JPS6091997A - モノアミンオキシダ−ゼ活性の測定方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、彼検試刺、特に生体試料中のモノアミンオキ
／ダーゼ活性の測定方法に関する。 千ノアミンオキシターセは、生体中では肝、膵、心、小
腸、腎、牌、甲伏線、脳、肺、胎盤、［ｒＩ［液、ミト
コンドリアなどに広く分布している。血中のモノアミン
オギ７ダーゼは、実質臓器ミトコンドリア く異なり、結合組織中のモノアミンオキ／ダーゼに由来
する部分が多く、臓器線卸症、特に肝内の１腺維増生と
いう川、象を血中のモノアミンオキ／ダーゼ活性値上り
Ｊｌｌ［渥することができる，っ従って、血中モノアミ
ンＡオ／ターセ活性を測定することは、臓器線維症、！
１４に肝線維症の診断に極めて有用である。 本酵素の訓５１テか法は数多くあるが、血中モノアミン
オキ／ダーゼ活性の測定の原理は、モノアεンオキ／ダ
ーセが反応式［Ｉ］の化学反応に於て、モノアミンの酸
化的脱アミン化を触媒することに基づくものである。 ＰＣ１１２　Ｎｌｈ　＋（４２　１川１００・七７ア′
Ｆ．／：Ａキンダーゼ □−りＩｉＣＨＯ＋ＮＩ−ｈ　＋１ｈＱ２．　・　〔ｌ
〕従来、イｊわれているモノアミンオキ／ダーゼ活性の
測定法としては、モノアミンオキシクーセの基質として
生成物が直接呈色するものを用いる方法、生成するアル
デヒドを発色剤を用いて直接発色させる方法、あるいは
生成する過酸化水素を測定する方法等があるが、これら
はいずれも基質に制約があっ・たり、捷だ使用し得る呈
色反応も極めて狭い範囲に限定されていた。例えば、基
′ｔｑとして１）−へ７ンルアミノーアゾーβ−ナノト
ール、川−二−１−ロベンジルアミン等が日’７：’＋
　４’Ｑτ存去として繁用されているが、しかし１１１

【中モノアミンオキ７ダーゼの存在騎か栖めて少ないた
め、増感１−７で測定−４−る必要があり、検体計を多
く使Ｉｌｌ　Ｌ．、１１，つ長い反応時間を必要とした
。具体的に（・、１、１１ｒ」常倹体計（ｔよ、０５ｎ
ｔｅｚ反応時間は３７℃ｆ　３　０　−　６０分を要し
た。史に、測定４に溶媒抽出等のｌ′Ｆ−４’ｉイｌな
操作を必要とした。徒だ、１’ｊ’：＋感１埃な測定法
と）て螢光を利用し／こ（測定法があるが、これ又特殊
な機器を必要とするなど、従来法にはさ捷ざ捷な欠点を
有するものが多く、これらの欠点のない測定法が望まれ
ていたθ 本発明者らは、か＼る要望に応えるべく鋭竜研元を重ね
た結果、モノアミンオキ／〃〜七反ｉ芯の成績１本であ
る）′九１ヒ（・（テ、■ＮＮＡ１にコチンアミドアテ
ニノ／′ヌクレオチド）又はＮΔ＋）ｐ　にコテ／アミ
トアデニンンヌクレメチトリン酸）、（２該アルテヒト
に作用するアＡーテヒトテヒトｒＪクナーセ類、（（１
）２［曲のマンガンイオン又−２［曲のコバルトイオ／
、（４）ベルオキ／ダーゼ、を組合せて作用さぜ、生成
する過酸化水素を測定することに゛より、抽出等の珀１
イ［な操作を必要とせず、高感１隻にモノアミ／］・＼
゛ー／−／ターゼ活訃Ｌ　イ！＋ることを見い出し、本
発明ｆ：冗１ｊＶ　略せるに到ったｃつ即ち、本光明ｔ
」、、モノアミン類を基′（４とし、＋ーノアミノオニ
＼−／〃“−セを作用させて生成する−７　Ａ−テヒｌ
−ニ、ＮＡ１）にコグ−ンアミトーノ゛テニノジフクン
オテド）又ｉ］−ＮＡＩ）　１″にコチンーアミドーＴ
アニンジヌクレ月テトす／酸）の存（「ト、該アルテヒ
トに作用するアルテヒトテ１ニＦロゲナーセ（頂を作用
させ（反応式［ＩＤ）、生成するＮ　八Ｉ）　１１　（
還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）アルい
はＮ　Ａ　Ｉ）　ｐ　ＩＩ　（還元型ニコチンアミドア
デニンジヌクレオチドリン酸）に（財）に、２１曲のマ
ンガンイオン又は２圃のコバルトイオンの存在ｌ・、ベ
ルオキ／ダーゼ（ｐ　ｏ　ｎ　）？：作川用ぜて（反応
式［１１１〕）、これを過酸化水素に変換さぜることに
より、反応式〔１〕、〔１］〕、ＣＩＩ＋　〕を結合す
ることにより導かれる反応式［ＩＶ）から明らかなよう
に、基′η１分子−から２分子の過酸化水素が生成する
ことになり、従宋去に比べて感度が２倍にフ′、ノし、
よりｉｌＥ確なモノアミンオキシターセ活性の測定を”
Ｊ能としたものである。 ＲＣＩＩＯ＋Ｎ八Ｉ）　”−へ（父はＮ　Ａ　＋）Ｐ”
　）＋ＩｈＯ’−ノ′ルデヒトテヒドロケナ−セ ｎ（゛ｏｏ−−１−ＮＡ＋＋ｕ（父はＮＡＩ）１’Ｈ）
＋１＋・　〔■１〕 ＮＡｌ１（又はＮ　Ａ　ｌ）　Ｉ用ｌ　’）　十＋１−
１−　（１２Ｍ　ｎ　□、１１（、＋１１ □−→Ｎ　Ａ　Ｉ）　”’　（又！ｄＮ　Ａ　Ｉ）Ｐ−
１）＋ｌｌ＋Ｑ飄１．！〔■１〕 １ン　−Ｃ００１１＋ＮＩＬ　＋２１１ノ　（、）２　
−−　ＣＩＶ　］本発明で用いる過酸化水素の測定法と
しては、発色法、螢毘法等臨床検査に於て元来から用い
られている方法のいずれにてもよく、破酸化性早色試薬
の呈色を測定−４−る、１３丁開発色法として（は、例
エバ、共存するペルオギ／ダーセの作用で、４−アミノ
アンチビリンにアニリン誘導体、例えば、Ｎ−エチル−
Ｎ−（２−ハイド１ｍ１ギ／−３−スルホフロビル）−
、、、−トルイジン、３−メチル−Ｎ−エチル−Ｎ−（
β−ヒ１０ギ／エチル）アニソ／を酸化縮合さぜる方法
、あるいは塩酸３−メチル−２−ペンゾチアゾリノ／ヒ
ドラゾンにアニリン誘導体、例えば、Ｎ、Ｎ−ジエチル
アニリン等を酸化縮合させる方法などがあり、本発明に
於て高感度に測定することが５］岨である。 寸だ、一方モノアミンオキシダーゼの活性を測定するに
あたり、アルデヒドテヒトロク゛ナーセにより生成−４
−るＮＡＩ）１１あるいｉ７′１．ＮＡＩ）１・１１の
紫外部吸収を面接測定１−ることも可能であるが、例え
ば、３４０　旧、、に於けるそれらの分子吸′／ｒ；係
数は、６、２　Ｘ　ｌ　Ｏ”と比・咬的小さくて感１埃
が低いので、ＮＡＩ）１１あるい（ｄＮΔＩ）　ｌ”　
ＩＩに−ア］・ラノ゛リウノ、１篇を作用させ、」：り
分−ト吸光係数の大きいホノＬ・マサンを生成させ、こ
れを測定することにより七ノアεノメキ／ターセ活性を
めてもよい、っ本発明について史に詳しく述べるど、本
発明に用いるｌｒｌ［中モノアミ／メキ／ダーセ活１’
ｌの訓′；１！川）Ｅｆノ↓とし、てし１１、一般式Ｒ
Ｃ，ｌｈ　Ｎｌｈ　（（」１１−、　、、ｌ＋はア／Ｌ
、　キノｌ、　置、　、ｐ、Ｑ　７′ルギル、／り「Ｊ
アル虚””　％　置４’ｆ％　７クロアルギル、アリル
、置換アリル、〕、ニル、憤゛］娑ファー７１１ナフチ
ル、置、１イハナフヂルを授わず０）で示されるもので
あれはいずれにても３１：＜、特に限定さｉするもので
（ｄないか、一般的なものとしては、′＼／／ハアミ／
、１１１−−−トロヘノンルアミンのような′１７）香
族アミ／翻、ヘプチルアミン、ヘプチルアミ／、アリル
Ｉミ゛ン等の１］旨肋族−アミン頃などが挙げらｔしる
。 反応の液性は、］ｒ１Ｌ中モノアミンオキ／ダーゼの至
適Ｉ）１１が約７２であるのて、１＋　１１６．０〜８
０の範囲であれに１、間１ｔ！ｌ　ｆｒ＜、！侍に限定
−４−るもので（４１，ない。 目的に適うｌ１１１を訂（持ｌ−るための緩雨液として
は、自体公知の緩４ｉｌｉｊ液、例えば、リン酸緩価液
、Ｉ・リス緩挿■液、グツド緩筒液などが用いら）１イ
）１）本発明で用いるアルテヒｉ・デヒトロタツーセ炎
自の内、ｌ・〕（、：　１．２．１．　：１、＋ｙＣ１
，２，１，４及びｌ＞　（’　＋　２１５の一アルテヒ
ト−ｊ’　ｌ−ｌ□ロケナーゼでは、微生物あるいは臓
器由才のものが使用」「ｉ」能であり、例え（メロ１１
、　Ｉ’ｓ＋１ｕｄｎｍｎｏ；１ｓ　；１口ｏｇｉ１１
ｎｓ＋１．　Ｓ；＋ｃｔ１ｗｚｎｍｙｃイ＋Ｎｒ１ｒｃ
ｖｉｓｉａｒ　、、　ｌ’１ｎ、ｗｌｃｔｌｓ　ｖｕｌ
ｇ；１ｒｉｓ　、ｉ’　１１１　、馬　１１１山来があ
る。っ壕か、ＩＩ；　（’　１．２．１．７のペン）、
アルテヒドテヒトロゲリーヒについては、微生物由来ど
して、トハ１ｄ　＋ｌ　Ｉｌｌ旧１；＋ｓ　Ｉｌｔ＋ｎ
巨−Ｓ　ｆ’　ＩＩ　Ｆｉ、　△ｓｐ＋ｊｇｉ　ｌ　ｌ
ｕｓｎｉｇｃｔ、ＩＩ　ａ　ｃ　ｌ　（・ｒ　ｉ　ｔ＋
ｍ由来のものがあるが、牛ｉにこれらに限定されるもの
ではない。寸だ、反応の至１ａｐｏは、−トロ己アルデ
ヒドデヒＩ・ロクーノーセてれ１８０〜９５、べ／スア
ルデヒドデヒドロゲナーゼでは約８５であり、Ｉ’ｌ＋
　６．０〜８０の範囲でこれらの反応をモノアミンオキ
／ダーゼ反応と同時に行なうこともｌ’ｌＪ能であり、
まだ、七ノーフ′ミンオキシダーゼの反応と切り前して
、第１段１１のモノアミンオキソダーゼの反応によゆ生
成しノこアルデヒドに、第２段１：Ｊのアルデヒドデヒ
ト１】ゲナーセ反応を行なわせることももちろん０ｊ能
である。この場合、これらのデヒドロゲナーゼの至適ｐ
Ｈ（”Ｉ近で反応を行なうことも可能であろう アルデヒドデヒドロゲナーゼにより生成するＮＡ　Ｉ）
　ＩＩあるいはＮ　Ａ　＋１１’　ＩＩにデトラノ゛リ
ウノ、Ｉ盆を作用させ、生成するホルマザンを測定する
方法に於て、用いるデトラゾリウムＩふＣトしてＮ１３
−（■）−ヨウドアエール’）−２−（、、−−＝トロ
フェニル）−５−フェニルー２１１　テＩ・ラゾリウノ
・クロライド（ｌ　Ｎ　ｒ　）、３−（４，５−ジノチ
ル−２−チーアゾリル）−２，５−ジフェニル−２１１
テトラゾリウノ・ブロマイド（Ｍ　′ｒ　′ｒ　）　４
どのモノテトラゾリウム塩、３．３’　−（４，４’−
ビフェニレン）−ビス（２，５−シフ１．ニル−２１１
デトラゾリウｌ、クロライド’）　（Ｎ（ｎ　−ＴＩ　
’）、３．３’　−（３，３’−ジメトキ７−４．　？
！　’−ビフェニレン）−ビス［２−（ｐ−二１・［フ
フ、−ル）−５−フェニル−２１１テトラノ゛リウノ＼
りｌ’ｌライド］　（Ｎ　ｉ　＋　ｒ　ｏ−’ｌ’　１
１）、：３．３’　−（３，：ｌ’−−ジノＩ・キ７−
４．４’−ビフェごレノ）−ビス［２，５−ビス（’　
＋）−−１・「Ｊフ、−ル’）　−２ｏ　テ１−ラノ′
リウノ、クロライド：）　（′ｒ　Ｎ１゛Ｂ）、３．３
’　−（３，３’−ジノ１−ギンー／１．４’−ビンエ
ニレン）−ビス（２，５−ジノエニハー２１１テトラゾ
リウムク「Ｊライ１−）（′ｒ　＋を）７Ｊ、どのジブ
ｉ・ラゾリウノ、１盆等還冗によりポルマーリン、ジポ
ルマザンを生成−するアトラノ゛リウム塩類のいスｉ＋
にても」二い。寸だ、Ｎ　Ａ　＋１．　ＩＩあるし）は
Ｎ　Ａ　１＋　１’　ＩＩからテトラソ゛リウム１一番
への電丁伝１文にケ」１、ジアホラーセを用いる方法あ
るいｔ：１：電子伝トド体を用いるノｊ法で行なわれる
、−１この電工伝達体とし−Ｃｔ：ｌｌ、ノ。 ナジンメトザルノ、−−１・（ｐ　Ｍ　Ｓ）、１−ノド
１−７ノエナジンメトリルノ。−１・（１−７トギン！
゛λ４Ｓ）、９−ジノチルアミノベ／ソーα−ファツ−
ゾキソニウムクロリト（メルトラブル−）又はこれらと
同等な作用を翁する電子伝達体の使用が６Ｊ能である。 アルデヒドデヒドロゲナーゼ類により生ＦＪｖするＮ　
Ａ　＋１１＋６ルイｌ：Ｎ　Ａ　ｌ）　Ｉ’　ｌｌ［，
２１曲／７）　−７７ｊｊ　ｙイオン又は２１ｉ１１ｉ
のコバルＩ・イオノ共イ’７　’Ｆ、ベルオギンダーゼ
を作用させ、定量°的に生成するｉ１４酸化水素を被酸
化性呈色剤により測定する方法に於て、用いる金属イオ
ンとしては、２１１（ｌｉのマンガンイオン若しくけ２
師のコバルトイオンに限らず、こｉ］らと同等な作用を
有する金属イオンであｆｔばいずれのものでもよい。史
に、用いられる金属イ刈ンの濃度は特に限定されないが
、通常０１へ２０　＋１ｍＮ１＋　／　ｔの＋７＋’％
ＩＢｉで用いられる○ベル刊ギノダーゼについては、辿
常西詳ワ“リービ由来のものが使用されるが、これに１
ｉＪＪ定するものではない。 過酸化水素の測定に使用さＪする被酸１１っヤ１惰色試
薬は、４−アミンアンチピリン・アニニリン系、するい
はｐ＞−、酸３−メチルー２−ベンツ゛テアノ゛リノン
ヒドラゾン・つ゛；−リン系に限汁されるものでν」、
なり、従来、過Ｖ裟１に水ネーベルオギノター七糸で）
１１いられるものが例外なく使１（１できることはいう
一走でもない７、 以ト°、実施例により本発明の態様を示−４−が、本発
明はこれらに限７：ｆされるもので（ｒ′Ｉない６、実
施例　１ 〔ａλ嶋峠ｄ周製　〕 ■　発色試薬 １１】−二トロー・、／ジルアミン・塩酸４４１１９５
　：Ｊ　ＩＩ＋２、ベルメキノダーゼ　６０００ｋｌ、
塩酸：３−ノチ）ｌ・−２−ベンゾチー１シリノンヒド
ラゾン（Ｍｎ　を冒＋　）１、１６　ｍ７、Ｎ１　Ｎ−
ジエグール１ニリン　４５７、塩化マノカン（１１水和
物’）　Ｊ、、　（ｌ　ｆ、ベラス−）°ノ（デヒトテ
ヒトｒＪゲジーセ　７　（ｌ　Ｏ＋Ｆ　、ニニ７ブ−ン
アくドアテニンジメクＶオチｉ（Ｎ　Ａ　＋１　）７１
７ｍりを■に調整方法を示しだ　（１，＋１５Ｍリン酸
１ｆｌＡソ筒液（ｐｌ＋　７．５　’）　１　ｔ＃ｃ溶
解する。 ■　００５Ｍす、／酸１′Ａ緩衝液（ｐＨ７，５’）リ
ン酸−力９１１ノ・　６８７をイオン交換水　１？に溶
解し、０．０５　Ｍ　ＩＪン酸−カリウム溶液を調製す
る１１リン酸二すトリウム・１２水塩　１７９２をイオ
ン交換水　１　ｔＫＭ解し、（１，０５Ｍ　ＩＪ　７酸
二ナトリウム溶液を調製する。０．５　Ｍ　’）ン酸−
カリウム溶Ｍ１６６ｍ（！と０．０５　Ｍリン酸二ナト
リウム耐液　８３４　ｍｅを混合し、（１，Ｑ　５Ｍリ
ン酸塩緩衝液（ｐＨ７，５）を調製する。 ■　七ノアミンオギンダーセ標準液 牛血ｍ　由来のモノアミン剖キ／ダーセ　ｌｏ。 １１を■で調製し、た０、　０５　Ｍリン酸１盆緩衝液
（ｐＨ７，５）でｃ容）實し、モノアミンオキツターセ
標／ｌ／’　：夜（１０ＣＪｕ／ｌｎｌ！　’Ｉとする
。これを希釈して２５．５０．７５　ｕ　／　ｍｅの標
準液を調製する。 （４）反応停止液 ジエチルジブ−刊カルバミン酸すトリウノ、　２２５７
をイオン交換水　１０ｍ１に溶用’ｆする。 〔測定法〕 ２５・　５０・　７５、ｌ　００　＋＋／ｍｅのモノア
ミンオギ／ダーセ標準液をそれぞれ試験管に５０／１ｔ
とり、発色試液　３　ｍｅを加え、３７℃で市確に３゜
分間加温後、反応停止液　５０μｌを添加して反応を停
止する。別にモノアミンオギンダーゼ標゛準液の代わり
にイオン交換水５　’Ｏ／７／−をとり、同様に操作し
て試薬山″険としだものを対１１６として波長５９０　
ｎｍの吸光度を測定する。 各モノアミノぢキノダーゼ標準液の活性（＋’　／〃ｆ
）に対してノ”’　ｙ　ｒ　Ｌだ吸光度を結ぶ検量線は
、第１図に示されるように、原点を通る直線となり、検
量線は良好な定「け性を示している。 次に、モノアミンオキシタ−ゼ標ｆｆ液の代わりに血７
ｇを用いで、標？ｖ′−液と同様に操作し、試薬冒険を
対照としてイ！Ｉた吸光度から、第１図の検量線によっ
て血（１ｊＩ中のモノアミンオキ／ダーゼ活性をめる。 。 比較例　１〔１疋来法〕 実施例　１．の発色試液に於いてアルテヒド７−ヒドロ
ゲナ−ビを使ＩＮせず、その他は実施例１と全く同様に
操作して得られた倹敬線を第１図に示ず０ 第１図より、不法は従来法に叱べ２倍の感ｔｆを有して
いることがわかる。 実施例　２ 〔試薬調製〕 ■　発色試液 １］−ヘギ／ルアミｌ　５０６　ｍｇ％アルテヒドデ５
ヒト「１ゲナーセ　７００　、、、Ｎへ１１　７　’１
７　ｍ７、ｌ’　Ｍ　Ｓｌ　１　ｍｇ、Ｎｉ＋ｒｎ　−
１’　ＩＩ　］、　２９を（■にへ固装方法を示しまた
０、　０５　Ｍす／酸塩緩衝液（１１１１８ζＯ）１１
に溶用イ４−る１、 ■　０．０５　Ｎ＋リン酸１話、緩衝イダ（、Ｉｌｌ　
８．　（＋　）１０リン酸　−カリウノ、　６８７をイ
ー４ン交換水　１ノ５　に　溶１ｆ１イ　し、０．０　
５　Ｍ　リ　ン　１１少−カ　リ　ウ　ノ、溶　ａ凝　
をＲ固装七る。す、／酸ニラートリウド ７をイ岡ン父１１寿水　ｌｔに溶）リイし、００５へ１
す／酸二すトリウム溶液を調製する。０．　０　５Ｍ　
’Ｊ　／酸Ｊ５ーカリウノ、Ｍ　？ｆ＆　５　０　ｊｎ
７！と０．　（１　５Ｍす／酸二すｌ−リウム　９　５
　０　ｍｅを混合し、＋１．　０　５　Ｍリン酸膓緩イ
曲１夜　（　ｐＨ　８．　０　’）　を９固装する０■
　モノアミンオキシダーゼ標準液 生血’７ｆｔ　由来のモノアミンオキツターセ　１　０
　０　２０■　を　■で４周製　し、た　［１．　０　
５　Ｍ　リ　ン　酸ｌ菖緩　０１ｉｉ　）夜　（ｐＨｓ
．ｏ’）で％　＋！＋’ｒＬ　、モノアミン剖キノター
セ標準ｌイダ（　１　０　０　ｏ　、、／　ｍｅ　’）
とする。これを希釈し一Ｃ２５、５０、７　５ｎ　／　
ｍ（’のＩＢＨ　専７？ｌをＲ周製１−る、、■　反１
芯停止液 ジエブール／ブーオカル・・ミン酸す１リウノ、２２５
７をイオン交４奥水　ＬＯｍｅにｍ　ｊｌｌｒ４　する
〇〔測定法Ｊ ２５、５０、７５、ｉ　Ｑ　Ｏｕ　／　ｍｅのＬ）丁ミ
／オギ／ターセ（票ｓ，を一液をそＪｌぞれ試験管に５
Ｏ　ｆ＃どり、発色状？（１−　３　ｍｌを加え、：３
７℃で市イｒ（＋に；３０鋒間加ｆ’Ｒ１陵、反ｊ，１
ス停止液！’ｉ０／１７４を６力ＩＩ　１−、て関心を
停止し、５６（（旧ｌ）に於ける吸）Ｖ、１ｇ−を測定
シン、。 （票準散の代わりにイ剖ン父］突水　ｊう（１　７１１
りことり、同様に操作し、試薬盲検の吸九度を測定−４
る４１各モノアミン珂ギ／ター１＝標Ｎ″液の活性（＋
１／ｎ＋ｅ　）に利してフ”　ｙ　ｉ　＋，た吸バ、１
１１（試薬盲検の１νに光度を引いた値）を結冨検量線
１は、第２図に示をれるように、原小を通る直線となり
、検量線は（、＞好な定計性を示している。 ？’Ｋ　Ｋ、七ノアミノオキ／ダーゼ標準液の代わりに
血清　Ｆ　Ｏ／ｊ７！をとり、同様に操作！７、検体の
吸光度を測定する。血清中のモノアミンオキ／ダーゼ活
性は、第２図の検量線によりめることができるし、捷た
、以上の操作から得られるそれぞれの吸光度から、次式
により算出し７てもよい。 七ノ゛アく／オキ／クーゼｌ占１牛（ｕ　／ｍｅ　）

【図面の簡単な説明】

第１図は、実施例１及び比較例１に於いて得らシ１．た
検量線を、実施例ｉｕ−実線で、比ｌ咬例１ｄ、破線で
表わし、だもので、いずれも横１１ｉ１１１の各モノア
ミ／オギ／ダーゼ標々モ液の活性（ＩＩ／　ｍｌ、　’
）　ＶＣついてイ↓）らｔ］た吸光度を縦軸に沿ってプ
ロ、］・し７た点をＩｒｉ　ンｒｃ　、モノアミンオキ
シターセ活ｉ’ｌ’のＭｅ　Ｍ線ヲ救わず○ 第２１スは、実施例２に於いて得られた検量線を表わし
、４’ｔｂ、　ＩＩＱｌｌの査モノアミンオキシクーゼ
標準液の活性（ｔ］／ｍｌ）について得られた吸光度（
標準液の吸光度から試薬盲検の吸光Ｉ矩を差し弓（しへ
た（１６）を縦軸に沿、・てノ「ｊ７１・した点を結ん
だ、−七ノアミンオギノター−１・活性の検量線を表わ
−ｌ−０特許出頼人　和光純薬玉業株式会社 第１図 ２５　５０　７５　１０〇 七ノアミンオキシク　”Ｖｌ”ｌ’ｌ’１（Ｉｔ　／ｍ
ｅ　）２Ｉ）２図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）＄、険試オニ４中のモノアミンオキ／ダーゼ活性
   を測定するにあたり、下記一般式（Δ）で示されるモノ
   アミ７類を基ａとして用い、これに、■Ｎ八へ）にコチ
   ンーアミトアデニンジヌクレメチト）父（ｄＮ　Ａ　＋
   １　ｒ′（＝コテンアｇ＋・アデニンジヌクレオチドリ
   ン酸’）　、（２）モノアミンオギンダーセの作用によ
   って１１１記モノアミン額から導かれるアルデヒドに作
   用−４−るアルデヒドデヒドロゲナーゼ類、（３）２［
   曲のマンガフ′イ」／又は、２１曲のコバノシＩ・イメ
   ノ、■ベルオへ゛／ターセ、を組合せて作用させ、生成
   Ｊ−ろ過酸化水素を測定ｒることを特徴と一トる、モノ
   アミンオキ／ダーゼ活１引の１ｒｌｌｌ　定ｙｂ。 一般１−ＡＬ　（Ａ） Ｒ（”ＩＩアＮ１１＋　（但し、１くはアルキル、置換
   アルギル、ンクロアルギル、置換／クロアルキル、アリ
   ル、置換アリル、フェニル、置換フェニル、ナフチル、
   置換プフチルを表わす。） （２）モノアミ７′」ギンダーゼの作用によって前記モ
   ノア、ミン灯ｊがら導かれるアルデヒドに作用するアル
   デヒドデヒドロゲナーゼ類がベンスアルデヒドデヒドロ
   ケナーゼである、特許請求の範囲１項記載のモノアミン
   オキ／ダーゼ活性の測定法。 （３）　Ｍ　検試Ｎ中のモノアミンオキ／ダーゼ活性全
   測定するにあな．リ、前記一般式（／Ｖ）で示さｉｔる
   モノアミ７類を基角として用い、これに、■Ｎ　Ａ　１
   １父１はＮ　Ａ　ｌ）　＋’　、■モノアミ／メキ／ダ
   ーセの作用によって前記モノアミンゆがら導かれるアル
   デヒドに作用するアルテヒ！・デヒＩ・ロヶナーセ’４
   Ｑ、−６κ１１合せて作用させ、生成するＮ　Ａ　１＋
   　Ｉ＋　（還元型．−：７チンアミトアゾー，ンジヌク
   レオテド）父はＮＡ１）　１１＋＋　（還元ｔｌリ７コ
   チンアごドーアテ．：ンジヌクレ」チドリン酸）ｆ：　
   ｉｌｌｌｌ定することを特徴と１る、千′アξンオキ／
   ターゼ活件の測定法。 （４．）　モノアミンオキシダーセの作用によって前記
   モノアミン類から導かれるアルデヒドに作用イーるアル
   デヒドデヒドロゲナーゼ類がペンスアルデヒドデヒトロ
   ヶナーセである、特、？！１′１悄求の範囲第３項記載
   のモノアミンオキ／ダーゼ活性の測定法。 （５）　？／Ｕ　Ｊｔ　試Ｎ中のモノアミン剖ギ／ダー
   ゼ活性を測定するにあたり、前記一般式（Δ）で示され
   るモノアミン類を基質として用い、これ１こ、■Ｎ　Ａ
   　＋）又Ｎ：ＮＡ　１１　＋）、（２ｊ）モノアミンオ
   キシダーゼノ作用によって前記モノアミン類がら導がれ
   るアルテヒド類に作用するアルデヒドデヒトロヶナーセ
   類、を組合せて作用させ、生成するＮ　Ａ　ｌ）　Ｉ＋
   又はＮＡ１）　ｌ’　１１にテトラゾリウム塩を作用さ
   せ、生成する７Ｃ／ｌ／　−ｙ　サンを測定することを
   特徴とする、七ノアミンオギ／ダーセ活′ｉト１−の４
   １１１定法。 （６）舌ノアε／オキ“／ダーゼの作用によって前１犯
   モノアミン類から導かれるアルデヒドに作用するアルデ
   ヒドテヒドロヶナーゼ類がへ／スアルデヒドデヒト「コ
   ゲナーゼである、特許請求の範囲第５項記載のモノアミ
   ンオキ／ダーゼ活性の測定法。