JPS60258123A - 第▲１０３▼因子標品の取得法ならびにその使用 - Google Patents

第▲１０３▼因子標品の取得法ならびにその使用

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JPS60258123A
JPS60258123A JP60110611A JP11061185A JPS60258123A JP S60258123 A JPS60258123 A JP S60258123A JP 60110611 A JP60110611 A JP 60110611A JP 11061185 A JP11061185 A JP 11061185A JP S60258123 A JPS60258123 A JP S60258123A
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JP
Japan
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factor
specimen
solution
factor xiii
exchanger
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Pending
Application number
JP60110611A
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English (en)
Inventor
ユルゲン・フアルケ
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Siemens Healthcare Diagnostics GmbH Germany
Original Assignee
Behringwerke AG
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Publication date
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Pending legal-status Critical Current

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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
    • C12N9/104—Aminoacyltransferases (2.3.2)
    • C12N9/1044—Protein-glutamine gamma-glutamyltransferase (2.3.2.13), i.e. transglutaminase or factor XIII
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
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  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は胎盤からの第Ｘｍ因子標品の取得法に関する。
この標品は血液凝固障害の治療に使用されうる。
西ドイツ特許第２０　６３　０６９号および同第２０　
６３　Ｃｌ２Ｏ号には第Ｘｌ［ｌ因子官有と同意義であ
るフィブリン安定化作用を弔する医楽の製法が既に６ピ
載されている。この両者における多段階方法ではｍｘｍ
因子はジアミノエトキシ−アクリジン乳酸塩を用いて沈
殿させている。この沈殿剤の使用は費用がかかる。もう
一つの同様に段階の多い方法はヨーロッパ特許第００１
１７３９号から知られておシ、そこでは一操作段階で第
ｘＭ１因子をアルキレンオキシド重合体を用いて沈殿さ
せている。
今、驚くべきことに、胎盤からの塩抽出物のエタノール
沈殿から出発しそして溶解させた沈殿をＤＥＡＪＩＩｉ
セルロースに吸着させ、この交換体を洗浄することによ
り不純物を実質上除去しそして第ＸＩ［Ｉ因子を溶離す
ることによシ第ｘ■因子像品が胎盤から従来法によるよ
シ市い収率で取得されうろことが見出された。
それゆえ本発明は第Ｘｍ因子を低級アルカノールを用い
て沈殿させ、残留物を水浴液中に溶解させ、この溶液を
陰イオン交換体と接触させ、液体を分離し、この交換体
を第Ｘｍ因子を脱着しない液体で洗いそして第Ｘｍ因子
を溶離させることを特徴とする胎盤の水性抽出物からの
第ｘｎ＋因子標品の取得法に関する。
アルカノール沈殿には好ましくはエタノールが使用され
、その際アルコール濃度は１００〜３００ｄ／を好まし
くは１５０〜３００ｄ／１ＫＷＩ４整される。−は７〜
９好ましくは７．５〜Ｚ７である。温度は０〜−１０℃
好ましくは−５〜−７０に保持される 残留物を１［］ｍ８以下の導電率および声５〜９を有す
る水性液体中に溶解させ、場合により濾過し、そして陰
イオン交換体好ましくはＤＥＡＰＩセルロースと接触さ
せる。その際湿った交換体量は液体１を当り１００〜５
００好ましくは２００〜６００−である。液体とイオン
交換体を混合し、その際接触時間は０．５〜５好ましく
は１時間である、または液体が交換体を含有１−るカラ
ムに導入されうる。ｐｌ（値は７〜９でめるべきである
。
液体とイオン交換体とを分離しそしてイオン交換体を４
奄率６まで、好ましくは１〜２　ｍｓを　Ｉｔ。
有する水性液体を用いそして聞７〜９好ましくは１５〜
１７で、好ましくは洗液中に蛋白質がなくなるまで洗浄
する。
交換体を導電率２ｍＳ以上を有する水性液体、好ましく
は複合物形成体を含有する塩溶液％に少くとも５　ｆ／
ｌの食塩を含有する水浴液で処理するとそれによりｉｘ
ｍ因子が脱着されそしてこの溶液を場合によシ濃縮する
かまたは乾固させる。
収率は胎盤中に含有される活性の５０％迄達する。
アルカメール沈殿の上澄み液からはアルブミンが、そし
て陰イオン９：俟坏処理された浴液およびイオン交換体
の洗液からは免疫グロブリンが得られる。
得られた第Ｘ■因子像品は場合によシさらに処置したの
ち血液凝固障督の治療に使用されうる。
実施例 粉砕した胎盤物質を５　ｆ／ｌの食塩を含有する水溶液
の同重量で処理することによシ得られた抽出液１０．３
１１’１ＤＴＡ　５ミリモルを加えそしてｐＨ７，６お
よび一６℃でその混合物が２５０＃＋７！／ｌのエタノ
ールを含有するまでエタノールを添加した。１時間攪拌
し、セライト（Ｏｅｌｉｔｅ）Ｊ２濾過助剤（５ミリモ
ル／ｌの［ＤＴＡ溶液で、予備洗浄）５０ｔ／ｌを加え
そして濾過した。残留物をトリス（Ｔｒｉｓ）およびＥ
ＤＴＡそれぞれ５ミリモル／ｌずつを含有する溶液１．
６を中に５回懸濁させ、攪Ｉ半しぞして濾過した。合一
した漬出液を限外濾過器上１５９０ｍ／となるまで誂縮
するとこれは１［１６００単位の第Ｘｍ因子を含有した
。
導電率２ｍ１３を有する濃縮物を湿ったＦｔＤＡＥセル
ロース３７５ｆと２時間攪拌した。この蛋白質溶液をＰ
４器上吸引濾過しそして濾過塊をトリス（Ｔｒｉ８）お
よびＫＤＴＡ　５ミリモに／ｌずつを含有する緩衝液１
３５０ｍで洗った。
脱着するＫはＤＥＩＡＦｔセルロースをａ５ｆ／／、の
Ｎａ１ｌおよび５ミリモル／ｌのＥＤＴＡを含Ｍする一
Ｚ２の水溶液１６００ｄ中４５分間攪拌した。溶液を濾
過したのちこれを２回反復した。溶出液を合した。この
ものは８，３０２単位の第ＸＩ因子活性を含有した。さ
らに処理するに先立ちこの蛋白質溶液は限外ｐ過器で濃
縮するかまたは凍結乾燥しうる。
特許出願人　ベーリングヴエルケ・アクチェンゲゼルシ
ャフト 外２名

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １）　１ＸＩｌｌ因子を低級アルカノールを用いて沈殿
    させ、残留物を水溶液中に溶解させ、この溶液を陰イオ
    ン交換体と接触させ、液体を分離し、交換体を第ｘＩＩ
    ｌ因子を説看しない液体で洗いそして第Ｘ■因子を溶離
    させることを特徴とする胎盤の水性抽出物からの第Ｘｍ
    因子標品の取得法。 ２）アルカノールがエタノールでメジそして混合物中の
    アルコールｍ度が１５０〜５００ｍ１／ｌであることを
    特徴とする特許 第１項記載の方法。 ３）陰イオン交換体がＤＩ！ｉＡＥｔセルロースである
    ことを特徴とする前記特許請求の範囲第１項記載の方法
    。 ４）導電率１〜２　ｍｓを有する水性液体を用いてイオ
    ン交換体を洗浄することを特徴とする前記％許請求の範
    囲第１頂記戦の方法。
JP60110611A 1984-05-25 1985-05-24 第▲１０３▼因子標品の取得法ならびにその使用 Pending JPS60258123A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

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DE19843419581 DE3419581A1 (de) 1984-05-25 1984-05-25 Verfahren zur gewinnung einer faktor xiii-praeparation sowie ihre verwendung
DE3419581.5 1984-05-25

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JPS60258123A true JPS60258123A (ja) 1985-12-20

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JP60110611A Pending JPS60258123A (ja) 1984-05-25 1985-05-24 第▲１０３▼因子標品の取得法ならびにその使用

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EP (1) EP0162426A3 (ja)
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DE (1) DE3419581A1 (ja)
DK (1) DK231885A (ja)
ES (1) ES8605812A1 (ja)
FI (1) FI852065L (ja)
GR (1) GR851270B (ja)

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EP0162426A3 (de) 1987-05-20
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