CN115590787B - 一种用于祛痘和皮肤修复的组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于祛痘和皮肤修复的组合物及其制备方法与应用，所述组合物包括分子量为1,000kD～3,000kD的高分子量酵母β葡聚糖和分子量为1kD～100kD的低分子量的酵母β葡聚糖。本发明将低分子量的酵母β葡聚糖与高分子量的酵母β葡聚糖复配形成混合物，起到功能复配的作用，高分子量酵母β葡聚糖可以在痤疮表明形成一层保护膜，起到隔离有害致病菌进一步感染，低分子量酵母β葡聚糖可以被吸收，修复受损皮肤和消炎。
Description
技术领域
本发明属于医药化工及医疗器械技术领域，具体涉及一种用于祛痘和皮肤修复的组合物及其制备方法与应用。
背景技术
皮肤作为人体表面积最大的器官，皮肤表面上存在很多微生物群，包括细菌、真菌、病毒和衣原体，这些微生物与皮肤表面的组织细胞及各种分泌物、微环境等共同组成一个微生态系统，也就是皮肤微生态。当皮肤微生态处于和谐平衡的状态，将有利于皮肤的健康，反之则会出现痤疮、皮炎等各类皮肤问题。
痤疮俗称青春痘，是一种好发于毛囊皮脂腺的慢性炎症性皮肤疾病，常由于以痤疮丙酸杆菌为主的微生物定植于毛孔并大量繁殖，堵塞毛孔，引起毛囊感染而造成的。当前，针对痤疮的治疗，一般为控制皮脂分泌、改善角化异常、抗细菌感染以及消炎等。常见的痤疮治疗药物如抗生素、维生素A酸、过氧化苯甲酰、以及植物杀菌抑菌成分等，虽能达到抑制痤疮丙酸杆菌等作用，但存在耐药、刺激性大和依赖性等问题，严重影响了痤疮的治疗效果。此外，这类杀菌产品容易破坏皮肤表面菌群生态平衡，从而造成更严重的皮肤问题。目前市场上治疗痤疮的功效成分一般都是杀菌剂，这些成分只能单纯的起到杀菌作用，而消炎效果有限，对皮肤疤痕的修复更是没有效果。因此，本领域急需开发一种结构明确、具有良好预防和治疗痤疮愈合和对皮肤疤痕修复的产品。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种用于祛痘和皮肤修复的组合物。
本发明还提出一种用于祛痘和皮肤修复的产品。
本发明还提出一种具有上述产品的制备方法。
本发明还提出上述组合物和产品的应用。
本发明还提出一种化妆品。
本发明还提出一种产品。
根据本发明的一个方面，提出了一种用于祛痘和皮肤修复的组合物，所述组合物包括分子量为1000kD～3,000kD的高分子量酵母β葡聚糖和分子量为1kD～100kD的低分子量的酵母β葡聚糖。高分子量酵母β葡聚糖可以在痤疮表面形成一层保护膜，起到隔离有害致病菌进一步感染，低分子量酵母β葡聚糖可以被吸收，修复受损皮肤和消炎。
在本发明的一些实施方式中，所述β葡聚糖的结构以β-1,3-连接为主链，平均每3-7个主链葡萄糖残基上含有1-2个以β-1,6-连接的葡萄糖侧基，所述β葡聚糖的结构如式(I)所示：
其中，l为0-50为整数，优选地为0-10，更优选地为0-3，更优选地为1-2，更优选地为1；m为≥0的整数，优选地为0-19，优选地为0-4，更优选为0-1，更优选地为0；n为≥5的整数，优选地为10-1000，更优选地为20-100。
在本发明的一些实施方式中，所述组合物包含以下重量百分比的组分：高分子量酵母β葡聚糖0.08％～0.5％和低分子量的酵母β葡聚糖0.3％～0.8％。
在本发明的一些实施方式中，所述组合物包含以下重量百分比的组分：高分子量酵母β葡聚糖0.1％～0.3％和低分子量的酵母β葡聚糖0.5％～0.7％。
在本发明的一些实施方式中，所述组合物包含以下重量百分比的组分：高分子量酵母β葡聚糖0.2％和低分子量的酵母β葡聚糖0.6％。
在本发明的一些实施方式中，所述高分子量酵母β葡聚糖的分子量为1000kD～1,500kD。
在本发明的一些实施方式中，所述高分子量酵母β葡聚糖的分子量为1100kD～1,300kD。
在本发明的一些实施方式中，所述高分子量酵母β葡聚糖的分子量为1250kD。
在本发明的一些实施方式中，所述低分子量的酵母β葡聚糖的分子量为10kD～50kD。
在本发明的一些实施方式中，所述低分子量的酵母β葡聚糖的分子量为10kD～20kD。
在本发明的一些实施方式中，所述低分子量的酵母β葡聚糖的分子量为10kD～20kD。
在本发明的一些实施方式中，所述低分子量的酵母β葡聚糖的分子量为18kD。
在本发明的一些实施方式中，所述组合物还包括百分含量为1％～2％的海藻糖。
在本发明的一些实施方式中，所述组合物还包括酵母菌多肽、低聚异麦芽糖、增稠剂、防腐剂、保湿剂和pH平衡剂。
在本发明的第二方面，提出了一种用于祛痘和皮肤修复的产品，所述产品包括高分子量酵母β葡聚糖、低分子量的酵母β葡聚糖、海藻糖、酵母菌多肽、低聚异麦芽糖、增稠剂、防腐剂、保湿剂和pH平衡剂。
在本发明的一些实施方式中，所述产品包含以下重量百分比的组分：高分子量酵母β葡聚糖0.08％～0.5％、低分子量的酵母β葡聚糖0.3％～0.8％、1％～2％的海藻糖、酵母菌多肽0.5％～2％、低聚异麦芽糖0.5％～2％、增稠剂0.1％～0.8％、防腐剂0.1％～0.5％、保湿剂3％～8％和pH平衡剂0.01％～0.08％。
在本发明的一些实施方式中，所述增稠剂包括卡波姆或水溶性壳聚糖。
在本发明的一些实施方式中，所述卡波姆选自以下成分中的至少一种：卡波姆940、卡波姆941、卡波姆934。
在本发明的一些实施方式中，所述防腐剂包括羟苯甲酯钠、苯甲酸、苯甲酸钠、苯氧乙醇、山梨酸和山梨酸钠中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述保湿剂包括甘油、丙二醇、双丙甘醇和丁二醇中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述pH平衡剂包括三乙醇胺、盐酸、柠檬酸、磷酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的至少一种。
在本发明的第三方面，提出了上述产品的制备方法，包括以下步骤：将上述组合物、海藻糖、酵母菌多肽、低聚异麦芽糖、增稠剂、防腐剂和保湿剂混合，加水搅拌均匀，再加入pH平衡剂调节pH至5.0-7.0即得。
在本发明的第四方面，提出了上述组合物和产品的应用，所述应用为在制备化妆品中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述化妆品的制剂类型是膏霜、乳剂、精华液、冻干粉或面膜。
在本发明的一些实施方式中，所述应用为在制备治疗唑疮的产品中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述应用为在制备抑制皮肤致病菌的产品中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述皮肤致病菌包括痤疮丙酸杆菌。
在本发明的一些实施方式中，所述应用为在制备修复皮肤创伤的产品的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述皮肤创伤包括烧伤、烫伤、痤疮、切口留下的疤痕及增生。
在本发明的一些实施方式中，所述产品为药品或医疗器械。
在本发明的一些实施方式中，所述药品还包括药用载体和/或药用辅料。
在本发明的一些实施方式中，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述赋形剂包括水。
在本发明的一些实施方式中，所述填充剂包括淀粉和蔗糖中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述黏合剂包括纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述湿润剂包括甘油。
在本发明的一些实施方式中，所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述吸收促进剂包括季铵化合物。
在本发明的一些实施方式中，所述表面活性剂包括十六烷醇。
在本发明的一些实施方式中，所述吸附载体包括高岭土和皂黏土中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁和聚乙二醇中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述医疗器械为凝胶。
在本发明的一些实施方式中，所述药品的形式为粉剂、膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、锭剂、颗粒、贴剂、胶囊剂、喷雾、片、丸和溶液中的一种。
在本发明的第五方面，提出了一种化妆品，包括上述组合物和辅料。
在本发明的一些实施方式中，所述辅料为防腐剂、螯合剂、香精、保湿剂、增稠剂、着色剂、乳化剂、抗氧化剂和皮肤调理剂中的至少一种。
在本发明的第六方面，提出了一种产品，包括上述组合物或用于祛痘和皮肤修复的制剂。
在本发明的一些实施方式中，所述产品为药品、化妆品或医疗器械。
在本发明的一些实施方式中，所述药品还包括药用载体和/或药用辅料。
在本发明的一些实施方式中，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述赋形剂包括水。
在本发明的一些实施方式中，所述填充剂包括淀粉和蔗糖中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述黏合剂包括纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述湿润剂包括甘油。
在本发明的一些实施方式中，所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述吸收促进剂包括季铵化合物。
在本发明的一些实施方式中，所述表面活性剂包括十六烷醇。
在本发明的一些实施方式中，所述吸附载体包括高岭土和皂黏土中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁和聚乙二醇中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，所述医疗器械为凝胶。
在本发明的一些实施方式中，所述产品的形式为粉剂、膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、锭剂、颗粒、胶囊剂、喷雾、片、丸和溶液中的一种。
根据本发明的一些的实施方式，至少具有以下有益效果：本发明将低分子量的酵母β葡聚糖与高分子量的酵母β葡聚糖复配形成混合物，起到功能复配的作用，高分子量酵母β葡聚糖可以在痤疮表明形成一层保护膜，起到隔离有害致病菌进一步感染，低分子量酵母β葡聚糖可以被吸收，修复受损皮肤和消炎。且酵母β葡聚糖混合物与海藻糖复配起到协同抑菌的作用，抑制唑疮杆菌，达到抑痘的作用；同时，本发明还以酵母β葡聚糖混合物、海藻糖、酵母菌多肽等物质为有效成分进行复合，在痤疮或伤疤表面形成保护膜，可以隔离有害菌的感染，同时部分有效成分被吸收发挥抗炎和皮肤修复作用，大大缩短了愈合时间，祛除疤痕。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
图1为本发明实施例1中的酵母β葡聚糖纯化的流程图；
图2为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图3为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图4为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图5为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图6为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图7为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图8为本发明测试例中的皮肤修复组合物对痤疮的作用效果图；
图9为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较轻疤痕修复的作用效果示例结果图；
图10为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较轻疤痕修复的作用效果示例结果图；
图11为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较轻疤痕修复的作用效果示例结果图；
图12为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较重疤痕修复的作用效果示例结果图；
图13为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较重疤痕修复的作用效果示例结果图；
图14为本发明测试例中的皮肤修复组合物对较重疤痕修复的作用效果示例结果图。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1不同分子量酵母β葡聚糖的制备
本实施例制备了不同分子量酵母β葡聚糖，具体过程为：
取市售酵母β葡聚糖适量，使其溶解于纯化水中，摇匀，得到约40mg/ml的酵母β葡聚糖溶液，经0.22μm滤膜过滤。
将已溶胀好的层析填料装柱，采用纯化进行压柱，至柱均匀性达到要求；装柱完成后，使用3倍柱体积的纯水平衡层析柱。层析柱平衡后进行上样，上样浓度为40mg/ml。采用纯水进行洗脱，将首先收集的洗脱液弃去，然后分步收集洗脱液，再使用高效凝胶渗透色谱测定其分子量分布。合并多糖分子量分布一致的洗脱液，浓缩后冷冻干燥。纯化流程图如图1所示。分别制备得到分子量＜10kD的酵母β葡聚糖、分子量为10kD～100kD的酵母β葡聚糖、分子量为110kD～500kD的酵母β葡聚糖、分子量为510kD～1,000kD的酵母β葡聚糖和分子量为1,000kD以上的酵母β葡聚糖。
实施例2一种生物多糖制剂
本实施例制备了一种生物多糖制剂，含有分子量100kD以下及1,000kD以上的β葡聚糖，分子量100kD以下及1,000kD以上的β葡聚糖的添加质量比为3:1。
实施例3一种祛痘和皮肤修复组合物
本实施例制备了一种祛痘和皮肤修复组合物，配方如表1所示。
表1
制备方法如下：
(1)根据表1中各组分的含量记载，分别称取纯化水、海藻糖、酵母β葡聚糖1(分子量为18kD)、酵母β葡聚糖2(分子量为1250kD)、低聚异麦芽糖、羟苯甲酯钠、酵母菌多肽、甘油至配料罐中，开启搅拌至完全溶解。
(2)再将卡波姆941加入配料罐中，搅拌至完全溶胀。
(3)在配料罐中加入适量的三乙醇胺，调整pH值至6.0(5.0-7.0均可)。
(4)真空脱气，降温。
测试例
1、不同生物多糖制剂对痤疮的体外抑菌试验
A.细菌悬浮液制备
(1)对于每个分离菌(Cutibacterium acnes痤疮丙酸杆菌购于标准物质网，等同ATCC 11827)，从新鲜的琼脂平板中选择3至5个形态相同的分离菌落，使用无菌环或棉签转移到含有3-4mL厌氧营养培养基试管中，搅拌。
(2)在225rpm/min的摇瓶中以35-37℃的温度培养72h，至等于或大于麦克法兰0.5标准的浊度。
(3)对细菌悬浮液进行稀释，麦氏浓度(1×108)按1：100即取150μL菌液至15mL肉汤，稀释至含有约1×106CFU/mL菌液备用。
B.配制溶液
(1)根据说明准备厌氧培养基，加蒸馏水煮沸搅拌溶解，高温高压灭菌(121℃15min)，冷却备用。
(2)配制10mL浓度为3.0μg/mL盐酸多西环素为阳性药物母液，以生物级DMSO：蒸馏水(1：3)混合液作为溶剂。(文献参考MIC约为0.08μg/mL)。
(3)分别配制320μL样品溶液(灵芝β葡聚糖、燕麦β葡聚糖、香菇β葡聚糖、酵母β葡聚糖(分子量10kD以下)、酵母β葡聚糖(分子量10kD～100kD)、酵母β葡聚糖(分子量110kD～500kD)、酵母β葡聚糖(分子量510kD～1,000kD)、酵母β葡聚糖(分子量1,000kD以上)、实施例2制备得到的多糖制剂(筛选得到的具体分子量为18kD的低分子量酵母β葡聚糖与分子量为1250kD的高分子量酵母β葡聚糖)、实施例3制备得到的用于祛痘和皮肤修复的组合物(包括分子量为18kD的低分子量酵母β葡聚糖与分子量为1250kD的高分子量酵母β葡聚糖与海藻糖)、海藻糖、透明质酸钠)母液，浓度均为51.2mg/mL，以生物级DMSO：蒸馏水(1：3)混合液作为溶剂。
C.抗菌实验
(1)从无菌包装中取出96孔微量滴定板。
(2)取9个EP管，向第一个EP管中加入300μL样品或阳性药母液，并向第2至第8个EP管加入150μL厌氧培养肉汤，从第1个EP管吸取150μL样品溶液于第2个EP管充分混匀，再从第2个EP管吸取150μL混合液于第3个EP管中，依次类推至第7个EP管。此时各EP管中的样品浓度依次为102.4，51.2，25.6，12.8，6.4，3.2，1.6mg/ml。分别取EP管的样品各50μL至A1，A2，取第二个EP管的样品各50μL至B1，B2，以此类推。H行不加样品，只加50μL培养基作为空白对照。
(3)随后在1到8孔分别加入50μL之前配好的菌液，使每孔最终药物浓度51.2，25.6，12.8，6.4，3.2，1.6，0.8，0mg/ml。在96孔板盖上记录相应的细菌名称、药物和日期。把制备好的96孔板放进30℃恒温厌氧培养箱中培养72h，目视观察每孔澄清度读取结果。
(4)设置与样品同比例的DMSO的纯水溶液作为溶剂对照，以厌氧培养基作为空白对照在每列的第8孔，以盐酸多西环素为阳性对照。
(5)观察对照孔是否正常。再读取无细菌生长的药物的最低浓度作为MIC值。
表2对痤疮丙酸杆菌的抑制效果
实验结果如表2所示，从表中可以看出，不同来源的β葡聚糖对痤疮丙酸杆菌均有不同的抑制活性，来源一致但不同分子量的酵母β葡聚糖对痤疮丙酸杆菌均有不同的抑制活性，由两种分子量(分子量10万以下及100万以上)组合的酵母β葡聚糖对痤疮丙酸杆菌的抑菌活性明显增强，实施例3中在两种分子量(分子量10万以下及100万以上)组合的酵母β葡聚糖的基础上加入海藻糖等物质制备得到的祛痘和皮肤修复组合物对痤疮丙酸杆菌的抑菌活性最强。
2、祛痘和皮肤修复组合物对痤疮的作用效果评估
1、观察对象
征集50名志愿者，年龄21-50周岁，具有不同程度痤疮的青年患者。
2、使用方法
将实施例3制备得到的祛痘和皮肤修复组合物，洁面后，直接涂抹于面部皮肤。使用周期为15天。
使用结果如图2-8所示，从图中可以看出，志愿者在使用3～5天后，原有丘疹逐渐消退，脱皮现象也得到有效缓解，使用5～15天后，得到有效控制，痤疮数量减少，单个痤疮体积变小，且很快消退，显示有较好的促进痤疮愈合的作用。
3、祛痘和皮肤修复组合物对较轻疤痕修复的作用效果示例
志愿者1，其胳膊上有一条伤疤，如图9所示，疤痕呈浅粉色，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续5天以后，疤痕变小，颜色变浅。
志愿者2，其手背上有疤痕，如图10所示，疤痕呈浅粉色，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续4天以后，疤痕变小，颜色变浅，在第12天时，疤痕完全修复。
志愿者3，其手背上有疤痕，如图11所示，疤痕呈长条形，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续5天以后，疤痕变小，颜色变浅，在第15天时，疤痕已经不明显。
4、祛痘和皮肤修复组合物对较重疤痕修复的作用效果示例
志愿者4，左脸疤痕经过缝合，如图12所示，疤痕呈粉色，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续5天以后，疤痕变小，颜色变浅，在第12天时，疤痕已经不明显。
志愿者5，左脸疤痕经过缝合，如图13所示，疤痕呈粉色，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续5天以后，疤痕变小，颜色变浅，在第10天时，疤痕已经不明显。
志愿者6，左脸疤痕明显红肿，如图14所示，疤痕呈粉色，在伤疤上涂抹实施例3的祛痘和皮肤修复组合物，连续4天以后，疤痕变小，颜色变浅，在第8天时，疤痕已经不明显。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
Claims (9)
1.一种用于祛痘和皮肤修复的制剂，其特征在于，所述制剂包含以下重量百分比的组分：分子量为1,250kD的高分子量酵母β葡聚糖0.1%~0.3%、分子量为18kD的低分子量酵母β葡聚糖0.5%～0.7%、海藻糖1%~2%、酵母菌多肽0.5％～2％、低聚异麦芽糖0.5％～2％、增稠剂0.1％～0.8％、防腐剂0.1％～0.5％、保湿剂3％～8％和pH平衡剂0.01％～0.08％，其中所述低分子量酵母β葡聚糖与高分子量酵母β葡聚糖的质量比为3:1。
2.一种如权利要求1所述的制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将所述的高分子量酵母β葡聚糖、低分子量酵母β葡聚糖、海藻糖、酵母菌多肽、低聚异麦芽糖、增稠剂、防腐剂和保湿剂混合，加水搅拌均匀，再加入pH平衡剂调节pH至5.0-7.0即得。
3.权利要求1所述的制剂在制备用于痤疮的药品或医疗器械中的应用。
4.权利要求1所述的制剂在制备用于痤疮的化妆品中的应用。
5.权利要求1所述的制剂在制备用于修复皮肤创伤的药品、化妆品或医疗器械中的应用。
6.根据权利要求3或5所述的应用，其特征在于，所述药品中还包括药用载体。
7.根据权利要求3或5所述的应用，其特征在于，所述药品中还包括药用辅料。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药用载体中包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。
9.根据权利要求3或5所述的应用，其特征在于，所述药品的形式为粉剂、膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、锭剂、颗粒、胶囊剂、喷雾、片、丸中的一种。
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