JPS60200169A - 線維素溶解酵素前駆体測定用試薬 - Google Patents
線維素溶解酵素前駆体測定用試薬Info
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- JPS60200169A JPS60200169A JP5653984A JP5653984A JPS60200169A JP S60200169 A JPS60200169 A JP S60200169A JP 5653984 A JP5653984 A JP 5653984A JP 5653984 A JP5653984 A JP 5653984A JP S60200169 A JPS60200169 A JP S60200169A
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は被検液中の線維素溶解酵素前駆体（以下単にｓ
−Ｕ Ｋという）を迅速にかつ正確に定量することが可
能な測定用試薬に関する。
−Ｕ Ｋという）を迅速にかつ正確に定量することが可
能な測定用試薬に関する。
ｓ −Ｕ Ｋは人腎細胞の培養培地より回収しうる分子
量約５万の蛋白質である。又、還元剤処理によって低分
子化が起こらず、プラスミン処理により酵素活性を発現
するチモゲンの一種である。
量約５万の蛋白質である。又、還元剤処理によって低分
子化が起こらず、プラスミン処理により酵素活性を発現
するチモゲンの一種である。
線維素溶解酵素としては、ウロキナーゼが著名であり、
人尿および人腎細胞の培養液から、精製されている。最
も医薬品として有用なウロキナーゼは、分子量約５万で
、その分子構造に１、Ｈ鎖（分子量３万）、Ｌ鎖（分子
量２万）の２本の鎖がジスルフィド結合によって連結さ
れている。それ故、還元処理によって容易に低分子化さ
れる。
人尿および人腎細胞の培養液から、精製されている。最
も医薬品として有用なウロキナーゼは、分子量約５万で
、その分子構造に１、Ｈ鎖（分子量３万）、Ｌ鎖（分子
量２万）の２本の鎖がジスルフィド結合によって連結さ
れている。それ故、還元処理によって容易に低分子化さ
れる。
ｓ −Ｕ Ｋは、チモゲンの一種であり、従来の尿由来
ウロキナーゼのＨ鎖とＬ鎖が結合しており、１本鎖ウロ
キナーゼ（Ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｉｎ Ｕｒｏｋｉｎａ
ｓｅ ）・牲・ となっている。よって、還元処理によっても低分子化が
おこらず、プラスミン処理により１本鎖が切断され２本
鎖となり、酵素活性を発現する。
ウロキナーゼのＨ鎖とＬ鎖が結合しており、１本鎖ウロ
キナーゼ（Ｓｉｎｇｌｅ−ｃｈａｉｎ Ｕｒｏｋｉｎａ
ｓｅ ）・牲・ となっている。よって、還元処理によっても低分子化が
おこらず、プラスミン処理により１本鎖が切断され２本
鎖となり、酵素活性を発現する。
ｓ −Ｕ Ｋは、フィブリンへの親和性が高く、血中で
、構造的にも酵素的に安定である。よって、フィブリン
（血栓）部位にｓ −Ｕ Ｋはすみやかに到達し、血栓
中に含まれる微量のプラスミンにより、血栓」二で酵素
活性を発現する。それ故、８−ＵＫの血栓溶解能は尿由
来ウロキナーゼに比して優れており、尿由来ウロキナー
ゼ大量投与時に問題となる血中フィブリノーゲンなどの
減少にともなう出血傾向の増大を引き起こしにくい。こ
のため、５−ＵＫの医薬としての臨床効果に期待がかけ
られるところは広大なものである。
、構造的にも酵素的に安定である。よって、フィブリン
（血栓）部位にｓ −Ｕ Ｋはすみやかに到達し、血栓
中に含まれる微量のプラスミンにより、血栓」二で酵素
活性を発現する。それ故、８−ＵＫの血栓溶解能は尿由
来ウロキナーゼに比して優れており、尿由来ウロキナー
ゼ大量投与時に問題となる血中フィブリノーゲンなどの
減少にともなう出血傾向の増大を引き起こしにくい。こ
のため、５−ＵＫの医薬としての臨床効果に期待がかけ
られるところは広大なものである。
よってｓ −Ｕ Ｋを迅速にかつ正確に定量しうる試薬
は、極めて有用である。
は、極めて有用である。
本発明はかかる試薬を提供せんとするものであり、その
要旨は、特異抗ｇ−Ｕ Ｋ抗体を動物赤血球に感作して
得た抗ｅ−ＵＫ抗体感作赤血球を含むことを特徴とする
逆受身赤血球凝集反応用５−ＩＪ Ｋ測定用試薬である
。
要旨は、特異抗ｇ−Ｕ Ｋ抗体を動物赤血球に感作して
得た抗ｅ−ＵＫ抗体感作赤血球を含むことを特徴とする
逆受身赤血球凝集反応用５−ＩＪ Ｋ測定用試薬である
。
本発明に係る測定用試薬は、各試薬をキット化しておく
ことが便宜的であるので、以下キット化されたものを例
として本発明を説明する。
ことが便宜的であるので、以下キット化されたものを例
として本発明を説明する。
本発明をキット化した場合、次のごとき各試薬にて構成
される。即ち、何）特異抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体を動物赤血
球に感作して得た抗ｓ−Ｕ Ｋ抗体感作赤血球（以下、
感作赤血球という。）、（ロ）緩衝液、（ハ）標準ｓ
−Ｕ Ｋ陽性コントロール（以下、陽性コントロールと
いう。）及びに）標準ｓ−〇 Ｋ陰性コントロール（以
下、陰性コントロールという。なお、（Ｉ：Ｉ）の緩衝
液に代えることもできる。）の組み合わせにて当該キッ
トは構成される。
される。即ち、何）特異抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体を動物赤血
球に感作して得た抗ｓ−Ｕ Ｋ抗体感作赤血球（以下、
感作赤血球という。）、（ロ）緩衝液、（ハ）標準ｓ
−Ｕ Ｋ陽性コントロール（以下、陽性コントロールと
いう。）及びに）標準ｓ−〇 Ｋ陰性コントロール（以
下、陰性コントロールという。なお、（Ｉ：Ｉ）の緩衝
液に代えることもできる。）の組み合わせにて当該キッ
トは構成される。
本発明に関するｓ −Ｕ Ｋとしては、ｓ−Ｕ Ｋ産生
人腎細胞を、無血清培地で培養して得られたもの、遺伝
子工学技術により大腸菌、枯草菌、酵母等によって産生
されたものなど、その由来を問わず広く使用可能である
。
人腎細胞を、無血清培地で培養して得られたもの、遺伝
子工学技術により大腸菌、枯草菌、酵母等によって産生
されたものなど、その由来を問わず広く使用可能である
。
感作赤血球は、特異抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体を動物赤血球に
感作させだ感作赤血球からなる。
感作させだ感作赤血球からなる。
抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体は、モノクローナル法等により得ら
れたものが使用される。
れたものが使用される。
モノクローナル法の場合、細胞融合法により抗ｓ −Ｕ
Ｋ抗体を製造する。
Ｋ抗体を製造する。
細胞融合法は自体既知の手段にて行われ、その−例は増
殖性を持った細胞と、目的とする抗体を産生じているリ
ンパ球とをポリエチレングリコールの存在下で反応せし
めることにより、増殖性と抗体産生能とをかねそなえた
細胞を製するもので、この細胞の産生ずる抗体は一個の
抗原決定基に対してのみ反応する単一の抗体である。
殖性を持った細胞と、目的とする抗体を産生じているリ
ンパ球とをポリエチレングリコールの存在下で反応せし
めることにより、増殖性と抗体産生能とをかねそなえた
細胞を製するもので、この細胞の産生ずる抗体は一個の
抗原決定基に対してのみ反応する単一の抗体である。
増殖性を持った細胞として、例えばミエローマ細胞を、
抗体産生リンパ球として、例えば、胛などの網内系細胞
を用いる。これらよりｓ −Ｕ Ｋのモノクローナル抗
体が製造される。
抗体産生リンパ球として、例えば、胛などの網内系細胞
を用いる。これらよりｓ −Ｕ Ｋのモノクローナル抗
体が製造される。
本発明者等はモノクローナル抗体を産生ずる融合細胞の
取得を意図して長年研究を重ねてきた結果、ｓ −Ｕ
Ｋに対する抗体を産生ずる融合細胞株を見い出し、しか
も当該融合細胞株が産生ずるモノクローナル抗体は、尿
由来ウロキナーゼ、大腸菌、枯草菌、または動物血清と
は共通反応を示さず、ｓ−Ｕ Ｋに対して特異的に反応
することを見いだした。
取得を意図して長年研究を重ねてきた結果、ｓ −Ｕ
Ｋに対する抗体を産生ずる融合細胞株を見い出し、しか
も当該融合細胞株が産生ずるモノクローナル抗体は、尿
由来ウロキナーゼ、大腸菌、枯草菌、または動物血清と
は共通反応を示さず、ｓ−Ｕ Ｋに対して特異的に反応
することを見いだした。
抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体を感作させる赤血球は、特に動物を
選ぶ必要はないが、安定でしかも感度の高い試薬を作る
ためにはヒツジ、ニワトリ、又はヒトの０型赤血球など
が望ましい。赤血球は生理食塩水で充分洗浄した後、ゲ
ルタール・アルデヒド、−ホルマリン等の処理で安定化
させる１、このような赤血球は５〜１５μＩＩ＋程度の
ものが良い。精製抗体でこれらの赤血球を感作するのは
公知の方法（医学のあゆみ、二、７５９（１９７０））
で実施することが出来る。
選ぶ必要はないが、安定でしかも感度の高い試薬を作る
ためにはヒツジ、ニワトリ、又はヒトの０型赤血球など
が望ましい。赤血球は生理食塩水で充分洗浄した後、ゲ
ルタール・アルデヒド、−ホルマリン等の処理で安定化
させる１、このような赤血球は５〜１５μＩＩ＋程度の
ものが良い。精製抗体でこれらの赤血球を感作するのは
公知の方法（医学のあゆみ、二、７５９（１９７０））
で実施することが出来る。
それには、赤血球と抗体とを緩衝液中で感作させるのが
よく、一般には赤血球浮遊液と抗体含有液を混合するこ
とにより行う。
よく、一般には赤血球浮遊液と抗体含有液を混合するこ
とにより行う。
本操作は、ｐＨ４，５〜１０、温度０〜６０℃で行うの
がよい。感作赤血球は凍結乾燥して、例えばバイアル中
に、好ましくはナトリウムアジド等のごとき保存剤を添
加して、封入しておくことが好ましい。
がよい。感作赤血球は凍結乾燥して、例えばバイアル中
に、好ましくはナトリウムアジド等のごとき保存剤を添
加して、封入しておくことが好ましい。
本発明に関する陽性コントロールは、標準検量線を作成
するために用いられるものであり、通常はｓ −Ｕ Ｋ
含有の凍結乾燥品よりなるものでちる。
するために用いられるものであり、通常はｓ −Ｕ Ｋ
含有の凍結乾燥品よりなるものでちる。
陽性コントロールであるｓ −Ｕ Ｋは緩衝液に溶解し
て使用され、小分けして標準検量線の作成に使用される
。
て使用され、小分けして標準検量線の作成に使用される
。
陽性コントロールは、たとえばバイアル中に、好ましく
はナトリウムアジドなどの保存剤を添加して封入してお
く。
はナトリウムアジドなどの保存剤を添加して封入してお
く。
陰性コントロールは抗ｓ−Ｕ Ｋ抗体及びｓ −ＩＪＫ
が共に陰性の液体（たとえば、生理食塩水など）よりな
り、たとえばバイアル中に、好ましくはナトリウムアジ
ドなどの保存剤を添加しておくことが好捷しい。
が共に陰性の液体（たとえば、生理食塩水など）よりな
り、たとえばバイアル中に、好ましくはナトリウムアジ
ドなどの保存剤を添加しておくことが好捷しい。
緩矯液は、感作赤血球、陽性コントロール、陰性コント
ロールを希釈するために用いられるものであり、たとえ
ばリン酸緩衝液からなり、非特異的反応の生じるのを防
止するために、たとえばストローマ、動物血清などを添
加してもよい。また、たとえばナトリウムアジドなどの
保存剤を添加しておくことが好ましい。
ロールを希釈するために用いられるものであり、たとえ
ばリン酸緩衝液からなり、非特異的反応の生じるのを防
止するために、たとえばストローマ、動物血清などを添
加してもよい。また、たとえばナトリウムアジドなどの
保存剤を添加しておくことが好ましい。
本発明試薬のキットにおいては、さらに赤血球凝集反応
の特異性判定のための確認試薬（以下、確認試薬という
）を組合わせてもよい。確認試薬は抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体
よりなるものである。
の特異性判定のための確認試薬（以下、確認試薬という
）を組合わせてもよい。確認試薬は抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体
よりなるものである。
実施例Ｉ
Ｓ−口ＫをＢＡＬＣ／Ｃ系マウスに１０週間免疫し、血
中抗体価の上昇したことを確認後、その肺細胞（Ｂ細胞
）を採取した。この細胞とマウスミエローマ細胞である
ｘｅａ−Ａｇ８６５３（７メリカ、ＦＬＯＷ社より入手
）とポリエチレングリコール＋ １０００ 存在下で混
合し融合せしめた。
中抗体価の上昇したことを確認後、その肺細胞（Ｂ細胞
）を採取した。この細胞とマウスミエローマ細胞である
ｘｅａ−Ａｇ８６５３（７メリカ、ＦＬＯＷ社より入手
）とポリエチレングリコール＋ １０００ 存在下で混
合し融合せしめた。
この融合細胞の内、ｓ −Ｕ Ｋに対する抗体を産生じ
ている細胞を、赤血球凝集反応、酵素免疫反応、及び中
和抗体反応等の方法で検査しながら抗５−ＵＫ抗体産生
株を得だ。この細胞株をマウス腹腔内で培養し７〜１０
日目にマウス腹水を分離した。
ている細胞を、赤血球凝集反応、酵素免疫反応、及び中
和抗体反応等の方法で検査しながら抗５−ＵＫ抗体産生
株を得だ。この細胞株をマウス腹腔内で培養し７〜１０
日目にマウス腹水を分離した。
このマウス腹水はプラスミン処理によって発現するｓ−
Ｕ Ｋの活性を強く阻害した。このようにモノクローナ
ル抗体を得、感作用に使用した。
Ｕ Ｋの活性を強く阻害した。このようにモノクローナ
ル抗体を得、感作用に使用した。
感作のだめの動物赤血球は、ヒツジ赤血球をリン酸緩衝
液で充分に洗浄後、ゲルタールアルデヒドを終濃度０．
５％Ｗ／Ｖに添加して約１時間室温処理し、上記緩衝液
でゲルタールアルデヒドを除いて固定化赤血球を得だ。
液で充分に洗浄後、ゲルタールアルデヒドを終濃度０．
５％Ｗ／Ｖに添加して約１時間室温処理し、上記緩衝液
でゲルタールアルデヒドを除いて固定化赤血球を得だ。
５ ％ Ｗ／Ｖ固定化赤血球の懸濁液と等量の上記の精
製抗５−ＵＫ抗体（Ｅ２８Ｑｎｍで００１程度）を混合
し、ｐＨ７，２でタンニン酸５−２０ ｍｌ １００ｍ
１を添加・撹拌後、４”Ｃで１夜放置して感作し抗ｓ
−ＵＫ抗体感作赤血球を得た。
製抗５−ＵＫ抗体（Ｅ２８Ｑｎｍで００１程度）を混合
し、ｐＨ７，２でタンニン酸５−２０ ｍｌ １００ｍ
１を添加・撹拌後、４”Ｃで１夜放置して感作し抗ｓ
−ＵＫ抗体感作赤血球を得た。
そして、充分に同上リン酸緩衝液で洗浄した。
この感作赤血球を分注してから凍結乾燥して試薬を得た
。
。
凍結乾燥後の抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体感作赤血球を動物血清
を含有する塩化ナトリウム含有等張化リン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，２）に２％以上のヒツジ赤血球ストローマを含む
リン酸緩衝液で０５％に調整溶解し、ｓ −Ｕ Ｋに対
する分集反応をマイクロプレート法で測定した。検体中
に含有せるｓ −Ｕ Ｋ量の００１単位／ｍｌまでの測
定は可能であった。
を含有する塩化ナトリウム含有等張化リン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，２）に２％以上のヒツジ赤血球ストローマを含む
リン酸緩衝液で０５％に調整溶解し、ｓ −Ｕ Ｋに対
する分集反応をマイクロプレート法で測定した。検体中
に含有せるｓ −Ｕ Ｋ量の００１単位／ｍｌまでの測
定は可能であった。
実施例２ キットの構成
キットを構成している試薬類は、次の５種類である。
■ 抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体感作ヒツジ赤血球：１バイアル
の内容物は、乾燥感作ヒツジ赤血球および保存剤で■の
リン酸緩衝液（ＰＢＳ）の５ｍｌをこれに加えて懸濁さ
せるとき、ｏ、 ｓ ％ （Ｗ／Ｖ）赤血球浮遊液が得
られる。保存剤としてす） ＩＪウムアジド１■が添加
されている。
の内容物は、乾燥感作ヒツジ赤血球および保存剤で■の
リン酸緩衝液（ＰＢＳ）の５ｍｌをこれに加えて懸濁さ
せるとき、ｏ、 ｓ ％ （Ｗ／Ｖ）赤血球浮遊液が得
られる。保存剤としてす） ＩＪウムアジド１■が添加
されている。
■ 陽性コントロール：
１バイアル中、凍結乾燥した５−ＵＫを含有する。１ｍ
ｌのＰＢＳで溶解したときの本溶液のＲＰＨＡ法による
ｓ −Ｕ Ｋ量は１：３２以上である。
ｌのＰＢＳで溶解したときの本溶液のＲＰＨＡ法による
ｓ −Ｕ Ｋ量は１：３２以上である。
■ 陰性コントロール：
１バイアル中、抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体ならびにｓ−ＵＫが
共に陰性の除菌濾過した生理食塩液１ ｍｌを含有する
。保存剤としてナトリウムアジド１ｍｇ（０，１係）が
添加されている。
共に陰性の除菌濾過した生理食塩液１ ｍｌを含有する
。保存剤としてナトリウムアジド１ｍｇ（０，１係）が
添加されている。
■ リン酸緩衝液：
１バイアル中、除菌濾過した塩化ナトリウム加等張リン
酸緩衝液ｐＨ７，２（ＰＢＳ ）５０＋ａ／！を含有す
る。ＰＢＳには、試験に際して非特異反応の生じるのを
防止するため、可溶化ストローマおよび動物血清を配合
している。
酸緩衝液ｐＨ７，２（ＰＢＳ ）５０＋ａ／！を含有す
る。ＰＢＳには、試験に際して非特異反応の生じるのを
防止するため、可溶化ストローマおよび動物血清を配合
している。
組 成（５Ｑｍｌ中）
リン酸二ナトリウム（無水） ３９５ ｍｈリン酸−カ
リウム １５５ 町 塩化ナトリウム ２２５ｍＱ ス ト ロ − マ ３ ％ 動 物 血 清 １ ％ ｐＨ７，２ リン酸緩衝液の１０ ｒｎｅは抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体感作
ヒツジ赤血球の懸濁用に用いられ、残りは被験液の希釈
に用いる。保存剤としてナトリウムアジドＩＩＩＩｇ（
０，１％ ）を加えておくことが好ましい。
リウム １５５ 町 塩化ナトリウム ２２５ｍＱ ス ト ロ − マ ３ ％ 動 物 血 清 １ ％ ｐＨ７，２ リン酸緩衝液の１０ ｒｎｅは抗ｓ −Ｕ Ｋ抗体感作
ヒツジ赤血球の懸濁用に用いられ、残りは被験液の希釈
に用いる。保存剤としてナトリウムアジドＩＩＩＩｇ（
０，１％ ）を加えておくことが好ましい。
■ 特異性判定のだめの確認試薬：
１バイアル中、除菌濾過した精製抗Ｓ−Ｕ Ｋ抗体（Ｐ
ＨＡ価で１：５１２以上）を含む凍結乾燥品である。こ
れを生理食塩水の５罰で溶解する。
ＨＡ価で１：５１２以上）を含む凍結乾燥品である。こ
れを生理食塩水の５罰で溶解する。
実施例３
実施例２の示しだ試薬を用いて定量試験を次の通り実施
した。
した。
■ 抗ｇ −ＬＩ Ｋ抗体感作ヒツジ赤血球を、１バイ
アル当たりリン酸緩衝液５ ｍｌ Ｋ懸濁する３、■
Ｕ−プレートの各穴に、ｄｒｏｐｐｅｒでリン酸緩衝液
をそれぞれ２５μぎずつ入れる。
アル当たりリン酸緩衝液５ ｍｌ Ｋ懸濁する３、■
Ｕ−プレートの各穴に、ｄｒｏｐｐｅｒでリン酸緩衝液
をそれぞれ２５μぎずつ入れる。
■ ｄｉｌｕｔｅｒにより、Ａ列の穴に被験渡者２５μ
ｌずつを入れる。Ａ列の混液を上に用いたｄｉｌ ｕｔ
ｅｒでＢ列へ移し、さらにＢ列より０列へ移し、次々と
順次移してＨ列までこれを行う。これにより被験液は、
２倍段階希釈されており、Ｈ列の希釈倍数は２５６倍と
なっている。
ｌずつを入れる。Ａ列の混液を上に用いたｄｉｌ ｕｔ
ｅｒでＢ列へ移し、さらにＢ列より０列へ移し、次々と
順次移してＨ列までこれを行う。これにより被験液は、
２倍段階希釈されており、Ｈ列の希釈倍数は２５６倍と
なっている。
■ 別に被験液の代わりに、陽性コントロールおよび陰
性コントロールについても、同様にして希釈系列をつく
る。
性コントロールについても、同様にして希釈系列をつく
る。
■ ｄｒｃｐｐｅｒを用い、すべての穴に抗ｓ −Ｕ
Ｋ抗体感作ヒツジ赤血球のリン酸緩衝液１Ｍ濁液を２５
μｌずつ加える。
Ｋ抗体感作ヒツジ赤血球のリン酸緩衝液１Ｍ濁液を２５
μｌずつ加える。
■ プレートはｍｉｃｒｏｍｉｘｅｒで約１０秒間振盪
後、室温で２時間インキュベートする。
後、室温で２時間インキュベートする。
■ コントロールの観察
陽性コントロールについては、通常６４倍希釈以上で凝
集を認める。陰性コントロールは、Ａ〜Ｈのすべてにお
いて穴の底に赤血球の沈降物を認める（測定が良好な場
合、陰性像は小さく明瞭である）。
集を認める。陰性コントロールは、Ａ〜Ｈのすべてにお
いて穴の底に赤血球の沈降物を認める（測定が良好な場
合、陰性像は小さく明瞭である）。
■ 試験結果
被験液につき、陰性コントロールと比較して凝集像を認
める最高希釈倍数をもってｓ −Ｕ Ｋ価とした。
める最高希釈倍数をもってｓ −Ｕ Ｋ価とした。
ｓ −Ｕ Ｋ含量を精密に定量するには、５−ＵＫの含
量既知溶液を用いてその希釈倍数と対応する凝集像の直
径（胴）を対数グラフにプロットして標準検量線を作成
する。この検量線をもとに、未知被験液の希釈倍数と凝
集像の直径から５−ＵＫ全含量求めた。
量既知溶液を用いてその希釈倍数と対応する凝集像の直
径（胴）を対数グラフにプロットして標準検量線を作成
する。この検量線をもとに、未知被験液の希釈倍数と凝
集像の直径から５−ＵＫ全含量求めた。
この結果、検出感度の最低値は、本発明の試薬では、０
０１単位であり、約２時間で測定が行えた・０ 実施例４ 又、被験液についての特異性を見るために行った試験で
は、被験液を抗体であらかじめ中和して再試験した結果
、偽陽性と判定されるものは３％以下であり、本測定用
試薬が非常に特異性の高いものであることが判った。
０１単位であり、約２時間で測定が行えた・０ 実施例４ 又、被験液についての特異性を見るために行った試験で
は、被験液を抗体であらかじめ中和して再試験した結果
、偽陽性と判定されるものは３％以下であり、本測定用
試薬が非常に特異性の高いものであることが判った。
特許出願人 株式会社ミドリ十字
代 理 人 弁理士 庄 司 隆
手続補正書（自発）
昭和５９年９月Ｓ日
１、事件の表示
昭和５９年特ｆ［願第０５６５３９号
２、発明の名称
線維素溶解酵素前駆体測定用試薬
３、補正をする者
事件との関係 特許出願人
氏名（名称） 株式会社 ミドリ十字
４、代理人
住所 〒５４１ 大阪市東区今橋１丁目１５番地の１株
式会社ミドリ十字内 電話 （０６１２２８−０７００ ６、補正により増加する発明の数 なし７、補正の対象 明ｍ書の発明の詳細な説明の濶 （１） 明細書第７頁、第１２行の「陰性コントロール
」の後に「および被験液」を挿入する。
式会社ミドリ十字内 電話 （０６１２２８−０７００ ６、補正により増加する発明の数 なし７、補正の対象 明ｍ書の発明の詳細な説明の濶 （１） 明細書第７頁、第１２行の「陰性コントロール
」の後に「および被験液」を挿入する。
（２）同書第１１頁、第１１行の「１」を「５ｏ」に訂
正する。
正する。
（３）同書第１２頁、下から第２行の「６４」を「３２
」に訂正する。
」に訂正する。
以 上
Claims (2)
- （１）特異抗線維素溶解酵素前駆体抗体を動物赤血球に
感作して得た抗線維素溶解酵素前駆体抗体感作赤血球を
含むことを特徴とする逆受身赤血球ａ集反応用線維素溶
解酵素前駆体測定用試薬。 - （２）特異抗線維素溶解酵素前駆体抗体を動物赤血球に
感作して得た抗線維素溶解酵素前駆体抗体感作赤血球、
緩衝液、標準線維素溶解酵素前駆体陽性コントロール及
び陰性コントロールを組み合わせてなるキットの形態と
した特許請求の範囲第（１）項記載の線維素溶解酵素前
駆体測定用試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5653984A JPS60200169A (ja) | 1984-03-23 | 1984-03-23 | 線維素溶解酵素前駆体測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5653984A JPS60200169A (ja) | 1984-03-23 | 1984-03-23 | 線維素溶解酵素前駆体測定用試薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60200169A true JPS60200169A (ja) | 1985-10-09 |
Family
ID=13029887
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5653984A Pending JPS60200169A (ja) | 1984-03-23 | 1984-03-23 | 線維素溶解酵素前駆体測定用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60200169A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1990008320A1 (fr) * | 1989-01-19 | 1990-07-26 | Teijin Limited | Procede, reactifs et kits d'analyse immunologique |
| WO1999059611A1 (en) * | 1998-05-21 | 1999-11-25 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for prevention and treatment of uncontrolled formation of intravascular fibrin clots |
| AU2004255196B2 (en) * | 2003-07-01 | 2009-10-08 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for selective dissolution of nascent intravascular blood clots |
-
1984
- 1984-03-23 JP JP5653984A patent/JPS60200169A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1990008320A1 (fr) * | 1989-01-19 | 1990-07-26 | Teijin Limited | Procede, reactifs et kits d'analyse immunologique |
| WO1999059611A1 (en) * | 1998-05-21 | 1999-11-25 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for prevention and treatment of uncontrolled formation of intravascular fibrin clots |
| US7837997B2 (en) | 1998-05-21 | 2010-11-23 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for prevention and treatment of uncontrolled formation of intravascular fibrin clots |
| AU2004255196B2 (en) * | 2003-07-01 | 2009-10-08 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for selective dissolution of nascent intravascular blood clots |
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