JPS6125488A - 抗生物質ｔａｎ−５８５ｃ，ｔａｎ−５８５ｄおよびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＪＬＬいａ牲肛盆Ｒ 本発明は主としてグフム陰性菌に対して抗菌力を示す抗
生物質ＴＡＮ−５８５ＣおよびＴＡＮ−５８５Ｄに関す
るものである。

従来の技術 本発明の抗生物質の性状に比較的類似すると思われる既
知抗生物質として、ザ・ジャーナル・オグ、アンティビ
オティックス（Ｔｈｅ　　Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃｓ）　、　ＸＸＩＸ　、　４９２〜５０
０（１９７６）に記載のノカルジシンＡが挙げられる。

発明が解決しようとする問題点 本発明は新規で有用な抗生物質を提供することを目的と
するものである。

問題点を解決する丸めの手段 そこで、本発明者らは多数の微生物を土壌よシ分離した
ところ、ある種の微生物が新規な抗生物質を産生ずるこ
と、°該微生物が７Ｖキシバクター属に属すること、該
微生物を適宜の培地に培養することによって主としてグ
フム陰性菌に対して抗菌力を示す２種の抗生物質を培地
中に蓄積しうろことなどを知り、これらの抗生物質を単
離し、物理化学的および生物学的諸性質から、当該抗生
物質がいずれも新規な抗生物質であることを確かめ。

これらをＴＡＮ−５８５ＡおよびＢと称することにした
（特願昭５９−１００７５４号）。

本発明者らはさらに培養液中の他の有効成分を検察した
ところ、さらに２成分が培養液中に存在することを知シ
、これらを単離し、ＴＡＮ−６８５０およびＤと命名し
た。さらに、抗生物質ＴＡＮ−５８６Ｃ１たはＤ紘抗生
物質’ｆ’ＡＮ−５８６Ａ電Ｐ乍 またはＢ　　　　　／Ｉ’クロニデースによる酵素反応
に付す事によっても得られる事実が判明し九。

本発明者らは、これらの知見に基づいてさらに研究を重
ねた結果、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、１）抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃお
よびり、またはこれらの塩、２）７レキシパクター属に
属する抗生物質’ｌ’ＡＮ−５８５Ｃおよび（を九は）
Ｄ生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物質ＴＡＮ−
５８５Ｇおよび（または）Ｄを生成蓄積せしめ、これを
採取することを特徴とする抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃお
よび（または）Ｄｆ７）ｉｌｌ造法、ならびにａ）抗生
物質ＴｔＮ−５８５ＡまたはＢをβ°−グルクリニデー
ヌで処理し、抗生物質ＴＡＮ−５８５Ａから抗生物質Ｔ
Ａ）ｆ−５８５Ｃを、抗生物質ＴＡＮ−５８５１１から
抗生物質ＴｔＮ−５８５Ｄを生成せしめることを特徴と
する抗生物質ＴＡＮ−５８５ＣまたはＤの製造法、であ
る。

なお、家駅明細書では抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃおよび
ＴＡｗ−：５ｓ５ｐを単に「ＴＡＮ−６８５」と称する
こともある。

本発明で使用される抗生物質Ｔ＊Ｎ−５８５生産菌とし
ては、７レキシパクター（Ｆｌｓｘｉｂａｃｔｅｒ）馬
に属し、抗生物質ＴＡＮ−５８５を産生ずる能力を有す
るものであれば如何なる微生物でもよい。

抗生物質Ｔ　Ａ　Ｈ−６’８６生産菌の例としては。

たとえば本発明者らＫよって奈良県吉野郡吉野山の土壌
より採取したフレキリバクター・アμギノリケ７アシエ
ンスＹＫ−４９株（以下、「ｙｘ−４９株」と略称する
こともある。）があげられる、ＹＫ−４９株の菌学的性
状は下記のとお夛である。

（ａ）形　態 肉汁寒天斜面上で２４℃、２日間培養後の観察では、細
胞は直径０．４〜０．’Ｉ／１ｍ、通常長さ２〜１０μ
ｍの細長い桿状を示すが、まれに５０〜７０μｍのフィ
ラメント状を呈することもあるつ鞭毛を有さない。グフ
イデイングによゐ運動性を有する。胞子やミクロシスト
を形成せず、またダラム染色は陰性で、抗酸性を示さな
い。

（ｂ）各種培地上での生育状態 ２４℃で培養し、ｌないし１４日間にわたって観察した
。

■肉汁寒天平板培養二円形）凸円状、金縁の集落を形成
する。表面は平滑、半透明、白色〜クリーム色を呈する
。拡散性色素は生成しない。

■肉汁寒天斜面培養：拡布状の良好な生育を示し、光沢
のある淡褐色を呈する。

■肉汁液体培養：混濁状に生育し、少量の沈殿を生じ、
弱い内環を形成する。

■肉汁ゼラチン穿刺培養：生育は弱い。

■リドマス・ミルク・ペプトン化Ｆｉ凝陽性、下部の白
澗が認められ、脱色が紹められるが、酸の生成および凝
固は認められない。

（ｃ）生理的性質 ■硝酸塩の還元：陰性 ■脱窒反Ｆ３：陰性 ■ＭＲ（メチルレッド）テヌト：陰性 ■ｖｐ（７ｔ−ゲス・グロスカウエ／Ｉ／）テスト：陰
性 ■インドールの生ｖｉ：、：陰性 ■硫化水素の生成：陰性 ■デンプンの加水分解：陽性 ■クエン酸の利用：陽性 ■無機窒素源の利用 ｉ）硝酸力１ウム：陰性 ｕ／）Ｗｔｅアンモニウム：擬陽性 ［相］色素の生成（キングＡ、キングＰおよびマンニア
）酵母エキス寒天の各培地）：可溶性色素を生成しない
。

■ウレアーゼ：陰性 ■オキシダーゼ：陽性 ［相］カタフーゼ：陽性 ■生育の範囲 ｉ）　ｐＢ　　：ｐＥ［４，９〜８．５で生育するが、
最適ｐｉｌｌは５．４〜６６６゜ ｉｉ）温度二６〜８５℃で生育するが最適温度は１４〜
８１℃。

［相］酸素に対する態度：好気的 ＠　ｏ　−Ｆ　（オキシダティブー７アーメンタテイグ
）テスト〔ヒユー・レイフソン（Ｈｕｇｈ−Ｌｅ　ｉ　
ｆ　ｓ　ｏｎ　）法〕：非非分梨 型糖からの酸およびガスの生成： 酸　　　　ガス　　　　利用性 （ベグトン水）　　　　　　（デービス培地）Ｌ−アラ
ビノース　　　±　　　　　−＋Ｄ−キシロース　　−
−＋ Ｄ−グルコース　　±　　　　　　　　　　＋Ｄ−マン
・ノース　　　＋　　　　　　　　　　　　　　＋Ｄ−
７フクトース　　　−−＋ Ｄ−ガラクトース　　　−　　　　　　　　　　　　　
＋麦　　芽　　糖　　　−＋ シ　　　ッ　　　糖　　　−＋ 乳　１−　　　＋ ト　レバロース　　　−−＋ Ｄ−ソルビット　　　−　　　　　−−Ｄ−マンニット
　　−　　　　　　　　　　＋イノシフ　ト　　−−− グリセリ　ン　　−　　　　　　　　　＋デンプン　−
　　　　　　＋ ［相］多糖類の分解：寒天、セルロース、カルボキシメ
チルセルロースおよびコロイダル・キチンを分解しない
。アルギン酸を分解する。

［相］０％食塩の肉汁液体培ｌＩ：生育する。

＠５％食塩の肉汁液体培養：生育しない。

以上の菌学的性質を有するＹＫ−４９株を、パーシーズ
・マニュアル・オグ・デターミナテイプ・バクテリオロ
ジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　　ｏｆＤｅｔ
ｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　
）第８版およびインターナシ目ナル・ジャーナル・オプ
・システマチック・バクテリオロジー（Ｉｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ　　ｏｆ　　Ｓｙｓｔｅｍ
ａｔｉｃ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）第ａＯ巻２
１５〜４２０頁（１９８０年）、同第３２巻１４６〜１
４９頁（１９８２年）の記載と照合して、桿状ないしフ
イフメント状のダラム陰性菌で、ミクロシストの形成能
がなくグフイディングによる運動性を示し、寒天、セル
ロース、カルボキシメチルセルロースおよびコロイダρ
・キチンのいずれをも分解せず、食塩の要求性がなく、
食塩に耐性を示さないことから７レキシパクター属に属
するとするのが妥当である。そこでＹＫ−４９株を７レ
キシパクター属の公知の種と比較したところ、次のよう
なＹＫ−４９株の性質、すなわち、１）オキンダテイプ
・７フーメンタテイプテストが非分解型で、２）アルギ
ン酸の分解能を有するなどの点で公知の種と異なってい
た。そこで１本菌を新菌種に属する株であると認め、該
新菌種ヲ７レキシパクター・アルギノリケファシエンス
（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ　　ａ１ｇｉｎｏｌｉｑｕｅ
ｆａｃ４ａｎｓ　）と命名した。

なお、本菌株は、昭和５９年２月２８日から通商産業省
工業技術院微生物工業技術研究所（ＦＲｌ）Ｋ受託番号
ＦＥＲＭ　　Ｐ−７４８４として、また昭和５９年２月
２０日から財団法人発酵研究所にＩＰ、０　１４ａ２１
としてそれぞれ寄託されている。

本発明に用いられるフレキシバクターｍ細菌は一般にそ
の性状が変化しゃすく、たとえば紫外線。

ｘ＃ｌ、化学薬品にトロソグアニジン、エチルメタンス
ルホン酸）などを用いる人工変異手段で容易に変異しう
るものであり、どの様な変異株であっても本発明の対象
とするＴＡＮ−５８５の生産能を有するものはすべて本
発明に使用することができる。

ＴＡＮ−５８５生産菌の培養に際しては、炭素源として
は、たとえばグルコース、シラ糖、麦芽糖、廃糖蜜、グ
リセロール、油脂類Ｃ例、大豆油。

オリーブ油など）、有機酸類（例、クエン酸、コハク酸
、グルコン酸など）など菌が資化しうるものが適宜用い
られる。窒素源としては、たとえば大豆粉、綿実粉、コ
ーン・ステイープ・リカー。

乾燥酵母、＃母エキス、肉エキス、ペプトン、尿素、硫
酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、塩化アンモニウム
、リン酸アンモニウムなどの有機窒素化合物や無機窒素
化合物が利用できる。また、無機塩としては、たとえば
塩化ナトリウム、塩化カリウム、炭酸カルシウム、硫酸
マグネシウム。

リン酸−カリウム、リン酸二ナトリウムなどの通常細菌
の培養に必要な無機塩類が単独もしくは適宜、組合せて
使用される。

また、硫酸第１鉄、硫酸銅などの重金ｍ類、ビタミンＢ
ｌ、ビオチンなどのビタミン類なども必要に応じ′″Ｃ
Ｃ添加る。さらにンリコーンオイルやポリアルキレング
リコールエーテルなどの消泡剤や界面活性剤を培地に添
加してもよい。その池内の発育を助け、ＴＡＮ−５８５
の生〃を促進するような有機物や無機物を適宜に添加し
てもよい。

培養方法としては、一般の抗生物質の生産方法と同様に
行なえばよく、固体培養でも液体培養でもよく、液体培
養の場合は静置培養、攪拌培養。

振盪培養９通気培養などいずれを実施してもよいがとく
に通気撹拌培養が好ましい。又培養温度はおよそ１５℃
〜８５℃の範囲が好ましく、培地のｐＨは約４〜８の範
囲でおよそ８時開〜１６８時間、好ましくは２４時間〜
１４４時間培養する。

培養物から目的とする抗生物質ＴＡＮ−５８５を採取す
るＫは微生物の生産する代謝物をその微生物の培養物か
ら採取するのに通常使用される分離手段が適宜利用され
る。たとえば抗生物質ＴＡＮ−５８５は、水溶性酸性物
質としての化学的性状を示し、主とじて培養ｐ液中に含
まれるので、まず培養液に一過補助剤を加えて濾過ある
いは遠心分離によって、菌体を除去し、得られた培養炉
液を適宜の担体に接触させて炉液中の有効成分を吸着さ
せ、次いで適宜の溶媒で有効物質を脱着させ、分別採取
する手段が有利に利用される。クロマトグツフィーの担
体としては活性炭、シリカゲル、粉末セルロース、吸着
性樹脂など化合物の吸着性の差を利用、または陰イオン
交換樹脂、陰イオン交換セルロースなど化合物の官能基
の差を利用、あるいは分子ふるい性担体類など化合物の
分子量の差を利用するものが有利に用いられる。これら
担体から目的とする化合物を溶出するためには担体の種
類、性質によって組み合せが異なるが、たとえば水溶性
有機溶媒の含水溶液すなわち、含水アセトン、含水アル
コール頻々ど、あるいは酸、アルカリ、緩衝液もしくは
無機あるいは有機塩を含む水溶液などが適宜組み合わせ
て用いられる。

また、これらのクロマトグツフィーによって得られた本
抗生物質の粗物質を分取用高速液体クロマトグツフィー
に付し、さらにＭ製する事もできる。

さらに詳しく述べるならば、担体として陰イオン交換樹
脂たとえばダウエックス−１（ダウ・アンド・ケミカル
社製、米国）、アンパーフィトエＲＡ−６８，４００，
４０２，４１０（ローム・アンド・ハース社製、米国）
、ダイヤイオン８Ａ−２１ＡおよびＣ（三菱化成社製、
日本）などを用いると炉液中の本抗生物質は吸着され、
＃１類あるいは酸含有の水溶液あるいは緩衝液などで溶
出される。また陰イオン交換セルロースたとえばＤＩ−
８２（ワットマン社製、英国）、Ｉ）ＥＡＥ−セルロー
ス（ブラウン社製、西独）など、あるいは陰イオン交換
分子ふるい性樹脂たとえｉｊ　Ｄ］ＣｆＥ−６，６いは
ＱＡＥ−セフ１デツクス（７１ルマシャ社製、スウェー
デン）などの担体に本抗生物質を吸着せしめ、塩類ある
いは酸含有の水溶液あるいは緩衝液などＫよって溶出さ
せることが出来る。

これら溶出液中の塩類１着色物質などを取シ除く九めＫ
はクロマト用活性炭（武田薬品工業社製、日本）あるい
唸吸着性樹脂たとえばダイヤイオンＵＰ−２０（三費化
成社製、日本）、アンバーフィトＸＡＤ−ＩＩ（ローム
・アンド・ハーメ社製、米国）などが有利に用いられる
。分画され九溶出区分は、濃縮、凍結、乾燥などの工程
を経て、粉末化される。かくして得られた粉末の純度が
悪い場合さらに精製する九めＫは高速液体クロマトグツ
フィー法が有利に利用される。用いられる担体としては
、たとえば’ｌ’８にゲル（東洋曹達社製、日本）ＭＭ
Ｃゲル（山村化学研究新製、日本）などが挙げられ、移
動層としてはメタノ−／ｌ’あるいはアセトニトリルな
どと酸性水溶液あるいは緩衝液などとの混合液が用いら
れる。

ＴＡＮ−５８５生産菌の一つであるＹＫ−、□４９株の
培養液中に、ＴＡＮ−５８５Ａ、Ｂ、ＣおよびＤが同時
に生産された場合、これらを分離するにはＱＡＥ−セフ
ァデックスおよび分取用高速液体クロマトグツフィーに
よってそれぞれ単一成分として分離することができる。

次に、ＴＡＮ−５８５ＡからＴＡＮ−５８５Ｃを、ＴＡ
Ｎ−５８５ＢからＴＡＮ−５８５Ｄを生成せしめるため
に用いられるβ−グ〜クロニデーヌとしては、高等植物
、動物、微生物由来の公知の調製品、例えば、カタツム
リ、アオガイ、ホタテガイ、ウシ肝臓、大腸菌などから
の調製品があげられる。本酵素による処理条件は、ＴＡ
Ｎ−５８５ＡあるいはＴＡｘ−５８５Ｂ　　ｔｙに対し
て、約５００．０００−１．５００．０００フイシュマ
ン単位のβ−グルクロニデースが、用いられる。反応ｐ
Ｈは約４．５〜７．０．好ましくはｐＨ約４．５〜５．
０．反応湿度は約ａｏ−２５℃、好ましくは約８７℃９
反応時間は、用いる基質の純度等によシ異なるが１通常
１〜２０時間である。反応溶媒としては、０．０２Ｍ〜
０．０５夏の各種緩衝液が用いられる。

上記において、原料物質である抗生物質ＴＡＮ−５８５
ＡおよびＢは特願昭５９−．１００７５４号記載の製造
法、具体的には後述の参考例１で示す方法で得ることが
できる。

このようにして得られたＴＡＮ−５８５は通常精製に用
いた塩類、緩衝液中の陽イオンたとえばナトリウム、カ
リウム、リチウム、カルシウム、アンモニウムイオンな
どと結合して仁れらの塊として単離される。得られ九Ｔ
ＡＮ−５８５＃Ｌ類を遊離体として得るためには蔓米公
知の方法である活性炭あるいは陽イオ、ン交換樹脂のク
ロマトグラフィーを利用する方法が用いられる。

抗生物質ＴＡＮ−５８５は金ｍ塩および有機アミン塩を
形成する。金属塩としては、九とえばナトリウム塩、カ
リウム塩、リチウム塩、カルシウム塩などが挙げられる
。

後述の実施例２で得られたＴＡＮ−５８５Ｃモノナトリ
ウム塩の物理化学的性質はっぎのとおシである。

（１）　　外観：無色結晶 （２）　　融点：約１９０℃から徐々に分解しはじめ、
明確な融点を示さない。

（３）比旋光度：〔α）％５−７４・１°（ｃ＝０・４
１゜水中） （４）構成元素：　Ｃ，Ｈ，Ｎ、ＯおよびＨ＆（５）元
素分析値（％）：五酸化リン上で−４０’Ｃ，６時間減
圧乾燥した試料 Ｃ，５１，６±２．０ Ｈ，４，８±１．０ ｉ、ｉｏ、ｏ±１．Ｏ Ｎａ、８．６±１．０ （６）　　分子ｆｉ：８工Ｍ　Ｂ　（５ｅｃｏｎｄａｒ
ｙ　Ｉｏｎ　Ｍ２５ａ８ｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　）法
による分子イオンビークは次のとおシである。

ｍ／ｚ　　５７５（Ｍ＋Ｎａ）”　、５５ａ（Ｍ＋Ｈ）
”、５ａｌ（７）分子式：　Ｃ２４％５Ｍ＜　０１０　
Ｎａ（８）円二色性（ＣＤ）スペクトル（水中）：〔θ
）　　　　　−１２７，０００±１５．０００２２８±
２ （９）紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル（水中）（＠１図
）： ”ｍａＸ２２５±２ｎｍ（！ｉ１．．＝、４２１±４０
）λ　　２７１±２ｎｍ（１’％＝４５±５）ｍａＸ　
　　　　　　　　　　　　　ｌａｗ２、、、２７１±２
ｎｍ（Ｅｉ：＝　３７±５．肩）Ｏｏ　　赤外部吸収（
ＩＲ）スペクトルＣＫＢｒ　中）（第２図）：主な吸取
（ＣＭ） ａ６００．ａ４４０．ａ２８０．、（０４０゜２９４０
．１７８０，１７４５，１６７５゜１６２０．１５９５
，１５７０，１５２０゜１４５０．１４００，１ａ４５
，１ａｌＯ。

１２９０．１２６０，１２ａＯ，１１８０゜１１２０．
１１１５，１１０５，１０６０゜９９０、　９４０．　
９１５．　８６０゜８ａＯ，８００，７６５，７３Ｏ。

６６０、　６４０．　６１５．　５４０゜（ＩＤ　１８
Ｃ−核磁気共鳴（ＣＭＲ）スペクトル（１００ＭＨｚ、
重水中）（ｖＪａ図）：少なくとも下記のシグナルが認
められる。

１７８．０Ｈｅ）、　１７７．５６（ｓ）、　１７６．
８４（ｅ）。

１６６．９４（ａ）、　１６６．７８（ｄ）、　１６．
１．０ａ（ｓ）。

１５８．８８（ｓ）、　１８８．９２（ｓ）、　１３２
．６２（ａ）。

１ａ１．２９（ｄ）、　１２９．４６（ｓ）、　１１８
．５１（ｄ）。

１１７−８１（ｄ）、　　７５．９０（ｄ）、　　７４
．４７（ｓ）。

６８．０ａ（ｔ）、　　６ａ、６０（ａ）、　　５６．
２７（ｄ）。

５５．９８（ｔ）、　　３２．６４（ｔ）−（ただし、
ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ、　ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、　ｔ：ｔ
ｒｉｐｌｅｔを表わす） （セ）溶解性： 可溶二本、メタノール、ジメチルスルフォキサイド。

雛ｇ：酢酸エチル、クロロフォルム、アセトン。

（１３）呈色反応： 陽性：ニンヒドリン、パートン、エールリッヒ反応。

陰性：ブレイブ・リーバツク、ドラーゲンドルフ反応。

（１０安定性：１００μｇ／ｄ、水溶液中、６０℃。

８時間 ｐＨ５〜７：安定 、ｐＨａ　　　：や−不安定 ｐＨ９：不安定 （（５）薄層クロマトグツフィー：スポットフィルム。

セルロースｆ（東京化成社製） 優）高速液体クロマトグツフィー（日立社製９日本）：
担体、ＹＭＣＡ−ａ１２（山村化学研究所製１日本）、
移動層＋１０％メタノール１０．０１Ｍリン酸緩衝液（
ｐａａ−０）。

２　ｄ／　ｍｉｎ、　Ｒｔ　（ｗｉｎ）　＝　４−９（
ｆｆ）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質（ただし、
遊離体のＴＡＮ−５８５Ｃは酸性物質）次に、後述の実
施例８で得られたＴＡＮ−５８５Ｄモノナトリウム塩の
物理化学的性質はりぎのとおシである。

（１）外観：無色結晶 （２）　　融点：約２００℃から徐々に分解し、明確な
融点を示さない。

（３）　　比旋光度：　（ｇ）”、’−１８７°（ｃ＝
０．４９．　水中） （４）構成元素：ｃ、ａ、Ｎ、ｏｋよびＮａ（５）　　
元素分析値Ｃ％）二五酸化すン上４０℃、６時間減圧乾
燥した試料 →０１Ｆ Ｃ５１，３±２．０ Ｈ５，８±１．Ｏ Ｎ　　９．９±１．０ 翫　３．８±１．０ （６）分子量：　８　Ｘ　Ｍ　８　（８ｅｃｏｎｄａｒ
ｙ　Ｉｏｎ　Ｍ２５ｓ８ｐｅｃｔｒｏｍｃｔｒｙ　）法
による分子イオンビークは次のとおシである。

ｍ／ｚ　５５９（Ｍ＋Ｎａ）”　、６８７（肝１（）”
、５１５（７）分子酸二０２４　Ｎ２３　Ｎ４０ｇ　Ｈ
ａ（８）円二色４１ｃＤ）スペクトル（水中）：〔θ〕
２２８±２−１２５，０００±１５，０００（９）紫外
部吸収ＣＵｖ）スペクトル（水中）（第４図）： λ、ｎ１ＬＸ２２６±２ｎｍ（Ｅｊ、４＝４０８±４０
）１％− λ　　２７１±２ｎｍ（１４１±５） Ｉ！１ａｚ　　　　　　　　　　　　ｌａｌ−λ　　２
７７±２ｎｍ（Σｉ：　＝＝　３５±５．肩）ａＸ ＱＯ赤外部吸収（工Ｒ）スペクトル（ＫＥｒ中）（第５
図）：主な吸取（ｃＭ） ａ４００．ａ２６０．ａ０５０，２９４０゜１７４０．
１６７５，１６２０，１５２０゜１４４０．１４００，
１ａｌＯ，１２５０゜１１８５．１１０５，１０６０，
１０ａＯ。

９ａＯ，９１０ｊ　８５０．　８ａＯ。

８１０、　７’６０．　６７０．　６４０゜５８０、　
５４０．　５００゜ （１１）　　１８ｃ−核磁気共鳴（ＣＭＲ）スペクトル
（１００ＭＨｚ、重水中）（第６図）：少なくとも下記
のＶグナ〜が紹められる。

１７８−６２（ｅ）、’　１７６．８２（ｓ）、　１７
４．８８（ｓ）。

１７０−９２（ｓ）、　１６６．４９（ｄ）、　１６１
．１０（ｓ）。

１５８、ａ７（ｓ）、　１８２．９８（ｄ）、　１８１
．６９（ｄ）。

ｌａｌ、０８（ｓ）、　１２９．６２（ｓ）、　１１８
．５２（ｄ）。

１１８．１０（ｄ）、　　６８．０６（ｔ）、　　６ａ
、５ａ（ｄ）。

６８．６６（ｄ）、　　５７．１０（ｄ）、　　５６．
２２（ｄ）。

４９．１７（ｔ）、　　３２．６ａ（ｔ）。

（１２）溶解性： 可溶：水、メタノール、ジメチ〜ス／Ｉ／７オキサイド
。

難溶：酢酸エチル、クロロ７オ〜ム、アセトン。

（１ａ）呈色反応： 陽性：ニンヒドリン、パートン、エールリッヒ反応。

陰性：ブレイブ・リーパフク、ドラーゲンドルフ反応。

（Ｓ４）薄層クロマトグツフィー：スポットフィルム。

セルロースｆ（東京化我社Ｉｌｌり 価）高速液体クロマトグツフィー（日立社製９日本）：
担体、Ｙ）ＩＣＡ−ａ１２（山村化学研究所製９日本）
、移動層１１０％メクノーＩｖ７０．０ロ１ン酸緩衝液
（ｐＨａ、ｏ）。

２　ｇｌ／　ｍｉｎ、　Ｒｔ　（ｗｉｎ）　＝　５−９
（１６）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質（ただし
、遊離体のＴＡＮ−５８５Ｄは酸性物質）抗生物質ＴＡ
Ｎ−６８５Ｃお上びＤモノナトリウム塩の生物学的性状
１次のとおりである。

１）抗菌スペクトル二種々の試験菌に対し、ＳＳ。

１表のような抗菌スペクトμを示す。

（注１）培地として、バクト・アンティビオティック・
メグイウムａ（ディ７コ・ヲボ゛クトリーズ。

米国）、１７．６ｐ、バクト・イースト・エキストラク
ト（ディフコ・ラボラトリーズ、米国）；５、Ｏｆ、パ
クト・アガ〜（グイ７コ・ラボラトリーズ、米国）ｉ２
０ｇ、蒸留水；　ｔｏｏｏ胃ｌ（ｐＨ無調整）を用い、
接種菌液として約１０６コロニー・７オーミング・ユニ
ット／ｌｌ１ｔヲ用イタ。

２）β−ラクタメースに対する安定性試験シュードモナ
ス・アエルギノーサ　Ｃ−１４１（β−１ａｃｔａｍ２
５ｅ感受性株）を被検菌として、２種のβ−ラクタメー
スに対する安定性をしらべた結果を＄２表に示す。

第２表 注１）、ｌ＆ＩＬＦｉペーパー・ディスク法による阻止
円直径（Ｍ）を示す。培地：栄養寒天培地（ｐＨ７，０
）＋ベニシリナーゼ： ０．０４８　ｕｎｉ　ｔ／ｙ／　１ セファロスポリナーゼ：　０．０２５ｕｎｉｔ／ｐｇ／
※※電阻止円がないことを示す。

３）マウス感染症に対する治療効果 ＴＡＮ−５８５０ナトリウム塩の実験的マウス感染症に
おける治療効果は第３表に示すとおりであＪ）、　１ｎ
ｖｉｔｒｏの抗菌力が弱いにもかかわらず、ｉｎ　ｖｉ
ｖｏ　の効果が優れている抗生物質である。

第３表 ※　　腹腔内感染１　※※　’ｆｒｙｐｔｉｃａｅｅ　
　ｓｏｙａｇａｒ　（Ｂ　Ｂ　Ｌ　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ　Ｓｙｓｔｅｍｓ社製、米国）培地、接ｌＩＲ
菌液として１０８コロニー・フォーミング・ユニット／
ｙｘｌヲ用いた。

４）毒性試験 ＴＡＮ−６８５０七ノナトリウム塩を１１／ｋＬｊでマ
ウスに皮下投与しても急性毒性は全く認められなかった
。

これらのテ°−夕から明らかなようにＩ’ＡＮ−５８５
は主としてダラム陰性菌に対して抗菌性を示し、哺乳動
物などに毒性を示さない抗生物質であると云える。した
がってＴＡＮ−５８５はヒトおよび家畜、家きんなとの
細菌感染症の治療に用いることが出来る。

ＴＡＮ−５８５をたとえば変形菌感染症の治療薬として
用いるには、たとえばＴＡＮ−５８５を生理的食塩水に
溶解して注射剤として非経口的に皮下または筋肉内に１
〜５ｏｇｙ／ｋｙ／日・好ましくは５〜２０１１９／ｋ
ｇ／日投与する。また経口剤として、抗生物質ＴＡＮ−
５８５を乳糖と混合してカプセル剤とし、ＴＡＮ−５８
５として１〜１００ｍｙ　／　ｋｙ　／日好ましくは５
〜５ｏｗｙ／＃／日投与する。

また、本発明によって得られるＴＡＮ〜５８５は、殺菌
剤として用いることができる。たとえばＴＡＢ−５８５
をｏ、０１〜０．１Ｗ／Ｖ％の濃度で蒸留水に溶解した
液剤、またはワセリン、フッリンを基剤とし、Ｉｇあた
ｆｉＴＡＮ−５８５を０．２〜２０１ｖ、好ましくは１
〜１０ｊｌｆ含有する軟膏剤として、ヒトおよび動物の
手１足、眼、耳などの殺菌、消毒に用いることができる
。

抗生物質ＴＡＮ−５８５はまた新しい医薬品の合成中間
体としても極めて有望な化合物である。

以上述べた諸性質から抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃおよび
Ｄはモノサイクリックβ−ツクタム系抗生物質と思われ
るが、これらに属する既知抗生物質のうち物理化学的性
状が比較的類似しているものとして、ノカルジシン（Ｎ
ｏｃａｒｄｉａｉｎ　）群抗生物質が挙げられる。しか
し、抗生物質ＴＡＮ−５８５０およびＤの分子式、赤外
部吸収スペクト／Ｉ／、ＣＭＲスペクトルおよび抗菌ス
ペクトルをツカ〃ジシのそれらと比較すると明らかに異
なシ、またβ−ヲクタメースに対する安定性も大である
ことから、ＴＡＮ−５８５ＣおよびＤ＃ｉそれぞれ新規
モノサイクリックβ−ラクタム系抗生物質である。

実施例 以下に実施例をもってさらに詳細に本発明の詳細な説明
するが、これによって本発明が限定されるもので社ない
。パーセントは、特にことわ）のないかぎ＃）重量／容
ｆ１％を示す。

実施例１ 栄養寒天斜面に生育させたフレキシパクターアルギノリ
ケファ、シエンスＹＫ−４９（ＦＥＢＭＰ−７４８４＋
ＩＦＯ１４ａ２１）＋７）菌株を、グルコーヌ２％、ソ
ルプノン・スターチａ％、生大豆粉１％、コーン・ステ
イープ・リカー１％、ポリペプトン（六五栄養化学社Ｉ
Ｎ）０．５％９食塩０．８′％を含む水溶液（ｐＨ７，
０）Ｋ沈降性炭酸力Ａ１／ウム０．５％を添加した培地
５００ｇ／を含む２１容坂口７フスコに接種して、２４
℃で４８時間往復振盪培養した。この培養液全量を、上
記培地にアクトコール（消泡剤、式日薬品工業社Ｉｌｌ
り０．０５％を添加した培地１２０１を含む容量２００
１のタンクに接種し、２４℃で通気ｆｆ１１２０１／分
、１５０回転／分の条件下で４８時間培養し九。この培
養液６０４を生大豆粉２％、コーン・グルテン・ミーＩ
ｖ１％、ポリペプトン０．２％を含む水溶液（ｐＨ７，
０）に沈降性炭酸力Ａ１５／ウム０．５％、アクトス−
／Ｌ’０．０５％を添加した培地１２Ｇ（ｌを含む容量
２０００１のタンクに接種し、２４℃で、通気量１２０
０Ｊ／分、１２０ＩＱ／分の条件下で、６６時間培養し
た。培養液（１１５０１，ｐＨ５−４）をハイフロ・ヌ
ーバー・セ／Ｉ／（ジＷンズ・マンビル社製、米国）を
用いて濾過し、炉液（１２０（１）をＩＲＡ−４０２（
ＣＩ型、４０１）のカラムクロマトグラフィーに付した
。吸着された抗生物質を１．０Ｍ食塩水（４００１）で
溶出し、溶出液を活性炭のカラムクロマトグラフィー（
２０１）に付した。活性区分を８％イソ・ブタノ−〃水
（１６（１）で溶出し、溶出液を工ＲＡ−６８（Ｃ１型
、１０１）のカラムクロマトグラフィーに付した。吸着
抗菌物質を一％−，ＯＮ食塩水Ｃ″８０１〕で溶出し、
溶出液を活性炭のクロマトグラフィ−（１０１）に付し
。

脱塩操作を行った。脱塩水溶液を１．５１まで減圧低温
下濃縮し、濃縮液をＱＡＩ−セフ１デツク、ＩＡ−２５
（ｃｌ型、ａＪ）の力？Ａり１ｆｆｆ）グｆｆフィーに
付した。抗生物質を０．０５Ｍ食塩水（２１１）および
０．１Ｍ食塩水で分画溶出した。

０−０５Ｍ食塩水の画分にはＴＡＮ−５８５ＣおよびＤ
成分が含有されている。一方、０．１Ｍ食塩水の画分に
はＴＡＮ−６８５ＡおよびＢ成分が含有されている（参
考例１参照）。

０．０５１食塩水の両分を集め、活性炭（０，５１）の
カラムクロマトグラフィーに付し、８％イソ・ブタノ−
〜水で溶出した。溶出液を減圧濃縮。

凍結乾燥し、凍結乾燥品にア七トンを加えて沈澱させ、
粗物質１８ｆを得た。粗物質１０ｆを５００ＷＩｔの水
にとかし、ＩＲＡ−６８（Ｃ１型、０．５１）のカラム
クロマトグラフィーに付し、０．１Ｍ食塩水で溶出した
。溶出液を活性炭クロマトグツ７４−（３００ｇ／）で
脱塩し、ＴＡＮ−５８５ＧおよびＤを含む粗物質２．７
ｆを得た。

この粗物質をＱＡＥ−セフ１デックスＡ−２５（ＣＩ型
、０．５４りのクロマトグラフィーに付し、０．０５Ｍ
食塩水で溶出分画し、有効区分を活性炭のクロマトグラ
フィーで脱塩した。除塩水溶液を減圧濃縮後、凍結乾燥
し、その乾燥品にアセトンを加えてめ澱物を沖取した（
　４８２１１ｙ）、。

得られた粉末を分取用逆層系高速液体クロマトグラフィ
ー〔担体：ＹＭＣバック、山村化学研究所製９日本、移
動層＝８％メタノール／（１，０５Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ８）、：］に付し、有効成分子ＡＮ−５８５Ｇおよび
Ｄのピークを分取した。活性炭クロマトグラフィーでそ
れぞれを脱塩後、溶出液を濃縮した。ＴＡＮ−５８５Ｃ
は遊離体として水から結晶化され、結晶（１４ＩＩｌ）
が得られた。

’Ｉ’ＡＮ−５８５Ｄは濃縮液を凍結乾燥すると、遊離
体の粉末としてｌ０ＩＩＩ得られた。

実施例２ 後記参考例１で得たＴＡＮ−５８５Ａジナトリウム樵２
００ダを０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ４，５）２．０
０ｄＫ溶解し、スルフ１テース・タイプＨ−１（β−グ
ルクロニデース（β−グルクロニｆ’４−ｔＢＯＯフィ
ッシュマンユニ７）／ＩＩＦを含有、）、シグマ社、米
国）１・Ｏｆを加え、３７℃において２４時間振盪した
。仁の反応液にアセトン８００Ｗｔを加え、遠心分離し
て不溶物を濃縮液のｐＨを６．５に調整したのち、活性
炭のカラムクロマトグラフィー（２０ｙｔｔ）に付し、
８％イソ・ゲタノール水（１００＊／）および８％イソ
・ブタノール−Ｎ　／　１００アンモニア水（１００＊
／　）にて溶出した。溶出液を４０Ｉｌｔまで減圧濃縮
したのち、濃縮液をＱ、　Ａ　Ｅ−セフ１デックスＡ−
２５（Ｃ１型、２０ｘｌ）のカラムクロマトグラフィー
に付し、０．０５Ｍ＊塩水にて溶出分画した。

有効区分のｐＨを７，０に゛調整し九のち、活性炭のカ
ラムクロマトグラフィー（１０ｘｌ＞で脱塩した。脱塩
水溶液を減圧濃縮後、エタノ−〃を加えて結晶化させ、
ＴＡＪｆ−５８５Ｃモノナトリウム塩の結晶７５ダが得
られた。

ＴＡＮ−５８５（、モ／す）リウム塩１００ｗｇを水５
ｘｌに溶解し、０．１Ｍ塩酸にてｐＨ３，４に調整する
と、ＴＡＮ−５８５０の遊離体の結晶８６ｍ！ｊが得ら
れた。本遊離体の工ＲスペクトルＣＫＢｒ　法）（第７
図）の主要ピークは次のとおシである。

ａ４００．　　ａ２００．　　ａ０６０．　２９８０゜
２９４０、　２６２０．　１７６０．　１７４０゜１６
７０、　１６２０．　１５１０ｊ　１４５０゜１４２０
、　１４００．　１ａ５０．　１ａ００゜１２９０、　
１２６Ｇ、　　１２２０．　１１８０゜１１４５、　１
１２０．　１０６０．　１０ａ０゜９８０、　　９００
．　　８４０．　　８１０゜７４０、　　６９０．　　
６５０．　　６３５゜４０ｃＮ 実施例８ 後記参考例１で得たＴＡＨ−５８５Ｂジナトリウム塩２
００１１ｇを０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ４，５）２
００＊／に溶解し、スルフ１テース・タイプＨ−１（β
−グルクロニグースａ００フィッシュマン単位／ＩＩＩ
を含有、シグマ社、米国、−ｐ−４−ヂ）−→）１．Ｏ
ｆを加え、３７℃において１６時間振盪した。この反応
液にアセトン８００ｇ／を加え５遠心分離して不溶物を
取シ除き、上溝液を１００−まで減圧濃縮した。濃縮液
のｐＨを７．０に調整したのち、活性炭のカラムクロマ
トグラフィー（１０ｘｌ）に付し、８％イソ・ブタノー
ル水（５０譚ｔ）にて溶出した。溶出液を２０河ｌまで
減圧濃縮したのち、濃縮液をＱＡＥ−セフ１デックスＡ
−２５（Ｃ１型、１０ｒ／）のカラムクロマトグツフィ
ーに付し、０．０５１［食塩水１００＊／シよび０．Ｉ
Ｍ食樵水５０１／にて溶出分画した。有効区分のＰＨを
７．２に調整したのち、活性炭のカラムクロマトグラフ
ィー（１０νｔ）で脱塩した。

脱塩水溶液を減圧ａｍ後、エタノールを加えて結晶化さ
せ、ＴＡＮ−５８５Ｄモノナトリウム塩の結晶５９１Ｆ
が得られた。

ＴＡＮ−５８５Ｄ−ｅ／ｆ−ト’）ｔムｊｌｉ１００１
ｖを水ｆ／ｘｌニ溶解し、０．１ＮＪｌ酸にテｐＨａ　
−５に調整し、エタノールを加えて結晶化させ、ＴＡＮ
−５８５Ｄの遊離体の結晶９ａ岬が得られ九。本遊離体
の工ＲスベクＦル（ＫＢｒ法）（第８図）の主要ピーク
は次のとお）である。

ａ４００．ａ２５０．ａ０５０，２９４０゜１７４０．
１６６０，１６２０，１５９０゜１５１５．１４４０ｊ
　１４００，１ａ７０゜１ａｌＯ，１２５０，１１８０
，１１００゜１０４０．　　９１０．　　８５０．　　
８２０゜７６０、　　７４０．　　６７０．　　６４０
゜５８０ｊ　　５４０ｃＩＩＩ 参考例１ 実施例Ｉにおいて、０．１Ｍ食塩水で分［＠出へん し活性画分を集め、さらに活性炭のカラムクロマトグラ
フィーに付し、８％イソ・ブタノール水で溶出した。溶
出液を減圧濃縮、凍結乾燥し、凍結乾燥品にアセトンを
加えて粗物質ａＯ，ａｆを得た。上記と同様の方法で培
養、精製して得た粗物質５６．９９を合つして、５００
ｓｔ／の水にとがし。

再度ＱＡＥ−セフ、デフクスＡ−２５（Ｃ１型、８１）
のカラムクロマトグツフィーに付した。

０．０８Ｍ＊塩水で溶出すると、分画の前半にＴＡｗ−
５８５Ａが、後半にＴＡＮ−５８５ＡおよびＢＯ混合物
が含まれていた。それぞれを活性炭りｐマトグフフィー
で脱塩し、ＴＡｗ−５８５Ａ２２ｆとＴＡＮ−５８５Ａ
、Ｂの混合物１５．８１を得た。

この混合物を再々度ＱＡＥ−セファデックス（１，２１
）のクロマトグツフィーに付し、０．０８Ｍ食塩水で溶
出分画し、二成分の溶出液を活性炭のクロマトグラフィ
ーで脱塩した。除塩水溶液を減圧濃縮後、凍結乾燥し、
その乾燥品にアセトンを加えて沈澱物を戸数した。ＴＡ
Ｎ−５８５ＡおよびＴＡｘ−５８５Ｂジナトリウム塩の
白色粉末がそれぞれａ、７ｆおよび２．Ｏｆ得られた。

上述の方法で得られたＴＡＮ−５８５ＡおよびＢジナト
リウム塩の物理化学的性質はつぎのとお）である。

−５Ａ　Ｎ　−ＬＬ５　Ａシナトリ乞り屹（１）外観：
白色粉末 （２）　　構成元素：Ｃ，Ｈ，Ｎ、ＯおよびＮａ（３）
元素分析ｆｌ！　（％）：（五酸化リン上４０℃で６時
間減圧乾燥した試料） Ｃ４６，Ｏ±２．０ Ｈ４，９±１．Ｏ Ｎ　　７．０±１．０ Ｎａ５．６±１．０ （４）分子量：ＳＩＭＳ法による分子イオンピークは次
のとおシである。

ｍ／ｚ　　７７ａ、７５１，７２９，７０７（５）水分
含量二６．９±２％（熱天秤法）（６）分子式：　Ｃ３
０Ｈ３ａＮ４０１６　Ｎａ２（７）　　円二色性スペク
トル（水中）：〔θ〕２２８±２−９５，５００±１０
，０００（８）　　紫外部吸収スペクトル（水中）：λ
　　２２４±２ｎｍ（１１％＝８１２±ａＯ）ｆｆｌａ
Ｘ　　　　　　　　　　　　　　　ｌａＩλ　　２６９
±２　ｎｍ　（Ｅ　’％＝２５±５）ｍｌＬＸ　　　　
　　　　　　　　　　ｌａ＋＋ス　　２７７±２ｎｍ（
Ｅ’％＝２０±５．肩）ｍａｘ　　　　　　　　　　　
　　　ｌ傷（９）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム
錠による主な吸収（波数）は次のとおシである。

ａ４ａＯ，３２８０ｊ　２９５０，１７６０゜１ｅ２ｏ
、１６１５，１４０５．ｔａｏｏ。

１２４０．１１８０，１１１０，１０６５゜１０２”５
．　９５０．　８８Ｏ，７６０゜６００、　５８５３ ０ｔ）　　１８Ｇ−核磁気共鳴（ＣＭＲ）スペクトル（
１００ＭＨｚ　、重水中）：少なくとも下記のシグナル
が認められる。

１８８−４６（ｓ）、　１７８．０９（ｓ）、　　１７
７．６０（ｓ）。

１７６−８８（ｓ）、　１６６．９６（ｓ）、　１６６
．７５（ｄ）。

１６１．０Ｈｓ）ｊ１５９．４７（ｓ）、　１ａａ−９
５（ａ）。

１８２．５４（ｄ、Ｘ２）、　１ａ２．４３（ｓ）。

１ａ１．ａａ（ｄ、Ｘ２）、　１１９．８９（ｄ、ｘ２
）。

１１７．８５（ｄ、Ｘ２）、　　１０ａ、１１（ｄ）。

７ｇ、９９（ｄ）、　　７８．１７（ｄ）、　　７５．
９５（ｄ）。

７５．５９（ｄ）、　　７４．５８（ｄ）、　　７４．
５３（ｅ）。

絽、０７（ｔ）、　　６３．５７（ｄ）、　　５６．２
２ｒａ）。

５６．０５ｒｔ）、　　ａ２−６４（ｔ）ｐｐｍ（ただ
し、ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ、　ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、　ｔ
：ｔｒｉｐｌｅｔを表わす） （ｎ）溶解性： 可溶：水、ジメチルメルクオキサイド。

１１［：酢酸エチル、クロロフォルム、アセトン。

（（２）呈色反応： 陽性：ニンヒドリン、エールリッヒ反応。

陰性：ブレイブ・リーバツク、バ・−トン。

ドフーゲンド／Ｉ／７反応。

（Ｉａ）安定性：１００１１ｇ／ｍｅ、水溶液中、６０
℃。

３時間 ｐＨ５〜７：安定 ｐＨａ：や＼不安定 ｐＨ９：不安定 （Ｗ薄層クロマトグラフィー：スポットフィルム。

セルロースｆ（東京化成柱ｌｌり （紛高速液体クロマトグラフィー（日立社製１日本）：
担体、ＹＭＣＡ−ａ１２（山村化学研究所Ｎ、日本）ｊ
移動層±５％メタノール１０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ８，０）。

２　ｓ／／　ｍｉｎ、　Ｒｔｒｍｉｎ）　＝　ａ　、　
ａ（１６）比旋光度：〔α〕２８−６−ｆ３　ｌ　、　
６’±１５’（ｃ＝０．５６．水中） （■）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質（ただし、
遊階体のＴＡＮ−５８５Ａは酸性物質）ＴＡＮ−５８５
Ｂジナトリウム塩 （１）　　外観：白色粉末 （２）構成元素ＩＣ，Ｈ，ＭおよびＮａ（３）元素分析
ｍ（％）：（五酸化リン上４０℃で６時間減圧乾燥した
試料） Ｃ−４５，ａ±２．０ Ｈ５，０±１．Ｏ Ｎ　　　７．０±１．０ Ｎａ６−１±１．０ （４）　　分子量：Ｓ工Ｍ８法による分子イオンビーク
は次のとおシである。

ｍ／ｚ　　７６７．７８５，７１ａ、６９１（５）水分
含量二６．８±ａ％（熱天秤法）（６）　　分子式：　
Ｃ３０Ｈ３！！Ｎ４０１５１１ａ２（７）　　円二色性
スペクトル（水中）：〔θ〕２２７±２−１２２，００
０±１５，０００（８ン紫外部吸ｌｌＸヌベクトル（水
中）：Ｘ、ａＸ２２４±２　ｎｍ　（Ｅ：：　＝８０２
±８０）λ、　　２６８±２ｎｍ（Ｅ１％＝　２７±５
）ｆｎａｌ　　　　　　　　　　　　　　１０１１λ　
　　２７７±２ｎｍ（Ｅ１％＝　２１±５．肩）ｍａｘ
　　　　　　　　　　　　　　１ａｔ（９）　　渉外部
吸収ヌベクトル：臭化カリウム錠による主な吸収（波数
）は次のとおシである。

ａ４００．ａ２８０．ａ０５０．２９００゜１７４０．
１６２０，１５１５，１４００゜１ａ００，１２４０．
１１ｇ０，１１１０゜夏０６０．　１０２０．　　９４
０．　　８３０゜７５０、　５ａ０３ Ｑｌ　　１８Ｃ−＃磁気共鳴（ＣＭＲ）スペクトル（１
００ＭＨｚ、重水中）：少なくとも下記のシグナルが紹
められる。

１８６．８　（ｓ）、　１７８−４０（ｅ）、　１７５
．９ＪＭｅ）。

１７４．９４（ｓ）、　１７１．１７（ａ）、　１６６
−６０（ｄ）。

１６１．１８（ｅ）、　１５９．５１（Ｂ）、　１８８
．９５（ｓ）。

１３２．７６（Ｂ）、　１ａ２．９７（ｄ）、　１ａ２
−５Ｈｓ）。

１ｉ３１．？５（ａ）、　１ａ１．１ａ（ｓ）、　１１
９．８６（ａ）。

１１８．１５（ａ）、　１０８．０５（ｄ）、　　７９
．０８（ｄ）。

７８．２０（ｄ）、　　７５．６５（ｄ）、　　７４．
６１（ｄ）。

６８．１０（ｔ）、　　６８．５６（ｄ）、　　５８．
７４（ｄ）。

５７．２１（ｄ）、　　５６．２９（ｄ）、　　４９．
３６（ｔ）。

８２．６７（ｔ）ｐｐｍ（ただし、ｏ：ｓｉｎｇｌｅｔ
。

ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、　ｔ：ｔｒｉｐｌｅｔを表わす）
（１１）溶解性： 可溶二本、ジメ千ルスルフォキサイド。

ｍ溶：酢酸エチル、クロロフォルム、アセトン。

（（２）呈色反応： 陽性二二ンヒドリ／、エールリクヒ反応。

陰性：ブレイブ・リーパフク、バートン。

ドラーゲンドルフ反応。

（四）薄層クロマトグラフィｍ：スポットフィルム。

セルロースｆ（東京化成柱ｍり （１４）高速液体クロマトグラフィー（日立社製２日本
）：担体、ＹＭＣＡ−ａ１２（山村化学研究所製１日本
）、移動層；　５％メタノ−／Ｉ’１０．０１ＭｊＪン
酸緩衝液（ｐＨ３，０）。

２ｄｌ　ｍ１ｎ−Ｒｔ　（ｍｉｎ　）　＝　４−２（紛
比旋光度二（α）２ｇ°’　−１５８°±１５°　（ｃ
＝０・５１．水中） （Ｉ５）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質（ただし
、遊離体のＴＡＮ−５８５Ｂは酸性物質）ｊ里Ω級色 本発明の抗生物質ＴＡＮ−５８５ＣおよびＴＡＮ−５８
５Ｄは主としてグフム陰性菌に対して抗菌力を示し、た
とえばヒトおよび家畜、家きんなどに経口的または非経
口的Ｋｆｉ与することによってこれらの細菌感染症の治
療に用いることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図および第８図は実施例２で得られた抗生
物質ＴＡＮ−５８５Ｇモノナトリウム塊のＵＶスベクＦ
／Ｉ／（水中）、工Ｒスペクトル（ＫＢｒ法）、ＣＭＲ
スペクトル（重水中）を示し、第４図、４ｓ５図および
第６図は実施例８で得られた抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｄ
モノナトリウム塩のＵＶ（水中）、工Ｒ（ＫＢｒ）およ
びＣＭＲスペクトル（１ｆｔ水中）をそれぞれ示す。ま
た第７図および第８図は実施例２および８で得られた抗
生物質ＴＡＮ−５８５ＣおよびＤの遊離体のＩＲスペク
トル（ＫＢｒ法）をそれぞれ示す。 手続補正書（自発） １．　事件の表示 昭和５９年特許願第１４４８０１号 ２、　発明の名称 抗生物質ＴＡＮ−５８５０，ＴＡＮ−５８５Ｄおよびそ
の製造法 ３、　補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所　　大阪市東区道修町２丁目２７番地名称　　（２
９３）　　武田薬品工業株式会社代表者　金体　育四部 ４、代理人 住所　大阪市淀用区十三本町２丁目１７番８５号５、　
補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ６　　補正の内容 ｌ）明細書第２９頁第１３行と第１４行の間に「以」二
に述へた物理化学的性質ならびにその他の物理化学的性
質から、ＴＡＮ−５８，５ＣおよびＴＡＮ−５８５Ｄの
化学構造式を次のとおり決定した。 ＯＯＨ 上式において、ＴＡＮ−５８５ＣはＲ１か−ＮＨＣＩ（
Ｏ。 Ｒ２が−ＯＨであらイつされ、また、ＴＡＮ−５８５Ｄ
はＲ３が−１１，Ｒ２が−ＮＩＩＣＩＩＯであられされ
る。」を挿入する。 以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （ I ）モノナトリウム塩として次の物理化学的性状を
   有する抗生物質ＴＡＮ−５８５ＣおよびＤまたはこれら
   の塩 （ａ）抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃ （１）構成元素：Ｃ、Ｈ、Ｎ、ＯおよびＮａ（２）元素
   分析値（％）：五酸化リン上で４０℃、６時間減圧乾燥
   した試料 Ｃ、５１．６±２．０ Ｈ、４．８±１．０ Ｎ、１０．０±１．０ Ｎａ、３．６±１．０ （３）ＳＩＭＳ法による分子イオンピークは次のとおり
   である。 ｍ／ｚ５７５、５５３、５３１ （４）分子式：Ｃ＿２＿４Ｈ＿２＿５Ｎ＿４Ｏ＿１＿０
   Ｎａ（５）円二色性（ＣＤ）スペクトル（水中）：〔θ
   〕＿２＿２＿８＿±＿２−１２７，０００±１５，００
   ０（６）紫外部吸収スペクトル（水中）： λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２２５±２ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿
   ｍ＝４２１±４０）λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７１±２ｎｍ（Ｅ
   ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４５±５）λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７
   Ｔ±２ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝３７±５、肩）
   （７）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠による主
   な吸収。 ３６００、３４４０、３２８０、３０４０、２９４０、
   １７８０、１７４５、１６７５、１６２０、１５９５、
   １５７０、１５２０、１４５０、１４００、１３４５、
   １３１０、１２９０、１２６０、１２３０、１１８０、
   １１２０、１１１５、１１０５、１０６０、９９０、９
   ４０、９１５、８６０、 ８３０、８００、７６５、７３０、 ６６０、６４０、６１５、５４０ｃｍ＾−＾１（８）＾
   １＾３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（１００ＭＨｚ、重水
   中）：少なくとも下記のシグナルが認 められる。 １７８．０１（ｓ）、１７７．５６（ｓ）、１７６．８
   ４（ｓ）、１６６．９４（ｅ）、１６６．７８（ｄ）、
   １６１．０３（ｓ）、１５８．３８（ｓ）、１３３．９
   ２（ｓ）、１３２．６２（ｄ）、１３１．２９（ｄ）、
   １２９．４６（ｓ）、１１８．５１（ｄ）、１１７．８
   １（ｄ）、７５．９０（ｄ）、７４．４７（ｓ）、６８
   ．０３（ｔ）、６３．５０（ｄ）、５６．２７（ｄ）、
   ５５．９８（ｔ）、３２．６４（ｔ）ｐｐｍ（ただし、
   ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ、ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、ｔ：ｔｒｉ
   ｐｌｅｔ） （９）溶解性： 可溶：水、メタノール、ジメチルスルフ オキサイド 難溶：アセトン、酢酸エチル、クロロフ オルム （１０）呈色反応： 陽性：ニンヒドリン、バートン、エール リッヒ反応 陰性：グレイグ・リーバツク、ドラーゲ ンドルフ反応 （ｂ）抗生物質ＴＡＨ−５８５Ｄ （１）構成元素：Ｃ、Ｅ、Ｎ、ＯおよびＮａ（２）元素
   分析値（％）：五酸化リン上で、４０℃、６時間減圧乾
   燥した試料 Ｃ、５１．３±２．０ Ｈ、５．３±１．０ Ｎ、９．９±１．０ Ｎａ、３．８±１．０ （３）ＳＩＭＳ法による分子イオンピークは次のとおり
   である。 ｍ／ｚ５５９、５３７、５１５ （４）分子式：Ｃ＿２＿４Ｈ＿２＿５Ｎ＿４Ｏ＿９Ｎａ
   （５）円二色性（ＣＤ）スペクトル（水中）：〔θ〕＿
   ２＿２＿８＿±＿２−１２５，０００±１５，０００（
   ６）紫外部吸収スペクトル（水中）： λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２２６±２ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿
   ｍ＝４０８±４０）λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７１±２ｎｍ（Ｅ
   ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝４１±５）λ＿ｍ＿ａ＿ｘ２７
   ７±２ｎｍ（Ｅ＾１＾％＿１＿ｃ＿ｍ＝３５±５、肩）
   （７）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠による主
   な吸収。 ３４００、３２６０、３０５０、２９４０、１７４０、
   １６７５、１６２０、１５２０、１４４０、１４００、
   １３１０、１２５０、１１８５、１１０５、１０６０、
   １０３０、９３０、９１０、８５０、８３０、 ８１０、７６０、６７０、６４０、 ５８０、５４０、５００ｃｍ＾−＾１ （８）＾１＾３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（１００ＭＨ
   ｚ、重水中）：少なくとも下記のシグナルが認められる
   。 １７８．６２（ｓ）、１７６．８２（ｓ）、１７４．８
   ８（ｓ）、１７０．９２（ｓ）、１６６．４９（ｄ）、
   １６１．１０（ｓ）、１５８．３７（ｓ）、１３２．９
   ８（ｄ）、１３１．６９（ｄ）、１３１．０８（ｓ）、
   １２９．６２（ｓ）、１１８．５２（ｄ）、１１８．１
   ０（ｄ）、６８．０６（ｔ）、６３．５３（ｄ）、５８
   ．６６（ｄ）、５７．１０（ｄ）、５６．２２（ｄ）、
   ４９．１７（ｔ）、３２．６３（ｔ）ｐｐｍ（ただし、
   ｓ：ｓｉｎｇｌｅｔ、ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、ｔ：ｔｒｉ
   ｐｌｅｔ） （９）溶解性： 可溶：水、メタノール、ジメチルスルフ オキサイド 難溶：アセトン、酢酸エチル、クロロフ オルム （１０）呈色反応： 陽性：ニンヒドリン、バートン、エール リッヒ反応 陰性：グレイグ・リーバツク、ドラーゲ ンドルフ反応 （II）フレキシバクター属に属する抗生物質ＴＡＮ−５
   ８５Ｃおよび（または）Ｄ生産菌を培地に培養し、培養
   物中に抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃおよび（または）Ｄを
   生成蓄積せしめ、これを採取することを特徴とする抗生
   物質ＴＡＮ−５８５Ｃおよび（または）Ｄの製造法 （III）抗生物質ＴＡＮ−５８５ＡまたはＢをβ−グル
   クロニデースで処理し、抗生物質ＴＡＮ−５８５Ａから
   抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｃを、抗生物質ＴＡＮ−５８５
   Ｂから抗生物質ＴＡＮ−５８５Ｄを生成せしめることを
   特徴とする抗生物質ＴＡＮ−５８５ＣまたはＤの製造法