．６ ｍ！程度で
、十分本発明の効果を奏し得る。
ウムとして用いるのが有利でちるが、他の金属イオンを
利用することも可能である。又その添加量は、上記ＥＤ
ＴＡの使用量によって左右されるが、ＫＤＴＡの使用量
が試料１ｍｌ当シ、１〜５■の範囲であれば、反応液１
ｍｌ当シ、塩化マグネシウムとして０．６ ｍ！程度で
、十分本発明の効果を奏し得る。
本発明Ｋ＞けるＥＤ’ｒ人は、２−５人分解酵素の活性
を阻害する目的で使用するものである。金属イオン依存
性の酵素の存在は古くから知られて訃シ、又それらが、
ＫＤＴＡ等のキレート化剤の作用による阻害を受けるこ
とは公知の事実である。
を阻害する目的で使用するものである。金属イオン依存
性の酵素の存在は古くから知られて訃シ、又それらが、
ＫＤＴＡ等のキレート化剤の作用による阻害を受けるこ
とは公知の事実である。
しかし、本発明においては、２−５Ａを免疫学的に直接
定量するため、ＥＤＴＡを単独で酵素阻害剤として用い
た・場合後述の実施例に示すとおり、過剰のＥＤＴＡが
免疫反応に影響を及ぼすので、免疫学的直接定量法にこ
れを使用することは困難である。
定量するため、ＥＤＴＡを単独で酵素阻害剤として用い
た・場合後述の実施例に示すとおり、過剰のＥＤＴＡが
免疫反応に影響を及ぼすので、免疫学的直接定量法にこ
れを使用することは困難である。
そこで、本発明では反応液中にマグネシウム等金属イオ
ンを存在させ、過剰のＩＤＴＡの影響を除去しているの
である。
ンを存在させ、過剰のＩＤＴＡの影響を除去しているの
である。
以下実施例に基いて、本発明を更に具体的に説明する。
Ｌ ＥＤＴＡＫよる２−５Ａ分解消失の抑制ヘパリン
採取時にＦＸＤＴＡを添加した血液よ）得られた前葉中
の２−５人濃度を定量し、ＥＤＴＡの２−５Ａ分解消失
抑制能を調べた。
採取時にＦＸＤＴＡを添加した血液よ）得られた前葉中
の２−５人濃度を定量し、ＥＤＴＡの２−５Ａ分解消失
抑制能を調べた。
０．１．２．４．および８キのエチレンシアζン４・・
酢酸−２ナトリクム（以下Ｅ Ｄ Ｔ Ａ −２Ｎａと
略す）の入った試験管く異なる３種のヘパリン血液検体
Ａ、Ｂ、及びＣを２−ずつ加えて混和し、冷却遠心して
血漿検体とした。この血漿検体及び、正常ヒト血漿をチ
ャコール処理して、２−５Ａツリーとしたものに２−５
Ａを添加して調製した２−５Ａｌｊ［重液について、以
下に述べる方法によｐＲＩＡを行った。
酢酸−２ナトリクム（以下Ｅ Ｄ Ｔ Ａ −２Ｎａと
略す）の入った試験管く異なる３種のヘパリン血液検体
Ａ、Ｂ、及びＣを２−ずつ加えて混和し、冷却遠心して
血漿検体とした。この血漿検体及び、正常ヒト血漿をチ
ャコール処理して、２−５Ａツリーとしたものに２−５
Ａを添加して調製した２−５Ａｌｊ［重液について、以
下に述べる方法によｐＲＩＡを行った。
採血後３時間の血漿検体を、０．２５％子牛血清アルブ
ミン（以下ＢＳＡと略す）訃よびＯ８５％ＥＤ Ｔ Ａ
２− Ｎａを含む０．０５Ｍリン酸緩衝液（以下ＰＢ
Ｓと略す）で１０倍希釈した血漿検体溶液１００μｔ（
又は標準液１００μｔ）と、 ■標識２−５Ａ溶液１
０．Ｏｓ！、 （１５０００ｃｐｎ ）を混和し、これ
に抗２゜−５Ａ家兎血清２００ｕ を加えて、室温で一
墨夜抗厘一抗体反応を行わせた。（第１反応） 得られた反応液に抗家兎ｒ−グロブリン山羊血清１００
ａを加えて一晩放置した後ＩＥ２反応）、３０００ｒｐ
ｎ２０分間遠心分離を行い、得られた沈殿部分の放射能
量を計測した。標準液の計測結果よシ、′ｓ準凹曲線作
製し、これから血漿検体中の２−５Ａ量を求めた。
ミン（以下ＢＳＡと略す）訃よびＯ８５％ＥＤ Ｔ Ａ
２− Ｎａを含む０．０５Ｍリン酸緩衝液（以下ＰＢ
Ｓと略す）で１０倍希釈した血漿検体溶液１００μｔ（
又は標準液１００μｔ）と、 ■標識２−５Ａ溶液１
０．Ｏｓ！、 （１５０００ｃｐｎ ）を混和し、これ
に抗２゜−５Ａ家兎血清２００ｕ を加えて、室温で一
墨夜抗厘一抗体反応を行わせた。（第１反応） 得られた反応液に抗家兎ｒ−グロブリン山羊血清１００
ａを加えて一晩放置した後ＩＥ２反応）、３０００ｒｐ
ｎ２０分間遠心分離を行い、得られた沈殿部分の放射能
量を計測した。標準液の計測結果よシ、′ｓ準凹曲線作
製し、これから血漿検体中の２−５Ａ量を求めた。
尚、抗２−５Ａ特異家兎血清は、５’−）！ｊホスホ（
アデニリル２Ｊ−５１１） アデノシンにキャリア蛋
白としてＵＳＡを結合させて得られた物質を免疫原とし
、常法に準じて家兎に免疫して得られた抗Ｊｊｌ［ｆ原
１１ｔ−０，２５’ＩＢ ＳＡト、１ ％ＩＥ’＊家見
血清家舎血清、０５ＭＰＢ Ｓ （ＰＨ８，０）で１０
０００倍に希釈したものを用いた。
アデニリル２Ｊ−５１１） アデノシンにキャリア蛋
白としてＵＳＡを結合させて得られた物質を免疫原とし
、常法に準じて家兎に免疫して得られた抗Ｊｊｌ［ｆ原
１１ｔ−０，２５’ＩＢ ＳＡト、１ ％ＩＥ’＊家見
血清家舎血清、０５ＭＰＢ Ｓ （ＰＨ８，０）で１０
０００倍に希釈したものを用いた。
又、抗家兎ｒ−グロブリン山羊血清は市販のものを、
Ｉ［識２−５Ａは２−５Ａにアクニル−チロシン基を導
入し、該チロシンを ｘｓｍしたものを用いた。 １標
［１１！２−５ Ａ／）製法については、本出願人が先
に出願の特許願「新規２１ｍｌ５１オリゴアデニル酸化
合物、その製造方法、及びその化合物から成る放射免疫
化学的測定方法による２′−５′オリゴアデニル酸測定
用の ｌ１ｌｌｌ用抗原、」Ｋ詳細な説明があるので、
そちらを参考にされたい。
Ｉ［識２−５Ａは２−５Ａにアクニル−チロシン基を導
入し、該チロシンを ｘｓｍしたものを用いた。 １標
［１１！２−５ Ａ／）製法については、本出願人が先
に出願の特許願「新規２１ｍｌ５１オリゴアデニル酸化
合物、その製造方法、及びその化合物から成る放射免疫
化学的測定方法による２′−５′オリゴアデニル酸測定
用の ｌ１ｌｌｌ用抗原、」Ｋ詳細な説明があるので、
そちらを参考にされたい。
以上の方法で行った２−５人の定量値を第１表に示す。
尚表中、ＥＤＴＡ−’２Ｎａ添加量は血液１ｍｌ当シの
キ数で、２−５Ａ量は、血漿検体１１Ｒｔ当シのｎ？数
を示す。
キ数で、２−５Ａ量は、血漿検体１１Ｒｔ当シのｎ？数
を示す。
第 １１！２
血液１ｍｌあた）２？ツのＥＤＴＡ２Ｎａを加えれば２
−５人が十分に安定であることがわかる。
−５人が十分に安定であることがわかる。
Ｌ ＥＤＴＡの抗厚−抗体反応に及はす影響異なる５
りの血液各々について、血液１１Ｒｔ当シ２〜１０１１
１ＯＥＤＴＡ−２Ｎａを添加し、実施例１と同様の方法
で、２−５Ａの定量を行い、試料中のＥＤＴＡが測定値
に及ぼす影響を調べ九。
りの血液各々について、血液１１Ｒｔ当シ２〜１０１１
１ＯＥＤＴＡ−２Ｎａを添加し、実施例１と同様の方法
で、２−５Ａの定量を行い、試料中のＥＤＴＡが測定値
に及ぼす影響を調べ九。
第１図はその結果を示すもので、ＥＤＴＡ−２Ｎｍ濃度
が上昇する釦従い１、抗、［抗体結合率が低下している
。
が上昇する釦従い１、抗、［抗体結合率が低下している
。
これは、試料中のＥＤＴＡ濃度が上昇することにより、
２−５Ａの定量値が実際の値よシも大きくなっていくこ
とを表している。
２−５Ａの定量値が実際の値よシも大きくなっていくこ
とを表している。
λ マグネシウムの添加によるＥＤＴＡの影響の除去
実施例１．０第１反応時において、塩化マグネシウムの
添加によるＥＤＴＡ−２Ｎａの影響の除去効果について
調べた。
添加によるＥＤＴＡ−２Ｎａの影響の除去効果について
調べた。
第２図に示すとお〕、反応液４００μを当シ、２５０ａ
ｇ−（０，６２５＊／ ｍｌ ）の塩化マグネシウムが
存在すれば、血液試料中のＥＤＴＡ２Ｎａが１〜５岬／
１ｍｌ＠血液の範囲で変動しても、その定量値に及ばず
影響は無視し得るものであった。
ｇ−（０，６２５＊／ ｍｌ ）の塩化マグネシウムが
存在すれば、血液試料中のＥＤＴＡ２Ｎａが１〜５岬／
１ｍｌ＠血液の範囲で変動しても、その定量値に及ばず
影響は無視し得るものであった。
本発明において、ＥＤＴＡは、実施例りで述べたとおシ
抗原−抗体反応を室温で行った場合でも、２−５Ａの酵
素的分解を最小限度に抑える効果を有する。
抗原−抗体反応を室温で行った場合でも、２−５Ａの酵
素的分解を最小限度に抑える効果を有する。
これは、実施例１．において、ＥＤＴ人２Ｎｍ無添加対
照区の２−５人実測値が、３検体とも０．１ｗ／ゴ・血
漿検体以下であるのに対し、ＥＤＴＡ−２Ｎａを血液１
ｍｇ当シ１１ｑ以上添加した区では検体Ａ、Ｂ、Ｃ，の
２−５人定量値が各々１゜９２１．８０ １．４０ｙ／
ｍｔ−血漿検体前後であることから明らかである。
照区の２−５人実測値が、３検体とも０．１ｗ／ゴ・血
漿検体以下であるのに対し、ＥＤＴＡ−２Ｎａを血液１
ｍｇ当シ１１ｑ以上添加した区では検体Ａ、Ｂ、Ｃ，の
２−５人定量値が各々１゜９２１．８０ １．４０ｙ／
ｍｔ−血漿検体前後であることから明らかである。
ここで注目すべきことは、ＥＤＴＡ無添加対照区の血漿
検体における２−５人定量値が、その１０倍希釈時に希
釈用緩衝液にＥＤＴＡが含有されているＫもかかわらず
異常に低くなりていることである。これは血液を採取し
てから血漿を分離−希釈するまでの間に２−５人の大部
分が分解消失してしまりことを示しておｊＤ、ＥＤＴＡ
添加の重要性が、このことからも明らかである。
検体における２−５人定量値が、その１０倍希釈時に希
釈用緩衝液にＥＤＴＡが含有されているＫもかかわらず
異常に低くなりていることである。これは血液を採取し
てから血漿を分離−希釈するまでの間に２−５人の大部
分が分解消失してしまりことを示しておｊＤ、ＥＤＴＡ
添加の重要性が、このことからも明らかである。
又、本発明において、マグネシウム等金属イオンの添加
は、実施例λで示したようなＥＤＴＡ添加による抗原−
抗体結合率の低下を抑え、正確な２−５Ａの定量を可能
にする。
は、実施例λで示したようなＥＤＴＡ添加による抗原−
抗体結合率の低下を抑え、正確な２−５Ａの定量を可能
にする。
又、実施例３．から明らかなように１反応９４００声を
中に塩化マグネシウムが２５０μｇ存在すれべ被検試料
中の過剰のＥＤＴＡの影響を無視し得る１Ａ度に抑え得
るものである。
中に塩化マグネシウムが２５０μｇ存在すれべ被検試料
中の過剰のＥＤＴＡの影響を無視し得る１Ａ度に抑え得
るものである。
以上述べたとおシ、本発明によれば２−５人の酵素的分
解消失を定量値に影響を与えることなく抑制することが
でき、かつ従来必要とされていた抽出操作を不要とした
ので、よシ簡便な手技くよＪ、２−５Ａの免疫学的直接
定量を行うことが可能である。
解消失を定量値に影響を与えることなく抑制することが
でき、かつ従来必要とされていた抽出操作を不要とした
ので、よシ簡便な手技くよＪ、２−５Ａの免疫学的直接
定量を行うことが可能である。
又、本発明は、実施例に開示し九ＲＩＡのみならず、ク
ジオパインデイングアクセイ、あるいは酵素イムノアッ
セイ等地の免疫学的直接定量法にも応用が可能であると
考えられ、適用範囲の広い、非常に有用な技術であると
いえる。
ジオパインデイングアクセイ、あるいは酵素イムノアッ
セイ等地の免疫学的直接定量法にも応用が可能であると
考えられ、適用範囲の広い、非常に有用な技術であると
いえる。
第１図は、被検血液に添加したＥ Ｄ Ｔ Ａ −２Ｎ
ａ量と抗原−抗体結合率（Ｂ／Ｔ％ ）の関係管示すも
のである。 第２図は、反応液中に塩化マグネシウムを加えた場合の
、被検血液に添加したＥＤＴＡ−２Ｎａ量と抗原−抗体
結合率の関係を示し九ものである。 第１図、第２図、ともに縦軸は抗原−抗体納金１ｃ（％
）を、横縦は血液１ｍｌ当シのＥＤＴＡ添加量（Ｗ）を
表す。 又、ｆｓ２図中の塩化マグネシウムの量は、反応液４０
０ｔｓＬに含まれる量（稽）として表示した。
ａ量と抗原−抗体結合率（Ｂ／Ｔ％ ）の関係管示すも
のである。 第２図は、反応液中に塩化マグネシウムを加えた場合の
、被検血液に添加したＥＤＴＡ−２Ｎａ量と抗原−抗体
結合率の関係を示し九ものである。 第１図、第２図、ともに縦軸は抗原−抗体納金１ｃ（％
）を、横縦は血液１ｍｌ当シのＥＤＴＡ添加量（Ｗ）を
表す。 又、ｆｓ２図中の塩化マグネシウムの量は、反応液４０
０ｔｓＬに含まれる量（稽）として表示した。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、生体試料中の２′−５′−オリゴアデニル酸の免疫
学的直接定量法において、予め試料にエチレンジアミン
４酢酸塩を添加し、該試料を金属イオンの存在下で抗２
′−５′−オリゴアデニル酸特異抗体と反応させること
を特徴とする２′−５′−オリゴアデニル酸の免疫学的
直接定量法。 ２、エチレンジアミン４酢酸塩がナトリウム塩であるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の２′−５
′−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法。 ３、エチレンジアミン４酢酸２ナトリウムが試料１ｍｌ
当り１〜５ｍｇの範囲で添加されることを特徴とする特
許請求の範囲第２項に記載の２′−５′−オリゴアデニ
ル酸の免疫学的直接定量法。 ４、金属イオンが、塩化マグネシウムとして添加された
マグネシウムイオンであることを特徴とする特許請求の
範囲第１項に記載の２′−５′−オリゴアデニル酸の免
疫学的直接定量法。 ５、塩化マグネシウムの量が、反応液１ｍｌ中０．６〜
１．３ｍｇであることを特徴とする特許請求の範囲第４
項に記載の２′−５′−オリゴアデニル酸の免疫学的直
接定量法。 ６、免疫学的直接定量法が、ラジオイムノアッセイであ
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の２′
−５′−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18287284A JPS61280566A (ja) | 1984-09-03 | 1984-09-03 | ２’−５’−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18287284A JPS61280566A (ja) | 1984-09-03 | 1984-09-03 | ２’−５’−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61280566A true JPS61280566A (ja) | 1986-12-11 |
| JPH0570109B2 JPH0570109B2 (ja) | 1993-10-04 |
Family
ID=16125901
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18287284A Granted JPS61280566A (ja) | 1984-09-03 | 1984-09-03 | ２’−５’−オリゴアデニル酸の免疫学的直接定量法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61280566A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010054516A (ja) * | 2002-11-18 | 2010-03-11 | Denka Seiken Co Ltd | 血清および血漿の測定値乖離を防止する免疫測定法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS4971133A (ja) * | 1972-10-13 | 1974-07-10 | ||
| JPS5446828A (en) * | 1977-09-20 | 1979-04-13 | Eisai Co Ltd | Reagent for detection of ursodesoxycholic acid and its preparation |
| JPS57208459A (en) * | 1981-06-19 | 1982-12-21 | Eisai Co Ltd | Measuring method using enzyme-labelled antibody and reagent |
-
1984
- 1984-09-03 JP JP18287284A patent/JPS61280566A/ja active Granted
Patent Citations (3)
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| JP2010054516A (ja) * | 2002-11-18 | 2010-03-11 | Denka Seiken Co Ltd | 血清および血漿の測定値乖離を防止する免疫測定法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0570109B2 (ja) | 1993-10-04 |
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |