JPS60252499A - モノクローナル抗体およびその製法 - Google Patents
モノクローナル抗体およびその製法Info
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- JPS60252499A JPS60252499A JP60092403A JP9240385A JPS60252499A JP S60252499 A JPS60252499 A JP S60252499A JP 60092403 A JP60092403 A JP 60092403A JP 9240385 A JP9240385 A JP 9240385A JP S60252499 A JPS60252499 A JP S60252499A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は限定された細胞質性、膜会合性および分泌され
た抗原に結合するモノクローナル抗体（以下ＭＡＲと略
記する）に関する。これら抗体は診断剤としてまたは作
用物質ないし作用物質担体として使用されうる。
た抗原に結合するモノクローナル抗体（以下ＭＡＲと略
記する）に関する。これら抗体は診断剤としてまたは作
用物質ないし作用物質担体として使用されうる。
限定され、単離された抗原を用いる免疫賦与技法および
かかる抗原に対する抗体の産生技術は知られている。未
精製の抗原物質を用いて免疫しそしてかかる抗原混合物
の特定の成分を識別する抗体を選択することも知られて
いる。
かかる抗原に対する抗体の産生技術は知られている。未
精製の抗原物質を用いて免疫しそしてかかる抗原混合物
の特定の成分を識別する抗体を選択することも知られて
いる。
かかる抗体を誘導する試みにおいて、非還元的または還
元的条件下に下記蛋白質抗原またはこれら蛋白質抗原上
の特定のエピトープと反応するモノクローナル抗体を選
択することができた。すなわち、 抗原１：非還元条件下または還元条件下に分子量（以下
ＭＷと略記する）７２±６キロダルトン（以下ＫＤと略
記する）を有する蛋白質、抗原２：非還元条件下にＭＷ
＞ ２ Ｄ ｏＫ、Ｄを有する糖蛋白質複合物、 抗原５：非還元条件下または還元条件下にＭＷ１８０±
ｌ０ＫＤ）９５±ｌ０ＫＤおよび５５±ｌ０ＫＤ金有す
る３種類の糖蛋白質、 抗原４：非還元条件下にＭＹ＞２００ＫＤを有する糖蛋
白質複合物。
元的条件下に下記蛋白質抗原またはこれら蛋白質抗原上
の特定のエピトープと反応するモノクローナル抗体を選
択することができた。すなわち、 抗原１：非還元条件下または還元条件下に分子量（以下
ＭＷと略記する）７２±６キロダルトン（以下ＫＤと略
記する）を有する蛋白質、抗原２：非還元条件下にＭＷ
＞ ２ Ｄ ｏＫ、Ｄを有する糖蛋白質複合物、 抗原５：非還元条件下または還元条件下にＭＷ１８０±
ｌ０ＫＤ）９５±ｌ０ＫＤおよび５５±ｌ０ＫＤ金有す
る３種類の糖蛋白質、 抗原４：非還元条件下にＭＹ＞２００ＫＤを有する糖蛋
白質複合物。
抗原１は、オート−７５（ｏａｔ、−７５）小細胞性肺
癌細胞系列〔［キャンサー・リサーチ（ＣａｎｃｅｒＲ
ｅｓｅａｒｃｈ ） Ｊ第３７巻第３’０８８〜！ｌ
ｒ］ ９５頁（１９７７年）参照〕の細胞膜上ならびに
オート−７５に由来し、ヌードマウスに移植された腫瘍
上１ｇＧ１アイソタイプのＭＡ、Ｂ ２７８／９７と接
合しうる１個のエピトープを担持する、すなわちこのＭ
ＡＲはこのエピトープを担持するそのままのオート−７
５細胞系列または相当する移植された腫瘍組織ニ結合す
る。このエピトープは他の１橿の小細飽性肺癌細胞系列
（５ＨＰ−７７）上にもまた６種の他の非小細胞性肺癌
細胞系列（ＣａＬｕ−１、Ｅ−１４、Ｂ１０９、Ａ ５
４９、ＣｈａＧｏ、Ｂｒｏ−ＣａＨｏｆ １ＡＴｃｃ系
列）上にも検出され得なかった。その他このエピトープ
は５種類の膵臓腫瘍細胞系列（ＰａＴｕ−Ｔ、ｎ、ｍ、
Ｍ：ｒＡ Ｐａ−Ｃ’ａ−２、ＰＡＮＣ−１）、２種類
の婦人科腫瘍細胞系列（ＨｅＬａＸＰＡ−１） 、５種
類の非関連性の他の癌細胞系列（ＭＣＦ−７、ＭＤＡ−
１、Ｃｏ−Ｗｉ）、６種類のヒト繊維芽細胞系列、３種
類のヒト以外の細胞系列（Ｖｅｒｏ、ラット線維芽細胞
、ＮＭＲＩ系マウス線維芽細胞）ならびにヒトの末端血
液白血球上には検出され得なかった。
癌細胞系列〔［キャンサー・リサーチ（ＣａｎｃｅｒＲ
ｅｓｅａｒｃｈ ） Ｊ第３７巻第３’０８８〜！ｌ
ｒ］ ９５頁（１９７７年）参照〕の細胞膜上ならびに
オート−７５に由来し、ヌードマウスに移植された腫瘍
上１ｇＧ１アイソタイプのＭＡ、Ｂ ２７８／９７と接
合しうる１個のエピトープを担持する、すなわちこのＭ
ＡＲはこのエピトープを担持するそのままのオート−７
５細胞系列または相当する移植された腫瘍組織ニ結合す
る。このエピトープは他の１橿の小細飽性肺癌細胞系列
（５ＨＰ−７７）上にもまた６種の他の非小細胞性肺癌
細胞系列（ＣａＬｕ−１、Ｅ−１４、Ｂ１０９、Ａ ５
４９、ＣｈａＧｏ、Ｂｒｏ−ＣａＨｏｆ １ＡＴｃｃ系
列）上にも検出され得なかった。その他このエピトープ
は５種類の膵臓腫瘍細胞系列（ＰａＴｕ−Ｔ、ｎ、ｍ、
Ｍ：ｒＡ Ｐａ−Ｃ’ａ−２、ＰＡＮＣ−１）、２種類
の婦人科腫瘍細胞系列（ＨｅＬａＸＰＡ−１） 、５種
類の非関連性の他の癌細胞系列（ＭＣＦ−７、ＭＤＡ−
１、Ｃｏ−Ｗｉ）、６種類のヒト繊維芽細胞系列、３種
類のヒト以外の細胞系列（Ｖｅｒｏ、ラット線維芽細胞
、ＮＭＲＩ系マウス線維芽細胞）ならびにヒトの末端血
液白血球上には検出され得なかった。
このエピトープはさらにヌードマウス上に移植された１
２種類の肺癌上および４種類の移植された膵臓腫瘍なら
びに７種類の直接患者からとり出された肺癌、ならびに
１種類ずつの胃癌および結腸癌、５種類の正常な肺組織
、１種類ずつの膵臓、胃、結腸および甲状腺正常組織上
で検出されない。
２種類の肺癌上および４種類の移植された膵臓腫瘍なら
びに７種類の直接患者からとり出された肺癌、ならびに
１種類ずつの胃癌および結腸癌、５種類の正常な肺組織
、１種類ずつの膵臓、胃、結腸および甲状腺正常組織上
で検出されない。
オート−７５腫瘍移植組織をホルムアルデヒド固定しモ
して／ξラフイン床に封埋したのちは、低温保存された
物質上に検出されるエピトープは変化してＭＡＲ２７８
／７９は最早結合しない。
して／ξラフイン床に封埋したのちは、低温保存された
物質上に検出されるエピトープは変化してＭＡＲ２７８
／７９は最早結合しない。
抗原２は、オート−２５小細胞性肺癌細胞系列の細胞膜
上ならびにオート−７５に由来しそしてヌードマウスに
移植された腫瘍上にＩ ｇ０３−アイソタイプのＭＡＢ
２７８／１０５に接合しうる１種類のエピトープを担
持する。このエピトープは脈管中例えば正常および腫瘍
組織の低温槽切片中ならびにホルムアルデヒド処理され
た一ξラフイン床に封埋された物質上に検出されうる。
上ならびにオート−７５に由来しそしてヌードマウスに
移植された腫瘍上にＩ ｇ０３−アイソタイプのＭＡＢ
２７８／１０５に接合しうる１種類のエピトープを担
持する。このエピトープは脈管中例えば正常および腫瘍
組織の低温槽切片中ならびにホルムアルデヒド処理され
た一ξラフイン床に封埋された物質上に検出されうる。
このものはここでは優勢には内皮細胞中に見出されるが
、しかしながらまた例えば基底膜の一部または内部弾力
膜のような細胞外範囲中にも見出されうる。これは巨核
球中には検出されないが、しかし糸球体の毛細管ループ
内皮中には検出される（ ＦｖＩＲ： ＡＧと反対）。
、しかしながらまた例えば基底膜の一部または内部弾力
膜のような細胞外範囲中にも見出されうる。これは巨核
球中には検出されないが、しかし糸球体の毛細管ループ
内皮中には検出される（ ＦｖＩＲ： ＡＧと反対）。
ポーマン氏の５の上皮は反応性ではない。当然血管系の
腫瘍中において特に富化されている。エピトープは例え
ばヒトの橢帯内皮細胞においても細胞膜（グルタルアル
デヒド固定後）上のみならず細胞質（核の周囲の斑点状
成分および細胞質内顆粒状分布物）中にも検出される。
腫瘍中において特に富化されている。エピトープは例え
ばヒトの橢帯内皮細胞においても細胞膜（グルタルアル
デヒド固定後）上のみならず細胞質（核の周囲の斑点状
成分および細胞質内顆粒状分布物）中にも検出される。
さらにヒトの腸骨稜静脈内皮細胞はこのエピトープを表
示し、一方これに対し牛の肺動脈内皮細胞においてはこ
のエピトープは検出されない。人間の末梢血液白血球の
細胞膜上にはこのエピトープは検出されない。ホルムア
ルデヒド固定およびパラフィン封埋に対する組織中のエ
ピトープの抵抗と並んでこれはさらにノイラミニダーゼ
処理に対しても抵抗性であるがしかし過沃素酸酸化に対
して感受性である。
示し、一方これに対し牛の肺動脈内皮細胞においてはこ
のエピトープは検出されない。人間の末梢血液白血球の
細胞膜上にはこのエピトープは検出されない。ホルムア
ルデヒド固定およびパラフィン封埋に対する組織中のエ
ピトープの抵抗と並んでこれはさらにノイラミニダーゼ
処理に対しても抵抗性であるがしかし過沃素酸酸化に対
して感受性である。
ＭＡ、Ｂ ２７８／１０５はその性質ゆえに内皮に由来
する腫瘍ならびに慢性炎症の診断に適当である。
する腫瘍ならびに慢性炎症の診断に適当である。
抗原６は異種構造の抗癌胚性抗原−抗血清との強い交叉
反応ゆえに１９６５年にゴールド・アンド・フリーマン
（Ｇｏｌｃｌ ＆ Ｆｒｅｅｍａｎ、 ）氏により単離
された癌胚性抗原（以下ＣＥＡと略記する）〔「ジエー
・エキスジ・メト（Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、凡策１２
２巻第４６７頁（１９（５５年）参照〕と類似する。こ
の複雑な糖蛋白質上に比較的多数のエピトープが局在し
、これらは他の、ｃＥＡと同じでない分子上にも存在す
る。これらは抗原ＮＣＡ２〔非特異的交叉反応抗原、［
ジェー・イミュン（Ｊ、 Ｉｍｍｕｎ、、 ） Ｊ第■
巻第１９２６頁（１９７３年）参照］、ＮＣＡ４ Ｃ非
特異的交叉反応ＦＣ原、「アン・エヌ・ワイ・アカド・
サイ（Ａｎｎ、 Ｎ、 Ｙ、 Ａｃａｄ。
反応ゆえに１９６５年にゴールド・アンド・フリーマン
（Ｇｏｌｃｌ ＆ Ｆｒｅｅｍａｎ、 ）氏により単離
された癌胚性抗原（以下ＣＥＡと略記する）〔「ジエー
・エキスジ・メト（Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、凡策１２
２巻第４６７頁（１９（５５年）参照〕と類似する。こ
の複雑な糖蛋白質上に比較的多数のエピトープが局在し
、これらは他の、ｃＥＡと同じでない分子上にも存在す
る。これらは抗原ＮＣＡ２〔非特異的交叉反応抗原、［
ジェー・イミュン（Ｊ、 Ｉｍｍｕｎ、、 ） Ｊ第■
巻第１９２６頁（１９７３年）参照］、ＮＣＡ４ Ｃ非
特異的交叉反応ＦＣ原、「アン・エヌ・ワイ・アカド・
サイ（Ａｎｎ、 Ｎ、 Ｙ、 Ａｃａｄ。
ｓｃｉ、）Ｊ第２５９巻第３８９頁（１９７５年）参照
〕、ＢＧＰ−Ｉ Ｃｒインド 、Ｂニー・カンサー（Ｉ
ｎｔ 。
〕、ＢＧＰ−Ｉ Ｃｒインド 、Ｂニー・カンサー（Ｉ
ｎｔ 。
Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ ）Ｊ第１７巻第５８８頁（１，９
７６年）参照〕およびＣＥＡｌｏｗ〔「スカンド・ジェ
ー・イムツル（８ｃａｎｄ、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、
） Ｊ第８巻補遺８号第４２３〜４２８頁（１９７８年
）参照〕である。
７６年）参照〕およびＣＥＡｌｏｗ〔「スカンド・ジェ
ー・イムツル（８ｃａｎｄ、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、
） Ｊ第８巻補遺８号第４２３〜４２８頁（１９７８年
）参照〕である。
抗原６上には７種の新規なエピトープが発見され、これ
らは一部分はすぐ前にあげた分子中にも存在する（第１
表参照）。この抗原は例えば免疫沈殿により結腸癌細胞
系列（ＤＥ−ＴＡ ）中に検出されそこでのその分子量
はＣＥＡについて文献に記載された分子量より相当低い
。
らは一部分はすぐ前にあげた分子中にも存在する（第１
表参照）。この抗原は例えば免疫沈殿により結腸癌細胞
系列（ＤＥ−ＴＡ ）中に検出されそこでのその分子量
はＣＥＡについて文献に記載された分子量より相当低い
。
第 １ 表
■ ＋ ＋ ＋ −← −
１＋＋＋−−
１［＋十−−−
■ ＋＋＋−
Ｖ＋＋−−
Ｖｌ ＋（＋） −−−
■ ＋−−ｍ−
ＭＡＲ１〜■により識別されるＣＥＡ分子上のエピトー
プは［モル壽イムツル（Ｍｏｌ 、 Ｉｍｍｕｎｏｌ
、）Ｊ第１９ （１２）巻筒１６４１〜１６４８頁（１
９８２年）およびヨーロッパ特許出願第９８，１６２Ａ
２号（１９８３年）においてモノクローナル抗体により
画定されるエピトープとは上記分子上での分布が異なる
ゆえに相異する。
プは［モル壽イムツル（Ｍｏｌ 、 Ｉｍｍｕｎｏｌ
、）Ｊ第１９ （１２）巻筒１６４１〜１６４８頁（１
９８２年）およびヨーロッパ特許出願第９８，１６２Ａ
２号（１９８３年）においてモノクローナル抗体により
画定されるエピトープとは上記分子上での分布が異なる
ゆえに相異する。
ＭＡＢ ｉπ（ＢＷ ４５１／３１ ）の特性を以下に
詳細に記載する。
詳細に記載する。
ＭＡＢ ＢＷ ４５１／３１はヒトの結腸、膵臓、胃お
よび肺癌から精製されたＣＥＡ（１８０ＫＤ ）上の１
個のアロタイプエピトープを識別する。このエピトープ
は研究に使用される組織のホルムアルデヒド固定および
パラフィン封埋に対して抵抗性である。さらにこのエピ
トープは過沃素酸塩酸化およびノイラミニダーゼ処理に
対して抵抗性である。
よび肺癌から精製されたＣＥＡ（１８０ＫＤ ）上の１
個のアロタイプエピトープを識別する。このエピトープ
は研究に使用される組織のホルムアルデヒド固定および
パラフィン封埋に対して抵抗性である。さらにこのエピ
トープは過沃素酸塩酸化およびノイラミニダーゼ処理に
対して抵抗性である。
免疫組織学的方法により仁のエピトープは下記のヒトの
ホルムアルデヒド固定された、パラフィン封埋された組
織中に検出されうる。すなわち、結腸癌原発腫瘍および
それから生じた肝臓転移の８Ｄ〜９０％は管腔方向に増
大してゆ（展性の反応を示す。これに対し転移により囲
まれた正常な肝組織とは何ら反応しない。さらに１粘膜
を含む正常な全結腸組織は何ら有意な検出可能な反応を
示さないという所見は重要である。
ホルムアルデヒド固定された、パラフィン封埋された組
織中に検出されうる。すなわち、結腸癌原発腫瘍および
それから生じた肝臓転移の８Ｄ〜９０％は管腔方向に増
大してゆ（展性の反応を示す。これに対し転移により囲
まれた正常な肝組織とは何ら反応しない。さらに１粘膜
を含む正常な全結腸組織は何ら有意な検出可能な反応を
示さないという所見は重要である。
この観察によりＭＡＢ ＢＷ４３１／ ３１はすべての
文献上知られたモノクローナル抗体、なかんずく外側の
粘膜とそしてさらに腸陰窩との相当に強い反応を示す「
インド・ジエー・カンサー（Ｉｎｔ。
文献上知られたモノクローナル抗体、なかんずく外側の
粘膜とそしてさらに腸陰窩との相当に強い反応を示す「
インド・ジエー・カンサー（Ｉｎｔ。
Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ月第６３巻第６４３頁（ｊ９８４年
）記載のＭａｂ３５とは区別される。正常な肺、正常な
膵臓、炎症のある膵臓、正常な胃、正常な膵臓、扁桃、
リンパ節および末梢血液白血球のような試験されたそれ
以外の正常組織はＭＡＢ ＢＷ４３１／３１ とは何ら
有意な反応を示さない。結腸癌の大多数と並んで試験さ
れた膵臓癌の約６０〜５０％および試験された胃癌の約
４０〜６０チはＢＷ４３１／３１との明らかな反応を示
す。
）記載のＭａｂ３５とは区別される。正常な肺、正常な
膵臓、炎症のある膵臓、正常な胃、正常な膵臓、扁桃、
リンパ節および末梢血液白血球のような試験されたそれ
以外の正常組織はＭＡＢ ＢＷ４３１／３１ とは何ら
有意な反応を示さない。結腸癌の大多数と並んで試験さ
れた膵臓癌の約６０〜５０％および試験された胃癌の約
４０〜６０チはＢＷ４３１／３１との明らかな反応を示
す。
ＭＡＢ ＢＹ ４３１／３１はに一型の軽い鎖と会合し
たｒｌ−アイソタイプのマウスの免疫グロブリンである
。この分子のＦｃ部分は蛋白質Ａに結合し５る。
たｒｌ−アイソタイプのマウスの免疫グロブリンである
。この分子のＦｃ部分は蛋白質Ａに結合し５る。
固形担体上に固定されたＭＡＥ ＢＷ４３１／ｌｉによ
りＣＢＡは高度に純粋な形態で組織可溶化物および体液
から単離され５る。
りＣＢＡは高度に純粋な形態で組織可溶化物および体液
から単離され５る。
かくして精製されたＣＥＡはニトロセルロース上に吸着
されたのち変化を受けて従ってＭＡＢ４５１１５１の結
合は今や無効である。これと反対にＭａｂ５５により識
別されるＣＢＡ上のエピトープ〔「インド・ジエー・カ
ンサー（Ｉｎｔ 、 Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ ）Ｊ第３３
巻第６４３頁（１９８４年）参照〕は同じ条件下でＭａ
ｂ３５が入手し５るニトロセルロース上に残留し、従っ
てＭａｂ３５は非常に有効に結合している。さらに１非
還元条件下に５Ｄ８−ＰＡＧＥにより分別されたＭＡＢ
ＢＹ ４３１１５１の分子量はＭａｂのそれ（約４０
００ＫＤ）よりかなり低い。ＭａｂＢＷ４３１／３１の
に一軽鎖の分子量におけるこの相異は還元条件下での８
ＤＢ−ＰＡＧＲにより示される（ｕａｂＢｗイ３１１５
１０に一軽鎖の分子量−２５ＫＤ。
されたのち変化を受けて従ってＭＡＢ４５１１５１の結
合は今や無効である。これと反対にＭａｂ５５により識
別されるＣＢＡ上のエピトープ〔「インド・ジエー・カ
ンサー（Ｉｎｔ 、 Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ ）Ｊ第３３
巻第６４３頁（１９８４年）参照〕は同じ条件下でＭａ
ｂ３５が入手し５るニトロセルロース上に残留し、従っ
てＭａｂ３５は非常に有効に結合している。さらに１非
還元条件下に５Ｄ８−ＰＡＧＥにより分別されたＭＡＢ
ＢＹ ４３１１５１の分子量はＭａｂのそれ（約４０
００ＫＤ）よりかなり低い。ＭａｂＢＷ４３１／３１の
に一軽鎖の分子量におけるこの相異は還元条件下での８
ＤＢ−ＰＡＧＲにより示される（ｕａｂＢｗイ３１１５
１０に一軽鎖の分子量−２５ＫＤ。
Ｍａｂ３５のそれ＝ ２９ ＫＤ ）。
ＭＡＢＶＩはＣＥＡ分子の副次集団上のみに見出される
１個のエピトープを識別する（３０％）。
１個のエピトープを識別する（３０％）。
抗原４はＰａ−Ｔｕ−１膵臓癌細胞系列の細胞膜上なら
びＫ Ｐａ−’］：’ｕ−１細胞系列からヌードマウス
上に移植された腫瘍上Ｉｇ０１−アイソタイプ（軽いに
一＠）のＭＡＢ ４ ［３６／１４に接合しつる１個の
エピトープを担持する。ＭＡＲは低温保存されたかまた
はホルムアルデヒド固定されパラフィン封埋された膵臓
神瘍組織、健常なおよび炎症を有する膵臓の管上皮なら
びに結腸癌と反応する。ＭＡＲは正常な肺の肺胞上皮と
弱く反応し、正常な内分泌および外分泌膵臓組織ならび
に人間の末梢血液白血球とは反応しない。ＭＡＲは腸陰
窩とは弱（反応する。
びＫ Ｐａ−’］：’ｕ−１細胞系列からヌードマウス
上に移植された腫瘍上Ｉｇ０１−アイソタイプ（軽いに
一＠）のＭＡＢ ４ ［３６／１４に接合しつる１個の
エピトープを担持する。ＭＡＲは低温保存されたかまた
はホルムアルデヒド固定されパラフィン封埋された膵臓
神瘍組織、健常なおよび炎症を有する膵臓の管上皮なら
びに結腸癌と反応する。ＭＡＲは正常な肺の肺胞上皮と
弱く反応し、正常な内分泌および外分泌膵臓組織ならび
に人間の末梢血液白血球とは反応しない。ＭＡＲは腸陰
窩とは弱（反応する。
ＭＡＢは膵臓の管上皮と並んで肝臓および乳腺の管上皮
と反応し、しかも後者の場合上皮細胞の尖頭部において
反応する。さらに正常な乳腺の範囲における線層の上皮
および線層の範囲内の被覆結合組繊細胞は陽性である。
と反応し、しかも後者の場合上皮細胞の尖頭部において
反応する。さらに正常な乳腺の範囲における線層の上皮
および線層の範囲内の被覆結合組繊細胞は陽性である。
これら間葉細胞に由来する乳腺肉腫も同様に陽性反応を
する。被覆結合組繊細胞は開業性の構成分である。
する。被覆結合組繊細胞は開業性の構成分である。
間葉成分とのならびに上皮成分とのこの反応性によりＭ
ＡＢ ４０６／１４は、「上皮膜抗原（以下腿と略記す
る）」と反応する抗体と区別される〔「ジエー・クリン
・パソル（Ｊ 、 Ｃ１１ｎ、 Ｐａｔｈｏｌ、）ＪＭ
３２巻第３５頁（１９７９年）参照〕。
ＡＢ ４０６／１４は、「上皮膜抗原（以下腿と略記す
る）」と反応する抗体と区別される〔「ジエー・クリン
・パソル（Ｊ 、 Ｃ１１ｎ、 Ｐａｔｈｏｌ、）ＪＭ
３２巻第３５頁（１９７９年）参照〕。
管上皮に由来する乳腺癌（管孔腺癌１２／１２ ）すべ
ては、研究された限りでは、腺組織に由来する乳腺癌（
小葉性乳腺癌６／６）と同様にＭＡＢ４０６／１４との
著明な細胞性の、一部はまた核周囲性の反応を示す。さ
らに、管孔腺癌にかかつているリンパ節（その中の腫瘍
細胞）はＭＡＢ４０６／１４との強い反応を示す（６／
６ ＞。肺の試験された扁平上皮癌のすべて（１０／１
０）は著明な細胞質性のそしてまた膜性の反応を示す。
ては、研究された限りでは、腺組織に由来する乳腺癌（
小葉性乳腺癌６／６）と同様にＭＡＢ４０６／１４との
著明な細胞性の、一部はまた核周囲性の反応を示す。さ
らに、管孔腺癌にかかつているリンパ節（その中の腫瘍
細胞）はＭＡＢ４０６／１４との強い反応を示す（６／
６ ＞。肺の試験された扁平上皮癌のすべて（１０／１
０）は著明な細胞質性のそしてまた膜性の反応を示す。
試験された肺の腺癌の１０のうちの６例、肺の大細胞癌
４／８および肺の小細胞癌の２１５がＭＡＢ ４０６／
１４と反応する。
４／８および肺の小細胞癌の２１５がＭＡＢ ４０６／
１４と反応する。
さらにＭＡＢ ４ｏ６／１４は正常な膵臓、リンパ節お
よび両組織に何ら検出しうる結合を示さず、一方これに
対し粘膜、腺のいくつかの細胞および個々の筋肉部分に
は正常な結腸の範囲での弱い結合が存在する。加えてＭ
ＡＲは試験された結腸癌の副次集団に（４／１７ ）お
よび外分泌膵臓癌（１１／１７）Ｋ結合する。ＭＡＢ
４０６／１４に対し陽性である組織中に存在するエピト
ープはホルムアルデヒド固定およびパラフィン封埋に対
してのみならず過沃素酸酸化およびノイラミニダーゼ処
理に対しても抵抗性である。
よび両組織に何ら検出しうる結合を示さず、一方これに
対し粘膜、腺のいくつかの細胞および個々の筋肉部分に
は正常な結腸の範囲での弱い結合が存在する。加えてＭ
ＡＲは試験された結腸癌の副次集団に（４／１７ ）お
よび外分泌膵臓癌（１１／１７）Ｋ結合する。ＭＡＢ
４０６／１４に対し陽性である組織中に存在するエピト
ープはホルムアルデヒド固定およびパラフィン封埋に対
してのみならず過沃素酸酸化およびノイラミニダーゼ処
理に対しても抵抗性である。
一適用は放射性標識されたＭＡＲを指跣間のヒダ、排液
性リンパ索または静脈中に注射することによる乳腺癌に
おける９７７４節転移の非侵襲性検出である。付加的な
使用分野はなかんずく肺の扁平上皮癌、ならびにまた他
の組織学的肺癌型、管孔腺癌ならびにある種の外分泌性
膵臓癌における免疫シンチグラフィーおよび免疫療法で
ある。体液中におゆるＭＡＢ４０６／１４により限定さ
れるエピトープの検出はそのエピトープを良く検出でき
る量にて分泌する腫瘍の早期診断および経過監視のため
の一方法である。
性リンパ索または静脈中に注射することによる乳腺癌に
おける９７７４節転移の非侵襲性検出である。付加的な
使用分野はなかんずく肺の扁平上皮癌、ならびにまた他
の組織学的肺癌型、管孔腺癌ならびにある種の外分泌性
膵臓癌における免疫シンチグラフィーおよび免疫療法で
ある。体液中におゆるＭＡＢ４０６／１４により限定さ
れるエピトープの検出はそのエピトープを良く検出でき
る量にて分泌する腫瘍の早期診断および経過監視のため
の一方法である。
上記モノクローナル抗体の製造に用いられる方法は西ド
イツ特許公開公報第５．３２９．１８４号第３．４およ
び５頁に記載されている。
イツ特許公開公報第５．３２９．１８４号第３．４およ
び５頁に記載されている。
本発明は非還元条件下または還元条件下に分子量約７２
±３ＫＤを有する蛋白質抗原、またはＦｖＷＲ：ＡＧと
同一ではないところの非還元条件下に分子量２００ Ｋ
Ｄ以上を有する糖蛋白質抗原、または非還元条件下に分
子量１８０±１０ＫＤ、９５±１０ ＫＤまたは５５±
１０ＫＤを有する６種類の糖蛋白質抗原−ヒの８種類の
限定されたエピトープ、またはＥＭＡと同一ではないと
ころの非還元条件下に分子量２００ＫＤ以上を有する糖
蛋白質抗原を識別するモノクローナル抗体に関する。
±３ＫＤを有する蛋白質抗原、またはＦｖＷＲ：ＡＧと
同一ではないところの非還元条件下に分子量２００ Ｋ
Ｄ以上を有する糖蛋白質抗原、または非還元条件下に分
子量１８０±１０ＫＤ、９５±１０ ＫＤまたは５５±
１０ＫＤを有する６種類の糖蛋白質抗原−ヒの８種類の
限定されたエピトープ、またはＥＭＡと同一ではないと
ころの非還元条件下に分子量２００ＫＤ以上を有する糖
蛋白質抗原を識別するモノクローナル抗体に関する。
これらの抗原は特定の細胞および組織上における前記し
た存在により、およびそれぞれの肌により限定されるこ
れら抗原上に存在するエピトープの特徴により明白に特
徴づけられる。
た存在により、およびそれぞれの肌により限定されるこ
れら抗原上に存在するエピトープの特徴により明白に特
徴づけられる。
本発明はさらに哺乳動物をオート−７５細胞系列の細胞
、Ｐａ−Ｔｕ−１細胞系列の細胞またはＣＥＡ陽性腺癌
の細胞、または癌胚性抗原（ｃｇＡ）を用いて免疫し、
かかる免疫された動物から肺臓細胞を別出し、Ｘ −６
５Ａｇ ８６５５またはＳＰ−２Ｍ胞系列と融合させ、
ハイブリドーマを選択しそしてモノクローナル抗体を取
得することからなる前記モノクローナル抗体の製法にも
関する。
、Ｐａ−Ｔｕ−１細胞系列の細胞またはＣＥＡ陽性腺癌
の細胞、または癌胚性抗原（ｃｇＡ）を用いて免疫し、
かかる免疫された動物から肺臓細胞を別出し、Ｘ −６
５Ａｇ ８６５５またはＳＰ−２Ｍ胞系列と融合させ、
ハイブリドーマを選択しそしてモノクローナル抗体を取
得することからなる前記モノクローナル抗体の製法にも
関する。
ＭＡＢ ２７８／９７および２７８／１０５を誘発させ
るための免疫原としてはオート−７５細胞系列がそｔ７
てＭＡＢ ４０６／１４の誘発にはＰａ−Ｔｕ−１細胞
系列が役立てられる。抗原６上のエピトープにより限定
されるＭＡＲを誘発させるための免疫原としては肺のＣ
ＥＡ陽性腺癌が役立てられる。商業上得られうるＣＥＡ
も利用されうる。
るための免疫原としてはオート−７５細胞系列がそｔ７
てＭＡＢ ４０６／１４の誘発にはＰａ−Ｔｕ−１細胞
系列が役立てられる。抗原６上のエピトープにより限定
されるＭＡＲを誘発させるための免疫原としては肺のＣ
ＥＡ陽性腺癌が役立てられる。商業上得られうるＣＥＡ
も利用されうる。
補乳動物好ましくはマウスをこれら細胞系列の１種類ま
たはそれ以上の細胞または抗原で免疫しそしてかかる動
物から得られた肺臓細胞をＸ６３Ａｇ ８６５５Ｍ胞系
列と融合させる。
たはそれ以上の細胞または抗原で免疫しそしてかかる動
物から得られた肺臓細胞をＸ６３Ａｇ ８６５５Ｍ胞系
列と融合させる。
例えば腫瘍患者または健常な人間からヒトのリンノぞ様
細胞をとり出し、生体外で免疫しそして人間のミエロー
マ細胞と融合させることもできる。ヒトのリンパ様細胞
を永久的に分裂させるためにはｇＢＶ−変換ま゛たｉ’
；ｊ ＤＮＡを用いるトランスフェクション（腫８遺伝
子トランスファー）の技術が利用されうる。
細胞をとり出し、生体外で免疫しそして人間のミエロー
マ細胞と融合させることもできる。ヒトのリンパ様細胞
を永久的に分裂させるためにはｇＢＶ−変換ま゛たｉ’
；ｊ ＤＮＡを用いるトランスフェクション（腫８遺伝
子トランスファー）の技術が利用されうる。
生成するハイブリドーマについてそれらが所望の特異性
を有する抗体を含有するか否か試験する。試験されたハ
イブリドーマ上澄みの中に前記した特異性を有する抗体
を含有する抗体がいくつか存在する。これら抗体を分泌
するハイブリドーマをクローンしそしてこれらハイブリ
ドーマクローンから得られるモノクローナル抗体をそれ
らにより識別される抗原を免疫化学的に特性化するため
に使用した。分子量は商業的に入手しうるマーカーと比
較して測定する。これら抗原はアフイニテイクロマトグ
ラフイーにより精製されうる。
を有する抗体を含有するか否か試験する。試験されたハ
イブリドーマ上澄みの中に前記した特異性を有する抗体
を含有する抗体がいくつか存在する。これら抗体を分泌
するハイブリドーマをクローンしそしてこれらハイブリ
ドーマクローンから得られるモノクローナル抗体をそれ
らにより識別される抗原を免疫化学的に特性化するため
に使用した。分子量は商業的に入手しうるマーカーと比
較して測定する。これら抗原はアフイニテイクロマトグ
ラフイーにより精製されうる。
加えてモノクローナル抗体の組織学的標本への結合は間
接的な免疫はルオキシダーゼ技術により測定された〔［
ジエー・タリノ・バンル（Ｊ、 Ｃ１１ｎ、 Ｐａ、ｔ
ｈｏｌ、凡策６２巻第９７１頁（１９７９年）参照〕。
接的な免疫はルオキシダーゼ技術により測定された〔［
ジエー・タリノ・バンル（Ｊ、 Ｃ１１ｎ、 Ｐａ、ｔ
ｈｏｌ、凡策６２巻第９７１頁（１９７９年）参照〕。
さらに、モノクローナル抗体により識別される抗原また
は抗原分子副次集団の分子特性化はウェスタン・プロッ
ト（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ）分析に加え、放射線
免疫沈殿〔「ベーリング・インステイテユート・コミュ
ニケーションズ（ＢｅｈｒｌｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ） Ｊ第７４巻第２７
〜３４頁（１９８４年）参照〕を用いて、および１８０
±ＩＤＫＤ ＣＥＡ、または９５±ｌ０ＫＤおよび５５
±１０ＫＤ ＣＥＡ関連分子についてのエピトープ分析
は遮断条件下にＥＬＩＳＡｓにより実施された〔「クリ
ｙ−キム・アクタ（Ｃｈｉｎ、 Ｃｈｉｍ、 Ａｃｔａ
）Ｊ第１３５巻第１５〜２２頁（１９８！１年）、特
に第１５頁参照〕。
は抗原分子副次集団の分子特性化はウェスタン・プロッ
ト（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ）分析に加え、放射線
免疫沈殿〔「ベーリング・インステイテユート・コミュ
ニケーションズ（ＢｅｈｒｌｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ） Ｊ第７４巻第２７
〜３４頁（１９８４年）参照〕を用いて、および１８０
±ＩＤＫＤ ＣＥＡ、または９５±ｌ０ＫＤおよび５５
±１０ＫＤ ＣＥＡ関連分子についてのエピトープ分析
は遮断条件下にＥＬＩＳＡｓにより実施された〔「クリ
ｙ−キム・アクタ（Ｃｈｉｎ、 Ｃｈｉｍ、 Ａｃｔａ
）Ｊ第１３５巻第１５〜２２頁（１９８！１年）、特
に第１５頁参照〕。
ヒトの組織上の、ＭＡＲにより識別されるエピトープの
分子特性化り以下に記載されるようにして遂行される、
すなわち、適当なエピトープを担持する、低温保存され
たヒトの組織の厚さ４〜６μｍの切片をスライド上乾燥
（室温で３０〜６０分）後アセ）・ン中１〜２秒固定し
た。続いてこれを ａ）過沃素酸酸化するためにＩ Ｆｌ／ｌのＦＩＳＡを
含有するｐＪ１２のＰＥ３９１０分間洗い、ｐＨ７，２
のＰＢＳ中に短時間浸漬しくすすぐ）そして室温で１時
間湿った室でｐ］（７，２のＰＢＳ中の１．１７／１０
０１ｎｌの過沃素酸と保温培養した。次にこの切片をｐ
丁−ＩＺ２のＰＢＳ中の１ ｇ／ＩＩの１３ＳＡ中で３
Ｘ５分間洗いそして切片をヤギの正常血清と保温培養し
、［：）ニー ・クリ７・パソル（Ｊ 、 Ｃｌ１ｎ−
Ｐａ、ｔｈＯｌ、、） Ｊ第３２巻第９７１頁（１９７
９年）記載のようにして試験すべきＭＡＲでさらに処理
しそして組織へのその結合を間接的な免疫はルオキシダ
ーゼ技法を用いて検出した。
分子特性化り以下に記載されるようにして遂行される、
すなわち、適当なエピトープを担持する、低温保存され
たヒトの組織の厚さ４〜６μｍの切片をスライド上乾燥
（室温で３０〜６０分）後アセ）・ン中１〜２秒固定し
た。続いてこれを ａ）過沃素酸酸化するためにＩ Ｆｌ／ｌのＦＩＳＡを
含有するｐＪ１２のＰＥ３９１０分間洗い、ｐＨ７，２
のＰＢＳ中に短時間浸漬しくすすぐ）そして室温で１時
間湿った室でｐ］（７，２のＰＢＳ中の１．１７／１０
０１ｎｌの過沃素酸と保温培養した。次にこの切片をｐ
丁−ＩＺ２のＰＢＳ中の１ ｇ／ＩＩの１３ＳＡ中で３
Ｘ５分間洗いそして切片をヤギの正常血清と保温培養し
、［：）ニー ・クリ７・パソル（Ｊ 、 Ｃｌ１ｎ−
Ｐａ、ｔｈＯｌ、、） Ｊ第３２巻第９７１頁（１９７
９年）記載のようにして試験すべきＭＡＲでさらに処理
しそして組織へのその結合を間接的な免疫はルオキシダ
ーゼ技法を用いて検出した。
ｂ）ノイラミニダーゼ処理するためにｐＨ５，５のＧ、
（］ ５ Ｍ Ｎａ＋、 Ｃａ＋＋アセテート緩衝液
中２×１０分間洗いそして種々の量のコレラ菌ノイラミ
ニグーゼ（１００ｍＵ／＋＋＋／！ 、１０ ｍＵ／ｍ
、１ｍＵ／ｍｅ。
（］ ５ Ｍ Ｎａ＋、 Ｃａ＋＋アセテート緩衝液
中２×１０分間洗いそして種々の量のコレラ菌ノイラミ
ニグーゼ（１００ｍＵ／＋＋＋／！ 、１０ ｍＵ／ｍ
、１ｍＵ／ｍｅ。
Ｃ１，１ｍＵ／ゴ）と前記したアセデート緩衝液中湿っ
た室で室温で保温培養した。アセテート緩衝液中２回洗
いそして１ｊ：ｌ／１１のＢＡＡを含有するｐＨ７２の
ＰＢＳ中２回洗ったのち切片をヤギの正常血清と保温培
養し、「ジエー・クリ７・・ぞツル（、ｙ、 Ｃ１１ｎ
、 Ｐａｔｈｏｌ、 ） Ｊ第３２巻第９７１頁（１９
７９年）におけるようにして試験すべきＭＡ、Ｂとさら
に処理しそして組織へのその結合を間接的な免疫ペルオ
キシダーゼ技法を用いて検出した。
た室で室温で保温培養した。アセテート緩衝液中２回洗
いそして１ｊ：ｌ／１１のＢＡＡを含有するｐＨ７２の
ＰＢＳ中２回洗ったのち切片をヤギの正常血清と保温培
養し、「ジエー・クリ７・・ぞツル（、ｙ、 Ｃ１１ｎ
、 Ｐａｔｈｏｌ、 ） Ｊ第３２巻第９７１頁（１９
７９年）におけるようにして試験すべきＭＡ、Ｂとさら
に処理しそして組織へのその結合を間接的な免疫ペルオ
キシダーゼ技法を用いて検出した。
４〜６μｍの厚さの低温保存された組織切片の代りに、
相当１−るＭＡＢＫより識別されるエピトープのホルム
アルデヒド１抵抗性卦よびノぞラフイン抵抗性を試験す
るためにホルムアルデヒド中に固定されそしてパラフィ
ン封埋された組織を用い、これをミクロトームで切断し
、脱ノぞラフインし〔ビー・ロメイス（Ｂ、 Ｈｏｍｅ
ｉｓ ）氏の［ミクロスコピツシエ・テクニケン（Ｍｉ
ｋｒｏｓｋｏｐｉｓｃｈｅＴｅｃｈ、ｎ１ｋｅｎ ）
Ｊ第１６版第１４５頁第５４６節（１９６８年）参照〕
そして「ジエー・クリ７・・ξツル（、ｙ、 Ｃ１１ｎ
、 Ｐａｔｈｏｌ−） Ｊ第６２巻第９７１頁（１９７
９年）の記載と同様にして間接的免疫はルオキシダーゼ
技法のためにさらに処理する。
相当１−るＭＡＢＫより識別されるエピトープのホルム
アルデヒド１抵抗性卦よびノぞラフイン抵抗性を試験す
るためにホルムアルデヒド中に固定されそしてパラフィ
ン封埋された組織を用い、これをミクロトームで切断し
、脱ノぞラフインし〔ビー・ロメイス（Ｂ、 Ｈｏｍｅ
ｉｓ ）氏の［ミクロスコピツシエ・テクニケン（Ｍｉ
ｋｒｏｓｋｏｐｉｓｃｈｅＴｅｃｈ、ｎ１ｋｅｎ ）
Ｊ第１６版第１４５頁第５４６節（１９６８年）参照〕
そして「ジエー・クリ７・・ξツル（、ｙ、 Ｃ１１ｎ
、 Ｐａｔｈｏｌ−） Ｊ第６２巻第９７１頁（１９７
９年）の記載と同様にして間接的免疫はルオキシダーゼ
技法のためにさらに処理する。
抗原１とのそれらの反応性ゆえに、特徴づけられたモノ
クローナル抗体は７２−ＫＤ抗原を担持する小細胞肺腫
瘍を抗原−１が陰性である他の腫瘍から診断上識別しそ
して区別するために使用されうる。
クローナル抗体は７２−ＫＤ抗原を担持する小細胞肺腫
瘍を抗原−１が陰性である他の腫瘍から診断上識別しそ
して区別するために使用されうる。
抗原２とのそれらの反応性に基づき特徴づけられたモノ
クローナル抗体は２００ ＫＤ以上の抗原を担持する組
織（内皮組織、血管腫瘍）を他の抗原−２陰性の組織か
ら診断上識別しそして区別するのに使用されうる。
クローナル抗体は２００ ＫＤ以上の抗原を担持する組
織（内皮組織、血管腫瘍）を他の抗原−２陰性の組織か
ら診断上識別しそして区別するのに使用されうる。
寸法１８０±１０ＫＤ、 ９５±１０ＫＤおよび５５±
１０ＫＤのＣＥＡ関連分子上の８種類の異なるエピトー
プとの反応性により定義されるモノクローナル抗体はＣ
’ＥＡ−陽性の組織（例えば結腸癌、膵臓癌、胃癌、乳
腺癌および肺癌）を診断上識別するのに使用されうる。
１０ＫＤのＣＥＡ関連分子上の８種類の異なるエピトー
プとの反応性により定義されるモノクローナル抗体はＣ
’ＥＡ−陽性の組織（例えば結腸癌、膵臓癌、胃癌、乳
腺癌および肺癌）を診断上識別するのに使用されうる。
抗原４とのそれらの反応性により特徴づけられるモノク
ローナル抗体は２００ ＫＤ以上の抗原を担持する組織
（乳腺癌）を他の抗原−４が陰性な組織から診断上識別
しそして区別するのに使用されうる。
ローナル抗体は２００ ＫＤ以上の抗原を担持する組織
（乳腺癌）を他の抗原−４が陰性な組織から診断上識別
しそして区別するのに使用されうる。
さらに前記した抗原を識別するすべての抗体はそれらに
より識別される体液中の抗原を検出するのに使用されう
るしまたは放射性標識された形態で生体内のそれぞれの
抗原を担持する組織に結合させそして抗原を検出する（
免疫シンチグラフイー）のに使用されうる。加えてこれ
らモノクローナル抗体は活性化合物の担体として使用さ
れそして悪性疾患の治療に使用されうる。もう一つの使
用可能性は生体内適用による肺癌細胞転移の阻止および
抗原を担持する転移性腫瘍細胞へのモノクローナル抗体
の結合である。加えてこれらモノクローナル抗体は他の
毒素の存在なしで抗原を担持する腫瘍細胞に有毒である
ことができるしまたは腫瘍細胞膜への結合後に悪性の腫
瘍細胞を良性の細胞とならしめる分化過程を来しうる。
より識別される体液中の抗原を検出するのに使用されう
るしまたは放射性標識された形態で生体内のそれぞれの
抗原を担持する組織に結合させそして抗原を検出する（
免疫シンチグラフイー）のに使用されうる。加えてこれ
らモノクローナル抗体は活性化合物の担体として使用さ
れそして悪性疾患の治療に使用されうる。もう一つの使
用可能性は生体内適用による肺癌細胞転移の阻止および
抗原を担持する転移性腫瘍細胞へのモノクローナル抗体
の結合である。加えてこれらモノクローナル抗体は他の
毒素の存在なしで抗原を担持する腫瘍細胞に有毒である
ことができるしまたは腫瘍細胞膜への結合後に悪性の腫
瘍細胞を良性の細胞とならしめる分化過程を来しうる。
診断上の目的には、これらモノクローナル抗体は試験の
如何に応じ［１，００１μＩｉ／ｍ／ 〜１ｏ、 ｏμ
ｍ１／ｍｌの濃度で使用され５る。
如何に応じ［１，００１μＩｉ／ｍ／ 〜１ｏ、 ｏμ
ｍ１／ｍｌの濃度で使用され５る。
治療上の効果は体重１にｇ当り２００μｌ／ｍｙの量で
得られる。
得られる。
第１頁の続き
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）非還元条件下または還元条件下に分子量７２±３Ｋ
Ｄを有する蛋白質抗１（ＡＧｌ）、血清学的Ｋ ＦＭＩ
Ｒ： Ａ（）と同一ではないところの非還元条件下に分
子量２００ＫＤ以上を有する糖蛋白質抗１（ＡＧ２）、
非還元条件下に分子量１８０±１０ＫＤ、９５±１’ｌ
ＫＤまたは５５±１［）ＫＤを有する糖蛋白質抗原（Ａ
Ｇ３）、またはＥＭＡと同一ではないところの非還元条
件下に分子量２００ＫＤ以上を有する糖蛋白質抗原（Ａ
Ｇ４）全識別するモノクローナル抗体。 ２）少くとも１個の共通のエピトープ、および非還元条
件下または還元条件下に分子量７２±５ＫＤ、血清学的
にヒトｆ） ＦｖＩＲ： ＡＧと同一ではないところの
非還元条件下に分子量２００ＫＤ以上、非還元条件下に
分子量１８０±１０ＫＤ％９５±１０ＫＩ）または５５
±１０ＫＤ、またはＥＭＡと同一ではないところの非還
元条件下に分子量２００ＫＤ以上を有することからなる
抗原集団。 ５）非還元条件下に分子量７２±５ＫＤを有する蛋白質
抗原（ＡＧ １ ） ％血清学的にＦｖＩＲ：ＡＧと同
一ではないところの非還元条件下に分子量２００ＫＤ以
上を有する糖蛋白質抗原（ＡＧ２）、非還元条件下に分
子量１８０±ｌ０ＫＤ、 ９５±１０ＫＤおよび５５±
１０ＫＤを有する３種類の糖蛋白質抗原（ＡＧＥ）、ま
たはｎ仏と同一ではないところの非還元条件下に分子量
２００ＫＤ以上を有する糖蛋白質抗原（ＡＧ ４ ）
を識別するモノクローナル抗体をＩＩ製するに当り、哺
乳動物をオート−７５細胞系列の細胞、Ｐａ−Ｔｕ−１
細胞系列の細胞またはＣＥＡ陽性腺癌の細胞、または癌
胚性抗／Ｊｉ（（ＣＥＡ）を用いて免疫し、かかる免疫
された動物から肺臓細胞を刷出し、Ｘ−６３Ａｇ ８６
５３細胞系列と融合させ、ハイブリドーマを選択しそし
てモノクローナル抗体を取得することからなる方法。 ４）＠乳動物がマウスである前記特許請求の範囲第６項
記載の方法。 ５）前記特許請求の範囲第１項記載のモノクローナル抗
体の生体外診断剤における使用。 ６）前記特許請求の範囲第１項記載のモノクローナル抗
体の医薬上の活性化合物用担体としての使用。 ７）前記特許請求の範囲第１項記載のモノクローナル抗
体の治療剤としての使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19843416774 DE3416774A1 (de) | 1984-05-07 | 1984-05-07 | Monoklonale antikoerper, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung |
| DE3416774.9 | 1984-05-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60252499A true JPS60252499A (ja) | 1985-12-13 |
| JPH07108918B2 JPH07108918B2 (ja) | 1995-11-22 |
Family
ID=6235105
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60092403A Expired - Lifetime JPH07108918B2 (ja) | 1984-05-07 | 1985-05-01 | モノクローナル抗体およびその製法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0516190B1 (ja) |
| JP (1) | JPH07108918B2 (ja) |
| AT (2) | ATE89605T1 (ja) |
| AU (1) | AU594305B2 (ja) |
| CA (1) | CA1277613C (ja) |
| DE (3) | DE3416774A1 (ja) |
| DK (1) | DK169507B1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6372630A (ja) * | 1986-08-30 | 1988-04-02 | ベ−リングヴエルケ・アクチエンゲゼルシヤフト | モノクローナル抗体からなる腫瘍治療剤 |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0131627B1 (en) * | 1983-01-21 | 1992-05-20 | PRIMUS, Frederick James | Specific cea-family antigens, antibodies specific thereto and their methods of use |
| DE3531301A1 (de) * | 1985-09-02 | 1987-03-05 | Behringwerke Ag | Monoklonale antikoerper gegen tumorassoziierte glykoproteine, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung |
| DE3432714A1 (de) * | 1984-09-06 | 1986-04-24 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Tumortherapeutikum und verfahren zu seiner herstellung |
| EP0180413B1 (en) * | 1984-10-26 | 1991-10-02 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-human cancer monoclonal antibody |
| AU601379B2 (en) * | 1985-11-07 | 1990-09-13 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The | Antigen indicative of human breast cancer and assays based thereon |
| DE3909799A1 (de) | 1989-03-24 | 1990-09-27 | Behringwerke Ag | Monoklonale antikoerper (mak) gegen tumorassoziierte antigene, ihre herstellung und verwendung |
| HUE038225T2 (hu) | 2011-08-23 | 2018-10-29 | Roche Glycart Ag | Bispecifikus, T-sejtaktiváló antigénkötõ, molekulák |
| RU2015140917A (ru) | 2013-02-26 | 2017-04-03 | Роше Гликарт Аг | Биспецифические антигенсвязывающие молекулы, активирующие т-клетки |
| EP3444278A1 (en) | 2013-02-26 | 2019-02-20 | Roche Glycart AG | Bispecific t cell activating antigen binding molecules |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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