JPS60114191A - 水溶液中のｓ‐トリアジン誘導体の分解方法 - Google Patents
水溶液中のｓ‐トリアジン誘導体の分解方法Info
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- JPS60114191A JPS60114191A JP59230464A JP23046484A JPS60114191A JP S60114191 A JPS60114191 A JP S60114191A JP 59230464 A JP59230464 A JP 59230464A JP 23046484 A JP23046484 A JP 23046484A JP S60114191 A JPS60114191 A JP S60114191A
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（並東上の利用分野）
この発明は、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｅｕ！り
％の２１Ｔ規な微生物、廃水中のアミノ−５−）リア
ジ／及びシアヌール酸の微生物学的分解のための方トリ
アジンをバイオマス、又はＮＨ４＋もしくは塩化物のご
とき分解生成物に生物学的に分解する方法に関する。
％の２１Ｔ規な微生物、廃水中のアミノ−５−）リア
ジ／及びシアヌール酸の微生物学的分解のための方トリ
アジンをバイオマス、又はＮＨ４＋もしくは塩化物のご
とき分解生成物に生物学的に分解する方法に関する。
（従来技術）
特にクロロ−８−トリアジン、アミノ−８−トリアジン
及び（シクロ）アルキルアミノ−５−）リアジンを不純
物として含有する水溶液は、化学工秦における１、３．
５−トリアジン（Ｓ−トリアジン）の大規模生産におい
て連続的に生成する。
及び（シクロ）アルキルアミノ−５−）リアジンを不純
物として含有する水溶液は、化学工秦における１、３．
５−トリアジン（Ｓ−トリアジン）の大規模生産におい
て連続的に生成する。
このような廃水は、自然においては緩慢にのみ分解され
る８−トリアジン誘導体のために厄介物である。しかし
ながら、前処理は非常に高いコスト及び対応して高いエ
ネルギー消費に伴う仕事であり、今まで満足に解決され
ていない。廃水中に存在するｓ−トリアジン誘導体は、
上昇した温度において加水分解によ多部分的に転換され
得る。しかしながら一般に、生産から生ずる残留ｓ−ト
ＩＪアジン誘導体は非常に希薄な溶液として存在し、そ
れ故に化学的手段によってこれらを分解することはほと
んど不可能である。
る８−トリアジン誘導体のために厄介物である。しかし
ながら、前処理は非常に高いコスト及び対応して高いエ
ネルギー消費に伴う仕事であり、今まで満足に解決され
ていない。廃水中に存在するｓ−トリアジン誘導体は、
上昇した温度において加水分解によ多部分的に転換され
得る。しかしながら一般に、生産から生ずる残留ｓ−ト
ＩＪアジン誘導体は非常に希薄な溶液として存在し、そ
れ故に化学的手段によってこれらを分解することはほと
んど不可能である。
従って、この種の希薄廃水の浄化方法をめる場合、ｓ−
トリアジン誘導体の段階的分解の各段階において高い生
物分解を達成する微生物学的方法を開発するための努力
が常になされる。
トリアジン誘導体の段階的分解の各段階において高い生
物分解を達成する微生物学的方法を開発するための努力
が常になされる。
この明細香を通して、このような努力及び反応く、ノ
段階のみを検討しよう。非常低率での重要でない副反応
は具体的には記載しない。
は具体的には記載しない。
（問題点を解決するだめの手段）
この発明の第一の部分は、Ｒ１が塩素原子又はＮＨ２基
であり、そしてＲ２が水素、又は４個以下の炭素原子を
含有する脂肪族もしくは脂環族炭化水素基である式（Ｉ
ａ）のアミノ−ｓ−トリアジンの、式（Ｉｂ）の対応す
るアンメリンへ、及び式（Ｉｃ）のアンメリドへの微生
物掌的部分分解の各観点に関する。
であり、そしてＲ２が水素、又は４個以下の炭素原子を
含有する脂肪族もしくは脂環族炭化水素基である式（Ｉ
ａ）のアミノ−ｓ−トリアジンの、式（Ｉｂ）の対応す
るアンメリンへ、及び式（Ｉｃ）のアンメリドへの微生
物掌的部分分解の各観点に関する。
Ｈ２
ＮよＮａｈ、コラリヌスＮＲＲＬ−Ｂ−１５４４４（Ｉ
ａ） この発明の対象は、チパーガイギー社の農業研究ステー
ションから採取した土壌由来の新規な微生物ロドコッカ
ス・コラリヌス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｃｏｒａｌｌ
ｉｎｕｓ ） ＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４であり、こ
こでは種々の耕作（リンゴ、ブドウ、トウモロコシ）の
もとて圃場が複数年間（４〜１９年間）にわた１）シー
ｑジｙ （Ｓｉｍａｚｉｎｅ ） （２−クロ０−４．
６−ビス〔エチルアミノ）−ａ−トリアジン）及び／又
はアトラジン（Ａｔｒａｚｉｎｅ ） （２−クロロ−
４−エチルアミノ−６−イソプロビルアミノ−Ｓ−トリ
アジン）によシ処理されていた。この４］１￥ｉ４株は
、１９８３年６月１３日に、米国、ペオリア、クリノイ
６１６０４のＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｐ、ｅｓｅａ
ｒｃｈ Ｃｕ１ｔｕｒｅＣｏｌｌｅａｔｊｏｎ （ＮＲ
ＲＬ ）に寄託された。Ｕ皿、（スＮＲＲＬ ５−１５
４４４は式（Ｉａ）の２．４−．７アミノーｓ−ｈリア
ジン訝導体を脱アミノすることができ、そして２−アミ
ノ−４−クロロ−８−トリアジン誘導体を脱塩素化する
ことができ、そしてこれらを式（Ｉｂ）の対応するアン
メリン誘導体に転換し、そして一部分並行して、しかし
主として引続いて式（Ｉｃ）のアンメリド誘導体に転換
する。
ａ） この発明の対象は、チパーガイギー社の農業研究ステー
ションから採取した土壌由来の新規な微生物ロドコッカ
ス・コラリヌス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓｃｏｒａｌｌ
ｉｎｕｓ ） ＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４であり、こ
こでは種々の耕作（リンゴ、ブドウ、トウモロコシ）の
もとて圃場が複数年間（４〜１９年間）にわた１）シー
ｑジｙ （Ｓｉｍａｚｉｎｅ ） （２−クロ０−４．
６−ビス〔エチルアミノ）−ａ−トリアジン）及び／又
はアトラジン（Ａｔｒａｚｉｎｅ ） （２−クロロ−
４−エチルアミノ−６−イソプロビルアミノ−Ｓ−トリ
アジン）によシ処理されていた。この４］１￥ｉ４株は
、１９８３年６月１３日に、米国、ペオリア、クリノイ
６１６０４のＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｐ、ｅｓｅａ
ｒｃｈ Ｃｕ１ｔｕｒｅＣｏｌｌｅａｔｊｏｎ （ＮＲ
ＲＬ ）に寄託された。Ｕ皿、（スＮＲＲＬ ５−１５
４４４は式（Ｉａ）の２．４−．７アミノーｓ−ｈリア
ジン訝導体を脱アミノすることができ、そして２−アミ
ノ−４−クロロ−８−トリアジン誘導体を脱塩素化する
ことができ、そしてこれらを式（Ｉｂ）の対応するアン
メリン誘導体に転換し、そして一部分並行して、しかし
主として引続いて式（Ｉｃ）のアンメリド誘導体に転換
する。
Ｒ２７；＝水素である場合、Ｒｈ、コラリヌスＮＲＲＬ
Ｂ−１５４４４はアンメリド（Ｉｃ）をさらに、シアヌ
ル酸の段階を介してバイオマスに分解する。この兄明は
また、同じ分解反応を行うことができるＲｈ、コラリヌ
スＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４の変異株を包含する。
Ｂ−１５４４４はアンメリド（Ｉｃ）をさらに、シアヌ
ル酸の段階を介してバイオマスに分解する。この兄明は
また、同じ分解反応を行うことができるＲｈ、コラリヌ
スＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４の変異株を包含する。
の微生物は上記のスキームに示すように、ｓ−トリアノ
ン中のアミノ置換基をヒドロキシル基に転換する。すな
わちアミノ−ａ−トリアジンを対応するアンメリン及び
アンメリドに分解することができる。罵くべきことに、
新規微生物Ｒｈ、コラリとＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４
の発見は、クロロ−８−トリアジンの微生物学的分解を
可能にし、そして塩素原子の生物学的除去及び式（Ｉｂ
）の対応するアンメリンの生成を始めて可能にする。
ン中のアミノ置換基をヒドロキシル基に転換する。すな
わちアミノ−ａ−トリアジンを対応するアンメリン及び
アンメリドに分解することができる。罵くべきことに、
新規微生物Ｒｈ、コラリとＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４
の発見は、クロロ−８−トリアジンの微生物学的分解を
可能にし、そして塩素原子の生物学的除去及び式（Ｉｂ
）の対応するアンメリンの生成を始めて可能にする。
（Ｃｏｕｃｈ等（Ｐｒｏｃ、 ５ｏｕｔｈ Ｗｅｅｄ
Ｓｃ、 Ｓｏｃ、１９６５＋Ｖｏｌ１８，６２３頁）に
よる糸状菌を用いるアトラジンの脱塩素化の可能性につ
いての発表は、実験を再現するのに十分でない説明を与
えておシ、そして実際的な重要性を達成していない。〕
Ｒｈ、コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４は同時に
、ｓ −トリアジン類分解連鎖中の最終転換生成物の１
つを構成する生成物であるシアヌール酸を開裂し、そし
てこれを尿素、ビウレット、Ｎ■■４＋のでとき分解生
成物を介してバイオマスに転換するという有利な性質を
有する。
Ｓｃ、 Ｓｏｃ、１９６５＋Ｖｏｌ１８，６２３頁）に
よる糸状菌を用いるアトラジンの脱塩素化の可能性につ
いての発表は、実験を再現するのに十分でない説明を与
えておシ、そして実際的な重要性を達成していない。〕
Ｒｈ、コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４は同時に
、ｓ −トリアジン類分解連鎖中の最終転換生成物の１
つを構成する生成物であるシアヌール酸を開裂し、そし
てこれを尿素、ビウレット、Ｎ■■４＋のでとき分解生
成物を介してバイオマスに転換するという有利な性質を
有する。
従って、この発明のその他の対象は、微生物Ｒｈ、コラ
リヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４、及びその対応する
変異株を用いて、好気的条件下で、式（Ｉａ）の２−ア
ミノ−ｓ−トリアジン誘導体を式（Ｉｂ）の対応するア
ンメリン及び式（Ｉｃ）のアンメリドに微生物学的に転
換する方法である。
リヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４、及びその対応する
変異株を用いて、好気的条件下で、式（Ｉａ）の２−ア
ミノ−ｓ−トリアジン誘導体を式（Ｉｂ）の対応するア
ンメリン及び式（Ｉｃ）のアンメリドに微生物学的に転
換する方法である。
この発明の他の対象はまた、好気的条件下でＲｈ、コラ
リヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４及びその対応する変
異株を用いるシアヌル酸の微生物学的全分解のための方
法である。
リヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４及びその対応する変
異株を用いるシアヌル酸の微生物学的全分解のための方
法である。
上記の式（Ｉａ） ／ （Ｉｂ）において、置換基Ｒ２
は、特に水素、エチル、イソプロピル及びシクロプロピ
ルを意味するものと理解されよう。
は、特に水素、エチル、イソプロピル及びシクロプロピ
ルを意味するものと理解されよう。
実際上非常にＮ’Ａな式（Ｉ）の化合物として、２．４
−ビス（エチルアミノ）−６−クロロ−３−トリアジン
（シマジン）の脱エチル化及び２−クロロ−４−エチル
アミノ−６−イングロビルアーミノーｓ−）リアノン（
アトラジン）の脱イソプロピル化によ）生物学的に非常
に容易に生成する（ Ｗｉｃｈｍａｎ及びＢｙｒｎｅｓ
、 Ｗｅｅｄ、 ＳＣ，１９７５ｒＶｏｌ ２３ 、４
８８−４５３ ） ２−アミノ−４−エチルアミノ−６
−クロロ−ｓ−トリアジンが挙げられ、そしてクロロ−
ｓ−トリアジン除草剤により処理された圃場からの小川
及び水路中で検出される（Ｍｕｌｒ及びＢａｋｅｒ、
Ｊ、 Ａｇｒｉｃ、 Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ。
−ビス（エチルアミノ）−６−クロロ−３−トリアジン
（シマジン）の脱エチル化及び２−クロロ−４−エチル
アミノ−６−イングロビルアーミノーｓ−）リアノン（
アトラジン）の脱イソプロピル化によ）生物学的に非常
に容易に生成する（ Ｗｉｃｈｍａｎ及びＢｙｒｎｅｓ
、 Ｗｅｅｄ、 ＳＣ，１９７５ｒＶｏｌ ２３ 、４
８８−４５３ ） ２−アミノ−４−エチルアミノ−６
−クロロ−ｓ−トリアジンが挙げられ、そしてクロロ−
ｓ−トリアジン除草剤により処理された圃場からの小川
及び水路中で検出される（Ｍｕｌｒ及びＢａｋｅｒ、
Ｊ、 Ａｇｒｉｃ、 Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ。
１９７６、Ｖｏ１２４．１２２−１２５）。
この発明の実施において使用する微生物はまず適当な増
殖培地に培養し、そして次に分解すべき基質の水溶液に
加えるか、あるいは分解すべき基質を含有する培地にお
いて直接に培養する。
殖培地に培養し、そして次に分解すべき基質の水溶液に
加えるか、あるいは分解すべき基質を含有する培地にお
いて直接に培養する。
Ｒｈ、コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４４の増殖は
、アルカリ金属（Ｋ、Ｎａ）、アルカリ土類金属（Ｃａ
。
、アルカリ金属（Ｋ、Ｎａ）、アルカリ土類金属（Ｃａ
。
Ｍｇ）又は遷移金属（Ｆｅ ）の硫酸塩又は燐酸塩、そ
してさらにモリブデン酸アルカリのごとき塩のある景の
存在によシ促進される。
してさらにモリブデン酸アルカリのごとき塩のある景の
存在によシ促進される。
適当な増殖培地は例えば次のような組成を有する。
燐酸カリウム緩衝剤ｐ＋（７，３１０ｍＭ硫酸マグネシ
ウム七水和物 ０．２５ ｍＭＰｆｅｎｎｉｎｇ及びＬ
ｉ ｐｐｅ ｒｔの微蓋５ｒｎｌ／ｌｊ元素溶液（Ａｒ
ｃｈ、 Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ。
ウム七水和物 ０．２５ ｍＭＰｆｅｎｎｉｎｇ及びＬ
ｉ ｐｐｅ ｒｔの微蓋５ｒｎｌ／ｌｊ元素溶液（Ａｒ
ｃｈ、 Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ。
５５．２４６．１９６６）、 １００ｍ９／ｌの塩化カ
ルシウムニ水オロ物を補充したものグリセリン １０ｍ
Ｍ 窒素源 Ｎ２２．５ｍＭ 適当な炭素源は例えばグリセリン、フラクトース、Ｄ−
グルコン酸塩、酢酸塩、安息香酸、サリチル酸、ｍ−ヒ
ドロ安息香酸等である（後記の第２．２表を参照のこと
）。
ルシウムニ水オロ物を補充したものグリセリン １０ｍ
Ｍ 窒素源 Ｎ２２．５ｍＭ 適当な炭素源は例えばグリセリン、フラクトース、Ｄ−
グルコン酸塩、酢酸塩、安息香酸、サリチル酸、ｍ−ヒ
ドロ安息香酸等である（後記の第２．２表を参照のこと
）。
例えば２−アミノ−４−エチルアミノ−６−クロロ−８
−トリアゾン、メラミン、２，４−ジアミノ−６−シク
ログロビルアミノーｓ−トリアジン、又は２．４−ジア
ミン−６−ヒドロキシ−Ｓ−トリアジンを包含する式（
Ｉａ）及び（Ｉｂ）の８−トリアジン類が窒素源として
使用される。
−トリアゾン、メラミン、２，４−ジアミノ−６−シク
ログロビルアミノーｓ−トリアジン、又は２．４−ジア
ミン−６−ヒドロキシ−Ｓ−トリアジンを包含する式（
Ｉａ）及び（Ｉｂ）の８−トリアジン類が窒素源として
使用される。
分離及びグさ縮
得られる微生物の原型を廃水サンプル及び土壌サンプル
から得、そしてさらに培養することによシ選択する。
から得、そしてさらに培養することによシ選択する。
１、分離
１．１ 廃水サンプルを＋４℃にて１０分間遠心分離し
た（２０．０００ＸＪｉ’）。上清液を廃棄し、そして
残留沈澱物（ベレット）を緩衝液（０，２５ｍＭの硫酸
マグネシウムを含有する１ ０ ｍＭ燐酸カリウム緩衝
液、ｐｌ（７，３）に再懸濁し、濾過し、そしてさらに
２回緩衝液で洗浄した。次にベンツトを、緩衝化塩溶赦
、例えば前記の増殖培地に懸濁し、そして接種材料とし
て使用する。
た（２０．０００ＸＪｉ’）。上清液を廃棄し、そして
残留沈澱物（ベレット）を緩衝液（０，２５ｍＭの硫酸
マグネシウムを含有する１ ０ ｍＭ燐酸カリウム緩衝
液、ｐｌ（７，３）に再懸濁し、濾過し、そしてさらに
２回緩衝液で洗浄した。次にベンツトを、緩衝化塩溶赦
、例えば前記の増殖培地に懸濁し、そして接種材料とし
て使用する。
１．２．スイスの種々のチバーーＪｆイギー研究ステー
ションからの、数年間にわたシｓ−）リアジン除草剤に
よシ処理された土壌サンプル（５ｙ）を１．１．に記載
した緩衝液１００ｍ１中で３０℃にて１時間振とうし、
そして自然沈降せしめた。上清液をワットマンＡＩＦ紙
で濾過し、そしてｐ液をさらに、接種材料として使用す
る／ζめ１．１．において記載した方法により処理した
。
ションからの、数年間にわたシｓ−）リアジン除草剤に
よシ処理された土壌サンプル（５ｙ）を１．１．に記載
した緩衝液１００ｍ１中で３０℃にて１時間振とうし、
そして自然沈降せしめた。上清液をワットマンＡＩＦ紙
で濾過し、そしてｐ液をさらに、接種材料として使用す
る／ζめ１．１．において記載した方法により処理した
。
２、濃縮
２、５ ｍＭの窒素（Ｂ−トリアノンの形で）、５ｍＭ
のグルコース、５ｍＭのコハク酸４．１０ ｍＭのグリ
セリン、及び０．４ ｍｌの接種材料溶液を含治する溶
液サンプル（３ｍｌ）を培養管中に密封し、３０℃にて
１〜３日間、窒素を全く含まない雰囲気において、２０
（Ｖ／ｖ）％の酸素及び８０（ｖ／ｖ）％のヘリウムで
満たした容器中で約８×１０’ Ｐａの圧力のもとで培
養した。これから得たサンプルを寒天グレート上に移し
、そして選択し、そして陽性試験の後に分離した。
のグルコース、５ｍＭのコハク酸４．１０ ｍＭのグリ
セリン、及び０．４ ｍｌの接種材料溶液を含治する溶
液サンプル（３ｍｌ）を培養管中に密封し、３０℃にて
１〜３日間、窒素を全く含まない雰囲気において、２０
（Ｖ／ｖ）％の酸素及び８０（ｖ／ｖ）％のヘリウムで
満たした容器中で約８×１０’ Ｐａの圧力のもとで培
養した。これから得たサンプルを寒天グレート上に移し
、そして選択し、そして陽性試験の後に分離した。
ロドコッカス・コラリヌスはダラム陽性、オキシメーゼ
陰性であり、そして好ましくは２０℃〜４５℃において
増殖し、好ましいｐｌ（範囲は６〜８である。このもの
は暗赤色のコロニーを形成し、そして個々の変異株は一
層淡い色でも生ずる。式（Ｉａ）の３− ） ＩＪア・
シン誘導体において、この微生物の酵素系はＣｔ原子ケ
ヒドロキシル基によシＶｉＬき換えることができる。窒
素源として、メラニン、アンメリン、アンメリド、２．
４−ジアミノ−６−クロロ−ｓ−トリアジン、シアヌー
ル酸、ビー−レット、尿ｇＮＨ４＋を含む式（Ｉａ）及
び〔Ｉｂ）のｓ−トリアジン誘導体の遊離アミ７基を利
用することができ、そして炭素源として例えばグリセリ
ン、酢酸、エタノール等を利用することができる。
陰性であり、そして好ましくは２０℃〜４５℃において
増殖し、好ましいｐｌ（範囲は６〜８である。このもの
は暗赤色のコロニーを形成し、そして個々の変異株は一
層淡い色でも生ずる。式（Ｉａ）の３− ） ＩＪア・
シン誘導体において、この微生物の酵素系はＣｔ原子ケ
ヒドロキシル基によシＶｉＬき換えることができる。窒
素源として、メラニン、アンメリン、アンメリド、２．
４−ジアミノ−６−クロロ−ｓ−トリアジン、シアヌー
ル酸、ビー−レット、尿ｇＮＨ４＋を含む式（Ｉａ）及
び〔Ｉｂ）のｓ−トリアジン誘導体の遊離アミ７基を利
用することができ、そして炭素源として例えばグリセリ
ン、酢酸、エタノール等を利用することができる。
乙は、細胞分裂の後しばしばＹ形又はＹ形をとる１〜２
μｍの非運動性桿菌として観察される。電子顕微鏡にお
いて、この微生物は、グラム陽性特性に従って平滑な表
面及びさらに細胞分裂リングを示すＶ−形として現われ
る。
μｍの非運動性桿菌として観察される。電子顕微鏡にお
いて、この微生物は、グラム陽性特性に従って平滑な表
面及びさらに細胞分裂リングを示すＶ−形として現われ
る。
２、新規微生物の生化孝的特徴付は及び分ガ４生化学的
試験 ２．１、 ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −
１５４４４の一般的特徴付は及び分力１のために、市販
の系を使用する。この系はグラム陽性微生物の特徴付け
に対して一般的情報を供する。
試験 ２．１、 ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −
１５４４４の一般的特徴付は及び分力１のために、市販
の系を使用する。この系はグラム陽性微生物の特徴付け
に対して一般的情報を供する。
シュ）試験
特徴付：＋十両試、験陽性
一一両試験陰性
嫌気的デキストロース分解 −一
嫌気的デキストロース分解中のガス発生 −一リジンデ
カルボキシラーゼ 一 オルニチンデカル？キシラーゼ −− Ｈ２Ｓ生成 −一 インドール生成 −一 アドニトール（ａｄｏｎｉｔｏｌ）分解 −一ラクトー
ス分解 −一 アラビノース分解 −一 ソルビトール分解 −一 アセトイン生成 −− ドゥルシトール（ｄｕｌｃｉｔｏｌ ）分解 −一７ェ
ニルアラニンデアｓナーゼ −一 ウレアーゼ ＋十 シモンス（Ｓ ｉｍｍｏｎｓ ）シトレート資化 −一
アルギニンジヒドラーゼ −− Ｎ２生成 −一 キシロース分解 −一 ２．２．特Ｄ５利け［Ｈ，５ｅｉｌｅｒ、 Ｊ、 Ｇｅ
ｎｅｒａｌ性質 嫌気的反応 − 〇源としての５−アミノバレレート −Ｃ源としてのサ
クシネート ＋ Ｃふとしてのアジペート − Ｃ源としてのシトレート ＋ Ｃ源としてのＤ−グルコネート ＋ Ｃ諒としてのＬ−ロイシン − Ｃ源としてのＬ−アスパラギン − Ｃ源としてのし一アスパルテート − Ｃ掠としてのＤ−リボース − Ｃ源としてのＬ−アラビノース − ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ−１５４４４の
保存新規菌株を保存するのに次の方法が適当である０（
、） スラント寒天〔前記の増殖培地に従う；式（Ｉａ
）の２−クロロトリアノンを必須のＮ源とする〕上に菌
株のバイオマスを保持する。
カルボキシラーゼ 一 オルニチンデカル？キシラーゼ −− Ｈ２Ｓ生成 −一 インドール生成 −一 アドニトール（ａｄｏｎｉｔｏｌ）分解 −一ラクトー
ス分解 −一 アラビノース分解 −一 ソルビトール分解 −一 アセトイン生成 −− ドゥルシトール（ｄｕｌｃｉｔｏｌ ）分解 −一７ェ
ニルアラニンデアｓナーゼ −一 ウレアーゼ ＋十 シモンス（Ｓ ｉｍｍｏｎｓ ）シトレート資化 −一
アルギニンジヒドラーゼ −− Ｎ２生成 −一 キシロース分解 −一 ２．２．特Ｄ５利け［Ｈ，５ｅｉｌｅｒ、 Ｊ、 Ｇｅ
ｎｅｒａｌ性質 嫌気的反応 − 〇源としての５−アミノバレレート −Ｃ源としてのサ
クシネート ＋ Ｃふとしてのアジペート − Ｃ源としてのシトレート ＋ Ｃ源としてのＤ−グルコネート ＋ Ｃ諒としてのＬ−ロイシン − Ｃ源としてのＬ−アスパラギン − Ｃ源としてのし一アスパルテート − Ｃ掠としてのＤ−リボース − Ｃ源としてのＬ−アラビノース − ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ−１５４４４の
保存新規菌株を保存するのに次の方法が適当である０（
、） スラント寒天〔前記の増殖培地に従う；式（Ｉａ
）の２−クロロトリアノンを必須のＮ源とする〕上に菌
株のバイオマスを保持する。
（ｂ） ライオ−アンプル（Ｃ源のほかに、所望のＮ−
源として２−クロロトリアジンを少量存在せしめる８較
がある）。培養物を栄養溶液から遠心分離し、そしてバ
イオマスをＶ４〜１／３容Ｍの１５％スキムミルクに再
懸濁し、そして凍結乾燥する。
源として２−クロロトリアジンを少量存在せしめる８較
がある）。培養物を栄養溶液から遠心分離し、そしてバ
イオマスをＶ４〜１／３容Ｍの１５％スキムミルクに再
懸濁し、そして凍結乾燥する。
新規菌株の変異株は自然に生成することができ、あるい
は変異株を人為的に調製することができる。
は変異株を人為的に調製することができる。
後者の変異株は、天然林と同様に、水溶液中で式（Ｉａ
）及び（Ｉｂ）の化合物を分解し、そしてノＺイオマス
を生産することができる。変異株はまた、化学的手段、
例えば特定のグアニジン誘導体、例えばＮ−メチル−Ｎ
−ニトロングアニジン、又は亜硝酸アルカリ、例えば亜
硝酸ナトリウムによっても生成せしめることができる。
）及び（Ｉｂ）の化合物を分解し、そしてノＺイオマス
を生産することができる。変異株はまた、化学的手段、
例えば特定のグアニジン誘導体、例えばＮ−メチル−Ｎ
−ニトロングアニジン、又は亜硝酸アルカリ、例えば亜
硝酸ナトリウムによっても生成せしめることができる。
あるいは、物理的手段、例えば紫外線、ｘ ａ％又は放
射線の照射によっても生成せしめることができる。
射線の照射によっても生成せしめることができる。
第二部においてこの発明は、ｌ七１が塩素原子又はＮｉ
２基であシ、そしてＲ２が水素、又は４個以下の炭素原
子を含有する脂肪族もしくは脂環族炭化水素基である式
（Ｉａ）及び（Ｉｂ）のアミノ−ｓ−トリアジンの微生
物学的全分解に関し、次の微生物の組合わせた使用によ
って主としてバイオマスに分解される。
２基であシ、そしてＲ２が水素、又は４個以下の炭素原
子を含有する脂肪族もしくは脂環族炭化水素基である式
（Ｉａ）及び（Ｉｂ）のアミノ−ｓ−トリアジンの微生
物学的全分解に関し、次の微生物の組合わせた使用によ
って主としてバイオマスに分解される。
（ａ） ロドコッカス・コラ＋） ヌスＮＲＲＬ Ｂ
−１５４４４；及び （ｂ） シー−トモナスｓｐ、ＮＲＲＬ −Ｂ −１２
２２８、及び／又は （ｃ） シュードモナスｓｐ、 ＮＲＲＬ −Ｂ −１
２２２９；場合によってはさらに、 （ｄ） シュードモナスＮＲＲＬ Ｂ−１１３０８、及
び／又は （ｅ）スポロスリ、クス・センキーＮＲＲＬ Ｙ −１
１３０７゜ （ｂ）及び（Ｃ）のシー−トモナス菌株、及びこれらの
分解特性は公開されたＥＰ特特許出願４７７１跨イｊｌ
卦８ １／６ ２ ３ ６ ）から知られる。
−１５４４４；及び （ｂ） シー−トモナスｓｐ、ＮＲＲＬ −Ｂ −１２
２２８、及び／又は （ｃ） シュードモナスｓｐ、 ＮＲＲＬ −Ｂ −１
２２２９；場合によってはさらに、 （ｄ） シュードモナスＮＲＲＬ Ｂ−１１３０８、及
び／又は （ｅ）スポロスリ、クス・センキーＮＲＲＬ Ｙ −１
１３０７゜ （ｂ）及び（Ｃ）のシー−トモナス菌株、及びこれらの
分解特性は公開されたＥＰ特特許出願４７７１跨イｊｌ
卦８ １／６ ２ ３ ６ ）から知られる。
（ｄ）及び（ｅ）の微生物、及びその分解特性は、独国
出願公開第２９ ２３ ７９４号（又は対応する英国特
許第２０２５９１９号明細：評）から知られる。
出願公開第２９ ２３ ７９４号（又は対応する英国特
許第２０２５９１９号明細：評）から知られる。
後で記載するように、上記微生物の混合培養物は、個々
の微生物の各分解件能の和から予想されるのよシも大き
な分解結果を達成する。
の微生物の各分解件能の和から予想されるのよシも大き
な分解結果を達成する。
従って、この発明はさらに、水溶液例えば廃水中に存在
する式（Ｉａ）及び（Ｉｂ）のａ − トＩＪアジンと
ＮＲＲＬ Ｂ − １ ５ ４ ４ ４、又はその変異
株、及これらの変異株によシ、揚台によってはさらに！
−−ドモナスＮＲＲＬ Ｂ −１１３０８及び／又は乙
！ロスリックス・センギーＮＲＲＬ Ｙ−１１３０７、
又はこれらの変異株を加えて全分解するための混合微生
物法に関する。
する式（Ｉａ）及び（Ｉｂ）のａ − トＩＪアジンと
ＮＲＲＬ Ｂ − １ ５ ４ ４ ４、又はその変異
株、及これらの変異株によシ、揚台によってはさらに！
−−ドモナスＮＲＲＬ Ｂ −１１３０８及び／又は乙
！ロスリックス・センギーＮＲＲＬ Ｙ−１１３０７、
又はこれらの変異株を加えて全分解するための混合微生
物法に関する。
式（Ｉａ）及び式（Ｉｂ）の両方の１１−トリアジン誘
導体を含有する廃水を処理するためにロドコッカスと２
種類のシー−トモナス菌株の内の少なくとも１種類とを
好気的条件下で組合わせて用いるこの発明の方法により
、前記化合物が全体的に分解され、そしてバイオマスの
形成に使用される。
導体を含有する廃水を処理するためにロドコッカスと２
種類のシー−トモナス菌株の内の少なくとも１種類とを
好気的条件下で組合わせて用いるこの発明の方法により
、前記化合物が全体的に分解され、そしてバイオマスの
形成に使用される。
ＮＲＲＬ Ｂ−１２２２９は、この発明の方法において
式（ｌａ）及び／又は（Ｉｂ）の化合物を含有する水溶
液の微生物学的浄化のために使用され、この方法１５４
４４又はこの菌株から誘導された変異株、び／又はシー
−トモナスｓｐ、 ＮＲＲＬ Ｂ−１２２２９、又はこ
れらのバイオモスを生産することができる変異株を、増
殖促進無機塩の存在下で、約２０℃〜４０℃の範囲の温
度で、約６〜８．５の範囲のＰ［］において増殖せしめ
、そして所望によシ前記バイオマスを分離することを含
んで成る。
式（ｌａ）及び／又は（Ｉｂ）の化合物を含有する水溶
液の微生物学的浄化のために使用され、この方法１５４
４４又はこの菌株から誘導された変異株、び／又はシー
−トモナスｓｐ、 ＮＲＲＬ Ｂ−１２２２９、又はこ
れらのバイオモスを生産することができる変異株を、増
殖促進無機塩の存在下で、約２０℃〜４０℃の範囲の温
度で、約６〜８．５の範囲のＰ［］において増殖せしめ
、そして所望によシ前記バイオマスを分離することを含
んで成る。
水溶液を処理するための方法において、上記の微生物は
、酸素を消費しながら、これらの溶液中に存在する式（
Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）の化合物を分解する。これら
の化合物はまた、飽イロまでの礁度において溶液中に存
在することができよう。
、酸素を消費しながら、これらの溶液中に存在する式（
Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）の化合物を分解する。これら
の化合物はまた、飽イロまでの礁度において溶液中に存
在することができよう。
溶液の発酵処理のために、緩衝液、例えば燐酸緩衝液、
又は塩基水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液もしく
は水酸化カリウム水溶液の添加によシ、ＰＩ４を、約６
〜８の範囲、好ましくは７に調整する。
又は塩基水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液もしく
は水酸化カリウム水溶液の添加によシ、ＰＩ４を、約６
〜８の範囲、好ましくは７に調整する。
微生物の増殖は、ある種の塩、例えばアルカリ金ｒＡ（
Ｋ、Ｎａ）、アルカリ土類金属（Ｃａ、Ｍｇ）又は遷移
金属（Ｆｅ）の？＋ｉｉｊ酸塩又は燐酸塩、さらにはア
ルカリ金属の硼酸塩又はモリブデン酸塩の存在により促
進される。
Ｋ、Ｎａ）、アルカリ土類金属（Ｃａ、Ｍｇ）又は遷移
金属（Ｆｅ）の？＋ｉｉｊ酸塩又は燐酸塩、さらにはア
ルカリ金属の硼酸塩又はモリブデン酸塩の存在により促
進される。
好ましい無機塩は例えば、燐酸水素二ナトリウム又は燐
酸水素二カリウム、燐酸水素−ナトリウム又は燐酸水素
−カリウム、硫酸マグネシウム及び硫酸鉄、並びに塩化
カリウム及び塩化カルシウムである。硫酸亜鉛、硫酸マ
ンガン及び硫酸銅、モリブデン酸ナトリウム、及び？ラ
ックスを少量追加的に加えることができる。４％以下に
おける他の塩（例えば、アルカリ金属塩化物）の存在は
分解を妨害しない。
酸水素二カリウム、燐酸水素−ナトリウム又は燐酸水素
−カリウム、硫酸マグネシウム及び硫酸鉄、並びに塩化
カリウム及び塩化カルシウムである。硫酸亜鉛、硫酸マ
ンガン及び硫酸銅、モリブデン酸ナトリウム、及び？ラ
ックスを少量追加的に加えることができる。４％以下に
おける他の塩（例えば、アルカリ金属塩化物）の存在は
分解を妨害しない。
式（Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）のトリアジン誘導体を含
有する水溶液の浄化のために、炭素源、例えばグリセリ
ン、酢酸又はエタノールが、溶液の資化性炭素金貸が低
いために溶液に加えられる。
有する水溶液の浄化のために、炭素源、例えばグリセリ
ン、酢酸又はエタノールが、溶液の資化性炭素金貸が低
いために溶液に加えられる。
培養物の増殖は、これらの培地中好気的栄件下で、例え
ば酸素又は空気の雰囲気中で、すなわち振とうフラスコ
又は発酵槽を振とうし又は攪拌すすることによって行わ
れる。
ば酸素又は空気の雰囲気中で、すなわち振とうフラスコ
又は発酵槽を振とうし又は攪拌すすることによって行わ
れる。
培養物の増殖は、例えば栄養溶液の一回添加もしくは反
復添加によシ回分的に、又は栄養溶液の連続添加によシ
連続的に行うことができる。上記の条件が保持される限
シ、反応容器の大きさは反応経にとって重要ではない。
復添加によシ回分的に、又は栄養溶液の連続添加によシ
連続的に行うことができる。上記の条件が保持される限
シ、反応容器の大きさは反応経にとって重要ではない。
まず、例えば液体培地において１又は複数の前培養物を
用意し、そして次にこの前培養物を主培養培地に接種す
ることによって、複数段階において培養物を増殖せしめ
るのが好ましい。前培養物は、例えばスラント寒天上に
保持されていた該当する微生物の細胞材料を含有するサ
ンプルを式（Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）のｓ−トＩ７ア
ジンを含有する無菌溶故に移し、そしてとのバッチを２
８℃〜３０℃にて数日山］インキーベートすることによ
って調製することができる。新鮮な栄養溶液にこの第１
前培養物を接ねし、そしてこのバッチを同じは度で再度
インキ−ベートスル。
用意し、そして次にこの前培養物を主培養培地に接種す
ることによって、複数段階において培養物を増殖せしめ
るのが好ましい。前培養物は、例えばスラント寒天上に
保持されていた該当する微生物の細胞材料を含有するサ
ンプルを式（Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）のｓ−トＩ７ア
ジンを含有する無菌溶故に移し、そしてとのバッチを２
８℃〜３０℃にて数日山］インキーベートすることによ
って調製することができる。新鮮な栄養溶液にこの第１
前培養物を接ねし、そしてこのバッチを同じは度で再度
インキ−ベートスル。
発酵中における増殖経過は、培養液中のｓ−トリアジン
の９Ｍの低下を測定することによシ、又は該当する菌株
の増殖の参照組として役立つ蛋白質濃度を測定すること
によシ分析的に、あるいは生成したバイオマスの重量に
基いて重量測定的に追跡することができる。
の９Ｍの低下を測定することによシ、又は該当する菌株
の増殖の参照組として役立つ蛋白質濃度を測定すること
によシ分析的に、あるいは生成したバイオマスの重量に
基いて重量測定的に追跡することができる。
バイオマスは、ヨーロッパ特許明細書第１０２４３号に
記載されている多数の方法のいずれかによ多処理し、そ
して汚染金属イオンを含有しない高品質の肥料に変える
ことができる。
記載されている多数の方法のいずれかによ多処理し、そ
して汚染金属イオンを含有しない高品質の肥料に変える
ことができる。
この文脈において、バイオマスとは、生存状態、例えば
複製もしくは休止状態、部分的もしくは完全な死滅の状
態、又は酵素的分解もしくは外来生物による分解の状態
にあるすべての細胞系でちって、この発明の微生物に基
礎を置く系であると定義される。
複製もしくは休止状態、部分的もしくは完全な死滅の状
態、又は酵素的分解もしくは外来生物による分解の状態
にあるすべての細胞系でちって、この発明の微生物に基
礎を置く系であると定義される。
この発明の方法によって祷られる限定さｆＬだそして再
現性ある組成のバイオマスは、例えば動物飼料添加物と
して使用することができる。記載するように、バイオマ
スはまた懸濁液として使用することができ、あるいは、
例えば脱水及び殺菌の後に肥料に加工することができる
。バイオマスはまた、例えば発酵塔での嫌気的発酵によ
シ、高熱含ｂｔのバイオマス（組成：約７０係のメタン
、２９チの二酸化炭素、及び１チの水素；熱含量：約５
５００〜６５００ ｋａｒｆｌ／ｍ ）の製造のための
出発材料としても使用することができる。バイオガス生
産からの残渣（スラッジ）もまた、もとのバイオマスに
比べて窒素が非常に鑓縮されている高品質の肥料である
。
現性ある組成のバイオマスは、例えば動物飼料添加物と
して使用することができる。記載するように、バイオマ
スはまた懸濁液として使用することができ、あるいは、
例えば脱水及び殺菌の後に肥料に加工することができる
。バイオマスはまた、例えば発酵塔での嫌気的発酵によ
シ、高熱含ｂｔのバイオマス（組成：約７０係のメタン
、２９チの二酸化炭素、及び１チの水素；熱含量：約５
５００〜６５００ ｋａｒｆｌ／ｍ ）の製造のための
出発材料としても使用することができる。バイオガス生
産からの残渣（スラッジ）もまた、もとのバイオマスに
比べて窒素が非常に鑓縮されている高品質の肥料である
。
次に、この発明を例によシ説明する。
株の微生物の１サンプル金、０．５ｍＭの２−アミノ−
４−エテルアミノ−６−クロロ−５−）！ｊアジンを含
む栄養溶液３ｍｌを収容する試験管に接種し、そしてパ
ッチを３０℃、４ ｒｐｓにて９６時間インキュベート
する。この前培養物１ｍｌを、０．５ｍＲ（の２−アミ
ノ−４−エチルアミノ−６−クロロ−５−）Ｊアジンを
含有する栄養溶液１００ｍ１を収容する第２の振とりビ
ンに接移し、そしてバッチを２８℃、４ ｒｐｓにて９
６時間インキ−ベートする。
４−エテルアミノ−６−クロロ−５−）！ｊアジンを含
む栄養溶液３ｍｌを収容する試験管に接種し、そしてパ
ッチを３０℃、４ ｒｐｓにて９６時間インキュベート
する。この前培養物１ｍｌを、０．５ｍＲ（の２−アミ
ノ−４−エチルアミノ−６−クロロ−５−）Ｊアジンを
含有する栄養溶液１００ｍ１を収容する第２の振とりビ
ンに接移し、そしてバッチを２８℃、４ ｒｐｓにて９
６時間インキ−ベートする。
チルアミノ−６−クロロ−ｓ−トリアジン実験室発酵槽
に、１０ノの無殺菌の、又は殺菌した（１２０℃にて２
０分間殺菌）栄養溶液（０，５ｍＭの２−アミノ−４−
エチルアミノ−６−クロロ−ｓ−トリアジンを含有する
）を仕込む。
に、１０ノの無殺菌の、又は殺菌した（１２０℃にて２
０分間殺菌）栄養溶液（０，５ｍＭの２−アミノ−４−
エチルアミノ−６−クロロ−ｓ−トリアジンを含有する
）を仕込む。
ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬＢ−１５４４４の第
２前培養約５００ｍ／＋を含有するサンプルを加え、そ
して次の条件を保持する。ＰＨ７（これは、４Ｎ水酸化
ナトリウム水后液及びＩＮ塩酸と共に３；’を拌するこ
とによって保持する）；温度２８℃；空気添加速度０．
２６１／分。菌株は、唯一の窒素源としての純粋な２−
アミノ−４−エチルアミノ−６−クロロ−５−）リアジ
ンで増殖する。約２００時間後、５−ｔｌＪアジンが完
全に分解される。得られたバイメマスは、単一細胞の混
合物又は種々のサイズの凝集体の形であシ、そして沈降
又は遠心分離により分離することができる。
２前培養約５００ｍ／＋を含有するサンプルを加え、そ
して次の条件を保持する。ＰＨ７（これは、４Ｎ水酸化
ナトリウム水后液及びＩＮ塩酸と共に３；’を拌するこ
とによって保持する）；温度２８℃；空気添加速度０．
２６１／分。菌株は、唯一の窒素源としての純粋な２−
アミノ−４−エチルアミノ−６−クロロ−５−）リアジ
ンで増殖する。約２００時間後、５−ｔｌＪアジンが完
全に分解される。得られたバイメマスは、単一細胞の混
合物又は種々のサイズの凝集体の形であシ、そして沈降
又は遠心分離により分離することができる。
例３． ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬＢ −１５
４４４の培養物の増殖による２−アはノー４−エロドコ
ッカス・コラリヌスＮＲＲＬＢ−１５４４４株のサンプ
ルを基礎寒天上のスラント寒天培養から取り、そして次
の組成を有する増殖培地に接種する。
４４４の培養物の増殖による２−アはノー４−エロドコ
ッカス・コラリヌスＮＲＲＬＢ−１５４４４株のサンプ
ルを基礎寒天上のスラント寒天培養から取り、そして次
の組成を有する増殖培地に接種する。
燐酸カリウム緩衝剤ＰＨ７，３ｌ ＯｍＭ硫酸マグネシ
ウム七水和物 ０．２５ｍＭ（１００１ｒｖｌの塩化カ
ルシウム水和物を補充） グリセリン ｌＱｍＭ ２−アミノ−４−エチルアミノ−６−２，５ｍＭクロロ
−ｓ−トリアジン この培地６０ゴずつを５００罰のエルレンマイヤーフラ
スコ中ロータリーセーカ−（２〜３ｒｐｓ）上で、３０
℃にて７５時間培養する。２４′時間ごとにす／グルを
採取し、そして蛋白質含量の濁度及び窒素源の儂度を測
定する。
ウム七水和物 ０．２５ｍＭ（１００１ｒｖｌの塩化カ
ルシウム水和物を補充） グリセリン ｌＱｍＭ ２−アミノ−４−エチルアミノ−６−２，５ｍＭクロロ
−ｓ−トリアジン この培地６０ゴずつを５００罰のエルレンマイヤーフラ
スコ中ロータリーセーカ−（２〜３ｒｐｓ）上で、３０
℃にて７５時間培養する。２４′時間ごとにす／グルを
採取し、そして蛋白質含量の濁度及び窒素源の儂度を測
定する。
結果
蛋白質ｙ１モル基質 ３９
窒素資化モル１モル基質 １
蛋白質ｇ１モルＮ ３９
分解化合物モル１モル基質 ０−９８
ＮＲＲＬＢ−１５４４４の分解特性を試験するために窒
素源として他の９ ＋ ） ＩＪアジン誘導体を使用す
る。示されているように、ｓ−トリアジン誘導体は部分
的に、又は完全に（＊）、すなわち実質上Ｃｔ−とバイ
オマスとに分解される。この第２の場合において、「ｎ
ｄ」（検出されず）が表中の最後の列に存在する。
素源として他の９ ＋ ） ＩＪアジン誘導体を使用す
る。示されているように、ｓ−トリアジン誘導体は部分
的に、又は完全に（＊）、すなわち実質上Ｃｔ−とバイ
オマスとに分解される。この第２の場合において、「ｎ
ｄ」（検出されず）が表中の最後の列に存在する。
ｓ−トリアジン誘導体について次の略号を用いる。
ＥＯＡＴ ＝ ２−エチルアミノ−４−ヒドロキシ−６
−アミ／−ｓ−トリアジ：ｙ （ＥＯＯＴに分解される
）； ｌ０ＡＴ ＝ ２−イソプロピルアミノ−４−ヒドロキ
シ−６−アミノ−５−）リアジン （１００Ｔに分解される）； ＥＯＯＴ ＝ ２−エチルアミノ−４，６−シヒドロキ
シーｓ−）リアジン； ｌ００Ｔ ＝ ２−インプロビルアミノ−４，６−シヒ
ドロキシーｓ−トリアジン； ＡＡＡＴ（＊） ＝メラミン（２，４，ａ−トリアミノ
−８−トリアジン）； ０ＡＡＴ（＊） ＝ ２−ヒドロキシ−４，６−ジアミ
ツーｓ−トリアジン（アンメリン）； ００ＡＴ（＊） ＝ ２ 、４−ジヒドロキシ−６−ア
ミノ−Ｓ−トリアジン（アンメリド）； ０００Ｔ（＊） ＝シアヌール酸（２，４，６−ドリヒ
ドロキシーｓ−トリアジン）。
−アミ／−ｓ−トリアジ：ｙ （ＥＯＯＴに分解される
）； ｌ０ＡＴ ＝ ２−イソプロピルアミノ−４−ヒドロキ
シ−６−アミノ−５−）リアジン （１００Ｔに分解される）； ＥＯＯＴ ＝ ２−エチルアミノ−４，６−シヒドロキ
シーｓ−）リアジン； ｌ００Ｔ ＝ ２−インプロビルアミノ−４，６−シヒ
ドロキシーｓ−トリアジン； ＡＡＡＴ（＊） ＝メラミン（２，４，ａ−トリアミノ
−８−トリアジン）； ０ＡＡＴ（＊） ＝ ２−ヒドロキシ−４，６−ジアミ
ツーｓ−トリアジン（アンメリン）； ００ＡＴ（＊） ＝ ２ 、４−ジヒドロキシ−６−ア
ミノ−Ｓ−トリアジン（アンメリド）； ０００Ｔ（＊） ＝シアヌール酸（２，４，６−ドリヒ
ドロキシーｓ−トリアジン）。
以下余白
下の例５において示すように、Ｒｈ、コラリヌスＮＲＲ
ＬＢ−１５４４４は式（Ｉｃ）の２−アルキルアミノ−
４，６−シヒドロキシーｓ−トリアジ／を分解すること
ができず、２−クロロ−４−アミノ−６−アルキルアミ
ノ−ｓ−トリアジン誘導体の分解はこの段階で停止する
が、この方法は、この微生物と、窒素源として上記のｓ
−トリアジン誘導体を資化することができる他の微生
物との組合わせを用いることによシ、式（Ｉａ）及び／
（Ｉｂ）のｓ −トリアジン誘導体の全分解のだめの
非電に効率的な方法に転換することができる。これによ
って、別々に９．ｉ用した微生物の個々の値から予想さ
れたものよシ一層良好な分解結果が達成される。
ＬＢ−１５４４４は式（Ｉｃ）の２−アルキルアミノ−
４，６−シヒドロキシーｓ−トリアジ／を分解すること
ができず、２−クロロ−４−アミノ−６−アルキルアミ
ノ−ｓ−トリアジン誘導体の分解はこの段階で停止する
が、この方法は、この微生物と、窒素源として上記のｓ
−トリアジン誘導体を資化することができる他の微生
物との組合わせを用いることによシ、式（Ｉａ）及び／
（Ｉｂ）のｓ −トリアジン誘導体の全分解のだめの
非電に効率的な方法に転換することができる。これによ
って、別々に９．ｉ用した微生物の個々の値から予想さ
れたものよシ一層良好な分解結果が達成される。
基礎寒天上のスラント寒天培養物からＲｈ、コラリヌス
ＮＲＲＬ Ｂ−１５４４４、及びシー−トモナスａｐ、
ＮＲＲＬ Ｂ−１２２２８のサンプルｒ取り、そして
次の組成の増殖培地に一緒に接種する。
ＮＲＲＬ Ｂ−１５４４４、及びシー−トモナスａｐ、
ＮＲＲＬ Ｂ−１２２２８のサンプルｒ取り、そして
次の組成の増殖培地に一緒に接種する。
燐酸カリウム緩衝剤ｐＨ７，３１５ｍＭ硫酸マグネシウ
ム七水和物 ０．２５ｍＭＰｆｅｎｎｉｇ及びＬｉｐｐ
ｅｒｔの微量 ５ ｍ１７１元素溶液（Ａｒｃ、Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌ、 ５５ ＋２４６、１９６６ ）（１０
０ｍ９／ｌの塩化カルシウムニ水和物を補充） グリセリン １０ｍＭ 乳酸 １０ｍＭ ２−アミノ−４−エチルアミノ−６−２，５ｍＭクロロ
−８−トリアジン（ＣＥＡＴ） この培養液の（３Ｑｍｌずつｔ、５００ｍ１のエルレン
マイヤーフラスコ中ロータリーセーカ−（２〜３ｒｐｍ
）上で、３０℃にて７５時間培養する。２４時間ごと
にサンプルを採シ、そして蛋白質含量の濁度、及び屋素
踪の濃度をＩ１１定する。
ム七水和物 ０．２５ｍＭＰｆｅｎｎｉｇ及びＬｉｐｐ
ｅｒｔの微量 ５ ｍ１７１元素溶液（Ａｒｃ、Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌ、 ５５ ＋２４６、１９６６ ）（１０
０ｍ９／ｌの塩化カルシウムニ水和物を補充） グリセリン １０ｍＭ 乳酸 １０ｍＭ ２−アミノ−４−エチルアミノ−６−２，５ｍＭクロロ
−８−トリアジン（ＣＥＡＴ） この培養液の（３Ｑｍｌずつｔ、５００ｍ１のエルレン
マイヤーフラスコ中ロータリーセーカ−（２〜３ｒｐｍ
）上で、３０℃にて７５時間培養する。２４時間ごと
にサンプルを採シ、そして蛋白質含量の濁度、及び屋素
踪の濃度をＩ１１定する。
結果
Ｎ源 （ＪＡＴ
蛋白質ｇ１モル基質 ２１５
窒素資化モル１モル基質 ５
蛋白＠Ｅ１１モルＮ ４３
分解化合物モル１モル基質 ｎｄ（１）Ｎ源（結果）ｎ
ｄ（１） 注（１） ｎｄは検出されなかったことを示す。
ｄ（１） 注（１） ｎｄは検出されなかったことを示す。
特許出願人
チバーガイギー アクチェンケ”Ｍ）レンヤ７ト特許出
願代理人 プト理士 青 木 朗 弁理士西舘和之 弁理士 福 本 績 弁理士 山 口 昭 之 弁理士 凸 、ｈ イ艮 乞
願代理人 プト理士 青 木 朗 弁理士西舘和之 弁理士 福 本 績 弁理士 山 口 昭 之 弁理士 凸 、ｈ イ艮 乞
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、微生物ロドコッカス・コラリヌス （Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕａ ａｏｒａｌｌｉｎｕｓ ）
ＮＲＲＬ Ｂ−１５４４４゜２、次の式（Ｉａ）及び
／又は（Ｉｂ）、（式中、Ｒ１は塩素原子、又はＮＨ２
基であシ；そしてＲ２は水素、又は４イ１以下の炭素原
子を含有する脂肪族もしくは脂環族炭化水床基である、
）で表わされるｓ−トリアジン誘導体の水溶液中で、次
の式（Ｉ（り、 以下余白 ＨＯヘヘ１、−８２ （Ｉｃ） で着わされる対応するアンメリドを生成せしめることが
できる微生物ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ
−１５４４４及びその変異株。 ３、次の式ＣＩ＆）及び（Ｉｂ）、 Ｃ式中、 Ｒ１は塩素原子、又はＮＨ２基であシ；そし
てＲ２は水素、又は４個以下の炭素原子を含有する脂肪
族もしくは脂環族炭化水素基である、）で表わされるａ
”トリアジン誘導体を水溶液中で分解する方法であって
、該溶液を、好気的条件下、６〜８の範囲の声において
、ロドコッカス・コラリヌスＮＲＲＬ Ｂ −１５４４
４株と接触せしめることを含んで成る方法。 ４、式（Ｉａ）及び（Ｉｂ）においてＲ２が水素、エチ
ル、イソプロピル、又はシクロプロピルである特許請求
の範囲第３項記載の方法。 ５、式（Ｉａ）中のＲ１が塩素原子である特許請求の範
囲第３項記載の方法。 ６、微生物の増殖を促進する無（残塩としてアルカリ金
属、アルカリ土類金属もしくは遷移金属の硫酸塩もしく
は燐酸塩、又はモリブデン酸アルカリを使用する特許請
求の範囲第３項記載の方法。 ７、前記方法を２０℃〜４５℃の範囲の温度において実
施する特許請求の範囲第３項記載の方法。 ８、次の式（Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）、以下余白 （式中、工ζ１は塩素原子、又はＮ１（２詰でろシ；そ
してＲ２Ｆ、、ｉ水素、又は４個以下の炭素原子を含有
する脂肪族もしくは脂環族炭化水素基である、）で表わ
される化合物を含有する水溶液の微生物学的浄化方法で
あって、微生物ロドコッカス・コラリススＮＲＲＬ Ｂ
−１５４４４又は該微生９勿由米の変異株を、−シュ
ートモｆ ス、 ｓｐ （Ｐａｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓ
ｐ ）ＮＲｒ（Ｌ Ｂ −１２２２８及び／又はシー−
トモナス。 ｓｐ ＮＲＲＬ Ｂ −１２２２９、又はバイオマスを
生成せしめることができるこれらの変異株と共に、増殖
促進無機塩の存在下、約２０℃〜４０℃の範囲の温度及
び約６〜８．５の範囲の声において増殖せしめ、そして
所望によシ前記バイオマスを分離することを含んで成る
方法。 ９、前記方法を好気的条件下、６〜８のｐＨ範囲におい
て実施する特許請求の範囲第８項記載の方法。 １０、追加の微生物としてシュードモナスＮＲＲＬＢ−
１１３０８及び／又はスポロスリックス・センキー（５
ｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ５ｃｈｅｎｋｉｉ ） ＮＲＲＬ
Ｙ−１１３０７を用いる特許請求の範囲第８項記載の
方法。 １１、次の式（Ｉａ）及び／又は（Ｉｂ）、（式中、Ｒ
１は塩素原子、又はＮＨ２基であシ；そしてＲ２は水先
、又は４個以下の炭素原子を含有する脂肪族もしくは脂
環族炭化水素基である、）で表わされる８−トリアジン
銹等体を、次の式（） で表わされる対応するアンメリドに転換する能力を有す
るロドコッカス・コラリヌスの８−トリアジン分解変異
株の生物学的に純粋な培養物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH5968/83-0 | 1983-11-04 | ||
| CH596883 | 1983-11-04 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60114191A true JPS60114191A (ja) | 1985-06-20 |
Family
ID=4302270
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59230464A Pending JPS60114191A (ja) | 1983-11-04 | 1984-11-02 | 水溶液中のｓ‐トリアジン誘導体の分解方法 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4745064A (ja) |
| EP (1) | EP0141784B1 (ja) |
| JP (1) | JPS60114191A (ja) |
| AU (1) | AU3493084A (ja) |
| BR (1) | BR8405592A (ja) |
| DE (1) | DE3466668D1 (ja) |
| ES (2) | ES8602550A1 (ja) |
| ZA (1) | ZA848584B (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007282631A (ja) * | 2006-03-24 | 2007-11-01 | Kansai Paint Co Ltd | トリアジン系化合物の分解資化能を有する微生物 |
| JP2013215097A (ja) * | 2012-04-04 | 2013-10-24 | Toyota Central R&D Labs Inc | メラミン類の分解方法及びメラミン類分解微生物 |
| JP2016536986A (ja) * | 2013-11-21 | 2016-12-01 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． | アンメリンを製造するプロセス |
| JP2016539220A (ja) * | 2013-11-21 | 2016-12-15 | ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． | 難燃性ポリアミド組成物 |
| JP2018065634A (ja) * | 2016-10-17 | 2018-04-26 | 株式会社椿本チエイン | 可動体移動装置 |
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|---|---|---|---|---|
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| US5316939A (en) * | 1991-04-02 | 1994-05-31 | Kao Corporation | Microorganism belonging to the genus Rhodococcus, and process for producing sec-cedrenol and cedrenone |
| US5386079A (en) * | 1992-05-19 | 1995-01-31 | Ciba-Geigy Corporation | Wastewater treatment process |
| JP3308537B2 (ja) * | 1993-02-15 | 2002-07-29 | ムルザコフ、ボリス・ゲラシモヴィッチ | アシネトバクター種（ビコッカム）、アルスロバクター種及びロードコッカス種の菌株、ならびにそれら菌株を用いて油漏れ及び汚染を微生物学的に清浄化する方法 |
| US5429949A (en) * | 1994-02-22 | 1995-07-04 | Ohio State Research Foundation | S-triazine degrading bacteria |
| US5759800A (en) * | 1994-10-07 | 1998-06-02 | Boris Gerasimovich Murzakov | Strains of Acinetobacter species (bicoccum), Arthrobacter species, and Rhodococcus species, and a method for biological purification from oil spills and pollutions, using said strains |
| US6284522B1 (en) | 1995-10-23 | 2001-09-04 | Regents Of The University Of Minnesota | Isolated and purified DNA molecule and protein for the degradation of triazine compounds |
| GB2316408A (en) * | 1996-08-21 | 1998-02-25 | Secr Defence | Enzymatically-active material (ex. Rhodococcus rhodochrous) which releases nitrite from hexahydro-1,3,5-trinitro-1,3,5-triazine (RDX) |
| AU6029998A (en) | 1997-01-17 | 1998-08-07 | Regents Of The University Of Minnesota | Dna molecules and protein displaying improved triazine compound degrading ability |
| US6025152A (en) * | 1997-06-03 | 2000-02-15 | Hiatt; William N. | Denitrifying bacterial preparation and method |
| WO2001055409A2 (en) * | 2000-01-25 | 2001-08-02 | Regents Of The University Of Minnesota | Microbes and methods for remediation |
| CN105920773B (zh) * | 2016-04-26 | 2018-11-20 | 安徽农业大学 | 一种用于降解三嗪类除草剂的菌剂及制备方法 |
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|---|---|---|---|---|
| US3926795A (en) * | 1974-05-23 | 1975-12-16 | Fmc Corp | Biological treatment of plant waste streams to remove cyanuric acid |
| CH638470A5 (de) * | 1978-06-15 | 1983-09-30 | Ciba Geigy Ag | Verfahren zum abbau von cyanursaeure. |
| US4415658A (en) * | 1980-09-10 | 1983-11-15 | Ciba-Geigy Corporation | Process for decomposing 2,4-dihydroxy-6-amino-s-triazine derivatives |
| GB2127006B (en) * | 1982-09-17 | 1985-10-16 | Fmc Corp | Biological decompostion of cyanuric acid |
-
1984
- 1984-10-26 US US06/665,408 patent/US4745064A/en not_active Expired - Fee Related
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- 1984-10-29 DE DE8484810524T patent/DE3466668D1/de not_active Expired
- 1984-11-01 BR BR8405592A patent/BR8405592A/pt unknown
- 1984-11-02 ES ES537312A patent/ES8602550A1/es not_active Expired
- 1984-11-02 ZA ZA848584A patent/ZA848584B/xx unknown
- 1984-11-02 AU AU34930/84A patent/AU3493084A/en not_active Abandoned
- 1984-11-02 JP JP59230464A patent/JPS60114191A/ja active Pending
-
1985
- 1985-08-30 ES ES546580A patent/ES8604310A1/es not_active Expired
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| ES8602550A1 (es) | 1985-12-16 |
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