JPS60500416A - 新規ニトロソ尿素、その製法およびその治療への応用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 蜜ｉＬ三１−ロソ尿素ユその製法巧よびその治療への応用本発明は、新規な二Ｉ ・ロソ尿素、その製造方法およびその治療への応用に関する。

ある種のハロアルキルニトロソ尿素類、特に２−クロロエチルニトロソ尿素類は 、動物およびヒトの悪性腫瘍に対して制癌作用を示すために特に関心が持たれて いる種類の化合物であり、これらの化合物が癌の化学療法に有用であることは公 知である。

より大きな抗腫瘍効果および／またはより低い毒性を示すことのできるこの系列 の新規な化合物を開発するために多大の研究が行わ゛れてきた。

その結果、ごく最近、遊離アミノ酸またはアミドの末端Ｃ側誘導体である新規な ニトロソ尿素化合物が提案された。この誘導体は興味ある細胞毒性作用を示した 。

本発明は、アミノ酸から誘導した新規なニトロソ尿素化合物に関し、これは、最 も簡単な場合でもアミン官能基と酸官能基の少なくとも２つの反応性部位を有し ているという、アミノ酸のもつ多官能性の特徴を発揮する。

本発明によると、アミノ酸のアミン官能基には細胞毒性のあるニトロソ尿素部位 を結合させ、酸官能基の方はナイトロジエンマスタード部位を結合させる。

より具体的には、本発明は、Ｌ、、Ｄ、ＤＬ、アロ（ａｌｌｏ）およびトレオ（ ｔｈｒｅｏ）形の下記一般式で示される化合物に関する・式中、Ａば弐：　ＨＮ （Ｒ）−Ａ−ＣＯＯＨのアミノ酸の残基を表し、Ｒは水素原子、を機基、特にア ルキル基を表すが、または式中の窒素原子およびＡとともにＲは複素環を形成し ていてもよく、のニトロソ尿素基を表し、 Ｘは弐：　Ｃ１−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−１（ＣＩ−ＣＨ２−ＣＩ＋２）　ｚＮ −または（ＣＩ−ＣＨ２−ＣＨ２）　２Ｎ−Ｃ６Ｈ，−ＮＨ−のナイトロジェン マスタート基を表す。

このように、上記一般式の化合物は、２つの既知の細胞毒性部位、すなわちアミ ノ酸の末端Ｎ側の少なくとも１つのニトロソ尿素基Ｙと、末端Ｃ側の少なくとも １つのナイトロジェンマスタート基Ｘとを保有している。骨格のアミノ酸が２個 の酸官能基を有するもの（例、アスパラギン酸）である場合、この化合物は１個 のニトロソ尿素部位と２個のナイトロジェンマスタード部位とを有すること。こ なる。また、骨格のアミノ酸が２個のアミン官能基を有するもの（例、リジン） である場合、この化合物は２個のニトロソ尿素部位と１個のナイトロジェンマス タート部位とを有することになる。

本発明の化合物は、したがって、アミノ酸に結合させた１個のニトロソ尿素部位 を含有する公知の１官能性化合物とは基本的に区別される多官能性の化合物であ る。

本発明にかがる第１群の化合物は、次の一般式に対応するものてまたは　Ｎｉ１ −（ＣＨ２）２ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−ＮＨ−Ｙを表し、ｎは１〜７の整数であ り、ＸとＹは上と同し意味である。

この第１群は木質的に天然アミノ酸およびその誘導体からなるものである。

本発明にかかる第２群の化合物は、次の一般式に対応するもので」二記式中、ｎ は１〜７の整数を表し、ＸとＹは上と同し意味である。

この第２群の化合１ｙｌは、合成によってのみ得ることのできる非天然のアミノ 酸からなるものである。

本発明にかかる第３群の化合物は、次の一般式に対応するものである・ 上記式中、Ｒ”は有機基、特にアルギル基を表し、ＸとＹＢよ上と同じ意味であ る。

本発明の好ましい化合物としては、一般式■でＡが・Ａ　１ａ　、、β−Ａｌａ 。

Ａｓｐ、　Ａｓｎ、　Ｇｌｙ、　ＧＡＢＡ、　Ｉｌｅ、　Ｌｅｕ、　Ｌｙｓ、　 Ｍｅｔ、　Ｐｈｅ、　Ｐｒ、ｏ、、　Ｔｒｐ　およびＴｙｒから選んだアミノ酸 の残基を表しているものを挙げることができる。

一般式■の化合物の製造方法は、次の反応式で示すことができる。

本発明の方法は、下記の工程からなる。

まず、一般式； （式中、Ａは上と同し意味てあり、Ｐは保護基を、Ａｃｔは活性化基をそれぞれ 表す）の化合物を、式： ％式％（） （式中、Ｘは上と同し意味）の化合物のアミン塩酸塩と反応させて、の化合物を 生成させる。この一般式■の化合物を次いて水素化するの化合物が得られる。こ の一般式Ｖの化合物を次いて、−Ｃ式：％式％（） （式中、ＹとＡｃｔはそれぞれ上と同し意味）のニトロソカルバメートと反応さ せる。

上記方法においてへニトロソ尿素部位として２−クロロエチルニトロソ尿素およ びメチルニトロソ尿素を、またナイトロシエンマスタード部位として２−クロロ エチルアミン、ビス（２−クロロエチル）アミンおよびＮ、Ｎ−ビス（２−クロ ロエチル）フェニレンジアミンを使用した。

Ｎ保護基であるＰは、ベンジルオキシカルボニル基（Ｚ）とｔｅｒｔ−ブチロキ ジカルボニル基（Ｂｏｃ）のいずれでも同しようによい。ただし、イオウを含有 するアミノ酸の場合には、Ｂｏｃ　Ｍを用いる方が好ましい。

活性化は好ましくは活性化エステルにより行う。Ａｃｔがｐ−二Ｉ・ロフェノー ルまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミド基を表すのが有利である。

２−クロロエチルニトロソ尿素およびメチルニトロソ尿素の導入は、それぞれ活 避化Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ−二十ロソカルハメートまたは活性化Ｎ−メ チル−Ｎ−ニトロソカルバメートにより行うのか有利である。

上記方法において、一般式■の化合物と一般式■の化合物との反応已よ、有機溶 媒、たとえばジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の存在下に行う。次いでこの溶媒 を留去し、残香を酢酸エチルに溶解し、得られた有機相を次いで乾燥および濃縮 し、得られた残香を再結晶する。

一般式■の化合物の水素化は、常温常圧で炭素担持パラジウム触媒の存在下に有 機溶媒（例、エタン）中で行う。次いで、触媒を濾去し、得られた濾液を濃縮乾 固および乾燥する。

このようにして得られた一般式Ｖの化合物をを機熔媒し：溶解し、一般式■のニ トロソカルバメートをこれに添加する。反応混合物を室温で放置し、次いで減圧 濃縮する。得られた残香を次Ｌ）でクロマトグラフィー処理し、得られた純粋な 一般式■の化合物を再結晶処理する。

次に、本発明のニトロン尿素の製造の詳細を、以下の制、尿を目的としない実施 例により説明する。

Ｎ（≦、アミノ−”の２−クロロエチルアミンの一般的製法２−クロロエチルア ミン塩酸塩２．３２　ｇ（０，０２モル）とジイソプロピルエチルアミン３．４ ５ｍ１　（０，０２モル）とを０廿３０　ｍｌにとかして０℃に冷却した溶液に 、Ｎ保護アミノ酸の（ｐ−ニトロフェノールまたはＮ−ヒドロキシスクシンイミ ドによる）活性化エステル０．０１モルを添加する。反応混合物を室温で一晩攪 拌する。

次いでン容媒を減圧留去する。残金を酢酸エチル２００　ｍｌに溶解する。

この溶液を２Ｘ１００ｍｌの１０％クエン酸水ン容液、２　Ｘ１００　ｍｌの水 、２Ｘ１００ｍｌの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、および２Ｘ１００ｍｌの水 で順に洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧？ｔ！縮する。

場合に応じて、得られた残金を直接再結晶するか、シリカカラムでクロマトグラ フィー精製した後で再結晶する。

下記の実施例１．１ないし１．９の化合物は、この一般的製法にしたがって製造 される。

劫例１．■ Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニル−β−アラニン・２−クロロ−１＝エチルアミド Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニル−β−アラニンのＮ−ヒドロキシスクシンイミド エステルから。

ジクロロメタンと石油エーテルの混合物（１／１）から再結晶。

収率：６５％ 融点；２５〜８７℃ 分析：　Ｃ＋ｏＨ＋ｑＮ２０ｚＣ１（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ−０，４０（ 酢酸エチル）渫財■Ｌ上」 Ｎ−カルボヘンジキシ−４−アミノ−２；１゛クン酸の２−クロロエチルアミド Ｎ−カルポヘンゾキシー４−アミツブクン酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエ ステルから。

酢酸エチルと石油エーテルの混合物（１／１）から再結晶。

収率：６３％ 融点：９７〜９９℃ 分析：　Ｃｌａ　Ｈ＋　ｑ　Ｎ　２０３ＣＩ　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ　 ＝　０．３５　（酢酸エチル）亥宛拠」」 Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニルーし一アラニン・２−クロロ−３−エチルアミド Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニル−し−アラニンのｐ−二トロフェニルエステルか ら。

残金をシリカカラムでクロマトグラフィー精製。溶離剤ニジクロロメタン／エー テル（１／１）。

エーテルと石油エーテルの混合物（１／３）から再結晶。

収率ニア６％ 融点：１０１〜１０３℃ 分析：　ＣＩ６Ｈ＋ｑＮｚＯｚＣＩ　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｔ　＝　０． ６８　（ジクロロメタン／エーテル２／１）（α）”ニー８．１°（Ｃ＝１．　 ＤＭＦ）遺屓ｌ〔上」 Ｎ−カルポヘンゾキシーＬ−イソロイシン・２−クロロ−４−エチルアミド Ｎ−カルボヘンジキシ−し一イソロイシンのＮ−ヒドロキシスクシンイミドエス テルから。

エタノールから再結晶。

収率ニア８％ 融点＝１７５〜１７７℃ 分析：　Ｃ＋ａＨｚ３ＮｚＯｉｃＩ。　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒ，＝　０． ６８　（酢酸エチル／ジクロロメタン１／１）〔α）　２０　、＋３，５°（Ｃ ＝Ｌ　Ｄ肝）尖光例１．５ Ｎ−カルボヘンゾキソーし一ロイシン・２−クロロ−３−エチルアミド Ｎ−カルポヘンゾキン−Ｌ−ロイシンのＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル から。

酢酸エチルと石油エーテルの混合物（１１５）から再結晶。

収率：９１％ 融点＝１０］　〜１０３℃ 分析：　Ｃ，Ｈ２３Ｎ２０３Ｃ１（Ｃ，Ｉ（、Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｒ　＝　０．６ ５　（酢酸エチル／ジクロロメタン１／１）〔α）　２０：　−８，８゛（ｃ＝ ２．５．　ＤＭＦ）祖帆１刊 Ｎ−ｔ−−ブチロキシカルボニルーし一メチオニン・２−クロロ−６−エチルア ミド Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニル−し−メチオニンのＮ−ヒドロキシスクシンイミ ドエステルから。

油状の状態で得られ、それ以上精製しないで次工程に使用。

実施皿」Ａ Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニルザルコシンのＮ−ヒドロキシスクシンイミドエス テルから。

酢酸エチルとヘキサンの混合物（１／１）から再結晶。

収率：８０％ 融点＝１１９°Ｃ 分析：　Ｃ＋ｏＨ＋ｑＮ２０３Ｃ１（Ｃ，ＩＬＮ）ＴＬＣ：　Ｒｆ−０，４１（ 、酢酸エチル）尖旌炎」」 Ｎ、Ｎ−ジカルポヘンゾキシーし一リジン・２−クロロ−８−エチルアミド Ｎｃ′、　ＮＥ−ジカルホヘンヅキンーし一リジンのＮ−ヒドロキシスクシンイ ミドエステルから。

酢酸エステルとヘキサンの混合物（１／１）から再結晶。

収率：８８％ 融点：１２３〜１２５°Ｃ 分析：　Ｃｚ　ａ　Ｈ３Ｑ　Ｎ　３０ｓｃＩ　（Ｃ，［ｌ、Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ −０，５２（酢酸エチル）〔α）　”　：　＋４．２　°　（Ｃ＝Ｌ　Ｄ門Ｆ） 芙Ｊ 工Ｎ−カルボヘンゾキシーＬ−９−アスパラギン酸のα、β−シ（２−クロロエ チルアミド） ＤＭＦ７０ｍｌにＮ−カルボベンゾキシーし一アスパラギン酸５．３４ｇ　（０ ，０２モル）をとめ）した０℃の？容？夜に、２−クロロエチルアミン塩酸塩９ ．２８　ｇ（０，０８モル）、ジイソプロピルエチルアミン１３．８　ｍｌ（０ ，０８モル）およびＮ、Ｎ’−−ジシクロへキシルカルボジイミド８．２４　ｇ （０，０４モル）を順に添加する。

室温で２０時間経過後、生成したＮ、Ｎ“−ジシクロヘキシル尿素を濾去し、濾 液を減圧濃縮し、残香を酢酸エチル２００　ｍｌに溶解し、得られた溶液を上記 一般的製法に記載のように処理する。

得られた白色結晶をイソプロピルアルコールから再結晶する。

収量二２．４　ｇ　、すなわち収率３１％融点：１７４〜１７６℃ 分析：　Ｃ＋６Ｈｚ＋ｌ’ｌ：＋０４Ｃ１ｚ　（Ｃ１Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｔ＝ ０．４３　（ジクロロメタン／メタノール９４／６）〔α）　Ｎｏ　、　＋２． ６　°　（Ｃ＝１．　ＤＭＦ）大施五Ｉ ２−クロロエチル・ニトロソカルバモイルアミノ酸アミド（置換もしくは非　） の−的１１法 左火へ Ｎ−カルボベンゾキシアミノ酸アミド０．０１モルを、エタン１００　ｍｌ中の ？８液の状態で、炭素担持１０％パラジウム触媒お゛よび１当量の１０％塩酸水 溶液の存在下に常温・常圧で水素化する。

ＴＬＣが出発化合物の存在を示さなくなったら、触媒を濾紙で濾去し、濾液を減 圧下に濃縮乾固する。残香を粉末状になるまで乾燥エーテルとともに摩砕し、得 られた粉末を集め、工、−チルで洗浄し、デシケータの中で乾燥する。

生成したＮ脱保護誘導体を次いで２０ｍ１のＤＭＦに溶解する。１当量（０，０ １モル、１７２　ｍｌ）のジエチルアミン（ＤＩＥＡ）を低温で添加し、続いて ２，４．５−１リクロロフエニル・Ｎ−２−（クロロエチル）−Ｎ−ニトロソカ ルバメート０．０１２モル（３，９８ｇ）を添加する。

反応混合物を室温で３時間放置した後、減圧濃縮する。残香をシリカカラムでク ロマトグラフィー精製する。得られた純生成物を適当な溶媒から再結晶する。

収率はＮ−保護誘導体の量に基づいて算出する。

麦吏旦 Ｎ−ｔ−ブチロキシカルボニルアミノ酸アミド０．０１モルを２％のチオアニソ ールの存在下に室温で２０ｍ１の無水トリフルオロ酢酸に溶解する。４０分後、 溶液を減圧濃縮し、残香を粉末状になるまで無水エーテル中で摩砕する。

この後の操作は方法Ａと同様に実施する。

方法ＡまたはＢにしたがって下記化合物が製造される。

叉■適」」 Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソカルバモイル−β−アラニン・２−ク ロロエチル−１０−アミド実施例１．１の前駆物質から得られる。方法Ｂ。

クロマトグラフィー溶離剤ニジクロロメタン／酢酸エチル（３／１）。

酢酸エチルと石油エーテルの混合￥１ｌＪ（１／１）から再結晶。

収率：６６％ 融点＝８４　〜８５℃（分解） 分析：　ＣｏＨ＋４Ｎ４０ｒＣＩｚ　（Ｃ１Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｔ　＝　０． ５８　（酢酸エチル）ＩＲ：　シー　１４７０　ｃｍ−’　（Ｎ−ＮＯ）実施± 」」 ４−［Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソウレイド］　−１１−ブタン酸 の２−クローＤ　Ｉ　％−ルアミド実施例１．２の前駆物質から得られる。方法 Ａ。

クロマトグラフィー溶離剤：酢酸エチル。

エーテルとヘキサノの混合物（１／１）から再結晶。

収率ニア９％ 融点二６３　〜６４−℃（分解） 分析：　Ｃ９Ｈ１６Ｎ４０３ＣＩ□　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒ＋　＝　０． ４５　（酢酸エチル）ＩＲ＋シー１４８５ｃｍ−’（Ｎ−Ｎｏ）実施例１．３の 前駆物質から得られる。方法Ｂ。

クロマトグラフィー溶離剤ニジクロロメタン／酢酸エチル（９／１）。

収率：６０％ 融点：１１２〜１１４℃　（分解） 分析：　Ｃａ　Ｈ＋　ａ　Ｎ　４０３ｃｈ　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ　＝ 　０．４３　（ジクロロメタン／酢酸エチル２／ｌ）Ｔ　Ｒ：　Ｉ’　＝　１４ ７５　ｃｍ−’　（Ｎ−Ｎｏ）（α）　”　：　＋４３．２°（Ｃ＝１．　ＤＭ Ｆ）尖施斑」」 Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソカルバモイル−Ｌ−イソロイシン・２ −クロロエチル−１３−アミド実施例１．４の前駆物質から得られる。方法Ａ。

クロマトグラフィー溶離剤：ジクロロメタン／酢酸エチル喧３／１）。

エーテルから再結晶。

収率・６７％ 融点＝１０３〜１０４℃　（分解） 分析：　Ｃａ　Ｈ２６Ｎ　４０　ａｃｌ。　（Ｃ，Ｈ，ｌ１ｌ）ＴＬＣ：　Ｒｔ 　＝　０．５８　（ジクロロメタン／酢酸エチル１／１）Ｉ　Ｒ：　ｖ−１４８ ０ｃｍ−’　（Ｎ−Ｎｏ）Ｎ−（２−７０ロエチル）−Ｎ−ニトロソカルバモイ ル−し−ロイシン・２−クロロエチル−１４−アミド実施例１．５の前駆物質か ら得られる。方法Ａ。

クロマトグラフィー溶離剤：酢酸エチル／石油エーテル（３／１）。

酢酸エチルと石油エーテルの混合物（１／１０）から再結晶。

収率ニア１％ 融点：１１７〜１１８°Ｃ（分解） 分析：　Ｃ，ＩＨ２ＯＮ、０３Ｃ１２（Ｃ，Ｉｔ、Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒ，＝　０． ５２　（酢酸エチル／ヘキサン２／１）Ｉ　Ｒ：　ｖ　＝　１４３０　ｃｍ−’ 　（Ｎ−Ｎｏ）〔α）　”　：　＋１８．５°　（Ｃ＝１．　ＤＭＦ）天１１［ 又Ｊ 凡ユ±肚召凹正工±土り二りだ」」１左止ユ到匂辷」郵Ｊ土オニン・２−クロロ エチル−１５−アミド実施例１．６の前駆物質から得られる。方法Ｂ０クロマト グラフィー？容離Ｍ、エーテル。

エーテルと石油エーテルの混合物（１／１）から再結晶。

収率：６３％ 融点：５３　〜５５°Ｃ 分析：Ｃ３゜ＨＩＩＩＮ４０．ＳＣ１（Ｃ，＋１．Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ　＝　０ ．６４　（エーテル）Ｉ　Ｒ：　ｖ　＝’　１４８５　ｃｍ−’　（Ｎ−ＮＯ） 〔α）　２０　：　＋９．５°（Ｃ＝１．　ＤＭＦ）寒立皿」Ｊ 凡ユ」遣口クヱＯＸ　％　７１佳二骨辷≦玉口とムリヒ生到進火ｉ火ユ乞Ｚ・２ −クロロエチル−１６−アミド 実施例１．７の前駆物質から得られる。方法Ｂ。

クロマトグラフィー溶離剤ニジクロロメタン／酢酸エチル（９／１）。

エーテルとヘキサンの混合物（１／１）から再結晶。

収率：６３％ 融点：６３　〜６５℃ 分析：　ＣｅＨ＋ａＮａＯｚＣ１□　（Ｃ，Ｈ，Ｎ）Ｉ　Ｒ：　ｖ−１４’７０ 　ｃｍ−’　（Ｎ−Ｎｏ）ＴＬＣ：　Ｒｔ　＝　０．３６　（酢酸エチル／ジク ロロメタン１／１）災宛拠」Ｊ 実施例１．８の前駆物質から得られる。

方法Ａを利用するが、リジンがアミン官能基を２個含有しているため、旧ＥＡと 「活性化」ニトロソカルバメートを２倍量ずつ導入するようにこの方法を修正。

クロマトグラフィー溶離剤ニジクロロメタン／酢酸エチル（９／１）。

酢酸エチルと石油エーテルの混合物（１／４）がら再結晶。

収率：５２％ 融点：６９℃　（分解） 分析：　Ｃ１４Ｈ２４Ｎ５０？Ｃ１３（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒｆ　＝　０． ４０　（酢酸エチル／ヘキサン１／１）Ｉ　Ｒ：　ｖ−１４７０，１４８０ｃｍ −’　（Ｎ−Ｎｏ）〔α）　２０：　＋１２．３’　（Ｃ＝Ｌ　ＤＭＦ）実施例 ２．９ Ｎ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソカルバモイル−Ｌ−１８−アスパラギ ン酸のα、β−ジ（２−クロロエチルアミド）反応の粗生成物を水中で摩砕し、 乾燥し、エーテル中で摩砕し、乾燥する。得られた粉末をアセトンとヘキサンの 混合物（１／１）から再結晶する。

収率ニア０％ 融点＝１５６〜１５７°Ｃ（分解） 分析：　ＣｚＨ＋ｌ］Ｎ５ＯｎＣ１３（Ｃ，Ｈ，Ｎ）ＴＬＣ：　Ｒ，−０，２９ （クロロホルム／酢酸エチル３／１）Ｉ　Ｒ：　ν＝　１４７５　ｃｍ　−’　 （Ｎ−Ｎｏ）〔α〕２０：　→−２３，０°（Ｃ＝１．Ｄ肝）既知のニトロソ尿 素類と同様に、本発明の化合物も制癌、抗腫瘍および抗有糸分裂の各作用を示す 。

したがって、本発明の化合物は、人間および動物の悪性腫瘍の治療用の制癌薬と なる。

他の既知のニトロソ尿素類と比へた本発明の若干の化合物の制癌活性を、次に述 べる実験操作にしたがって測定した。

Ｆ１マウス（ＤＢ八へ２ＸＣ５７Ｂ　１／６）に、０日目に１０５個のロイケミ ア（ｌｅｕｋｅｍｉａ）　Ｌ　１２１０細胞を腹腔内径路により接種し、５群に 分ける。

第１群は対照群であり、残りの４群には１日目、５日目および９日目に各種濃度 の被験化合物で処置する。被験化合物は油中ぞ、濁液として注射する。マウスの 生死を観察し、死亡個体を剖検して死亡が白血病によるのか、投与薬剤の毒性作 用によるのかを調べる。被験化合物の各投与量ごとに、結果をＴ／Ｃ（％）　（ Ｔは処置群の生存癒した場合にＴ／Ｃ−（イ））として表す。Ｔ／Ｃ≧１２５％ は、その薬剤か有効であることを意味する。

この試験を、下記一般式： で示される化合物により、アミノ酸と置換基Ｘ（末端Ｃ（、ｌｌＪ’置換基）の 種類を変えて実施した。

Ｘの意味は次の通りである： １）本発明の化合物：　Ｘ　−−Ｎｉｌ−Ｃ１ｌｚ−ＣＨ□Ｃ１，−Ｎ（ＣＩ□ −ＣＨ２Ｃ１）　ｚまたは−ＮＨ−Ｃ６Ｈ４−Ｎ（ＣＨ２−ＣＨ２Ｃ１）２　； ２）本発明の範囲外の化合物：　Ｘ−−ＮＨ２または−ＮＨ−ＣＨ３゜結果を次 表に示す。

表　−Ｌ１２１（Ｘｉ、ｐ、）に対する活性の結果上の表は、ＬＤ５いＴ／Ｃ、 ｌ’１．Ｅ、１．Ｄ、　（最大有効体内用量、すなわちＴ／Ｃ−−に対応する最 大活性のプラトー）の量に関する。

表の結果は、本発明の２−クロロエチルアミド２花合物が既知のアミド化合物（ 末端Ｃ側−ＮＨ２）より有効であることを示している。

すなわち、次の表にも示すように、化合物＆　９．１３および１５は、化合物＆ 　１０．１４および１６よりずっと有効である。

匡り透専体 隅　置＠基 ９　−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ，−ＣＩ　ＭＥＩＤ：　１５〜５０　ｍｇ／ｋｇの範 囲内１０　−ＮＨ２最大活性プラトーを示さず町り版星生 １３　−ＮＨ−ＣＨｚ−ＣＨｚ−ＣＩ　ＭＥＩＤ：　１０〜３０　ｍｇ／ｋｇの 範囲内１４　−ＮＨ２最大活性プラトーを示さずＰＩＦ誘導体 １５　−ＮＨ−Ｃ）１２−ＣＨ２−ＣＩ　ＭＥＩＤ：　４０〜６０　ｍｇ／ｋｇ の範囲内１６　−ＮＨ２最大活性プラトーを示さずＬＤｓｏ値の結果は本発明の 化合物の毒性が低いことを示していることにも留意すべきである。

本発明は、上記一般式Ｉで示される化合物を有効主成分として含有する薬剤組成 物にも関する。

国際旨査報告 ＡＪＮＥＸＴｏＴＥ’、ｐ：ＩＮＴＥＲ３＋Ａｍ＝ＩＯＮＡＬＳＥＡＲＣＨＲＥ ＰＯＲＴＯＮＩＮＴＥＲＮＡＴＩＯＮＡＬ　ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮ　Ｎｏ、　 ＰＣＴ／ＦＲ８４１０○０２８　（ＳＡ　６５２３）第１頁の続き ＠発明者　マルチネ、ジャンーアルフォンスージョゼフ （ｊＭ＠　間者　エンバック、ジャン・ルイフランス国　３４０００　モンペリ エ、リュー・デ・セベンヌ（番地なし）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １．Ｌ、Ｄ、ＤＬ、アロおよびトレオ形の下記一般式で示される化式中、Ａは式 ：　ＨＮ（Ｒ）−Ａ−ＣＯＯＨのアミノ酸の残基を表し、Ｒは水素原子、有機基 、特にアルキル基を表すか、または式中の窒素原子およびＡとともにＲは複素環 を形成していてもよく、のニトロソ尿素基を表し、 Ｘは式：　Ｃ１−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ１＋−１（ＣＩ−ＣＨｚ−ＣＨｚ）　ｚＮ −または（ＣＩ−ＣＨ２−ＣＩ＋２）　２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＮＨ−のナイトロジエ ンマスタード基を表す。 ２、下記一般式で示される請求の範囲第１項に記載の化合物ニー（ＣＨ２）２Ｃ ＩＩ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｎ）Ｉ−Ｙを表し、ｎは１〜７の整数であり、ＸとＹは 請求の範囲第１項に記載の通りである。 ３、　下記一般式で示される請求の範囲第１項に記載の化合物：上記式中、ｎは １〜７の整数を表し、ＸとＹは請求の範囲第１項に記載の通りである。 ４、下記一般式で示される請求の範囲第１項に記載の化合物：上記式中、Ｒ”は 有機基、特にアルキル基を表し、ＸとＹは請求の範囲第１項に記載の通りである 。 ５、　Ａが　Ａｌａ、β−八へａ、八ｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｙ、ＧＡＢＡ、Ｉｌｅ 、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、　Ｐｈｅ、　Ｐｒｏ、　Ｔｒｐ　およびＴｙｒがら 選んだアミノ酸の残基を表している請求の範囲第１項に記載の化合物。 （式中、Ａ、ＸおよびＹは請求の範囲第１項に記載の通りの意味）で示される化 合物の製造方法であって、一般式： （式中、Ａは上七同し意味であり、Ｐは保護基を、Ａｃｔは活性化基をそれぞれ 表す）の化合物を、式、： ＨＸ　（ＩＩ＋） （式中、Ｘは上と同し意味）の化合物のアミン塩酸塩と反応させて、の化合物を 生成させ、 この一般式■の化合物を水素化して、一般式：の化合物を得、 得られた一般式Ｖの化合物を、一般式：％式％（） （式中、ＹとＡｃｔはそれぞれ上と同し意味）のニトロソカルバメートと反応さ せて、一般式■の化合物を得ることからなる上記方法。 ？、Ｐが、ヘンシルオキシカルボニル基（Ｚ）またはＬ−ブチロキシカルボニル 基（Ｂｏｃ）であり、Ａｃｔがｐ−二トロフェノール基またはＮ−ヒドロキシス クシンイミド基である請求の範囲第６項に記載の方法。 ８、一般式■の化合物と一般式■の化合物との反応を有機溶媒の存在下に行い、 次いでこの溶媒を留去し、残香を酢酸エチルに溶解し、得られた有機相を乾燥お よび濃縮し、得られた残香を特徴とする請求の範囲第６項および第７項のいずれ かに記載の方法。 ９、一般式■の化合物の水素化を、灰素担持パラジウム触媒の存在下に有機ノ容 媒中で行い、触媒を濾去し、得られた濾液を濃縮乾固および乾燥する、請求の範 囲第６項に記載の方法。 １〇　一般式Ｖの化合物を有機溶媒に溶解し、一般式■のニトロソカルバメート をこれに添加し、反応混合物を室温で放置後に減圧濃縮し、残香をクロマトグラ フィー処理し、得られた純粋な一般式Ｉの化合物を再結晶処理する、請求の範囲 第６項ないし第９項のいずれかに記載の方法。 Ｉｌ、腫瘍の治療に特に適した薬剤としての請求の範囲第１項ないし第５項のい ずれかに記載の化合物。 １２、請求の範囲第１項ないし第５項のいずれかに記載の化合物を主有効成分と して含有する薬剤組成物。