JPS60228418A - 特殊感染症の予防治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、特殊感染症の予防治療剤に関するものである
。

一般に、細菌による感染症の予防、治療には、各種の抗
生物質が使用され、良好な効果を挙げている。しかし感
染症の中には、抗生物質に比較的抵抗性がある細菌や耐
性菌由来のものも存在する。

このような感染症は、従来の抗生物質でけあｆシ治療効
果がなく、そのため宿主の抵抗力が低下している場合に
は、致命的な結果にもなりかねない。

そこで従来の抗生物質に抵抗性のある細菌や耐性菌由来
の感染症、すなわち特殊感染症に対し予防及び治療効果
のある薬剤の出現が待ち望まれてい本発明者は攬々探究
した結果、抗菌物質Ｃ−６６０５が特殊感染症に対し、
予防及び治療効果を有すること全見出し、本発明を完成
したものである。

すなわち本発明は抗菌物質Ｃ−３６０３ｔ−有効成分と
する特殊感染症の予防治療剤である。

次に本発明の詳細な説明する。

抗菌物質Ｃ−３６０３＃ｉ、先に特許を取得（特公昭５
６−２０７９）Ｌ、ている抗菌物質で、ダラム陽性菌、
特に口腔内のり蝕細菌に対して抗菌作用は を有しているものである。本発萌侶の抗菌物質Ｃ−５６
０５の新規用途、即ら、特殊感染症の予防治療剤に関す
るものである。

抗菌物質Ｃ−３６０３産生菌としては、たとえばス）Ｌ
／ブトコツカス属に属するＣ−３６０３菌が挙げられ、
このストレプトコッカスＣ−３６０３菌の細菌学的性状
は次の通りである。

■、形態的性状 ダラム陽性の球菌で大きさは０．８〜１．２μｍ−ｍ　
＆　ｈ　つＩＩＩＩ外１八Ｉ−←勅１１の敲禍Ｅ重鑓Ｓ
イ１八入胞子の形成、運動性、抗酸性、多形性は認めら
れない。

■、各種培地での生育状態 １、　ミテイス・サリパリクス寒天培地（３７℃、２日
間嫌気培養）二発育中程度、円形、金縁、凸円状、 ２、トリプトノイ寒天培地（３７℃、２日間嫌気培養）
二発育良好、円形、金縁、扁平状、色素産生ぜず。

３、　プレイン、・λ−トインクユージョン寒天培地（
３７℃、２日間嫌気培養）二発育良好、円形、金縁、扁
平状、色素産生ぜず。

４、　ガム寒天培地（３７℃、２日間嫌気培養）二発育
良好、円形、金縁、凸円状、色素産生ぜず。

５、　シュクロース加トリプトノイ液体培地（３７℃、
２日間嫌気培養）　：　４５’　に傾斜させて培養した
ところ、試験管の底部および傾斜面下部に沿って多糖類
と思われる不溶性物質が多量付着していた。

■、生理的性質 １、溶血性：なし。

２、　カタラーゼ：陰性。

６、　オキシダーゼ：陰性。

４、４５℃における発育：発育せず。

５、６０℃、３０分間加熱後の生残：生残せず。

６、ｐＨ９，６における発育：発育せず。

７、ｃｏ、要求性：要求する。

８．４％ＮａＣ１ＫＪ？ける発育：発育せず。

９４０％胆汁に訃ける発育：発育ｔＸ。

１０、　１．／４０００亜テルル酸における発育：発育
せず。

１１、炭素源の利用性（第１表） 第１表 炭素源　融成 り−グルコース　＋ Ｌ−ＪＴラビノース　− グリセリン　− ラクトース　＋ マルトース　＋ マンニット　＋ ラフィノース　＋ サリシン　＋ Ｄ−ノルビット　＋ シュクロース　＋ トレハロース　＋ １２、ＶＰ試験：陽性。

１！１．　エスクリンの加水分解：陽性。

１４、ＩＪ）マスミルク：凝固、指示薬を還元。

１５、ゼラチンの液化：液化せず。

１６、フルギニンの加水分解：陰性。

１７、馬尿酸塩の加水分解：陰性。

１８、胆汁溶解性：陰性。

１９０Ｆ試験：発酵。

以上の性質ｆ　Ｃｏｗａｎ　ａｎｄ　８ｔｅｅｌ　’ｓ
　Ｍａｎｕａｌ　ｆｏｒｔｈｅ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｂａｃｔｅｒｉａ（
１９７４）ｉ用いて検索すると、重曹は明らかニストレ
フトコソカス楓ミュータンス種に含まれるものと認めら
れる。したがって、本歯株をストレフトコツカス・ミュ
ータンスＣ−５６０５（８ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　
ｍｕｔａｎｓ　Ｃ−３０６３）と命名した。なお、重曹
は工業技術院微生物工業技術研究所にＦ’ＦＲＭ−Ｐ４
４１２８として寄託されている。

次にＣ−３６０５菌の培養方法および培養物中からの抗
繭物質Ｃ−３６０５の分離方法を説明する。

培地としては炭素源、窒素源、無機物、ビタミン、アミ
ノ酸等を含む、微生物の培養に通常用いられる培地が広
く使用され得る。炭素源としては同化可能な炭素化合物
であればよく、例えばグルコース、カラクトース、マル
トース、シュクロース、ラクトース、糖蜜などが使用さ
れる。窒素源としては利用可能な窒素化合物であればよ
く、例エババブトン、肉エキス、カゼイン酸加水分解物
などが使用される。その他リン酸塩、マグネシウム、ナ
トリウム、カリウム、カルシウム、鉄、マンが／などの
塩類、ビタミン、アミノ酸、消泡剤、界面活性剤が必要
に応じて使用される。培地は液体培地が好ましく、培養
は好気条件下、嫌気条件下のいずれでも用いられるが、
好ましくは好気条件下での静置培養が週番である。培地
の初発ｐＨは−５〜９、好ましくはｐＨ７，０〜８．０
であり、培養温度Ｆｉ２０〜４２℃、好ましく＃−ｔ３
５〜４０℃であり、培養時間は１４〜７２時間が適当で
ある。

このようにして得られた培養物中、抗菌物質Ｃ−３６０
５は主として培養Ｆ液中に存在する。菌体全域り除いた
培養上溝液から抗菌物質Ｃ−３６０＋を採取するには蛋
白質や抗生物質を分離するなめに通常用いられる分離精
製の方法が適宜利用され、例えば以下その一例について
説明する。

培養物から遠心分離法により菌体を除き、培養上清液を
得る。得られた培養上清液に硫酸ｒンモニウムを添加し
て低温下に放置する。生成した沈殿を遠心分離法忙よっ
て集め、これを少量のリン酸緩衝液に溶解させ、遠心分
離法で上清液を得る。

このようＫして得られた上清液を、上記緩衝液で平衡化
したＣＭ−セファデックスのカラムに通じて抗菌物質を
吸着せしめ、次いでアルカリ性の緩衝液を通じて抗菌物
質を溶出させる。得られた溶液をゲル濾過によって脱塩
し、脱塩したものを凍結乾燥すれば本抗菌物質は白色粉
末として得られる。

本発明の抗菌物質Ｃ−５６０３の物理化学的性質は次の
通りである。

１、　元素分析 Ｃ：５０．０１％、Ｈ：６．１９％、Ｎ：１２．８４係
、Ｓ：０．９＜５％、Ｏ（ｂａｌａｎｃｅ　）　：　３
０．００チ Ｃ：４９．８０％、Ｈ：６．５０チ、Ｎ：１１．４１チ
、Ｓ　：　１．１８Ｌ　Ｏ（ｂａｌａｎｃｅ　）　：　
５１．３１チ ２、分子量 ６０００〜Ｉ　０Ｏ（ＪＯ（５ＤＳ−ポリアクリルアミ
ドケ゛ル電気泳動法よシ算出） ６　分解点 １９０〜１９５℃ ４　比旋光度 高分子のため酢酸水溶液でも十分なる濃度が得られず、
測定不能。

５、紫外線吸収スはクトル 水溶液中で測定したスペクトルは第１図に示１チ。

２８９ｎｍ（Ｂ　、３３）に吸収極大を有すｃＩＬ る。

６、赤外線吸収スペクトル ＫＢｒ錠剤法で測定したスはクトルは第２図に示す通シ
であり、５２９０，１６５０．１５６５．１２４０．１
１０５．７５５ｃｍ−鳳の各波数に吸収帯を有する。

Ｚ　溶剤に対する溶解性 酸性水（ｒｉ４３．０）にわずかに溶解、水に＃爵。

メタノール、エタノール５アセト／、エーテル、酢酸エ
チル、クロロホルム、ｎ−ヘキサノ、ベンゼンに不溶。

８、呈色反応 ニンヒドリン反応、ビューレット反応、キサントプロテ
ィン反応、アダムキーウイッツ反応に陽性っ ９　塩基性、酸性、中性の区別 塩基性、、ｌｐＩ　＝１０．０±０．２（ポリアクリル
アミドゲル等電点分離法より算出） 和、物質の色・形状 白色粉末。

１１、アミノ酸分析 ｐ−）ルエンスルホン酸による加水分解物のアミノ酸分
析の一例を示す（第２表）。数値はアミノ酸の総モル濃
度に対する各アミノ酸のモル百分率を示す。なお、分析
法はＴ−Ｙ、Ｌｉｕａｎｄ　Ｙ、Ｈ，Ｃｈ、ａｎｇ、Ｊ
、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、　２４６．２８４２．１９７
１）の方法によったっ第　２　表 Ａｍ１ｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｍｏｌｅ％ Ａｓｐ、　４．５ Ｔｈｒ、　２．２ Ｓｅｔ、　４．１ Ｇｌｕ、　４・６ Ｐｒｏ、　Ｏ ｏ＋ｙ、　１１．５ Ａｌａ、　１２．１ Ｃｙｓ、　０ Ｖａ１．　７．０ Ｍｅｔ、　２．４ １１ｅｕ、　７．０ Ｌｅｕ、　９．５ Ｔｙｒ、　３．９ Ｐｈｅ、　６・１ Ｔｒｐ、　４．５ Ｌｙｓ、７．７ Ｈｉｓ、　Ｏ Ａｍｍｏｎ　ｉ　ａ　９．６ Ａｒ　ｇ、　３．６ ｔｏｔａｌ　１　０　０．０ １２、脂肪酸分析 酸加水分解物（６ＮＨＣＡ、１２０℃、２０ｈｒ）ヲク
ロロホルムーメタノール抽出し、ガスクロマトグラフィ
ーで分析したところ、Ｃｌ０−ｃ、♂の脂肪酸は検出さ
れなかった。

以上の物理化学的性質から、本抗菌物質Ｃ−６６０３は
はプチド系抗菌物質であると推定される。

次に抗菌物質Ｃ−３６０３の製造例を挙げる。

製造例 グルコース１．０％、ベグトン２．０チ、ＮａＣ１０，
５％、Ｋ２ＨＰ０．０．３チ、ＫＨ，ＰＯ４０，２チ、
Ｍｇ５Ｏ，−７Ｍ、００．０１％、ＭｎＳＯ４０，００
２％を含む液体培地（ｐＨ７，７）１００ｒｎＩ！にス
トレプトコッカス・ミュータンスＣ−５６０５、■喝゛
Ｅ几Ｍ−Ｐ４４１２８を接種し、３７℃で１日間好気条
件下で静置培養を行なった。この培養液を１０１の同じ
組成の培地に植菌し、６７℃で２０時間好′Ａ乗件ドで
静置培養した。こうして得た培養液を２００００　Ｇで
連続遠心分離を行なって培養上清液を得た。次に、この
培養土精液に硫酸アンモニウム３．８　ｋ、９を添加し
、約５℃に保持して１夜放置した。生成した沈澱を２０
０００Ｇで連続遠心分離を行なって渠めた。得られた沈
澱を少量のリン酸緩衝液（１０−２モル、ｐｉ−１７，
０）に溶解させた後、１２０００Ｇで１０分間遠心分離
を行なって沈澱を除いた。このようにして得られた上清
液を、あらかじめ同じ緩衝液で平衡化させておいたＣＭ
−セファデックスＣ−２５のカラム（５，０Ｘ５０儂）
に通じて抗菌活性区分を吸着させ、さらに同じ緩衝液を
通じて十分に洗浄した。

次いでリン酸緩衝液（５Ｘ１０−２モル、ｐＨ７，０）
に水酸化ナトリウムを加えて…９５に調整した液を通じ
て洗浄した後、同様に水酸化ナトリウムを加えて調整し
たｐｉ−１１０，８の緩衝液を通じて抗菌物質を溶出し
た。この溶出液をセファデックスＧ−２５のカラム（５
，５ｘ　８　Ｑｃｍ）に通じて脱塩し、得られた抗菌物
質溶液を凍結乾燥して白色の精製抗菌物質Ｃ−３６０５
約８０ダを得た。

本発明でいう特殊感染症とは１通常の抗生物質に抵抗性
のある細菌由来の感染症で、例えば他剤耐性菌及び緑膿
菌由来の感染症である。他剤耐性菌とは元来抗生物質に
対し抵抗性を有していなかった細菌であったものが、ア
ンピシリン等のペニシリン系抗生物質、セファレキシン
等のセファロスポリン系抗生物質、エリスロマイシン等
のマクロライド系抗生物質、リンコマイシン等のリンコ
マイシン系抗生物質、ドキシテトラサイクリン等のテト
ラサイクリン系抗生物質、カナマイシン等のアミノグリ
コシド系抗生物質等の中から選ばれる少なくとも一以上
の抗生物質に耐性を獲得した細菌をいう。また緑膿菌は
、シュードモナス・アエルギノザ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　）のことで、通常の抗生
物質に比較的抵抗性を有する細菌である。

抗菌物質Ｃ−３６０３の他剤耐性菌及び緑膿菌に対する
抗菌スペクトルは寒天培地希釈法で測定し、それぞれ第
６表、第４表に示した。

上記に示すごとく、抗菌物質Ｃ−３６０３は他剤耐性菌
及び緑膿菌の生育を阻止する働きを有するため、ヒトを
含む哺乳動物や鳥類の他剤耐性菌又は緑膿菌による特殊
感染症の予防又は治療に使用し得る。なお他剤耐性菌に
よる特殊感染症としては、扁桃炎、化膿性皮膚炎、火傷
感染症、術後感染症等また緑膿菌による特殊感染症とし
ては、慢性気管支炎、慢性腎盃炎、慢性膀胱炎、角膜炎
等があシ、抗菌物質Ｃ−５６０３はこれらの感染症に対
し、予防、治療効果を有する。

抗菌物質Ｃ−５６０５の製剤形態としては、そのまま固
体として、また水溶液状態としても使用できる。また賦
形剤、安定化剤、保存剤、湿潤剤、界面活性剤等を適宜
選択して、例えば錠剤、カプセル剤、粉剤として経口投
与用とするか、あるいは注射剤、塗布剤、半開など非経
口投与用としても使用できる。なお抗菌物質Ｃ−３６０
３は通常医薬的に許容される塩の形でも使用できる。投
与量は、予防、治療目的、治療患者及び条件によって変
わるが、成人の治療に投与する場合は、一般に１日当シ
約５〜１０００１ｎ？である。

次に１本発明の実施例を示す。

実施例１ 顆粒剤２００Ｉｖ中の処方例 抗菌物質Ｃ−３６０３５０ダ 乳糖　３５ダ デキストリン　１１５ダ 上記の成分をその割合になるように量り、混合し、「日
周＋」製剤総則の顆粒剤の製法に準じて顆粒剤とした。

実施例２ 錠剤１錠中の処方例 抗菌物質Ｃ−３６０３５０〜 デキストリン　１４ＢＩｎ９ ステアリン酸マグネシウム　２ダ 上記の成分をその割合になるように量シ、混合し、１日
周＋」製剤総則の錠剤の製法に準じて錠剤とした。

【図面の簡単な説明】

第１図は抗菌物質ｃ−３４ｏ３の紫外線吸収スペクトル
、第２図は同赤外線吸収スばクトルを示すグラフである
。 代理人　弁理士　戸　１）親　男

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 抗菌物質Ｃ−３６０３を有効成分とする特殊感染症の予
   防治療剤。