JPS5955834A - 消化管ホルモンの抽出方法 - Google Patents
消化管ホルモンの抽出方法Info
- Publication number
- JPS5955834A JPS5955834A JP57166489A JP16648982A JPS5955834A JP S5955834 A JPS5955834 A JP S5955834A JP 57166489 A JP57166489 A JP 57166489A JP 16648982 A JP16648982 A JP 16648982A JP S5955834 A JPS5955834 A JP S5955834A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- small intestine
- extraction
- acetic acid
- hormone
- gastrointestinal hormone
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、吐乳動物の小腸より消化管ホルモンを抽出す
る方法に関する。
る方法に関する。
従来より吐乳動物の小腸より消化管ホルモンを製造する
方法として種々のものが開示されてきた。
方法として種々のものが開示されてきた。
主
その小便なものは、抽出のための前処理、ずなわ ／″
３ら小腸中に共存する酵素をあらかじめ熱処理等によっ
て破壊し当該酵素による失活を防止するものであり９例
えば米国特許第３０１３９４４号および特公昭５３−９
９３１１号を挙げることができる。特に特公昭５３−９
９３１１号は酵素破壊のための熱処理によって消化管ホ
ルモン自体も失活するので、それを阻止する目的のため
に塩水溶液中で加熱する技術を開示しているのである。
３ら小腸中に共存する酵素をあらかじめ熱処理等によっ
て破壊し当該酵素による失活を防止するものであり９例
えば米国特許第３０１３９４４号および特公昭５３−９
９３１１号を挙げることができる。特に特公昭５３−９
９３１１号は酵素破壊のための熱処理によって消化管ホ
ルモン自体も失活するので、それを阻止する目的のため
に塩水溶液中で加熱する技術を開示しているのである。
さて、これら開示技術卆前記したように抽出のための前
処理に関するものであり、抽出方法自体については十分
な検討が加えられていない。例えば米国特許第３０１３
９４４号は抽出の条件として室温下金酢酸を使用するこ
とを開示しているし、また特公昭５３−９９３１１号は
９０〜９５°Ｃにおいて０．１規定酢酸を使用すること
を開示しているのであるが、いずれもそれぞれにおける
条件が最良のものであるか否かについては明瞭ではない
。
処理に関するものであり、抽出方法自体については十分
な検討が加えられていない。例えば米国特許第３０１３
９４４号は抽出の条件として室温下金酢酸を使用するこ
とを開示しているし、また特公昭５３−９９３１１号は
９０〜９５°Ｃにおいて０．１規定酢酸を使用すること
を開示しているのであるが、いずれもそれぞれにおける
条件が最良のものであるか否かについては明瞭ではない
。
かかる事情にかんがみ９本発明者は消化管ホルモンの抽
出のための最良の方法、すなわち、消化管ホルモンを高
純度、高収量において抽出することのできる方法につい
て検討をおこない、その結果、抽出にあたり酢酸濃度を
０．２乃至０．５規定とし。
出のための最良の方法、すなわち、消化管ホルモンを高
純度、高収量において抽出することのできる方法につい
て検討をおこない、その結果、抽出にあたり酢酸濃度を
０．２乃至０．５規定とし。
抽出温度を５０〜９０℃とすることによって所期の目的
が達成されることを知り９本発明を完成した。
が達成されることを知り９本発明を完成した。
ずなわぢ９本発明の目的は哺乳動物の小腸より酢酸を用
いて消化管ホルモンを高純度、高収量において抽出する
方法の提供であり、そのための技術手段として酢酸濃度
および抽出温度の最適条件を開示するものである。
いて消化管ホルモンを高純度、高収量において抽出する
方法の提供であり、そのための技術手段として酢酸濃度
および抽出温度の最適条件を開示するものである。
次に本発明の詳細な説明する。
本発明に係る消化管ホルモンとは具体的にはセクレヂン
、コレシストキニンパンクレオザイミン。
、コレシストキニンパンクレオザイミン。
バソアクディブインテスチナルペプタイドであるが、特
にセクレチンは本発明の主要な目的物質である。
にセクレチンは本発明の主要な目的物質である。
哺乳動物の小腸としては入手の容易おにび消化管ホルモ
ンを豊富に含有する点を考慮して２通常はブタ、ウシの
十二指腸を含む小腸−り部が使用される。
ンを豊富に含有する点を考慮して２通常はブタ、ウシの
十二指腸を含む小腸−り部が使用される。
本発明抽出方法を実施するにあたっては、哺乳動物の小
腸に対し直ちにこれをおこなってもよいが２例えば特公
昭５３−９９３１１号に開示されている技術に従い、あ
らかじめ塩水溶液中で加熱処理する前処理をおこなうの
が望ましい。また当該前処理後、直ちに本発明抽出方法
を実施してもよいが。
腸に対し直ちにこれをおこなってもよいが２例えば特公
昭５３−９９３１１号に開示されている技術に従い、あ
らかじめ塩水溶液中で加熱処理する前処理をおこなうの
が望ましい。また当該前処理後、直ちに本発明抽出方法
を実施してもよいが。
作業上の必要から、いったん凍結保存した後に。
解凍して実施してもよい。しかし、ここに記述した前処
理の実施の選択は自由であり、特に本発明を限定する要
件ではない。
理の実施の選択は自由であり、特に本発明を限定する要
件ではない。
本発明抽出方法における条件は酢酸濃度を０，２乃至０
，５規定とし、抽出温度を５０〜９０°Ｃとすることで
ある。抽出に要する時間は小腸の処理量によって適宜選
択されるが２通常は３０〜６０分がよい。
，５規定とし、抽出温度を５０〜９０°Ｃとすることで
ある。抽出に要する時間は小腸の処理量によって適宜選
択されるが２通常は３０〜６０分がよい。
しかし９本発明は当該抽出時間によって限定されない。
抽出の具体的な作業としては２例えば、前処理した小腸
ミンチをあらかじめ５０°〜９０°Ｃに加熱した０、２
乃至０．５規定の酢酸溶液中に投入し、３０〜６０分間
撹拌すればよい。特に、酢酸濃度はＯ０３規定。
ミンチをあらかじめ５０°〜９０°Ｃに加熱した０、２
乃至０．５規定の酢酸溶液中に投入し、３０〜６０分間
撹拌すればよい。特に、酢酸濃度はＯ０３規定。
抽出温度７０℃、抽出時間６０分は好ましい態様例であ
る。抽出が終了したら直ちに０〜１０°Ｃまで冷却し、
不溶物をｒ去すればよい。
る。抽出が終了したら直ちに０〜１０°Ｃまで冷却し、
不溶物をｒ去すればよい。
抽出後、抽出液から消化管ホルモンを即、部活製する後
処理については、従来公知の手段を常法により利用すれ
ばよい。
処理については、従来公知の手段を常法により利用すれ
ばよい。
例えば、カルボキシメチルセルロース、 ＱＡＥ−セフ
ァデックス、 ＤＥＡＥ−セファデックス等のイオン交
換樹脂による精製、塩化ナトリウノ・、硫酸アンモニウ
ム等による塩析、アセトン、メタノール。
ァデックス、 ＤＥＡＥ−セファデックス等のイオン交
換樹脂による精製、塩化ナトリウノ・、硫酸アンモニウ
ム等による塩析、アセトン、メタノール。
イソプロピルアルコール等による有機溶媒分画等の諸手
段を適宜組合わせて単離精製することができる。
段を適宜組合わせて単離精製することができる。
しかし、ここに記述した後処理の実施の選択は自由であ
り、特に本発明を限定する要件ではない。
り、特に本発明を限定する要件ではない。
本発明抽出方法によれば消化管ホルモンは熱による分解
と失活をまぬがれ、かつ酢酸溶液への移行が容易となる
ので、結果的には消化管ホルモンを高純度、高収量で抽
出することを可能にする。
と失活をまぬがれ、かつ酢酸溶液への移行が容易となる
ので、結果的には消化管ホルモンを高純度、高収量で抽
出することを可能にする。
以下に記載する実験例をもって本発明の詳細な説明する
。
。
実施例
試料と方法
豚の十二指腸を含む小腸」二部（幽門下２７７＋、）を
あらかじめ沸騰させた０、９％塩化す） ＩＪウム水溶
液に入れ、５分間煮沸した。このように処理した豚小腸
１１０１ｚをミンチした後、これを表１の抽出条件欄に
記載の各種条件において酢酸５（Ｍ’中に入れ１時間撹
拌して消化管ホルモンの抽出をおこなった。次いで室温
まで放冷した後、４６Ｃにて一夜放置した。
あらかじめ沸騰させた０、９％塩化す） ＩＪウム水溶
液に入れ、５分間煮沸した。このように処理した豚小腸
１１０１ｚをミンチした後、これを表１の抽出条件欄に
記載の各種条件において酢酸５（Ｍ’中に入れ１時間撹
拌して消化管ホルモンの抽出をおこなった。次いで室温
まで放冷した後、４６Ｃにて一夜放置した。
続いて、後記実験例１の分離精製の記載に従って分離精
製をおこない、得られた損消化管ホルモンを試料として
、そのうちの主要な成分であるセクレチンについて活性
を測定した。
製をおこない、得られた損消化管ホルモンを試料として
、そのうちの主要な成分であるセクレチンについて活性
を測定した。
（Ｃｒ１ｃｋ、 ｌ４ａｒｐｅｒ ａｎｄ Ｒａｐｅｒ
ｕｎｉｔ ） （Ｊ、 Ｐｈｙｓｉｏｌ。
ｕｎｉｔ ） （Ｊ、 Ｐｈｙｓｉｏｌ。
Ｖｏｌ、１１０ ａ９（１９５０）参照〕結果
結果を表１に示す。
表１
棒
表中、全活性とは煮沸処理した腸小腸１０ｈ＜ｔが閂か
らの収量を示す。また抽出条件において、 ｂｏｉｌの
場合は１０分間の撹拌にとどめた。
らの収量を示す。また抽出条件において、 ｂｏｉｌの
場合は１０分間の撹拌にとどめた。
表１より本発明抽出方法により消化管ホルモンが高純度
、高収枇で抽出されることが判明する。
、高収枇で抽出されることが判明する。
以−トに記載する実施例をもって本発明をさらに具体的
に説明する。
に説明する。
実施例１
豚の十二指腸を含む小腸」二部（幽門下２７７Ｌ）をあ
らかじめ沸騰させた０、９％塩化す） ＩＪウム水溶液
に入れ５分間煮沸した。このようにして処理した豚小腸
１０ｈｇをミンチした後、あらかじめ７０℃に加熱した
０、３規定酢酸５０Ｊ中に入れ、１時間撹拌して消化管
ホルモンの抽出を行なった。次いで室温まで放冷した後
４℃にて一夜放置した。続いて分離精製を以下のごとく
行なった。セライ）４００ｇを加え１紙にて固形物をｒ
去した。得られた微黄色澄明液を水で３倍に希釈した後
ｐＨを４．０に調整した。
らかじめ沸騰させた０、９％塩化す） ＩＪウム水溶液
に入れ５分間煮沸した。このようにして処理した豚小腸
１０ｈｇをミンチした後、あらかじめ７０℃に加熱した
０、３規定酢酸５０Ｊ中に入れ、１時間撹拌して消化管
ホルモンの抽出を行なった。次いで室温まで放冷した後
４℃にて一夜放置した。続いて分離精製を以下のごとく
行なった。セライ）４００ｇを加え１紙にて固形物をｒ
去した。得られた微黄色澄明液を水で３倍に希釈した後
ｐＨを４．０に調整した。
次いであらかじめ活性化したカルボキシメチルセルロー
ス６００ ｇを添加し４°Ｃで一夜放置した。カルボキ
シメチルセルロースをｒ取し、０．１規定塩酸１０．／
に懸濁し、吸着物を溶離させた。吸引ｒ過によりカルボ
キシメチルセルロースをｆ去し、Ｆ液に塩化ナトリウム
３．３ｋｇを加え４°Ｃで一夜放置した。次いで析出物
をＰ取し、微黄色ケーク４０．８゜を得た。
ス６００ ｇを添加し４°Ｃで一夜放置した。カルボキ
シメチルセルロースをｒ取し、０．１規定塩酸１０．／
に懸濁し、吸着物を溶離させた。吸引ｒ過によりカルボ
キシメチルセルロースをｆ去し、Ｆ液に塩化ナトリウム
３．３ｋｇを加え４°Ｃで一夜放置した。次いで析出物
をＰ取し、微黄色ケーク４０．８゜を得た。
かじめ沸騰させた水中に入れ５分間煮沸した。このよう
にして処理した豚小腸５ｋｇをミンチした後あらかじめ
６０℃に加熱した０、３規定酢酸２５１！中に入れ１時
間撹拌して消化管ホルモンの抽出を行なった。次いで４
℃にて一夜放置した。セライ） ２００ｇを加えて固形
物をゴ１去した。得られた微黄色澄明液にあらかじめ活
性化したカルボキシメチルセルｏ −ス０．９ｈｙ （
ｄｒｙ ３００ｇ）を添加し４℃で一夜放置した。カル
ボキシメチルセルロースを１取し、カルボキシメチルセ
ルロースを０．１規定塩酸１０Ｊに懸濁し、室温にて３
０分間撹拌して、吸着物を溶離させた。懸濁液を吸引ｐ
過し、Ｆ液に塩化ナトリウム３．０ｈａを加え４℃で一
夜放置した。次いで析出物をζ１取し黄色ケーク２７．
６．を得た。
にして処理した豚小腸５ｋｇをミンチした後あらかじめ
６０℃に加熱した０、３規定酢酸２５１！中に入れ１時
間撹拌して消化管ホルモンの抽出を行なった。次いで４
℃にて一夜放置した。セライ） ２００ｇを加えて固形
物をゴ１去した。得られた微黄色澄明液にあらかじめ活
性化したカルボキシメチルセルｏ −ス０．９ｈｙ （
ｄｒｙ ３００ｇ）を添加し４℃で一夜放置した。カル
ボキシメチルセルロースを１取し、カルボキシメチルセ
ルロースを０．１規定塩酸１０Ｊに懸濁し、室温にて３
０分間撹拌して、吸着物を溶離させた。懸濁液を吸引ｐ
過し、Ｆ液に塩化ナトリウム３．０ｈａを加え４℃で一
夜放置した。次いで析出物をζ１取し黄色ケーク２７．
６．を得た。
実施例３
豚の十二指腸を含む小腸上部（幽門下２７７Ｌ）をあら
かじめ沸騰させた０、９９６塩化ナトリウム水溶液中に
入れ５分間煮沸した。この豚小腸５ｈｇをミンチした後
、あらかじめ７０℃に加熱した０、２規定酢酸２５１中
に入れ、１時間撹拌して消化管ホルモンの抽出を行なっ
た。次いで室温まで放冷した後４°Ｃにて一夜放置した
。セライト２００ｇを加えｄｊ紙にて固形物を？Ｊｉ去
した。得られた微黄色澄明液にあらかじめ活性化したカ
ルボキシメチルセルロース０．９ｈａ （ｄｒｙ ３０
０ｇ）を添加し室温にて３０分間撹拌後４℃にて一夜放
置した。以下実施例２と同様の操作にてホルモンケーク
４ｏｇｇを得た。
かじめ沸騰させた０、９９６塩化ナトリウム水溶液中に
入れ５分間煮沸した。この豚小腸５ｈｇをミンチした後
、あらかじめ７０℃に加熱した０、２規定酢酸２５１中
に入れ、１時間撹拌して消化管ホルモンの抽出を行なっ
た。次いで室温まで放冷した後４°Ｃにて一夜放置した
。セライト２００ｇを加えｄｊ紙にて固形物を？Ｊｉ去
した。得られた微黄色澄明液にあらかじめ活性化したカ
ルボキシメチルセルロース０．９ｈａ （ｄｒｙ ３０
０ｇ）を添加し室温にて３０分間撹拌後４℃にて一夜放
置した。以下実施例２と同様の操作にてホルモンケーク
４ｏｇｇを得た。
特許出願人
工−ザイ株式会社
Claims (1)
- （１）吐乳動物の小腸から酢酸を用いて消化管ホルモン
を抽出するにあたり、当該酢酸の濃度を０．２乃至０．
５規定とし、抽出温度を５０〜９０°Ｃとすることを特
徴とする消化管ホルモンの抽出方法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57166489A JPS5955834A (ja) | 1982-09-27 | 1982-09-27 | 消化管ホルモンの抽出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57166489A JPS5955834A (ja) | 1982-09-27 | 1982-09-27 | 消化管ホルモンの抽出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5955834A true JPS5955834A (ja) | 1984-03-31 |
Family
ID=15832327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57166489A Pending JPS5955834A (ja) | 1982-09-27 | 1982-09-27 | 消化管ホルモンの抽出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5955834A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5399311A (en) * | 1977-02-10 | 1978-08-30 | Eisai Co Ltd | Method for preparing of alimentary canals hormones of degestive organs |
-
1982
- 1982-09-27 JP JP57166489A patent/JPS5955834A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5399311A (en) * | 1977-02-10 | 1978-08-30 | Eisai Co Ltd | Method for preparing of alimentary canals hormones of degestive organs |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3822348A (en) | Hormone-like substance having serum calcium reducing property | |
| JP3499789B2 (ja) | 魚ゼラチンの製造方法 | |
| SU1367837A3 (ru) | Способ получени средства, селективно тормоз щего рост или размножение нормальных и лейкемических клеток миелоидов | |
| JPS5955834A (ja) | 消化管ホルモンの抽出方法 | |
| Schryver et al. | The isolation of a product of hydrolysis of the proteins hitherto undescribed | |
| US4150117A (en) | Process for the preparation of gastrointestinal hormone | |
| JPH1129594A (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害物質、その製造方法およびそれを用いた血圧降下剤 | |
| CA1152894A (en) | Process for the production of new type of heparin-containing raw material | |
| US3262854A (en) | Method for the recovery of heparin | |
| JPS60181019A (ja) | ガングリオシドの抽出方法 | |
| JPH0367069B2 (ja) | ||
| US4394374A (en) | Thymus gland extracts | |
| US2085768A (en) | Method of separating and isolating the thyreotropic and the gonadotropic hormone of the anterior lobe of the hypophysis | |
| JPH0725877A (ja) | ヘミンとプロトポルフィリンジエステル及びプロトポルフィリンジナトリウム塩の製造法 | |
| US4518771A (en) | Process for the production of heparin-containing particulate products | |
| JPS6163247A (ja) | グロビンタンパク質の製造方法 | |
| JP5429468B2 (ja) | ポテトプロテインから粗チロシン又は粗ロイシンを分離する方法 | |
| SU633448A3 (ru) | Способ выделени белков | |
| SU377159A1 (ru) | Способ получения ингибитора протеаз | |
| JP2001112419A (ja) | Ｉｉ型コラーゲンの製造方法 | |
| SU1226807A1 (ru) | Способ получени 2-ацетокси-4 @ -хлор-3,5-дийодбензанилида | |
| SU733685A1 (ru) | Способ получени глюкуронидазы | |
| US2364852A (en) | Process for isolating the lactationpromoting hormone | |
| RU2224528C2 (ru) | Способ получения биологически активных пептидов каудальной нейросекреторной системы (кнсс) позвоночных | |
| SU878296A1 (ru) | Способ получени адипозина |