JPS59196738A - 吸着体およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は血液中の有害成分を除去するだめの吸着体に関
する。さらに詳しくは血液あるいは血漿、血清中からリ
ボ蛋白、とくに極低つ粘度リボ蛋白（ＶＴ、ＤＩ、）お
よび（または）低暫度リボ蛋白（ＴＪＤＬ）を選択的に
吸着除去する。ための吸着体に関する。

血液中に存在するリボ蛋白のうちｖＬＤＴ、、　ＴＪＤ
Ｌはコレステロールを多く含み、！ｉ！Ｉｌ脈（ｉｉＮ
化の原因となることが知られている。とりわけ家族性高
脂血症などの高脂血症、高コレステロール症においては
正常値の数倍のＶＬ　ＤＬおよび（または）ＴＪＤＬ値
を示し、冠動脈の硬化なとをひきおこす。

これらの疾患の治療には食事療法、条物た・；法が行な
われているが効果に限度があり、ｒｒＸ１１作用も懸念
されている。とくに家族性高脂血症に対してはＶＬＤＬ
ＸＬＤＬを多く含んだ患者の血漿を分ｉ’Ｊ１！−した
のち、正常血漿またはアルブミンなどを成分とする補液
と交Ｆ％　Ｌ、てＶＬＤＬ値、ＬＤＬ値を低下させる、
いわゆる血漿交換療法が現在のところほぼ唯一の効果的
な治療法である。しかしながら、血漿交換療法は周知の
ごとく、（１）高価な新鮮血漿あるいは血漿製剤を用い
る必要がある、（２）肝炎ウィルスなどの感染の傾れが
ある、（３）有害成分のみてなく有用成分も同時に除去
してしまう、ずなわぢリボ蛋白のはあい有用である高密
度リボ蛋白（ＨＤＴ、）も同時に除去してしまうなどの
欠点を有する。

叙上の欠点を解消する目的で膜による有害成分の選択的
除去が試みられているが、選択性の点で満足できるもの
はいまたえられていない。

また同じ目的で抗原、抗体などを固定した、いわゆる免
疫吸着体を用いる試みがなされており、該方法は選択性
の点ではほぼ満足できるものの、用いる抗原、抗体の入
手が困難かつ高価であるという欠点を有する。

さらには、除去対象物質に特異的な親和性（アフィニテ
ィー）を有する物質（以下、リガンドという）を担体に
固定した、いわゆるアフィニティークロマトグラフィー
の原」Ｊ［！による１没落体も試ミラれている。該方法
に用いられるリガンドは抗原、抗体などに比べれば入手
しやすい物う？Ｃが多いが、生体に由来する物質が多い
ため体外循環治療に用いるには滅菌操作などに対する安
定性、価格、安全性などの点て？！ｉ’：１足しうるち
のはほとんどない０ 本発明者らは叙上のごとき欠点を克服すべくさらに鋭意
研究を重ねた結果、！ｌ”ｒ定の粘度と硫黄含量を有す
るデキストラン硫酸および（または）その塩を水不溶性
多孔体に共有結合を介して固定することによって、高効
率でかつ安全に、しかも選択性よくリボ蛋白を吸着除去
しうる体外循環治療用吸着体かえられることを見出し、
本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は極限粘度（ＩＢ、４食塩水溶液中、
２５°Ｃで測定、以下同様）がｏ、１２ａ！／ｇ以下で
かつ硫黄含量が１５重量％以上、好ましくは１５〜２２
爪；ｌｉ’ｃ％のデキストラン硫酸および（または）そ
の塩が水下７′δ性多孔体に共有結合を介して固定され
てなる体夕）循環治療用リボ蛋白吸着体およびその；１
；す造）去に関する。

デキストラン（碓うレおＪ二び（または）その塩とはロ
イコノストック・メセンテロイデス（ＬｅｕｃｏｎｏＳ
ｔｏｃ　ｍｅｇθｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）などにより生産
される多糖であるデキストランの硫酸エステルおよび（
または）その塩である。

デキストラン硫ト民および（または）その塩がカルシウ
ムなどの２価カチオンの存在下（こリボ蛋白と沈殿をＪ
形成することが知られており、通常該目的（こけ分子に
炎が５０万（極限粘度が約０．２０ｄｚ／ｇ）程度のデ
キストラン硫酸および（またけ）その塩が使用される。

しかしながら、比較例に示すように斜上のごときデキス
トラン硫酸および（または）その塩を水不溶性多孔体に
固定してもＬＤＬおよび（または）ＶＬＤＬの吸Ｘ（能
力は低く、実用に耐えない。本発明者らは種々検討を重
ねた結果、極限粘度が０．１２ｃｌ）／、以下、より好
ましくはＯ，ｏａｄｚ／ｑ以下でかつ硫黄含量が１５重
債％以上のデキストラン硫酸および（または）その塩が
高いＬＤＬおよび（または）ｖ■、Ｄｂ：吸着能力と選
択性を示すことを見出した。さらに１．′＜べきことに
、斜上のごとき沈殿法では１０〜４０ＩＴ１１４の２価
カチオンを必要とするのに対し、本発明の吸ン音体では
２価カチオンの添加を必ずしも行なわなくとも高いＩＪ
（着能力と選択性を示すことが見出された。またデキス
トラン硫酸および（または）その塩の：、−（、？　ｆ
′［＋は低いが、分子ｍがある稈度■ジ上大きくなると
毒性が増加することが知られており、この点からも極（
８４粘度が０．１２ｄｌ／ｑ以下、より好ましくはＯ，
ｏ８ａｚ／、以Ｆの比較的低分子量のデキストラン（ｃ
ｆｇ　９および（またけ）その塩を用いることによって
、固定されたデキストラン硫酸および（または）その塩
が万が一説離した際の危険を防止できる。さらには、デ
キストラン硫酸および（または）その塩は大部分がα−
１，６−グリコシド結合であるので高圧蒸気滅菌などの
操作を施しても変化が少ない。

デキストラン硫酸および（または）その塩の分子（ｉの
測定法には種々あるが、粘度測定によるのが一般的であ
る。しかしながら、デキストラン硫酸および（ま１こは
）その塩は高分子電解質であるため溶液の４１２強度、
ｐＨ１さらにデキストラン硫酸および（または）その塩
の硫黄含量（すなわち、スルホン酸基の量）などによっ
て同じ分子量のものでも粘度が異なる。本発明でいう極
限粘度とは、デキストラン硫酸および（または）その塩
をナトリウム塩とし、中性の１１Ａ食塩水溶液中、２５
°Ｃで測定したものである。

本発明に用いるデキストラン硫酸および（または）その
塩は直＠′ｉ状ても分岐鎖状でもよく、塩としてはナト
リウム、カリウムなどの水溶性塩が好ましい。

本発明に用いる担体の水不溶性多孔体としてはつぎの性
質を！ｉｆｆえていることが好ましい。

（１）機械的強度が比較的高く、カラムなどに充填して
、血液、血漿などの体液を流したばあいの圧力損失が小
さく、目詰りなどをおこさない。

（２）充分な大きさの細孔が多数存在すること、すなわ
ち吸危除去対象物質が細孔内に侵入できることが必要で
あり、球状蛋白質およびウィルスを用いて測定した排除
限界分子量が１００万〜１億の範囲である（ただし排除
限界分子量とは細孔内に侵入できない（排除される）分
子のうち最も小さい分子量をもつものの分子量をいう）
。

（３）表面に固定化反応に用いうる官能ノ１（または容
易に活性化しつる官能基、たとえばアミノ基、カルボキ
シル基、ヒドロキシル基、ヂオール基、酸無水物基、ザ
クシニルイミド基、塩素基、アルデヒドノｊ・、アミド
基、エボギシ基などが存在する。

（４）高子蒸気滅菌などの滅菌１・■作による変化が少
ない。

なお、（２）の球状蛋白＋、ノ（およびウィルスを用い
て測定した排除限界分子量（以下、排除限界分子ｆ、Ｑ
という）に関しては、排除限界分子量ｔ　１ｏｏ万未ｆ
ｌＩＩ・の４１ｊ体を用いたばあいはＶＴＪＤＬ　％　
Ｔ−ＤＬの１全来１辻は小きく実用に耐えないが、排除
限界分子量が１００万〜数百万とＶＬＤＬ　％ＬＤＬの
分子量に近い担体でもある程度実用に供しうるものかえ
られる。一方、排除限界分子量か１億を超えると、リガ
ンドの固定量が減少して結果的に吸着量が減り、またゲ
ルの強度も低下するため好ましくない。かかる刈ｊ由の
ため本発明に用いる水不溶性多孔体は排除限界分子量が
１００万〜１億の範囲であることが適当である。

斜上のごとき性質を備えた水不溶性多孔体の代表例とし
では、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体、架橋ポリ
ビニルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋された
ビニルエーテル−無水マレイン酸共重合体、架橋された
スチレン−無水マレイン酸共重合体、架橋ポリアミドな
どなどの合成高分子の多孔体や多孔質セルロースゲル、
さらにはシリカゲル多孔質ガラス、多孔質アルミナ、多
孔質シリカアルミナ、各孔質ヒドロキシアパタイト、多
孔質ケイ酸カルシウム、多孔なηジルコニア、ゼオライ
トなどの無機多孔体があげられるが、これらに限定され
るわけではない　また水不溶性多孔体の表面は多糖類、
合成高分子などでコーティングされていてもよい。

水不溶性多孔体の粒子径は一般的には小さい方が吸着能
力の点で好ましいが、粒子径があまりに小さくなるとカ
ラムに充填したばあいの圧力損失が大きくなり好ましく
なく、１〜５．　ｏｏｏμの範囲であることが好ましい
。また水不溶性多孔体は単独で用いてもよいし２種類以
上混合して用いてもよい。

斜上の代表例の中でも多孔質セルロースゲルは前記（１
）〜（４）の性質を備えているばかりでなく、デキスト
ラン硫酸および（または）その塩を効率よく固定するこ
とができるため本発明にｉ１λも適した水不溶性多孔体
のひとつである。

デキストラン硫酸および（または）その塩を水不溶性多
孔体に固定する方法には４・１１々あるが、体外循環治
療に用いるにはリガンドが脱ｊ・ｚ（？シないことが重
要であるので、リガンドが結合の強固な共有゛結合を介
して水不溶［Ｉ：多孔体に固定されていることが望まし
い。

固定化方法の代表例としては、ハロゲン化シアン法、エ
ピクロルヒドリン法、ビスエポキサイド法、ハロゲン化
トリアジン法などがあげられるが、結合が強固でリガン
ドの脱）ミ１（の危険性が少ないエピクロルヒドリン法
が最も本発明に３１カしている。しかしながら、該エピ
クロルヒドリン法は反応性が低く、とくにデキストラン
硫酸および（または）その塩を固定するばあいにはリガ
ンドの官能基が水酸基であるためさらに反応性が低く　
、ａ常の方法では充分なリガンド固定量をうることは！
ＶＩ　シい。

本発明者らは種々横側の結果、エピクロルヒドリンで活
性化されたエポキシ化水不溶性多孔体とデキストラン硫
酸および（または）その塩を反応させる工程において、
デキストラン硫酸および（または）その塩の０度（水不
溶性多孔体（乾燥型Ｈｔ　）を除く全反応系重量に対す
る濃度、以下同様）を６重量％以上、より好ましくは１
０重量％以上に保つことによって充分な量のデキストラ
ンに酎および（または）その塩が固定されることを見出
した。デキストラン硫酸および（またＧＪ）その塙の固
定化量については、有意なリボ告白［ｊａ　冶Ｈ，’＜
をうるにはカラム体積１ｍｌあたり０．２ｍｑ以上が好
ましく、また経済性を考慮すると１００ｍｐ以下が望ま
しい。

また、多孔質セルロースゲルを用いると他の水不溶性多
孔体に比べ、同じ条件でもデキストラン硫酸および（ま
たは）その塩の固定量が多く、好都合である。

エピクロルヒドリンにより活性化された水不溶性多孔体
とデキストラン硫酸および（または）その塩との反応で
えられる吸着体は、デキストラン硫酸および（または）
その塩が式二 ｔｔ （式中、ＯＡはデキストラン硫１゛ルおよび（または）
その塩の水酸基に由来する酸素１３ｉξす、０は水不溶
性多孔体の表面水酸基に由来する酸素原子）で示される
結合を介して水不溶１′Ｉ：多孔体に固定されている。

なお、固定化反応終了後未反応のデキストラン硫酸およ
び（または）その）５．４は回収してｆ１７割などの工
程を経てＭ使用することもできる。

本発明による吸着体を体外循環治療に用いるには種々の
方法があるが、入口と出口に体液成分（血球、蛋白質な
ど）はＪＩ■過するが吸着体は通過できないフィルター
、メツシュなどを装着したカラムに充填し、該カラムを
体外やＩＩｉ環回路に組み込み、血液、血漿などの体冶
をカラムに通して行なう方法が代表的である。

つぎに実施例をあげて本発明をさらに＋ｉＦ　ｔ、　＜
説明するが、本発明はかかる実カＩｉ例のみに限定され
るわけではない。

比較例１ セルロファインＡ−６（チッソ（４″（ａ製の多孔質セ
ルロースゲル、排除限界分子量５０．０００．０００　
、粒子径４５〜１０５μｍ　）　１０ｍ１に２０％Ｎａ
ＯＨ４ｇ、ヘプタン１２ｇおよび／ニオン系界面活性剤
トウイーン（Ｔｗｅθｎ）２０を１　ｉ１゛、＜＋加え
、４０°Ｃで２時間攪拌後エピクロルヒドリン５．を加
えて２１＋、’ｒ間橙拌した。１′Ｉ＞置後上澄みを捨
て、ゲルを水７）１．１戸ｉｉ’、ｉ　シてエポキシ化
セルロースゲルをえた。

つきにＩＪＤＴＪ沈殿用として市販されている極限粘度
０−２０　ａｉ／′ｑ、平均重合度（原料デキストラン
の平均重合度、以下平均重合度という）３，５００、Ｍ
ｊ黄含量１７．７屯（八％のデキストラン硫酸ナトリウ
ム０．５．を水２ｍｌに溶解し、これに斜上のごとくし
てえられたエポキシ化セルロースゲル’１ｍｌを加え、
ｐＨ１２に１ｌｉａ　ｆｉした（デキストラン硫酸ナト
リウムの濃度は約１０重世％）。これを４０°Ｃで１６
時間振とう後ゲルを戸別し、２Ｍ食塩水、０．５Ｍ食塩
水、水で洗浄し、デキストラン硫酸ナトリウムが固定化
されたセルロースゲルをえた。固定されたデキストラン
硫酸ナトリウムのトミはカラム体積１ｍｌあたり４．２
ｒｒ、９であった。

比較例２ デキストラン硫西千すトリウムをＪＸｆ４１ｉ１（％占
（ｇＬｏ、１２４ｄｌ／９、平均重合度１４０．＋−１
１５：ｉ：・ｌ含量１；’、　５．７　ｊ旦１’ｊ％の
ものにかえたほかは比較例１と同様にしてデキストラン
硫酸ナトリウムが固定されたセルロースゲルをえた。固
定された７゛キストランσ’ｊｅ　１１’）ナトリウム
の友ｊ１はカラム体積１ｍｌあたり２．５ｍ、であった
。

実施例１ デキストラン硫酸ナトリウムとして （１）極限粘度０．０２７ａｌ／ｑ、平均重合度１２、
ｈ’ｎ’＝黄含１１０７．７ｊｌｊ滑％（２）極限粘度
肌０５５ａｚ／、、平均重合度４０．にｉ訂１“を含ｈ
（１９爪を静（３）極限粘度０−０８３ｄｔ／９、平均
重合度１４０、硫１３′？含鼠１９．２’ｉＴ都ヲ４（
４）極限粘度０．１１８ａｌ／ｐ、平均重合度２７０、
硫黄含量１７．７取量％の４種類を用い、比較例１と同
様にしてデキストラン硫酸ナトリウムが固定されたセル
ロースゲルをえた。固定されたデキストラン（１４ｉ：
酸ナトリウムの量はカラム体積１ｍｌあたりそれぞれ２
．０ｍｇ、１．５ｍ９．４．０ｍｇ、４．３ｍ９であっ
た。

実施例２ 架橋ポリアクリレートゲルであるトヨバールＨＷ６５　
（東洋ｖＶ達（４１）製、排除限界分子量５．　ＯＤ［
ｌ、　ＯＤＤ、粒子径５０〜１０（ｂ＋ｍ）　１０ｍ４
に飽和ＮａＯＨ水溶液６ｍｔ　％エピクロル上１９２１
５ｍ１を加え、攪拌しながら５０°０で２時間反応させ
たのち、ゲルをアルコール、水で洗浄してエポキシ化さ
れたゲルをえた。

えられたゲル２ｍｔに極限粘度０−０５５ｄｔ／、ｐ、
平均重合度４０、硫黄畜敏１９爪爪％のデキストラン硫
酸ナトリウム０，５．および水’１ｍｌを加えた（デキ
ストラン硫酸ナトリウムの濃度は約１３重量％）。

ついでｐＨ１２に調整し、４０°Ｃで１６時間振とうし
、ゲルを戸別し、２Ｍ食塩水、０．５Ｍ食塩水、水で洗
浄してデキストラン硫酸ナトリウムが固定されたゲルを
えた。固定されたデキストラン硫酸ナトリウムのｂ−（
はカラ１、体１ｆ１１ｒｎｌあたりｏ、４ｍ９であった
。

実施例６ 極限粘度０．０５５ｄｌ／ｑ、平均重合度４０、硫黄含
量１９重１ｊ１％のデキストラン硫酸ナトリウムを用い
、固定化反応におけるデキストラン（υｊ５　Ｎｉナト
リウムの濃度を２゜５重ｈｋ％にかえたほかは比較例１
と同様にしてデキストラン硫酸ナトリウムが固定された
ゲルをえた。固定されたデキストラン硫酸ナトリウムの
足はカラム体’ｒｉ：１１ｍ１あたり０．１５ｍ９であ
った。

試験例 比較例１〜２、実施例１〜６でえられたデキストラン硫
酸ナトリウムが固定されたゲルのそれぞれ１ｍｌをカラ
ムに充填し、高脂血症患音の血漿（総コレステロール４
度３００ｍｇ／ｄｌ）　６ｍｌを流し、吸着されたＬＤ
Ｌの量を総コレステロールを指標として測定した（用い
た血漿中のコレステロールはほとんどがＬＤＬに由来す
るため）。

結果を第１表に示す。

実施例４ 実施例１でえられた吸着体のうち、極限粘１句０．０２
７ｄｔ／９、平均重合度１２、硫Ｍｉｔ含ノー（１７゜
７重量％のデキストラン硫酸ナトリウムを固定したもの
を生理食塩水中に分散させた状態で１２０　’ａ　２Ｄ
分間高王蒸気滅菌を施し、実ｆｉ＋”ｊ、　（３’：Ｉ
ろと同様にしてＬＤＬの吸着量を測定したところ、該１
１’２菌操作によルＷ　着ｆｆｔ　〕＃ｐ’＜　少Ｉｔ
　ワ１’　カテＡ−）−）　７＝。

実施例５ 実施例１でえられた吸着体のうち、極限粘度０．０２７
ａ、ｚ／、、平均重合度１２、（７）：乙黄含ｆ筺１７
．７重凰％のデキストラン硫酸ナトリウムを固定したち
の１ｍｌをカラムに充填し、これに正常ヒト血漿（ＬＤ
ＬコレステロールとＨＤＬコレステロールの比が約１　
：　１　）　６ｍｔを通したところ、ＩｊＤＩ、は大幅
に減少したが、ＨＤＬはほとんど吸ｆｊされなかった。

実施例６ 実施例５で用いた吸着体１ｍｌをカラムに充填ｔ７、こ
れにＶＬＤＬ、　ＬＤＬ　、　ＨＤＬを含む正常ウサギ
の血卵６ｍｌを通し、カラムｉＥｆ’＋　１”；１前後
での血漿中のリボ蛋白をポリアクリ／′１ノアミドゲル
を用いたディスク電気泳動法で調べた。第ｉｘはその結
果を示すチャートである。第１図中、曲、Ｉ？Ｊ　Ａお
よびＢはそれぞれカラム通り：ロ前、通過後の電気泳動
の結果であり、縦軸は５７０ｎｍ　Ｉ＝こおける吸光度
、↑けそれぞねＶＴＪＤＬ　、　ＬＤＬ　、　ＨＤＬの
バンドが出現した位置を示すっ 第１図に示ずごと（、ＶＬＤＵ６、ＬＤＬはＩＪｌり着
されたが、ＨＤＬはほとんど段着されなかった０

【図面の簡単な説明】

第１図はポリアクリルアミドゲルを用いたディスク電気
泳動の結果を示すチャートである０２１図 ＶＬＤＬ　　ＬＤＬ　　　　　　　　　　　　　　　　
）（Ｉ）Ｌ手続補正書（自発） 特６ｆ１庁長官　若　杉　川　夫　　　殿１・ＩＦ　（
！ｌの表；１＼ 昭和５８　　年特許願第　７０９６７　　　号２発明の
名称 吸着体およびその製造法 ３補１「４・する者 弔（′１との関係　　特Ｗ￥１出願人 住　所　　大阪市北区中之島三丁目２番４号名　称　　
（０９４Ｔ１淵化学工業株式会社代表者　高　１）　敞 ５補正の対象 （１）　　明細書の［−発明の１：）′：細７フｒ　Ｉ
ＩＱ明１の）１“ｉ６補正の内器 （１）　　明糾Ｉ書１４頁９イＪ−の［１つできる４、
−１のつぎに改行してつぎの文章を挿入−・ｔ−る。 「　デキストランｆｍ　Ｉｔを同一、；ｆしたのち、未
反応の活性基（エピクロルヒドリンを用いたはアいはエ
ポキシ基）はモノエタノールアミンなどで封止しておく
のが＼イ４ましい。−１（２）　　同１５頁末行の［を
えた。−１（υつぎに「未反応のエポキシ基はモノエタ
ノールアミンを用いて封止した。」を挿入する。 （３）同１７頁１５行の「をえた。」のつぎに「未反応
のエポキシ基はモノエタノールアミンを用いて封止した
。」をＪｊｉｉ人する。 以　　上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　極限粘度が肌１２ｅＬｌ／９以下でかつ硫黄含量が
   １５重量％以」二であるデキストラン硫酸および（また
   は）ぞの塩が水不溶性多孔体に共有結合を介して固定さ
   れてなる体外循環治療用リボ蛋白（段、）′ｉ体。 ２　水不溶性多孔体の排除限界分子量が１００万〜１億
   の範囲である特許請求の範囲第１項記載の吸着体。 ろ　水不溶性多孔体が多孔質セルロースゲルである行ｉ
   ｉ’Ｆ請求の範囲第１項または第２項記載の吸着体。 ４　デキストラン硫酸および（または）その塩が式： （式中、ＯはテキストランＪ＜’ｔ　Ｄ’ｓおよび（ま
   たは）その塩の水酸基に由来する政不；原子、ＯＢは水
   不溶性多孔体の表面水Ｗハに由来する酸素原子である）
   で示される結合を介して水不溶性多孔体しこ同字されて
   なるＱ’！ｌ許ｔ！Ｉ’ｊ求の範囲第１項、第２項また
   は第６項記載の吸着体。 ５　デキストラン１流ｒ訳および（またｉｌｌ：　）そ
   のＪ漁の固定数がカラム体Ｉ４１ｍ１あたり０．２ｍｇ
   以上である特許請求の範囲第１頂、第２項、第６項また
   は第４項記載の吸帰体。 ６　エポキシ化された水不溶性多孔体とデキストラン硫
   酸および（または）その塩とを反ｊＱさせるにあたり、
   デキストラン硫酸および（または）その塩濃度を水不溶
   性多孔体（乾燥重量）を除く全反応系重置の６重す支％
   以上としたことを特徴とする極限粘度かＱ、１２ｄ−１
   ／９以下でかつ硫黄含量が１５重量系以上のデキストラ
   ン硫酸および（または）その塩が水不溶性多孔体に共有
   結合を介して固定されてなる体外循環油（Ｃｆ用リボ蛋
   白吸着体の製造法。 ７　水不溶性多孔体の排除限界分子量が１００万〜１億
   の範囲である％許請求の範囲第６項記載の製造法。 ８　水不溶性多孔体が多孔質セルロースゲルである′１
   １許１１１１求の範囲第６項または第７項記載の製造法
   。 ９　デキストラン＋ｉｉｇ　ｆｌ’！および（または）
   その塩が式： （式中、ＯＡはデキストラン硫酸および（または）その
   塩の水酸基に由来する酸素原子、０は水不溶性多孔体の
   表面水酸基に由来する酸素原子である）で示される結合
   を介して水不溶性多孔体に固定されてなる特許請求の範
   囲第６ｒＡ、第７項または第８項記載の製造法。 １０　　デキストラン硫酸および（または）その塩の固
   定ＬＫがカラム体ｆｊｆ１ｍｔあたり肌、２ｍｔｉ以上
   である１“ｒ許１留求の１ｉａｌｊＪＪ第６項、第７項
   、”：＋Ｓ　８　Ｑｊまたは第９項記載の製膜ン人。