JPS60231673A - Ｙｍ−０９７３０のジアステレオマーａまたはその酸付加塩、該化合物の製造方法および該化合物からなる医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、　ＹＣ−２１，４のジアステレオ異性体Ａ捷
たはその薬理学的に許容される酸付加塩、該化合物の製
造方法および該化合物を有効成分とする医薬に関する。

ＹＣ−２１４は、化学名を　２，６−シメチルー４−（
３−ニトロフェニル）−１，４−シヒトロヒリジンー３
，５−ジカルボン酸−３−（ｌ−ベンジルピロリジン−
３−１ル）エステル−５−メチルエステルと称せられ、
つぎの化学構造式で示されるジヒドロピリジン−３，５
−ジカルボン酸エステル誘導体である。

ＹＣ−２１４は２本願の出願人会社の研究者等によって
始めて合成された化合物で、血管拡張作用および血圧降
下作用を有し、その作用に持続性があることが報告され
ている（特許第１１３７５０６号、特公昭５７−３０１
１１号公報）。

ＹＣ−２１４は、不斉炭素原子を２個有しており。

これらの不斉炭素原子にもとづく異性体が存在すること
が立体化学的見地より推定されるが。

前記特許公報にはこれらに関し何も記載がなく。

未確認である。

本発明者等は、　ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａ
とジアステレオ異性体Ｂとを始めて分離し。

異性体Ａが異性体Ｂおよび両異性体の混合物に比べて格
段にすぐれた特有の薬理効果を有していることをつきと
め本発明を完成した。ここに。

異性体Ａは高速液体クロマトグラフィー（以下ＨＰＬＣ
とい５）［カラム：ヌクレオシル■５　Ｃ，８４，６ｍ
ｍダＸ３００ｍｍ、カラム温度：３０’Ｃ，移動相：０
０５モル　リン酸２水素カリウム（ｐＨ３）−アセトニ
トリル（８０：　２０　ｖ／ｖ）、流速：毎分０．９ｍ
ｌ、紫外線検出器（λ２５４ｎｍ）］において保持時間
２８分を示し、　同保持時間２９分を示す異性体Ｂと明
確に区別できる化合物である。

したがって９本発明の目的化合物は、上記高速液体クロ
マトグラフィーにおける保持時間によって特定される　
ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａまたはその薬理学
的に許容される酸付加塩を対象とするものである。ここ
に、薬理学的に許容される酸付加塩としては、マロン酸
塩。

シーウ酸塩、パラニトロ安息香酸塩、２−ケトグルタル
酸塩、マレイン酸塩、　ｄｌ−リンゴ酸塩。

リン酸塩、塩酸塩、硫酸塩またはパラトルエンスルホン
酸塩である。

後記薬理実験の結果に示されるように２本発明の異性体
Ａまたはその薬理学的に許容される酸付加塩は、冠動脈
内直接投与による冠面流量増加率において、異性体Ｂの
３〜１５倍、各異性体の等量混合物の６〜１４倍の面積
比を示し、冠動脈への高い親和性を有することを示す。

一方、異性体Ｂは等量混合物とほぼ同等乃至２倍の効力
を示した。このことは、　ＹＣ−２１４の薬理作用は、
各異性体の物理的混合割合の単なる平均値として現われ
るものではないことを意味している。また冠動脈に高い
親和性を有することは本発明者によって見出された新し
い薬理学的知見であって本願化合物の医薬としての利用
可能性を高めるものである。

つぎに２本発明の異性体Ａまたはその薬理学的に許容さ
れる酸付加塩の製造方法について説明する。

前述のように、特公昭５７−３０１１１号公報にはＹＣ
−２１４の異性体に関する記載は全く見当らず。

また、その後の文献にも異性体を製造した報告をみない
。一対のジアステレオ異性体は一般に光学対掌体の場合
と異なり、飾光性の絶対値が異なるほか、全ての物理的
化学的性質が異なる。

従って、その性質が明らかになっていない以上。

それらの性質の相異にもとづいて各異性体を製造するこ
とはできない。

本発明者等は、後述の参考例に記載の方法によってＹＣ
−２１４を合成し、そこに得られたＹＣ−２１４がジア
ステレオ異性体Ａと同異性体Ｂの等量混合物であること
を知ることができた。そしてこれにもとづき、混合物か
ら異性体Ａを取得する方法を種々検討した結果、各異性
体の混合物をシリカゲルを担体とし、酢酸エチルおよび
酢酸の混液を溶離液とするカラムクロマトグラフィーに
付することにより、最初の溶出液より異性体Ａを、後の
溶出液より異性体Ｂを製造したもので、これら両異性体
は本発明者等により始めて明らかとされた新規化合物に
属するものである。

この製造方法で担体として使用されるシリカゲルとして
は、カラムクロマトグラフィーに一般に使用されるもの
であれば特に制限はない。

溶離液として使用する混合溶媒における酢酸エチルと酢
酸との混合割合は特に制限はない。通常酢酸エチルを主
体とし、これに歩容量の酢酸を混合したものを使用する
。混合比は概ね酢酸エチル３０〜５０／ｖに対し、酢酸
１〜１０’／ｖ程度であり、酢酸の配合量が低下すると
目的化合物の溶出時間が長くなる。溶出速度、処理温度
は適宜の条件を採用できる。

また、上記の製造方法と別の製造方法として。

本発明者等は各異性体の混合物を特定の酸付加塩に導き
、これを分別再結晶することにょシ異性体Ａの酸付加塩
を製造することに成功した。

この製造方法に用いられる酸付加塩としては。

たとえばマロン酸塩、バラニトロ安息香酸塩。

マレイン酸塩＋、　ｄｌ−リンゴ酸塩などである。

これらの酸付加塩は結晶性であり、且つ有機溶媒に対す
る溶解度が異性体Ａと異性体Ｂとで相異しているので分
別再結晶により異性体Ａを製造する方法に利用できる。

殊に好適な酸付加塩はマロン酸塩である。この塩は１回
の再結晶により、異性体Ａの含有量が極めて高い結晶を
得ることができる。この製造方法に使用できる溶媒とし
てはたとえばメタノール、エタノール。

アセトン、アセトニトリルなどを挙げるコトカできる。

以上の各製造方法で得られたＹＣ−２１４のジアステレ
オ異性体Ａの酸付加塩はいったん遊離形に導いた後、こ
れに他の酸を作用させることにより所望の酸付加塩に塩
交換することが可能である。

つぎに、　ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａの薬理
効果、急性毒性、医薬としての投与量を説明する。

（１）冠面流量増加作用 測定方法： ベントパルビタールナトリウム　３０ｑ／ｋｇｉ、ｖ、
で麻酔し、開胸した犬において、左頚動脈より導いた血
液をポンプ（Ｈａｒｖａｒｄ　Ａｐｐａｒａｔｕｓ＋１
２１５　Ｄ　）により、左冠動脈廻旋枝に定圧潅流し、
冠血流量は電磁流量計（ＭＦ−２５，日本光電）で測定
した。潅流圧は、血流ポンプ制御装置（ＳＯ８−２１，
データーグラフ）で。

常Ｋ　１２０　ｍｍＨｇとなるようにポンプを駆動した
（塚田徳昌他二日本薬理学会誌　７４５９Ｐ。

１９７８）。被検薬の冠動脈に対する直接作用を見る目
的で、薬物は、冠動脈内へ直接投与した。薬物評価は、
被検薬投与後１２０分間に増加した冠面流量増加率−＃
４ｍ、ｔｎ、ｔｌ：；：：：Ｅ＊ＩＬＩｋ　×、００）
の面積で行った。

測定結果； 表　１ 被検薬１μｇを冠動脈内直接投与すると、異性体Ａ塩酸
塩は、各異性体の等量混合物に比べ１４倍高い冠面流量
増加率面積を示した。

本実験は、被検薬を直接冠動脈内に投与しているので、
異性体Ａ塩酸塩は異性体Ｂ塩酸塩および各異性体の等量
混合物に比べ、冠動脈血管床に高い親和性を有すること
を示している。

このような冠動脈への高い親和性を有することは、狭心
症等の冠動脈疾患に高い有用性を有することを意味する
。

（２）麻酔ラットにおける降圧作用 測定方法：ウレタンで麻酔したラストで血圧を測定した
。薬物は、２０分間隔で累積的に静脈内投与した。

測定結果： 表２ 表２から明らかなように血圧を３０ｍｍＨｇ下降する用
量（ＥＤ　３０　ｍｍＨｇ　）で比較すると、異性体Ａ
塩酸塩は異性体Ｂ塩酸塩より約７０倍降圧作用が強力で
ある。

（３）急性毒性 ６週齢９体重２７〜２９ｇの雄性ＩＣＲマウスを用い、
異性体Ａ塩酸塩を０．５％メチルセルロース懸濁液とし
て経口投与し、７日間観察した。異性体Ａ塩酸塩の急性
毒性値（ＬＤ５０　）Ｌｉｔｃｈｆｉｅｌｄ　＆Ｗｉｌ
ｃｏｘｏｎ法（ジャーナルオプファルマコロジー（Ｊ、
　ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　）　９６巻９９−１１３頁　
１９４９年でもとめ、その値は２９５　（２４２−３６
０）　ｍｇ／ｋｇ　ｐ−０，であった。

（４）投与量 体重、症状により異なるが９通常静注では０．１〜２ｍ
ｇ、経口投与では１日５〜２０ｆｆ１ｇを１日１回又は
２回に分けて行う。

つぎに実施例、処方例を挙げて本発明の目的化合物、そ
の製造方法および医薬について更に説明する。なお、各
実施例で原料として使用する異性体Ａと異性体Ｂの混合
物の製造例を参考例として説明する。また、各実施例で
得られた目的化合物の物性値を表３に示す。

参考例 ３−二トロベンツアルデヒド１．５１　ｇ　（０，０１
モル）と１−ベンジル−３−アセトアセチルオキシ−ピ
ロリジン２．６１　ｇ　（０，０１モル）および３−ア
ミノクロトン酸メチルエステル１．１５　ｇ　（０，０
１モル）ヲインブロパノール５　ｍｌ中に溶解し８時間
加熱還流する。溶媒を減圧下に溜去し得られた残留物を
クロロホルムに溶解し希塩酸、水、炭酸水素ナトリウム
飽和水溶液で順次洗浄し無水硫酸マグネシウムで乾燥後
溶媒を減圧下に溜去して粗製の２，６−シメチルー４−
　（３−ニトロフェニル）　−１，４−ジヒドロピリジ
ン−３，５−ジカルボン酸−３−（１−ベンジルピロリ
ジン−３−イル）エステル−５−メチルエステルをカラ
メル状に４．９１ｇ得た。

ここに得た粗製塩基を以下に示す条件で高速液体クロマ
トグラフィーによりジアステレオ異性体の生成比を分析
したところ、ジアステレオ異性体Ａ（保持時間２８）：
ジアステレオ異性体Ｂ（保持時間２９分）の比は１：１
であった。

カラム：ヌクレオシル■５　Ｃ，ａ　、　４．６　ｍｍ
　ｌ　ｘ　３００ｍｍ。

カラム温度＝３０℃、移動相：０．０５モルリン酸２水
素カリウム（ｐＨ３）−アセトニトリル（８０：　２０
　ｖ／ｖ　）　、流速：毎分０．９　ｔｎｌ　、紫外線
検出器（２２５４ｍｍ）。

なお、ジアステレオ異性体ＡおよびＢは、ＹＣ−２１４
ＯＮ−ベンジル基におけるメチレンの核磁気共鳴スペク
トルのシグナルに相異点が認められる。重メタノールｄ
４中での測定により、異性体Ａは、４．４０ｐｐｍに、
また、異性体Ｂは４．３０ｐｐｍにそれぞれ水素原子２
個に相当するシングレットのシグナルを示す。

表３（目的化合物の物性値） 実施例１゜ 参考例で得たＹＣ−２１４の粗製遊離塩基４．９１　ｇ
をクロロホルム２５ｍ１に溶解し１０％塩酸１５ｍ７を
加えよく振りまぜた後有機相を分液する。有機層をもう
一度１０ｍ１の１０％塩酸で同様に処理し、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥後減圧下に溶媒を溜去して得た残留物
をアセトン１０．４ｍ７に溶解し放置してＹＣ−２１４
塩酸塩を結晶として得た（収量３５ｇ）。これをメタノ
ール１．８ｍ４に溶解しアセトン８ｍｌを加え再結晶を
行う。この繰作をもう一度（つがえしＹ’Ｃ−２１４塩
酸塩２．３８　ｇを得た。ここに得た塩酸塩のジアステ
レオ異性体Ａ二Ｂの比はＨＰＬＣによると６５．６　：
　３４．４であった。この塩２．１５ｇをクロロホルム
２５ｍｔに溶解し飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１５ｍ
７で２度洗浄し、有機層を無水マグネシウムで乾燥し溶
媒を減圧下に溜去して得た遊離塩基２ｇをシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーに付しくカラム：リクロプレノ
プ■５１６０．　Ｃサイズ、溶出液：酢酸エチル−酢酸
＝３０：５ｙ／Ｖ）ジアステレオ異性体Ａの酢酸塩を油
状に得る。これをクロロホルム１０ｍＺにとかし飽和炭
酸水素ナトリウム水溶液１０＋ｎＺ。

水１０＋ｎｔ、１０％塩酸１０ｍ１で順次洗浄し無水硫
酸マグネシウムで乾燥後溶媒を減圧下に溜去する。得ら
れた残留物を０．８ｍＡのアセトンで処理して目的のジ
アステレオ異性体Ａの塩酸塩を得る。収量０．４　ｇ　
０実施例２ 参考例で得たＹ（，２１４の粗製遊離塩基４゜９１ｇと
冷アセトニトリルで洗浄してＹＣ−’２１４のマロン酸
塩２．０３　ｇを得た。（ジアステレオ異性体Ａ、Ｂの
比−８９，１：１０．９　）。これを２５倍量のメタノ
ールで２回再結晶しＹＣ−２１４のジアステレオ異性体
Ａ１００％のマロン酸塩を１０６ｇ得た。

実施例３ 参考例で得たＹＣ−２１４の粗製遊離塩基４．９’　１
　ｇとルで洗浄し減圧乾燥してＹＣ−２１４のマロン酸
塩ｉ、ｓ　ｓ　ｇを得る。ここに得た結晶のジアステレ
オ異性体Ａ、Ｈの比は９０．７　：　９．３である。こ
れをメタノールから２回再結晶して異性体Ｂを含まない
ジアステレオ異性体Ａマロン酸塩を得た。

実施例４ 実施例３のメタノールの代りにアセトニトリルを用いて
同様に処理してマロン酸塩２．０３　ｇを得る。

ここに得た結晶のジアステレオ異性体Ａ、Ｂの比は８９
．１　：　１０．９である。これを２５倍容のメタノー
ルより再結晶するとジアステレオ異性体Ａ、Ｈの比が９
９．５　：　０．５のマロン酸塩１．５７　ｇを得る。

さらに２５倍容のメタノールから再結晶して高速液体ク
ロマトグラフ法でジアステレオ異性体Ｂを検！菰なし・
ＹＣ−２１４マロン酸塩１．２７　ｇを得た。このマロ
ン酸塩１．２７　ｇを５ｍＡのクロロホルムにけんだく
し飽和炭酸ナトリウム水溶液各２．５ｍＺで２回、水２
．５ｍＺ、１０％塩酸各２．５Ｊｎｔで２回順次洗浄し
たクロロホルム溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し濾
過し減圧下に実施例５゜ ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａのマロン酸塩５９
５ｒｌ１ｇを５ｍＡのクロロホルムにけんだ＜シ、飽和
炭酸水素ナトリウム液各２．５ｍＡで２回、水苔５ｍ４
で２回処理して得たクロロホルム溶液を無水硫酸マグネ
シウムで乾燥し、濾過し減圧乾固してＹＣ−２１４のジ
アステレオ異性体Ａの遊離塩基４９１ｒｌ１ｇをカラメ
ル状に得た。これとシュウ酸２水和物１２６トン ■とを３ｍＡのアセ≠ヰに溶解し４°Ｃに放置して析出
する結晶を戸数してＹＣ−２１４のジアステレオ異性体
Ａのシーウ酸塩４００ｍｇを得た。

実施例６゜ 実施例５のシュウ酸の代りに２−ケトグルタル酸１４６
１Ｔ１ｇを用いてＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａ
の２−ケトグルタル酸塩を２５Ｏｎ１ｇ得た。

実施例７ 実施例５のシュウ酸の代りにパラニトロ安息香酸１６７
１１１ｇを用いて、　ＹＣ−２１４ジアステレオ異性体
Ａのパラニトロ安息香酸塩５３０１１１ｇを得た。

実施例８ 実施例５のシーウ酸の代りにマレイン酸１１６ｒＤｇを
用℃・て、ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａのマレ
イン酸塩を３００１１１ｇ得た。

実施例９゜ ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａ４９１ｒＱｇをア
セトン２ｍ乙に溶解しリン酸の１モル　メタノール溶液
１ｍｌを加え４℃に放置して析出する結晶を戸数してＹ
Ｃ−２１４のジアステレオ異性体Ａのリン酸塩を４８０
ｆＱｇ得た。

処方例１．（錠剤） １錠　５０００錠 ＹＣ−２１４塩酸塩１０．０ＩＩｔｇ　、５０　ｇ乳　
糖　１０１．０■　５０２　ｇ トウモロコシデンプン　２５．３■　１２６．５　ｇヒ
ドロキシグロビルセルロース　３．０■　１５　ｇステ
アリン酸マグネシウム　０．７１Ｑｇ　３．５ｇＹＣ−
２１４塩酸塩５０ｇ、乳糖５０２ｇ、）ウモロコシデン
プン１２６．５　ｇを均一に混合し、　１０％ヒドロキ
シプロピルセルロース水溶液１５０ｇを加えて練合し、
顆粒を製する。乾燥後ステアリン酸マグネシウム３．５
ｇを加えて均一に混合し、１錠１４０１ＴＩｇの錠剤と
する。

処方例２（カプセル剤） １カプセル　１０００カプセル ＹＣ−２１４塩酸塩　１０．０１ｒｔｇ　１０　ｇ結晶
乳糖　１８９．０１１ｔｇ　１８９　ｇステアリン酸マ
グネシウム　１．０１Ｔ１ｇ１ｇ２００　＋１ｔｇ　２
００　ｇ 上記成分を均一に混合し、　２００１１１＠をゼラチン
カプセルに充填し、カプセル剤とする。

処方例３．（注射剤） ＹＣ−２１４塩酸塩　１ｒＱｇ Ｄ−ツルピトー＃　１００ｍｇ 上記成分を注射用蒸留水にとがし、塩酸を加えてｐＨ４
に調整したのち、注射用蒸留水を加えて全量を特徴とす
る 特許出願人 山之内製薬株式会社 代理人 弁理士長井省三 手続補正書（自発） 昭和６０年３月１４日 特許庁長官　志　賀　学　殿　通１ １　事件の表示 昭和５９年特許願第７５９９８号 ２　発明の名称 ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡまたはその酸付
加塩。

該化合物の製造方法および該化合物からなる医薬３　補
正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　東京都中央区日本橋本町２丁目５番地１名称　（
６６７）　山之内製薬株式会社代表者　森　岡　茂　夫 ４　代　理　人 住所　東京都板橋区小豆沢１丁目１番８号明細書の１発
明の名称」、「特許請求の範囲」及び「発明の詳細な説
明」の欄 、−一□”′”、 訂正明細書 １、発明の名称 ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡまたはその酸付
加塩、該化合物の製造方法および該化合物からなる医薬 ２、特許請求の範囲 一ジメチル−４−（３−ニド−フェニル）　−１，４−
ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−（１−
ベンジルピロリジン−３−イル）エステル−５−メチル
エステル（以下ＹＭ−０９７３０とい５）のジアステレ
オマーＡまたはその薬理学的に許容される酸付加塩。

（２）酸付加塩がマロン酸塩、シュウ酸塩、パラニトロ
安息香酸塩、２−ケトグルタル酸塩、マレイン酸塩。

ｄＡ−’）ンゴ酸塩、リン酸塩、塩酸塩、硫酸塩または
パラトルエンスルホン酸塩であることを特徴とする特許
請求の範囲第（１）項記載の化合部。

（３１ＹＭ　−０９７３０のジアスデンオー？−Ａ塩酸
塩であることを特徴とする特許請求の範囲第（１１項記
載の化合物。

＋４１　２，６−シメチルー４−（３−ニトロフェニル
）−一（１−ベンジルビルリジン−３−イル）エステル
を、シリカゲルを担体とし、酢酸エチルおよび酢酸の混
液を溶離液とするカラムクロマトグラフィーに付し、溶
出液からＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡの酢酸
塩を分離し２次いで塩基で処理するか、あるいはさらに
薬理学的に許容される酸で処理することの薬理学的に許
容される酸付加塩の製造方法。

ｄｔ−リンゴ酸塩を分別再結晶してＹＭ−０９７３０の
ジアステレオマーＡの対応する塩を得１次いで所望によ
り塩基で処理するか、あるいはさらに薬理学的に許容さ
れる酸で処理することを特徴とするＹＭ−０９７３０の
ジアステレオマーＡまたはその薬理学的に許容される酸
付加塩の製造方法。

（６）酸付加塩がマｐン酸塩、パラニドｐ安息香酸塩。

マレイン酸、　ｄｔ−リンゴ酸塩であることを特徴とす
る特許請求の範囲第（５）項記載の製造方法。

（７１ＹＭ−０９７３０のマロン酸塩を用いることを特
徴とする特許請求の範囲第（５）項記載の製造方法。

−ジメチル−４−（３−ニトロフェニル）　−１，４−
ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−（１−
ベンジルピロリジン−３−イル）盃ステルー５−メチル
エステルのジアステレオマーＡまたはその薬理学的に許
容される酸付加塩を有効成分とする血管拡張剤。

３、発明の詳細な説明 本発明は、ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡまた
はその薬理学的に許容される酸付加塩、該化合物の製造
方法および該化合物を有効成分とする医薬に関する。

ＹＭ−０９７３０は、化学名を　２，６−ジンチル−４
−（３−ニトロフェニル）−１，４−ジヒドロピリジン
−３，５−ジカルボン酸−３−（１−ベンジルピロリジ
ン−３−イル）エステル−５−メチルエステルと称せら
れ、つぎの化学構造式で示されるジヒドロピリジン−３
，５−ジカルボン酸エステル誘導体である。

ＹＭ−０９７３０は１本願の出願人会社の研究者等によ
って始めて合成された化合物で、血管拡張作用および血
圧降下作用を有し、その作用に持続ｉがあることが報告
されている（特許第１１３７５０６号、特公昭５７−３
０１１１号公報）。

ＹＭ−０９７３０は、不斉炭素原子を２個有しており、
これらの不斉炭素原子にもとづ（異性体が存在すること
が立体化学的見地より推定されるが、前記特許公報には
これらに関し何も記載がなく、未確認である。

本発明者等は、ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡ
とジアステレオマーＢとを始めて分離し、ジアステレオ
マーＡが、ジアステレオマーＢおよび両レアステレオマ
−の混合物に比べて格段にすぐれた特有の薬理効果を有
していることをつきとめ本発明を完成した。ここに、ジ
アステレオマーＡはＹＭ−０９７３０の内、塩酸塩の融
点が２００〜２０６℃の化合物である。

したがって１本発明の目的化合物は、上記塩酸塩の融点
によって特定されるＹＭ−０９７３０のレアステレオマ
−Ａまたはその薬理学的に許容される酸付加塩を対象と
するものである。ここに、薬理学的に許容される酸付加
塩としては、マロン酸塩、シュウ酸塩、バラニトロ安息
香酸塩、２−ケトグルタル酸塩、マレイン酸塩、ｄｔ−
’）ンゴ酸塩、リン酸塩、塩酸塩、硫酸塩またはパラト
ルエンスルホン酸塩である。

後記薬理実験の結果に示されるように１本発明のジアス
テレオマーＡまたはその薬理学的に許容される酸付加塩
は、冠動脈内直接投与による冠面流量増加率において、
ジアステレオマーＢの３〜１５倍、各ジアステレオマー
の等量混合物の６〜１４倍の面積比を示し、冠動脈への
高い親和性を有することを示す。

一方、ジアステレオマーＢは等量混合物とほぼ同等乃至
２倍の効力を示した。このことは、ＹＭ−０９７３０の
薬理作用は、各ジアステレオマーの物理的混合割合の単
なる平均値として現われるものではないことを意味して
いる。また冠動脈に高い親和性を有することは本発明者
によって見出された新しい薬理学的知見であって本願化
合物の医薬としての利用可能性を高めるものである。　
゛ つぎに９本発明のジアステレオマーＡまたはその薬理学
的に許容される酸付加塩の製造方法について説明する。

前述のように、＊公昭５７−３０１１１号公報にはＹＭ
−０９７３０の異性体に関する記載は全く見当らず。

また、その後の文献にも異性体を製造した報告をみなな
っていない以上２それらの性質の相異忙もとづいて各ジ
アステレオマーを製造することはできない。

本発明者等は、後述の参考例に記載の方法によってＹＭ
−０９７３０を合成し、そこに得られたＹＭ−０９７３
０がジアステレオマーＡと同ジアステレオマーＢの等景
況合物であることを知ることができた。そしてこれＫも
とづき、混合物から２７ステレオマーＡを取得する方法
を種々検討した結果、各ジアステレオマーの混合物をシ
リカゲルを担体とし、酢酸エチルおよび酢酸の混液を溶
離液とするカラムクロマトグラフィーに付するコトによ
り、最初の溶出液よりジアステレオ−＝ｒ　−Ａ　ヲ。

後の溶出液よりジアステレオマーＢを製造したもので。

これら両ジアステレオマーは本発明者等圧より始めて明
らかとされた新規化合物に属するものである。

この製造方法で担体として使用されるシリカゲルとして
は、カラムクロマトグラフィーに一般に使用されるもの
であれば特に制限はない。溶離液として使用する混合溶
媒における酢酸エチルと酢酸との混合割合′は酢酸エチ
ル３０〜５０　ｖ／ｖに対し、酢酸１〜１０　ｖ／ｖ程
呻であり、酢酸の配合量が低下すると目的化合物の溶出
時間が長くなる。溶出速度、処理温度は適宜の条件を採
用できる。

また、上記の製造方法と別の製造方法として１本発明者
等は各ジアステレオマーの混合物を特定の酸付加塩に導
き、これを分別再結晶することによりジアステレオマー
への酸付加塩を製造する。ことに成功した。

この製造方法に用いられる酸付加塩としては、たとえば
マロン酸塩、パラニトロ安息香酸塩、マレイン酸塩　ｄ
ｌ−！Ｉンゴ酸塩などである。これらの酸付加塩は結晶
性であり、且つ有機溶媒に対する溶解度がジアステレオ
マーＡとジアステレオマーＢとで相異しているので分別
再結晶によりジアステレオマーＡを製造−ｔ−る方法に
利用できる。殊に好適な酸付加塩はマロン酸塩である。

この塩は１回の再結晶により、ジアステレオマーＡの含
有量が極めて高い結晶を得ることができる。

この製造方法に使用できる溶媒としてはたとえばメタノ
ール、エタノール、アセトン、アセトニトリルナトを挙
げることができる。

以上の各製造方法で得られたＹＭ−０９７３０のジアス
テレオマーＡの酸付加塩はいったん遊離形に導いた後。

これに他の酸を作用させることＫより所望の酸付加塩に
塩交換することが可能である。

つぎに、ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡの薬理
効果、急性毒性、医薬としての投与量を説明する。

（１１冠面流量増加作用 測定方法： ベントバルビタール　ナトリウム３０１Ｑｇ／ｋｇ　ｉ
、ｖ、で麻酔し、開胸した犬において、左頚動脈より導
いた血液をポンプ（Ｈａｒｖａｒｄ　Ａｐｐａｒａｔｕ
ａ、　１２１５　Ｄ　）により。

左冠動脈廻旋枝に定圧潅流し、冠血流量は電磁流量計（
ＭＦ−２５，日本光電）で測定した。潅流圧は、血流ポ
ンプ制御装置（８Ｃ６−２１，データーグラフ）で。

常に１２０　ｍｍ　Ｈｇとなるようにポンプを駆動した
（塚田徳昌他二日本薬理学会誌７４５９Ｐ、　１９７８
　）。被検薬の冠動脈に対する直接作用を見る目的で、
薬物は、冠動脈内へ直接投与した。薬物評価は、被検薬
投与後１２０分間に増加した冠面流量増加率 （−竪４り坤興員二β矢Ｉ酸櫻１ｊＬｘ　ｔｏｏ　）　
ノ面積テ行った。

投与前冠血流量 測定結果；　表１ 被検薬１μｇを冠動脈内直接投与すると、ジアステレオ
マーＡ塩酸塩は、各ジアステレオマーの等量混合物に比
べ１４倍高い冠面流量増加率面積を示した。

本実験は２被検薬を直接冠動脈内に投与しているので、
ノアステレオマ−Ａ塩酸塩はジアステレオマーＢ塩酸塩
および各ジアステレオマーの等量混合物に比べ、冠動脈
血管床に高い親和性を有することを示している。このよ
うな冠動脈への高い親和性を有することは、狭心症等の
冠動脈疾患に高い有用性を有することを意味する。

（２）麻酔ラットにおける降圧作用 測定方法： ウレタンで麻酔したラットで血圧を測定した。薬物は、
２０分間隔で累積的に静脈内投与した。

表２から明らかなように血圧を３０ｍｍＨｇ下降する用
量（ＥＤ　３０ｍｍＨｇ　）で比較すると、ジアステレ
オマーＡ塩酸塩はジアステレオマーＢ塩酸塩より約７０
倍降圧作用が強力である。

（３）急性毒性 ６週齢１体重２７〜２９ｇの雄性ＩＣＲマウスを用い。

：、＞７ステレオマーＡ塩酸塩を０５％メチルセルロー
ス懸濁液として経口投与し、７日間観察した。ジアステ
レオマーＡ塩酸塩の急性毒性値（ＬＤｓｏ　）　Ｌｉｔ
ｃｈ−ｆｉｅｌｄ　＆　Ｗｉｌｃｏｘｏｎ法（ジャーナ
ルオプファルマコロジー（Ｊ、　ｐｈａｒｍａｃｏ＋、
　）　９６巻９９〜１１３頁　１９４９年）でもとめ、
その値は２９５　（２４２−３６０）ｑ／ｋｇ　ｐ、ｏ
、であった。

（４）投与量 体重、症状により異なるが１通常静注では０．１〜２■
、経口投与では１日５〜２０ｍｇを１日１回又は２回に
分けて行う。

つぎに実施例、処方例を挙げて本発明の目的化合物。

その製造方法および医薬について更に説明する。なお。

各実施例で原料として使用するＹＭ−０９７３０の製造
例を参考例として説明する。また、各実施例で得られた
目的化合物の物性値を表３に示す。

参考例 ３−二ト１〈ンツアルデヒド１．５１ｇ　（０，０１モ
ル）と１−ベンジル−３−７セトアセチルオキシビロリ
ジン２．６１ｇ（０，０１モル）およヒ３−７　ミノク
ロトン酸メチルエステルｚ１ｓｇ　（ｏ、ｏ１モル）を
イソプルパノール５ｍＺ中に溶解し８時間加熱還流する
。溶媒を減圧下に溜去し得られた残留物をクロロホルム
に溶解し希塩酸、水、炭醗水素ナトリウム飽和水溶液で
順次洗浄し無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を減圧下
に溜去して粗製の２，６−シメチルー４−（ａ−ニトロ
フェニル）−１，４−）ヒドロピリジン−３，５−ンカ
ルボン酸−ａ−（１−ベンジルピロリジン−３−イル）
エステル−５−メチルエステルをカラメル状に４９１ｇ
得た。

ここに得た粗製塩基を以下に示す条件で高速液体クロマ
トグラフィー（以下ＨＰＬＣという）によりジアステレ
オマーの生成比を分析したところ、ジアステレオマーＡ
（保持時間２８分）：ジアステレオマーＢ（保持時間２
９分）の比は１：１であった。

カラム：ヌクレオシル■５　Ｃ１Ｂ、　４．６ｍｍ　’
；ｌ　Ｘ　３００ｍｍ、カラＡｉ度：　３０℃、　移動
相：テトラ−ｎ−ペンチルアンモニウムブロマイド（３
ｍＭ）含有０．０５モルリン酸２水素カリウＡ（ｐＨ３
）−アセトニトリル（ｓｏ　：　２０　ｖ／ｖ　）。

流速：毎分０．９ｍｔ、紫外線検出器（２２５４０ｍ）
。

なお、ジアステレオマーＡおよびＢは、ＹＭ−０９７３
０のＮ−ベンジル基におけるメチレンの核磁気共鳴スペ
クトルのシグナルに相異点が認められる。重メタノール
ｄ４中での測定により、ジアステレオマーＡは、　４．
４０ｐｐｍに。

また、ジアステレオマーＢは４．３０　ｐｐｍ　Ｋそれ
ぞれ水素原子２個に相当するシングレットのシグナルを
示す。

実施例１ 銀 参考例で得たＹＭ−０９７３０の粗製遊離塩基４．９１
ｇをクロロホルム２５℃乙に溶解し１０％塩酸１５ｍＺ
を加えよく振り孟ぜた後有機層を分液する。有機層をも
う一度１０ｍＺの１０％塩酸で同様に処理し、無水硫酸
マグネシウムで乾燥後渡トン 圧下に溶媒を情夫して得た残留物を７セ≠→１０．４ｍ
ｌに溶解し放置し’ＣＹＭ−０９７３０塩酸塩を結晶と
して得た（収量３．５ｇこれをメタノール１．８ｍｔに
溶解しアセトン８ｍＺを加え再結晶を行う。この繰作を
もう一度くりかえしＹＭ−０９７３０塩酸塩２．ａｓｇ
を得た。ここに得た塩酸塩のジアステレオマーＡ：Ｂの
比はＨＰＬＣによると６５．６　：　３４．４であった
。この塩２．１５ｇをりｐＩ：＋ホルム２５ｍ７に溶解
し飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１５ｍＺで２度洗浄し
、有機層を無水マグネシウムで乾燥し溶媒を減圧下に情
夫して得た遊離塩基２ｇをシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーに付しくカラム：リクロブレップ　５ｉ６０．
　Ｃサイズ、溶出液：酢酸エチル−酢酸＝３０＝５Ｖ／
、）ジアステレオマーＡの酢酸塩を油状に得る。これを
クロロホルム１０ｍ７にとかし飽和炭酸水素ナトリウム
水溶液１０ｍ４．水１０ｍｔ、１０％塩酸１０ｎ＋ｔで
順次洗浄し無水硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を減圧下
に情夫する。得られた残留物を０．８ｍＺのアセトンで
処理して目的のジアステレオマーＡの塩酸塩を得る。収
量０．４ｇ０実施例２ 参考例で得たＹＭ−０９７３０の粗製遊離塩基４．９１
　ｇとマロン酸１．０４ｇを７セトニトリル１５ｍ１に
溶解し０〜５°に一夜放置する。析出する結晶を沢取し
少量の冷７セト二トリルで洗浄してＹＭ−０９７３０の
マロン酸塩２．０３ｇを得た。（ジアステレオマーＡ：
Ｂの比＝　８９．１　：　１０．９　）　。コれを２５
倍容のメタノールで２回再結晶しＹＭ−０９７３０のジ
アステレオマーＡ　１００％のマロン酸塩１）１．０６
ｇを得た。

実施例３ 参考例で得たＹＭ−０９７３０の粗製遊離塩基４．９１
　ｇとマロン酸１．０４ｇをメタノール１５ｍ４に加熱
溶解しＯ〜５°に一夜る。これをメタノールから２回再
結晶してジアステレオマーＢを含まないジアステレオマ
ーＡマロン酸塩を得た。

実施例４ 実施例３のメタノールの代りにア七ト二トリルを用いて
同様に処理してマロン酸塩２．０３　ｇを得る。ここに
得た結晶のジアステレオマーＡ二Ｂの比は８９．１　：
　１０．９である。これを２５倍容のメタノールより再
結晶するとジアステレオマーＡ：Ｂの比が９９．５　：
　０．５のマロン酸塩１．５７ｇを得る。

さらに２５倍容のメタノールから再結晶して高速液体ク
ロマトグラフ法でジアステレオマーＢを検出出来ないＹ
Ｍ−０９７３０マｐノ酸塩１２７ｇを得た。このマロン
酸塩１．２７ｇを５ｍ４のクロロホルムにけんだくし飽
和炭酸ナトリウム水溶液各２．５ｍｌで２回、水２．５
ｍｌ、１０％塩酸各２．５ｍＺで２回順次洗浄したクロ
ロホルム溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し濾過し減
圧下に蒸発乾固した残留物をアセトン２ＩＩｌ乙に溶解
し放置して析出するＹＭ−０９７３０塩酸塩のジアステ
レオマーＡを１．０９ｇ得た。

実施例５ ＹＭ−０９７３０のジアステレオ−ｑ　−Ａのマｐ　７
酸塩５９５　ｍｇを５ｍｌのクロロホルムにけんだ＜シ
、飽和炭酸水素ナトリウム液各２．５　ｍｌで２回、水
苔５１１１ｔで２回処理して得たりｐａホルム溶液を無
水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し減圧乾固してＹＭ
−０９７３０のジアステレオマーＡの遊離塩基４９１１
１１ｇをカラメル状に得た。これとシュウ酸２水和物１
２６１１１ｇとを３ｍ７の７七トンに溶解し４℃に放置
して析出する結晶なｒ取してＹＭ−０９７３０のジアス
テレオマーＡのシュウ酸塩４００１１１ｇを得た。

実施例６ 実施例５のシーウ酸２水和物の代りに２−ケトグルタル
酸１４６ｍｇを用いてＹＭ−０９７３０のジアステレオ
マーＡの２−ケトグルタル酸塩を２５０１１１ｇ得た。

実施例７ 実施例５のシーウ酸２水和物の代りにパラニド−安息香
酸１６７ｍｇを用いて、　ＹＭ−０９７３０のジアステ
レオ−ｖ　−Ａのバラニトロ安息香酸塩５３０ｒｌ１ｇ
を得た。

実施例８ 実施例５のシーウ酸２水和物の代りにマレイン酸１１６
■を用いて、　ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡ
のマレイン酸塩を３００■得た。

実施例９ ＹＭ−０９７３０のジアステレオ−ｑ−Ａ４９１ｍｇを
ア七ドア２ｍ／に溶解しリン酸の１モルメタノール溶液
１ｍＺを加え４℃に放置して析出する結晶をｒ取してＹ
Ｍ−０９７３０のノアステレオマ−Ａのリン酸塩を４８
０　ｆｆ１ｇ得た。

処方例１（ｔＪｒツノ １錠　５０００錠 ＹＭ−０９７３０塩酸塩　１０．Ｏｆｌｌｇ　５０　ｇ
乳　糖　１０１．０１Ｑｇ　５０２　ｇトウモロコシデ
ンブ７　２５．３ｍｇ　１２６．５　ｇ上２ドロキシプ
ロピルセルロース　３．ＯｔＱｇ　１５　ｇステアリン
酸マグネシウム　７．Ｏ［Ｑｇ　３．５ｇＹＭ−０９７
３０塩酸塩５０ｇ、乳糖５０２ｇ、　）ウモロコシデン
ブン１２６．５ｇを均一に混合し、１０％０％ヒドロキ
シプルピルセルロース液１５０ｇを加えて練合し、顆粒
を製する。

乾燥後ステアリン酸マグネシウム３．５ｇを加えて均一
に混合し、１錠１４０■の錠剤とする。

処方例２（カプセル剤） １カプセル　１０００カプセル ＹＭ−０９７３０塩酸塩　１０．０ｍｇ　１０　ｇ結晶
乳糖　１８９．ＯｔＱｇ　１Ｂ９　ｇステアリン酸マグ
ネシウム　１．０■　１ｇ上記成分を均一に混合し、２
００１１１ｇをゼラチンカプセルに充填し、カプセル剤
とする。

処方例３（注射剤） ＹＭ−０９７３０塩酸塩　１［ｌｌｇ Ｄ−ンルビトール　１００■ 上記成分を注射用蒸留水にとかし、塩酸を加えてｐＨ４
に調整したのち、注射用蒸留水を加えて全量を２ｍｌと
する。

手続補正書（自発） ２３発明の名称 ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡまたはその酸付
加塩、該化合物の製造方法および該化合物力・らなる医
薬 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　東京都中央区日本橋本町２丁目５番地１名　称
　（６６７）　山之内製薬株式会社代表者　森岡茂夫 ４、代理人 住　所　東京都板橋区小豆沢１丁目１番８号（１）特許
請求の範囲を別紙のとおり訂正する。

（２）明細書（昭和６０年３月１４日付の手続補正書で
提出した訂正明細書）第６頁１２行および第９頁７行の
［ｄｌ−ＩＪンゴ酸塩」を削除する。

（３）　同上明細書第１３頁７・〜８行の［炭酸水素ナ
トリウム飽和水溶液」を［飽和炭酸水素ナトリウム水溶
液」に訂正する。

（４）同上明細書第１５頁１３〜１４行の「無水マグネ
シウム」を「無水硫酸マグネシウム」に訂正する。

（５）　同上明細書第１９頁６行の末尾に続けて２行を
改めて、つぎの実施例１０を挿入する。

［実施例１０ ジアステレオマーＢを含まないＹＭ−０９７３０のジア
ステレオマーＡのマロン酸塩１．５ｇを５　ｒｎｌのク
ロロホルムにげんだクシ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶
戒告３　ｍｌで２回。

水３ｍＺで２回順次洗浄する。クロロホルム溶液を無水
硫酸マグネシウムで乾燥後溶媒を減圧下に留去する。得
られた残留物にエタノール６　ｍｌを加え一夜５℃で静
置するとＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡの遊離
塩基を結晶状で得た。収量０．８６ｇ。

融点１４５〜１４８°Ｃ 元素分析値（Ｃ２７〜Ｎ３０．として）Ｃ（％）　Ｉ（
（％）　Ｎ（％） 理論値　６５．９８　５．９５　８．５５実験値　６６
．０４　６．００　８．５３ＮＭＲ（ＣＤＣＩ、中、Ｔ
ＭＳ内部標準、δｐｐｍ　）１．４０〜２．９６　（６
Ｈｇ　ｍ、　ｃ２’、　４’ｌ　１！”ｔ）２．３４．
２．３６（６Ｈ，ｓ、　Ｃ２，６−ＣＲ２）３．６５　
（５Ｈ，ｓ、　−ＣＯＯＣ隻及び−ＣＲ２０）５．１０
　（ＩＴ（、ｓ、　Ｃ４−）（）５．７８　（１）（、
ｂｒｏａｄ　ｓ、　ＮＨ）（６）　同第１９頁１３行の
ｉ’−７，０＋１１ｇＪをｒ　Ｏ，７ＩＴ１ｇ、Ｊに訂
正する。

ＰＬ　％ 特許請求の範囲 （１）塩酸塩の融点（分解）が２００〜２０６°Ｃであ
る２、６−シメチルー４−（３−ニトロフェニル）−１
，４−シヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−
（１−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル−５−
メチルエステル（以下ＹＭ−０９７３０という）のジア
ステレオマーＡまたはその薬理学的に許容される酸付加
塩。

（２）酸付加塩がマロン酸塩、シュウ酸塩、バラニトロ
安息香酸塩、２−ケトグルタル酸塩、マレイン酸塩、リ
ン酸塩、塩酸塩、硫酸塩またはパラトルエンスルホン酸
塩であるこ、とを特徴とする特許請求の範囲第（１）項
記載の化合物。

（３）ＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡ塩酸塩で
あることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の
化合物。

（４）　２．６−ジメチル〜４−（３−ニトロフェニル
）−１，４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸
−３−（１−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル
−５−メチルエステル（以下ＹＭ−０９７３０という）
を、シリカゲルな担体とし、酢酸エチルおよび酢酸の混
液を溶離液とするカラムクロマトグラフィーに付し、溶
出液からＹＭ−０９７３０のジアステレオマーＡの酢酸
塩を分離し２次いで塩基で処理するか、あるいはさらに
薬理学的に許容される酸で処理することを特徴とする塩
酸塩の融点（分解）が２００〜２０６℃であるＹＭ　−
０９’７３０のジアステレオマーＡまたはその薬理学的
に許容される酸付加塩の製造方法。

（５）　２，６−シメチルー４−（３−二トロフェニル
）−１，４−ジヒドロビリジイー３，５−ジカルボン酸
−３−（１−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル
−５−メチルエステル（以下ＹＭ−０９７３０という）
のマロン酸塩を分別再結晶してＹＭ−０９７３０のジア
ステレオマーＡの対応する塩を得２次いで所望により塩
基で処理するか、あるいはさら薬理学的に許容される酸
で処理することを特徴とするＹＭ−０９７３０のジアス
テレオマーＡまたはその薬理学的に許容される酸付加塩
の製造方法。

（６）塩酸塩の融点（分解）が２００〜２０６℃である
２、６−シメチルー４−（３−ニトロフェニル）−１，
４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−（
１−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル−５−メ
チルエステルのジアステレオマーＡまたはその薬理学的
に許容される酸付加塩を有効成分とする血管拡張剤

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）高速液体クロマトグラフィー［カラム：ヌクレオ
   シル■５　ＣＡＢ　４．６　ｒｒｒｎｙＪ　ｘ　３００
   　ｍｍ　、カラム温度：３０℃、移動相：０．０５モル
   リン酸２水素カリウム（ｐＨ３）−アセトニトリル（８
   〇二２０Ｖ／Ｖ）、流速：毎分０．９　ｍｌ　、紫外線
   検出器（λ２５４　ｎｍ）　］において保持時間２８分
   を示すことを特徴とする　２，６−シメチルー４−（３
   −ニトロフェニル）−１，４−ジヒドロピリジン−３，
   ５−ジカルボン酸−３−（１−ベンジルピロリジン−３
   −イル）エステル−５−メチルエステル（以下ＹＣ−２
   １４という）のジアステレオ異性体Ａまたはその薬理学
   的に許容される酸付加塩。 （２）酸付加塩がマロン酸塩、シュウ酸塩、バラニトロ
   安息香酸塩、２−ケトグルタル酸塩。 マレイン酸塩、　ｄｌ−リンゴ酸塩、リン酸塩。 塩酸塩、硫酸塩捷たはパラトルエンスルホン酸塩である
   ことを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の化合
   物。 （３１ＹＣ−２１４のシアスゲレオ異性体Ａ塩酸塩であ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の化
   合物。 （４）高速液体クロマトグラフィー［カラム：ヌクレオ
   シル■５　Ｃ１Ｂ　４．６　ｍｍ　ＯＸ　３００　ｍｍ
   　、カラム温度：３０℃、移動相：００５モルリン酸２
   水素カ　リ　ラム　（ｐＨ３）　７セトニトリル（８０
   ：　２０Ｖ／Ｖ）流速：毎分０．９　ｍｌ　、紫外線検
   出器（λ２５４ｎｍ）］において保持時間２８分を示す
   ２，６−シメチルー４−（３−ニトロフェニル）−１，
   ４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−（
   １−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル−５−メ
   チルエステル（以下ＹＣ−２１４という）のジアステレ
   オ異性体Ａと同上保持時間２９分を示すＹＣ−２１４の
   ジアステレオ異性体Ｂの混合物を、シリカゲルを担体と
   し、酢酸エチルおよび酢酸の混液を溶離液とするカラム
   クロマトグラフィーに付し、溶出液から異性体Ａの酢酸
   塩を分離し２次いで塩基で処理するか、あるいはさらに
   薬理学的に許容される酸で処理することを特徴とする　
   ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａまたはその薬理学
   的に許容される酸付加塩の製造方法。 （５）高速液体クロマトグラフィー［カラム：ヌクレオ
   シル■５　Ｃ１６４，６ｍｍ　ｐ　ｘ　３００　ｍｍ　
   、カラム温度＝３０℃、移動相：００５モルリン酸２水
   素カリウム（ｐＨ３）−アセトニトリル（８０：２０”
   ／Ｖ）、流速：毎分０．’９　ｍｌ　、紫外線検出器（
   λ２ｓ４ｎｍ）］において保持時間２８分を示す２，６
   −シメーｙ−ルー４−（３−ニトロフェニル）＝１．４
   −ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３−（１
   −−＜ンジルビロリジンー３−イル）エステル−５−メ
   チルエステル（以下ＹＣ−２１４という）のジアステレ
   オ異性体Ａと同上保持時間２９分を示す　Ｙ（，２１４
   のジアステレオ異性体Ｂとの混合物のマロン酸塩、　ｄ
   ｔＩＪンゴ酸塩を分別再結晶して異性体Ａの対応する塩
   を得２次いで所望により塩基で処理するか、あるいはさ
   らに薬理学的忙許容される酸で処理することを特徴とす
   るＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａ−ｉたはその薬
   理学的に許容される酸付加塩の製造方法。 （６）酸付加塩がマロン酸塩、バラニトロ安息香酸塩、
   マレイン酸、　ｄｌ−リンゴ酸塩であることを特徴とす
   る特許請求の範囲第（５）項記載の製造方法。 （７１ＹＣ−２１４のジアステレオ異性体Ａと同異性体
   Ｂとの混合物のマロン酸塩を用いることを特徴とする特
   許請求の範囲第（５）項記載の製造方法。 （８）高速液体クロマトグラフィー［カラム：ヌクレオ
   シル■５　Ｃｏｇ　４．６　ｍｍ　ｌ　ｘ　３００　ｍ
   ｍ　、カラム温度＝３０℃、移動相：０．０５モルリン
   酸２水素カリウム（ｐＨ３）−アセトニトリル（８０：
   　２０ｖ／ｖ、流速：毎分０．９　ｍｌ　、紫外線検出
   器（λ２５４ｎｍ　）、　］において保持時間２８分を
   示す２，６−シメチルー４−（３−ニトロフェニル）−
   １゜４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸−３
   −（１−ベンジルピロリジン−３−イル）エステル−５
   −メチルエステルのジアステレオ異性体Ａまたはその薬
   理学的に許容される酸付加塩を有効成分とする血管拡張
   剤。