JPS59218958A - 不規則抗体の検出用試薬 - Google Patents
不規則抗体の検出用試薬Info
- Publication number
- JPS59218958A JPS59218958A JP9443083A JP9443083A JPS59218958A JP S59218958 A JPS59218958 A JP S59218958A JP 9443083 A JP9443083 A JP 9443083A JP 9443083 A JP9443083 A JP 9443083A JP S59218958 A JPS59218958 A JP S59218958A
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/80—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood groups or blood types or red blood cells
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は状態の異なるポリエチレングリコールをリン酸
塩食塩緩衝液に溶解させて得たポリエチレングリコール
の混〆夜からなる不規則抗体の検出用試薬に関する。
塩食塩緩衝液に溶解させて得たポリエチレングリコール
の混〆夜からなる不規則抗体の検出用試薬に関する。
不規則抗体とはいわゆるランドスタイナー（Ｌａｎｄｓ
ｔｅｉｎｅｒ ）の法則に合わない赤血球抗体のことで
、抗Ｄ１抗Ｃ１抗で、抗Ｅ、抗Ｄｉ” 、抗Ｓ１抗Ｊｒ
”、抗Ｘ ｇ ａ１抗Ｆｙｂなどが知られている。この
ような不規則抗体を検出する従来法の１つにアルブミン
・クームス法があり、その術式を例示すると次の通りで
ある。
ｔｅｉｎｅｒ ）の法則に合わない赤血球抗体のことで
、抗Ｄ１抗Ｃ１抗で、抗Ｅ、抗Ｄｉ” 、抗Ｓ１抗Ｊｒ
”、抗Ｘ ｇ ａ１抗Ｆｙｂなどが知られている。この
ような不規則抗体を検出する従来法の１つにアルブミン
・クームス法があり、その術式を例示すると次の通りで
ある。
試験管にセレクトゲン（不規則抗体に対応する抗原をも
つヒ）０型赤血球の浮遊液）１滴と被検血清２滴を入れ
、これに２２％ウシアルブミン溶液を２滴加えて３７℃
で１５〜３０分間感作する。
つヒ）０型赤血球の浮遊液）１滴と被検血清２滴を入れ
、これに２２％ウシアルブミン溶液を２滴加えて３７℃
で１５〜３０分間感作する。
このものを生理食塩水を用いて２５００ｒｐｍ、５分間
の遠心で３回洗浄した後、上澄みをできるだけ捨て去る
。次にクームス血清を２滴加えて１１０００ｒｐで１分
間遠心し、赤血球の凝集の強さを肉眼で判定する。この
アルブミン幸クームス法は２２％ウシアルブミン溶液と
クームス血清を必要とし、クームス血清が高価であると
いう欠点がある。
の遠心で３回洗浄した後、上澄みをできるだけ捨て去る
。次にクームス血清を２滴加えて１１０００ｒｐで１分
間遠心し、赤血球の凝集の強さを肉眼で判定する。この
アルブミン幸クームス法は２２％ウシアルブミン溶液と
クームス血清を必要とし、クームス血清が高価であると
いう欠点がある。
本発明の目的は安価で検出精度の良い不規則抗体の検出
用試薬を提供することにある。
用試薬を提供することにある。
本発明者はウシアルブミンやクームス血清に代る不規則
抗体の検出用試薬を研究し、入手が容易でしかも安価な
グリース状ないしワックス状のポリエチレングリコール
が、２２％ウシアルブミン溶液及びクームス血清と同等
又はそれ以上の機能を有することを見出し、この知見に
基づいて先に不規則抗体の検査用試薬（特願昭５７−１
６５３１３号、先行発明という）を開発した。本発明者
は引続いてポリエチレングリコールを用いる検出用試薬
の研究を重ねた結果、状態の異なるポリエチレングリコ
ールの混合溶液が先行発明よりも優れた機能を有するこ
とを見出し、又このポリエチレングリコールの混合溶液
に非イオン性界面活性剤を加えると赤血球の凝集像が見
やすくなることを見出し、これらの新知見に基づいて本
発明を完成した。
抗体の検出用試薬を研究し、入手が容易でしかも安価な
グリース状ないしワックス状のポリエチレングリコール
が、２２％ウシアルブミン溶液及びクームス血清と同等
又はそれ以上の機能を有することを見出し、この知見に
基づいて先に不規則抗体の検査用試薬（特願昭５７−１
６５３１３号、先行発明という）を開発した。本発明者
は引続いてポリエチレングリコールを用いる検出用試薬
の研究を重ねた結果、状態の異なるポリエチレングリコ
ールの混合溶液が先行発明よりも優れた機能を有するこ
とを見出し、又このポリエチレングリコールの混合溶液
に非イオン性界面活性剤を加えると赤血球の凝集像が見
やすくなることを見出し、これらの新知見に基づいて本
発明を完成した。
本発明に係る検出用試薬は状態の異なるポリエチレング
リフールをリン酸塩食塩緩衝液に溶解させて得たポリエ
チレングリコールの混合溶液であり、次にその実施例を
説明する。
リフールをリン酸塩食塩緩衝液に溶解させて得たポリエ
チレングリコールの混合溶液であり、次にその実施例を
説明する。
本発明におけるリン酸塩食塩緩衝液はリン酸塩の濃度Ｖ
７５モルのものが適し、これに０．８％の割合で食塩を
溶解させておく。このリン酸塩食塩緩衝液に非イオン性
界面活性剤例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸
エステルを０．２％の割合に溶解させる。ポリエチレン
グリコールの溶剤にこのような界面活性剤を加えておく
と、赤血球が試験管の内壁に付着しなくなり、遠心沈澱
により赤血球が試験管底に落とされるので、赤血球の凝
集像が見やすくなり、従って検出精度が向上する。
７５モルのものが適し、これに０．８％の割合で食塩を
溶解させておく。このリン酸塩食塩緩衝液に非イオン性
界面活性剤例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸
エステルを０．２％の割合に溶解させる。ポリエチレン
グリコールの溶剤にこのような界面活性剤を加えておく
と、赤血球が試験管の内壁に付着しなくなり、遠心沈澱
により赤血球が試験管底に落とされるので、赤血球の凝
集像が見やすくなり、従って検出精度が向上する。
状態の異なるポリエチレングリコール（ＰＥＧと略記す
る）はグリース状ないしワックス状とフレーク状及び液
状のものを用い、これらのＰＥＧを上記リン酸塩食塩緩
衝液に次の濃度となるように溶解させる。
る）はグリース状ないしワックス状とフレーク状及び液
状のものを用い、これらのＰＥＧを上記リン酸塩食塩緩
衝液に次の濃度となるように溶解させる。
平均分子量６，０００のワックス状ＰＥＧ ４．５〜
１０．０％平均分子量２０．０００の７レーク状ＰＥＧ
Ｏ，５〜 １．２％平均分子量４００の液状ＰＥＧ
Ｏ〜 ７，０％本発明試薬を用いる不規則
抗体の検出法（本発明法という）について、その術式を
具体的に例示すると次の通りである。
１０．０％平均分子量２０．０００の７レーク状ＰＥＧ
Ｏ，５〜 １．２％平均分子量４００の液状ＰＥＧ
Ｏ〜 ７，０％本発明試薬を用いる不規則
抗体の検出法（本発明法という）について、その術式を
具体的に例示すると次の通りである。
ＰＥＧ＃６，０００と＄２０，０００及び＃−４００を
上記リン酸塩食塩緩衝液にそれぞれ濃度６％、０．９％
、２％となるように溶解させ、これに上記界面活性剤を
０．２％の割合に溶解させて本発明試薬を調製する。試
験管にセレクトゲン１滴と被検血清２滴−を入れ、これ
に本発明試薬２滴を加え、３７℃で１５〜３０分間感作
する。このものを生理食塩水を用いて２．５０ Ｏｒｐ
ｍ ％ ５分間の遠心で２回洗浄し、上澄みを捨て来る
。次に本発明試薬を２滴加えて３．４０ Ｏｒｐｍで１
５秒間達遠心、赤血球の凝集の強さを肉眼で判定する。
上記リン酸塩食塩緩衝液にそれぞれ濃度６％、０．９％
、２％となるように溶解させ、これに上記界面活性剤を
０．２％の割合に溶解させて本発明試薬を調製する。試
験管にセレクトゲン１滴と被検血清２滴−を入れ、これ
に本発明試薬２滴を加え、３７℃で１５〜３０分間感作
する。このものを生理食塩水を用いて２．５０ Ｏｒｐ
ｍ ％ ５分間の遠心で２回洗浄し、上澄みを捨て来る
。次に本発明試薬を２滴加えて３．４０ Ｏｒｐｍで１
５秒間達遠心、赤血球の凝集の強さを肉眼で判定する。
従来のアルブミン・クームス法と先行発明法及び本発明
法について幾つかの不規則抗体に対する反応性を比較し
た。その成績は第１表の通りである。なお凝集スコアは
ダンスフォードとボウレイ（Ｄｕｎｓｆｏｒｄ ａｎｄ
Ｂｏｗｌｙ ）の方法に従って（４＋）から（０）ま
での６段階に分けて計算し７こ。
法について幾つかの不規則抗体に対する反応性を比較し
た。その成績は第１表の通りである。なお凝集スコアは
ダンスフォードとボウレイ（Ｄｕｎｓｆｏｒｄ ａｎｄ
Ｂｏｗｌｙ ）の方法に従って（４＋）から（０）ま
での６段階に分けて計算し７こ。
第 １ 表
傘プロメリン法によシ（＋）
第１表から判るように試験に用いた抗Ｅは従来法では検
出不能であり、ブロンリン法で始めて検出可能であった
が、本発明法により容易に検出できた。本発明法は抗Ｅ
のほか第１表に記載した通り多くの不規則抗体を検出す
ることができた。検出の感度は抗Ｅ１抗りと抗ｄについ
ては従来法よりも本発明法の方が感度が良く、抗１ ｒ
ａは本発明法に比較して従来法の方が感度が良かった
が、その他の抗体では画法とも同じ感度を示した。又先
行発明法では抗体価の低い抗Ｓ１抗Ｘｇ” ％抗Ｊｒａ
は検出不能であったが、本発明法はこれらの不規則抗体
をも検出することができた。
出不能であり、ブロンリン法で始めて検出可能であった
が、本発明法により容易に検出できた。本発明法は抗Ｅ
のほか第１表に記載した通り多くの不規則抗体を検出す
ることができた。検出の感度は抗Ｅ１抗りと抗ｄについ
ては従来法よりも本発明法の方が感度が良く、抗１ ｒ
ａは本発明法に比較して従来法の方が感度が良かった
が、その他の抗体では画法とも同じ感度を示した。又先
行発明法では抗体価の低い抗Ｓ１抗Ｘｇ” ％抗Ｊｒａ
は検出不能であったが、本発明法はこれらの不規則抗体
をも検出することができた。
以上は本発明に係る試薬の実施例及びこれを用いる不規
則抗体検出法の１例を示したもので、本発明はこれらに
限定されることなく、発明の要旨内において、用いるポ
リエチレングリフールを変更することができ、例えばポ
リエチレングリコールについては≠６０００のものをφ
；４０００に、′Ｊｆ−２ｏ、ｏｏｏのものを＃、１４
，０００に、又＃４００のものを４＃、３００に代えて
もよく、この場合混合溶液中における各ポリエチレング
リコールの濃度をその平均分子量に応じて変更すること
ができる。
則抗体検出法の１例を示したもので、本発明はこれらに
限定されることなく、発明の要旨内において、用いるポ
リエチレングリフールを変更することができ、例えばポ
リエチレングリコールについては≠６０００のものをφ
；４０００に、′Ｊｆ−２ｏ、ｏｏｏのものを＃、１４
，０００に、又＃４００のものを４＃、３００に代えて
もよく、この場合混合溶液中における各ポリエチレング
リコールの濃度をその平均分子量に応じて変更すること
ができる。
本発明に係る検出用試薬Ｉ−ｒ状態の異なる複−景号−
ポリエチレングリコールを、リン酸塩食塩緩衝液に溶解
させて混合溶液を調製したもので、入手が容易でしかも
安価なポリエチレングリコールを用いて不規則抗体を検
出し、従来のアルブミン拳クームス法と同等又はそれ以
上の成績を挙げることができるから、不規則抗体の検出
用試薬として極めて有益である。又リン酸塩緩面液に非
イオン性界面活性剤を加えたものは検出精度がさらに向
上するという利点を有す。
ポリエチレングリコールを、リン酸塩食塩緩衝液に溶解
させて混合溶液を調製したもので、入手が容易でしかも
安価なポリエチレングリコールを用いて不規則抗体を検
出し、従来のアルブミン拳クームス法と同等又はそれ以
上の成績を挙げることができるから、不規則抗体の検出
用試薬として極めて有益である。又リン酸塩緩面液に非
イオン性界面活性剤を加えたものは検出精度がさらに向
上するという利点を有す。
Claims (3)
- （１） グリース状ないしワックス状と７レーク状及
び液状の各ポリエチレングリコールを、リン削塩食塩緩
衝液に溶解させて得た状態の異なるポリエチレングリコ
ールの混合溶液からなることを特徴とする不規則抗体の
検出用試薬。 - （２） グリース状ないしワックス状とフレーク状及
び液状の各ポリエチレングリコールを、リン酸塩食塩緩
衝液にそれぞれ４．５〜１０．０％、０．５〜１．２％
、０〜７．０％の濃度となるように溶解させて混合溶液
を調製した特許請求の範囲第１項に記載の不規則抗体の
検出用試薬。 - （３） ポリエチレングリフールの混合溶液に非イオ
ン性界面活性剤を加えた特許請求の範囲第１項又は第２
項に記載の不規則抗体の検出用試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9443083A JPS59218958A (ja) | 1983-05-27 | 1983-05-27 | 不規則抗体の検出用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9443083A JPS59218958A (ja) | 1983-05-27 | 1983-05-27 | 不規則抗体の検出用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59218958A true JPS59218958A (ja) | 1984-12-10 |
| JPS648307B2 JPS648307B2 (ja) | 1989-02-13 |
Family
ID=14110014
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9443083A Granted JPS59218958A (ja) | 1983-05-27 | 1983-05-27 | 不規則抗体の検出用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59218958A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62159047A (ja) * | 1985-12-31 | 1987-07-15 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 血漿蛋白定量用試薬 |
| WO2002006839A3 (de) * | 2000-07-13 | 2002-12-05 | Olympus Diagnostica Gmbh | Blutgruppenserologisches untersuchungsverfahren |
| CN102338800A (zh) * | 2011-05-25 | 2012-02-01 | 上海血液生物医药有限责任公司 | 抗体筛选红细胞试剂盒 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3012407U (ja) * | 1994-12-14 | 1995-06-20 | 株式会社トキワ | カートリッジ式コンパクト |
| US8528511B2 (en) | 2005-09-23 | 2013-09-10 | Jp Scope, Inc. | Variable travel valve apparatus for an internal combustion engine |
| EP2530261B1 (en) | 2005-09-23 | 2014-04-30 | JP Scope, Inc. | Valve apparatus for an internal combustion engine |
| TW202040132A (zh) * | 2018-11-09 | 2020-11-01 | 日商積水醫療股份有限公司 | 抑制以自動分析裝置進行的免疫測定中之異常檢測的方法、檢測方法、免疫測定試劑、及免疫測定試劑套組 |
-
1983
- 1983-05-27 JP JP9443083A patent/JPS59218958A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62159047A (ja) * | 1985-12-31 | 1987-07-15 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | 血漿蛋白定量用試薬 |
| WO2002006839A3 (de) * | 2000-07-13 | 2002-12-05 | Olympus Diagnostica Gmbh | Blutgruppenserologisches untersuchungsverfahren |
| CN102338800A (zh) * | 2011-05-25 | 2012-02-01 | 上海血液生物医药有限责任公司 | 抗体筛选红细胞试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS648307B2 (ja) | 1989-02-13 |
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