JPS63170395A - 抗生物質ｔａｎ−９３０およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は細菌感染症の治療剤として有用な新規抗生物質
ＴＡＮ−９３０およびその塩ならびにその製造法に関す
る。

従来の技術 本発明の新規抗生物質ＴＡＮ−９３０はアデノシンを骨
格とする核酸系抗生物質で分子中にリンを含有するが、
このような抗菌性抗生物質は未だ報告されていない。

発明が解決しようとする問題点 細菌によって惹起される疾病は抗生物質投与による治療
法の発達によってかなり克服されている。

しかし、従来の抗生物質を長期あるいは大量に投与する
ことによる起因菌の変化（菌交代現象）あるいは耐性菌
の出現（耐性化現象）は現在の感染症治療医学分野で大
きな問題となっている。この問題を克服するために、当
分野では、常に新規骨格を有し、新しい生物活性を示す
抗生物質、あるいはそれらを合成するための中間原料が
求められている。

問題点を解決するための手段 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的として多数
の微生物を土壌より分離し、その産生ずる抗生物質を分
離探索したところ、ある種の微生物が新規な抗生物質を
産生ずること、該微生物かシュードモナス属に属する菌
種であること、該微生物を適宜の培地に培養することに
よってダラム陰性細菌に対して抗菌力を示す抗生物質を
培地中に蓄積しうろことなどを知り、この抗生物質を単
離し、その物理化学的および生物学的諸性質から、当該
抗生物質が新規な抗生物質であることを確め、これを抗
生物質ＴＡＮ−９３０と称することにした。

本発明者らは、これらの知見に基づいてさらに研究を重
ねた結果、本発明を完成した。

本発明は、（１）抗生物質ＴＡＮ−９３０およびその塩
、（２）シュードモナス（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）
属に属する抗生物質ＴＡＮ−９３０生産菌を培地に培養
し、培養物中に該抗生物質を生成蓄積せしめ、これを採
取することを特徴とする抗生物質ＴＡＮ−９３０および
その塩の製造法を提供するものである。

なお、本明細書においては抗生物質ＴＡＮ−９３０を単
にｒＴＡＮ−９３０Ｊと称することらある。

本発明で使用される抗生物質ＴＡＮ−９３０生産菌とし
ては、ンユードモナス属に属し、抗生物質ＴＡＮ−９３
０を産生ずる能力を有するものであれば如何なる微生物
でもよい。その例としては、たとえばシュードモナス・
エスピー（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ、）があげられ
る。その具体例としては、本発明者らが兵庫県飾磨郡夢
前町で採取したクマザサより分離したシュードモナス・
エスピーＰＫ−５株（以下、ｒＰＫ−５株」と略称する
こともある。）があげられる。

ＰＫ−５株の菌学的性状は下記のとおりである。

（ａ）形態 肉汁寒天斜面上で２４℃、５日間培養後の観察では、細
胞は直径０．６〜１．２μｍ１長さ０．８〜２．１μｍ
の桿状を示し、極上の鞭毛を有し、運動性を示す。

胞子を形成せず、またダラム染色は陰性で、抗酸性を示
さない。

（ｂ）各種培地上での生育状態 ２４℃で培養し、ｌないし１４日間にわたって観察した
。

■肉汁寒天平板培＃：コロニーは透明な黄色でやや光沢
を有し、円形、表面は凸状、周縁は波状である。

■肉汁寒天斜面培＃：拡布状の生育を示し、単黄色ない
しこはく色を呈する。

■肉汁液体培養：混濁状に生育し、沈澱、菌膜を生成し
ない。

■肉汁ゼラチン穿刺培養：主として上部で生育し、噴火
口状に液化する。

■リドマス・ミルク；リドマスの還元は認められない。

ややペプトン化が認められるが、凝固は認められない。

（ｃ）生理的性質 ■硝酸塩の還元ニー ■脱窒反応ニー ■ＭＲ（メチルレッド）テストニー ■ＶＰ（フォーゲス・プロスカラエル）テストニー ■インドールの生成ニー ■硫化水素の生成（ＴＳＩ寒天および酢酸鉛紙）、− ■デンプンの加水分解ニー ■クエン酸の利用（コーゼル、　クリステンセンおよび
シモンズの各培地）：＋ ■無機窒素源の利用 ：）硝酸カリウム；− ！り硫酸アンモニウムニー ■色素の生成（キングＡ、Ｂおよびマンニット酵母エキ
ス寒天の各培地）：拡散性色素の生成は認められない。

■ウレアーゼ：　＋ ＠オキシダーゼ：＋ ■カタラーゼ：＋ ■生育の範囲 １）ｐＨ：　ｐＨ５，２〜８．８で生育するが、最適ｐ
Ｈは５．３〜５．９゜ 培地ニゲルコース０，１％酵母エキス ０．０１％、硫酸アンモニウム０．１ ％、食塩０．１％、硫酸マグネシウ ム（７水塩）０．０５％、リン酸緩衝 液０．１Ｍ（別滅菌）。

１１）温度：２０〜３５℃で生育するが最適温度は２３
〜２９℃。培地：肉汁液体培 地。

■酸素に対する態度：好気的 ■０−Ｆ（オキシダティブーファーメンタテイブ）テス
ト［ヒユー・レイフソン（Ｈｕｇｈ・Ｌｅｉｆｓｏｎ）
法］：酸化型 ■糖からの酸、ガスの生成および糖の利用性；Ｌ−アラ
ビノース　　−　　　　−− Ｄ−キシロース　　　−−− Ｄ−グルコース　　　−　　　　−＋ Ｄ−マンノース　　　−−± Ｄ−フラクトース　　−−± Ｄ−ガラクトース　　−−− 麦　　芽　　糖　　　　−−＋ ン　　　　ヨ　　　　糖　　　　　　−−＋乳　　　　
　　　糖　　　　−−± トレハロース　　　　−　　　　−− Ｄ−ソルビット　　　−　　　　−＋ Ｄ−マンニット　　　−−士 イノンソト　　　　　−−十 グリセリン　　　　　−　　　　−＋ デンプン　　　　　　−−± ［株］ＤＮＡのＧＣ（グアニンーントシン）含量・６５
．１±１．０モル％（Ｔｍ法） ■多糖の分解能： カルボキシメチルセルロース：− コロイダルキチン、− アルギン酸ナトリウムーー ■トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）８０の分解：士以上の菌学
的性状を有するＰＫ−５Ｄを、バーノーズ、マニュアル
・イブ・デターミネイティブやバクテリオロジ−（Ｂ　
ｅｒｇｅｙ’　ｓ　　Ｍａｎｎｕａｌ　　ｏｆＤｅｔｅ
ｒｍｉｎａｔｉｖｅ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第
８版およびインターナショナル・ジャーナル・イブ・シ
ステマテイック・バクテリオロジ−（Ｉ　ｎｔｅｒｎａ
ｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ　　ｏｆ　　Ｓｙｓｔｅｍ
ａｔｉｃ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第　３０巻２
２５〜４２０頁（１９８０年）、同第３２巻１４６〜１
４９Ｎ（１９８２年）に記載の種と照合すると、ダラム
陰性桿菌て鞭毛による運動性を示し、好気性でカタラー
ゼ陽性、オキシダーゼ陽性であり、Ｄ　Ｎ　ＡのＧ＋Ｃ
含量が、６５，１±１．０モル％であることから、シュ
ードモナス属に属すると考えられた。そこでＰＫ−５株
を７ユードモナス・エスピーＰＫ−５と呼称することに
した。

上記ンユートモナス・エスピーＰＫ−５株は、昭和６１
年７月３日から通省産業省工業技術院微生物工業技術研
究所（ＦＲＩ、日本国茨城県筑波郡谷田部町東１丁目１
番３号）に受託番号ＦＥＲＭ　　Ｐ−８８３２として、
また昭和６１年６月２４日かみ財団法人発酵研究所（ｒ
ｐｏ、日本国大阪府大阪市淀川区十三本町２丁目１７番
８５号）にＩＦＯ−１４５１５としてそれぞれ寄託され
ている。

本発明に用いられるシュードモナス属細菌は一般にその
性状が変化しやすく、ｆコとえば紫外線、Ｘ線、化学薬
品（例、ニトロソグアニジン、エチルメクンスルホン酸
）などを用いろ人工変異手段で容易に変異しつるもので
あり、どの様な変異株であってし本発明の対象とするＴ
ＡＮ−９３０の生産能を有するものはすべて本発明に使
用することができる。

ＴＡＮ−９３０生産閑の培養に際しては、炭素源として
は、たとえばグルコース、ンヨ塘、マルトース、可溶性
デンプン、デキストリン、油脂類（例、大豆油、オリー
ブ油など）、有機酸類（例、クエン酸、コハク酸、グル
コン酸など）など菌が資化しうるしのか適宜用いられる
。窒素源としては、たとえば大豆粉、綿実粉、コーン、
グルテン・ミール、乾燥酵母、酵母エキス、肉エキス、
ベプトノ、尿素などの有機窒素化合物が（り用できる。

また、無機塩としては、たとえば塩化ナトリウム、塩化
カリウム、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム、リン酸
−カリウム、リン酸二ナトリウムなどの通常細菌の培養
に必要な無機塩類が単独もしくは適宜、組合せて使用さ
れる。

また、硫酸第一鉄、硫酸銅などの重金属類、ビタミンＢ
Ｉ、ビオチンなどのビタミン類なども必要に応じて添加
される。さらにシリコーンオイルやポリアルキレンゲリ
コールエーテルなどの消泡剤や界面活性剤を培地に添加
してもよい。その細菌の発育を助け、ＴＡＮ−９３０の
生産を促進するような有機物や無機物を適宜添加しても
よい。

培養方法としては、一般の抗生物質の生産方法と同様に
行なえばよく、固体培養でも液体培養でもよい。液体培
養の場合は静置培養、撹拌培養、振盪培養、通気培養な
どいずれを実施してもよいがとくに通気撹拌培養が好ま
しい。また、培養温度はおよそ１５°Ｃ〜３２℃の範囲
が好ましく、培地のｐＨは約５〜８の範囲でおよそ８時
間〜！６８時間、好ましくは２４時間〜１４４時間培養
す培養物から目的とする抗生物質ＴＡＮ−９３０を採取
するには微生物の生産する代謝物をその微生物の培養物
から採取するのに通常使用される分離手段か適宜利用さ
れる。たとえば抗生物質ＴＡＮ−９３０は水溶性酸性物
質の性質を示し、主として培養濾液中に含まれるので、
まず培養液に濾過補助剤を加えて濾過あるいは遠心分離
によって菌体を除去し、得られた培養濾液を適宜の担体
に接触させて濾液中の有効成分を吸着させ、ついで適宜
の溶媒で有効物質を脱着させ、分別採取する手段が有利
に利用される。クロマトグラフィーの担体としては活性
炭、シリカゲル、粉末セルロース、吸着性樹脂など化合
物の吸着性の差を利用、または陰イオン交換樹脂、陰イ
オン交換セルロースなど化合物の官能基の差を利用、あ
るいは分子ふるい性担体類など化合物の分子量の差を利
用するものが有利に用いられる。これら担体から目的と
する化合物を溶出するためには担体の種類、性質によっ
て組み合せが異なるが、たとえば水溶性有機溶媒の含水
溶液すなわち、含水アセトン、含水アルコール類など、
あるいは酸、アルカリ、緩衝液もしくは無機あるいは有
機塩を含む水溶液などが適宜組み合わせて用いられる。

さらに詳しくは、担体として陰イオン交換樹脂たとえば
アンバーライトＩＲＡ−６８，４００、・１０２．４１
０（ローム・アンド・ハース社製、米国）ダイヤイオン
５Ａ−２１ＡおよびＣ（三菱化成社製、日本）などを用
いると濾液中の本抗生物質が吸着され、塩類あるいは酸
含有の水溶液あるいは緩衝液などで溶出される。また、
陰イオン交換セルロースたとえばＤＥ−３２（ワットマ
ン社製英国）、ＤＥＡＥ−セルロース（ブラウン社製　
西独）など、あるいは陰イオン交換分子ふるい性樹脂た
とえばＤＥＡＥ−あるいはＱＡＥ−セファデックス（フ
ァルマシャ社製、スウェーデン）などの担体に本抗生物
質を吸着せしめ、塩類あるいは酸含有の水溶液あるいは
緩衝液などによって溶出させることが出来る。これらの
溶出液中の塩類、着色物質などを取り除くためにはクロ
マト塩類、着色物質などを取り除くためにはクロマト用
活性炭（底円薬品工業社製、日本）あるいは吸着性樹脂
たとえばダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化成社製、日本
）、アンバーライトＸＡＤ−ＩＩ（ローム・アンド・ハ
ース社製、米国）などが有利に用いられる。分画された
溶出区分は、濃縮、凍結乾燥などの工程を経て、粉末化
することができる。

ＴＡＮ−９３０は精製過程において、用いられた塩類、
緩衝液中の陽イオンｆことえばナトリウム、カリウム、
リチウム等のアルカリ金属、カルシウム、マグネシウム
等のアルカリ土類金属または、１つらしくは２つの低級
アルキル基（例えば、メチル、エチル等）を有していて
もよいアンモニウムもしくはインモニウムイオンなどと
結合した状態で存在するが、この場合そのままのｐＨで
活性炭クロマトグラフィーに付すると対応する塩として
単離され、ｐＨ５ないし２、好ましくはＩ）Ｈ４ないし
２．５に溶出液を調整し、活性炭のクロマトグラフィー
に付すと遊離体として得られる。これらの塩および遊離
体いずれら本発明の範囲のものである。

後記する実施例Ｉで得られたＴＡＮ−９３０ジナトリウ
ム塩の物理化学的性状はつぎのとおりである。

１）外観、白色固体 ２）比旋光度：［α］”　　−２６°±ｌＯ°（Ｃ−Ｏ
，５１，水中） ３）元素分析値（％） 実測値　　　　　　計算値８ Ｃ，２８，６３Ｃ，２８，５３ Ｈ，３，９３Ｈ，３，８７ Ｎ、１２．９６　　　　　Ｎ、１２．８００、　　、　
　　　　　　　０，３５．０８Ｐ、１１．５６　　　　
　Ｐ、１１．３２Ｎａ、７．２　　　　　　Ｎａ、８．
４０（＊水分２モルを含むとして計算） ４）測定分子量値：Ｓｒ−ＭＳ法によるｍ／ｚ　　５１
２　（Ｍ＋　Ｈ）” ５）分子式：　Ｃ＋３１（＋７ＮｓＯ＋ｏＰｚ・Ｎａ＊
６）紫外部吸収スペクトル：水中（第１図参照）、１％ λｍａｘ２５８±３　ｎｍ（Ｅ　、ｃｍ＝　２９５±５
０）７）赤外部吸収スペクトル臭化カリウム錠剤中（第
２図参照）、 主な吸収 ３４００．１６５０．＋６１０．１５８０，１４８０゜
１４２０、＋３８０．１３４０，１２４０．１１１０゜
１０８０．９４０，８３０，８００，７３０，６５０゜
５１０　（ｃｍ−’） ３）＋３ｃ−核磁気共鳴スベクトル：Ｉ００！□ＡＨｚ
。

重水中（第３図参照）、下記のシグナルが認められる １　５８．３４（ｓ）、　　１５５．６８（ｄ）、　　
Ｉ　５１．８６（ｓ）、１４２．６７（ｄ）、１２１．
３９（ｓ）、８９．８２（ｄ）、　　８６．７１（ｄ）
および８６．６２（ｄ）、　　７７．０９（ｄ）、　　
７３．２３（ｄ）、　　６８．０４（ｔ）および６７゜
９９（ｔ）、　　５６．９５（ｄ）、　　５６．４４（
ｄ）および５４．４９（ｄ）、　　１６．３９（ｑ）ｐ
ｐｍ（ただし、Ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｔ
ニトリプレット、ｑ：　クアルテット） ９）溶解性： 可溶；水、ジメチルスルフォキサイド、難溶；酢酸エチ
ル、アセトン、クロロフォルム １０）呈色反応： 陽性；過ヨード酸−ベンチジン、モリブデン酸アンモニ
ウム−過塩素酸、過マンガ ン酸カリウム反応 陰性；ニンヒドリン、板目、バートン反応１１）薄層ク
ロマトグラフィー（Ｔ　Ｌ　ＣＸセルロースｆ１東京化
成社製、日本） 溶媒系　　　　　　Ｒｔ値 アセトニトリル：水（４：１）　　　ｏ、ｏｓブタノー
ル：酢酸：水（２：Ｉ：１）０．３１１２）高速液体ク
ロマトグラフィー（ＨＰＬＣＸ担体：ＹＭＣ−ＰＡＫ　
　Ａ−３１２、山村化学研究新製、移動相：６％メタノ
ール１０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６、３）、流速：
　：ｌ＋＋ρ／ｍ１ｎ）：　Ｒｔ−４、８（ｍｉｎ） ！３）物質区分：中性物質（遊離体は酸性物質）また、
ＴＡＮ−９３０ジナトリウム塩の構造は式（１）で示さ
れる： （Ｄ 次にＴＡＮ−’９３０の生物学的性状について述べる。

ＴＡＮ−９３０ジナトリウム塩の各種微生物に対する抗
菌スペクトルは第１表に示すとおりである。

第１表 スタフィロコッカス・ア　＞１００　　６．２５ウレウ
スＦＤＡ２０９Ｐ ミクロコツカス・ルテウ　＞１００　　＞１００スＩＰ
ＯＩ２７０８ バチルス・ズブチリス　　＞１００　　＞１００ＮＩＩ
（、Ｊ　　ＰＣＩ２１９ バチルス・セレウス　　　＞１００　　＞１００ＤＡ５ エンエリヒア・コリ　　　　　１００　　１２．５ＮＩ
ＨＪＪＣ２ サルモネラ・ヂフイムリ　　　５０　　　６，２５ウム
ＩＦ’０１２５２９ ントロバクター・フロ　　＞ｔｏｏ　　＞ｔｏ。

インディＩＦ０１２６８１ クレブシェラ・ニューモ　＞ｔｏｏ　　＞１００ニエｆ
ＦＯ３３１７ セラチア・マルセッセ　　　１００　　１００ンスＩＦ
’０１２６４８ プロテウス・ミラビリス　＞１００　　　３．１３ＡＴ
ＣＣ２１１００ プロテウス・ブルガリス　　１００　　　３．＋３（Ｆ
Ｏ３９８８ プロテウス・モルガニ−＞１００　　＞１００１Ｆ’０
３１６８ ンユードモナス・エルギ　＞１００　　＞１００ノーサ
ＩＦ０３０８０ アルカリゲネス・フエ力　＞１００　　＞１００リスＩ
ＦＯ１３１１１ アシネトバクタ−・　　　＞１００　　＞１００カルコ
アセテイクス ＩＰＯｆ２５５２ （注１）バクト・アンティビオティック・メディウム３
（ディフコ・ラボラトリーズ、米国）１７゜５ｇ、バク
ト・イースト・エキストラクト（ディフコ・ラボラトリ
ーズ、米国）５．０ｇ、バクト・アガー（ディフコ・ラ
ボラトリーズ、米国）２０ｇ。

蒸留水　１０００　ｍ（！（ｐＨ無調整）からなる培地
を用い、接種菌液として約１０’コロニー・フォーミン
グ・ユニット／ｍ（ｌを用いた。

（注２）方法は（注１）と同じ、最大発育許容濃度は抗
生物質を含まない培地上に発育した菌量と同じ程度に発
育することを許容する最大の濃度を示す。

＋４）’Ｈ−核磁気共鳴スベクトル＝４００ＭＨｚ、重
水中、下記のノブナルが認められる １、５０（３Ｈ，ｄ）、３．１５（Ｉ　Ｈ，ｄｄ）、３
．３３（ＩＨ，ｍ）、　４．２３（２Ｈ，ｄｄ）、　　
４．４　１（ＩＨ，ｍ）、　　４゜５５（Ｉ　Ｈ，ｄｄ
）、　４．７８（Ｉ　Ｈ，ｔ）、　　６．１５（Ｉ　Ｈ
。

、Ｊ）、８．２７（目−Ｆ、ｓ）、　８　、５１　（Ｉ
　Ｈ，ｓＸｐｐｍ）（ただし、Ｓ：ンングレット、ｄ、
ダブレット、ｄｄ：ダブレットダブレット、ｔニトリブ
レット、ｍ；マルヂプレット） また′ＦＡＮ−９３０ジナトリウム塩の実験的マウス感
染症における治療効果は第２表に示すとおりである。

第２表 さらに、ＴＡＮ−９３０ジナトリウム塩を１０００　ｍ
ｇ／　ｋｇでマウスに腹腔内あるいは経口投与しても急
性毒性は全く認められなかった。

これらのデータから明らかなようにＴＡＮ−９３０はダ
ラム陰性菌および陽性菌に対して抗菌性を示し、咄乳動
物などに毒性を示さない抗生物質であると云える。した
がってＴＡＮ−９３０はヒトおよび家畜、家きんなどの
細菌感染症の治療に用いろことが出来る。

この治療用に、ＴＡＮ−９３０は公知の製剤化技術に従
って種々の剤形の医薬組成物に処方して用いることがで
きる。

ＴＡＮ−９３０をたとえば大腸菌感染症の治療薬よして
用いるには、たとえばＴＡＮ−９３０を生理的食塩水に
溶解して注射剤として非経口的に皮下または筋肉内に１
〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは５〜２０　ｍｇ／　
ｋｇ／日投与する。また経口剤として、抗生物質ＴＡＮ
−９３０を乳糖と混合してカプセル剤とし、ＴＡＮ−９
３０として１−１００　ｍｇ／　ｋｇ／日、好ましくは
５〜５０　ｍｇ／　ｋｇ／日投与する。

また、本発明によって得られるＴＡＮ−９３０は、殺菌
剤としてし用いることができる。たとえばＴＡＮ−９３
０を０．０１〜０．１Ｗ／Ｖ％の濃度で蒸留水に溶解し
た液剤、またはワセリン、ラノリンを基剤とし、Ｉｇあ
たりＴＡＮ−９３０を０．２〜２０ｍｇ、好ましくは１
−１０ｍｇ含有する軟膏剤として、ヒトおよび動物の手
、足、顔などの殺菌、消毒に用いることかできる。

抗生物質ＴＡＮ−９３０はまた新しい医薬品の合成中間
体としても有望な化合物である。

以上述べた化学的および生物学的諸性質から明らかなご
とく、ＴＡＮ−９３０は新規抗生物質である。

実施例 次に実施例をもってさらに詳細に本発明を説明するが、
これによって本発明が限定されるものではない。パーセ
ントは、特にことわりのないかぎり重量／容量％を示す
。

実施例１ 栄養寒天斜面上に生育させたンユートモナス・エスピー
ＰＫ−５（Ｆ’ＥＲＭ　Ｐ−８８３２；ｒ　ＦＯ−１４
５１５）の菌株を、グルコース２％、可溶性デンプン３
％、生大豆粉１％、コーン・ステイープ・リカー０．３
％、ポリペプトン（大五栄養化学社製）０．５％、食塩
０．３％を含有する水溶液（ｐＨ７，０）に沈降性炭酸
カルシウム０．５％を添加してなる培地４０ｍ１２を含
む２００ｍρ容三角フラスコに接種して、２４℃で４８
時間振盪培養しその培養物を種菌とした。

次に、乾燥酵母（底円薬品工業社製）２％、グルコース
０．１％（ｐＨ無調整）からなる培地４０ｎｏ２を含む
２００ｍ（７容三角フラスコ（６０本、２４００ｍｆ２
）に、先の種菌１ｆｆＩａずつを接種して、２８℃で２
３０回転／分の条件下で７２時間振盪培養した。

培養液を遠心分離にかけ、上清液（２Ｑ）を得た。

上清液をｐ）ｒ７．ｏに調整後アンバーライトＩＲＡ−
＝１０２（ＣＱ型、１２０ｍ１２、ローム・アンド・ハ
ース社製、米国）のカラムクロマトグラフィーに付した
。抗生物質を１Ｍ食塩水で溶出し、溶出液（１，２Ｑ）
を活性炭クロマトグラフィー（１００ｍｆｆ、底円薬品
工業社製、日本）に付した。水洗（４００ｍ□後、抗生
物質を８％イソブタノール−Ｎ１５０アンモニア水（４
００ｍ１２）で溶出した。

溶出液を濃縮、凍結乾燥して、粗粉末（１，５ｇ）を得
た。粗粉末を水（３５０ｍ□に溶かし、溶解液をＱ　Ａ
　Ｅ　−セフ　ｙデック７、Ａ−２５（Ｃ＆型、１８０
ｍＱ、ファルマシャ社製、スウェーデン）のカラムクロ
マトグラフィーに付し、Ｏ，１Ｍ食塩水で溶出分画した
。活性区分を集め、ｐＨ７，０に調整後活性炭クロマト
グラフィー（２５ｍｇ）で脱塩し、溶出液を濃縮、凍結
乾燥して粉末（２１０＋９）を得た。この粉末を水（４
０ｍ（りに溶かし、ＱＡＥ−セファデックスＡ−２５（
ＣＣ型、３０ｍ！２）のカラムクロマトグラフィーに付
し、０．０８Ｍ食塩水で溶出分画した。抗生物質を含む
両分を集め、１１１［−１７、１に調整後、活性炭クロ
マトグラフィー（１０ｍｆ２）に付した。水洗（４０ｍ
の後、８％イソブタノールで溶出し、溶出液を濃縮、凍
結乾燥して、ＴＡＮ−９３０ジナトリウム塩の白色粉末
（１０２３＋１？）を得た。

実施例２ 栄養寒天斜面上に生育させた、シュードモナス・エスピ
ーＰＫ−５（１’；”ＥＲＭ　　Ｐ−８８３２；ＩＦ’
０−１４５１５）の菌株を、グ／ｌｚ　：］　−，２，
２％、可溶性デンプン３％、生大豆粉１％、コーン・ス
テイープ・リカー０．３％、ポリペプトン０．５％、食
塩０．３％を含有する水溶液（ｐＨ７，０）に沈降性炭
酸カルシウム０．５％を添加してなる培地５００ｍ（２
を含む２（２容坂ロフラスコに接種して、２４℃で４８
時間往復振盪培養した。この培養液全型を上記培地に消
泡剤アクトコール（底円薬品工業社製）０．０５％を添
加してなる培地３０ｔ２を含む容ｆｆｔ５０ｉ２のタン
クに接種し、２・１°Ｃで通気量３０１２／分、２００
回転／′分の条件下で４８時間培養した。この培養液６
ａを乾燥酵母２％、グルコース０．１％、アクトコール
０．０５％（ｐＨ無凋整）からなる培地１００Ｑを含む
容量２００Ｃのタンクに接種し、１７°Ｃで通気ｆｆ１
２０ＯＬ’分、１５０回転／分の条件下で６６時間培養
した。

培養液（１００１２）をｐＨ７，０に調整後、シャープ
レス分離して濾液（９８１２）を得た。濾液をアンバー
ライトｒ　ＲＡ−４０２（Ｃ（２型、５り）のカラムク
ロマトグラフィーに付した。抗生物質を１Ｍ食塩水で溶
出し、溶出液（５０ｇ＞を活性炭クロマトグラフィー（
４Ｑ）に付した。水洗（１２ｆｆ　）後、抗生物質を８
％イソブタノール−Ｎ１５０アンモニア水（＋　６（）
で溶出し、溶出液を減圧下８Ｑまで濃縮した。濃縮液を
ＱＡＥ−セファデックスＡ−２５（ＣＱ型、３Ｃ）のカ
ラムクロマトグラフィーに付し、０．１Ｍ食塩水で溶出
分画した。活性区分を集め、ｐＨ６、５に調整後活性炭
クロマトグラフィー（０，８＆）で脱塩し、溶出液を減
圧下１．５（！まで濃縮した。濃縮液をＱＡＥ−セファ
デックスＡ−２５（Ｃ１２型、ＩＱ）のカラムクロマト
グラフィーに付し、０．０９Ｍ食塩水で溶出分画した。

抗生物質のみを含む両分と抗生物質を主成分とする両分
の２画分に分け、各ｐＨ７、０に調整後活性炭クロマト
グラフィーの脱塩工程を経て、前者からＴＡＮ−９３０
ジナトリウム塩の粉末（１，４６ｇ）、後者からＴＡＮ
−９３０ジナトリウム塩の粗粉末（６，Ｏｇ、純度７０
％）を得た。

発明の効果 本発明の新規抗生物質ＴＡＮ−９３０およびその塩は、
ダラム陰性菌および陽性菌に抗菌作用を示し、たとえば
ヒトおよび他の動物に経口的または非経口的に投与する
ことによってこれらの細菌感染症の治療に用いることが
できる。また、ヒトおよびその他の動物の体表面等の殺
菌、消毒にも有用である。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１で得られた抗生物質ＴＡＮ−９３０の
紫外部吸収スペクトル（水中）、第２図は赤外部吸収ス
ペクトル（ＫＢｒ法）、第３図はＩ３０核磁気共鳴スペ
クトル（１００ＭＨｚ、重水中）である。 特許出願人　武田薬品工業株式会社 代　理　人　弁理士前出　葆ほか２名 第１図 瑣　長（ｎｍ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ジナトリウム塩として次の構造式で示される新規抗
   生物質ＴＡＮ−９３０またはその塩：▲数式、化学式、
   表等があります▼ ２、シュードモナス属に属し、抗生物質ＴＡＮ−９３０
   を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物
   中に抗生物質ＴＡＮ−９３０を生成蓄積せしめ、これを
   採取することを特徴とする抗生物質ＴＡＮ−９３０また
   はその塩の製造法。