JPS59161319A - 薬理作用を有する魚貝類エキスの製造方法 - Google Patents

薬理作用を有する魚貝類エキスの製造方法

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JPS59161319A JP58034385A JP3438583A JPS59161319A JP S59161319 A JPS59161319 A JP S59161319A JP 58034385 A JP58034385 A JP 58034385A JP 3438583 A JP3438583 A JP 3438583A JP S59161319 A JPS59161319 A JP S59161319A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は薬理作用を有する魚貝類エキスの製造方法、更
に詳細1には栄養バランス作用、抗潰瘍作用、インシュ
リン様作用、高脂血症治癒作用、リウマチ及び関節炎の
治癒作用を有する魚貝類エキスの製造方法に関する。
従来、魚肉エキスの抽出法としては、たとえば、すでに
公知の特公昭53−31935の方法があり、この方法
によれば却1切り・スラリー化等の前処理を施していな
い原料魚を60℃以上に加熱し、次に50〜60℃、p
、E(9〜10にて而」アルカリ性蛋白分解酵素を用い
て分解した後、pH5〜6に調整し別のmIJ酸性分解
酵素を用いて分解する。この方法では、炭酸ナトリウノ
ーなどの食品衛生法上好ましくないナトリウムイオンを
添加して声を9〜10に調整して面jアルカリ件蛋白分
解酵素を作用させ、次いでpH全5〜6に調整した後に
耐酸性分解酵素を添加するという面倒なpH調整操作が
必要であるという欠点を有していた。しかも、この方法
では耐酸性分解酵素が完全に不活性化されずに剛アルツ
ノ’I (g4′蛋白分解酵素と共に作用するため実質
上分−J″弗’3001下のパブタイドアミノ酸群及び
光力[1アミノ酸のみからなる抽出液を得ることは困難
で7’+つだ。
本発明の主[]的は実質上分子量30009下のベゾク
イト゛−ノ′ミノl)夕In及び遊離アミノ酸を主成分
と17で含む薬理作用1を有する魚貝類エキスの製]1
1;方法を4に供することにある。
本発明の他の目的はpJI訴(整操作が不要な薬理作)
11をイーIする魚貝類エキスの製造方法をJJt化す
ることにある。
本イと明によれは、細切シ・スラリー化なとの1)II
処■11(金側していない原料魚貝類を75℃以上のt
晶度に力11熱1〜で魚貝類て含1れる自己分解酵素召
−完全に不活性化すると同時に魚貝ぬjの臭気を除去し
、次に50〜60℃、pI(6,Q〜70において枯浄
閑産生蛋自分5宜酵素を添加して前記魚貝類に含寸れる
蛋白質をプロプオース級VC−iで分解した彷・、f!
IA度を75℃り上に昇温しで前記蛋白分解酵素を完全
に不活性化し、次いで40〜50℃、pH6、0〜7.
0、]〜3時間において麹菌産生蛋白分解酵素を添加し
てi′lJ記プロテオース級に寸で分解した蛋白佃を更
に実質上分子i%3000JJ下のパブタイドアミノ酸
群及び遊離アミノ酸に分角〃し、引続いて75℃以」二
に昇温して麹菌産生蛋白分解酵素を完全に不活性化し、
得られた分1fイ液を分離濃縮することを特徴とする薬
理作用を有する魚貝類エキスV製造方法が提供される。
1ソ下、本発明につき史υて詳祁[説明する。
本発明者(弓pH6、0〜7.0.50〜60℃におい
て枯草1乳産生蛋白分解酵素を作Illさせた後にこの
t’I’F 7を完全に不活性化し、次いで1つH’ 
6 、0〜7.01、i Q−50°C11〜31角間
において麹菌産生蛋白分量′酵素を作1(1されること
により実質上分子量3000J))のペブタイFアミノ
酸ノ祥及び遊離アミノ酸を主成分として含む魚貝類エキ
スを製造することができること並ひに内蔵を含む魚貝類
全体を5)−解するため種々の薬理作用をイイするもの
と推定し、種々検討研究を行った結果、今般上記特定の
アミノ酸組成を有する魚貝類エキスは栄養バランス作用
、抗潰瘍作51]、インシュリン様作用、高脂血症治癒
作用、リウマチ及び関節炎の治癒作用を有することを確
認し本発明を完成するに到った。
本発明ではまず原料魚貝類例えd、アジ、ザパ、イワシ
、ザン々、カツオ、ホッケ、クラ、イカ、タコ、エビ、
カキ、シジミ5アザリ、イガイ、モガイ、アカガイ、ハ
マグリ等を細+:Bす・スラリー化などの前処球をする
ことなく九%剪1反応缶に投入する。原オーIKより太
きいものは適当な大きさに切断してもよい。投入拶・直
ぢ6て75℃」ソ上、りflしくは80℃」ン上に昇温
して魚貝類の中1・で含せれる自己消化酵素を完全に不
活性化すると1Til fl占(l(自己消化酵素の作
用1により発生する魚具類特有の牛〈さみ、悪臭などの
臭グしを除去する。前述の従来法においては60℃を不
活1勺、化温度の最低値としていたが、薬理作用を有す
る本発明の魚貝類エキスとしては臭気が若干残る/ヒめ
前記i低温度値では不十分である。
次いで、50℃〜60℃、pI(5,Q〜7,0、好寸
しくはpH6、0〜6.5において枯草菌産生蛋白分解
酵素を添加して魚貝類に含捷れる蛋白刊をプロプオース
級にまで分解する。分解時間は臨界的なものではないが
通常1〜3時間、好4しくは]、5〜2時間行なう。本
発明ではpI−16,0〜7.0の中性若しくは弱酸性
下で分解を行なうためpH調整を行なう必要がなく、ま
たアルカリ性111で分解を行う場合に比し、原料魚貝
類の筋肉の膨潤、・円部との分割は余り生じないが、こ
のpHflii2囲にて継続して分解することにより低
分子のベグタイ1:′アミノ酸及び遊離アミノ酸が全く
生ずることなく蛋白質は完全にプロプオース級に寸て分
角イされる。この段1者では次段階における酵素分角イ
に適するようプロテオース級斗で完全に相分解する必要
がある。
次いで、温度を少くとも75℃り上、好寸しくば80’
Cり上に昇温する。この昇温工程では前段階において用
いた枯草菌産生蛋白分解酵素か完全に不活性化される。
不活性化時間−通常10分〜1一時間、好壕しくは15
〜30分程度である。この不活性化工程がない場合には
、次の酵素分解工程において前段階の酵素が併存して作
用し、本発明の目的とする!特定のアミノ酸を含む薬理
作用を有する魚貝類エキスは得られ々い。
引続いて、本発明では1つFlを調整せずkc /I 
0〜50℃、pJI(’i、0〜7.0において麹菌産
生’?rfi自分解酵自分流酵素て分1剪する。この工
程では枯草菌産生蛋白分子Qi(酵素が完全に不活性化
されているため、麹菌産生蛋白分解酵素のみが作用して
前段階により分解生成したプロテオースが完全に分角イ
され、実lq的に分子性:3000以下のベプタイドア
ミノ酸群及び遊t/iffアミノ酸に分角イされる・。
分解It、’、間は1〜:3時間、好丑しくは2時間ゼ
を度行なう。この分解段階で(dl、従来法に比較し低
篇旧っ弱酸性若しくは中性にてマイルドな条件下で継続
分i11’l :l)−行ゎJl−る/ζめ、[」的と
する特定のアミノ酸が得ら1する。
分解時間が1. If、li間未満ではプロテメースが
残り本発明にて用いる特定のアミノ酸糺成が得ら)tず
、ま/こ一方3時間を越えると木登1す1の目的とする
薬理作/”11が低下する。
分解後、直ちに75℃す、上、好ましくは80℃」ン−
hに昇温し、麹菌産生蛋白分解酵素を完全に不活性化し
、引続いて酵素が作用し、変性して所期の薬理作用が低
下するのを防止する。
かようにして得た分解液は遠心分離機などを用い常法に
て魚貝肉エキス層、油層及び骨片類等の未分解物に分離
する。魚貝肉エキスは次いで口過し、60℃以下におい
て減Ff、’a縮する。
本発明により得られる魚貝肉エキス(dグルタミン酸、
アスパラギン酸、リジン、アルギニン5 グリシン、ア
ラニン、ロイノン、プロリン、ヒスチヂン、フェニール
アラニン、セリン等の多azのベプクイ1:″アミノ酸
群及び遊離アミノ酸を含み、実質的に分子量か3000
1.Ifのものを主成分とする。
本発明ではたとえは水分約30重隼%5和蛋白質含邦か
約60重−用%、粗脂肪含邦]重量%月下の魚貝肉エキ
スを得ることかでき、このエキスはり下の実施例りて示
すように種々の薬理作用を有する。
以T:5本発明を下記の実施例(lこつき説明する。
なお、F%」は6重量%」を表わす。
実施例1 魚肉エキスの訓1製 サバ4tを前処理を行なわず、丸ま捷、4tの水と共に
攪拌機(、lき反応缶に入力5.80℃に加熱した。1
5分後に55℃に温度を下げ、pH6,2において枯草
菌産生缶内分解酵素/1. K9を添加し、]、55時
間反させた。次で80℃にy1温し、15分間維持した
後、45℃になる才で冷却し、との習1度にて麹菌産生
蛋白分解酵素2 K9を添加し2時間反応させた。pJ
Iは6.5であった。
その後80℃Vこ外温して再び酵素を不活性化させ/ζ
。この反応液を常法により遠心分離機でエキス層5油層
、骨片等未分解層に分21tシ、エキス層はろ過後60
℃において減圧濃縮してツバエキスとした。
とのザ・ゝエキス全成分分析したところ、水分35.4
%、粗蛋白質57.4%、粗脂肪0.4%、炭水化′吻
0.5%、灰分6.3%を含み、カロリーは235Ca
」であった。寸だ、クロマトグラフィーにて分析しプこ
ところ、分子量2500.13(団、760の、3神の
ピークが認められ、実質的に分子量3000腋下である
ことが判明した。アミノ酸群アミノ酸組成は表1の通り
であった。
表  1 )ご施例IKで得られたツバエキスを30倍に水で稀釈
し、i7i[!乳後の肉豚に1 Fl i、 Oc c
毎1]飼不・1中に混ぜ給餌し、6t月後に層殺し、′
本発明のツバエキスをJjえなかったものと比11りし
た。
解体所見を表2に示1″。
注1=第1図は肺の状態を示す写真であり、Aは本発明
のサバエキスを与えたもの、13は匈えなかったもので
ある。Aは色が鮮明で鶴巣がないが、Bは色が悪く病巣
1がみられる。
?Jl:第2図は心臓の状態を示す写真であり、Aは本
発明のサバエキスを与え/こもの、Bは与えなかったも
のである。Aは脂肪側蓋が々いが、Bは多量の脂肪2が
側蓋していることが判る。
注3:第3図及び第4図は肝臓の状態を示す写真であり
、第3図中人は本発明のサバエキスを与えたもの、Bは
与えなかったものである。Aには病巣がないが、Bには
病巣3がみられる。第4図は第3図13のサバエキスを
与えなかった肉豚の肝臓の他方の切F+を示す写真であ
り、病巣4が深部才で達していることが判る。
天廁秒113   抗l貴ブ易f乍片1実施例1にて得
られたザノ々エキスを用い、サバエキスの抗潰瘍作用を
、ラットを用いる潰瘍モデルの一つである5hay潰瘍
を用いて実験した。また、胃液分泌に及ぼす影響を幽門
結紮法により実験し/こ。
実験方法 1)抗潰瘍作用(幽門結紮潰瘍) 体v150〜200gのWistar系雄性ラットを2
4時間絶食後、5hayらの方法(注■〕に準じエーテ
ル麻酔下に幽門部を結紮した。
絶食絶水下K 12時間放置後、胃をとり出し、前円部
に発生した潰瘍をNarumi (注O)らの方法に従
い潰瘍指数で表現した。
検体は、水に溶解し/こザ、+1エキス500mり/K
pを幽門結紮1時間前に経口検力した。
2)胃液分泌抑制活性 Sh、ayらの方法に準じて測定した。すなわち、48
時間絶衾したWi s t a、 r系°雄性うットC
体重150〜200g〕の幽門部を結紮後、41ホ「間
の肘留胃液についてその液が・総酸度・総ペプシン活性
を測定した。
総酸度は、フェノールフタレインを指示薬として0 、
02 N −Na OHテ滴定して求め、i li、総
ペプシン活性はカゼインを基質としてAnson法(注
■)に準じて求めた。
検体は、幽門結紮1時間前に経口投力した。
注■ H,Sha、y、 S、A、Kowa、rov、
 S、S、Fe1s、 D。
Meranze、 M、Gruentej、n 、 a
nd M、Sip]−et 。
Ga5trosntero]、ogy、 543 (]
、 945 )注■ S、Na、rumi、 T、l−
1irata、、 K、Goma、1basb]、、 
a、ndM、Ka、nno、 J、Ta、ked、a、
、 Res、 Lab、 、 29.85(1970) 注■ M、L、Anson、 J、Gen、Physi
o]−、、22,791’1938)実験結果 〆 表3より明らかなように、本発明のサバエキス5007
’+9/に2の投力で、胃液量・総酸度を有意に抑制し
、また、潰瘍に対しでも抑制傾向が認められる。第5図
はこの実施例の実1験に供したラットの胃の状態を示す
′LJ′真である。AI′i木発明のザパエキス投鳥の
もの、Bけ投鳥しなかったもの(コントロール)、Cは
アトロビンザルフエ−h 投JEjのものを示す。第5
図より明らかなように、A、 Cは透明で潰瘍がみられ
ないか、13では潰瘍5が発生していることが判る。
実施例4 インツユリン様作用 実施例1により得らねまたザ・ぐエキスを用い、光層1
1脂肪細胞に対するア]:ルナリンの脂肪分解に対する
作用を指イ草に、サバエキスのイノツユリン様作J[」
につき実験し/こ。
実1験方法 ラットの副翠丸脂肪組織を摘出し、コラゲナーゼ処理に
て調整した脂肪細胞を用いてア12レナリンによる脂肪
細胞からの遊離脂肪酸の放出抑制作用全測定した測定結
果を表6に示す。
実験結果 表5 VC;+<すように、Mn11脂肋細胞に1μg
/mAの712レナリンを作用させる々55μE q、
 /gの遊離脂肪酸が遊回1された。この実験系に] 
mI 、U、/mlのインンユリンを共存させておくと
、その邪が23μE q、/ gまで抑制された。
サバエキスをこの実験系に共存させんと500μp /
nr、eの濃度で有意な抑制作用が認められた。
以上の結果から、サバエキスにインシュリン様作用が認
められ、ηJ)尿に対する°サバエキスの有効性が判る
高脂肪六投匈における高脂血症及び軽度肝障害に関して
5実施例IKより得られたサバエキスの効果を試験した
実験方法 サラダオイルに酸素をバブリングしながら、2時間]7
0〜180℃で加熱すると過酸化脂層が生成された。こ
のサラダオイルにコレステロール・コール酸すh IJ
ウム・粉末飼料を混じた飼料をラットに負餌させると、
5祠間後には高脂血症と軽度肝障害が惹起された。
この実験系にサバエキスを共存させ、その有効性を血液
学的に検討した。寸だ、臓器を病理形態学的に観、察し
た。なお、被検体は毎日1回経口投力した。
結果 表4及び5に実験及び結果を示す。表4及び5より明ら
かなように、サバエキス500’ilり/Kz投与群は
、詠脂血J+Fl柄卯の指標Vこする中性脂肪遊離脂肪
酸を有意に抑制する作用が認められる。−1だ、肝障害
の指標にするGOT値も有意に抑制する。
また、肝臓を病理形態学的に検討すると、サラダオイル
投与群には壊死細胞が多く認めら一ハ、るが、ザパエキ
ス投、4群には壊死細胞の減少が認められた。
実施例6 リウマチ及O・関節炎の治Mj5作用すュウ
マチ及び関節炎の炎症実験モデルであるアジュバント゛
関節炎に7・1する作用を実施例1により得られ/、ニ
ザパエキスを月1いで試験し/ヒ。
実験方法 SOコeの方法に1ゾした。]40〜160gのラソI
・を用い、A4ico−bacterium buty
ricum (DIFCO)の死菌体を13a、yol
下K]07/lり/mAの割合で混じたものを右足11
庶及び尾K O,05ydづつ成因注射した。発生する
浮腫をネtfk法で測定しd腫゛率を求めた。結果を第
7図に示す。
1か月後、心臓から採面し、血液学的に検8・tシた。
また、両足のX線像を用いて骨の変ゼrを観察した。な
お、被検体は毎日1同経口投勘した。測定結果を表6及
び7に示す。
糸I、    果 成因注射によって、右後]1id5日目にピークを示す
一次炎症と、15日目上り再び起炎する二次炎症を示し
た。11日口外ら起炎する炎症に対してサバエキス50
017u7/に、9で抑制傾向が認められた。
′iだ、X線像に対する作用に訃いても浮腫の抑1.1
図面ノf7i’j−r(Lな説明3)、]図は本発明の
方法により製造し/社ザバエキスを投1−Ji1−.た
肉豚の肺の状態及び比較例の肉豚の肺の状態全/Iり寸
15′貢である。第2図は本発明の方l、! V(より
製造したザパエキスを投4 した肉豚の心11i;It
:の状態及び比較例の肉豚の心臓の状態を示す写真であ
る。ul、3図は本発明の方法により製造したザパエキ
スを投Jグした肉豚の肝臓の状態及び比較例の肉豚の肝
臓の状態を示す写真である。第4[21にj第3図の比
軸例の肉豚の別の・肝臓切片の状態を示す写4′1であ
る。、第5図は本発明のザパエキスを投−υしたラット
及び比較例のラットの胃の状7qをノドず写ム′1、で
ある。第6図は本発明の方法により製)’l)i U 
/ζザバエエキのインンユリン様作)TJを示すグラフ
であり、脂肪細胞からの遊離脂肪酸の放出1着を示すグ
ラフである。第7図は本発明の方法により製;<H7,
1,/こザパエキスを投馬し/ζラット及び比リダ例の
ラットの?> l1ilt率を示すグラフである。
図中、AI、本発明のザパエキスを投鳥したもの、Bは
投力しなかったもの、Cは参考例のものを示し、]、3
,4及び5は病変部であシ、2は脂肪側蓋剖である。
−第 1 図 ;゛き2図 第3図 ゛\ 第4剃  3 ど・ 手続補正書(自発) 昭和58年4月18日 腸誇庁長官 若杉和夫  カ(り ] 小イ’lの表示 11/イ和58イ「 特 館  願第34’385号!
I咋1′&の関係  特π■出願人 (1所 氏 名(名称)日本物産株式会社 5 補正命令のr1例 6 補止により増加する発明の数 する。
手続補正書(In 特許庁長官 若杉和夫 殿 1 事件の表示 昭右158イr−!1芋許 願第34385号2 発明
の名称 薬1.!1作用を有する魚貝類エキスの3 補
正をする者   ′i!″!遣方法事件との関係 や−
ボ]出願人 C所

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 細切り・スラリー化などの前処理を施していない原料魚
    貝類を75℃Jソ土の温度に加熱して魚貝g1に含才れ
    る自己分IQjl酵素を完全に不活性化すると同時に魚
    貝類の臭気を除去し、次に50〜60℃、T)H,6、
    0〜7.06でおいて枯草菌産生蛋白分解酵素を添力叫
    、て前記魚貝類に含−=rhる蛋白質をプロテオース級
    に丑で分解した後、温度を75℃以上に昇温して前記蛋
    白分解酵素を完全に不活性化し、次いで40〜50℃、
    plI6.0〜7.0.1〜3時間において麹菌産生蛋
    白分解酵素を添加して前記プロテオース級に丑で分IQ
    !I L、た蛋白質を更に実質上分子量3000以下の
    ベプタイISアミノ酸群及び遊離アミノ酸に分解し、引
    続いて75℃以上に昇温して麹菌産生蛋白分解酵素を完
    全に不活性化し、得られ/ζ分解液を分離濃縮すること
    を特徴とする薬理作/Tlを有する魚貝類エキスの製造
    方法。
JP58034385A 1982-03-04 1983-03-04 薬理作用を有する魚貝類エキスの製造方法 Granted JPS59161319A (ja)

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