JPS599157B2 - 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法Info
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- JPS599157B2 JPS599157B2 JP2675877A JP2675877A JPS599157B2 JP S599157 B2 JPS599157 B2 JP S599157B2 JP 2675877 A JP2675877 A JP 2675877A JP 2675877 A JP2675877 A JP 2675877A JP S599157 B2 JPS599157 B2 JP S599157B2
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Description
【発明の詳細な説明】
この発明は発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法に関
する。
する。
発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法においては、ｄ
−ビオテンもしくはｄ−ビオテン活性を有する物質（以
下ピオテンと記す）を培地に添加することが必要である
が、このビオテンの添加量が多い場合には、Ｌ−グルタ
ミン酸生産菌は旺盛に増殖するが、Ｌ−グルタミン酸の
収率が激減スることがよく知られている。
−ビオテンもしくはｄ−ビオテン活性を有する物質（以
下ピオテンと記す）を培地に添加することが必要である
が、このビオテンの添加量が多い場合には、Ｌ−グルタ
ミン酸生産菌は旺盛に増殖するが、Ｌ−グルタミン酸の
収率が激減スることがよく知られている。
又Ｌ−グルタミン酸生産に最も適した培地中のビオテン
量は通常の培地で２〜４μｆｆ／ｌであることが知られ
ている。
量は通常の培地で２〜４μｆｆ／ｌであることが知られ
ている。
これに対し、例えばビートモラッセス又はケーンモラツ
セス等の高濃度のビオチンを含有するものを炭素源とし
て使用する場合には、培地中に上記最適濃度よりも高い
濃度のビオテンが持込まれてしまうので、そのままでは
Ｌ−グルタミン酸の収率は著しく低《なってしまう。
セス等の高濃度のビオチンを含有するものを炭素源とし
て使用する場合には、培地中に上記最適濃度よりも高い
濃度のビオテンが持込まれてしまうので、そのままでは
Ｌ−グルタミン酸の収率は著しく低《なってしまう。
そこでこのような場合には、界面活性剤、抗生物質等の
ビオチン活性抑制剤が培地に添加されて、過剰量のビオ
テンによる弊害が取除かれることが行われている。
ビオチン活性抑制剤が培地に添加されて、過剰量のビオ
テンによる弊害が取除かれることが行われている。
本発明者らは以上のような従来のＬ−グルタミン酸発酵
方法を更に改良すべ《研究してきたが、その結果意外に
も、２０μ？／ｌという過剰のビオテンを含有するよう
な培地を用いてＬ−グルタミン酸発酵を行う場合に更に
ビオテンな培地に３０μグ／ｌ以上含有するように添加
すると共に、増殖初期ないし対数増殖期末期までに界面
活性剤よりなるビオテン抑制剤をビオテンの存在量に応
じて添加することにより、Ｌ−グルタミン酸の収率が著
しく向上し、しかも培養時間縦来法よりも著しく短時間
でよく、かつその場合、従来法ではビオテンの量に対す
る菌の生育とＬ−グルタミン酸生産量の関係が著しく敏
感であり、生育を制限した時にのみＬ−グルタミン酸が
生産されたが、本発明の方法によれば、ビオテンの添加
量を精細に調整することなくＬ−グルタミン酸の生産量
を高め得ることを知り、本発明を完成するに至った。
方法を更に改良すべ《研究してきたが、その結果意外に
も、２０μ？／ｌという過剰のビオテンを含有するよう
な培地を用いてＬ−グルタミン酸発酵を行う場合に更に
ビオテンな培地に３０μグ／ｌ以上含有するように添加
すると共に、増殖初期ないし対数増殖期末期までに界面
活性剤よりなるビオテン抑制剤をビオテンの存在量に応
じて添加することにより、Ｌ−グルタミン酸の収率が著
しく向上し、しかも培養時間縦来法よりも著しく短時間
でよく、かつその場合、従来法ではビオテンの量に対す
る菌の生育とＬ−グルタミン酸生産量の関係が著しく敏
感であり、生育を制限した時にのみＬ−グルタミン酸が
生産されたが、本発明の方法によれば、ビオテンの添加
量を精細に調整することなくＬ−グルタミン酸の生産量
を高め得ることを知り、本発明を完成するに至った。
本発明の方法で使用される培地はビオテンを２０μグ／
ｌ以下含むようなものなら全て用いられ、例えば、ビー
トモラツセス、殿粉糖化液等が好ましく用いられるが、
グルコースとビテオン含有物質、例えばビートモラツセ
ス、ケーンモラツセス、殿粉糖化液を混じて２０μ′？
／ｌ以下の量に調節したものでも用い得ることは言うま
でもない。
ｌ以下含むようなものなら全て用いられ、例えば、ビー
トモラツセス、殿粉糖化液等が好ましく用いられるが、
グルコースとビテオン含有物質、例えばビートモラツセ
ス、ケーンモラツセス、殿粉糖化液を混じて２０μ′？
／ｌ以下の量に調節したものでも用い得ることは言うま
でもない。
またビオテン含有量の多い原料を糖濃度を低くしてフィ
ーデイング法によって糖を補充していくことも可能であ
る。
ーデイング法によって糖を補充していくことも可能であ
る。
使用する窒素源としては通常の炭水化物を原料とするＬ
−グルタミン酸醗酵に使用する原料例えば硫安、アンモ
ニウムガス、尿素等や補助的に使用される有機窒素源、
例えば味液（大豆蛋白加水分解液）、コーンステイープ
リカー等も使用できる。
−グルタミン酸醗酵に使用する原料例えば硫安、アンモ
ニウムガス、尿素等や補助的に使用される有機窒素源、
例えば味液（大豆蛋白加水分解液）、コーンステイープ
リカー等も使用できる。
炭素源、窒素源の他、無機物質として、りん酸塩、マグ
ネシウム塩及び鉄イオン、マンガンイオンの微量を添加
するのも通常のとおりである。
ネシウム塩及び鉄イオン、マンガンイオンの微量を添加
するのも通常のとおりである。
本発明において使用されるビオテン即ちビオテン活性を
有する物質とは、ｄ−ビオテン、デステオビオテン、７
・８−ジアミノペラルゴン酸、ｄービオテンスルフオン
キシド等であって、これらはサツカロミセス・セレビシ
エ（ Ｓ ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉ
ａｅ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ７ ７ ５ ４によるパイオ
アツセイによってビオテン活性を保有するものである。
有する物質とは、ｄ−ビオテン、デステオビオテン、７
・８−ジアミノペラルゴン酸、ｄービオテンスルフオン
キシド等であって、これらはサツカロミセス・セレビシ
エ（ Ｓ ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉ
ａｅ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ７ ７ ５ ４によるパイオ
アツセイによってビオテン活性を保有するものである。
定量方法は通常のパイオアツセイ法による（「生化学実
験講座」１３巻、ｐ３５１、東宗化学同人（１９７５）
） 本発明において使用される界面活性剤よりなるビオテン
活性抑制剤とは、過剰に存在するビオテンの作用を抑制
するために使用されるものであって、シュークロースモ
ノパルミテート、シュークロースモノステアレート、シ
ュークロースモノミリステート、ポリオキシエチレンソ
ルビタンーモノパルミテート、Ｎ−パルミトイルグルタ
ミン酸、ソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエテ
レングリコールモノパルミテート、パルミテン酸、ステ
アリン酸、ミＩＪステン酸等、高級飽和脂肪酸又はその
誘導体よりなる界面活性剤等がある。
験講座」１３巻、ｐ３５１、東宗化学同人（１９７５）
） 本発明において使用される界面活性剤よりなるビオテン
活性抑制剤とは、過剰に存在するビオテンの作用を抑制
するために使用されるものであって、シュークロースモ
ノパルミテート、シュークロースモノステアレート、シ
ュークロースモノミリステート、ポリオキシエチレンソ
ルビタンーモノパルミテート、Ｎ−パルミトイルグルタ
ミン酸、ソルビタンモノパルミテート、ポリオキシエテ
レングリコールモノパルミテート、パルミテン酸、ステ
アリン酸、ミＩＪステン酸等、高級飽和脂肪酸又はその
誘導体よりなる界面活性剤等がある。
培地中に存在する２０μｔ？／ｌ以下のビオテン濃度と
するときは、例えばビートモーラツセスの場合ｄ−ビオ
テン定量では通常２．０〜４．５μグ／１００グであり
、かつその糖濃度は５０重量％であるから、糖濃度１５
？／ｄｌの場合６〜１３，５μグ／ｌ、糖濃度１０グ／
ｄｌの場合４〜９．０μグ／ｌであり、ビオテンを３０
μグ／ｌ以上とするには糖濃度１ ５ ？／ｄｌのとき
２４〜１６．５μグ／ｌ以上を添加し、１ ０ ？／ｄ
ｌの場合２６〜２１μグ／ｌ以上を添加する。
するときは、例えばビートモーラツセスの場合ｄ−ビオ
テン定量では通常２．０〜４．５μグ／１００グであり
、かつその糖濃度は５０重量％であるから、糖濃度１５
？／ｄｌの場合６〜１３，５μグ／ｌ、糖濃度１０グ／
ｄｌの場合４〜９．０μグ／ｌであり、ビオテンを３０
μグ／ｌ以上とするには糖濃度１ ５ ？／ｄｌのとき
２４〜１６．５μグ／ｌ以上を添加し、１ ０ ？／ｄ
ｌの場合２６〜２１μグ／ｌ以上を添加する。
本発明で添加するビオテン抑制剤は増殖の初期に添加す
ることが好ましいが、対数増殖期の末期までに添加して
もその効果を発揮できる。
ることが好ましいが、対数増殖期の末期までに添加して
もその効果を発揮できる。
その添加量は実験によって定められ、もちろん存在する
ビオテンの量の多い程多く添加するが、その量は従来法
のように鋭敏な調整を必要としないのが特徴である。
ビオテンの量の多い程多く添加するが、その量は従来法
のように鋭敏な調整を必要としないのが特徴である。
なお、本発明に使用する細菌はいわゆるコリネフォーム
のビオテン要求性株であり、プレビバクテリウム属、コ
リネバクテリウム属等に多数知られている細菌類が用い
られ、例えば、プレビバクテリウム・フラバム（ Ｂｒ
ｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ ） ＡＴＣＣ
１ ４ ０ ６ ７、プレビバクテリウム・ラクトフ
エルメンタム（ Ｂｒｅｖｉ ，ｌａｃｔｏｆｅｒｍｅ
ｎｔｕｍ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ６ ９、プ
レビバクテリウム・デイバリカタム（Ｂｒｅｖｉ．ｄｅ
ｖａｒｉｃａｔｕｍ） ＡＴ Ｃ Ｃ ｌ ４ ０ ２
０、プレビバクテリウム・サツ力ロリテイカム（Ｂｒ
ｅｖｉ，ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ） Ａ Ｔ
Ｃ Ｃ １ ４ ０ ６ ６、及びコリネバクテリウム
・グルタミカム （ Ｃｏｉ７ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉ
ｃｕｍ） Ｃミクロコツカス゜グルタミカム（ Ｍｉｃ
ｒｏｃｏｃｃｕｓｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ） 〕ＡＴ
Ｃ Ｃ １ ３ ０ ３ ２及びコリネバクテリウム・
アセトアシドフイラム（ Ｃ ｏｒｙｎｅ ．ａｃｅｔ
ｏａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １
３ ８ ７ ０等が挙げられる。
のビオテン要求性株であり、プレビバクテリウム属、コ
リネバクテリウム属等に多数知られている細菌類が用い
られ、例えば、プレビバクテリウム・フラバム（ Ｂｒ
ｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ ） ＡＴＣＣ
１ ４ ０ ６ ７、プレビバクテリウム・ラクトフ
エルメンタム（ Ｂｒｅｖｉ ，ｌａｃｔｏｆｅｒｍｅ
ｎｔｕｍ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ６ ９、プ
レビバクテリウム・デイバリカタム（Ｂｒｅｖｉ．ｄｅ
ｖａｒｉｃａｔｕｍ） ＡＴ Ｃ Ｃ ｌ ４ ０ ２
０、プレビバクテリウム・サツ力ロリテイカム（Ｂｒ
ｅｖｉ，ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ） Ａ Ｔ
Ｃ Ｃ １ ４ ０ ６ ６、及びコリネバクテリウム
・グルタミカム （ Ｃｏｉ７ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉ
ｃｕｍ） Ｃミクロコツカス゜グルタミカム（ Ｍｉｃ
ｒｏｃｏｃｃｕｓｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ ） 〕ＡＴ
Ｃ Ｃ １ ３ ０ ３ ２及びコリネバクテリウム・
アセトアシドフイラム（ Ｃ ｏｒｙｎｅ ．ａｃｅｔ
ｏａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １
３ ８ ７ ０等が挙げられる。
次に、粗原料として甜菜糖蜜を用い、更にｄ−ビオテン
を添加した場合のし−グルタミン酸収率の向上及び培養
時間の短縮の実験結果を示す。
を添加した場合のし−グルタミン酸収率の向上及び培養
時間の短縮の実験結果を示す。
甜菜廃糖蜜を糖分として５０■／ｍｌ、ＫＨ２ＰＯ４１
．Ｏ■／ｍｌ， Ｍｇｓ０４− ７Ｈ２０ ｏ．４ｍ
ｙ／ｍｌ Ｉ味液」（大豆蛋白加水分解物）をＴ−Ｎと
して２４０μ？７ｍｌ含む培地を調整し、更に苛性ソー
ダ水溶液でｐＨ７．０に調整し、更に次の第１表の如く
ｄ−ビオテンを添加し、その３０ｍｌずつを５００１Ｌ
ｌ溶の振盪フラスコに分注し、１１５℃で１０分間加熱
殺菌した。
．Ｏ■／ｍｌ， Ｍｇｓ０４− ７Ｈ２０ ｏ．４ｍ
ｙ／ｍｌ Ｉ味液」（大豆蛋白加水分解物）をＴ−Ｎと
して２４０μ？７ｍｌ含む培地を調整し、更に苛性ソー
ダ水溶液でｐＨ７．０に調整し、更に次の第１表の如く
ｄ−ビオテンを添加し、その３０ｍｌずつを５００１Ｌ
ｌ溶の振盪フラスコに分注し、１１５℃で１０分間加熱
殺菌した。
この培地にプレビバクテ｝ リウム・ラクトフエルメン
タム（Ｂ ｒｅｖｉｂａｃ ｔｅｒ ｉｕｍｌａｃｔｏ
ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８
６ ９を接種し、往復振盪機により３１．５℃で培養を
行った。
タム（Ｂ ｒｅｖｉｂａｃ ｔｅｒ ｉｕｍｌａｃｔｏ
ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８
６ ９を接種し、往復振盪機により３１．５℃で培養を
行った。
なお、培養中は４５０■／ｍｌの尿素水を添加してｐｎ
６．５〜８．０に保った。
６．５〜８．０に保った。
培養開始後５時間にシュークロースモノパルミテートを
第１表の濃度になるように添加した結果を第１表に示す
。
第１表の濃度になるように添加した結果を第１表に示す
。
第１表に示した如く、粗原料として、生育促進因子を過
剰に含有する甜菜糖蜜を用いたし−グルタミン酸生産培
地にビオテン活性抑制剤を添加した条件下で、ｄ−ビオ
テンを添加した際、その濃度を増加してゆ《に伴い、顕
著なＬ−グルタミン酸収率の向上と共に培養時間も短縮
できることが明らかになった。
剰に含有する甜菜糖蜜を用いたし−グルタミン酸生産培
地にビオテン活性抑制剤を添加した条件下で、ｄ−ビオ
テンを添加した際、その濃度を増加してゆ《に伴い、顕
著なＬ−グルタミン酸収率の向上と共に培養時間も短縮
できることが明らかになった。
従来、Ｌ−グルタミン酸発酵におけるビオテンの作用と
して、一般的に菌体の生育を支配する栄養素としての役
割は知られていたが、第１表に示したようなｄ−ビオテ
ンの大量存在下でのし−グルタミン酸収率の向上、並び
に糖消費促進による培養時間の短縮という効果は本発明
者らが初めて見出した新しいビオテンの作用であり、本
発明によって、従来法のように単にビオテン過剰含有培
地にビオテン抑制物質を加えてＬ一グルタミン酸の生産
を調整するに止まらず、小過剰量のビオテン含量を一度
３０μ？／ｌ以上に高めておいて、ビオテン抑制物質を
加えることによってビオテンの添加量及びビオテン抑制
物質の量をそれ程鋭敏に調節することなく、糖原料から
のし−グルタミン酸への転換率の向上並びに糖消費速度
の向上による培養時間の著しい短縮をはかることが可能
となり、それだけ雑菌混入の機会も少く、安定した発酵
管理が可能となり、空気、攪拌、動力等の削減、設備の
回転の向上等の工業上の優れた効果をもたらすことがで
きたのである。
して、一般的に菌体の生育を支配する栄養素としての役
割は知られていたが、第１表に示したようなｄ−ビオテ
ンの大量存在下でのし−グルタミン酸収率の向上、並び
に糖消費促進による培養時間の短縮という効果は本発明
者らが初めて見出した新しいビオテンの作用であり、本
発明によって、従来法のように単にビオテン過剰含有培
地にビオテン抑制物質を加えてＬ一グルタミン酸の生産
を調整するに止まらず、小過剰量のビオテン含量を一度
３０μ？／ｌ以上に高めておいて、ビオテン抑制物質を
加えることによってビオテンの添加量及びビオテン抑制
物質の量をそれ程鋭敏に調節することなく、糖原料から
のし−グルタミン酸への転換率の向上並びに糖消費速度
の向上による培養時間の著しい短縮をはかることが可能
となり、それだけ雑菌混入の機会も少く、安定した発酵
管理が可能となり、空気、攪拌、動力等の削減、設備の
回転の向上等の工業上の優れた効果をもたらすことがで
きたのである。
次に実施例を挙げる。
実施例 １
甜菜廃糖蜜を用い、全糖として１５０■／ｍｌ、Ｋｎ２
ＰＯ４１． Ｏ Ｔｎ９／ｍｅ， ＮＨ４Ｈ２ ＰＯ４
１． Ｏ ｍ９７ｍｅ、ビタミンＢ１ １００μグ／ｌ
、（ ｐＨ ７．０ ）の組成を有する培地を調整し、
その３００７７Ｉｌずつを１１容ミニファーメンターに
張り込み、１１５℃１０分間加熱殺菌した。
ＰＯ４１． Ｏ Ｔｎ９／ｍｅ， ＮＨ４Ｈ２ ＰＯ４
１． Ｏ ｍ９７ｍｅ、ビタミンＢ１ １００μグ／ｌ
、（ ｐＨ ７．０ ）の組成を有する培地を調整し、
その３００７７Ｉｌずつを１１容ミニファーメンターに
張り込み、１１５℃１０分間加熱殺菌した。
この培地にプレビバクテリウム・ラクトフエルメンタＡ
（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｌａｃｔｏｆｅｒｍ
ｅｎｔｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ６ ９
を接種し、３１．５℃で通気攪拌培養を行った。
（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｌａｃｔｏｆｅｒｍ
ｅｎｔｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ６ ９
を接種し、３１．５℃で通気攪拌培養を行った。
なおビオチン活性抑制剤としては、シュークロースモノ
パルミティトを０．８■／ｍｇの濃度になるように培養
５時間で添加した。
パルミティトを０．８■／ｍｇの濃度になるように培養
５時間で添加した。
培養中除菌空気と共にアンモニアガスをファーメンター
に通じ培養液をｐＨ７．８に調節した。
に通じ培養液をｐＨ７．８に調節した。
蓄積したＬ−グルタミン酸を定量し、対糖収率を計算し
た。
た。
その結果４２時間で培養を終了し、対糖収率６０％のＬ
−グルタミン酸の蓄積であった。
−グルタミン酸の蓄積であった。
一方、培地にｄ−ビオテン１５０μ１／ｌ添加すると共
に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイトを３
１ｎ９／ＴＬｌの濃度になるように添加した。
に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイトを３
１ｎ９／ＴＬｌの濃度になるように添加した。
培養３１時間で終了し、対糖収率６６％のＬ−グルタミ
ン酸の蓄積であった。
ン酸の蓄積であった。
実施例 ２
殿粉糖化液を全糖として１ ０ ０ｍｇ／ｒｎｌ、ＫＨ
２ ＰＯ４ １− Ｏ Ｔｎ９ ／ｍｌ、ＭｇＳ０４
− ７ Ｈ２０ １．Ｏｍ９／ｍｌ， ＦｅＳ０４・７
Ｈ２０ ０． ０ １ ｍｙ／ｍｌ．、ＭｎＳ０４
・４Ｈ２００．０ １１１１９／ｒｎｌ１ＶＢ， １
０ ０μグ／ｌ、「味液」（大豆蛋白加水分解物）を
Ｔ一Ｎとして２４０μ？／ｍｌ，ビオテン１５μ？／ｌ
、尿素４．５η／ｍｌを含む培地を調製し、更にｐＨ７
．０にＮａＯＨで調整後、その２Ｏｒｎｌずつを５００
ｍｌ溶振盪フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱
殺菌した。
２ ＰＯ４ １− Ｏ Ｔｎ９ ／ｍｌ、ＭｇＳ０４
− ７ Ｈ２０ １．Ｏｍ９／ｍｌ， ＦｅＳ０４・７
Ｈ２０ ０． ０ １ ｍｙ／ｍｌ．、ＭｎＳ０４
・４Ｈ２００．０ １１１１９／ｒｎｌ１ＶＢ， １
０ ０μグ／ｌ、「味液」（大豆蛋白加水分解物）を
Ｔ一Ｎとして２４０μ？／ｍｌ，ビオテン１５μ？／ｌ
、尿素４．５η／ｍｌを含む培地を調製し、更にｐＨ７
．０にＮａＯＨで調整後、その２Ｏｒｎｌずつを５００
ｍｌ溶振盪フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱
殺菌した。
この培地にコリネバクテリウム・アセトアシドフイラム
（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍａｃｅｔｏａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ７
０を接種し、往復振盪機により３１．５℃で培養を行
った。
（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍａｃｅｔｏａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｍ ） Ａ Ｔ Ｃ Ｃ １ ３ ８ ７
０を接種し、往復振盪機により３１．５℃で培養を行
った。
培養５時間後、シュークロースモノパルミテイト０、８
■／廐を添加した。
■／廐を添加した。
なお培養中は４５０■／ｎｉｌの尿素水を適宜添加して
ｐＨ６．５〜８．０に保った。
ｐＨ６．５〜８．０に保った。
４２時間で発酵終了し、対糖収率４６％のＬ−グルタミ
ン酸の蓄積であった。
ン酸の蓄積であった。
一方、培地にｄ−ビオテン１００μ？／ｌ添加すると共
に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイトを４
■／ＴＬｌ！の濃度になるように添加した際は培養３４
時間で終了し、対糖収率４９％のし−グルタミン酸の蓄
積であづた。
に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイトを４
■／ＴＬｌ！の濃度になるように添加した際は培養３４
時間で終了し、対糖収率４９％のし−グルタミン酸の蓄
積であづた。
実施例 ３
主発酵用初発培地として、甜菜廃糖蜜を全糖として６
０”９／ｍｌ１ＫＨ２ＰＯ４ ２ｍｔｐ／ｍｌ，ＮＨ４
Ｈ２ＰＯ４２ ｍ９／ｍｅ、ＭｇＳ０４−７Ｈ２０
１．０１１１ｔ？／ｍｌ， ＶＢ１２ ０ ０ μ？／
ｌ （ ＰＨ ７．０ ）の組成を有する培地を調整し
、その３００ｍｌを１１容ミニジャーファーメンターに
張り込み、１２０℃、１０分間加熱殺菌した。
０”９／ｍｌ１ＫＨ２ＰＯ４ ２ｍｔｐ／ｍｌ，ＮＨ４
Ｈ２ＰＯ４２ ｍ９／ｍｅ、ＭｇＳ０４−７Ｈ２０
１．０１１１ｔ？／ｍｌ， ＶＢ１２ ０ ０ μ？／
ｌ （ ＰＨ ７．０ ）の組成を有する培地を調整し
、その３００ｍｌを１１容ミニジャーファーメンターに
張り込み、１２０℃、１０分間加熱殺菌した。
この培地にプレビバクテリウム・ラクトフエルメンタム
（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｌａｃｔｏｆｅｒｍｅ
ｎｔｕｍ） Ａ Ｊ ３ ６ １ ２ Ｆ Ｅ ＲＭ−
Ｐ２３０８（Ｎ−パルミトイル、Ｌ−グルタミン酸に対
して感受性を有する、特開昭５０−６４４８６）を接種
し、３１．５゜Ｃで通気攪拌培養を行った。
（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｌａｃｔｏｆｅｒｍｅ
ｎｔｕｍ） Ａ Ｊ ３ ６ １ ２ Ｆ Ｅ ＲＭ−
Ｐ２３０８（Ｎ−パルミトイル、Ｌ−グルタミン酸に対
して感受性を有する、特開昭５０−６４４８６）を接種
し、３１．５゜Ｃで通気攪拌培養を行った。
培養開始後５時間でシュークロースモノパルミテイトを
０．５ｍ９／ｍｌの濃度になるように添加した。
０．５ｍ９／ｍｌの濃度になるように添加した。
培養中は除菌空気と共にアンモニアガスをファーメンタ
ーに通じ、培養液をｐＨ７。
ーに通じ、培養液をｐＨ７。
８に調節し、かつ糖濃度を約４０ｍｔｙ／ｍｌに保つよ
うにあらかじめ加熱滅菌した糖濃度５００■／ｍｌの甜
菜廃糖蜜を連続的にフィードし、培養液中の総糖濃度が
１６０１ｎ９／ｍｌになった時点でフイードを打ち切っ
た。
うにあらかじめ加熱滅菌した糖濃度５００■／ｍｌの甜
菜廃糖蜜を連続的にフィードし、培養液中の総糖濃度が
１６０１ｎ９／ｍｌになった時点でフイードを打ち切っ
た。
その結果、４５時間で培養を終了し、対糖収率５９％の
Ｌ−グルタミン酸の蓄積であった。
Ｌ−グルタミン酸の蓄積であった。
一方、初発培地にｄ−ビオテン３００μｔ／ｌ添加する
と共に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイト
を２ｙｎｙ／ｍｌの濃度になるように添加した際は培養
３５時間で終了し、対糖収率６５％のＬ−グルタミン酸
の蓄積であった。
と共に、培養５時間後シュークロースモノパルミテイト
を２ｙｎｙ／ｍｌの濃度になるように添加した際は培養
３５時間で終了し、対糖収率６５％のＬ−グルタミン酸
の蓄積であった。
Claims (1)
- １ 炭水化物を主炭素源とする培地にＬ−グルタミン酸
生産能を有する細菌を培養し、培地中に生成蓄積したＬ
−グルタミン酸を採取してＬ−グルタミン酸を製造する
方法において、ビオテン活性を有する物質をｄ−ビオテ
ンとして２０μグ／ｌ以下の量含有する培地に、ビオテ
ン活性を有する物質をｄ−ビオテンとして３０μ？／ｌ
以上含有するように添加し、かつこの培地に培養当初な
いしは対数増殖期末期までに界面活性剤よりなるビオテ
ン活性抑制剤を添加することを特徴とする発酵法による
し−グルタミン酸の製造法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2675877A JPS599157B2 (ja) | 1977-03-10 | 1977-03-10 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
| ES467712A ES467712A1 (es) | 1977-03-10 | 1978-03-09 | Un metodo para producir acido l-glutamico por fermentacion. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2675877A JPS599157B2 (ja) | 1977-03-10 | 1977-03-10 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS53113086A JPS53113086A (en) | 1978-10-03 |
| JPS599157B2 true JPS599157B2 (ja) | 1984-02-29 |
Family
ID=12202169
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2675877A Expired JPS599157B2 (ja) | 1977-03-10 | 1977-03-10 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS599157B2 (ja) |
| ES (1) | ES467712A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MY113040A (en) * | 1994-02-24 | 2001-11-30 | Ajinomoto Kk | Novel gene derived from coryneform bacteria and use thereof |
-
1977
- 1977-03-10 JP JP2675877A patent/JPS599157B2/ja not_active Expired
-
1978
- 1978-03-09 ES ES467712A patent/ES467712A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS53113086A (en) | 1978-10-03 |
| ES467712A1 (es) | 1978-10-16 |
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