JPS6119498A - 多糖類を酵素により変換する方法 - Google Patents
多糖類を酵素により変換する方法Info
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- JPS6119498A JPS6119498A JP60120734A JP12073485A JPS6119498A JP S6119498 A JPS6119498 A JP S6119498A JP 60120734 A JP60120734 A JP 60120734A JP 12073485 A JP12073485 A JP 12073485A JP S6119498 A JPS6119498 A JP S6119498A
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- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
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- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は酵素による変換方法、特にα−アミラーゼ活性
を示す酵素による澱粉または部分的に加水分解した澱粉
のような多糖類の酵素的変換方法に関する。
を示す酵素による澱粉または部分的に加水分解した澱粉
のような多糖類の酵素的変換方法に関する。
アミラーゼはカルボヒドラーゼの重要なグループでアシ
、広い工業的な用途をもつ。アミラーゼは澱粉化合物中
のα−Ｄ−グルコシド結合を加水分解する能力によって
特徴づけられ、そして商業的なアミラーゼの主な販路は
澱粉の加工技術における販路である。かなりの分子量の
多糖類である澱粉はα−アミラーゼにより加水分解され
て１０箇までの単糖類単位を含有するより低い分子量の
多糖類を生産することができる。
、広い工業的な用途をもつ。アミラーゼは澱粉化合物中
のα−Ｄ−グルコシド結合を加水分解する能力によって
特徴づけられ、そして商業的なアミラーゼの主な販路は
澱粉の加工技術における販路である。かなりの分子量の
多糖類である澱粉はα−アミラーゼにより加水分解され
て１０箇までの単糖類単位を含有するより低い分子量の
多糖類を生産することができる。
このような酵素は、澱粉分子を分解することによって澱
粉懸濁液または濃い澱粉ペーストを液体の形に変えるの
で、″液化型“酵素と呼ばれる。
粉懸濁液または濃い澱粉ペーストを液体の形に変えるの
で、″液化型“酵素と呼ばれる。
他のアミラーゼは異なる加水分解操作を触媒する。例え
ばβ−アミラーゼは澱粉、グリコーゲン、またはデキス
トリン分子の非還元性末端における加水分解を触媒して
マルトース分子を分離するが、ゲルコアミラー、ゼは同
じ多糖類またオリゴ糖類の非還元性末端からのグルコー
スの分離を触媒する。
ばβ−アミラーゼは澱粉、グリコーゲン、またはデキス
トリン分子の非還元性末端における加水分解を触媒して
マルトース分子を分離するが、ゲルコアミラー、ゼは同
じ多糖類またオリゴ糖類の非還元性末端からのグルコー
スの分離を触媒する。
α−アミラーゼ活性を示す酵素は各種のシ自然の資源か
ら、例えばかび、菌類、細菌から得られる。そして異な
る微生物からの酵素は、α−アミラーゼによって一般に
触媒される加水分解反応を触媒することができるが、し
ばしば彼等が作用する条件、特に温度およびｐＨの条件
において異なシ、そして工業”的な実施においては、こ
のような差異が重要である。
ら、例えばかび、菌類、細菌から得られる。そして異な
る微生物からの酵素は、α−アミラーゼによって一般に
触媒される加水分解反応を触媒することができるが、し
ばしば彼等が作用する条件、特に温度およびｐＨの条件
において異なシ、そして工業”的な実施においては、こ
のような差異が重要である。
本発明者等のヨーロッパ特許出願
８１８００５７８．２明細書には、本発明者等は、なか
んずく遺伝子工学で得られる微生物よりアミラーゼ活性
をもつ酵素を□製造する方法を記載した。
んずく遺伝子工学で得られる微生物よりアミラーゼ活性
をもつ酵素を□製造する方法を記載した。
この特許出願には、遺伝子工学で得られる微生物にアミ
ラーゼ活性を示す種々の酵素をコードした遺伝子を供与
する多数の微生物が記載されている。ヨーロッパ特許出
願８１８００５７８．２に明らかにされているこのよう
な供与体微生物の１つがバチルス参メガテリウム（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）であるが、この微
生物から製造される酵素は、上記ヨーロッパ特許出願の
方法により製造されることができるように記載されたア
ミラーゼ活性をもつ他の酵素から選び出される性質をも
つものとして記載されていない。しかし久から、本発明
者等は、今やα−アミラーゼ活性をもつバチルス−メガ
テリウムからの酵素が若干の工業的適用において該酵素
を特に有用にさせる性質をもつことを発見した。
ラーゼ活性を示す種々の酵素をコードした遺伝子を供与
する多数の微生物が記載されている。ヨーロッパ特許出
願８１８００５７８．２に明らかにされているこのよう
な供与体微生物の１つがバチルス参メガテリウム（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）であるが、この微
生物から製造される酵素は、上記ヨーロッパ特許出願の
方法により製造されることができるように記載されたア
ミラーゼ活性をもつ他の酵素から選び出される性質をも
つものとして記載されていない。しかし久から、本発明
者等は、今やα−アミラーゼ活性をもつバチルス−メガ
テリウムからの酵素が若干の工業的適用において該酵素
を特に有用にさせる性質をもつことを発見した。
それ故に、本発明は多糖類を、４．５〜８の範囲のｐＨ
で、バチルス・メガテリウムから得られるα−アミラー
ゼ活性を示す酵素と接触させることを特徴とする、酵素
により多糖類を単糖類または１つあるいはそれ以上のよ
シ低い分子量の多糖類に変換する方法である。
で、バチルス・メガテリウムから得られるα−アミラー
ゼ活性を示す酵素と接触させることを特徴とする、酵素
により多糖類を単糖類または１つあるいはそれ以上のよ
シ低い分子量の多糖類に変換する方法である。
ＮＣＩＢ Ｎｏ、 １１５６８の呼称のもとに寄託され
ているバチルス・メガテリウムが好ましい。
ているバチルス・メガテリウムが好ましい。
本発明方法で用いられる酵素は異なる組成の多糖類の変
換を触媒することができる。かくして、その第１の商業
的利用は澱粉また部分的澱粉加水分解物の単糖類または
より低い分子量の多糖類への変換における利用であるが
、この酵素はまたプルランの変換を触媒し、その生成物
は殆ど全くトリサツカライドであるパノースである。α
−アミラーゼ活性を示す他の酵素と違って、このバチル
ス・メガテリウム酵素はまたサイクロデキストリンの加
水分解を触媒し、最後には主としてデキストロース、マ
ルトース、およびマルトトリオースからなる生成物を生
成する。
換を触媒することができる。かくして、その第１の商業
的利用は澱粉また部分的澱粉加水分解物の単糖類または
より低い分子量の多糖類への変換における利用であるが
、この酵素はまたプルランの変換を触媒し、その生成物
は殆ど全くトリサツカライドであるパノースである。α
−アミラーゼ活性を示す他の酵素と違って、このバチル
ス・メガテリウム酵素はまたサイクロデキストリンの加
水分解を触媒し、最後には主としてデキストロース、マ
ルトース、およびマルトトリオースからなる生成物を生
成する。
澱粉工業に用いられるとき、このバチルス・メガテリウ
ムからのアミラーゼ活性を示す酵素は、通常のα−アミ
ラーゼで触媒される加水分解反応において、例えば液化
澱粉の製造において作用させるだめに用いることができ
る。しかしながら、との酵素の特に意義のある利用は、
デキストロースシラップが澱粉または澱粉加水分解物か
ら製造される方法−この加水分解反応はグルコアミラー
ゼにより触媒される−における利用である。なぜならば
、本発明者等は、バチルス・メガテリウム酵素およびグ
ルコアミラーゼが同じ時間に同じ媒質中で一緒に用いる
ことができるというように反応条件を選ぶことができる
ことを発見したからである。特に、バチルス・メガテリ
ウムα−アミラーゼ活性酵素は、供給原料がマルトデキ
ス） ＩＪンまたは液化澱粉であシ、加水分解酵素がグ
ルコアミラーゼである通常の糖化反応に次の予期しない
利点をもって添加することができる。
ムからのアミラーゼ活性を示す酵素は、通常のα−アミ
ラーゼで触媒される加水分解反応において、例えば液化
澱粉の製造において作用させるだめに用いることができ
る。しかしながら、との酵素の特に意義のある利用は、
デキストロースシラップが澱粉または澱粉加水分解物か
ら製造される方法−この加水分解反応はグルコアミラー
ゼにより触媒される−における利用である。なぜならば
、本発明者等は、バチルス・メガテリウム酵素およびグ
ルコアミラーゼが同じ時間に同じ媒質中で一緒に用いる
ことができるというように反応条件を選ぶことができる
ことを発見したからである。特に、バチルス・メガテリ
ウムα−アミラーゼ活性酵素は、供給原料がマルトデキ
ス） ＩＪンまたは液化澱粉であシ、加水分解酵素がグ
ルコアミラーゼである通常の糖化反応に次の予期しない
利点をもって添加することができる。
（ａ） 所定量のグルコアミラーゼに対しては、糖化
時間が減少され、あるいは所定の糖化時間に対しては、
使用するグルコアミラーゼの量が減少される。
時間が減少され、あるいは所定の糖化時間に対しては、
使用するグルコアミラーゼの量が減少される。
（ｂ） 同じデキストロース濃度をもつ生成物を得る
ために、加工供給原料におけるよシ高い濃度の溶解した
固体を用いることができる（１０重量％壕で多く）。そ
の代シにまたはそれに付随して、標準のプラント供給原
料またはわずかに増加した溶解した固体をもつ供給原料
から、増加したデキストロース濃度（０，５〜１重量％
増加した）およびオリゴマーの低下した濃度（ＤＰｌｌ
は０．２重量％に減少される。ここに、ＤＰは゛ゝゝデ
キストロースポリマー“ を表わし、そしてゝｎ”はポ
リマーの中のデキストロース単位の数である）をもつ生
成物を製造することができる。 。
ために、加工供給原料におけるよシ高い濃度の溶解した
固体を用いることができる（１０重量％壕で多く）。そ
の代シにまたはそれに付随して、標準のプラント供給原
料またはわずかに増加した溶解した固体をもつ供給原料
から、増加したデキストロース濃度（０，５〜１重量％
増加した）およびオリゴマーの低下した濃度（ＤＰｌｌ
は０．２重量％に減少される。ここに、ＤＰは゛ゝゝデ
キストロースポリマー“ を表わし、そしてゝｎ”はポ
リマーの中のデキストロース単位の数である）をもつ生
成物を製造することができる。 。
（Ｃ） 後記するよりな゛アルコール混濁” が減少
される。′アルコール混濁“は糖化生成物中の低重合体
成分の含量を示す。
される。′アルコール混濁“は糖化生成物中の低重合体
成分の含量を示す。
ゲルコアミラ〜ゼおよびバチルス−メガテリウム酵素が
一緒に用いられる方法は、好適には４０〜６５℃の範囲
、もつと好適には５５〜６０℃の範囲の温度で実施され
る。ｐＨは、好適には４．５〜５．５、もつと好適には
約５である。
一緒に用いられる方法は、好適には４０〜６５℃の範囲
、もつと好適には５５〜６０℃の範囲の温度で実施され
る。ｐＨは、好適には４．５〜５．５、もつと好適には
約５である。
一般に、ｐＨが低いほど低い温度が用いられ、そして逆
もまた同じである。マルトデキストリン供給原料は２０
〜４０重量％の溶解した固体、特に２５〜８５重量％の
溶解した固体を含有することができる。使用されるグル
コアミラーゼの量は乾燥物質を基準にして適切には０．
０５〜０．４０重量％、好適には０，１０〜０．２０重
量％であり、そしてバチルス・メガテリウム酵素は好適
には０．０２〜１０．０単位／ｇ乾燥物質、もつと好適
には０．１〜２．０単位／ｇ乾燥物質である。得られた
生成物は、９６重量％以上のデキストロース、好適には
９７重量％以上のデキストロース、もつと好適には９７
．５重量％以上のデスストロースを含有することができ
る。
もまた同じである。マルトデキストリン供給原料は２０
〜４０重量％の溶解した固体、特に２５〜８５重量％の
溶解した固体を含有することができる。使用されるグル
コアミラーゼの量は乾燥物質を基準にして適切には０．
０５〜０．４０重量％、好適には０，１０〜０．２０重
量％であり、そしてバチルス・メガテリウム酵素は好適
には０．０２〜１０．０単位／ｇ乾燥物質、もつと好適
には０．１〜２．０単位／ｇ乾燥物質である。得られた
生成物は、９６重量％以上のデキストロース、好適には
９７重量％以上のデキストロース、もつと好適には９７
．５重量％以上のデスストロースを含有することができ
る。
単位７ｇ乾燥物質でバチルス・メガテリウムのアミラー
ゼ活性酵素濃度を表わすことは酵素工業において通例の
ことであシ、そして酵素試料が例えばその純度などによ
り異なる活性を示すかもしれないので必要である。所定
の試料の活性は、市販されて手に入れることのできる試
験キットを用い、・そして注意深く調整された条件のも
とに酵素゛により遊離される染料の強さの光学的評価に
基づくファデパス（ＰＨＡＤＥＢＡＳ ）テストにより
測定される。酵素の活性が完全に未知の場合には、試料
を最初に水で希釈しである範囲の希釈物をつ＜シ、つい
でこの希釈物を下記する方法によって試験して試験条件
下に定量測定に対し適当な範囲において染料の光学密度
を与える希釈を見い出す。つぎに試験がこの濃度でブラ
ンク試料との比較において繰返される。
ゼ活性酵素濃度を表わすことは酵素工業において通例の
ことであシ、そして酵素試料が例えばその純度などによ
り異なる活性を示すかもしれないので必要である。所定
の試料の活性は、市販されて手に入れることのできる試
験キットを用い、・そして注意深く調整された条件のも
とに酵素゛により遊離される染料の強さの光学的評価に
基づくファデパス（ＰＨＡＤＥＢＡＳ ）テストにより
測定される。酵素の活性が完全に未知の場合には、試料
を最初に水で希釈しである範囲の希釈物をつ＜シ、つい
でこの希釈物を下記する方法によって試験して試験条件
下に定量測定に対し適当な範囲において染料の光学密度
を与える希釈を見い出す。つぎに試験がこの濃度でブラ
ンク試料との比較において繰返される。
詳細には、希釈した酵素試料２００μｌが試験管中に置
かれ、４ｍｌの緩衝液と混合される°。ブランクは２０
０μｌの脱イオン水と４ｍｌの緩衝液からなる。緩衝液
はｐＨ５に調整された酢酸ナトリウム（２０ｍ−Ｍ）お
よび塩化カルシウム（２ｍＭ）よりなる。
かれ、４ｍｌの緩衝液と混合される°。ブランクは２０
０μｌの脱イオン水と４ｍｌの緩衝液からなる。緩衝液
はｐＨ５に調整された酢酸ナトリウム（２０ｍ−Ｍ）お
よび塩化カルシウム（２ｍＭ）よりなる。
つぎに各試料にファデバス（ＰＨＡＤＥＢＡＳ）錠剤が
添加され、試料は１０秒間攪拌された水浴中に置かれ、
５５℃で１５分間保持される。ファデバス錠剤は染料と
緩衝液を含有し、２つの緩衝液系の作用により試験溶液
は６．８という最終ｐＨになる。
添加され、試料は１０秒間攪拌された水浴中に置かれ、
５５℃で１５分間保持される。ファデバス錠剤は染料と
緩衝液を含有し、２つの緩衝液系の作用により試験溶液
は６．８という最終ｐＨになる。
１５分後に、０．５モル水酸化ナトリウム１ｒｎｌを添
加するこのにより反応が停止され、試料は攪拌され、つ
いブ°約１５００ｇで５分間遠心分離されるかまたは濾
過される。つぎに試料の吸光度がｌ ａｍ光路のキュベ
ツトを用い脱イオン水と対照して６２０ｎｍで測定され
る。ブランクの吸光度が試験下の試料から引き去られ、
そしてファデバス標準曲線から単位／ｌでアミラーゼ活
性単位が測定される。ついで単位／ｌでの値が単位７ｇ
乾燥物質に変換される。
加するこのにより反応が停止され、試料は攪拌され、つ
いブ°約１５００ｇで５分間遠心分離されるかまたは濾
過される。つぎに試料の吸光度がｌ ａｍ光路のキュベ
ツトを用い脱イオン水と対照して６２０ｎｍで測定され
る。ブランクの吸光度が試験下の試料から引き去られ、
そしてファデバス標準曲線から単位／ｌでアミラーゼ活
性単位が測定される。ついで単位／ｌでの値が単位７ｇ
乾燥物質に変換される。
高テキストロースシラツブの製造におけるバチルス・メ
ガテリウム酵素の適用は勿論、この酵素はまたこのよう
なシラツブが得られるならばそのシラツブの品質の改良
に用いられることもてきる。特に、このようなシラツブ
のゝゝアルコール混濁“が、グルコアミラーゼ／バチル
ス・メガテリウム酵素を組合せて用いる方法に対し上述
したｐＨおよび温度条件下に、この酵素と接触させるこ
とにより減少されることができる。
ガテリウム酵素の適用は勿論、この酵素はまたこのよう
なシラツブが得られるならばそのシラツブの品質の改良
に用いられることもてきる。特に、このようなシラツブ
のゝゝアルコール混濁“が、グルコアミラーゼ／バチル
ス・メガテリウム酵素を組合せて用いる方法に対し上述
したｐＨおよび温度条件下に、この酵素と接触させるこ
とにより減少されることができる。
コノ゛アルコール混濁“は、その後のイオン交換体での
処理で゛全く除去されるようなレベルにまで減少される
ことができる。
処理で゛全く除去されるようなレベルにまで減少される
ことができる。
次に例を示して本発明をさらに詳しく説明する。
例に用いた装置はす了モスタソト制御の水浴中の振盪フ
レーム上に乗せられた一系列の５００ｍ１エルレンマイ
ヤーフラスコカラナった。
レーム上に乗せられた一系列の５００ｍ１エルレンマイ
ヤーフラスコカラナった。
一般（、供給原料は一定のｐＨを一定するために緩衝液
として０．０２モル酢酸ナトリウムを含有する５ ００
ｍｊ？のマルトデキストリノ溶液からなった。
として０．０２モル酢酸ナトリウムを含有する５ ００
ｍｊ？のマルトデキストリノ溶液からなった。
この溶液はまた！あたり８０ｍｇ Ｃａ” （塩化カル
今シウムの形で）を含有した。初めのｐＨ調整
は酢酸でなされ、そして反応を開始するために酵素が添
加された。反応のｐＨは溶液のｐＨを計器で１日２回測
定し、そしてｐＨが低下した場合は水酸イけｌ］リウム
を添加することに゛より制御された。
今シウムの形で）を含有した。初めのｐＨ調整
は酢酸でなされ、そして反応を開始するために酵素が添
加された。反応のｐＨは溶液のｐＨを計器で１日２回測
定し、そしてｐＨが低下した場合は水酸イけｌ］リウム
を添加することに゛より制御された。
また１００ｍ／の試料が２４時間ごとに取り出され、３
０分間沸騰することにより酵素が失活され、そしてこの
酵素が失活した溶液は濾過された。
０分間沸騰することにより酵素が失活され、そしてこの
酵素が失活した溶液は濾過された。
ついで濾過した試料のデキストロース含景が高圧液体ク
ロマトグラフィーにより測定され、そして適当な場合に
はアルコール混濁テストが実施された。
ロマトグラフィーにより測定され、そして適当な場合に
はアルコール混濁テストが実施された。
゛ゝアルコール混濁“は次のようにして測定された。
（ａ） ０．９１ｇの溶解した固体（屈折計により測定
したとき）が存在するような試料を１００ｍ１のフラス
コに入れる、 （ｂ） 全水分存在量が３．８９ｇであるように脱イ
オン水を添加する、 （ｃ） ９９．８％純度のエタノール２１ｍｔｌを添
加する、 （ｄ） 還流下に攪拌しながら９〜ｌＯ分間沸騰させ
る、 （ｅ） 流水下に冷却する、そして （ｆ） ４ｃｍセル中で５７８ナノメートルで光学密
度を測定する。
したとき）が存在するような試料を１００ｍ１のフラス
コに入れる、 （ｂ） 全水分存在量が３．８９ｇであるように脱イ
オン水を添加する、 （ｃ） ９９．８％純度のエタノール２１ｍｔｌを添
加する、 （ｄ） 還流下に攪拌しながら９〜ｌＯ分間沸騰させ
る、 （ｅ） 流水下に冷却する、そして （ｆ） ４ｃｍセル中で５７８ナノメートルで光学密
度を測定する。
例中で用いたグルコアミラーゼは、マイルスーカリ・ヘ
ミ−（Ｍｉｌｅｓ−Ｋａｌｉ Ｃｈｅｍｉｅ） から
得られる０ＰＴＩＤＥＸ Ｌ １５’０（ＯＰＴＩＤＥ
Ｘは商標である）であった。
ミ−（Ｍｉｌｅｓ−Ｋａｌｉ Ｃｈｅｍｉｅ） から
得られる０ＰＴＩＤＥＸ Ｌ １５’０（ＯＰＴＩＤＥ
Ｘは商標である）であった。
例１
供給原料は２５重量％の溶解した固体を含有し、そして
温度が５５℃に維持された。グルコアミラーゼだけでの
加水分解がこの反応に対し通常のｐＨである４、２で実
施された。バチルス−メガテリウム酵素が添加されたと
き、ｐＨは５．０に上昇された。下記の第１表は４８時
間後に得られた生成物のデキストロース含量を示す。
温度が５５℃に維持された。グルコアミラーゼだけでの
加水分解がこの反応に対し通常のｐＨである４、２で実
施された。バチルス−メガテリウム酵素が添加されたと
き、ｐＨは５．０に上昇された。下記の第１表は４８時
間後に得られた生成物のデキストロース含量を示す。
第１表
例２
位／ｇであった。その結果を第２表に示す。
１５ ９６ ９７．９２５
４８ ９４．０２５
９６ ９７．０８５ ４８
９１．６８５ ９６
９５．７例３ 溶液は２５重量％の溶解した固体を含有し、ｐＨは５で
、そしてバチルスφメガテリウム酵素の濃度は１．５単
位／ｇであった。７２時間後の結果は第８表に示すとお
シであった。
４８ ９４．０２５
９６ ９７．０８５ ４８
９１．６８５ ９６
９５．７例３ 溶液は２５重量％の溶解した固体を含有し、ｐＨは５で
、そしてバチルスφメガテリウム酵素の濃度は１．５単
位／ｇであった。７２時間後の結果は第８表に示すとお
シであった。
第３表
０．１０ ９７．２
０．０８ ９６．９
０．０５ ９８．１
例４
この系列の実験に２ける緩衝液は０，１モル酢酸ナトリ
ウムで、グルコアミラーゼの濃度は０．１５重量％、そ
してバチルス・メガテリウム酵素は１．５単位／ｇであ
った。４８時間後の結果を下記第４表に示す。
ウムで、グルコアミラーゼの濃度は０．１５重量％、そ
してバチルス・メガテリウム酵素は１．５単位／ｇであ
った。４８時間後の結果を下記第４表に示す。
第４表
４．６ ９６．０
４．８ ９６．６
５．０ ９６．８
５．２ ９６．４
５．４ ９６．１
例５
この結果は下記第５表に示すとおシである。
第５表
例６
反応溶液は１５％の溶解した固体を含有し、そしてバチ
ルス・メガテリウム酵素の変化した量の存在において６
０℃でｐＨ６に維持された。
ルス・メガテリウム酵素の変化した量の存在において６
０℃でｐＨ６に維持された。
２４０時間後の結果を下記第６表に示す。
第６表
１５ ４４．８
８０ Ｔ’１．７
グルコアミラーゼとの組み合せにおいて市販反応条件は
、供給原料溶液が３２重量％の溶解した固体を含有した
という以外は例１におけると同様であった。９６時間後
の結果は第７表に示すとおりであり、そしてこの結果は
、市販のα−アミラー゛ゼは、バチルス番メガテリウム
から得だα−アミラーゼ活性酵素と異なり、９６時間後
でさえ、グルコアミラーゼによる加水分解に改良を与え
ないことを示す。
、供給原料溶液が３２重量％の溶解した固体を含有した
という以外は例１におけると同様であった。９６時間後
の結果は第７表に示すとおりであり、そしてこの結果は
、市販のα−アミラー゛ゼは、バチルス番メガテリウム
から得だα−アミラーゼ活性酵素と異なり、９６時間後
でさえ、グルコアミラーゼによる加水分解に改良を与え
ないことを示す。
例８
グルコアミラーゼ触媒による加水分解でつくられたデキ
ストロースシラップの試料は９５．８重 １量％のデ
キストロースを含有し、そして１．５５０のアルコール
混濁をもった。
ストロースシラップの試料は９５．８重 １量％のデ
キストロースを含有し、そして１．５５０のアルコール
混濁をもった。
この試料を２つに分け、そしてこれを５５℃でｐＨ５，
０において、（ａ）バチルス・メガゾリウムＮＣＩＢ
Ｎｏ、 １１５６８のα−アミラーゼ活性酵素、および
（ｂ）市販の手に入れることができるα−アミラーゼで
処理した。この処理の結果を第８表に示す。
０において、（ａ）バチルス・メガゾリウムＮＣＩＢ
Ｎｏ、 １１５６８のα−アミラーゼ活性酵素、および
（ｂ）市販の手に入れることができるα−アミラーゼで
処理した。この処理の結果を第８表に示す。
７ｇ
（注）ｕ／ｇ一単位／ｇ
例９
５重量％の溶解した固体を含有するプルラン容液が、５
０単位／ｇのバチルス・メガテリウムＮＣＩＢ Ｎｏ、
１１５６８のα−アミラーゼ活性酵素で５５℃でｐＨ
５，６において２４時間処理された。
０単位／ｇのバチルス・メガテリウムＮＣＩＢ Ｎｏ、
１１５６８のα−アミラーゼ活性酵素で５５℃でｐＨ
５，６において２４時間処理された。
４ ２４時間の終シにプルランは９８
重量％のパノースに変換された。
重量％のパノースに変換された。
Claims (11)
- （１）多糖類を、４．５〜８．０の範囲のｐＨで、バチ
ルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅ
ｒｉｕｍ）から得られるα−アミラーゼ活性を示す酵素
と接触させることを特徴とする、酵素により多糖類を単
糖類または１つあるいはそれ以上のより低い分子量の多
糖類に変換する方法。 - （２）バチルス・メガテリウムがバチルス・メガテリウ
ムＮＣＩＢ Ｎｏ．１１５６８であることを特徴とする
特許請求の範囲第１項記載の方法。 - （３）多糖類が澱粉、部分的澱粉加水分解物、プルラン
またはサイクロデキストリンであることを特徴とする特
許請求の範囲第１項または第２項記載の方法。 - （４）バチルス・メガテリウムの酵素が、澱粉または澱
粉加水分解物からデキストロースシラップをつくるため
に、グルコアミラーゼと一緒に使用されることを特徴と
する、特許請求の範囲第１項〜第３項のいずれかに記載
の方法。 - （５）澱粉加水分解物がマルトデキストリンまたは液化
澱粉であることを特徴とする特許請求の範囲第４項記載
の方法。 - （６）温度が４０〜６５℃、好適には５５〜６０℃であ
ることを特徴とする特許請求の範囲第４項または第５項
記載の方法。 - （７）ｐＨが４．５〜５．５、好適には５．０であるこ
とを特徴とする特許請求の範囲第４項〜第６項のいずれ
かに記載の方法。 - （８）マルトデキストリンが２０〜４０重量％、好適に
は２５〜３５重量％の溶解した固体を含有することを特
徴とする特許請求の範囲第５項記載の方法。 - （９）使用するグルコアミラーゼの量が乾燥物質を基準
として０．０５〜０．４０重量％、好適には０．１０〜
０．２０重量％であることを特徴とする特許請求の範囲
第４項〜第８項のいずれかに記載の方法。 - （１０）使用するバチルス・メガテリウムから得られる
酵素の量が０．０２〜１０．０単位／ｇ乾燥物質、好適
には０．１〜２．０単位／ｇ乾燥物質であることを特徴
とする特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載
の方法。 - （１１）バチルス・メガテリウムの酵素がアルコール混
濁を示すデキストロースシラップと接触され、アルコー
ル混濁が減少されることを特徴とする特許請求の範囲第
１項または第２項記載の方法。
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| GB8414272 | 1984-06-05 | ||
| GB848414272A GB8414272D0 (en) | 1984-06-05 | 1984-06-05 | Enzymatic hydrolysis |
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|---|---|
| JPS6119498A true JPS6119498A (ja) | 1986-01-28 |
| JPH0644873B2 JPH0644873B2 (ja) | 1994-06-15 |
Family
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Family Applications (1)
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| JP (1) | JPH0644873B2 (ja) |
| CN (1) | CN85104505A (ja) |
| AT (1) | ATE65546T1 (ja) |
| AU (1) | AU585860B2 (ja) |
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| ES (1) | ES8608583A1 (ja) |
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| US3888738A (en) * | 1973-10-31 | 1975-06-10 | Hayashibara Kabushiki Kaisha | Method for purifying cyclodextrin-producing enzymes |
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-
1984
- 1984-06-05 GB GB848414272A patent/GB8414272D0/en active Pending
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1985
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Patent Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
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