JP2526217B2 - 腫瘍会合性糖蛋白に対するモノクロ−ナル抗体およびそれらの製法 - Google Patents
腫瘍会合性糖蛋白に対するモノクロ−ナル抗体およびそれらの製法Info
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は限定された細胞質性のまたは膜会合性のまた
は分泌された抗原に結合するモノクローナル抗体（以下
MAbと略記する）ならびにそれらの製法に関する。これ
らの抗体は診断剤、活性化合物または活性化合物のため
の担体として使用されうる。
は分泌された抗原に結合するモノクローナル抗体（以下
MAbと略記する）ならびにそれらの製法に関する。これ
らの抗体は診断剤、活性化合物または活性化合物のため
の担体として使用されうる。
限定され、単離された抗原を用いる免疫処置法および
かかる抗原に対する抗体の産生法は知られている。未精
製抗原物質を用いて免疫処置しそしてかかる抗原混合物
の特定の成分を識別する抗体を選択することも知られて
いる。
かかる抗原に対する抗体の産生法は知られている。未精
製抗原物質を用いて免疫処置しそしてかかる抗原混合物
の特定の成分を識別する抗体を選択することも知られて
いる。
今、好都合な性質を有するモノクローナル抗体を選択
することに成功した。これらは蛋白質抗原上の特定のエ
ピトープと反応することを特徴とする、すなわち以下の
とおりである。
することに成功した。これらは蛋白質抗原上の特定のエ
ピトープと反応することを特徴とする、すなわち以下の
とおりである。
MAb 436/15は非還元条件下に200kDaをこえる分子量を
有する糖蛋白質（抗原１）と反応する。このMAbにより
識別されるエピトープはホルムアルデヒド固定またはパ
ラフイン封埋に対しノイラミニダーゼ処理に対すると同
じく抵抗性である。しかしながらこのエピトープは過沃
素酸酸化により破壊される。MAb 436/15はＬ−鎖として
カツパ鎖を有するIgG3−アイソタイプに属する。
有する糖蛋白質（抗原１）と反応する。このMAbにより
識別されるエピトープはホルムアルデヒド固定またはパ
ラフイン封埋に対しノイラミニダーゼ処理に対すると同
じく抵抗性である。しかしながらこのエピトープは過沃
素酸酸化により破壊される。MAb 436/15はＬ−鎖として
カツパ鎖を有するIgG3−アイソタイプに属する。
MAb 494/32は非還元条件下または還元条件下に、200k
Daをこえる分子量を有しかつホルムアルデヒド固定また
はパラフイン封埋に対してのみならずノイラミニダーゼ
処理に対しても抵抗性であるところの糖蛋白質（抗原
２）上のエピトープを識別する。このエピトープは過沃
素酸酸化により破壊される。MAb 494/32はＬ−鎖として
カツパ鎖を有するIgG1−アイソタイプに属する。
Daをこえる分子量を有しかつホルムアルデヒド固定また
はパラフイン封埋に対してのみならずノイラミニダーゼ
処理に対しても抵抗性であるところの糖蛋白質（抗原
２）上のエピトープを識別する。このエピトープは過沃
素酸酸化により破壊される。MAb 494/32はＬ−鎖として
カツパ鎖を有するIgG1−アイソタイプに属する。
MAb 495/19およびMAb 495/36は非還元性または還元性
条件下に、200kDaをこえる分子量を有しかつノイラミニ
ダーゼ処理ならびに過沃素酸塩酸化に対して抵抗性であ
るところの糖蛋白質（抗原３）上のエピトープを識別す
る。抗原１および２の上のエピトープと反対にこのエピ
トープはホルムアルデヒド固定またはパラフイン封埋に
対して抵抗性でない。MAb 495/19および495/36はカツパ
鎖を有するIgG3−アイソタイプである。
条件下に、200kDaをこえる分子量を有しかつノイラミニ
ダーゼ処理ならびに過沃素酸塩酸化に対して抵抗性であ
るところの糖蛋白質（抗原３）上のエピトープを識別す
る。抗原１および２の上のエピトープと反対にこのエピ
トープはホルムアルデヒド固定またはパラフイン封埋に
対して抵抗性でない。MAb 495/19および495/36はカツパ
鎖を有するIgG3−アイソタイプである。
MAb 494/32および495/36はADCC反応を促進しうる（D.
Herlyn氏他の「The Jounal of Immunology」134,2,1300
〜1304（1983）記載の方法参照）。
Herlyn氏他の「The Jounal of Immunology」134,2,1300
〜1304（1983）記載の方法参照）。
本発明は非還元条件下に200kDaを越える分子量を有す
る糖蛋白質（抗原１）と反応するところのカツパ鎖を有
するIgG3−アイソタイプのMAb 436/15と呼ばれるモノク
ローナル抗体、非還元条件下および還元条件下に200kDa
を越える分子量を有する糖蛋白質（抗原２）と反応する
ところのカツパ鎖を有するIgG1−アイソタイプのMAb 49
4/32と呼ばれるモノクローナル抗体、および非還元条件
下および還元条件下に200kDaを越える分子量を有する糖
蛋白質（抗原３）と反応するところのカツパ鎖を有する
IgG3−アイソタイプのMAb 495/19および495/36と呼ばれ
る２種類のモノクローナル抗体に関する。
る糖蛋白質（抗原１）と反応するところのカツパ鎖を有
するIgG3−アイソタイプのMAb 436/15と呼ばれるモノク
ローナル抗体、非還元条件下および還元条件下に200kDa
を越える分子量を有する糖蛋白質（抗原２）と反応する
ところのカツパ鎖を有するIgG1−アイソタイプのMAb 49
4/32と呼ばれるモノクローナル抗体、および非還元条件
下および還元条件下に200kDaを越える分子量を有する糖
蛋白質（抗原３）と反応するところのカツパ鎖を有する
IgG3−アイソタイプのMAb 495/19および495/36と呼ばれ
る２種類のモノクローナル抗体に関する。
MAb 436/15は人間の組織、ヌードマウス上のヒト腫瘍
異種移植組織または生体外培養された細胞系統上に認め
られうる抗原１上のエピトープを識別し、その際細胞系
統の場合はエピトープ検出は生きている細胞上の間接的
免疫螢光法により行われ（J.Immunol.Methods 1977,15,
57〜66）そして異種移植組織またはヒト腫瘍組織の場合
は間接的な免疫ペルオキシダーゼ法により行われる（J.
clin.Path.1979,32,971〜978）。
異種移植組織または生体外培養された細胞系統上に認め
られうる抗原１上のエピトープを識別し、その際細胞系
統の場合はエピトープ検出は生きている細胞上の間接的
免疫螢光法により行われ（J.Immunol.Methods 1977,15,
57〜66）そして異種移植組織またはヒト腫瘍組織の場合
は間接的な免疫ペルオキシダーゼ法により行われる（J.
clin.Path.1979,32,971〜978）。
結腸癌細胞系統DE−TAおよび膵臓癌細胞系統PaTu Iは
明らかな膜螢光を示す。膵臓癌PaTu IおよびPaTu IIの
異種移植組織および肺癌B110の小細胞性異種移植組織は
個々の組織領域において陽性の免疫染色を示すが、これ
に反し肺癌BroCa17および膵臓癌組織PaTu IIIには何ら
検出されうる反応はない。
明らかな膜螢光を示す。膵臓癌PaTu IおよびPaTu IIの
異種移植組織および肺癌B110の小細胞性異種移植組織は
個々の組織領域において陽性の免疫染色を示すが、これ
に反し肺癌BroCa17および膵臓癌組織PaTu IIIには何ら
検出されうる反応はない。
人間の癌において、MAb 436/15は55種の試験された他
の肺癌のうちの８種類の高度に分化した肺の線癌と反応
する（分泌された生成物の染色ならびに細胞質および膜
染色）。肺の扁平上皮細胞癌のいくつかも同様に反応す
る。その他に結腸癌およびそれに由来する肝臓転移の約
50％、膵臓癌の約60％、卵巣癌の約40％において腫瘍領
域の10〜20％（分泌物との強い反応）、および乳癌の50
％において少数の細胞が反応性である。
の肺癌のうちの８種類の高度に分化した肺の線癌と反応
する（分泌された生成物の染色ならびに細胞質および膜
染色）。肺の扁平上皮細胞癌のいくつかも同様に反応す
る。その他に結腸癌およびそれに由来する肝臓転移の約
50％、膵臓癌の約60％、卵巣癌の約40％において腫瘍領
域の10〜20％（分泌物との強い反応）、および乳癌の50
％において少数の細胞が反応性である。
MAb 436/15はリンパ節、扁桃腺、末梢血液白血球、正
常な肝臓および正常な結腸には何ら実質的な結合を示さ
ない。肺の異形成上皮、膵臓および少数の小胞細胞の小
葉間および小葉内管路、ならびに胃腺および脾臓中の少
数の細胞が反応を示す。
常な肝臓および正常な結腸には何ら実質的な結合を示さ
ない。肺の異形成上皮、膵臓および少数の小胞細胞の小
葉間および小葉内管路、ならびに胃腺および脾臓中の少
数の細胞が反応を示す。
MAb 494/32は人間の組織、ヌードマウス上のヒト腫瘍
異種移植組織または生体外培養された細胞系統上に認め
られうる抗原２上のエピトープを識別する。その際結合
は前記したようにして検出された。
異種移植組織または生体外培養された細胞系統上に認め
られうる抗原２上のエピトープを識別する。その際結合
は前記したようにして検出された。
結腸癌細胞系統DE−TAは著明な膜螢光を示す。膵臓腫
瘍PaTu IおよびII、I.W.および14の異種異植組織および
結腸癌４および５の異種移植組織は著明な細胞質および
細胞膜反応を示す。
瘍PaTu IおよびII、I.W.および14の異種異植組織および
結腸癌４および５の異種移植組織は著明な細胞質および
細胞膜反応を示す。
人間の癌においてMAb 494/32は膵臓の第一度および第
二度線癌の約80％と反応するが、これに対し第三度膵臓
癌とは何らとるに足る反応が観察されない。さらに、結
腸癌肝臓転移の約70％および結腸癌原発腫瘍の約30％が
免疫組織学的に染色される。肺癌の約40％においては少
数の腫瘍細胞が反応性である。
二度線癌の約80％と反応するが、これに対し第三度膵臓
癌とは何らとるに足る反応が観察されない。さらに、結
腸癌肝臓転移の約70％および結腸癌原発腫瘍の約30％が
免疫組織学的に染色される。肺癌の約40％においては少
数の腫瘍細胞が反応性である。
正常な肺、肝臓、乳房、腎臓、脾臓、リンパ節、骨髄
および結合組織ならびに筋肉および末梢血液白血球はMA
b 494/32と何らとるに足る免疫反応を示さない。しかし
胃および結腸の粘液産性細胞（杯状細胞）ならびに外側
の結腸粘膜の少数の細胞は染色される。炎症を起した膵
臓においては管路系は陽性反応を示すが、これに対し外
分泌性および内分泌性膵臓組織は反応しない。
および結合組織ならびに筋肉および末梢血液白血球はMA
b 494/32と何らとるに足る免疫反応を示さない。しかし
胃および結腸の粘液産性細胞（杯状細胞）ならびに外側
の結腸粘膜の少数の細胞は染色される。炎症を起した膵
臓においては管路系は陽性反応を示すが、これに対し外
分泌性および内分泌性膵臓組織は反応しない。
MAb 494/32により限定される抗原の分子量（200kDa以
上）は190kDaを有するMAb AR2−20およびAR1−28により
限定される糖蛋白質のそれとは異なる（Cancer Res.,19
85,45,1723〜1729）。さらに、MAb 494/32についてのエ
ピトープ接近性はそれが膵臓の高度に分化した腺癌と優
先的に反応するものであり、これに反しMAb AR2−20お
よびAR1−28はすべての試験された膵臓癌と反応する。
上）は190kDaを有するMAb AR2−20およびAR1−28により
限定される糖蛋白質のそれとは異なる（Cancer Res.,19
85,45,1723〜1729）。さらに、MAb 494/32についてのエ
ピトープ接近性はそれが膵臓の高度に分化した腺癌と優
先的に反応するものであり、これに反しMAb AR2−20お
よびAR1−28はすべての試験された膵臓癌と反応する。
MAb 494/32とMAb DUPAN−２（LNCI,1985,72,999〜100
3）との間の明白な相異はエピトープ接近性（DUPAN−２
はすべての膵臓癌および胆のう癌および多くの腺組織と
反応する）およびノイラミニダーゼ抵抗性（DUPAN−２
はノイラミニダーゼ感受性エピトープを識別する）にあ
る。Cancer Res.,1985,45,1402〜1407に記載のMAb C54
−０、C1−N3およびC1−P83はエピトープおよび定めら
れた抗原（C54−０に対して分子量122kDa）への接近性
に関してMAb494/32と相異する。
3）との間の明白な相異はエピトープ接近性（DUPAN−２
はすべての膵臓癌および胆のう癌および多くの腺組織と
反応する）およびノイラミニダーゼ抵抗性（DUPAN−２
はノイラミニダーゼ感受性エピトープを識別する）にあ
る。Cancer Res.,1985,45,1402〜1407に記載のMAb C54
−０、C1−N3およびC1−P83はエピトープおよび定めら
れた抗原（C54−０に対して分子量122kDa）への接近性
に関してMAb494/32と相異する。
MAb 495/36および495/19は人間の組織、ヌードマウス
上のヒト腫瘍異種移植片および生体外で培養された細胞
系統上に認められうる抗原３上のエピトープを識別し、
その際反応は前記したようにして検出された。
上のヒト腫瘍異種移植片および生体外で培養された細胞
系統上に認められうる抗原３上のエピトープを識別し、
その際反応は前記したようにして検出された。
結腸癌細胞系統DE−TAは明白な膜螢光を示す。すべて
の試験されたヒト腫瘍異種移植組織例えば気管支癌BroC
a−11、GOT−１、MR−21E560Sp、BroCa−33、BroCa−5
3、B98、膵臓癌PaTu I、PaTu IIおよび結腸癌Ca 4,5,Le
−Met Co.Ca2,DE−TA、Le−Met Co.Ca9およびLe−Met C
o.Ca3は強い細胞質性ならびに膜性反応を示す。
の試験されたヒト腫瘍異種移植組織例えば気管支癌BroC
a−11、GOT−１、MR−21E560Sp、BroCa−33、BroCa−5
3、B98、膵臓癌PaTu I、PaTu IIおよび結腸癌Ca 4,5,Le
−Met Co.Ca2,DE−TA、Le−Met Co.Ca9およびLe−Met C
o.Ca3は強い細胞質性ならびに膜性反応を示す。
人間の肺癌組織においてはMAb 495/36は試験された種
々の組織の場合の約100％と明らかな膜反応を示す。さ
らに、膵臓癌、結腸癌肝臓転移、卵巣癌および膀胱癌な
らびに乳癌の約90％が強い膜反応を示す。末梢血液白血
球、リンパ球、脾臓、血管、結合組織および筋肉におい
ては何ら免疫組織学的染色は観察されない。正常な結腸
では粘膜および腺窩が陽性反応し、肝臓においては胆管
上皮そして胃においては腺組織が陽性反応する。肺の上
皮および外分泌性および内分泌性膵臓組織は強い反応を
示す。
々の組織の場合の約100％と明らかな膜反応を示す。さ
らに、膵臓癌、結腸癌肝臓転移、卵巣癌および膀胱癌な
らびに乳癌の約90％が強い膜反応を示す。末梢血液白血
球、リンパ球、脾臓、血管、結合組織および筋肉におい
ては何ら免疫組織学的染色は観察されない。正常な結腸
では粘膜および腺窩が陽性反応し、肝臓においては胆管
上皮そして胃においては腺組織が陽性反応する。肺の上
皮および外分泌性および内分泌性膵臓組織は強い反応を
示す。
上記モノクローナル抗体の取得に用いられる方法は西
ドイツ特許公開公報3329184号第３〜５頁に記載されて
いる。
ドイツ特許公開公報3329184号第３〜５頁に記載されて
いる。
本発明はさらに、哺乳動物を肺癌細胞系統MR22E572ま
たは結腸癌細胞系統DE−TAの細胞で免疫し、かくして免
疫された動物から脾臓細胞を剔出し、細胞系統X63Ag8.6
53と融合させ、ハイブリドーマを選択しそしてMAbを取
得することからなる前記したモノクローナル抗体の１種
類の製法にも関する。
たは結腸癌細胞系統DE−TAの細胞で免疫し、かくして免
疫された動物から脾臓細胞を剔出し、細胞系統X63Ag8.6
53と融合させ、ハイブリドーマを選択しそしてMAbを取
得することからなる前記したモノクローナル抗体の１種
類の製法にも関する。
MAb 436/15を誘発させるための免疫原としては細胞系
統MR22E572が用いられそしてMAb494/32、495/36および4
95/19を誘発させるにはDE−TA細胞系統が用いられる。
哺乳動物好ましくはマウスをこれらの細胞系統の一種類
の細胞で免疫しそしてかかる動物から得られた脾臓細胞
をX63Ag8.653細胞系統と融合させる。
統MR22E572が用いられそしてMAb494/32、495/36および4
95/19を誘発させるにはDE−TA細胞系統が用いられる。
哺乳動物好ましくはマウスをこれらの細胞系統の一種類
の細胞で免疫しそしてかかる動物から得られた脾臓細胞
をX63Ag8.653細胞系統と融合させる。
生成するハイブリドーマについてそれらが所望の特異
性を有する抗体を含有するか否かについて検査する。
性を有する抗体を含有するか否かについて検査する。
検査されたハイブリドーマ上澄み液中に前記した特異
性を有する抗体を含有するもの幾種かが存在する。これ
らの抗体を分泌するハイブリドーマをクローンし、そし
てこれらハイブリドーマクローンから得られたモノクロ
ーナル抗体を、それらにより識別される抗原を免疫化学
的に特性化するのに用いる。分子量は商業的に入手しう
る標識と比較して測定される。これら抗原はアフイニテ
イクロマトグラフイーにより精製されうる。
性を有する抗体を含有するもの幾種かが存在する。これ
らの抗体を分泌するハイブリドーマをクローンし、そし
てこれらハイブリドーマクローンから得られたモノクロ
ーナル抗体を、それらにより識別される抗原を免疫化学
的に特性化するのに用いる。分子量は商業的に入手しう
る標識と比較して測定される。これら抗原はアフイニテ
イクロマトグラフイーにより精製されうる。
さらに、組織学的標本へのモノクローナル抗体の結合
は間接的な免疫ペルオキシダーゼ技法を用いて測定され
る（J.clin.Pathol.,1979,32,971）。
は間接的な免疫ペルオキシダーゼ技法を用いて測定され
る（J.clin.Pathol.,1979,32,971）。
さらにこれらモノクローナル抗体により識別される抗
原または抗原分子サブ集団の分子特性化はウエスタンブ
ロツト分析に加えて放射線免疫沈殿により行われる（ベ
ーリング研究所（Behring Institute）報告、1984年、7
4,27〜34）。
原または抗原分子サブ集団の分子特性化はウエスタンブ
ロツト分析に加えて放射線免疫沈殿により行われる（ベ
ーリング研究所（Behring Institute）報告、1984年、7
4,27〜34）。
人間の組織上の種々のエピトープとの反応性に基づき
MAb 436/15、494/32および495/36または495/19はエピト
ープ陽性およびエピトープ陰性の組織または体液の免疫
組織学的区別に用いられうる。前記したMAbはさらに放
射性標識された形態で生体内で腫瘍に結合でき（436/1
5、494/32）そしてそれらの助けにより排液性リンパ節
における早期転移が免疫シンチグラフイーにより検出さ
れうる（495/36、495/19）。
MAb 436/15、494/32および495/36または495/19はエピト
ープ陽性およびエピトープ陰性の組織または体液の免疫
組織学的区別に用いられうる。前記したMAbはさらに放
射性標識された形態で生体内で腫瘍に結合でき（436/1
5、494/32）そしてそれらの助けにより排液性リンパ節
における早期転移が免疫シンチグラフイーにより検出さ
れうる（495/36、495/19）。
その上、これらモノクローナル抗体は活性化合物の担
体として使用できそして悪性疾患の治療に利用されう
る。もう一つの使用可能性は生体内投与による腫瘍細胞
転移の抑制または抗原を担持する転移性腫瘍細胞へのモ
ノクローナル抗体の結合である。さらに、これらモノロ
ーナル抗体は他の毒素と共同作用することなしで抗原担
持性腫瘍細胞にとつて有毒でありうるしまたは腫瘍細胞
膜に結合したのち、悪性の腫瘍細胞を良性の細胞となら
しめる分化過程をもたらしうる。
体として使用できそして悪性疾患の治療に利用されう
る。もう一つの使用可能性は生体内投与による腫瘍細胞
転移の抑制または抗原を担持する転移性腫瘍細胞へのモ
ノクローナル抗体の結合である。さらに、これらモノロ
ーナル抗体は他の毒素と共同作用することなしで抗原担
持性腫瘍細胞にとつて有毒でありうるしまたは腫瘍細胞
膜に結合したのち、悪性の腫瘍細胞を良性の細胞となら
しめる分化過程をもたらしうる。
さらにADCCを促進するMAb 494/32および495/36は非放
射性標識された形態で全身または局所投与によりエピト
ープ陽性腫瘍に対する腫瘍治療に使用されうる。
射性標識された形態で全身または局所投与によりエピト
ープ陽性腫瘍に対する腫瘍治療に使用されうる。
前記したモノクローナル抗体はまた標識された形態で
診断剤としてまたは組織および体液の分析に使用できそ
して放射線免疫シンチグラフイーに、または治療剤とし
て放射線免疫療法にまたは化学免疫療法に用いられう
る。
診断剤としてまたは組織および体液の分析に使用できそ
して放射線免疫シンチグラフイーに、または治療剤とし
て放射線免疫療法にまたは化学免疫療法に用いられう
る。
診断目的にはモノククローナル抗体は試験の如何に応
じ0.001〜100μg/mlの濃度で用いられる。
じ0.001〜100μg/mlの濃度で用いられる。
治療効果は200μｇ〜100mg/Kgの量で達成される。
本発明による無傷の抗体と並んで、酵素（特にパパイ
ン、プラスミンまたはペプシン）により当業者に知られ
た方法で調製された例えばＦ（ab′）２またはFabのよ
うなそれらの分解生成物も使用されうる。
ン、プラスミンまたはペプシン）により当業者に知られ
た方法で調製された例えばＦ（ab′）２またはFabのよ
うなそれらの分解生成物も使用されうる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ハンス−ハーラルト・ゼトラツエク ドイツ連邦共和国デー−3550マルブル ク．ゾネンハング３ (56)参考文献 特開 昭60−89500（ＪＰ，Ａ)
Claims (4)
- 【請求項１】腫瘍会合性糖蛋白質に対するカッパ鎖を有
するIgG3−アイソタイプのMAb 436/15と呼ばれるモノク
ローナル抗体であって、非還元条件下に200kDaを越える
分子量を有する糖蛋白質（抗原１）と反応し、この抗体
と反応して、結腸癌細胞系統DE−TAおよび膵臓癌細胞系
統PaTu Iは明らかな膜蛍光を示し、膵臓癌PaTu Iおよび
PaTu IIの異種移植組織および肺癌B110の小細胞性異種
移植組織は個々の組織領域において陽性の免疫染色を示
し、これに反しこの抗体は肺癌BroCa17および膵臓癌組
織PaTu IIIに対しては何ら検出されうる反応を示さず、
リンパ節、扁桃腺、末梢血液白血球、正常肝臓および正
常結腸へは実質的に結合せず、肺の異形成上皮、膵臓お
よび少数の小胞細胞の小葉間および小葉内管路、並びに
胃腺および脾臓中の少数の細胞に対しては反応を示す前
記抗体；腫瘍会合性糖蛋白質に対するカッパ鎖を有する
IgG1−アイソタイプのMAb 494/32と呼ばれるモノクロー
ナル抗体であって、非還元条件下および還元的条件下に
200kDaを越える分子量を有する糖蛋白質（抗原２）と反
応し、この抗体と反応して、結腸癌細胞系統DE−TAは著
明な膜蛍光を示し、この抗体に対して、膵臓腫瘍PaTu I
およびII、I.W.および14の異種移動組織および結腸癌４
および５の異種移植組織は著明な細胞質および細胞膜反
応を示し、正常な肺、肝臓、乳房、腎臓、脾臓、リンパ
節、骨髄および結合組織並びに筋肉および末梢血液白血
球は何らとるに足る免疫反応を示さず、胃および結腸の
粘液産生細胞（杯状細胞）並びに外側の結腸粘膜の少数
の細胞は染色され、炎症を起こした膵臓においては管路
系は陽性反応を示すがこれに対し外分泌性および内分泌
性膵臓組織は反応しない前記抗体；並びに腫瘍会合性糖
蛋白質に対するカッパ鎖を有するIgG3−アイソタイプの
MAb 495/19およびMAb 495/36と呼ばれる２種類のモノク
ローナル抗体であって、非還元条件下および還元的条件
下に200kDaを越える分子量を有する糖蛋白質（抗原３）
と反応し、この抗体と反応して結腸癌細胞系統DE−TAは
著明な膜蛍光を示し、この抗体に対して、気管支癌BroC
a−11、GOT−１、MR−21E560Sp、BroCa−33、BroCa−5
3、B98、膵臓癌PaTu I、PaTu IIおよび結腸癌Ca4,5、Le
−Met Co.Ca2、DE−TA、Le−Met Co.Ca9およびLe−Met
Co.Ca3は強い細胞質および細胞膜反応を示し、さらにMA
b 495/36は人間の肺癌組織に著明な膜反応を示し、末梢
血液白血球、リンパ球、脾臓、血管、結合組織および筋
肉においては何ら免疫組織学的染色を示さず、正常な結
腸の粘膜および腺窩は陽性反応を示し、肝臓の胆管上皮
および胃の腺組織は陽性反応を示し、肺の上皮および外
分泌性および内分泌性膵臓組織は強い反応を示す前記抗
体。 - 【請求項２】腫瘍会合性糖蛋白質に対するカッパ鎖を有
するIgG3−アイソタイプのMAb 436/15と呼ばれるモノク
ローナル抗体であって、非還元条件下に200kDaを越える
分子量を有する糖蛋白質（抗原１）と反応し、この抗体
と反応して、結腸癌細胞系統DE−TAおよび膵臓癌細胞系
統PaTu Iは明らかな膜蛍光を示し、膵臓癌PaTu Iおよび
PaTu IIの異種移植組織および肺癌B110の小細胞性異種
移植組織は個々の組織領域において陽性の免疫染色を示
し、これに反しこの抗体は肺癌BroCa17および膵臓癌組
織PaTu IIIに対しては何ら検出されうる反応を示さず、
リンパ節、扁桃腺、末梢血液白血球、正常肝臓および正
常結腸へは実質的に結合せず、肺の異形成上皮、膵臓お
よび少数の小胞細胞の小葉間および小葉内管路、並びに
胃腺および脾臓中の少数の細胞に対しては反応を示す前
記抗体；腫瘍会合性糖蛋白質に対するカッパ鎖を有する
IgG1−アイソタイプのMAb 494/32と呼ばれるモノクロー
ナル抗体であって、非還元条件下および還元的条件下に
200kDaを越える分子量を有する糖蛋白質（抗原２）と反
応し、この抗体と反応して、結腸癌細胞系統DE−TAは著
明な膜蛍光を示し、この抗体に対して、膵臓腫瘍PaTu I
およびII、I.W.および14の異種移植組織および結腸癌４
および５の異種移植組織は著明な細胞質および細胞膜反
応を示し、正常な肺、肝臓、乳房、腎臓、脾臓、リンパ
節、骨髄および結合組織並びに筋肉および末梢血液白血
球は何らとるに足る免疫反応を示さず、胃および結腸の
粘液産生細胞（杯状細胞）並びに外側の結腸粘膜の少数
の細胞は染色され、炎症を起こした膵臓においては管路
系は陽性反応を示すがこれに対し外分泌性および内分泌
性膵臓組織は反応しない前記抗体；並びに腫瘍会合性糖
蛋白質に対するカッパ鎖を有するIgG3−アイソタイプの
MAb 495/19およびMAb 495/36と呼ばれる２種類のモノク
ローナル抗体であって、非還元条件下および還元的条件
下に200kDaを越える分子量を有する糖蛋白質（抗原３）
と反応し、この抗体と反応して結腸癌細胞系統DE−TAは
著明な膜蛍光を示し、この抗体に対して、気管支癌BroC
a−11、GOT−１、MR−21E560Sp、BroCa−33、BroCa−5
3、B98、膵臓癌PaTu I、PaTu IIおよび結腸癌Ca4,5、Le
−Met Co.Ca2、DE−TA、Le−Met Co.Ca9およびLe−Met
Co.Ca3は強い細胞質および細胞膜反応を示し、さらにMA
b 495/36は人間の肺癌組織に著明な膜反応を示し、末梢
血液白血球、リンパ球、脾臓、血管、結合組織および筋
肉においては何ら免疫組織学的染色を示さず、正常な結
腸の粘膜および腺窩は陽性反応を示し、肝臓の胆管上皮
および胃の腺組織は陽性反応を示し、肺の上皮および外
分泌性および内分泌性膵臓組織は強い反応を示す前記抗
体を製造するに当たり、肺癌細胞系統MR22E572の細胞で
免疫した哺乳動物から剔出した脾臓細胞と細胞系統X63A
g8.653とを融合させたハイブリドーマから、MAb 436/15
を産生するハイブリドーマを選択し、MAb 436/15モノク
ローナル抗体を取得するか、あるいは結腸癌細胞系統DE
−TAの細胞で免疫した哺乳動物から剔出した脾臓細胞と
細胞系統X63Ag8.653とを融合させたハイブリドーマか
ら、MAb 494/32、MAb 495/36またはMAb 495/15を産生す
るハイブリドーマをそれぞれ選択し、MAb 494/32、MAb
495/36またはMAb 495/15モノクローナル抗体を取得する
ことからなる方法。 - 【請求項３】哺乳動物がマウスである前記特許請求の範
囲第２項記載の方法。 - 【請求項４】診断剤、製剤上の活性化合物のための担
体、組織および体液の分析用および放射線免疫シンチグ
ラフィー用並びに治療剤として使用するための前記特許
請求の範囲第１項記載のモノクローナル抗体。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19853531301 DE3531301A1 (de) | 1985-09-02 | 1985-09-02 | Monoklonale antikoerper gegen tumorassoziierte glykoproteine, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung |
| DE3531301.3 | 1985-09-02 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6269997A JPS6269997A (ja) | 1987-03-31 |
| JP2526217B2 true JP2526217B2 (ja) | 1996-08-21 |
Family
ID=6279944
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61203909A Expired - Lifetime JP2526217B2 (ja) | 1985-09-02 | 1986-09-01 | 腫瘍会合性糖蛋白に対するモノクロ−ナル抗体およびそれらの製法 |
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| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0213581A3 (ja) |
| JP (1) | JP2526217B2 (ja) |
| AU (1) | AU611381B2 (ja) |
| DE (1) | DE3531301A1 (ja) |
| DK (1) | DK415586A (ja) |
| ES (1) | ES2000615A6 (ja) |
| GR (1) | GR862238B (ja) |
| MX (1) | MX3601A (ja) |
| PT (1) | PT83285B (ja) |
| ZA (1) | ZA866614B (ja) |
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| EP0180413B1 (en) * | 1984-10-26 | 1991-10-02 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-human cancer monoclonal antibody |
| AU601379B2 (en) * | 1985-11-07 | 1990-09-13 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The | Antigen indicative of human breast cancer and assays based thereon |
| US4926869A (en) * | 1986-01-16 | 1990-05-22 | The General Hospital Corporation | Method for the diagnosis and treatment of inflammation |
| GB8800078D0 (en) * | 1988-01-05 | 1988-02-10 | Ciba Geigy Ag | Novel antibodies |
| DE3825615A1 (de) * | 1988-07-28 | 1990-02-01 | Behringwerke Ag | Antigenkonstrukte von "major histocompatibility complex" klasse i antigenen mit spezifischen traegermolekuelen, ihre herstellung und verwendung |
| JPH0266456A (ja) * | 1988-08-31 | 1990-03-06 | Saikin Kagaku Kenkyusho:Kk | 疾病動物の一次診断方法、それに使用する診断試薬及びその製造方法 |
| DE3909799A1 (de) | 1989-03-24 | 1990-09-27 | Behringwerke Ag | Monoklonale antikoerper (mak) gegen tumorassoziierte antigene, ihre herstellung und verwendung |
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|---|---|---|---|---|
| DE3416774A1 (de) * | 1984-05-07 | 1985-11-14 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Monoklonale antikoerper, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung |
| DE3329184A1 (de) * | 1983-08-12 | 1985-02-21 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Monoklonale antikoerper mit spezifitaet fuer membran-assoziierte antigene |
| US4585742A (en) * | 1983-12-14 | 1986-04-29 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Monoclonal antibody with specificity to human small cell carcinoma and use thereof |
| DK276185D0 (da) * | 1984-11-09 | 1985-06-19 | Novo Industri As | Monoklonale antistoffer,fremgangsmaade til fremstilling af disse samt deres diagnostiske anvendelse |
| JPS61258173A (ja) * | 1985-05-10 | 1986-11-15 | Akira Taniuchi | モノクロ−ナル抗体およびその製法ならびに用途 |
| US5185432A (en) * | 1986-02-26 | 1993-02-09 | Oncogen | Monoclonal antibodies and antigen for human non-small cell lung carcinoma and other certain human carcinomas |
-
1985
- 1985-09-02 DE DE19853531301 patent/DE3531301A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-08-23 EP EP86111708A patent/EP0213581A3/de not_active Withdrawn
- 1986-08-29 MX MX360186A patent/MX3601A/es unknown
- 1986-09-01 DK DK415586A patent/DK415586A/da not_active Application Discontinuation
- 1986-09-01 ES ES8601533A patent/ES2000615A6/es not_active Expired
- 1986-09-01 JP JP61203909A patent/JP2526217B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1986-09-01 GR GR862238A patent/GR862238B/el unknown
- 1986-09-01 ZA ZA866614A patent/ZA866614B/xx unknown
- 1986-09-01 AU AU62140/86A patent/AU611381B2/en not_active Ceased
- 1986-09-01 PT PT83285A patent/PT83285B/pt not_active IP Right Cessation
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|---|---|
| DK415586A (da) | 1987-03-03 |
| DK415586D0 (da) | 1986-09-01 |
| AU6214086A (en) | 1987-03-05 |
| EP0213581A3 (de) | 1988-05-25 |
| EP0213581A2 (de) | 1987-03-11 |
| ZA866614B (en) | 1987-04-29 |
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| PT83285B (pt) | 1989-05-12 |
| GR862238B (en) | 1986-12-31 |
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| DE3531301A1 (de) | 1987-03-05 |
| AU611381B2 (en) | 1991-06-13 |
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| MX3601A (es) | 1993-05-01 |
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