JPS60193906A - 植物ウイルス病防除剤 - Google Patents
植物ウイルス病防除剤Info
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- JPS60193906A JPS60193906A JP59047146A JP4714684A JPS60193906A JP S60193906 A JPS60193906 A JP S60193906A JP 59047146 A JP59047146 A JP 59047146A JP 4714684 A JP4714684 A JP 4714684A JP S60193906 A JPS60193906 A JP S60193906A
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- Japan
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はヌルデタケ属に属する菌の培養ろ液または該培
養ろ液から得られる多糖を有効成分とする植物ウィルス
病防除剤に関する。
養ろ液から得られる多糖を有効成分とする植物ウィルス
病防除剤に関する。
畑、水田あるいは各種施設で栽培されるタバコ、トマト
、ピーマン、キュウリ、タイコン、ハクサイなどは、タ
バコモザイクウィルス(以下TMVという)、キーウリ
モザイクウィルス(以下CMVという)、キーウリ緑斑
モザイクウィルス(以下°cGMMVという)、カブモ
ザイクウィルス(以下TuM■という)などのウィルス
によるモザイク病や萎縮病に罹病し、著しい被害を受け
ることが多い。これらのウィルスは他作物、雑草、種子
、土壌中などに存在し、農機具、人の手、衣服などの接
触、昆虫の吸汗などによって伝播する。本発明者らは、
植物ウィルス病を防除する目的から、天然物を主とする
多数の物質についてスクリーニングを行なった綱 結果、担子菌箭(Bastidiomycetes)サ
ルノコシカケ科(polyporaceae )中のヌ
ルデタケ属(porodisculus murr、
)に属する菌が培養中に生産する多糖が著効を示すこと
を発見した。
、ピーマン、キュウリ、タイコン、ハクサイなどは、タ
バコモザイクウィルス(以下TMVという)、キーウリ
モザイクウィルス(以下CMVという)、キーウリ緑斑
モザイクウィルス(以下°cGMMVという)、カブモ
ザイクウィルス(以下TuM■という)などのウィルス
によるモザイク病や萎縮病に罹病し、著しい被害を受け
ることが多い。これらのウィルスは他作物、雑草、種子
、土壌中などに存在し、農機具、人の手、衣服などの接
触、昆虫の吸汗などによって伝播する。本発明者らは、
植物ウィルス病を防除する目的から、天然物を主とする
多数の物質についてスクリーニングを行なった綱 結果、担子菌箭(Bastidiomycetes)サ
ルノコシカケ科(polyporaceae )中のヌ
ルデタケ属(porodisculus murr、
)に属する菌が培養中に生産する多糖が著効を示すこと
を発見した。
本発明に使用するヌルデタケ属に属する菌株としては、
天然のヌルデタケよシ分離した菌株、あるいは公知の保
存菌株、たとえば、ポロディスキ、 # スーベンデュ
/l/ス(porodisculuspendulus
) IFO4967(IFOは財団法人発酵研究所の
略号)、ポロディスキールス・ペンf−/l/ ス(P
orodisculua penduls)AHU93
79(AHUは北海道大学農学部の略号)あるいはボロ
ディスキ! ルスーベンデュルス(Porodiscu
luspendulus )JTS−3009(JTS
は日本専売公社の略号、微工研菌寄第7434号)等が
あるが、多糖生産量が高いこと、任意の分子量を有する
多糖が広範囲の分子量にわたシ調製できることなどから
、p、pendulus JTS−3009株が、最も
望t Lイ菌株である。p、 penduLus JT
S −3009株(以下本菌株という)が培養中に特定
の多糖を生産することは公知である。(アグリカルチュ
ラル・バイオロジカル・ケミストリー45巻525〜5
26 頁、1981う年;同誌45巻653〜657頁
、1981年;特公昭56−42902号)。
天然のヌルデタケよシ分離した菌株、あるいは公知の保
存菌株、たとえば、ポロディスキ、 # スーベンデュ
/l/ス(porodisculuspendulus
) IFO4967(IFOは財団法人発酵研究所の
略号)、ポロディスキールス・ペンf−/l/ ス(P
orodisculua penduls)AHU93
79(AHUは北海道大学農学部の略号)あるいはボロ
ディスキ! ルスーベンデュルス(Porodiscu
luspendulus )JTS−3009(JTS
は日本専売公社の略号、微工研菌寄第7434号)等が
あるが、多糖生産量が高いこと、任意の分子量を有する
多糖が広範囲の分子量にわたシ調製できることなどから
、p、pendulus JTS−3009株が、最も
望t Lイ菌株である。p、 penduLus JT
S −3009株(以下本菌株という)が培養中に特定
の多糖を生産することは公知である。(アグリカルチュ
ラル・バイオロジカル・ケミストリー45巻525〜5
26 頁、1981う年;同誌45巻653〜657頁
、1981年;特公昭56−42902号)。
本菌株の培養ろ液にエタノール、アセトン等を用いた沈
澱法によシ得られる活性成分をタバコ、トマト、ピーマ
ン、キーウリ、メロン、タイコン、ハクサイなどの菫葉
に散布、塗布あるいは地下部から吸収させることによっ
て、TMV。
澱法によシ得られる活性成分をタバコ、トマト、ピーマ
ン、キーウリ、メロン、タイコン、ハクサイなどの菫葉
に散布、塗布あるいは地下部から吸収させることによっ
て、TMV。
CMV、CGMMV、TuMV などの感染、発病を効
果的に防止することができる。本発明者らはこのことを
実験的に確認し本発明をなすに至った。
果的に防止することができる。本発明者らはこのことを
実験的に確認し本発明をなすに至った。
この活性成分を処理した植物には薬害は全く認められず
、植物の生育には何らの悪影響もない。
、植物の生育には何らの悪影響もない。
本菌株の培養のだめの培地としては、通常の担子菌の培
養に用いられる処方でよい。すなわち、炭素源としては
、たとえばグルコース、マルトース、マンノース、ガラ
クトース、フラクトース、スクロース等、窒素源として
はたとえば酵母エキス、粉末酵母、コーンステイープリ
カー、ペプトン、アンモニウム塩、硝酸塩などを使用す
ることができる。無機塩類としては、たとえば燐酸塩、
マグネシウム塩、その他の無機塩類が含まれる。その他
生長に必要なビタミン等は適宜添加してもよい。以下に
代表的な培地組成の一例をあげる。グルコース5%、ペ
グトン0.2%、酵母エキス0.2%、リン酸1カリ0
.5%、硫酸アンモニウム025%、麦芽エキス1チ。
養に用いられる処方でよい。すなわち、炭素源としては
、たとえばグルコース、マルトース、マンノース、ガラ
クトース、フラクトース、スクロース等、窒素源として
はたとえば酵母エキス、粉末酵母、コーンステイープリ
カー、ペプトン、アンモニウム塩、硝酸塩などを使用す
ることができる。無機塩類としては、たとえば燐酸塩、
マグネシウム塩、その他の無機塩類が含まれる。その他
生長に必要なビタミン等は適宜添加してもよい。以下に
代表的な培地組成の一例をあげる。グルコース5%、ペ
グトン0.2%、酵母エキス0.2%、リン酸1カリ0
.5%、硫酸アンモニウム025%、麦芽エキス1チ。
培養は液体培養が有利である。これには培地の初期pH
を2〜7に調整し、20℃〜35℃で、4〜14日間振
盪または通気かく拌培養する。
を2〜7に調整し、20℃〜35℃で、4〜14日間振
盪または通気かく拌培養する。
通気かく拌培養を行なう場合には、通気量0.1〜10
1717m、かく拌速度30〜800 rpmの範囲が
適当である。
1717m、かく拌速度30〜800 rpmの範囲が
適当である。
本菌の培養ろ液はそのままでも抗植物ウィルス活性を有
するが、その活性成分を採取するには種々の方法を採υ
得る。好ましい一例を示すと、培養液をろ過または遠心
分離して菌体を除去し、ろ液にメタノール、エタノール
、アセトンなどの水溶性の溶剤を、ろ液に対し35〜7
0容量チの濃度になるように添加し、生じた沈澱を更に
脱水して乾燥を行う。
するが、その活性成分を採取するには種々の方法を採υ
得る。好ましい一例を示すと、培養液をろ過または遠心
分離して菌体を除去し、ろ液にメタノール、エタノール
、アセトンなどの水溶性の溶剤を、ろ液に対し35〜7
0容量チの濃度になるように添加し、生じた沈澱を更に
脱水して乾燥を行う。
得られた物質は繊維状でやや茶褐色を呈しているが、培
養ろ液に粉末活性炭を加え脱色した後、上記と同様の方
法で処理を行なえば白色の物質を得ることができる。
養ろ液に粉末活性炭を加え脱色した後、上記と同様の方
法で処理を行なえば白色の物質を得ることができる。
得られた物質の水溶液は、モリツシュ・反応、アンスロ
ン反応は陽性、ニンヒドリン反応、フ二−リング反応、
ビーレット反応は陰性、またこの加水分解液については
、モリツシー反応、アンスロン反応、フェーリング反応
は陽性、ニンヒドリン反応、ビユレット反応は陰性であ
った。
ン反応は陽性、ニンヒドリン反応、フ二−リング反応、
ビーレット反応は陰性、またこの加水分解液については
、モリツシー反応、アンスロン反応、フェーリング反応
は陽性、ニンヒドリン反応、ビユレット反応は陰性であ
った。
更に水に透析しても溶液の粘性が変わらないところから
本物質は多糖物質であると考えられる。
本物質は多糖物質であると考えられる。
本多糖物質の構造は、酸加水分解、メチル化分析、過ヨ
ウ素酸酸化、exO−およびendo−β−1,3グル
カナーゼ処理などの結果から、β−1,3結合したD−
グルコースが主鎖をなし、主鎖のD−グルコース残基3
個ごとに1個のβ−1、6結合したD−グルコースが側
鎖をなす基本構造をもつD−グルカンであることが判明
している。(アグリカルチュラル・バイオロジカル・ケ
ミストリー45巻525〜526頁、1981年)通常
の培養方法によって得られる本多糖物質の分子量は、1
04〜106の範囲にある。一般に培養方法による多糖
の分子量調製は困難であり、特に任意の分子量の多糖を
得ることは難しい。
ウ素酸酸化、exO−およびendo−β−1,3グル
カナーゼ処理などの結果から、β−1,3結合したD−
グルコースが主鎖をなし、主鎖のD−グルコース残基3
個ごとに1個のβ−1、6結合したD−グルコースが側
鎖をなす基本構造をもつD−グルカンであることが判明
している。(アグリカルチュラル・バイオロジカル・ケ
ミストリー45巻525〜526頁、1981年)通常
の培養方法によって得られる本多糖物質の分子量は、1
04〜106の範囲にある。一般に培養方法による多糖
の分子量調製は困難であり、特に任意の分子量の多糖を
得ることは難しい。
しかし、本多糖物質の分子量は培養期間を変えることに
よシ調整することができる。回分培養において、本多糖
物質の分子量は培養4〜7日で106であるが、培養8
日目から分子量は減少し、培養11〜14日で105と
なる。培養期間中の分子量変化は、培養ろ液の粘度特性
から知る事ができる。すなわち、本多糖物質の水溶液は
、非ニー−トン流動を示し、見かけ粘度はずシ速度の増
加とともに低下する。この傾きは分子量が高いほど大き
く、傾きと分子量との間には相関が認められる。またこ
の傾きは多糖濃度の影響を受けないため、一定の測定温
度条件でずシ速度を変化させながら溶液の粘度を測定す
れば、本多糖物質の分子量を容易に知る事ができる。
よシ調整することができる。回分培養において、本多糖
物質の分子量は培養4〜7日で106であるが、培養8
日目から分子量は減少し、培養11〜14日で105と
なる。培養期間中の分子量変化は、培養ろ液の粘度特性
から知る事ができる。すなわち、本多糖物質の水溶液は
、非ニー−トン流動を示し、見かけ粘度はずシ速度の増
加とともに低下する。この傾きは分子量が高いほど大き
く、傾きと分子量との間には相関が認められる。またこ
の傾きは多糖濃度の影響を受けないため、一定の測定温
度条件でずシ速度を変化させながら溶液の粘度を測定す
れば、本多糖物質の分子量を容易に知る事ができる。
(ジャーナル・オプ・ファーメンテ−ジョン・テクノロ
ジー60巻、405〜409頁、19’82年;同誌6
1巻505〜510頁、1983年)、本多糖物質の粘
度は、溶液のpH%無機塩の存在によって影響を受けな
いので、培養ろ液の粘度特性をその捷ま測定することに
より、分子量10L−10’の間で任意の分子量を有す
る多糖を培養液から得ることが可能である。また、11
〜14日培養液からゲルろ過、限外ろ過などの手法を併
用すればさらに低分子(分子量104〜105)の多糖
も含め目的に応じて種々の分子量を有する本多糖物質を
得ることができる。
ジー60巻、405〜409頁、19’82年;同誌6
1巻505〜510頁、1983年)、本多糖物質の粘
度は、溶液のpH%無機塩の存在によって影響を受けな
いので、培養ろ液の粘度特性をその捷ま測定することに
より、分子量10L−10’の間で任意の分子量を有す
る多糖を培養液から得ることが可能である。また、11
〜14日培養液からゲルろ過、限外ろ過などの手法を併
用すればさらに低分子(分子量104〜105)の多糖
も含め目的に応じて種々の分子量を有する本多糖物質を
得ることができる。
本多糖物質の生産量は、培養期間に゛よシ変動合、培養
4〜8日で培養液中に対液0.5%(重量)前後生産さ
れるが、培養9日目から多糖量は減少し、培養144日
目、対液o、 i%(重量)前後となる。
4〜8日で培養液中に対液0.5%(重量)前後生産さ
れるが、培養9日目から多糖量は減少し、培養144日
目、対液o、 i%(重量)前後となる。
次に本発明の効果について述べると、本多糖物質を濃度
x、oyrq/−の水溶液として、被処理植物の葉面に
散布することによ、9、TMV、CMV。
x、oyrq/−の水溶液として、被処理植物の葉面に
散布することによ、9、TMV、CMV。
CGMM’V、 TuMVなどを効果的に85〜99%
阻止率で予防することができる。
阻止率で予防することができる。
以下植物ウィルス感染防除試験の実施例を挙けて説明す
る。
る。
実施例1゜
P、 pendulus JTS−3009株を、グル
コース3%、尿素0,07%、酵母エキス0.3%、リ
ン酸1カリ0.1 % %硫酸マグネシウムO,OS%
を含む培地で、28℃で12日間振盪培培養た。
コース3%、尿素0,07%、酵母エキス0.3%、リ
ン酸1カリ0.1 % %硫酸マグネシウムO,OS%
を含む培地で、28℃で12日間振盪培培養た。
培養後、培養液をろ過する事によシろ液を得、ろ液に等
量〜、2倍量のエタノールを添加した。
量〜、2倍量のエタノールを添加した。
生じた沈澱を再度水に溶解し、再び沈澱を得る操作を2
度繰シ返す事によシ、平均分子量11,0×104の精
製多糖を得た。本多糖溶液のウィルス感染1sE1止効
果k、TMV、CGMMV、CMV オヨびTuMVに
ついて検定した。検定には、それぞれのウィルスを接種
することによって斑点を生ずる植物、すなわちTMVに
対してはタバコ(品種キサンチ・エヌシー) 、CGM
MV に対してはチョウセンアサガオ、CMVに対して
はササゲの初生葉、TuMvに対してはタバコ(品種プ
ライトエロー)を用いた。これらの植物は直径120の
ポットで育成し、ササゲ以外は展開した木葉の表または
裏側の中葉に前記精製多糖を含む被験液を絵筆で塗布し
、一方の中葉には対照として水を塗布した。ササゲにつ
いては、一対の初生葉の片方の葉に前記被験液を、そし
てもう一方の葉に水を塗布した。被験液の多糖濃度は、
いずれも1.0■/mlとした。被験液処理1日後、葉
表全面にウィルスを塗抹接種した。ウィルス濃度はTM
Vnf 0.1μm/ツ、CMVが1μS’/−1CG
MMVとTIIMVが罹病葉汁液のそれぞれs、ooo
倍および100倍希釈液とした。ウィルス接種4〜7日
後、接種葉に現われた斑点数を数え、次式によってウィ
ルス感染阻止率を算出した。
度繰シ返す事によシ、平均分子量11,0×104の精
製多糖を得た。本多糖溶液のウィルス感染1sE1止効
果k、TMV、CGMMV、CMV オヨびTuMVに
ついて検定した。検定には、それぞれのウィルスを接種
することによって斑点を生ずる植物、すなわちTMVに
対してはタバコ(品種キサンチ・エヌシー) 、CGM
MV に対してはチョウセンアサガオ、CMVに対して
はササゲの初生葉、TuMvに対してはタバコ(品種プ
ライトエロー)を用いた。これらの植物は直径120の
ポットで育成し、ササゲ以外は展開した木葉の表または
裏側の中葉に前記精製多糖を含む被験液を絵筆で塗布し
、一方の中葉には対照として水を塗布した。ササゲにつ
いては、一対の初生葉の片方の葉に前記被験液を、そし
てもう一方の葉に水を塗布した。被験液の多糖濃度は、
いずれも1.0■/mlとした。被験液処理1日後、葉
表全面にウィルスを塗抹接種した。ウィルス濃度はTM
Vnf 0.1μm/ツ、CMVが1μS’/−1CG
MMVとTIIMVが罹病葉汁液のそれぞれs、ooo
倍および100倍希釈液とした。ウィルス接種4〜7日
後、接種葉に現われた斑点数を数え、次式によってウィ
ルス感染阻止率を算出した。
検定の結果を第1表に挙げた。本多糖物質は検定したい
ずれのウィルスと植物の組み合わせにおいても高い感染
阻止率を示した。
ずれのウィルスと植物の組み合わせにおいても高い感染
阻止率を示した。
第 1 表
TMV タバコ(キサンチ・エヌシー) 1.0 葉表
981 I I 葉裏 65 CGMMV チョウセンアサガオ 〃 葉表95CMV
ttグCZ−ダネtyジャク) I # 93’l’
uMV タバコ(ブライト・エロー) tr t 90
実施例2゜ p、pendulus JTS−3009株を実施例1
と同様の培養条件で4〜14日間培養した。
981 I I 葉裏 65 CGMMV チョウセンアサガオ 〃 葉表95CMV
ttグCZ−ダネtyジャク) I # 93’l’
uMV タバコ(ブライト・エロー) tr t 90
実施例2゜ p、pendulus JTS−3009株を実施例1
と同様の培養条件で4〜14日間培養した。
アルコール沈澱法によシ、4日間培養液から平均分子量
86.7.XIO’の、9日間培養液から平均分子量3
1.5X10’の、10日間培養液から平均分子量23
.8X10’の、11日間培養液から平均分子量13.
6X10’の、12日間培養液から平均分子量11.0
X10’の精製多糖を得た。また14日間培養液から限
外ろ過性により平均分子量7.5×104と2.5X1
0’の多糖を得た。この様にして得られた種々な分子量
の多糖試料のTMV感染阻止効果を実施例1に準じて検
定した。その結果は第2表に挙げたとおシであシ、いず
れの試料も著効を示したが、比較的低分子の多糖−はど
感染阻止効果が高かった。
86.7.XIO’の、9日間培養液から平均分子量3
1.5X10’の、10日間培養液から平均分子量23
.8X10’の、11日間培養液から平均分子量13.
6X10’の、12日間培養液から平均分子量11.0
X10’の精製多糖を得た。また14日間培養液から限
外ろ過性により平均分子量7.5×104と2.5X1
0’の多糖を得た。この様にして得られた種々な分子量
の多糖試料のTMV感染阻止効果を実施例1に準じて検
定した。その結果は第2表に挙げたとおシであシ、いず
れの試料も著効を示したが、比較的低分子の多糖−はど
感染阻止効果が高かった。
(以下介臼)
第 2 表
2.5X10’ 1.0 葉表 99
7.5X10’ 97
11.0X10’ 97
13.6X10’ 95
23.8xlO’ 95
31.5xlO’ 93
B6.7X10’ 85
Claims (1)
- 1、 ヌルデタケ属に属する菌の生産する多糖を主成分
として含有することを特徴とする植物ウィルス病防除剤
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59047146A JPS60193906A (ja) | 1984-03-14 | 1984-03-14 | 植物ウイルス病防除剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP59047146A JPS60193906A (ja) | 1984-03-14 | 1984-03-14 | 植物ウイルス病防除剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS60193906A true JPS60193906A (ja) | 1985-10-02 |
JPS6220163B2 JPS6220163B2 (ja) | 1987-05-06 |
Family
ID=12766958
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP59047146A Granted JPS60193906A (ja) | 1984-03-14 | 1984-03-14 | 植物ウイルス病防除剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS60193906A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1989006493A1 (en) * | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Japan Tobacco Inc. | Plant virus controlling agent and process for its preparation |
-
1984
- 1984-03-14 JP JP59047146A patent/JPS60193906A/ja active Granted
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1989006493A1 (en) * | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Japan Tobacco Inc. | Plant virus controlling agent and process for its preparation |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS6220163B2 (ja) | 1987-05-06 |
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