JPS61109736A - 外用製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 １五立１ 本発明は、ネガマイシンまたはその塩を有効成分として
含有する外用製剤に関する。

先行技術 ネガマイシン（以下、ＮＧＭと記す）は、本発明者らに
より発見され、ストレプトマイセス・プルベオフスクス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｐｕｒｐｅｏｆｕｓｃｕ
ｓ　）に属する数種の放射菌が生産し、グラム陽性閑に
対して特にすぐれた抗菌力を有する抗生物質であり（特
公昭４６−２８８３５号公報参照）、また細菌類に起因
する植物病害に対しても有効であることが知られている
（特開昭５２−１２９２５号公報参照）。その作用機序
としてｍＲＮＡのコードンの読み誤りをおこす点で、ス
トレプトマイシン（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｔｎ）　、カ
ナマイシン（にａｎａｍｙｃｉｎ　）等のアミノグルコ
シド抗生物質と類似しているが（￥、　ＩＪｅｈａｒａ
　ｅｔａｌ、　：　Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、　
２５．８６５（１９７２））　、ＮＧＭは特にタンパク
合成の終了過程（ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　）を強く阻
害することが知られている（Ｙ、０ｃｈａｒａ、　Ｈ，
Ｈｏｒｉ、　Ｈ，Ｕｍｅｚａｗａ　：　Ｂｉｏｃｈｉｍ
。

Ｂｉｏｐｈｓ、Ａｃｔａ、、　　３７４　、　８２　（
１９７４）　　；　４４２．　２５１（１９７６））。

ところで、抗生物質療法の日常化と関連して、近年にお
ける感染症の変貌はめまぐるしいものがあり、特に緑膿
菌をはじめとしたグラム陰性菌による薬剤耐性菌の出現
は大きな課題となっている。

また、これらの菌による熱傷、外傷および術後の川面等
からの二次感染症またはその他の感染症の誘発は、我々
にとって極く身近な問題となっている。

ＮＧＭは、上記感染症等に対づる治療および予防に特に
有効な抗生物質であるといえ、大いに期待されている（
特公昭４６−２８８３５号公報、Ｊ、＾ｎｔｉｂｉｏｔ
ｉｃｓ、２３．１７０　（１９７０））　）　。しかし
、外用剤として製剤した場合は基剤中での安定性および
放出性に問題があり、未だ実用化に到ってないのが現状
である。

１１立Ｗ １刀 本発明は、上記問題を解決することを目的とし、外用剤
中のＮＧＭの放出性、安定性および有効性を検討した結
果、シクロデキストリンおよびゲル基剤を用いることに
より、主薬の分解を起すことなく短時間でＮＧＭを殺菌
濃度に到達させることができるという当業者にとっても
思わぬ発見に基づくものである。

したがって本発明による外用製剤は、ゲル基剤中にネガ
マイシンまたはその塩およびシクロデキストリンを含有
してなることを特徴とするものである。

肱呈 本発明の外用製剤によれば、基剤としてゲル基剤を使用
することにより、ＮＧＭの放出性を高め、またシクロデ
キストリンを添加することにより、ＮＧＭを一層安定的
に保持することができることにより、グラム陽性菌また
は緑膿菌をはじめとするグラム陽性菌およびその耐性菌
等による種々の感染症（ｌｌｊｉ疹、ものう炎、尋常性
毛癒、表存性膿皮症および２次感染症等）の外科的治療
および予防に多大の貢献をなすものと思われる。

更に付は加えれば、ゲル基剤を用いた本外用製剤は、次
の点に利点を有するものである。

（イ）　無脂肪性であるため脂漏性疾患の患者に対して
も適している。

（ロ）　水で容易に洗浄できるため、頭部への塗布にも
適している。

（ハ）　粘膜または分泌により湿潤する損傷部位によく
固着する。

発明の詳細な説明 ＮＧＭが公知物質であることは前記したところであって
、その構造はδ−ハイドロキシ−β〜リジン（δ−ｈｙ
ｄｒｏｘｙ−β−１ｙｓｉｎｅ）と１−メチルヒドラジ
ノ酢酸（１−ｍｅｔｈｙｌｈｙｄｒａｚｉｎｏ　ａｃｅ
ｔｉｃａｃｉｄ）から成る直鎖状ペプチドである。本発
明に用いるＮＧＭは、上記化合物の他、抗菌活性を有す
る任意の誘尋体も含むものである（特開昭５２−５９１
１２号および特開昭５２−８３６０５号各公報）。また
、これらの化合物は、強酸（たとえば塩酸、硫酸、硝酸
、安息香酸等薬学的に許容される無機または有機酸と塩
を形成することがあり、従って本発明はＮＧＭの塩をも
対象とするものである。

ＮＧＭは、ストレプトミセス・プルベオフスクス（ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｐｕｒｐｅｏｆｕｓｃｕｓ　）
に属する数種の放線菌（Ｍａ２Ｏ−０２株（微生物化学
研究所菌株番号）、ＭＡ９１・−Ｍ１株（微生物化学研
究所菌株番号）ＭＡ１０４−Ｍ１株（微生物化学研究所
菌株番号）等）から培養取得する（特公昭４６−２８８
３５号公報）か、あるいは合成的に得ることができる（
特開昭５２−５９１１２号公報、大野雄二ら：日本化学
会誌、９．１２９９　（１９８３））。

従って、ＮＧＭは必要に応じて合成するか、あるいは上
記のような放線菌から培養取得するのが普通である。

ＮＧＭは一般に白色粉末で、においはなく、水によく溶
け、低級アルコールのうちメタノールには僅かに溶ける
が、他の有機溶媒には難溶または不溶性の物質である。

ＮＧＭは、一般に低毒性である（マウスに対するＬＤ５
゜は静脈注射で２００ＩＩｔｇ／に！！以上である（特
開昭５２−５９１１２号公報参照）。）シクロデキスト
リン 本発明において用いられるシフロブキスリンは、水溶液
中または固体状態において包接化合物を形成することの
できる任意の環状オリゴ糖をいい、好ましくはグルコー
ス数が６〜８個（α−シクＯデキストリン、β−シクロ
デキストリンおよび、γ−シクロデキストリン）のもの
を使用する。

Ｌｋｌｌ 本発明でいうゲル基剤とは、水もしくは一価ないし多価
低級アルカノールたとえばエタノール、グリセリンなど
で親水性ないし水溶性高分子物質をゲル化させたもので
、透明に近いものから、不透明なものまであるが、いず
れも水洗性は比較的優れ、親水性の物質の配合に適して
いるものである。親水性高分子物質を例示すればゼラチ
ン、デンプン、カルボキシビニルポリマー、トラガント
、アルギン酸塩、セルロース誘導体（メチルセルロース
、カルボキシメチルセルロース ナイトおよびビーガムなどがあげられる。好ましいのは
、カルボキシビニルポリマー カルボキビニルポリマー もった水溶性のビニルポリマーで、主としてアクリル酸
の共重合体である（特公昭３２−４１４１号公報、アメ
リカ特許第２，７９８．０３５号明ｍｍ＞。カルボキシ
ビニルポリマーは一般に白色粉末で（水分は２％以下（
相対湿度５０％、室温での平衡水分含母８％）、１％水
溶液のｐＨ３、比重１．４１）、増粘効果、品質の均一
性、耐老化性、温度変化に対する粘度の安定性および耐
微生物性などにすぐれた無毒性、無刺激性の基剤である
。

カルボキシビニルポリマーは、撹拌しながら水を徐々に
加えていくと、均一に分散して低粘度の。

酸性溶液となり、これをたとえば水酸化ナトリウム溶液
、アンモニア水、トリエタノールアミン、゛モノエタノ
ールアミン、ジイソプロパツールアミンおよびトリエチ
ルアミン等の任意のアルカリ性物質で中和すると所要の
ｐＨを持った高粘度溶液を得ることができる。ゲル基剤
としてはカルボキシごニルポリマーを０．２〜２．０％
含み、ｐＨが４〜１０に調整されたものがよい。

外用製剤 本発明における外用製剤は、ＮＧＭ、シクロデキストリ
ンおよびゲル基剤の３種の必須成分を適宜製剤上の補助
成分（保存剤、着色剤、乳化剤等）と混合し、常法に従
って軟膏剤（口腔軟膏および眼軟膏をも含む）、クリー
ム剤およびリニメント削なとの形態に調整可能である。

必要に応じて、副腎ホルモン（ベタメタシン、ヒドロコ
ルチゾン等）伯の抗生物質または抗ヒスタミン薬（ジフ
ェンヒドラミン等）等の他剤を配合することもできる。

本発明外用製剤の好ましい製剤形態は軟１１製剤である
。

本外用製剤中の組成は、剤形により適宜変更されるが、
通常は本製剤中ＮＧＭ０．５％〜３％及びシクロデキス
トリン０．３〜２％含有するものである。

以上示した外用製剤は、たとえば気密容器に入れて固く
密関するか、チューブ等に入れて保存することができる
。

用法および用ｍは、通常、症状により適Ｒを１日１〜数
回、直接患部に塗布するかまたは無菌ガーゼにのばして
貼付するのが望ましい。

本発明による外用製剤は、グラム陽性菌またはグラム陰
性菌およびその耐性菌等による感染症治療および予防に
有効である。

なお本外用製剤は、ＮＧＭが低毒性であること、またゲ
ル基剤およびシフロブキスリンが製剤上許容されたもの
であることより、毒性の点で問題がないものと思われる
。

１凰１ １）　軟膏試料の調製 （イ）　ゲル基剤 ハイビスワコ−Ｎｏ１０４　　　（５ｇ、１０ｇ（和光
純薬）　　　　　　　　または１５ｇ）１０％水酸化ナ
トリウム　　　　適　量全　　ｆｆｉ　　　　　　１０
００９ ｔａｕ＋，ながら、精製水中にハイビスワコ−Ｎ０１０
４（和光純薬）の必要ｆｆｉ（５ｇ、１０ｇまたは１５
ｇ）を徐々に加え、かたまりのない低粘度の曇った液に
なるまで分散させ、更に１０％水酸化ナトリウムで中和
して、ゲル基剤を調製した。

（口）　乳剤性基剤 白色ワセリン　　　　　　　　　２５０ｇステアリルア
ルコール　　　　　２２０ｇプロピレングリコール　　
　　　１２０ｇラウリル硫酸ナトリウム　　　　　１５
ｇ全　　ｆｆｉ　　　　　　１０００ｇ 第十改正日本薬局方収載の親水軟膏の製法に従って、親
水性基剤を調製した。

（ハ）　乳剤性基剤 流動パラフィン　　　　　　　　　５０ｇ全　　雇　　
　　　１０００９ 流動パラフィンに白色ワセリンを徐々に加え、よく練合
して、油脂性基剤をＷ４製した。

以上調製した３種の基剤に、必要徂のＮＧＭを加え、均
等に混合するように研和して、被検体とした。

２）　　ＮＧＭの定ｍ （イ）　高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によ
る定６１ 室温でＮＧＭの０．０５Ｍリン酸緩衝液（１）８６．８
）に過剰量の７０レサミン （ｆｌｕｏｒｅｓｃａｍｉｎｅ　）　　（ｐ、Ｂｏｈｌ
ｅｎ、　ｅｔａｌ、、　Ａｒｃｈ。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ、、１６３．３９０
　（１９７４）　）のジオキサン溶液をすばやく加え、
約１分間電動ミキサーで撹拌して検体をｗ４製し、その
後、ｈ速液体クロマトグラフィー（以下ＨＰＬＣと記す
）　（ポンプ：日立６５５、カラム：　ＮＬＩＣＬＥＯ
８Ｉ　Ｌ■５Ｃ１８（ナーゲル）を充填したステンレス
鋼製カラム（８ｊＩＩｍ×２５０＃ｌ１１）、内部標準
物質：Ｄ−グルタミン酸、移動相：メタノール１０．１
Ｍ酢酸混合液（４０：　６０））により分離し、溶出さ
れる蛍光物質を検出器（日立６５０−１０１Ｃ）を用い
て、励起波長３９０−１蛍光波長４７７ｍで測定を行な
つ七。このようにして得られたＮＧＭとフロレサミン（
ｆｌｕｏｒｅｓａｎ＋１ｎｅ）との複合体のクロマトグ
ラフ、第１図に示す通りである。

ＮＧＭと７０レサミン（ｆｌｕｏｒｅｓｃａｍｉｎｅ　
）　Ｊ＝　１７）複合体は、保持時間９．１分、１３．
４分および２２分に３本のピーク（２〜４）を示しく内
部標準物質（Ｄ−グルタミン１ｉｄ）のピーク（５）の
保持時間は、２８分であった。）、このうち最も分離が
良好なピーク４を選んで（ＮＧＭに２分子の７０レサミ
ン（ｒｌｌＪＯｒｅｓａｌｉｎｌｌりが置換したもの）
、そのピーク高さ比とＮＧＭの濃度との関係をプロット
して検但線（第２図）を作成して、以下の実験に供した
。

（ロ）　カップ法による定量 シュードモナス・エルギノーザ（Ｐｓｒｄｏｍｏｅ＋ａ
ｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）　Ｉ　Ｆ　０　３９２３を感
性ディスク用培地（０水）を用いて試験菌数Ｉ　Ｘ　１
０６個／ｄに調製した薄層平板にカップ（８φ×１０＃
ＩＩ＋）を起き、０．０５Ｍリン酸緩衝液（ρ８６．８
）で段階希釈したＮＧＭを該カップに満たした後、３７
℃で１９時間培養し、阻止円径（ｔｍ　）を測定して標
準曲線（第３図）を作成した。

その結果、ＮＧＭの濃度に比例して阻止円径の増大が認
められた。従って、以゛後の実験において、ＮＧＭの放
出量の増減は阻止内径（姻）にて判断することとする。

３）　　ＮＧＭの放出性 （イ）゛　トＩＰＬｃによる検討 ゲル基剤、乳剤性基剤および油脂性基剤の３秤の軟膏基
剤（いずれもＮＧＭ含量１　ｗ／ｗ％）について、５Ｍ
１６７５３型軟膏放出シミユレーター（５ａｒｔＯｒｉ
ＵＳ社製）を用いて周知方法（Ｈ，Ｏｔａｇｉｒｉ。

ｅｔａｌ、、　　Ｃｈｅｇ＋、’Ｐｈａｒｔ　　Ｂｕｌ
ｌ、、　　　６．　２４０１　〜２４０５（１９８４）
　）に従ってＮＧＭを放出させ（隔膜には、１５．９ｃ
ｉのセロハン膜（ＳａｔｒｉＬＩＳ、Ｂａｒｒｉｅｒｅ
ｆＯｌ　１０８Ｍ１６７５４）を用い、放出液には０．
０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６，８）を使用して３４℃、
１２ｄ／ｓ＋ｉｎで放出液を循環させた）、１時間毎に
４時間、放出されるＮＧＭを前記ＨＰＬＣによる定量法
に従って定量した。

（の結果、第４図に示すように、ＮＧＭの放出量はゲル
基剤が最も優れ、ついで乳剤性基剤、油脂性基剤の順で
あった。

（ロ）　カップ法による検討 あらかじめ感性ディスク用培地（０水）を用いてシュー
ドモナス・エルギノーザ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅ
ｒｕａｉｎｏｓａ）　Ｉ　Ｆ　Ｏ３９２３を１×１０６
個／〆に調製して、薄層平板とした。

これにゲル基剤、乳剤性基剤および油脂性基剤の３種の
快音基剤（ＮＧＭ含ｐｉ　ｌ　ｗ／ｗ％）を充填したカ
ップ（φ８Ｘ１０ｍ＞を置き、３７℃で１９時間培養し
た後、阻止円径（ｕｔｍ　）を測定したく竹原光教ら、
薬学雑誌、虹、　１２９５　（１９７７）　）。

その結果、下表に示１ように、阻止円径はゲル基剤が一
番大きく、ＮＧＭの放出量はゲル基剤が最も浸れている
といえる。

４）　ゲル基剤中のＮＧＭ含吊増加に伴うＮＧＭの放出
挙動 ケル基剤中のＮＧＭの含ｆｌｏ、５．１．０および１，
５ｗ／ｗ％の３種類に調製し、前記カップ法による検定
法に従って３７℃で１９時間培養した後、阻止円径（ｗ
ｒ　）を測定した。

その結果、阻止円径は下表に示したようにＮＧＭの含量
増加に伴い増大することが認められ、ＮＧＭのゲル基剤
中での放出性は用量依存的に増５）　ゲル基剤を用いた
ＮＧＭの抗菌活性スタフィロコッカス・アウレウス（５
ｔａｐｈｙｌ。

ｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　）　Ｉ　Ｆ　Ｏ３０６０
、シュードモナス・エルギノーザ（ＰＳ１３ＬＩｄＯＩ
ＯｎａＳ　ａｅｒｔｌｌＪｉｎＯ３ａ）１１”０　３９
２３、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｖｕ
ｌａａｒｉｓ）　Ｉ　ＦＯ３１６７およびセラティア串
マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃｅｎ
ｃｅ　）　ＩＦＯ３０４６の４１類の試験菌をミューラ
ー・ヒルトン（１４ｕｅｌ　Ｉｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎ）培
地（Ｄｉｒｃｏ　）を用いて試験菌数をＩ　Ｘ　１０６
個／−に調製した薄層平板に、ＮＧＭをそれぞれ１　ｗ
／ｗ％、１３よび２Ｗ／Ｗ’）６含有するゲル基剤を充
填したカップ（φ８Ｘ１０１１ｍ）を首き、３７℃で約
１９時間培養した後、駆出内径（ａｍ　）を測定した（
住木論介ら、「抗生物質（上）」東京大学出版会、東京
、１９６１、Ｐｉ　２２）。

その結果、Ｎ１１ト円１￥は、下表に承りようにシュー
ドモナス・エルギノーザＩＦＯ３９２３に対して（ｆＪ
ら大きな１直を示し、スタフィロコッカス・アウレウス
ＩＦＯ３０６０に対しては小さかった。

しかし、ゲル基剤中のＮＧＭ含串を２　ｗ／ｗ％に増加
さＬることにより、４種の試験菌する抗菌力は全体的に
増大し、スタフィロコッカス・アウレウスＩＦＯ３０６
０に対しても十分な抗菌作用が認められた。

このことより、ゲルＬ（剤を用いたＮＧＭ外用剤番よ、
グラム陽性菌あるいはグラム陰性菌等による秤々の疾病
に有用であることがわかった。

６）　　ＮＧＭの安定性試験 実験方法 下記に示す軟膏試料的２ｇをサンプル瓶に密封して４０
℃の定温器に保存し、紅時的に軟情試料を採取しく５日
、１５日、３０日、６０日後）、軟膏中のＮＧＭ残存ｍ
を前記カップ法により定ｆｆ１ｊした（なお、残存り（
％）は、対照として新しく調製したＮＧＭ軟膏試料の阻
止内径（ａｍ　）を１００％としてＮＧＭの残存ｍを表
示した）。

（イ）・・・ＮＧＭ（２ｗ／ｗ％）＋グル基剤（ハイビ
スワコ−ＮＯ１０４，１，５ｗ／ｖ％）（ロ）ネガマイ
シン（２ｗ／ｗ％）十九剤性基剤（ハ）・・・ＮＧＭ（
１ｗ／ｗ％）＋グル基剤（ハイビスワコ−Ｎｏ１０４、
ｌ、５ｗ／ｖ％）（ニ）　−Ｎ　Ｇ　Ｍ　（１ｗ／ｗ％
）　＋　ケル１ｌｌｌ　（Ａ　イＬスワＬ＋−８０１０
４，１，５ｗ／ｖ％）＋β−シクロデキストリン（２％
） ゲル基剤中のＮＧＭ（２ｗ／ｗ％）と乳剤性基剤中のＮ
ＧＭ（２ｗ／ｗ％）との安定性を比較した結果は、第５
図に示す通りであった。

また、ゲル基剤中のＮＧＭ（１冑／Ｗ％）とゲル基剤＋
β−シク０デキストリン中のＮＧＭ（ＩＷ／Ｗ％）との
安定性を比較した結果は、第６図に示す通りであった。

ＮＧＭは乳剤性基剤中よりもゲル基剤中でより安定であ
り、またシクロデキストリンを加えることにより更に安
定性が増強されることがわかった。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ＮＧＭと７０レサミン複合体のクロマトグラ
グラフを模写したものである。 第２図は、ＮＧＭの濃度とクロマトグラフのピーク高さ
比との関係を示し検量線である。 第３図は、ＮＧＭの濃度とシュードモナス・工ルギノー
サに対するＮＧＭの阻止円径を示した標準曲線である。 第４図は、ゲル基剤、乳剤性基剤および油脂性基剤中の
ＮＧＭの放出量を経時的に示したグラフである。 第５図は、ゲル基剤中のＮＧＭと乳剤性基剤中のＮＧＭ
との安定性を比較したグラフである。 第６図は、ゲル基剤中のＮＧＭとゲル基剤＋β−シクＯ
デキストリン中のＮＧＭとの安定性を比較したグラフで
ある。 出願人代理人　　猪　　股　　　　清 イ呆′Ｓ時間（分） ＮＧＭの）農洩（ｘ　１０−７モル） ＮＣｒ１ＪＩの濃Ｗｊ＝　ＣＩＱ／ｍ、ｌ）第４図 ム：ゲル基剤 ・：乳１！ｌＩ性基剤 ■：油脂性基剤 δ 放置時間（時間） ム：ゲル暴寿」 ・：乳剤ａ基剤 放置時間　（白） ■ニゲル基剤＋β−シクロデキストリン・　：　ゲル迦
１１」 放置時間（８）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ゲル基剤中にネガマイシンまたはその塩およびシクロデ
   キストリンを含有してなる外用製剤。