JPS6054690A - 抗生物質ＬＬ−Ｄ０５１３９β - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ＬＬ−ＤＯ５１３９βと表示され゛る新規な
抗バクテリア・抗腫瘍剤、発酵によるその生産、粗製溶
液からのその回収・濃縮法およびその精製法に関する。

本発明は、その範囲内に、希薄な形、粗製濃縮物および
純粋な形の抗バクテリア・抗腫瘍剤を包含する。この新
規な剤の特定の微生物への効果ならびにその構造および
化学・物理学的性質により、それは従来記載された抗バ
クテリア剤と区別される。

ＬＬ−ＤＯ５１３９βは、構造 を有し、そしてそのケミカル・アブストラクッの名命法
はＮ−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリンヅアゾアセテートであ
る。

それは構造が Ｎｆｉ。

！ ＨＯ−ＣＨｆ−ＣＢ−ＣＯＯＨ であるセリン（２−アミノ−３−ヒドロキシプロピオン
ａ２）および構造が ■ ＣＯＯＨ である、抗新生細胞剤のアザセリン（セリンソアゾアセ
テート）と構造的に異なるが、それらに関係する。

ＬＬ−ＤＯ５１３９βは有機カルボン酸であり、こうし
て無毒の製薬学的許容されうるカチオンと塩を形成する
ことができる。適当には中性溶媒中で、抗生物質の遊離
酸の混合物と化学量論的量のカチオンとによって形成さ
れる塩は、アルカリ金属（たとえば、ナトリウム、カリ
ウムなど）、アルカリ土類金属（たとえば、カルシウム
、マグネシウムなど）およびアンモニウムのようなカチ
オンと形成することができる。ＬＬ−４）０５１３９β
のカチオンの塩は、一般に、最も普通の有機溶媒中に比
較的不溶性の水溶性固体である。

ＬＬ−ＤＯ５１３９βと表示する新規な抗バクテリア剤
は、制御された条件下で、グリコミセス・ハーヒネｙ　
シｘ　（Ｇｌｙｃｏｒｎｙｃｔｔｓ　ｈａｒｂｉｎｇｎ
ｓｉｓ）。

ｇｉｎ、　ｎｏｖ、　、　ａｐ、　ｎｏｖ、と名付けら
れる新規な鵬および種の新規な株を培養する間に形成さ
れる。

発酵条件に依存して、種々な量のアザセリンが同時に生
産される。適切な培養条件下で、定められた培地を用い
ると、ＬＬ−４）０５１３９βが主要活性成分として生
産される。ＬＬ−Ｄ０５１３９βの物理的特性は、次の
とおりである冨 １３　分子量：２４４ＣＦＡＢ−ＭＳ）１図に示−ｆＵ
Ｖスペクトル、水溶液）３、第２図に示すＩＲスペクト
ル（ＫＢｒディスク） ４、　旋光度：〔α〕讐＝＋５７”±５０ＣＣ。

０１９チ、水） ５、’ＨＮＭＲスベクトル（Ｄ＊Ｏｔ　ｐｐｒｎ＊　Ｔ
ＭＳ）ｚ第３図に示す、１．５６Ｃ３１１，ｄ、Ｊ＝７
．４ｆｉｚ）、４．０７　（ｌＨ、ｑ、　ｊ＝ｒ、４Ｈ
ｚ　）、４．４９（２−３Ｈ，ｍ）、５．１９（ＩＨ，
広い８） ６、ｐＨ５，０以下において急速に分解し、弱塩基性溶
液中で安定。

ＬＬ−４）０５１３９を酸加水分解すると、標準アミノ
酸分析により定愉゛シて、１モル当量の各Ｌ−アラニン
およびＬ−セリンが解放される。ＬＬ−Ｄ０５ｔａ９か
ら誘導されたアラニンおよびセリンの両者は、静止相と
してルーラウロイル−Ｌ−バリン−ｔ−ブチルアミドを
用いるよく受け入れられたガスクロマトグラフィーによ
り定敏して、Ｌ−立体配Ｉｆｔ　’Ｉｋ　廟する。Ｒｏ
Ｃｈａｒｌｇｓ　ａｔ　ａｌ、　。

Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ、　１１２　＋　１
２１−１３３（１９７５）参照。エドマン分′ｌ１４法
を用いてＬＬ−Ｊ）ｏｓｔａ９βをＮ−末端分析し、次
いでＰ’ｌ’ｌｉ−アミノ酸をｆｌＰＬｃ分析すると、
Ｎ−末端アミノ酸はＬ−アラニンと同定された。したが
って、この物質には次の構造式が割当られた：この新規
な抗生物質生成様は、中国のノ１ルピンで集められた土
の試料から単離され、そしてニューヨーク市ｉ’？−ル
・リバー所在のアメリカン・サイアナミド・カンパニー
（Ａｒｎｇｒｉｃａｎ　Ｃ１１ａｎａｍｉｄＣｏｍｐａ
ｎｙ）のレーデレ・うがラドリーズ・デイビヅ：＋ｙ　
（Ｌｅｄｓｒｌｅ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉａｓ　Ｄｉｖ
ｉｓｉｏｎ）の培養物収集物中に培養物番号ＬＬ−ＤＯ
５１３９として保存されている。この新規な微生物の生
存する培養物は、イリノイ州ペオリア所在の培養物収集
研究所（Ｃ；ｕｌｔｕｒａ　ＣｏＬｌｔｅｃｔｉｏｎ　
Ｌａｂｏｒａｔｏ−ｒｙ、　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｕｔｉ
ｌｉｚａｔｉｏｎ　Ｒｔｔａｇａｒｃｈ　ａｎｄＤｇｖ
ｎｌｏｐｍｌｌｎｔ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、　Ｕ、　Ｓ、
　Ｄｔｒｐａｒｔｍｇｎｔｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒ
ｅ）に保管を託し、受託番号ＮＲＲＬ１５３３’ｌでそ
の永久収集物に加えられ、そしてこの受託物から自由に
入手できる。

培養物ＬＬ−ＤＯ５１３９を分類学的に特性づけ、そし
てグリコミセス・バーピネンシス（ＧＬｙｃｏ−ｍｙｃ
ｅｓ　ｈａｒｂｉｎｇｎａｉａ）、　ｇｉｎ、ｎｏｖ、
、　ａｐ、　ｎｏｖ。

として知られる新らしい属の型種Ｃｔｙｐｅ　５ｐｅｃ
ｉｅｓ）として同定された。

観察は培養物の培養的、生理学的および形態学的な面に
ついて、文献〔Ｅ、Ｈ，Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　ａｎｄＤ、
　Ｇｏｔｔｌｉｇｂ、　Ｍｔｒｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｃ
ｈａｒａｃｔｓｒｉｚａ−１ｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｔｒｇ、
ｐｔｏｍ、ｙｃｇｓ　５ｐｅｃｉｅｓ、　、　Ｉｎｔｓ
ｒｎａｔ。

Ｊ、５ｙｓｔ、　Ｂａｅｔｇｒｉｏｌ、１６　ｔ　３１
３−３４０（１９６？）、およびＲｏＥ、Ｇｏｒｄｏｎ
、ｅｔ　ａｌ、。

Ｎｏｃａデｄｉａ　ｃｏｉｌｉαＣα、Ｎｏｃａデｄｉ
ａ　ａｕｔｏｔデｏｐｈｉｃａ，Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｃ
ｏｌｌｉａｃａ，Ｎｏｃａｒｄｉａ　ａｕｔｏｔｒｏｐ
ｈｉｃａ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｎｏａａｒｄｉａ　５ｔｒ
ａｉｎ、、Ｉｎｔｇｒｎａｔ、Ｊ。

５ｙａｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　、　２４　＋　５４
−６３（１９７４））に詳述されている方法を用いて行
った。この研究において用すた培地は、文献（Ｔ、　Ｇ
、Ｐｒｉｄｈａｍ。

ｔｒｔ　ａｌ、　、　Ａ　ｓｇｌｇｃｔｉｏｎ　ｏｆ　
ｔｙｄｉａ　ｆ’ｏｒ　ｍｎ１ｎｔａ　−ｎａｎｃｔｔ
　ａｎｄ　ｔａｒｔｏｎｏｍｉｃ　５ｔｓＬｄｙ　ｏｆ
　Ｓｔｒｇｐｔｏ−ｍｙｃｅｔｇａ、　、　Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ　Ａｎｎ、　、　９４７−９５３（１９５
６−５７）　、、Ｇ、　Ｆ、　Ｇａｕｔｅ、　ｇｔ　ａ
ｌ、　。

Ｐｒｏｂｌｅｍｓ　ｉｎ　ｔｈｔｔ　ｃｌａｓｓｉｆｉ
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆａｎｔａｇｏｎｉｔｔｔｉａ　ａａ
ｔｉｎｏｒｎｙｃａｔ＃ａ、　、　ＳｔαｔｓＰｕｂｌ
ｉｓｈｉｎｇ　Ｈｏｕｓｅ　ｆｏｒ　Ｍｅｄｉｅａｌ　
Ｌｉｔｓｒａｔｕｒａ　。

Ｍｓｄｇｉｚ　Ｍｏｓｃｏｗ　（１９５７）およびＲ，
Ｅ。

Ｇｏｒｄｏｎ、躬姐、■勤憇更本、アクチノミセテヌ（
ａｃｔｉｎｏｍｙｃｓｔｍｓ）および土壌バクテリアの
分類学的研究について〕中に推奨されているものから選
んだ。培養物の細胞壁の化学的組成は、文献［Ｈ，Ａ、
　Ｌｓｃｈｓｖａｌｉｇｒ、　ａｔ　ａｌ、　、　Ｃｈ
ｇｍｉ−ｃａｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｓ　ａ　
ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅｃｌａｓｓｉｆｉｃ
ａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｇｔｇａ、、　
Ａｄｖ。

Ａｐｐｌ、Ｍｉｅデｏｂｉｏ１．　１　４　冨　４　？
　−７２（１９７１））の方法を用いて決定した。リン
脂質のパターンは、文献〔Ｍ、、Ｐ、Ｌｇｃｈｔｒｖａ
ｌｉｓｒ、　ｓｔ　ＧＬ　、　Ｃｈ＃ｒｎｏ−ｔａｘｏ
ｎｏｍｙ　ｏｆ　ａｇｒｏｂｉｃ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃ
ｅｔｓａｔｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ　ｃｏｒｎｐｏｓ
ｉｔｔｏｎ、　、　Ｂｉｏｅｈｎｍ。

５ｙｓｔ、Ｈｃｏｌ、　、　５　＋　２４９−２６０（
１９７７Ｄの方法を用いて決定した。詳細を表■〜■に
記録し、そして培養物の一般的説明を下に記載する。

アンダーラインを引いた記述的色は、次の刊行物から採
用したｔ　Ｋ、Ｌ、Ｋａｌｌｙおよびり、Ｂ。

Ｊｗｄｄ、　Ｃｏ１ｏｒ、Ｕｎ４ｖａｒｔｚａｌ　Ｌａ
ｎｇｕａｇｅ　ａｎｄＤｉｃｔｉｏｎａｒｙ　ｏｆ　Ｎ
ａｙｎａｓ、　Ｈａｔ、Ｂａｒ、５ｔａｎｄ。

ＣＵ、Ｓ、　）、　’５ｐａＯ，Ｐｕｂｌ、４４０　、
　ＷａｓｈｉｎｒｔｔｏｎｔＤ、　Ｃ，（１９７６）お
よび添付のＩｎｔｇｒ−８ｏｃｉｔｔｔｙＣｏｌｏｆ　
Ｃｏｕｎｃｉｌ、Ｈａｔ、　Ｂｗ、５Ｌａｎｄ、Ｃｇｎ
ｔｒｏｉｄ　。

Ｃｏ１ｏｒ　Ｃｈａｒｔｓ。

この培養物について観察されたデータは、既知の綱につ
いて刊行されたデータ、すなわち、Ａｃｔｉｎｏｍ　ｃ
ａｔａｌ＃ｇ　Ｍ、Ｇｏｏｄｆａｌｌｏｗ、　ａｔ　ａ
ｌ、　。

ｈｈｂｍｔｒｒｉｃａｌ　ｔａｚｏｎｏｍｙ　ｏｆ　Ａ
ｃｔｉｎｏｒｎａｄｕｒａ　ａｎｄｒｅｌａｔｅｄ　ａ
ｃｔｉｎｏｎｙｃｓｔｔｒａ、、Ｊ、Ｇｔｒｎ、Ｍｉａ
ｒｏ−ｂｉｏｌ、　、　１１２　！　９５−１１１　（
１９７９）　、　Ｔ。

Ｈａｓａｇａｗａ、　ａｔ　旦、　Ｎｅｗ　Ｇｅｎｕｓ
　ｏｆ　ｔｈｅＡｃｔｔｎｏｍｙａｓｔａｌｔｔａｔ　
Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｔｔｍａ　ｇｔｒｎ、　ｎｏｖ。

Ｉｎｔａｒｎａｔ、Ｊ、　５ｙａｔ、Ｂａａｔａｒｉｏ
ｌ、　、　２８　（２）ｆ３０４−３１０（１９７Ｂ）
、およヒＪ、　Ｍｅｙｔｉｒ。

Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉａ、ａ　ｎｔｔｗ　ｇｔｔｎＬ
ＩＬａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒＡｃｔｉｎｏｔｎｙ
ｃｇｔａｌｇａ、、Ｉｎｔａｒｎａｔ、Ｊ、５ｙａｔ。

Ｂａｃｔｇｒｉｏｌ、　、２６　（４）！　４　Ｂ　？
　−４９３（１９７６）、と比較した。単離されたＬＬ
−Ｄ０５１３９＃′ｉ既知の為のいずれと屯密接に類似
せず、ノカルソオプシｘ　（Ｎｏｃａｒｄｔｏ　ａｓａ
）は形態学的観点から最も密接に関係する分類群である
。

ＬＬ−ＤＯ５１３９の全細胞の化学ＦｉＨ−Ｄ型（メソ
−ＤＡＰ、および特性糖類としてアラビノースおよびキ
シロース）である。

この培養物のリン脂質パターンは、薄層クロマトグラフ
ィーによシ観測すると、Ｐ−を型群について非常に異常
なノＲターンを表わす。ｘ−Ｄ型金細胞分析〔通常ミク
ロモノスポラ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏａｐｏｒａ）に典型
的である〕および異常なＰ−ｘ型リン脂質パターンはこ
の培養物の形態学を有する微生物について完全に新規で
ある。これらの観察に基づいて、この培養物はグリコミ
セス（すＩＱコ区シ）ト表示した新らしい属に割当てる
。種の名前バーピネンシス＜ｈ、ατｂｉｎｔｒｎｓｉ
ｓ）は、この培養物が単離された土製試料を収集した中
国のノ１ルピンの場％を表わす。

微慧形態学 胞子は未発達の気生芽胞柄上の非常に短い直鎖中に形成
される。胞子は円筒形、０．４５〜０．５５ミクロンＸ
　０．９８〜１．０６ミクロン、であり、そＩ−て平滑
な表面を有する。

細胞壁の組成 この培養物の全細胞の加水分解物は、ジアミノピペリン
酸のメソ−異性体、および特性糖類としてアラビノース
およびキシロースを含有する。培養物はＰ−を型リン脂
質パターンの異常な変形を有し、そしてホス７アチジル
グリセロール、ホスファチジルイノシトールおよびホス
ファチジルイノジチルマンノシド類を含有する。このリ
ン脂質のｘ成はアクチノミセタＶ　ス（ＡＣ２ｉｎＯｍ
ｖＣ＃ｔａｌｅ８）中の他の属について今日まで報告さ
れてきていない。

生長饋 すぐれた生長ばＮｉ１−アミン−でんぷん−グルコース
寒天（ＡＴＣＣ培地１７２）および酵母−エキス−麦芽
エキス寒天上で観察され、中程度の生長はペネデイク）
　（Ｂｅｎｇｄｉｃｔ）の寒天、ガウゼＣＧａｕｚｔｉ
　）　Ａ　Ｉ寒天、ペネット（Ｂｇｎｎａ　ｔ　ｔ　）
（Ｄ寒天、リンゴ酸カルシウム寒天、ツアペックＣＣｚ
Ｇｐｓｋ）のスクロース寒天、ヒツキー−トレスｆ−（
Ｉｉｉｃｋｇｙ−Ｔｒｅｓｎａｒ）寒天、およびオート
ミール寒天上で観察され、劣った生長は無機塩類−でん
ぷん寒天上で観察され、そして生長はトマトペースト−
オートミール寒天上で観察されなかった。

栄養菌糸体 すぐれた生長が観察された培地上で、栄養菌糸体は上昇
し、回旋状であることが観察され、そして一般に黄色味
がかった色であった。いくつかの培地上に悪臭が観測さ
れた。

気生菌糸体および胞子の色 気生菌糸体はｔｌとんどの培地上に存在しなかった。存
在するとき、菌糸体は非常に希薄でありかつ白色であっ
た。

可溶性色素 はとんどの培地上で不存在。ＮＺ−アミン−でんぶん−
グルコース寒天上の黄色味色素。

生理学的反応 ペプトン−鉄基天上およびチロシン寒天（ｌ５Ｐ−７）
上のメラニン色素の不存在；リドマスミルク（ｌｉｔｖ
ａｂａ　ｍ１ｌｋ）の強いペプトン化；栄養ゼラチンの
タンパク質加水分解の不存在基硝酸塩の弱い還元ないし
還元の不存在、チロシンまたはキサンチンの不存在；ア
デニンおよびハイポキサンチンの強い加水分鱗茎でんぷ
んの弱い加水分解各エスタリンの強い加水分解；尿累の
加水分解の不存在。Ｔ、Ｇ、Ｐｒｉｄｈａｍおよびり、
Ｇｏｔｔｌｅｉｂの方法により炭水化物の利用。種決定
のための助けとして、あるアクチノミセタレス（Ａｃｔ
ｉｎｏｍ　ａｓｔα−一←１．）による炭素化合物の利
用。Ｊ、ＢａａｔｉｏＬＨ−５６＋１０７−１・１４（
１９４８）１ガラクトース、グルコース、グリセロール
、ラクトース、マルトース、マンニトール、トレハロー
スおよびキシロースのすぐれた利用ジアラビノース、フ
ルクトース、マンノース、ラムノースオヨびスクロース
の中程度の利用；メ、リビオースおよびサリシンの劣っ
た利用；アドニトール、ズルシｌ−ル、ハフ、、−ヤ、
７ｖ、トーユ１，７′イア−Ｘおよびソルビトール（Ｄ
不利用。Ｒ，Ｅ、Ｇｏｒｄｏｎ　ａｔ　ａｌ。

（ｖｉｔｈ　ａｕｐｒα）の方法による炭水化物からの
酸の生産纂アラビノース、フルクトース、ガラクトース
、グルコース、グリセ−ロール、マルトース、マンニト
ール、マンノース、ラムノース、サリシン、スクロース
およびトレハロ−スからのすぐれた酸の生産；ラクトー
ス、マンニトールおよびラーフイノースからの弱い酸の
生産。Ｒ，Ｅ、Ｇｏｒｄｏｎμ虹、（亘シ駐しツ）の方
法による有機酸の利用；乳酸塩およびリンゴ酸の利用；
安息香酸塩、クエン酸塩、ムチン酸塩およびシュウ酸塩
の利用。

表ｙ ＩＳＰ−９炭水イｔｍ用培地上のＧｌｙｃｏｍｙｏａａ
ｈａｒｂｉｎｅｔｎａｔａ　ＬＬ−Ｄｏ　５１３９の炭
素源の利用インキュベーション：２８日　温ｉ：！８℃
表Ｗ　（Ｍ、き） ＊　３−すぐれた利用　１−＝劣った利用＊　２−かな
シの利用　Ｏ＝利用なし 表Ｖ ゴルドン（Ｇｏｒｄｏｓ）　の基礎無機窒素培地上のよ
る種々の炭水化物からの酸の生産 インキュベーション：２８日　８度：２８℃表Ｖ（続き
） ±　−＝　弱い陽性の応答 表■ ３９による有機酸の利用 インキュベーション：２８日　温度：ｇｇ℃十　−陽性
の応答 −−陰性の応答 本発明の抗バクテリア剤を製造するため、本発明は例示
をのみ目的とする、この特定の有機体または前述の生長
および顕微鏡的特性を完全に示す有機体に限定されない
ことを理解すべきである。

事実、ｒグリコミセス・バーピネンシス（Ｇｌｙｏｏ−
ｍｙｃｇａ　ｈａｒｂｉｎｅｎａｔａ　）　ｇｕｎ、　
ｎｏｖ、、　ａｐ、　ｎｏｖ、。

ＩＶＲＲＬ１５３３７Ｊという用語は、この有伎体の自
然の（自発的）突然変異体ならびにこの有機体からこの
分野で知られた突然変異誘発手段、たとえばＸ線輻射、
紫外線照射、窒素マスタード、アクチノファージ類、ニ
トロンアミン類などへの暴露により生産された誘発突然
変異体を包含することを望みかつ意図する。この用語は
、また、この分野で知られた遺伝的技術、たとえば、複
合、形質導入、および遺伝子工学の技術により生産され
た異種間および種内部の遺伝的組み換え体を包含するこ
とを望みかつ意図する。

この抗バクテリア剤は、標準の寒天希釈手順によｌ）、
ム：ｒ−＞−−ヒントｙ　（Ｍｗｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔ
ｏｓ）を用い、かつステーアス（Ｓｔｔｔｅｒｓ）複製
装置により得られたほぼ１０’コロニ一形成単位の各試
験有機体の接種物を用いて試験した・とき、ダラム陽性
およびグラム陰性のバクテリアに対して試験管内で活性
である。最小阻止濃度（ｍｃ、ｇ／ｗｔ）を、３５℃に
おいて１８時間のインキュベーション後、可視の生長を
阻止する抗生物質ＬＬ−ＤＯ５１３９βの最低濃度とし
て定義した。結果を下表■に記載する。

表■　（続き） 表■（続き） さらに、ＬＬ−７）０５１３９βは次の試験によシ確立
されるように移植したマウスの腫瘍の生長を阻止する。

リンノン球白血病Ｐ３８８試験 使用した動物は、すべてが１つの性であり、最小１７Ｆ
の体重を有しかつすべてが３ｆ！重の範囲内であるＤＢ
Ａ／２マウスであった。３匹の動物／試験群が存在した
。リンパ球白血病Ｐ３８８の１０６細胞を含有する希腹
水の０．１コを腹腔内に注射することによって、腫瘍細
胞の移植を行った。

ＬＬ−７）０５１３９βを第１日目、第５日目および第
９日月（腫瘍接種に関して）に種々の投与量で腹腔内に
投与した。動物の体重を計シ、そして生存する動物を正
規の基準で３０日間記録した。

処置動物（Ｔ）／対照動物（Ｃ）についての生存時間の
比を計算した。陽性対照化合物は５−フルオ四ウラシル
で゛あＪ）　、６０　Ｗ／　ｋｙの注射として与えた。

効能についての規準は、Ｔ／ｃ×１ｏ。

≧１２５％であった。この試験の結果を表■に記載する
。

表　■ さらに、ｚｚ−Ｄｏｓｔａｅβをヒトの腫瘍のクロノソ
エニツク（ｏｌｏｎｏ（Ｈｎイ６）（幹細胞）検定にお
いて試験し、そしてこれはヒトの胸部（ＬＸ−１）がん
（ｏａｒｅ　ｉｎｏｍａ　）　オヨ０．　：ｙ　ｖｘ　
ン（ｃａｌｏｎ）　（ＣＸ−１）がんに対して２．０ｍ
ｃｆ／−以上の投与量で活性であることがわかった。

ヒトの腫瘍のクロノソエニツク（Ｃｌｏｎｏｇｅｎｔｃ
　）検定 この試験は文献（Ａ、Ｈａｍｂｕｒｇｔｔｒ　ａｎｄ　
Ｓ。

Ｓａｌｍｏｎ、　ｐｒｉｍａｒｙ　ｂｉｏａｓｓａｙ　
ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｔｕｍｏｒａｔｅｔｎ　ｃａｌｌｓ
、、　５ｃｉｅｎｃｅ、　１９７　：　４６１−４６Ｂ
　（１９７７））の方法に本質的に従い実施した。ヒト
のコロンがん（ｃｏｌｏｎ　ｃａｒａｔｎｏｍａ　）（
Ｃｘ−１）およびヒトの胸部ｙｂｔｌｖ（ＬＸ−１）腫
瘍は、ナショナル・キャンサー・インスチチュ’　−）
　（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎ５ｔｉｔｕ
ｔｅ　）から入手し、無感覚（ａｔｈｙｍｉｃ　）　Ｂ
ａ　ｌ　ｂ／ｃ−ｃｒラウス中０．２５％で分散させ、
そして０．１−の試験薬物を含有する軟質（０，３％）
アガ目−ス培地中の５×１０４胸部がん細胞またはｔｘ
ｔｏｓコロンがん細胞を３５−のブライデッド（ｇｒｉ
ｄｅｄ　）皿中の固化した（α５％）アガロース基準培
地上へ被覆（ｐｌａｔｅ　）　した。培養物を３７℃に
おいて空気雰囲気中の加湿二酸化炭素中においてインキ
ュベーションした。コロニーをｌθ〜１１日後計数した
。

処置／対照（ＴｉＣ）値が５３０％であシ、７０％の細
胞の死滅を表わす場合、化合物は活性であると考える。

ＬＬ−ＤＯ５１３９βについてのこの試験の結果を表■
に記載する。

１Ｌ１）ｏｓｉａ９βを生産する一般的手順ダリコきセ
ス・バーピネンシス（Ｇｌｙｃｏｍｙｃｅｓｈａｒｂｉ
ｎｅｎａｉｓ　）　ＮＲＲＬ　１５３３７の培養を、広
範な種類の培蒐中で実施した。ＺＺＩ）０５１３９βの
生産に有用な培地は、炭素の同化可能な源、たとえば、
でんぷん、糖、糖蜜、グリセロールなど、窒素の同化可
能な源、タンパク質、タンパク質加水分解物、ポリペプ
チド、アミノ酸、トウモロコシ浸漬液など、および無機
のアニオン塩およびカチオン塩、たとえば、カリウム、
ナトリウム、アンモニウム、カルシウムの硫酸塩、炭酸
塩、リン酸塩、塩化物などを含む。微量元素、たとえば
、ホウ素、モリブデン、銅などが培地の他の成分の不純
物として供給される。楢、びんおよびフラスコ中の通気
は、滅菌した空気を発酵培地を通してまたはその表面上
へ強制的に供給することによシ行う。かきまぜは機械的
羽根車により４見る。泡防止剤、たとえば、ラード油ま
たはシリコーン消泡剤を必要に応じて使用できる。

酸中の安定性に劣るため、Ｌｌ−Ｄ０５１３９βを含有
する溶液は単離を通じてｐＨ１〜９．５に保持する。定
めた培地を発酵に使用するとき、はんの微量のアザセリ
ンが同一に生産され、ＬＬ−ＤＯ５１３９βは発酵Ｆ液
を粒状炭素のカラムに吸着させ、このカラムを水性アル
コール混合物から溶離することによって、発酵すること
ができる。

活性調製物を微結晶質セルロースのカラムクロマトグラ
フィーに反復し：てかけ、１−プロ・リール：水（８０
：２０）で反復して溶離することによりさらに精製する
。複合培地を発酵に使用するとき、大量の妨害不純物が
存在するため、ＬＬ−Ｄ０５１３９βを発酵Ｆ液から粒
状炭素で吸着させることはできない。この場合において
、発酵ν液を粒状炭素のカラムに進退させて、アザセリ
ンおよび他の不純物を除去する。次いでカラムの溶離液
中のＬＬ−Ｄ０５１３９βを弱アニオン交換樹脂たとえ
ばアンバーライト（Ａｍｂげｒｉｔｅ■）ＪＲ４Ｂ（Ｏ
ＨＯ）またはアニオン交換体たとえばＤＥＡＥセフ１テ
ックス（Ｓｔｔｐｈａｄｅｚ”　）　ｉたはｑＡＥセフ
ァデックス（Ｓｅｐｈαｄｇｘ■）上へ吸着させる。活
性物質は前記樹脂またはセファデックス（５ｅｐｈａｄ
ｅｚ■）から冷水性塩基で溶離し、次いで粒状炭素カラ
ムで脱塩することができる。

次いで抗生物質ＬＬ−Ｄ０５１３９βを粒状炭素カラム
から水性アルコール混合物で溶離し、そして前述のよう
にさらに精製する。

各クロマトグラフ工程の終りにおいて、部分的に精製さ
れた調製物は次のＨＰＬＣ系を用いて分析的に純粋なＺ
、Ｌ−、ＤＯ５１３９βに対して便利に量を計ることが
できる： カラム：ヌクレオシル（ＮｕｃｌｅｏｓｉＬ　）　１．
０　。

Ｎ　（（１’Ｈｓ）ｔ　＋　２５　ｃｔｎ　（Ｍａｃｈ
ｇｒｇｙ−Ｎａ　ｇ　ｇ　ｌ　充填カラム）。

溶　媒：メタノール：２−プロＡ／−、ｚ：水、７５：
５：２Ｇ 検出器：２５４ｓ兜 流速：１．５ｍＪ／分 ＩＬ−Ｄ０５１３９βの保持時間＝６−また、本発明の
新規な抗生物質を活性成分として含有する、哺乳動物に
おけるバクテリアの感染を処置しかつがんの病気を軽減
するために有用な治療学的組成物が、本発明の範囲内に
入る。本発明のとの面は、７０ｋｇの患者にほぼ１００
キ〜はぼ１０２７日の量で投与する、哺乳動物における
バクテリアの感染を処置する新規な組成物および方法を
包含する。１日量は分割して１日数回投与することがで
きる。投与範囲は、処置する哺乳動物において最適な治
療学的応答を提供するように調節する。

さらに、本発明は、約０．０−７５１１１ｐ　〜約３０
０ｔＩＩｆ／　ｍ”体表面積７日の範囲の量で投与する
ことがら−なる、哺乳動物における白血病および関連す
る癌の退行および／または軽減を誘発する新規な組成物
および方法を包含する。種々の大きさおよび種種の動物
および人間についての投与の相互関係は、Ｆｒｔｒｉｒ
ｅｔｃｈ、　Ｅ、　／、、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｑｕａｎ
ｔｉｔａｔｉｖｅＣｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｒ
Ａｃｉｔｙ　ｏｆ　ＡｎｔｉｃａｎａｅｒＡ（Ｈｎｔｓ
　ｉｎ　Ｍｏｕｓｅ、　Ｒａｔ、　Ｈａｍｓｔｅｒ、　
Ｄｏｇ。

Ｍｏｎｋｅｙ　ａｎｄ　Ｍａｎ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈ
ｅｍｏｔｈａｒ、　Ｒｅｐ、　。

５ｏＮｏ、４：２１９−２４４（Ｍａｙ　１９６６）に
記載されている。最適な結果のだめの好ましい投与の養
生法は、約１．　Ｏｒｑ　／　ｍ”〜約８ｑ／ばの合計
の処置の投与であろう。約７０ｋｇの体重の患者につい
て約０．５■〜約５２５岬の活性化合物の合計量が２４
時間の期間中に投与されるような投与単位を用いる。こ
の投与の養生法は最適な治療の応答を与えるように調節
することができる。たとえば、いくつかに分けた投与量
を毎日投与することができ、あるいは投与量は治療学的
立場の要求により指示されるように比例的に減少させる
ことができる。活性化合物は静脈内、筋肉内または皮下
の道筋による抗癌剤の使用のために特別に投与すること
ができる。

癌の退行および軽減は、たとえば、腹腔内投与を用いて
達成される。単一の静脈内投与または反復した毎日の投
与を行うことができる。約５〜ＩＯ日までの毎日の投与
はしばしば十分である。

毎日の投与１１または１回の投与量を１日置きまたはそ
れより頻度の少ない日に分配することも可能でおる。投
与の養生法から理解できるように、主な活性成分の投与
量は、癌をもつ宿主に対する細胞毒性の過度の悪い副作
用の不存在下に、白血病などの退行および軽減を促進す
るために十分な量である。ここで使用するとき、癌の病
気は血液の悪性腫瘍たとえば白血病、ならびに他の充実
および非充実の悪性腫瘍たとえば色素癌、胸部病、およ
び哺乳動物の腫瘍を意味する。退行および軽減とは、処
置の不存下の癌の過程に比べて、腫瘍または病気の他の
発現の生長を阻止しあるいは遅延することを意味する。

活性化合物は非経口的ＶＣあるいは腹腔内圧投与するこ
とができる。活性化合物の溶液または分散液は、適当に
は界面活性剤たとえばヒドロキシプロピルセルロースと
混合した、水中で調製することができる。また、分散液
はグリセロール、液状ポリエチレングリコ一ル、および
それらの混合物中で、および油中で調製できる。貯蔵お
よび使用の通常の条件下で、これらの調製物は微生物の
生長を防止するための防腐剤を含有する。

注射可能な使用に適する製薬学的形態は、無菌の水溶液
または水性分散液および注射可能な溶液または分散液の
即時調製用無菌粉末を包含する。

すべての場合において、この形態は無菌でなくてはなら
ず、かつ注射容易であるような程度に流動性でなくては
ならない。それは製造および貯蔵の条件下で安定でなく
てはならず、そして微生物たとえばバクテリアおよび菌
類の汚染作用に対して保存されなくてはならない。担体
は、たとえば、水、エタノール、ポリオール（たとえば
、クリセロール、プロピレンダリコール、および液状ホ
リエチレングリコールなど）、それらの適当な混合物、
および植物油を含有する溶媒または分散媒質であること
ができる。適当な流動性は、たとえば、コーティングた
とえばレシチンの使用により、分散液の場合における要
求する粒子サイズの維持によシ、および界面活性剤の使
用にょシ維持することができる。微生物の作用の防止は
、種々の抗バクテリア剤および抗菌剤、たとえば、／ｌ
シラペン類クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸
、チメロサルなどによル生じさせることができる。多く
の場合において、等張剤、たとえば、糖類まだは塩化ナ
トリウムを含有させることが好ましいであろう。注射可
能な組成物の遅延した吸収は、吸収遅延剤、たとえば、
モノステリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物中
に使用することにより生じさせることができる。

適当な注射可能な溶液は、活性化合物を要求される量で
適当な溶媒中に、必要に応じて上に列挙した他の成分と
ともに混入し、次いで滅菌濾過することによって調製さ
れる。一般に、分散液は種々の滅菌した活性成分を、基
剤の分散媒および上に列挙した必要な他の成分を含有す
る無菌賦形剤中に混入することにより調製される。無菌
の注射可能な溶液の調製のための無菌粉末の場合におい
て、好ましい調製法は真空乾燥および凍結乾燥の技術で
ある。これらは前もって滅菌濾過した溶液から活性成分
テラス追加の所望成分の粉末を生ずる。

治療学的使用において、本発明の化合物は普通の縦口的
製薬学的組成物の形で投与することもできる。このよう
な組成物は、本発明の化合物が胃の酸性ｐＨへ暴露され
ないように適切に配合されたとき、経口的投与に逼する
であろう。活性成分は製薬学的に許容されうる担体と混
合させて一緒にすることができる。この担体は投与に望
む調製物の形態に依存して広範な禰々の形態を取ること
ができる。化合物は錠剤のような組成物で使用できる。

ここで、主要活性成分を普通の錠剤化成分、たとえば、
コーンスターチ、ラクトース、スクロース、ソルビトー
ル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム
、リン酸二カルシウム、ガム、または無毒の製薬学的に
許容されうる希釈剤または担体と類似する材料と混合す
る。新規な組成物の錠剤または丸薬は、積層するがある
いは他の方法で配合して、取り囲まれｆｃ＃物の遅延し
た作用または前もって決定した類似の作用の利点を争え
る投与形態を提供することができる。たとえば、錠剤ま
たは丸剤は内部の投与成分と外部の投鷺鵠偏窪δ 与成分からなることかで　ノ上 の外皮の形である。２成分は腸溶性層により分離するこ
とができ、この腸溶性層は胃内の崩壊に抵抗する役割を
しかつ内部の層を十二指腸中に通亨させるかあるいは遅
延して解放させる。種々の拐。

料をこのような腸溶性の層またはコーティングのために
使用することができ、このような材料はある数のポリマ
ーの酸類またはそれらの混合物を包含し、たとえば、セ
ラック、セラックおよび化チルアルコール、酢酸セルロ
ースなどでアう。トくに有利な腸溶性コーティングは、
スチレンマレイン酸コポリマーとコーティングの腸溶性
に寄与する既知の材料とからなる。錠剤まｆｃハ九却１
は適当な無毒の色素の使用により着色して、快い外観を
与えることができる。本発明によれば、適当な経口的投
与形態の他の例は十二指腸中で吸収されるように特別に
配合された活性成分を有するカプセルである。

投与が各量でありかつ投与量が均一であるように非経口
的組成物および経口的組成物を配合することは、ことに
有利である。ここで使用する投与単位形態は、処置すべ
き哺乳動物の患者に単位投与に適した物理的に離散した
単位を意味する。各単位に、要求する製薬学的担体と関
連して所望の治療学的効果を生成するように計算された
、前もって決定された量の活性物質を含有する。本発明
の新規な投単位形態についての規格ハ、（ａ）活性物質
の独特の特性および達成すべき特定の治療効果、またｕ
（ｂ）身体の健康がここに詳しく開示するように傷害さ
れる、病気の状態を有する生きている患者における病気
を処置するためのこのような活性物質の配合技術に固有
の制限により、指冷されかつそれらに直接依存する。

主要な活性成分は、前述のような投与単位形態の適当な
製薬学的に許容されうる担体と有効量で、投与に便利で
ありかつ効果的に配合される。単位投与形態は、たとえ
ば、主要な活性成分を約０．１〜約５００■、好ましく
は約ｌθ〜約５００１１ｑの畦間の量で含有する。非経
口的使用のため比率で表わして、活性化合物に、一般に
約０．１〜約１００η／−担体で存在する。補助活性成
すを含有する組成物の場合において、投与量は紬記成分
の通常の投与量および投与法を参照して決定される。

ここで１史用するとき、「１１１ｔ学的に許容されつる
担体」ハ、使用する場合、溶媒のいずれかおよびすべて
、分散媒質、コーティング、バクテリア剤および抗菌・
カビ剤、等張剤および吸収遅延剤などを包含する。製薬
学的に活性な物質のためのこのような媒質および薬剤の
使用は、この分野においてよく知られている゛。いずれ
かの常用の媒質まｆｃハ薬剤が活性成分と不適合性であ
る場合を除いて−、治療学的組成物中のその使用は考え
られる。

補助活性成分全組成物中、に混入することもできる。

不発明を次の非制限的実施例を参照して詳述する。

実施例　１ 接種調製物 一次接種物全生長させるために１史用した典型的な培−
地は、次の処方に従った： デキスト口−ス　１．０％ Ｎ−Ｚアミン　０．５％ 炭酸カルシウム　０．１％ 水、十分１　１００　％ ｐＨを水酸化ナトリウムで７．２に調節し、培地全滅菌
した。グリコミセス・バーピネンシスｌ　ＧＬｙｃｏｍ
ｙＣｅｓ　ｈａｒｂｉｎｅｎｓｉａ　）ｇｔｔｎ。

ｎｏｖ、、ｓｐ、ｎｏｖ、、ＮＲＲＬ　１５３３７の寒
天スラント（αｇａｒ　５ｌａｎｔ　ｌ　からの菌糸体
のスフレイピングｌ　５ｃｒａｐｉｎｃｔ　）ｔＬ＋ｅ
用して、２５ｏ−容のフラスコ内の５０ｍ１の上の無菌
培地を接種した。このフラスコ全回転Ｓ盪器上で２８℃
および１ｇｏ　〜２００ｙｐｍにおいテア２時間インキ
ュベーションした。得られる一次接種物を使用して一系
列のフラスコを接種した。各フラスコは１００−の上の
無菌培地を含有し、これを次いで同−条Ｖ＋丁でインキ
ュベーションして、二次接種物を得た。

実施例　２ 発酵 発酵培地は、次の処方に従った： デキストロース　２＋ｏ　％ 硝酸ナトリウム　０．１　％ 硫酸第一鉄七水和物　０．０１　％ 硫酸マグネシウム七水和物　０．０２　％炭酸カルシウ
ム　′ｏ、５　％ 水、十分量　１０（１・冷 ｐＨを７．４に調節し、培地全滅醒した。二次接種物（
実施例１）の一部分を１吏用して、９ｊの無萌培地を接
種し、次いでこれを回転振盪器上で１８０〜２００ｒｐ
ｍおよび２８℃において６日１１ＪＩインキュベーショ
ンし、この時マツシュ（ｍａｓｈｌを収穫した。

実施例　３ Ｌｌ；−Ｄｏ　５１３９βの単離 収穫したマツシュ（！？！施例２に記載するようにｄａ
した）の９ノの部分を濾過した。８２００．ｚのろ液（
ＨｐＬＣにより定欧して１６４ｔｔｌ／ｍｌのＬＬ−１
７０５１３９βを含有する１を、冷水性　゛水酸化す）
　ＩＪウムの添加によりｐ　Ｈ９，０に調節した。次い
でこのＦ欣を氷水浴中で冷却し、その間７００ｄの活性
炭を充填したカラムに１６−７分の流速で通過させた。

このカラムを７００艷の脱イオン水で洗浄し、次いで水
から水：メタノール（４：６１の混合物までの直線勾配
で、２．６ｔｄ／分の流速で６時間にわたって溶離し、
５分の分画を集めた。１２０の分画が集められるまで、
溶離を続けた。各分画は薄；−クロマトグラフィー（Ｔ
ＬＣＪ（シリｆＪｌ’ル　６０、Ｆ２５４、予備被覆Ｔ
ＬＣシート、Ｅ、Ｍａｒｃｋ　Ｉｎｃ、（７）製品；ｎ
−プロノ臂ノール；水ｔ８０：２０１　ニア”２５４急
冷およびニンヒドリン噴霧により可視化、Ｒｆ＝０、２
７１およびエシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉ−ｃｈ
ｉａ　ｃｏｌｉ　ｌ　に対する拡散検定により分析した
。分画７−５７．５８−９３　９４−ｆ１８ｆ。

別々にプールし、各１−ルを真空濃縮してメタノールを
除去し、次いで希塩酸で中和し、凍結乾燥して、それぞ
れ１４２７ｒ１１ｇ（，４１，４２３＋９（１およびｘ
４８ｑ（Ｃ１の黄色固体を得た。

１、（）の７４８ＷｉＩの部分を１．５−の水中に溶か
し、ガラスのカラム（２，，５Ｘ１１０α）（微結晶質
セルロースを充填し、外−プローぞノール：水（８（１
：２０）中で平衡化した）上に装入した。

このカラムを外−１０パノール：水（８０：２０１で２
　ｍｌ　７分の流速で溶離し、６分の分画を集めて合計
１２０の分画を得た。各分画を前述のように分析した。

各ゾールを水（１４体積）とともに共洲蒸留し、希塩酸
で中和し°、凍結乾燥すると、それぞれ１８９ｑの白色
粉末（Ｄ）および５９Ｗ９の淡黄色固体（Ｅ）が得られ
た。試料（Ａ’Ｈ−１、高圧液体りａマドグラフィー＜
ＨＰＬＣｌおよびＴＬＣにより測定すると、分析的に純
粋なＬＬ−Ｄ０５１３９βを含有した。

（，４１の第２部分１６７１１１Ｆ）’ｅ前述のように
りａマドグラフィーにかＶア、１７１９の白色粉末（Ｆ
）（これは３４％のｚ、ｚ、−Ｄｏｓｉ医９βであった
）および８３■の淡黄色固体（Ｇ）（これは８９　％ｃ
７）　Ｌ　Ｌ　−、Ｚ）　０５１３９　β”？’　ア”
：）ｆｃ　ｌ　’ｘ　得た。

試料（７３１１４２０”ｌｆ）、（Ｃ１１４７ｗｑ１お
よび実施例２に記載するように実施１−た他の発酵から
誘導された６００ｗｑの生産物を合わせ、前述のように
クロマトグラフィーにかけると、２６２■の白色粉末（
Ｈ）（これは３３％のＬＬ　−Ｄ。

生産物［１、（ＦＩおよび（〃）を−緒にし、前述と同
じ方法で微結晶質セルロースのカラムのクロマトグラフ
ィーにかけると、４０２ｍｇの白色粉末（Ｋ）（これに
２７％のＬＬ−Ｄｎ５１３９βであった）および８０■
の淡黄色固体（Ｌ）（これは１００％の１１−／）０５
１３９βであつ７′ｃ）が得られた。

（、Ｕｌの分析データは次のとおりであった一元素分析
：　６’３６．８　：Ｈ，５，２ｊ　Ｎ、１９．６　；
分子ｉ１：　２４４　（ＦＡＢ、−ＭＳ　ｌ　；旋光度
：〔α〕２Δ＝　＋５７°＋５（ＣＸ　０．１９％、水
）　ＨＵＶ　２６０．、ｎｗ（Ｅ　”、：　６４６）ｍ
ａ＾ （第１図に示すスペクトに、メタノール／水溶液）；Ｉ
Ｒスペクトル（Ｋ　Ｂｒディスク；、第２図に示す； 息ｆｌＮＡｆＲスペクトル、第３図に示す（Ｄ、０゜ｐ
　ｐ　ｍ　Ｔ　Ａｉ　ＳからＬＬ５６１３Ｈ，ｄ、Ｊ＝
’１．４Ｈｚ）、４．０７　（ＩＨＸｑ、Ｊ＝”１．４
Ｈｚ　）、４．４９　（２−３１１，ｍ）、５．１９（
１７／、広い８）。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明のＬＬ−Ｄ０５１３９βのＵＶスペク
トル（ａ度　５μＩ／ｍｙ、メタノールで測定）である
。 第２図は、本発明のＬＬ−１）０５１３９βのＪ　Ｒス
ペクトル（ＫＢｒディスク）である。 第３図に、本発明のＬＬ−ＤＯ５１３９βのＮＭＲスペ
クトル（Ｄ、０溶液）である。 ＦＩＧ、　１ 噸胃４−　”３ 第１頁の続き ０発　明　者　アメデオ・エイ・ファ　アメリカ合衆国
ニンチーニ　レン　２ ■発　明　者　レイモンド・トマス・　アメリカ合衆国
ニテスタ　ブ・ロックレッジ ニーヨーク州１０９５６ニユーシテイ・ザグユージャー
ジイ州０７００９シーグーグロープレイス　５５

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、実ｐ的に純粋な形態が、 α）　旋光度〔α〕に＝＋５７°±ｓ”（Ｃ。 ０．１９％、水）を有し、 ｂ）　加水分解時に１モル当量の各Ｌ−アラニンおよび
   Ｌ−セリンを生成し、 Ｃ）　エドマン分解法によりＮ−末端アミノ酸としてＬ
   −アラニンを有し、 ｄ）　添付図面の第１図に示す特性紫外線スペクトルを
   有し、 ｅ）　添付図面の第２図に示す特性赤外線スペクトルを
   有し、 ｆ）　添付図面の第３図に示す特性プロトン核磁気共鳴
   スベクトル（Ｄ、Ｏ、ｐｐｍ、ＴＭＳ）ｓｌ、５６（３
   Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．４１１ｚ　）、４（１？（Ｉ　Ｈ−ｑ
   ｔ　Ｊ　＝’Ｉ−４Ｅ　Ｚ　）　％　４４９　（２−３
   ＃　、ｍ）、５．１９　（ＩＢ、広い８）を有し、そし
   て Ｑ’）　２４４ＣＦＡＢ−ＭＳ）の分子閂を有する、こ
   とを特徴とする、ＬＬ　−４）０５１３９βと表示され
   る化合物Ｎ−Ｌ−アラニルーＬ−セリンジアゾアセテー
   ト。 ２、＠乳動物に抗バクテリア的に有効量のＮ−Ｌ−アラ
   ニル−Ｌ−セリンジアゾアセテート（抗生物質ＬＬ−Ｄ
   ｏｓｌａ９β）を投与することからなる哺乳動物におけ
   るバクテリアの感染を処置する方法。 ａ、ｎ＠乳動物に治療学的に有効量のＮ−Ｌ−アラニル
   −Ｌ−セリンジアゾアセテート（抗生物質ＬＬ−Ｄｏｓ
   １ａｅβ）を投与することからなる哺乳動物における白
   血病の退行を誘発しおよび／まｆｃは腫瘍の生長を阻止
   する方法。 ４．ＮＲＲＬ１５３Ｂ’ｌの同定特性を有するグリコミ
   セス会バーピネンシス（Ｇｌｙｃｏｒｎｙｃａａ−、ｈ
   ａｒｂｉｎｇｎｓｉｓ）、　ｇｓｎ、ｎｏｖ、　、ｓｐ
   、ｎｏｖ、およびその抗生物質産生突然変異体を、好気
   的条件下に、炭素、窒素および無機のアニオンおよびカ
   チオン塩類の同化可能な源を含有する無菌の液体培地中
   で、実質的な抗生活性が前記培地へＬＬ−Ｄ０５１３９
   βの生産により付与されるまで、培養し、次いで抗生物
   質をそれから回収することからなる抗生物質ＬＬ−ＤＯ
   ５１３９βの生産法。 ５、ＮＲＲＬ１Ｂ３ＢＹの同定特性を有する有機体グリ
   コミセス・バーピネンシスＣＧＬｙｅｏｍｙｃＩＩｓｈ
   ａｒｂｉｎｇｎｓｉｇ）　、　ｇｌｌｎ、ｎｏｖ、　、
   ｓｐ、ｎｏｖ、　およびその抗生物質産生突然変異体の
   生存培養物を接種した、炭素、窒素および無機のアニオ
   ンおよびカチオン塩類の同化可能な源を含有する液体培
   地を好気的に発酵し、前記発酵培養物を無菌的に通気し
   かつかきまぜながらｐＨｒ〜９．５に、９０〜２００時
   間２４〜３２℃において維持し、マツシュを収穫し、そ
   して抗生物質を抽出することからなる抗生物質ＬＬ−Ｄ
   Ｏ５１３９βの製造法。 ６、炭素、窒素および無機のアニオンおよびカチオン塩
   類の同化可能な源を含有する水性栄養培地中で発酵した
   とき、抗生物質ＬＬ−Ｄ０５１３９βを回収可能な量で
   生産できる、ＮＲＲＬｘ５ａａＴの同定特性を有する微
   生物グリコミセス・バーピネンシスＣＧｌｙｃｏｍｙｃ
   ｓｓ　ｈａｒｂｉｎｇｎｓｉｓ）　、　ｇｔｒｎ。 物質ＬＬ−ＤＯ５１３９βを合成する能力をなお保持す
   るように、自発的に突然変異している、特許請求の範囲
   第６項記載の微生物グリコミセス・ハーヒネｙ　シス（
   Ｇｌｙｃｏｍ、ｙａａｓ　ｈａｒｂｉｎａｎｓｉｓ）の
   生物学的に純粋な培養物。 ８、　前記微生物は、遺伝的に変わっているが、抗生物
   質ＬＬ−［＞０５１３９βを合成する能力をなお保持す
   るように、突然変異誘発手段に付されている、特許請求
   の範囲第６項記載の微生物グリコミセス−バーピネンシ
   ス（ＧＬｙｃｏｒｎ、ｙｃｔｔｓｈａｒｂｔｎｅｎｓｉ
   ａ）の生物学的に純粋な培養物。 ９、治療学的に有効な量のＮ−Ｌ−アラニル−Ｌ−セリ
   ンジアゾアセテート（抗生物質ＬＬ−Ｄ０５１３９β）
   と製薬学的に許容されうる担体または希釈剤とからなる
   、バクテリアの感染を処置するための治療学的組成物。 １０、治療学的に有効な量のＮ−Ｌ−アラニル−Ｌ−セ
   リンジアセテート（抗生物質ＬＬ−ＤＯ５１３９β）と
   製薬学的に許容されうる担体または希釈剤とからなる、
   白血病の退行または軽減を誘発しあるいは帽瘍の生長を
   阻止するための治療学的組成物。