JPS5939828A - 抗腫瘍活性物質の製造方法 - Google Patents
抗腫瘍活性物質の製造方法Info
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- JPS5939828A JPS5939828A JP14975082A JP14975082A JPS5939828A JP S5939828 A JPS5939828 A JP S5939828A JP 14975082 A JP14975082 A JP 14975082A JP 14975082 A JP14975082 A JP 14975082A JP S5939828 A JPS5939828 A JP S5939828A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明は抗腫瘍活性物質の新規製造方法に１廁する。
本発明者は、軟骨組織よりの粗抽出物はそのままでは抗
腫瘍活性を示さないが、水性溶媒で抽出した後、親水性
有機溶媒で沈澱せしめフラーゲナーゼ阻害活性を有する
分子ｆｆ１２〜３０万の画分を分肉１１シたところこれ
が抗腫瘍活性を示すことを見出し、この発見に基づいて
本発明を完成するに至った。すなわち、この物質は、」
１記粗抽出物よりソマトメジン様成長因子ＣＤＦ（Ｃａ
ｒｒｉｌａｇｅ −Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｆａｃｔｏｒ ）
を分離した残渣より抽出精製されたものである。 本発明の出発物質として使用する動物軟骨は多１
腫瘍活性を示さないが、水性溶媒で抽出した後、親水性
有機溶媒で沈澱せしめフラーゲナーゼ阻害活性を有する
分子ｆｆ１２〜３０万の画分を分肉１１シたところこれ
が抗腫瘍活性を示すことを見出し、この発見に基づいて
本発明を完成するに至った。すなわち、この物質は、」
１記粗抽出物よりソマトメジン様成長因子ＣＤＦ（Ｃａ
ｒｒｉｌａｇｅ −Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｆａｃｔｏｒ ）
を分離した残渣より抽出精製されたものである。 本発明の出発物質として使用する動物軟骨は多１
【１に
入手できるという点で胎児軟骨、特に牛胎児軟骨が好ま
しい。 本発明の目的物質は水に可溶、親水性有板溶媒に鑓溶で
あるが、出発物質より抽出するには、グアニンン等塩水
溶液でｐ Ｈ５〜７程度の塩溶液に溶解し、これにアセ
トン、エタノール等の親水性有機溶媒を加えて再沈せし
め分取すればよい。 分子量２〜３０万０両分を分離するには例えば膜分画法
を採用すｊｚばよい。 コラ−ゲナーゼ阻害活性の測定は常法の測定手段を利用
すればよい。 なお、コラ−ゲナーゼ阻害活性成分と抗腫瘍活性成分が
同一かどうか（Ｉｆ” Ｋ？３できていないが、上記処
理手段により得られ、かつコラゲナーゼ阻害活性を有す
る両分、例えば後述試料りが抗腫瘍活性を有するものと
して本発明の目的物質となる。 さらに」し体重には例えば、牛胎児軟骨をスライスし水
性溶媒例えば塩水溶液中でホモシナイスし、アセトン画
分４５〜６５％程度沈澱）し、ｔ（ｔられた沈澱を上記
塩水溶液中に再溶ｆｉｒ（Ｌ、膜分Ｉｌ！ｌＩ（分子：
１ｆ： ２〜３０万）により分肉１１すれば、Ｌい。所
望により透析等常法の蛋白１！’１’ｉ袈手段によりＦ
ｌ’Ｊ製し凍結乾燥し保存することがてきる。 このようにして得られた凍結乾燥品は淡黄色の粉末で、
水に可溶である。水溶液のｐＨ値は６〜７である。 本発明で得られたくの質を制癌剤として使用する場合に
は、そのままあるいは適当な担体とともに経口投かする
か、生理食塩水に溶解して注射投与することが考えられ
る。 本発明品は、生体由来であるため副作用が少なく、大量
に入手可能な動物軟骨を出発原料としているので、必要
によりさらに精製して制癌剤としての実用性が期待され
る。 以下、実施例により本発明の詳細な説明する。 実施例１ 牛胎児軟骨２００７をスライスし、ＩＭグア二／ン塩酸
−０，１Ｍ６−アミノ−ｎ−カプロン酸（ｐ、８６．０
） ２ ｌ中でポリトロンによりホモシナイスした。 ４℃１４８１１．！１間攪拌の後、８０００ｒｐｍ、２
０分（４℃）遠心し得られた」二清にアセトンを４５％
（終濃度）添加し、ｏ’ｃ下２ｏ分放置した。 次いて、８０００ｒｐｍ、２０５（４℃）遠心し得られ
た」−７Ｈにさらにアセノ・ノを加え終濃度６５％七し
１１ｆび０℃下２０分放置後８０００ｒｐｍ。 ２０分（４℃）遠心した。得られた沈澱を５Ｑｍｅの蒸
留水に射角・ｉし、蒸悄水に対して、４℃下４８時間透
析を行い、凍結乾燥の後４７のアセトン画分（試料Ａ）
を得た。 試料Ａ３１ｉ’を４Ｍグアニジン塩酸、 ０．０１ Ｍ
エチレン／アミン四酢酸（ＥＤＴＡ ）、Ｏ，］］Ｍ６
−アミノーｎ−カプロン酸 ＋）Ｈ６，５） ２０ ａ
ｍＨ４溶解し、８０００ｒｐｍ２０分（４℃）遠心し、
得られた上清を、１．０１（２／ｃｎＩ加圧下、アミコ
ン社装分子ｆｌｊ’ ３０万カツト限外濾過膜［ＸＭ−
３００Ｊを通し、限外Ｊｊ４ｊ過液をｔｒｂた。さらに
、２ 、０ ｋｇ／ ｏ！加圧ド、東洋（ＩＩＩｌＩ紙
化製分子ｔｉｉ： ２万力ン日技外濾過膜「ＵＰ２０」
を曲して内液（分子１１ｉ： ３０万〜２万画／Ｊ３）
（試事１１３ ） ｌｉＭ外醐外液過液料Ｃ）を得た。 試料ｌろを同様、透析し、凍結１：Ｉ２燥し２６６ ｍ
！’Ｉの試イ：１１３乾燥品を得た。 ＩＣＲｍｌマウス（５週令）の皮下にザルコーマ−１８
０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料ＡおよびＢ乾
燥品をそれぞれ２〃ノ９を生理食塩水に溶解したものお
よび対照群として生理食塩水のみを２回皮下投与し、腫
瘍移植後５週間目の腫瘍の短、長径より腫瘍体積を測定
し次の式により腫瘍阻１１−率（１，Ｒ，）を求め、結
果を表１に示した。 表１に示すように試料Ａは抗腫瘍活性を示さなかったの
に対して、これより精製した試料Ｂは抗腫瘍活性を示し
た。 一方、試料ＢおよびＣについてソマトメジン活性（Ｙ、
Ｋａｔｏ＋Ｙ、Ｎｏｍｕｒａ＋Ｍ、Ｔｓｕｊｉ＋Ｈ，Ｏ
ｈｍａｅ、Ｍ、Ｋｉｎｏｓｈ−ｉ＋ａ＋Ｓ、Ｈａｍａｍ
ｏｔｏ ａｎｄ Ｆ、５ｕｚｕｋｉ ” ＣａｙＬｉｌ
ａｇｅ −Ｄｅｒｉｖ−ｅｄ Ｆａｃｔｏｒ （ＣＤＦ
） ｎ 。 Ｓｏｍａｉｏ ｍｅｄｉｎ −Ｌｉｋｅ Ａｃｔｉｏｎ
ｏｎ Ｃｕｔｕｒｅｄ ｃｈｏｄｒｏｃｙｔｅｓ”Ｅ
ｘｐ、 （６７１Ｒｅｓ、ｖｏ、１．＋３２ Ｐ３３９
−３４７（＋９８１））をｉｕ＋＋定したところ、試料
Ｃにのみ活性が認められた。 表 １ ※】 腫瘍体積において対照群（ｎ ＝ ７ ）に対し
てＰ ＜ ０．０１ 実施例２ 牛胎児軟骨＋５０ｐ１Ｍグアニジン塩酸０．１Ｍ６−ア
ミノ−ｎ−カプロン酸（ｐ Ｈ６，０） ＋、ｓ ｅ中
でミギサーによりホモゲナイズした。４℃４８１ｉｔ、
間攪拌の後８０００ｒｐｍ、２０分（４℃）遠心しｆｉ
Ｉられた上清にアセ！・ンを終濃度４５％添加し、０℃
下２０分放置した。次いで８０００ｒｐｍ２０分（４℃
）遠心し得られた上ｌＨにさらにアセトンを加え、終濃
度６５％とし０℃下２０分放置した。８０００ｒｐｍ２
０分（４℃）遠心後、得られた沈澱を５０ｍ１の蒸留水
に溶解し蒸留水にえｊして４℃下４８時間透析の後凍結
乾燥した。 これを２ｏｏｍｅの４Ｍグアニジン塩酸、０．０１ＭＥ
ＤＴＡ、 ０． ＩＭ ６−アミノ−ｎ−カプロン酸（
ｐＨ６，５）に溶解し、Ｉ 、０ 、 ｋｇ／ ａｌ
加圧下、限外濾過膜「ｘＭ−３００」に通し、得られ
た限外濾過液を！ 、 ５ ｋｇ ／ ｃｒｌ 加圧
下、限外濾過膜「ＵＰ２０」に通し、内液を採取し同様
蒸留水に対して透析の後凍結乾燥し、＋ ７２ ｒｎｇ
の粉末（試料Ｄ）を得た。 蛋白を重量比で６４ｊ９６（フォリン法）含有スル。 元素分析値： Ｃ４５，２９９６，Ｈ７，２４％、 Ｎ
１４．７４％赤外吸収スペクトル（Ｋ Ｂ ｒ 希釈
による拡散反射法： 牙１図 ＩＣＲｄ（ｉｔマウス（５週令）の皮下にザルコーマ−
１８０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料Ｄ ２
ｍｇを生理食塩水に溶解したものおよび％Ｉ照群として
、生理食塩水のみを４回皮下投与し、腫瘍移植後５週間
目の腫瘍体積を測定し腫瘍阻止率を求め、結果を表２に
示した。 表 ２ ※２：腫瘍体積において対照群（ｎ ＝ ７． ）に対
してＰ ＜ ０．０１ 表２より試料りは著しい抗腫瘍活性を示１−１その結果
、７匹中３匹は腫瘍が完全に退縮していることが理解さ
れる。 次に試料りについてコラ−ゲナーゼ阻害活性を測定した
。結果を表３に示した。 表 ３ なお、−に記活性の測定に用いたコラ−ゲナーゼは家兎
皮膚を無血清培地にて器官培養して得られた培養」二清
をトリプシン処理により活性化したものである０、コラ
−ゲナーゼ活性は１４ｃｍグリンン標識コラーゲンより
の１＋Ｃ放射能の２５ｍＭトＪス塩酸、２．５ ｍ Ｍ
塩化カルシウム中における遊離により測定した。
入手できるという点で胎児軟骨、特に牛胎児軟骨が好ま
しい。 本発明の目的物質は水に可溶、親水性有板溶媒に鑓溶で
あるが、出発物質より抽出するには、グアニンン等塩水
溶液でｐ Ｈ５〜７程度の塩溶液に溶解し、これにアセ
トン、エタノール等の親水性有機溶媒を加えて再沈せし
め分取すればよい。 分子量２〜３０万０両分を分離するには例えば膜分画法
を採用すｊｚばよい。 コラ−ゲナーゼ阻害活性の測定は常法の測定手段を利用
すればよい。 なお、コラ−ゲナーゼ阻害活性成分と抗腫瘍活性成分が
同一かどうか（Ｉｆ” Ｋ？３できていないが、上記処
理手段により得られ、かつコラゲナーゼ阻害活性を有す
る両分、例えば後述試料りが抗腫瘍活性を有するものと
して本発明の目的物質となる。 さらに」し体重には例えば、牛胎児軟骨をスライスし水
性溶媒例えば塩水溶液中でホモシナイスし、アセトン画
分４５〜６５％程度沈澱）し、ｔ（ｔられた沈澱を上記
塩水溶液中に再溶ｆｉｒ（Ｌ、膜分Ｉｌ！ｌＩ（分子：
１ｆ： ２〜３０万）により分肉１１すれば、Ｌい。所
望により透析等常法の蛋白１！’１’ｉ袈手段によりＦ
ｌ’Ｊ製し凍結乾燥し保存することがてきる。 このようにして得られた凍結乾燥品は淡黄色の粉末で、
水に可溶である。水溶液のｐＨ値は６〜７である。 本発明で得られたくの質を制癌剤として使用する場合に
は、そのままあるいは適当な担体とともに経口投かする
か、生理食塩水に溶解して注射投与することが考えられ
る。 本発明品は、生体由来であるため副作用が少なく、大量
に入手可能な動物軟骨を出発原料としているので、必要
によりさらに精製して制癌剤としての実用性が期待され
る。 以下、実施例により本発明の詳細な説明する。 実施例１ 牛胎児軟骨２００７をスライスし、ＩＭグア二／ン塩酸
−０，１Ｍ６−アミノ−ｎ−カプロン酸（ｐ、８６．０
） ２ ｌ中でポリトロンによりホモシナイスした。 ４℃１４８１１．！１間攪拌の後、８０００ｒｐｍ、２
０分（４℃）遠心し得られた」二清にアセトンを４５％
（終濃度）添加し、ｏ’ｃ下２ｏ分放置した。 次いて、８０００ｒｐｍ、２０５（４℃）遠心し得られ
た」−７Ｈにさらにアセノ・ノを加え終濃度６５％七し
１１ｆび０℃下２０分放置後８０００ｒｐｍ。 ２０分（４℃）遠心した。得られた沈澱を５Ｑｍｅの蒸
留水に射角・ｉし、蒸悄水に対して、４℃下４８時間透
析を行い、凍結乾燥の後４７のアセトン画分（試料Ａ）
を得た。 試料Ａ３１ｉ’を４Ｍグアニジン塩酸、 ０．０１ Ｍ
エチレン／アミン四酢酸（ＥＤＴＡ ）、Ｏ，］］Ｍ６
−アミノーｎ−カプロン酸 ＋）Ｈ６，５） ２０ ａ
ｍＨ４溶解し、８０００ｒｐｍ２０分（４℃）遠心し、
得られた上清を、１．０１（２／ｃｎＩ加圧下、アミコ
ン社装分子ｆｌｊ’ ３０万カツト限外濾過膜［ＸＭ−
３００Ｊを通し、限外Ｊｊ４ｊ過液をｔｒｂた。さらに
、２ 、０ ｋｇ／ ｏ！加圧ド、東洋（ＩＩＩｌＩ紙
化製分子ｔｉｉ： ２万力ン日技外濾過膜「ＵＰ２０」
を曲して内液（分子１１ｉ： ３０万〜２万画／Ｊ３）
（試事１１３ ） ｌｉＭ外醐外液過液料Ｃ）を得た。 試料ｌろを同様、透析し、凍結１：Ｉ２燥し２６６ ｍ
！’Ｉの試イ：１１３乾燥品を得た。 ＩＣＲｍｌマウス（５週令）の皮下にザルコーマ−１８
０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料ＡおよびＢ乾
燥品をそれぞれ２〃ノ９を生理食塩水に溶解したものお
よび対照群として生理食塩水のみを２回皮下投与し、腫
瘍移植後５週間目の腫瘍の短、長径より腫瘍体積を測定
し次の式により腫瘍阻１１−率（１，Ｒ，）を求め、結
果を表１に示した。 表１に示すように試料Ａは抗腫瘍活性を示さなかったの
に対して、これより精製した試料Ｂは抗腫瘍活性を示し
た。 一方、試料ＢおよびＣについてソマトメジン活性（Ｙ、
Ｋａｔｏ＋Ｙ、Ｎｏｍｕｒａ＋Ｍ、Ｔｓｕｊｉ＋Ｈ，Ｏ
ｈｍａｅ、Ｍ、Ｋｉｎｏｓｈ−ｉ＋ａ＋Ｓ、Ｈａｍａｍ
ｏｔｏ ａｎｄ Ｆ、５ｕｚｕｋｉ ” ＣａｙＬｉｌ
ａｇｅ −Ｄｅｒｉｖ−ｅｄ Ｆａｃｔｏｒ （ＣＤＦ
） ｎ 。 Ｓｏｍａｉｏ ｍｅｄｉｎ −Ｌｉｋｅ Ａｃｔｉｏｎ
ｏｎ Ｃｕｔｕｒｅｄ ｃｈｏｄｒｏｃｙｔｅｓ”Ｅ
ｘｐ、 （６７１Ｒｅｓ、ｖｏ、１．＋３２ Ｐ３３９
−３４７（＋９８１））をｉｕ＋＋定したところ、試料
Ｃにのみ活性が認められた。 表 １ ※】 腫瘍体積において対照群（ｎ ＝ ７ ）に対し
てＰ ＜ ０．０１ 実施例２ 牛胎児軟骨＋５０ｐ１Ｍグアニジン塩酸０．１Ｍ６−ア
ミノ−ｎ−カプロン酸（ｐ Ｈ６，０） ＋、ｓ ｅ中
でミギサーによりホモゲナイズした。４℃４８１ｉｔ、
間攪拌の後８０００ｒｐｍ、２０分（４℃）遠心しｆｉ
Ｉられた上清にアセ！・ンを終濃度４５％添加し、０℃
下２０分放置した。次いで８０００ｒｐｍ２０分（４℃
）遠心し得られた上ｌＨにさらにアセトンを加え、終濃
度６５％とし０℃下２０分放置した。８０００ｒｐｍ２
０分（４℃）遠心後、得られた沈澱を５０ｍ１の蒸留水
に溶解し蒸留水にえｊして４℃下４８時間透析の後凍結
乾燥した。 これを２ｏｏｍｅの４Ｍグアニジン塩酸、０．０１ＭＥ
ＤＴＡ、 ０． ＩＭ ６−アミノ−ｎ−カプロン酸（
ｐＨ６，５）に溶解し、Ｉ 、０ 、 ｋｇ／ ａｌ
加圧下、限外濾過膜「ｘＭ−３００」に通し、得られ
た限外濾過液を！ 、 ５ ｋｇ ／ ｃｒｌ 加圧
下、限外濾過膜「ＵＰ２０」に通し、内液を採取し同様
蒸留水に対して透析の後凍結乾燥し、＋ ７２ ｒｎｇ
の粉末（試料Ｄ）を得た。 蛋白を重量比で６４ｊ９６（フォリン法）含有スル。 元素分析値： Ｃ４５，２９９６，Ｈ７，２４％、 Ｎ
１４．７４％赤外吸収スペクトル（Ｋ Ｂ ｒ 希釈
による拡散反射法： 牙１図 ＩＣＲｄ（ｉｔマウス（５週令）の皮下にザルコーマ−
１８０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料Ｄ ２
ｍｇを生理食塩水に溶解したものおよび％Ｉ照群として
、生理食塩水のみを４回皮下投与し、腫瘍移植後５週間
目の腫瘍体積を測定し腫瘍阻止率を求め、結果を表２に
示した。 表 ２ ※２：腫瘍体積において対照群（ｎ ＝ ７． ）に対
してＰ ＜ ０．０１ 表２より試料りは著しい抗腫瘍活性を示１−１その結果
、７匹中３匹は腫瘍が完全に退縮していることが理解さ
れる。 次に試料りについてコラ−ゲナーゼ阻害活性を測定した
。結果を表３に示した。 表 ３ なお、−に記活性の測定に用いたコラ−ゲナーゼは家兎
皮膚を無血清培地にて器官培養して得られた培養」二清
をトリプシン処理により活性化したものである０、コラ
−ゲナーゼ活性は１４ｃｍグリンン標識コラーゲンより
の１＋Ｃ放射能の２５ｍＭトＪス塩酸、２．５ ｍ Ｍ
塩化カルシウム中における遊離により測定した。
調・１図は、実施例２で得られた試料りの赤外線吸収ス
ペクトル図である。 特許出願人 味の素株式会社 ｏ ℃ −於 ロ Ｓ 〜 ′＃ 勺 Ｅｌ）ＩＩ？１１１）＋１ｉ１１ＶＭｉ ％手続補正１
！１（方式） （１ｊ１和！ｉ７．１１１２月？目 １：＋ １ｉ庁艮宜 ン−杉 相 夫 殿１、 ＝Ｊｆ
ｌ’ｌの入車 昭和５フイＴ ４’ｌ Ｒ’ｌ願第１／１９７’５０月
２、介Ｉ引の名ｆ年 抗腫瘍？ｌ酬１物質の製造方法 ３、？ＩＩｉ正をする者 事（’ｌとの関係 特許出願人 １１所 東京都中火区京橋−丁目５番８号（発送日
昭和５７年１１７’１３０口）５、補正によ
り増加する発明の数 なし６、補正の対象 明
ｌｌｌ１由り発明の１０．田な註鴫嗣韻７、補ｉｆの内
容 別紙の通り（日ｕｍＩ’￥Ｇ自、嘗、２＋−１
−あ・為′負パ′４−９東） 一方、試料ＢおよびＣについてソマトメジン活性（Ｙ
、Ｋａ ！ Ｏ＋ Ｙ 、Ｎｏｍｕｒ ａ ＋ Ｍ−Ｔ
ｓ ｕ Ｊ Ｉ＋ Ｈ、Ｏｈｍａ ｅ ＋ Ｍ、Ｋ ＋
ｎｏ Ｓ ｈ−ｉｔａ、Ｓ、Ｈａｍａｍｏｔｏ ａｎ
ｄ Ｆ、５ｕｚｕｋｉ ＩＩＣａｒｔｉｌａｇｅ−Ｄｅ
ｉｖ−ｅｄ Ｆａｃｔｏｒ （ＣＤＦ） ｎ Ｓｏｍａｔｏ ｍｅｄｉｎ−ＬｉｋｅＡｃｔｉｏｎ ｏ
ｎ Ｃｕｔｕｒｅｄ ｃｈｏｄｒｏｃｙｔｅｓ”Ｅｘｐ
、 Ｃｅ１ｌ Ｒｅｓ、ｖｏｌ、１３２ Ｐ３３９−
３４７（１９８１））を測定したところ、試料Ｃｔこの
み活性が認められた。 表 １ ※１ 腫瘍体積において対照群（ｎ＝７）に対してｐ
＜ ０．０１ 元素分析ｒ＋ｆｊ ： Ｃ４５，２９９６，Ｈ７，２４
Ｌ Ｎ １４．７４５％赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ希
釈による拡散反射法： 剖・１図 ＩＣＲ雌−１ウス（５週令）の皮下にザルコーマ−１８
０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料Ｄ ２ ｍ９
を生理食塩水に溶解したものおよび対照群として、生理
食塩水のみを４回皮下投与し、腫瘍移植後５週間［１の
１ｌＩｌｉ瘍体積を測定し腫瘍阻止率を求め、結果を表
２に示した。 表 ２ ※２：腫瘍体積において対照群（ｎ＝７）に対してＰ
＜ ０．０１ 表２より試料りは著しい抗腫瘍活性を示し、その結果、
７匹中３匹は腫瘍が完全に退縮していることが理解され
る。 次に試料りについてコラ−ゲナーゼ阻害活性を測定した
。。結果を表３に示した。 表 ３ なお、上記活性の測定に用いたコラ−ゲナーゼは家兎皮
膚を無血清培地にて器官培養して得られた培養上清なト
リプシン処理により活性化したものである。コラ−ゲナ
ーゼ活性は＋４ｃｍグリシン標識コラーゲンよりの１４
Ｃ放射ｈｈ０２５ｍＭ）Ｊス塩酸、２．５ｍＭ塩化カル
シウム中における遊離により測定した。 ４、図面の簡単な説明 刃・１図は、実施例２で得られた試料りの赤外線吸収ス
ペクトル図である。 特許出願人 味の素株式会社
ペクトル図である。 特許出願人 味の素株式会社 ｏ ℃ −於 ロ Ｓ 〜 ′＃ 勺 Ｅｌ）ＩＩ？１１１）＋１ｉ１１ＶＭｉ ％手続補正１
！１（方式） （１ｊ１和！ｉ７．１１１２月？目 １：＋ １ｉ庁艮宜 ン−杉 相 夫 殿１、 ＝Ｊｆ
ｌ’ｌの入車 昭和５フイＴ ４’ｌ Ｒ’ｌ願第１／１９７’５０月
２、介Ｉ引の名ｆ年 抗腫瘍？ｌ酬１物質の製造方法 ３、？ＩＩｉ正をする者 事（’ｌとの関係 特許出願人 １１所 東京都中火区京橋−丁目５番８号（発送日
昭和５７年１１７’１３０口）５、補正によ
り増加する発明の数 なし６、補正の対象 明
ｌｌｌ１由り発明の１０．田な註鴫嗣韻７、補ｉｆの内
容 別紙の通り（日ｕｍＩ’￥Ｇ自、嘗、２＋−１
−あ・為′負パ′４−９東） 一方、試料ＢおよびＣについてソマトメジン活性（Ｙ
、Ｋａ ！ Ｏ＋ Ｙ 、Ｎｏｍｕｒ ａ ＋ Ｍ−Ｔ
ｓ ｕ Ｊ Ｉ＋ Ｈ、Ｏｈｍａ ｅ ＋ Ｍ、Ｋ ＋
ｎｏ Ｓ ｈ−ｉｔａ、Ｓ、Ｈａｍａｍｏｔｏ ａｎ
ｄ Ｆ、５ｕｚｕｋｉ ＩＩＣａｒｔｉｌａｇｅ−Ｄｅ
ｉｖ−ｅｄ Ｆａｃｔｏｒ （ＣＤＦ） ｎ Ｓｏｍａｔｏ ｍｅｄｉｎ−ＬｉｋｅＡｃｔｉｏｎ ｏ
ｎ Ｃｕｔｕｒｅｄ ｃｈｏｄｒｏｃｙｔｅｓ”Ｅｘｐ
、 Ｃｅ１ｌ Ｒｅｓ、ｖｏｌ、１３２ Ｐ３３９−
３４７（１９８１））を測定したところ、試料Ｃｔこの
み活性が認められた。 表 １ ※１ 腫瘍体積において対照群（ｎ＝７）に対してｐ
＜ ０．０１ 元素分析ｒ＋ｆｊ ： Ｃ４５，２９９６，Ｈ７，２４
Ｌ Ｎ １４．７４５％赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ希
釈による拡散反射法： 剖・１図 ＩＣＲ雌−１ウス（５週令）の皮下にザルコーマ−１８
０腫瘍細胞を移植し、担癌とした後、試料Ｄ ２ ｍ９
を生理食塩水に溶解したものおよび対照群として、生理
食塩水のみを４回皮下投与し、腫瘍移植後５週間［１の
１ｌＩｌｉ瘍体積を測定し腫瘍阻止率を求め、結果を表
２に示した。 表 ２ ※２：腫瘍体積において対照群（ｎ＝７）に対してＰ
＜ ０．０１ 表２より試料りは著しい抗腫瘍活性を示し、その結果、
７匹中３匹は腫瘍が完全に退縮していることが理解され
る。 次に試料りについてコラ−ゲナーゼ阻害活性を測定した
。。結果を表３に示した。 表 ３ なお、上記活性の測定に用いたコラ−ゲナーゼは家兎皮
膚を無血清培地にて器官培養して得られた培養上清なト
リプシン処理により活性化したものである。コラ−ゲナ
ーゼ活性は＋４ｃｍグリシン標識コラーゲンよりの１４
Ｃ放射ｈｈ０２５ｍＭ）Ｊス塩酸、２．５ｍＭ塩化カル
シウム中における遊離により測定した。 ４、図面の簡単な説明 刃・１図は、実施例２で得られた試料りの赤外線吸収ス
ペクトル図である。 特許出願人 味の素株式会社
Claims (1)
- 動物状１すより、水性溶媒で抽出した後、親木性有機溶
媒で沈澱せしめ、コラ−ゲナーゼ阻害１１ξ性を有する
分子ＪｊＦ ２〜３０万の両分を分離することを特徴と
する抗腫瘍活性物質の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14975082A JPS5939828A (ja) | 1982-08-28 | 1982-08-28 | 抗腫瘍活性物質の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14975082A JPS5939828A (ja) | 1982-08-28 | 1982-08-28 | 抗腫瘍活性物質の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5939828A true JPS5939828A (ja) | 1984-03-05 |
Family
ID=15481936
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14975082A Pending JPS5939828A (ja) | 1982-08-28 | 1982-08-28 | 抗腫瘍活性物質の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5939828A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5242692A (en) * | 1990-07-10 | 1993-09-07 | Bar Ilan University | Anti-metastatic factor |
| US6168807B1 (en) | 1998-07-23 | 2001-01-02 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Low molecular weight components of shark cartilage, processes for their preparation and therapeutic uses thereof |
| US6380366B1 (en) | 1994-04-28 | 2002-04-30 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Shark cartilage extract:process of making, methods of using and compositions thereof |
| US6383522B1 (en) | 1997-03-11 | 2002-05-07 | Les Laboratoires Aeterna, Inc. | Toxicity reduced composition containing an anti-neoplastic agent and a shark cartilage extract |
-
1982
- 1982-08-28 JP JP14975082A patent/JPS5939828A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5242692A (en) * | 1990-07-10 | 1993-09-07 | Bar Ilan University | Anti-metastatic factor |
| US6380366B1 (en) | 1994-04-28 | 2002-04-30 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Shark cartilage extract:process of making, methods of using and compositions thereof |
| US6635285B2 (en) | 1994-04-28 | 2003-10-21 | Les Laboratoires Aeterna, Inc. | Shark cartilage extract: process of making, methods of using, and compositions thereof |
| US6383522B1 (en) | 1997-03-11 | 2002-05-07 | Les Laboratoires Aeterna, Inc. | Toxicity reduced composition containing an anti-neoplastic agent and a shark cartilage extract |
| US6855338B2 (en) | 1997-03-11 | 2005-02-15 | Les Laboratoires Aeterna, Inc. | Anti-tumor therapies comprising a combination of a cartilage extract and an anti-neoplastic agent providing high efficacy and low toxic side effects |
| US6168807B1 (en) | 1998-07-23 | 2001-01-02 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Low molecular weight components of shark cartilage, processes for their preparation and therapeutic uses thereof |
| US6506414B2 (en) | 1998-07-23 | 2003-01-14 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Low molecular weight components of shark cartilage, processes for their preparation and therapeutic uses thereof |
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