JPS59501950A - ゼノ−ルハブデイン抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ゼノールハブデイン抗生物質 技術分野 この発明は、抗生物質および殺菌剤に関する。そして、特に、める種の線虫と共 生する微生物から単離できる抗生物質および殺菌剤に関する。

背景技術 ヘテロルハビテイダエ（Ｈａ　ｔ　ｔｒｏｒｈａｈｉ　ｔ　ｉｄαり科およびス タイネルネマテイダエ（５ｔｔｉｒｕｒルｔｍａｔｉｄαり科の、昆虫の病原と なる、線虫は、ゼノールノ１ブトウス（Ｘｇｎｏｒルαｈｄμす属の／ζクチリ アと共生していることは知られている。そして、これらのバクテリアは他属のバ クテリアの活性を抑制する能力があることが観察されている。ゼノールノ・ブト ウス（ＸｇｎｏｒルαｂｔＬｕｓ）ハ、トーツス（Ｔｈｏｙｎａりおよびポイナ （Ｐｏ１ｎαｒ）によって次の論文に説明されている。

工ｒＬｔ　Ｊ、　Ｅ３ｙｚｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、　２９（４）、　３５ ２−３６０゜（１９７９）、　Ａｋｈｔｂｒｓｔ、Ｉｒｂｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、　 ＢａｃｔｇｒｉｏＬ−、３３（１）＋３８−４５＋　（１９８３）、Ａｋｈｔｂ ｒｓｔ、　Ｊ、　Ｇａ４．　Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ、。

１２１、３０３−３０９．　（１９８０）、　ａｒＬｄ、　Ａｋｈｕ、ｒｚｔ、 　Ｊ、Ｇ４３゜ＭｉｃｒｏｈｉｏＬ、１２８．　３０６１　３０６５．（１９８ ２）。

この活性に、このゼノールノープデイ（Ｘｅ−ｎｏｒｈａｂｃｔｉ）　により放 出さ扛た抗生物質に由来するものと考えられる。ボール（ｐａｔｈｌ）等（Ｊ、 　Ｇｈｇｍ、Ｅｃｏｌ、　７（３１，５８９−５９４（１９８１）　）は、たと えば、Ｘ、ネマトフイルス（Ｘ、　ｎｇｍａｔｏｐｈｉＬｗ）　およびｘ９ルミ ネセンス（）（、Ｚｕ叫、ｆ＆ｇｌ？１１”ｇＴＬｊ）の培養組織中にめる種の インドールとスチルベンの存在を確認し、そして、これらの化合物が数多くの非 病原性の生物発光性のバクテリアに対して活性でるることを示した。

ボール等は、このゼノールハブト９ウス（Ｘｔｎｏｒｈａｂｄμり系においてい くつかの抗バクテルア性の機構が行なわれている可能性を指摘している。この可 能性は、我々がボール等によって研究さｎたものと全く異なる構造の抗生物質を Ｘ、ネマトフイルス（Ｘ、　ｎｇｒｎａｔｏｐｈｉＬｕｚ　）から単離すること に成功したという事笑を説明でき友。さらに、この新化合物は、グラム陽性棟を 含む広範囲のバクテリアに対して活性を有すること、また殺生物剤として、特に 殺虫剤として有効であることが証明された。

ゼノールハノドウス（ＸｇｒＬｏｒｈａｂｄｕｚ　）　４５１の７９クチリアは 、第１形（１°）および第２形（２°）と呼ばれる２つの形で存在していること が判明した。ゼノールハプドウス（Ｘ情ｏｒｈａｂｔＬｕ、ｓ　）のこの２つの 形は、それらの群体の形７１によって、最も簡単に区別することが可能でるる。

第１形のバクテリアは抗生物質としての活性を示すが、第２形の７２クチリアは 示さない。

発明の開示 この発明のいくつかの化合物は、第１形のＸ、ネマトフイルスＴ３１９種（Ｔ！ ｎｔｇｒｏｈａｃｔｇｒｉａｃｍａｇ　’）から単離されたもノテるるか、７０ 　ｅＶ　ｆ）−９子イオン化質量分析に２いて、基本組成Ｃ，Ｈ４Ｎ２０Ｓ２の イオンによるピークを与える点１ｃＩｒｆ徴を持っている。そして、これらのイ オンの衝突誘起ｆｌｆｉＭスイクトル（ｅ　ＧｏｌＬｉｚｉｏｎ　５ｐａｃｔｒ ｏｚｃｏｐｙ　ｅ　Ｐｌｔｎｔｂｍ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ１９７８ 、　Ｅｄ、、　Ｒ，Ｇ、Ｃｏｏｋりが第１図に示される点に特徴を持っている。

この衝突誘起解離スイクトル（ＣｊｏｌＬｉｓｉｏｎ−鴎ムｃｔｄ　ｄｉｓｓｏ ｃｉａｔｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　）は、はｒｏ、０４Ｐｇの圧で衝突セル中 に入っているヘリウムで、ＶＧマイクロマス７０／７０質量分析器を磁場と電気 セクター電圧とを一定比にして、走査することによシ得ることができる。

この発明の化合物は抗生物質の活性と殺生物性の活性を示す。

この化合物のめるものは、１，２−ジチオロ（４，３−ｂ〕ピロール誘導体でメ ジ、それ以外のものはまだ未確認である。この発明の化合物は、Ｘ、ネマトフイ ルス（Ｘ、　ｎａｍａｔｏｐｈ“μＳ）またはＸ、ルミネセンス（Ｘ、　Ｌｔｂ ｍｚｔＬｇｚｃｇｒｂりから単離されたものであるか、そのようにして単離され た化合物から誘導されたものである。

この１，２−ジチオロ（４，３−ｊ）ピロール誘導体は次の一般式で表わされる 。

この発明のこれらの化合ｗμ「ゼノールノーブデイン（ＸｇｒＬｏｒｈａｂｔｔ ｚｎｓ　）　ｊと称する。Ｘ、ネマトフイルス（ｘ。

７ＬｅｍαｔｏｐｈｉｌμＳ）から単離さｎるゼノールノーブデイン（ｘｇｒＬ ｏｒｈａｈｃｔｉｎｓ　）は次のものかめる。

ゼノールノ１ブデインＩＲ□＝Ｈ Ｒ２＝ルーベンテル ゼノールハブデインＩ［Ｒ□＝Ｈ Ｒ２＝４−メチルベンチル ゼノールハプデインｍＲ工＝Ｈ Ｒ２＝ルーヘプチル ゼノールハブデインｒｖ　Ｒ１＝ＣＨ３Ｒ２＝＝ル一インチル ゼノールハプデインｖ　Ｒ１祇■３ Ｒ２＝４−メチルインチル ゼノールハプデインおよびこの発明の他の化合物の塩、アシルおよびその他の誘 導体もこの発明に包含される。

この発明のゼノールハプデイン化合物には次のものがある。

６−ヘキサライルアミノ−１，２−ジチオロ（４，３−Ａ）ピロール−５（４Ｈ ）−オン、６−（５−メチル−ヘキサノイルアミノ）−１，２−ジチオロ（４， ３−ｂ）ピロール−５−（ｊＨ）〒オン、６−オクタライルアミノ−１，２−ジ チオロ（４，３−Ａ）ピロール−５（４Ｈ）−オン、６−ヘキサライルアミノ− ４−メチル−１，２−ジチオロＣ４，３−Ａ〕ピロール−５（４Ｈ）−オン、お よび、６−（５−メチルヘキサノイルアミノ）−４−メチル−１，２−ジチオロ ［４，３−ｂ）ピロール−５（４Ｈ）−オンこの発明は、前記抗生物質および殺 生物剤の製造方法をも包含している。この製造方法には、と）わけ、天然源、例 えばゼノールハズドウスの培養組織のようなものから、それ自体公知の方法で単 離することが包含される。この公知の単離方法には、たとえば、エタノール、Ｄ ＭＳＯ，酢酸エチルまたはクロロホルムのような五峨浴剤で抽出し、次いでクロ マトグラフィー、５ 好ましくは、シリカゲル固定層を使用したクロマトグラフィーにかけることが例 にあげることができる。

したがって、この発明は、ゼノールハブデインＩ、■、■、■またはＶの製造方 法をも提供するものである。この製造方法は、ゼノールハブドウス　ネマトフイ ルスまたはゼノールハブドウス　ルミネッセンスのうちのゼノールハブデイン製 造種を適当な培養媒体中で培養し、生成した培養液からゼノールハプデイ／を分 離することからなるものである。

抗生物質の活性および／または殺生物性を示すこの他の化合物の製造方法もこの 発明の範囲内に包含される。この製造方法は、ゼノールハブト９ウス　ネマトフ イルスま専はゼノールノ１ブトウス　ルミネッセンスのうちのゼノールハノデイ ン製造種を適当な培養媒体中で培養し、生成した培養液から抗生物質の活性およ び／または殺生物性を示すこの他の化合物を分離することからなるものでめる。

別の観点からみると、この発明は、ゼノールノ・ズブインＩ、■、■、■または ■の連続的製造方法を提供するものである。

この連続的製造方法は、ゼノールハゾドウス　ネマトフイルスまたはゼノールハ プドウス　ルミネッセンスのうちのゼノールハブデイン製造橿を発酵器中の適当 な培養媒体中で、酸素の存°在下で培養し、この発酵器中の培養系の温度および ｐＨを調節し、新しい培養媒体ｔこの発酵器中に連続的に加え、そして、この発 酵器中の培養系の容量を一定の限界内に保つような速度で連続的に発酵器から連 玩的に培養系全敗シ出、し、そして、取シ出した培養系からゼノールノ・ズブイ ンＩ、■、■、■および■を分離することからなる。

この発明は、また、抗生物質の活性２よび／または殺生物性を示すこの他の化合 物の連続的製造方法も提供するものである。

この連続的製造方法は、ゼノールハブドウス　ネマトフイルスまたはゼノールハ ブドウス　ルミネッセンスのうちのゼノール在下で培養し、この発酵器中の培養 系の温度２よびｐＨを調節し、新しい培養媒体をこの発酵器中に連成的に加え、 そして、この発酵器中の培養系の容量を一定の限界内に保つような速度で培養系 を連続的に取シ出し、そして、取）出した培養系から抗生物質の活性および／ま たは殺虫性のこの他の化合物を分離することからなる。

更に他の観点からみると、この発明は、また、医薬処方物も提供するものである 。この医薬処方物は、上記式Ｉの少なくとも１つの化合物またはこの発明の抗生 物質の活性を示す他の化合物の少なくとも１つの化合物からなるものであシ、医 薬的に許容される担体または希釈剤とともに使用される。

この発明はまた、伝染病の防止または制御が必要とされる哺乳動物の伝染病全防 止または制御する方法を提供するものである。この方法は、上記式Ｉの少なくと も１つの化合物または抗生物質の活性を示すこの発明の他の化合物またはこれら を含む処方の有効量をその哺乳動物に投与すること刀）らなるものである。

さらに、こ？発明は、生物をその生物が現わ乳る場所または現わｎると思わｎる 場所で殺するか制御する方法を提供するものである。この方法は、上記式ｌの少 なくとも１つの化合物またはこの発明の殺生物性の他の化合物またはそれらを含 む処方の有効量をその場所に散布することからなるものである。

（この発明の実施の態様） 適当な培養媒体は、グルコースｌたは他のＳ類、グリセロールまたは脂質のよう な適当な炭素およびエネルギー源、アンモニア、尿素、アミノ酸、イプチドまた は蛋白質のような適当な窒素源、の１質を適当量含んでいるか、または、燐酸塩 、カリウム、マグネシウム、カルシウムおよび微量元素のようなｆｉ栄養素を含 んでおり、そして、ビタミン源および酵母抽出物のような成長因子全台んでいる 。

このような媒体で、ゼノールハブデインをバッチ培養で製造するのに適した媒体 として次の酵母抽出物塩（ｙｓ）液がある：酵母抽出物　５＃Ｌ−”； （ＮＨ４）２Ｓｏ４ｓｙＬ−”；　ｈａｙｓ’４・７Ｈ２０＋　０．２　’ｉ　 Ｌ−”　ｐＫＨ２ＰＯ４０−５ｇＬ−”　ａｎｔｉ　Ｋ　２ＨＰＯ４０−５Ｊ　 Ｌ　−”　−ｐＨ６，８゜このような媒質で、ゼノールノ・ズブインを述玩培養 で製造するのに適した媒体として、次のものがある。

ｇＬｙｃｔｒｏｌ　２０　ＩＩＬ−”　ｐ酵母抽出物　１０　、！１ｌＬ−”　 ；　（ＮＨ４）２Ｓｏ４２（Ｌ９Ｌ−”；　ＫＨ２ＰＯ４１０５’Ｌ”−１；　 Ｍｙｓｏ４・７Ｈ２０２，！ＭＬ−”；ＯａＯ！１２”２Ｈ２００，２９ｇＬ− ”；　ＦｅＳＯ４−７）Ｉ２０２７．８■Ｌ−”；ＭｒＬＳＯ４−Ｈ２Ｏ８，４ ５ＮｊＬ−”；　Ｚｆ＆Ｓ０４”７Ｈ２０，１４，４＊Ｌ−”；Ｇ　ｏ　Ｃ１２ ・６Ｈ２００，１０’ｊ’Ｌ−１，＋　ａｎｄ　ＣｔｂＳＯ４・５Ｈ２００，１ ９りＬ−’。

バッチプロセスにおいては、温度が２３Ｃから３７Ｃの間、望ましくは２３Ｃか ら３０Ｃの間、最適には２８Ｃ１で実施することか好ましい。バッチプロセスに おいては、ｐＨが４．５から８，０の間、望ましくは６．３から７，５の間、最 適には６．８で開始することが好ましい。

この発明の連続プロセスにおいては、温度が２３ｔｌ’から３７Ｃの間、望まし くは２８Ｃで実施するのが好ましい。そして連続プロセスにおいては、ｐＨが４ ．５から８．０の間、望ましくは６．３から７．５の間、そして最適にｒｌ：６ ．８で開始することが好ましい。このプロセスにおいては、新しい培養媒体を希 釈率が０、０１　ｈｒ−”から０，５ｈｒ−’の間、好適には０．０４ル、−１ から０．１　Ａｙ−”　Ｌ：ｐ間になるように加えることが好ましい。

この発明のゼノールハプデイン化合物を製造する方法で使用する培養媒体および 培養条件は、抗生物質の活性および／または殺生物性を示す本発明の他の化合物 の製造にも好適である。

本発明のゼノールハプデイン化合物の構造は、ゼノールハブデイン■の同族列の キサントヒトロール誘導体の結晶をＸ線回折分析を行なうことによシ解明された 。質量スイクトル、紫外、核磁気共鳴および保持時間のデータの相互関係から化 学構造を５個のゼノールハブデイン同族体Ｉ　−Ｖおよびゼノールハノデイン■ の酢酸エステルに指定することが可能になった。

次の例は、このような手順を詳細に説明するものであシ、そして、単離物の分離 およびこの発明の化合物の性質を説明するものである。

例１ １０形のゼノールハブドウスネマトフイルスＴ３１９ｉ（Ｅｎｔｇｒｏｈａｃｔ ｇｒｉａｃｔａｇ）のモノ千セニツク培養系は次のよう９ に鳥のぐず陶土で培養された。ホモジナイズされた鳥のぐず肉１２部に対してポ リウレタンフォーム１部からなる媒体（：＃）を真空にポリプロピレンバッグに 入れてオートクレーブした。

このバッグをフィルター（ｏ、４部ｍ）を持つチューブによシ空気でふくらまし た。Ｘ、ネマトフィルスをＹＳ培養液（５００ｍ、Ｌ）中で、２８Ｃ１２４時間 培養して、接種材料を製造した。

これを上記の媒体に接種して、５日間成長させた。

接種されたフオーム−ホモジナイズ物混合物をエタノール（２Ｘ５Ｌ）中にした して、１０時間手動で混合した。一体にしたエタノールの抽出物を真空中４０Ｃ で蒸発させることによシ＃縮した。次いでこれを凍結乾燥し、抽出物１４３Ｉ！ が生成した。コノ抽出＊（ｘ３ａｌｔ酢酸エチル（４×５００ｍ１Ｊ）中で攪拌 し、次いでアセトン（２Ｘ５００ｍＬ）中で攪拌し、そして、有機抽出物を傾瀉 させ、ろ過し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、最後に、蒸留することによシ 、粘性の茶色の油（５０ＩＩ）が生成した。

この油の一部をガラス器中の抗バクテリア性の生物検定に使用した。この試料の 浴液をＤＭＳＯ中に溶解し、紙円盤に塗布した。この円盤金メらかしめミクロコ ックスルーテウス（Ｍｉｔｒｏｃｏｃｕｓ　ｈｂｔｔｔｂ、？）を接種した寒天 上に置いた。３７Ｃで２０時間培養した後、抑制領域全測定した。

この油（５０，９）ｔ−石油エーテル（４０−６０°、１５０ｍＬ＋）Ｋ洛Ｎし た。キーゼルゲｋ　６０　（ＫｉｔｓｅｌｇａＬ　６０　）　（３５−７０メツ シユ）（１００ｍＬ）ｋこれに加え、生成した浴液を蒸発させた。乾いた粘看性 の残留物が生成した。これを石油二−テ１０１１表昭５９−５（１１９５０（５ ）ル（４０〜６０°　）で平衡にされたキーセルゲル６０（３５−７０メツシユ 、１７９０＃）のカラム（９００Ｘ５０ｍ）の上部に入れた。このカラムを逐次 次のもので溶離した。カッコ中に示したものは回収した重量である。石油エーテ ル４Ｌ；石渡エーテル：酢酸エチル９：１　２Ｌ、３：１　２Ｌ（２１，１ｇ） ；２：１　４Ｌ（７，７，９）；１：１　２Ｌ（１，８６，９）、；１：２４Ｌ （２，６５ｙ）；酢酸エチルｚＬ（９２ｇ）；メタノール４Ｌ（９，６４！１） 。

石油エーテル：酢酸エテル１：２に溶離された黄色溶離成分は１００１００Ｊ” のＭ、　１．　Ｃで抗バクテリア性の活性を示した。

最も活性な成分（２，６５，９）を石油エーテル４０−６０’（１００ｍＬ）で すシつぶし、ろ過し、乾燥することにょシ淡黄色の固体５５５■が生成した。

この淡黄色の固体（８０ｍ９）のメタノール（４ｍＬ）溶液をゲル透過クロマト グラフィーにかけた。このクロマトグラフィーはメタノール中セファデックスＬ Ｈ−２０（Ｅ３ｅｐｈａｄｇｘ　ＬＨ−２０）のカラム（８８Ｘ　３．Ｏｃｍ、 全浴積４４２．Ｌ）で行なった。このカラム溶離液を１　＠Ｌ、　７ＩＬｉＦ＆ −１でくみ出し、７０−セル中でユビコード（Ｕｖｉｃｏｒｄ）Ｓ工Ｉ　（ＬＫ Ｂ　）’を使用し”Ｃ２８０ｒ＆ｒｎで検査した。そしてこれｔマルチラック（ ＭｔＬＺｚταｃ）　（ＬＫＢ　）　’Ｔ：分別した。２つの対称Ｕ、　Ｖ、吸 収が検出された。これは３３１−３７３ｍＬ（１０ダ）の不活性の無色の結晶、 および、４３３−４７５ｍＬ（５７，８〜）のＭ−品性黄色結晶に対応している 。いくつかのバッチの試料をクロマトグラフィーすることによシ黄色固体２６５ ■生成した。

この固体をホワットマ／パーティシル−１０（ＷＡαｔ１臨Ｐａｒｔｉｚｔｌ　 −１０）　ＯＤＳカラム（１０ｍ、９．４Ｘ５００Ｚｌｌり上で予備的、インク ラティク（１ｚｏｃｒａれＣ）、逆相ＨＰＬＣで処理した。溶離剤（アセトニト リル：水１：１）ｔ−ウォーターズモデル（Ｗαｔｅｒｚ　Ｍｏｄｔｌ　）　４ ５　Ｑ波長可変性検出器を使用して２８０Ｌｍで溶離液を夜食した。試料２−５ ｍｙｋアセトニトリル（２００Ｌ）中に注入したものをカラムに入れた。主な三 成分が検出された。これを真空中で蒸発させ、凍結乾燥すると三種の黄色の等活 性の化合物、ゼノールノ・プデイン■（４２，７＊）、ｆｆ（８，０１り、２よ びＩＩＩ（４，０１ｎ９）が生成した。

ゼノールハブデインＩ：ＭＰ１９２−１９３Ｃ１３Ｇ　ＮＭＲ（ＤＭＳＯｃｌ６ ，２５ＭＨｚ）１３．９８（ｑ）、２１．９３（ｔ）。

２４．８６（ｔ）、３０．８８（ｔ）、３４．６９（ｔ）、１１０．７４Ｃｄ） 、　１１５．４２１１）。

１３３．６２（す、１３４．０９（す、　１６７．９６（−９）、　１７１．９ １（、？）−０”ＨＮＭＲ（ＣＤ３）２Ｃｏ　２００ＭＨｚ基準アセトｙ２．０ ４１１１１１１；９．７０　（０，３７Ｈｂｒｏａｄ）　；　８，７４　（０， ３８Ｈ，ｂｒｏａｄ）　；　６．９８　（０，６４Ｈ。

ｚｈａｒｐｚ）；３．２２（０，２８Ｈｚ）；２．９３（ｈｒす；　２．４５　 （２Ｈ。

ｔ、　Ｊ＝７．２Ｈｚ）；　１．６４（２Ｈ，ｂｒ’　ｔ　ｏｆ　ｄ）；　１． ３２（４Ｈ。

ｒＪＬ）；　０．８８（３Ｈ，ｂｒ　ｃｌ　ｏｆ　ｔ）。

９．７０．８．７４，２．９３−の信号はＣＤ３０Ｄと変臭可能である。

ＩＲ（ＮｒｂｊｏＬ）ｃｍ−’　：　３２５０（ｂｙ）、１６７０．　１６４０ ゜１４７０゜ 質量スペクトル、１１Ｌ子イオン化、　ｍ／ｚ　（％）：２７３　（０，６）、 　２７２　（５，６）、　２７１　（７）、　Ｍ”２７０．０４９６（ｓ５）、 Ｃ１□Ｈ□４Ｎ２０２Ｓ２理論量　２７０．０４９８２．１７４（２４）。

１７３（２６）、１７１９７５９（１００）・Ｃ３Ｈ４Ｎ２０Ｓ２理論量１７１ ．９７６６．１４５（５）、１４３（７）、１１７（５）、１０ｒ（５）。

９９（７）、７２（５）、７１（１８）、５７（８）；５５（１２）。

４５（１５）、４３（８５）。

紫外スペクトル（ＣＨ３０Ｈ）　：　３９０　ｎ　’Ｉ’　（−αＺ）　ｔ　３ １０　’　町２５０ルｍ。

キサントヒトロール肪導体 ゼノールハブデインＩ（７３０μＩ）の酢酸（５０μＬ）浴液をキサントヒトロ ール（９−ヒドロキサンチン）（３，３１Ｂ９）の酢酸（５０μＬ）溶液に加え た。−夜室温で放置後結晶が生成した。母液を注射器で除き、結晶を冷酢酸で洗 った（２Ｘ５０μＬ）。これをメタノール（１ｍＬ）、酢酸（５０，ａＬ）、ア セトニトリル（５０μＬ）の混合物で８５Ｃで再結晶させた。Ｘ線回折によって これらの結晶の溶造を決定した。

質量スペクトル　電子イオン化　ｍ／ｚＣチ）：４６４（０，８）。

１８２（２２）、１８１（１００）、１７２（２３）、１５２（９）、８６（６ ）。

６０（８）、４５（９）、４４（６）、４３（１１）。

ゼノールハプテインｎ　：　Ｍ、　Ｐ、　２１０−２１３ｔｌ’”ＨＮＭＲ（Ｃ Ｄ３）２Ｇｏ　２００ＭＨｚ基準７七ドア　２．０４ｍ　；９．７８　（０，１ ４Ｈｈｒ）　：６−９６　（０，４５Ｈ、’　）　ｐ　３−２９　（０，４Ｈ、 Ｊ’　）　ｐ２．８５ｎｎａｔｌ　ｚｈｏｕ、ｌｃｔｇｒ　；　２．８３（３Ｈ Ｊ）　；２．４４（２Ｈ，ｔ　Ｊ＝７．４Ｈ２）；１．６２（３Ｈ，ｍ）；１． ２５（２Ｈ，ｄ　ｏｆ　ｔ）；０．８７（６Ｈ，ｄ　Ｊ＝６．５Ｈ２）− 質量スはクトル　電子イオン化ＴｒＬ／ｚ　（％）：Ｍ”２８４（２）Ｃ□２Ｈ １６Ｎ２０□Ｓ２．１７４（１０）、　１７３（１３）。

１７２（１００）、１４３（３）、９５（７）、６９（６０）、５５（４）。

４５（５）、４３（２８）。

Ｍ＋２８４．０６５９（２０）Ｃ□２Ｈ１６Ｎ２０□Ｓ２理論量２８４．０６５ ３゜１７４（１０）、１７３（１３）、１７１．９７７１（１００）Ｃ５Ｈ４Ｎ ２０Ｓ２理論量　１７１．９７６６．１４３（３）、９５（７）、６９（６０） 。

５５（４）、４５（５）、４３（２８）。

紫外スペクトＡ／（ＯＨ３０Ｈ）：３９０ｙｚｍ（ｍｅ３：）、３１０３ｍ。

２５０ル罵。

ゼノールハプデイン■アセテート ピリジン（１ｍＬ）をゼノールハビデインＩｔ（９，６Ｉｖ）の無水酢酸（１ｍ Ｌ）の溶液に加え、そしてこの浴液を室温で５０時間放置した。この溶液を凍結 乾燥し、残留物をアセトニトリル（１ｍＬ）に溶解した。そして、これをホワッ トマンマグナム（Ｗｈａｔｙｕｘｎ　ＭｚｙｒＬｍｍ）　９０ＤＳカラム上に４ ７１１Ｌｍｚ３−”で、アセトニトリル：水（３：２）中で、予備的、イソクラ タイツク（１ｚｏｃｒａｔａｉｃ）　ＨＰＬＧに従わせた。アセテートが実質的 に定量的な量で回収された。

質量スペクトル　電子イオン化　ｒＩＬ／ｚ（％）：３２８（５）。

３２７（７）、３２６．０７６０　Ｇ□４Ｈ□８Ｎ２０３Ｓ２理論景１７３（１ １）、１７２（１００）、１７１（８）、９５（８）、６９（９）。

５５（７）、４３（３５）。

１ＨＮＭＲ（ＣＤＣＪｇ）２００ｍＨｚ　（ＣＨ３）４！ｉ基準：８．０８（Ｉ Ｈ，、？ルａｒｐ　ＪＦ、ｏｌｅｆｉｎｉｃ）、７．４２（ＩＨ，ｈｒ　ｚ、Ｎ −Ｈ）。

２．６６　（３Ｈ１！ｈａｒｐ　Ｊ’、　ａ（３ｃｏ）、　２．３６　（２Ｈ， ｔ、　Ｊ＝７Ｈｚ、　ＣＨ２−Ｃ：ｒ　Ｏ）　＊　１．７　（３Ｈ＋　ｂｒｍ　 ＋　ＣＨ２）　＋　１−２６　（２Ｈ＋　ｂｒ　ｍｅ　ＣＨ’２　）ｅＯ，９１ （６Ｈ，ｔｉ、　Ｊ＝＝７Ｈｚ、　ｌｅｍｉｎａｌ　ｒｎｅｔｈｙＬｚ）　。

ゼノールハズデイｙｍ　：　Ｍ、　Ｐ、　３６０ｔｌｌ’ＩＨＮＭＲ（ＣＤ３） ２Ｇｏ基準　７．セ）　７２．０４　ＧＰ　；　９．７（ｍ）　；６．８６　（ ｚ　）　；３．２７　（ｚ）；２．８６　（ｓｍａｌｌ　ｓｈｏｕｌｄｇｒ　） 　；　２．８３（ｚ）；２．４４（！、　Ｊ＝７．４Ｈｚ）；１．６４（ｍ）； １．３（ｍ）；０．８６（ｍ）。

マススにクトル　電子イオン化　ｍ／ｚ（％）：２９８．０８１５（３２）、Ｃ □３Ｈ□８Ｎ２ｏ２Ｓ２理論ｉ　２９８．０８１０゜１７４（１８）、　１７３ （２０）、　１７１．９７６９（１００）、　Ｃ５Ｈ，Ｎ２ＣＥ３２理論量　１ ７１．９７６６．１４３（３）、１２７（３）、１１７（３）。

１０．１（３）、７２（３）、５７（３２）、４５（１０）、４３（２６）。

紫外スペクトル（ＯＨ３０Ｈ）：３９０ｓｍ（ｍｚｘ）、３１０ａｍ、２５０編 ゼノールハプデインＩ、■、■、■およびｍｏ、１．５ｍＬ４４　の流速で、セ して４０５　ｔＬｍで検知されたブラウンリー（Ｂｒｏｗｆ＆ｉｅｓ　）　ＲＰ −１８カラム（４，６Ｘ　２５０ｍ）上の保持時間はそれぞれ、４．６　、６． ０　、６．６４　、８．９８および９．６分である。

ゼノールハブデインＩＶ　：　Ｍ、　Ｐ、　１６５ｔ：’”　ＨＮ　ＭＲ（ＣＤ 　ａ　）　２　Ｇｏ　２００　ＭＨｚ基準アセトン２．０４ｐｙｘｐ８．８５　 （０，２Ｈ，ｂｒｏａｄ　ＪＰ、　ＮＨ）　；　７．０８　（ＩＨ，５ｈａｒｐ 　ＪＰ。

ｏＬａｆｉｎｉｃ　Ｈ）；　３．２８　（３Ｈ，ＪＦルａｒｐ　４ＮＭ　ｅ）ｐ 　２．４３　（２Ｈ＋　ｔ−Ｊ＝７Ｈｚ、ＧＯ−ＣＨ２）；１．６４（２Ｈ，Ｍ 、０Ｈ２）；１．２５（４Ｈ。

Ｍ、０Ｈ２−ＯＨ２）；０．８５（３Ｈ，Ｍ、０Ｈ３）。

質量ス被りトル、電子イオン化、７Ｆｌ／ｚ（％）：２８６（３）。

２８５（４）、Ｍ”２８４．０６５４（２４）Ｃ□２Ｈ，、Ｎ２０２Ｓ２３ｍ論 １２４８．０６５３；１８９（１）、１８８（１０）、１８７（１１）、１８６ （１００）、１８５（５）、１５７（２）、１３０（１）、１０１（１）、９９ （１）、８６（３）、７１（３）、７０（１）、６９（１）、５５（３）、４５ （３）、４３（１７）、４２（７）、４１（５）。

Ｍ／２１８６０衝突−誘起′Ｓ離スペクトル：　１７２（５）。

１７１（３５）、１７０（５）、１６９（８１）、１５９（７）、１５８（２９ ）１５７（Ｚｏｏ）、１５６（５）、１５４（６）、１５３（４２）、１４４（ ２６）、１４３（４８）、１４２（３３）、１４１（２０）、１３１（２３）。

１３０（４２）、１２９（６）、１２８（６）、１２５（２９）、１２４（８） 。

１１７（７）、１１６（２９）、１１４（８）、１１３（１５）、１０３（１８ ）。

１０２（３３）、１０１（２９）、１００（１５）、９８（２０）、８７（１１ ）。

８６（４２）、８５（１４）、８４（２１）、８２（１６）、８１（２５）。

７２（４３）、７１（１０）、７０（１１）、６９（１７）、６８（５）、６６ （５）、６５（８）、６０（５）、５７（６）、５５（８）、５３（６）、５２ （６己）、／４５−（：２．４）Ｊ、ノ４２（２０ル紫外スベク）　ル（ＣＨ３ ０Ｈ）λｙ１ａｘ　３９０（ε＝１００００）；３１０ｙＬｍ（ε＝１０００） 、２５０ｎｍ。

赤外スペクトル（Ｋ　Ｂｒ　ｄｉ、ｔＣ）ｃ７ＩＬ−”：３２６０．２９２（Ｌ １６８０．１６５０，１６１０．１５４０，１４４０．１２４０．８３０ゼノー ルハブデインＶ ＩＨＮＭｎ（ＣＤ３）２Ｇｏ　２００ＭＨｚ　基準アセトｙ２．ｏ４ｐｐｘ；８ ．９（７＋１．　ＮＨ）；７．１０（ＩＨ，５ｈａｒｐ　ｓ、ｏｌｇｆｉｎｉｃ 　Ｈ）；３．２９（３Ｈ，５ｈａｒｐ　ＪＰ、　ＮＭ　ｇ　）　；　２．４２　 （２Ｈ，ｔ　、　Ｊ＝７Ｈ２，ｃｏ−ＣＨ２）；１．６２（３Ｈ，ｍ）；１．２ ５（２Ｈ，ｍ）；０．８７（６Ｈ，ｃｌ、Ｊ＝６．５Ｈｚ）。

質量スペクトル、電子イオン化、Ｍ／Ｚ（％）：３００（２）。

２９９（４）、２９８．０８０７（２０）Ｇ□３Ｈ□８Ｎ２０□Ｓ２　理論量２ ９８．０８１０，１８９（１）、１８８（１０）、１８７（１３）、１８６（１ ００）、１３０（１）、１０１（１）、９５（３）、８６（３）、６９（４）。

５７（３）、５６（１）、５５（５）、４５（３）、４４（１）、４３（１９） 。

４２（７）、４１（９）。

紫外スペクトル　（ＣＨ３０Ｈ）：３９０ｆ＆ｍ（ｍｚ、ｚ：）、３１０ｎｍ。

２５０ルｍ。

ゼノールハノデインの大量生産には発酵技術が使用でき、その例を次に示す。

例２ Ｘ、ネットフィルス１３１９種を、酵母抽出物５．９．　Ｌ−”含む酵母抽出物 −塩（ＹＳ）媒体ｐＨ６，７３，５！ｊツトル中で成長させた。攪拌器付実験室 用発酵器を使用した。これは、端部にステンレススチール板の付いた５リツトル のガラスパイプ部分から構成されている。攪拌器は、タービン駆動の平刃で、１ ４２５　ｒｐｍで運転される。空気を０．５　ｖｖ−’０ｍ１ｎ−”で発酵器中 に吸入した。これは、溶存酸素濃度を大気飽和よシ５０チ高く保持するためでる る。冷水を内部冷却コイルを通して循環し、オンーオフ温度制両装置を２５０ワ ツトの加熱ランプ２個を点灯させるたりに使用し、このようにして、培養温度全 ２８Ｃに保った。シェーカー珊養器中の酵母抽出物−塩媒体中で２０時間成長さ せた、３％Ｖ／υ接徳材料を使用した。培髪系を収穫前４８時間、発酵器中で成 長させた。遅絖流動大ベレツトコア（ｓｏｏｍＬ）ローター付のベックマン（Ｂ ｅｃ桓αｒＬ）Ｊ２−２１Ｍ遠心分離器、１５．００　Ｏｒｐｍ　（３０，０Ｏ ＯＸ’７）　で運転される、を１５Ｃで使用して、セルを採取した。ナトリウム アジド″（６００Ｔｎ９）全この上澄：０．（３リツトル）に加え、次いで、こ れをアンバーライト（Ａｙｎｂｅｒｌｔｔｔ）　ＸＡＤＩ−樹脂（３４Ｘ２．５ α）のカラムを通すためにポンプを便って送）出した（９．７ｍＬ、狙ルー１） 。この１更脂を水（２，５リツトル）で洗った。メタノール性の溶出分を蒸発さ せると残留物が生成した。

この残留物から、上述したクロマトグラフィーの手順によルゼノールハビデイン を単離することができた。

例３ セノールハプト９ウスネマトフイルスＸＱ−１種を連続培養で成長させた。５Ｌ のガラス容器付ブラウン（Ｂｒαｕ、ｘ　）　Ｕ−シリーズ発酵器ｅ　２．３　 Ｌの培養動作容量にセットした。温度ヲ２８Ｃに調節した。２０饅Ｗ／υ燐酸ま たは５０％ｕ／　Ｚｌ　水酸化ナトリウムを必要に応じて、自動的に添加するこ とによシ、ｐＨ全７．０に調節した。溶存酸系のレベル全大気飽和よシ４０％ま たはそれ以上高く保つために、空気の流入速度および攪拌速度を手動で調節した 。

１８Ｌのバッチの中に次の成分を含む媒体を製造した。酵母佃出吻１５＆、Ｌ” ；塩化ナトリウム５．！ｉ’、Ｌ−”；硫酸アンモニウムＩＪｉ’−Ｌ−”；硫 酸マグネシウム０．５．９．　Ｌ−’；　オルト燐酸二水素化カリウムおよび水 酸化ナトリウム各々１．９＝　Ｌ”−”。

オートクレーブ中の殺菌後、この媒体２Ｌを投置した発酵器に導入し、これに酵 母佃出吻−塩冶養孜甲でＸＱ−１の第１形の終夜培養したもの１００７ＦＬＬを 接種した。これをバッチで８時間成長させた。次いで、新しい媒体を、発酵器中 に、希釈率が０．０５Ａｒ−”になるのに充分な速度で、ポンプ注入した。培養 物取り出しチューブを通して毎２０時間ごとに貯蔵器に１培養物容量のものが収 納された。ゼノールハズデインの製造は２４時間以内に開始され、そして全層薫 物において定常状態濃度に達する。この濃度はゼノールハプディンＩ　１０．８ 〜．Ｍ”およびゼノールハブデインｌｌ３６．４■、Ｌ−１であ）、全生産率は 約２．４〜Ｌ−１，１，ｒ−１である。この発酵は装置が破壊するか、生産性が 落ちるかめるいは汚染が発生するまで成行することができる。この場合、培養物 が非生産性の第２形に転換することが１４０時間後に観察された。このとき、ゼ ノールハプデインの生産性は最初の定常状態レベルの３０％にまで落ちた。

発育できるセル個体群が３１チになる原因は第２形のものにある。

次の生物の寒天中での成長は、この発明によシ単離されたゼノールハズドウスの 存在によ）抑制することが見出された。セルロモナス（Ｇｔｌｌ！Ｌｔｏｍｏｎ ａｚ）ＳＰ、Ｓ　、アウレウス（α、ｔＬｒｔｕす、Ｂ−セレウススプスプ、ミ コイデｘ　（ｃｅｒｅｗｓ　５ｔｂｈｓ７）、ｍｙｃｏｉｄ、ｔｚ）、Ｂ、ポリ ミキサ（ｐｏｌｙｍｙｘａ）、Ｂ、スプチリス（ｓｕｈｔｉＬｉｚ）、Ｅ、コリ （ｃｏｌｉ　）、Ｂ、トリンジｘ　７　’／　ス（ｔｈｒｉｎｇｉｍｓｉす、Ｓ Ａ、ンネイ（ｚｏｎｎｔｉ）、セラチア（Ｓｓτｒａｔｉａ）　Ｓｐ、　Ｐｒ、 ブルガリス（ｔｒｗｌｇａｒｉす、Ｅｒｔｎ、カロトボラ（Ｃαγｏｔｏｖｏｒ ａ）、Ｃ。

アルビカンス（αＬｂｉｃａｎｙ）およびＳ、セレビシアエ（ｃｅｒｔｖｉ、１ １ｉａｔ）。

この発明の抗生物質はゼノールハブデインの抗バクテリア活性の塩およびそれ以 外の誘導体を含むことは明らかである。これ以外に、この発明は、この抗生物質 を含有する医薬組成物も包含するものであり、病気の処置または防止に２けるこ の抗生物質の使用もまた包含するものである。この発明の物質は、カプセル、丸 薬、錠剤、座薬、浴液、懸濁液、分散物、粉、粉末、クリーム、ゲルのような投 薬の形に２いて、径口的に、非径口的にあるいは局所的に投与することができる 。

処方物は、この発明の化合物を少なくとも１つ含み、他の医薬活性剤を含有する ことができる。

錠剤、カプセル、ピル、粉末、顆粒およびこれらの類似物などのような径口投与 の固形の処方は、通常、殿粉、ラクトース、メルク、ステアリン酸マグネシウム 、植物ガムおよびこれらの類似物のような微細に分割された希釈剤、充填剤、崩 壊剤２よび／または結合剤と混合して製造される。

シロップ、浴液、懸濁液、エリキシル剤２よびこれらの類似物のような径口投与 の液体処方物は、通常水性ベースとともに製造される。非径口処方物は、たとえ ば、水または何機浴媒中の無菌浴液、懸濁液または乳濁液である。

局所処方物は、浴液、慾濁液、軟こう、微粉末、エアロゾル２よび類似物が含ぼ れる。

処方物は、殺菌することかでき、および／または、保存剤、安定剤、湿潤剤、エ マルシファイア、浸透圧音質える塩、または、緩衝剤のような佐剤全台むことが できる。

この発明の殺生物の用途に関しては、この発明の化合物は、単独でまたは適当な 担体２よび／または稀釈剤とともに、使用することができる。担体または稀釈剤 は、浴媒、分散剤、湿潤　剤、細合剤、濃化剤、展着剤のような、固体または液 体を使用することができる。

殺生物剤処方物は、適当な胆俸ミｆｃは稀釈剤と混合ぽたはグラインドゝのよう な通常の手段で製造することができる。

固体調合剤の例は、湿潤可能な粉、粉末、顆粒である。液体調合剤の例は、浴液 、水分散性濃縮物、乳濁液またはに一ストである。

手続補正書（方式） 昭和５９年　７“月７≠日 特許庁長官殿 （特許庁審査官　殿） ゼノールハブデイン抗生物質 ３、補正をする者 事件との関係：特許出願人 霞が関ビル内郵便局　私書箱第４９号 栄光特許事務所　電話（５８１）−９６０１（代表）国際調査報告 】 １： ）： 工 第１頁の続き ０発　明　者　ライオンズ・グラハム・レイモンドオーストラリア国２２２３ニ ュー・サウス・ウエールス・オートレイ・マツケン・クレツセント３２ ０発　明　者　グレッグソン・リチャード・ピータ−オーストラリア国２０９９ ニュー・サウス・ウエールス・ナラウイーナ・トウレッジ・ストリート２２ （ｌ　明　者　アキュアスト・レイモンド・ジョセフォーストラリア国１０１８ タスマニア・ホウロー・ナンコーア・クレツセント５３ ＠発　明　者　レイシー・ミツシェル・ジエイムスオーストラリア国２６００オ ーストリアン・キャピタル・テリトリ−・キャンベル・フレスウェル・ストリー ト５３ ■出　願　人　バイオテクノロジー・オーストリア・ピー・ティー・ワイ・リミ テッド オーストラリア国２０６９ニュー・サウス・ウエールス・ローズヴイル・バーク −・ストリート（番地なし）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式（Ｉ）のゼノールハブデイン化合物；またはその塩、そのアシル２よび他 の誘導体。 （式中、Ｒ１は水素、２よびＲ２はルーペンチル、４−メチルペンチルまたはル ーヘプチルであるか、あるいは、Ｒ１はメチル２よびＲ２はルーイブチルまたは ４−メチルにブチルである。） ２．６−ヘキサライルアミノ−１，２−ジチオロ（４，３−ｂ）ピロール−５− （４Ｈ）−オン、またはその塩、そのアシルおよび他の誘導体。 ３．６−（５−メチルヘキサノイルアミノ）　−１，２−ジチオロ［４，３−Ａ ）ピロール−５（４Ｈ）−オン、またはその塩、そのアシルおよび他の誘導体。 ４．６−オクタライルアミノ−１，２−ジチオロ（４，３−ｂ’３ピロール−５ （４Ｈ）−オン、またはその塩、そのアシルおよび他の誘導体。 ５．６−ヘキサライルアミノ−４−メチル−１，２−ジチオロ（４，３−ｂ〕ピ ロール−５（４Ｈ）−オン、またはその塩、そのアシルおよび他の誘導体。 ６．６−（３−メチルペンタノイルアミノ）−４−メチル−１゜２−ジチオロ（ ４，３−Ａ）ピロール−５（４Ｈ）−オン、またはその塩、そのアシルおよび他 の誘導体。 ７、式（Ｉ）のゼノールハブディン化合物；またはその塩、そのア。 シルおよび他の誘導体の製造方法において、（式中、Ｒ１は水素およびＲ２はル ーインチル、４−メチルぺブチルまたはルーへブチルであるか、あるいは、Ｒ１ はメチルおよびＲ２はルーはブチルまたは４−メチルインチルである。） ゼノールハブドウスネマトフイルスまたはゼノールハブト９ウスルミネッセンス のうちのゼノールハブディン製造徨を酵素の存在下で適当な培養媒体中で培養し 、生成した培養液から式（Ｉ）の化合物を分離することからなシ、さらに必要に 応じて、式（Ｉ）の化合物をその塩、そのアシルおよび他の誘導体に変換するこ とからなる、製造方法。 ８、その培養媒体が、適当な炭素およびエネルギー源、適当な窒素源、適当量の 無機栄養物、および若干のビタミン２よび成長因子ｉｔ含んでいる、請求の範囲 第７に記載された製造方法。 ９、その製造が温度２３Ｃから３７Ｃの間で行われる、請求の範囲第７または第 ８に記載の製造方法。 １０、その製造が温度２８Ｕで行なわれる、請求の範囲第７または第８に記載の 製造方法。 １１、式（Ｉ）のゼノールハプデイン化合物、または、その塩、そのアシル２よ び他の誘導体、 （式中、Ｒ１は水素およびＲ２はルーペンチル、４−メチルペンチルまたはルー ヘプチルであるか、あるいは、Ｒ１はメチル、およびＲ２はルーペンチルｌたは ４−メチルペンチルである。） の連続的製造方法において、 ｅ累の存在下発酵器中の適当な培養媒体中で、ゼノールハブドウスネマトフイル スまたはゼノールハブドウスルミネツセンスのうちのゼノールハズデイン製造種 を培養し、この発酵器中の培養系の温度およびｐＨを制御し、この発酵器中の培 養系の容積を選定された限界内になるような速度でこの発酵器中に新しい培養媒 体を連続的に加え、且つ、この発酵器から培養物を連続的に採取し、２よび、採 取した培養物から式（Ｉ）の化合物を分離することからなシ、さらに、必要に応 じて式（Ｉ）の化合物ｔ、その塩、そのアシル２よび他の誘導体に変あ 換することからなる、連続的製造方法。 １２、その培養媒体が、適当な炭素およびエネルギー源、適当な窒素源、適当量 の無機栄養物および若干のビタミンおよび成長因子源を含む物質からなる、請求 の範囲第１１に記載の製造方法。 １３、その温度が、２３Ｕから３７Ｃの間に匍」御されている、請求の範囲第１ １または第１２に記載の製造方法。 １４、その温度が、２８Ｃに制御されている、請求の範囲第１１または第１２に 記載の製造方法。 １５、そのｐＨが、６．３から７．５の間に制御されている、請求の範囲第１１ 〜１４のいずれか１つに記載の製造方法。 １６、そのｐＨが、６．８に制御されている、請求の範囲第１１〜１４のいずれ か１つに記載の製造方法。 １７、その新しい培養媒体を、希釈率がｏ、ｏ　ｉ　ｈｒ−”から０．５ｈｒ− ”の間になるように、加える、請求の範囲第１１〜１６のいずれか１つに記載の 製造方法。 １８、その新しい培養媒体を、希釈率が０゜０４　ｈｒ−”から０．１ルｒ−１ の間になるように、加える、請求の範囲第１１〜１６のいずれか１つに記載の製 造方法。 １９、その製造方法が、笑質的に前記の例に記載されたものでらる、請求の範囲 第１に記載された式（１）のゼノール・・ブチイン化合物の製造方法。 ２０、　請求の範囲第１に記載された式（Ｉ）のゼノール／・７゛デイン化物で ない、抗生物質の活性２よび／’？ｔは殺生物性を有する化合物、ぼたはその塩 、そのアシル２よび他の誘導体、全製造する方法において、酸素の存在下適当な 培養媒体中で、ゼノールハブドウスネマトフイルスまたはゼノールハブドウスル ミネツセンスのうちのゼノールハブデイン製造種を培養し、生成した培養液から 抗生物質の活性２よび／または殺生物性含有する前記化合物を分離することから な夛、さらに必要に応じて、この分離した化合物をその塩、そのアシルまたは他 の誘導体に変換することからなる、製造方法。 ２１、請求の範囲第１に記載されだ式（Ｉ）のゼノールハプデイン化合物でない 、抗生物質の活性２よび／または殺生物性を有する化合物の連続的製造方法に２ いて、酸素の存在下発酵器中の適当な培養媒体中で、ゼノールノ・ブドウスネマ トフイルスまたはゼノールハズドウスルミネツセンスのうちのゼノールハブデイ ン製造裡を培養し、この発酵器中の培養系の温度およびｐＨを制御し、この発酵 器中の培養系の容積を選定された限界内に保持するような速度で連続的に新しい 培養媒体をこの発酵器中に加え、且つ、この発酵器から連続的に培養物を採取し 、および、採取された培養物から抗生物質の活性２よび／または殺生物性を有す る前記化合物を分離することからなシ、さらに必要に応じて、この分離化合物を その塩、そのアシルｌたは他の誘導体に変換する、連続的製造方法。 ２２、請求の範囲第７〜１９のいずｔか１つの製造方法で製造された、請求の範 囲第１に記載さｎた式（Ｉ）のゼノールノ・ブチイン化合物。 ２３、　請求の範囲第２０Ｉたは第２１に記載の製造方法により製造された、請 求の範囲第１の式（Ｉ）のゼノールノ・ブチイン化合物でない、抗生物質の活性 および／または殺生物性を有する化合物。 冴、活性成分として、請求の範囲第１〜６のいずれか１つ、第２２または第２３ に記載の少なくとも１つの化合物、または医薬として許容されるその塩、そのア シルまたは他の誘導体を含有し、医薬として許容される担体ｌたは希釈剤ととも に含有してなる、医薬処方物。 ２５、　Ｍ＆染病の予防ｉ　ｆｃは抑制を必要とする哺乳動物の感染病を予防ま たは抑制する方法において、 請求の範囲第１〜第６のいずｎか１つ、第２２または第２３に記載された少なく とも１つの化合物、または医薬として許容さｎるその塩、そのアシルまたは他の 誘導体、ｌたは請求の範囲第２４に記載の処方物の有効量を前記哺乳動物に投与 することからなる、方法。 ２６、請求の範囲第１〜第６のいずｔか１つ、第２２または第２３に記載さｔた 少なくとも１つの化合物、またはその塩、そのアシルまたは他の誘導体を活性成 分として含み、通常の殺生物用の担体ｌたは希釈剤とともに含有してなる、殺生 物用処方物。 ２７、生物のいる場所ｌたは生物がいると思われる場所で、その生物を殺すまた は抑制する方法に２、特許請求の範囲第１〜第６のいずれか１つｌたは第２２ま たは第２３に記載ざｒ′した少なくとも１つの化合物またはその塩、そのアシル −ｒｆｃは他の誘導体、または請求の範囲第２６に記載された処方物の有ｖ；／ Ｊ量？、前記の場所に適用することからなる、方法。