JPS588397B2 - 新規なマイトマイシン誘導体およびその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なマイトマイシン誘導体及びその製法に関
する。

さらに詳しくは一般式（■）：（式中、Ｘはアミン基も
し《はアルコキシ基を示し、Ｙは水素もしくはアルキル
基を示す）で表ワされる新規化合物およびその製法に関
する。

本発明の目的化合物は広範囲な抗菌活性を有し従って病
院における器具等の殺菌の目的にあるいは洗剤と共に洗
浄剤として、又医薬として有用である。

又これらの化合物を原料として新たな化合物を作る中間
体として有用である。

マイトマイシン類は一般的に抗腫瘍性を有する化合物と
して知られ次式で示されるミトサン骨格を有している。

既にマイトマイシンＡ，Ｂ，Ｃ，ＤおよびＥ１ポルフイ
ロマイシン、さらにこれらの誘導体が知られている。

優れた性質を有する化合物は常に求められており、本発
明者らはマイトマイシンの誘導体について検討した結果
、前記一般式（Ｉ）で表わされる化合物が抗菌性を有す
る新規な化合物であることを見出し本発明を完成した。

一般式（Ｉ）で表わされる化合物においてＸにおいてア
ルコキシ基は低級アルコキシ基、例えばメトキシ、エト
キシ、インプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ等
を寛味する。

またＹにおけるアルキル基は低級アルキル基例えばメチ
ル、エチル、ｎ−プロビル、ｉ−プロビル、ｎ−ブチル
、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル等を意味する。

本発明の目的化合物の具体例として （１）１０−デカルバモイルオキシ−９−デヒドロマイ
トマイシンＢ（以下化合物■） （２）９ａ−０−メチル−１０−デカルバモイルオキシ
ー９−デヒドロマイトマイシンＢ（以下化合物■） （３） ７−アミノー１０−デカルバモイルオキシ−
９−デヒドロ−７−デメトキシマイトマイシンＢ（以下
化合物■） （４）７−アミノー９ａ−０−メチル−１０−デカルバ
モイルオキシ−９−デヒドロ−７−デメトキシマイトマ
イシンＢ（以下化合物■） 等があげられる。

これらの化合物の各種細菌に対する発育最少阻止濃度は
次の表に示される。

Ｖ：マイトマイシンＢ ■：７−アミノー７−デメトキシマイトマイシンＢ（イ
）：スタフイロコツカス・アウレウス ＡＴＣＣ６５３
８ｐ（ロ）：バチルス・ズブチリス ＡＴＣＣ１０７０
７（ハ）：シゲラ・ゾンネイ ＡＴＣＣ９２９０（ニ）
：クレプシエラ・ニューモニ７ ＡＴＣＣ１００３１
本発明の目的化合物は次の方法によって製造することが
できる。

（Ａ） 一般式（Ｉ）においてＹが水素である一般式
（■′） （式中、Ｘは前記と同意義を示す）で表わされる化合物
は一般式（■）： （式中、Ｘは前記と同意義を有す）で示されるマイトマ
イシン類を反応に不活性な溶媒中、塩基の存在下、脱力
ルバミン酸化させることにより得られる。

この原料化合物はマイトマイシンＢ等を含む公知化合物
である。

この反応に用いられる溶媒としては、エチルエーテル、
テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコール
ジメチルエーテル等のエーテル類、ｎ−ヘキサン、石油
エーテル、ベンゼン等の脂肪族あるいは芳香族炭化水素
類、Ｎ．Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド類、酢酸
エチル等のエステル類、アセトン等のケトン類、クロロ
ホルム、塩化メチレン等のハロゲン化炭化水素類等通常
の有機溶剤を単独もしくは混合して使用できる。

使用される塩基としては炭酸ナトリウム、炭酸カリウム
、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ソジウムハイド
ライト、リチウムハイドライト等の無機塩基、トリメチ
ルアミン、トリエチルアミン、ソジウムメトキサイド、
ソジウム−ｔ−ブトキサイド、ポタシウムーｔ−ブトキ
サイド、■・５−ジアザビシクロ〔５・４・０〕ウンデ
カー５−エン等の有機塩基が使用できるが好ましくはソ
ジウムハイドライト、ポタシウムーｔ−ブトキサイドな
どの強塩基が使用される。

塩基の量は原料マイトマイシン類に対して、１〜３０倍
モル、好ましくは１〜１０倍モルが用いられる。

反応溶媒は原料マイトマイシン類の溶解性にもよるが、
原料マイトマイシン類に対し、５〜１０４倍モル、好ま
しくは１０〜１０３倍モルが用いられる。

反応は−８０〜７０℃好ましくは−３０℃〜５０℃で行
われ反応時間としては使用する塩基の種類および反応温
度により異るが３時間〜３日間位で完了する。

反応系にシリカゲル、アルミナ、珪藻十等を添加するこ
とによって反応副生物を吸着することができる。

反応の進行はアセトン：クロロホルム−１：１の混合溶
媒等適当な展開液を用いるシリカゲル薄層クロマイグラ
フィーにより把握できる。

反応終了後反応混合物を沢過処理するか又は残存する塩
基物質を分解あるいは中和するため含水酢酸エチル、ガ
ス状又は固型の二酸化炭素等を加えて処理したのち、沢
過処理する。

次いで沢液を減圧下濃縮し、残渣を合成化学分野で通常
用いられる精製方法、例えばシリカゲル力ラムクロマト
グラフィー；再結晶等により精製して目的物を単離でき
る。

（Ｂ） 一般式（ Ｉ ）においてＸがアミン基であ
る一般式（ＩＶ） （式中、Ｙは前記と同意義を示す）で表わされる化合物
は一般式（■）； （式中、Ｒ′はアルキル基を示し、Ｙは前記と同意義を
示す）で表わされる化合物とアンモニアとを適当な極性
溶媒例えばエチルアルコール、メチルアルコール、水等
の中で反応させることによって得られる。

一般式（ＩＩＩ）で表わされる原料化合物は一般式（Ｉ
）においてＸがアルコキシ基の場合と同一であり−例え
ば（Ａ）の方法で得られる。

Ｒ′は低級アルキル例えばメチル、エチル、ｎ一フロビ
ル、ｉ−プロビル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチ
ル等を意味する。

アンモニアはアンモニア水として用いても、溶媒中に気
体アンモニアを存在（溶解を含む）せしめてもよい。

アンモニアは原料マイトマイシン類に対し１〜１０３倍
モル好ましくは１〜１０２倍モル用い、溶媒は原料マイ
トマイシン類に対し１０〜１０４倍モル好ましくは５０
〜１０３倍モル用いられる。

反応は−３０〜５０℃、好ましくはＯ〜３０℃で行われ
、１時間〜４８時間で完了する。

反応終了後目的物の単離は前記（Ａ）の方法（但し塩基
の分解工程を除く）に従って行われる。

（ｑ 一般式（Ｉ）で表わされる化合物中Ｙがアルキル
基である一般式（■）： （式中、Ｘは前記と同意義を示し、Ｒ２はアルキル基を
示す）で表わされる化合物は一般式（Ｖ）： （式中、Ｘは前記と同意義を示す）で表わされる化合物
を反応に不活性な溶媒に溶かし、強塩基の存在下ヨウ化
エチル、ジメチル硫酸、等適当なアルキル化剤でアルキ
ル化することによっても得ることが出来る。

原料である一般式（Ｖ）で表わされる化合物は本発明の
目的化合物である一般式（Ｉ）で表わされる化合物にお
いてＹが水素である場合の化合物である。

反応に用いられる溶媒及び塩基は前諏八の方法で記載の
ものが用いられる。

溶媒、塩基、およびアルキル化剤は原料マイトマイシン
類に対してそれぞれ１０〜１０４倍モル、好ましくは５
０〜１０３倍モル、１〜５０倍モル、好ましくは１〜１
０倍モル、１〜５０倍モル、好ましくは１〜１０倍モル
用いられる。

反応は数秒ないし１日で完了する。反応の進行のチェッ
ク、反応混合物からの目的物の単離は（Ａ）におけると
同様の方法で行われる。

（Ｄ）ストレプトミセス属に属し、一般式（Ｉ）で表わ
される化合物を生産する能力を有する微生物を栄養培地
に培養し、培養液中に生産能力に相当する化合物の少な
く共１つを生成蓄積せしめ培養液から生成蓄積した該化
合物を採取することによって一般式（Ｉ）で表わされる
化合物を得ることができる。

本発明で用いられる微生物はストレプトミセス属に属し
一般式（Ｉ）で表わされる化合物を生産する能力を有す
る微生物であればいずれも用いうる。

好適な微生物はストレプトミセス・ケスピトーサス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃａｅｓｐｉｔｏ −ＳＵ
Ｓ ）に属し、具体的な菌としてストレプトミセス・ケ
スピトーサスＡＴＣＣ２７４２２があげられる。

微生物を変異処理例えば、Ｘ線照射、Ｃｏ照射、γ線照
射あるいは化学処理例えばＮＴＧ処理等することによっ
てその代謝生産物の生産性の高い変異株を得ることがで
きる。

本発明においては前記菌株の変異株も前記生産能を有す
る限り用いうる。

本発明の培養においては通常の放線菌の培養法が用いら
れる。

使用する培地としては炭素源、窒素源、無機物、必要に
応じてその他の栄養物を程よく含有する培地であれば合
成培地または天然物使用培地のいずれも使用可能である
。

培地に使用される炭素源としては、たとえばグルコース
、グリセロール、フラクトース、マルトース、蔗糖、ガ
ラクトース、ラクトース、デキストリン、殿粉またはそ
の加水分解液、廃糖蜜等の種々の炭水化物が単独または
組合わせて用いられる。

窒素源としてはアンモニア、塩化アンモニウム、燐酸ア
ンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢
酸アンモニウム等の各種の無機および有機アンモニウム
塩類、尿素、ペプトン、ＮＺ−アミン、肉エキス、乾燥
酵母、酵母エキス、コーンスチープリカー、カゼイン加
水分解物、フィッシュミール、あるいはその消化物・大
豆粉あるいはその消化物等の含窒素有機物質が使用でき
る。

無機物としては、各種燐酸塩、食塩、炭酸カルシウム等
、さらに微量の重金属塩が使用されるが、天然物を含む
培地を用いる場合、天然物に含まれていて必ずしも添加
を必要としない。

また、栄養要求を示す変異株を用いる場合には当然その
栄養要求を満足させる物質を培地に加えなければならな
い。

醗酵は振盪培養あるいは通気攪拌深部培養の好気的条件
で行なわれる。

培養温度は普通２５〜３５℃である。

培養中の培地のｐＨは約６〜８であることが好ましいが
、通常培養中のｐＨコントロールは行わない。

通常４〜５日で培地中に目的物が生成蓄積し、培養は完
了する。

次に培養終了液からの目的物の採取は抗生物質の精製に
一般に使用される方法によって行なうことができる。

次に精製の一例を概略的に示す。

精製中、目的物は分解されやすいので分解防止剤として
ボラツクス〔商品名、 Ｎａ２Ｂ４Ｏ７・１０Ｈ２０：小泉化学薬品■〕などを
培養終了液に加えるのが好ましい。

ついで沢過により菌体を除くが、この際ラジオライト〔
商品名、昭和化学工業■製〕などのろ過助剤を加えて行
なうのがよい。

ろ液をダイヤイオンＨｐ−２０（商品名、三菱化成■製
〕の活性炭などの吸着剤で処理して抗生物質を吸着させ
、メタノールなどの溶出剤で溶出する。

溶出液を濃縮して抗生物質をクロロホルムなどで抽出す
る。

抽出の際食塩などを加えると抽出効率を上げることがで
きる。

抽出液を脱水乾燥し、濃縮して、シリカゲル、アルミナ
カラムなどで処理し、クロロホルムとメタノールや酢酸
エチルとアセトン等の混合溶剤などで溶出する。

目的物を含有する溶出液を乾固し、アセトンー石油エー
テルなどから再結晶して目的物を得る。

以下に本発明の態様を示す実施例を示す。

実施例１ １０−デカルバモイルオキシ−９−デヒドロマイトマイ
シンＢ（化合物■） マイトマイシンＢ１００ｍ９をジオキサン５ｍｌに溶解
し、攪拌下、ポタシウムｔ−ブトキサイド１００■を加
え室温で２日間攪拌する。

反応混合物を過剰のドライアイスで中和した後、沢別口
、沢液を減圧濃縮する。

濃縮残渣をアセトン：クロロホルム−１：４を展開液と
したシリカゲル力ラムクロマトグラフイにより精製し、
Ｒｆ値の高い青色留分を分取し、減圧濃縮後アセトンー
石油エーテルより結晶化させると、黒紫色針状晶として
目的物が１４１ｎ９（収率１７．０％）得られる。

この化合物の物性は次の通りである。

■本物質は高分解能質量分析により分子ピークＭ＋−２
８８．１０８６（分子量” １５ Ｈ１６ Ｎ２ ０４
としての計算値は２８８．１１１０）を示す。

■本物質はアセトン：クロロホルム−１：１を展開液と
したシリカゲル薄層クロマトグラフイー（メルク社製Ａ
ｒｔ５７１９）によりＲｆ値０．７０の青紫色単一スポ
ットを示す（同一条件でマイトマイシンＢはＲｆ値０．
３０を示す）■本物質の臭化カリウム錠剤法による赤外
部吸収曲線を第１図に示す。

■テトラメチルシランを内部標準とし、重クロロホルム
を測定溶媒とした６０ＭＨｚＮＭＲによるプロトンのケ
ミカルシフトをδ（ｐｐｍ）で示す。

（ａ） ：６． １３（ｓ、ＩＨ）、（ｂ） ： ５．
５ ３ （ ｓ、ＩＨ）、（ｃ）：３．００−４．２０
（ＩＨ）、（ｄ）：ａｎｄ（ｆ）；２．２７（２Ｈ）、
（ｅ）：２．１８（ｓ、３Ｈ）、（ｇ） ；３．９ｓ（
ａ，Ｌ Ｈ ）、（ｈ） ； ３．４５ （ｄ、１Ｈ）
、（ｉ）；１．７５（ｓ、３Ｈ）、（ｊ）：４．０５（
ｓ，３Ｈ ） また上記ＮＭＲスペクトルを第−５図に示す。

実施例２ ７−アミノー１０−デカルバモイルオキシ−９一デヒド
ロ−７−デメトキシマイトマイシンＢ（化合物■） ７−アミノー７−テメトキシマイトマイシンＢ１グおよ
びシリカゲル（ドイツメルク社製＃７７２９）３ｇをテ
トラヒドロフラン５０ｍｌに加え、よく攪拌しつつソジ
ウムハイドライド（５０％ｏｉｌ含）４８Ｑ〜を加え、
室温で２日間攪拌する。

その後、過剰の水飽和酢酸エチルで未反応のソジウムハ
イドライトを分解し、過剰のドライアイスで中和したの
ち戸別する。

沢液を減圧濃縮後アセトン：クロロホルム−１：４を展
開液としたシリカゲル力ラムクロマトグラフイーにて展
開し、未反応原料より速やかに留出する暗緑紫色留出帯
を分取する。

これを減圧濃縮すると暗緑色針状晶として目的物が３５
０ｍｇ（収率４２８％）得られる。

この化合物の物性は次の通りである。

■本物質は高分解能質量分析により分子ピークＭ＋−２
７３．１１１８（分子量Ｃ１４ Ｈｌ ５ Ｎ３ ｏ３
としての計算値は２７３．１１１３）を示す。

■本物質はアセトン：クロロホルム−１：１を展開剤と
したシリカゲル薄層クロマトグラフイー（メルク社製Ａ
ｒｔ５７１９）によりＲｆ値０．４２の黄緑色単一スポ
ットを示す（同一条件で７−アミノー７−デメトキシマ
イトマイシンＢはＲｆ値０．１０を示す） ■本物質の臭化カリウム錠剤法による赤外部吸収曲線を
第２図に示す。

■テトラメチルシランを内部標準とし、重クロロホルム
ー重水素置換ジメチルスルホキサイドを測定溶媒とした
６０ＭＨｚＮＭＲによるプロトンのケミカルシフトをδ
（ｐｐｍ）で示す。

（ａ）：５．９０（ｓ、ＩＨ）、（ｂ）：５．３２（ｓ
、ＩＨ）、（ｃ） ：６．３３（ｓ，ＩＨ）、（ｄ）
ａｎｄ （ｆ） ：２．２３（２Ｈ）、（ｅ） ：２、
１７（ｓ，３Ｈ）、（ｇ）：４．．２２（ｄ、ＩＨ）、
（ｈ）；３．４３（ｄ、ＩＨ）、（ｉ）：１．７０（ｓ
、３Ｈ）、（ｊ） ；６、４７（ｓ、２Ｈ） 実施例３ ９ａＯ−メチル−１０−デカルバモイルオキシ−９−デ
ヒドロマイトマイシンＢ（化合物■）ジメチルホルムア
ミド０．３ｍｌ．，ベンゼン１ｍｌの混合溶媒に１０−
デカルバモイルオキシー９−デヒドロマイトマインンＢ
２０ηを加え室温で攪拌しながらソジウムハイドライド
（５０％ｏｉｌ含）２０７Ｑを加える。

次いでジメチル硫酸０．０３５ｍｌを加えて２分間攪拌
後水飽和酢酸エチルを加えて未反応のソジウムハイドラ
イドを分解する。

混合物を沢別後、ろ液に１０ｍｌの酢酸エチルを加え、
次いで水２ｍｌで５回洗浄する。

有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち、減圧濃縮
し、濃縮残渣をアセトン：クロロホルム−１：９を展開
液としたシリカゲル力ラムクロマトグラフイーにより精
製する。

青紫色針状晶として目的物が８．７ｍｇ（収率４１．５
％）得られる。

この物質の物性は次の通りである。

■本物質は高分解能質量分析により分子ピークＭ＋−３
０２．１２８０（分子量Ｃ１６Ｈ１８Ｎ２０４としての
計算値は３０２．１２６６）を示す。

■本物質はアセトン：クロロホルム＝１：１を展開液と
したシリカゲル薄層クロマトグラフイー（メルク社製Ａ
ｒｔ５７１９）によりＲｆ値０．８０の青紫色単一スポ
ットを示す（同一条件で１０−デカルバモイルオキシ−
９−デヒドロマイトマイシンＢはＲｆ値０．７０を示す
）■本物質の臭化カリウム錠剤法による赤外部吸収曲線
を第３図に示す。

■テトラメチルシランを内部標準とし、重クロロホルム
を測定溶媒とした６０ＭＨｚＮＭＲによるプロトンのケ
ミカルシフトをδ（ｐｐｍ）で示す。

（ａ）；６．３２（ｓ、ＩＨ）、（ｂ） ；５、５０（
ｓ、ＬＨ）、（ｃ） ：３．０７（ｓ，３Ｈ）、（ｄ）
ａｎｄ（ｆ）：２．２５（２Ｈ）、（ｅ）；２．２２（
ｓ、３Ｈ）、（ｇ）；４．ｏｓ（ａ１１Ｈ）、（ｈ）
；３．４１（ｄｄ，１Ｈ）、（ｉ）：１．８５（ｓ、３
Ｈ）、（ｊ） ：４．０８（ｓ，３Ｈ） 実施例４ ７−アミノー９ａ−０−メチル−１０−デカルバモイル
オキシ−９−デヒドロ−７−テメ１−キシマイトマイシ
ンＢ（化合物■） ？ンモニア飽和メチルアルコール５ｍｌＫ９ａ−ｏ−メ
チル−１０−７’カルバモイルオキシ−９−デヒドロマ
イトマイシンＢＩＯ〜を加え、室温で１８時間攪拌する
。

その後、反応液を減圧濃縮乾固し、アセトンー石油エー
テルより結晶化すると緑色針状品として目的物が６．２
ｍｇ（収率６５．２％）得られる。

この化合物の物性は次の通りである。

■本物質は高分解能質量分析により分子ピークＭ＋＝２
８７．１２５２（分子量Ｃ１５Ｈ１Ｎ３０３としての計
算値は２８７．１２６９）を示す。

■本物質はアセトン：クロロホルム−１：１を展開液と
したシリカゲル薄層クロマＩ・グラフィー（メルク社製
Ａｒｔ５７１９）によりＲｆ値０．６３の深緑色単一ス
ポットを示す（同一条件で９ａ−メトキシー１０−デカ
ルバモイルオキシ−９−デヒドロ−９ａ−デヒドロキシ
マイトマイシンＢはＲｆ値０，８０を示す。

■本物質の臭化カリウム錠剤法による赤外部吸収曲線を
第４図に示す。

■テトラメチルシランを内部標準とし、重メチルアルコ
ールを測定溶媒とした１０ ０ ＭＨｚＮＭＲによるプ
ロトンのケミカルシフトをδ（ｐｐｍ）で示す。

（ａ）；６．０８（ｄ、ＩＨ）、（ｂ）；ｓ．３４（ｄ
、ＬＨ）、（ｃ）；３．０６（ｓ、３Ｈ）、（ｄ） ａ
ｎｄ（ｆ） ：２．４３（２Ｈ）、（ｅ） ：２．２１
（ｓ、３Ｈ）、（ｇ）；４。

２６（ｄ、ＩＨ）、（ｈ） ；３．４３（ｄｄ、ＩＨ）
、（ｉ） ；１．７７（ｓ，３Ｈ）， （ｊ） ；４．
８１（ＣＤ３０Ｄと交換） 実施例５ ７−アミノー９ａ−０−メチル−１０−デカルバモイル
オキシ−９−デヒドロ−７−デメトキシマイトマイシン
Ｂ（化合物■） （ｉ）ストレプトミセス・ケスピ｝−サスＡＴＣＣ２７
４２２の培養 該菌１白金耳を２５０ｍｌ容のエルレンマイヤーフラス
コ中の５０ｍｌの下記第１種培地に接種し、２８℃で２
日間培養する。

得られる第１種培養液を５００ｍｌの第２種培地を含む
２ｌ容のバツフル付エルレンマイヤーフラスコニ移シ、
２８℃で２日間培養する。

第２種倍養液１．５１（フラスコ３本分）を２００ｌ容
の第３種培養タンク中の第３種培地１００ｌに移し、２
８℃で２日間通気攪拌培養（回転数２５Ｏｒｐｍ、通気
量６０ｇ／ｍｉｙｔ）する。

第１、第２および第３種培地は共にグルコース１５ ′
？／７３、可溶性殿粉５グ／ｌ、乾燥酵母１０ｇ／ｌ，
食塩５グ／ｌ、炭酸カルシウム３ｇ／ｌを含み、使用前
にｐＨ７．０に調整し、１２０℃で２０分間殺菌したも
のを用いる。

第３種培養液１００ｌを２ｋｌ容の醗酵タンク中の１ｋ
ｌの醗酵培地に移す。

醗酵培地組成は蔗糖１５？／ｌ：、可溶性殿粉２０グ／
ｌ、大豆粕４０グ／ｌ、食塩５グ／ｌ、塩化コバルト（
６水塩）２００〜／．ｅ、ノルマルパラフィン５ ｍｌ
／ｌ （殺菌前ｐＨを７．２に調整）で１２０℃、２０
分間殺菌したものを用いる。

この醗酵タンク培養は２８℃で５日間通気攪拌方式（回
転数８ Ｏｒ， ｐ．ｍ，、通気量４００ ｌ／ｍｉｔ
ｔ ）により行なう。

（１１）目的化合物の単離 培養終了後、培養液にポラソクスを２０ｋｇ加えて溶解
後、ｉコ過助剤ラジオライト＃６００を１００ｋｇ加え
て菌体を沢別する。

沢液をダイヤイオンＨＰ−２０ ５０ｌのカラムに通
塔する２５０ｌの脱イオン水にて洗浄後、５０％メタノ
ール溶液にて２５０ｌ溶出する。

続いてメタノール１５０ｌにて溶出を行なう。

目的化合物を含有する溶出画分２００．ｅを減圧下で約
２６１まで濃縮し、食塩約８ｋｇを加えて溶解させた後
クロロホルム１７ｌを加えて抽出を行ないクロロホルム
層を分取する。

この操作を５回繰り返したのち得られたクロロホルム抽
出液約８０ｌを１ｌにまで濃縮する。

濃縮クロロホルム溶液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱
水したのち、シリカゲル７ｌを充填したカラムに通し、
クロロホルム：メタノール（１００：１〜５）で展開す
る。

目的化合物を含む両分をあわせ濃縮したのち、再び同一
の溶媒系を用いたシリカゲルクロマトグラフイーにより
精製して目的化合物画分の濃縮液を得る。

この濃縮液をさらに酢酸エチル：アセトン（１００：１
）を用いたシリカゲルクロマトグラフイーを２度行なっ
て精製し、目的化合物の両分を濃縮する。

この濃縮液をアルミナクロマトグラフイーにてクロロホ
ルム：アセトン（９８：２）で溶出させ、溶出液を濃縮
乾固し、アセトンー石油エーテルから結晶化すると緑色
針状晶の目的化合物１．９７％得られる。

この化合物の物性値は次の通りである。

■ 融点 約２７０℃（２２０℃付近で褐変）■ マス
スペクトル ＣＩ５Ｈ１７Ｎ３０３としての計算値 ２
８７．１２６９ 実測値 ２８７．１２５２ ■ ＰＭＲスペクトル（ＣＤ３０Ｄ中） １．７７（Ｓ、３Ｈ）、２．２ １ （ Ｓ， ３Ｈ）
、２．４ ４ （ ｂｓ、２Ｈ）、３．０ ６ （ ｓ
、３Ｈ）、３．４ ２ （ ｄｄ、ＩＨ）、４．２６（
ｄ、ＬＨ）、５．３４（ｄ，ＩＨ）、６．０７（ｄ，Ｌ
Ｈ）■ 電子スペクトル（ＭｅＯＨ） ２２２ｎｍ（ ｌｏｇε４．０２）、２．８ ９ （４
．０ ３）、３７３（４．２５）、６．０２（２．３７
）■ 赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤中）第４図と一
致する。

■ 薄層クロマトグラフイー（ＴＬＣ）によるＲｆ値 ■ 元素分析値（ Ｃ１５ Ｈ１７Ｎ３ ０３として）
ＨＣ Ｎ 実測値（％） ５．９５ ６２．７３ １４．３
４理論値（％） ５．９６ ６２．７０ １４．
６３■ 比旋光度 本物質が濃緑色のため測定できなかった。

■ 塩基性、酸性、中性の区別 中性物質である。

［相］ 溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルムに可溶、ベンゼン、エーテル、水に難溶、ｎ−
ヘキサンに不溶 上記物性値より、この化合物は７−アミノー９ ａ −
ｏ−メチル−１０−デカルバモイルオキシー９−デヒ
ドロ−７＝デメトキシマイトマイシンＢと決定された。

実施例 ６ １０−デカルバモイルオキシ−９−デヒドロマイトマイ
シンＢ（化合物■） Ａ．ストレプトミセス・ケスピトーサスＡＴＣＣ２７４
２２の培養 種培地（第１、第２および第３種培地）および醗酵培地
は実施例５に示した培地を用いる。

種培地５０ｍｌを入れた２５０ｍｌ容エルレンマイヤー
フラスコに種菌の１白金耳を植菌し、２８℃で２日間振
盪培養を行なう。

第２種培養および第３種培養は実施例５の方法と同様に
行ない、２ｋｌ容の醗酵タンク中の１ｋｌの醗酵培地に
移して、実施例５で示した方法と同様に本醗酵を行なわ
せる。

Ｂ． 目的化合物の単離 培養終了後、実施例５と同一の方法でクロロホルム抽出
液を得る。

濃縮クロロホルム溶液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱
水した後、アルミナを充填したカラムに通し、クロロホ
ルムで展開する。

目的化合物を含む両分をあわせて濃縮し、その濃縮液を
一晩冷凍庫に放置し、析出した沈澱をろ別後、ろ液を減
圧下で濃縮する。

濃縮残渣に少量のクロロホルムを加え不溶物を沢別し、
沢液をシリカゲルクロマトグラフイーにてクロロホルム
：アセトン（１０：０〜３）で溶出させ、目的化合物を
含む両分をあわせ濃縮した後、再び同一の溶媒系を用い
たシリカゲルクロマトグラフイーにより精製し、目的化
合物を含む画分を合わせ、濃縮した後、アセトンから結
晶化させると黒紫色針状晶が５．６〜得られる。

この化合物の物性値は次の通りである。

■ 融点 約１２５℃ ■ マススペクトル Ｃ１５Ｈ１６Ｎ２０４としての計算値２８８，１１１．
０実測値 ２８８．１１３５ ■ ＰＭＲスペクトル（ＣＤ３０Ｄ中） １．８４（Ｓ、３Ｈ）、２．２１（Ｓ、３Ｈ）、２．４
４ （ ｂｓ， ２Ｈ）、３．４ ６ （ ｄｄ１１
Ｈ）、４．０ ２ （ Ｓ， ３Ｈ）、４．０３（ｄ
，ＩＨ）、５．４８（ｄ，ＩＨ）、６．０９（ｄ１ １
Ｈ）■ 電子スペクトル（ＭｅＯＨ） ２２６ｎｍ（ ｌｏｇε４．０８）、２９１（４．０３
）、３２４Ｓｈ（３．９３）、５７８（３．０４）■
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤法）第１図と一致する
。

■ ＴＬＣによるＲｆ値 実施例５の第２表、第３表に示される。

■ 元素分析値（ Ｃ１５Ｈ１６Ｎ２０４として）ＨＣ
Ｎ 実測値（％） ５．６４ ６２．３４ ９．３７
理論値（％） ５．５９ ６２．４９ ９．７２
■ 比旋光度 本物質が濃黒紫色のため測定できなかっ た。

■ 溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルムに可溶、ベンゼン、エーテル、水に難溶、ｎ−
ヘキサンに不溶 ■ 酸性、塩基性、中性の区別中性物質である。

上記の物性から本物質は１０一デカルバモイルオキシ−
９−デヒドロマイトマイシンＢ（化合物■）と特定され
る。

実施例 ７ ９ａ＝Ｏ−メチル−１０−デカルバモイルオキシ−９−
デヒドロマイトマイシンＢ （ 化合物ｎ）（Ｉ）
ストレプトミセス・ケスヒトーサスＡＴＣＣ２７４２２
の培養 種培地（第１、第２および第３種培地）および醗酵培地
は実施例５に示した培地を用いる。

培養も実施例５の方法と同様に行なう。

（ＩＩ） 目的化合物の単離 培養終了後、実施例５と同一の方法でクロロホルム抽出
液を得る。

濃縮クロロホルム溶液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱
水した後、アルミナを充填したカラムに通し、クロロホ
ルムで展開する。

目的化合物を含む両分を合わせて濃縮し、その濃縮液を
一晩冷蔵庫に放置し、析出した沈澱をろ別後、ろ液を減
圧下で濃縮する。

濃縮残渣に少量のクロロホルムを加え、不溶物を沢別し
、沢液をシリカゲルクロマトグラフイーニテ、クロロホ
ルム：アセトン（４：１〜３：２）で溶出させ、目的化
合物を含む両分をあわせ濃縮した後、再びシリカゲルク
ロマトグラフイーにてクロロホルム：アセトン（４９：
１〜９：１）で溶出させ、目的化合物を含む両分をあわ
せて濃縮する。

次いで２％の水を含んだアルミナにてベンゼン：酢酸エ
チル（９５：５）で溶出させ、溶出液を濃縮乾固し、ｎ
−ヘキサンから結晶化すると青紫色針状晶が２．８雫得
られる。

この物質の物性値は次の通りである。

■ 青紫色の中性物質である。

■ 元素分析値（ Ｃ１６ Ｈｔｇ Ｎ２ ０４として
）ＨＣＮ 実測値（％） ５．９９ ６３．２９ ８．８８
理論値（％） ６．００ ６３．５６ ９、２７
■ 分子量： マススペクトルにより実測値３０２．１２７９を与える
。

Ｃ１６Ｈ１８Ｎ２０４としての計算値は ３０２．１２６６である。

■ 融点：９２〜９３℃ ■電子スペクトル： （メタノール）２２０ｎｍ（ｌｏｇ５４．１５）２８９
（４．０５）、３２０（４．００）、５６９（３．０８
） ■ ＰＮＲスペクトル（ＣＤ３０Ｄ中） １．８５ （Ｓ，３Ｈ）、２．２ １ （ Ｓ， ３Ｈ
）、２，４． ６ （ ｂｓ、２Ｈ）、３．０ ５ （
Ｓ、３Ｈ）、３．３８（ｄｄ、ＬＨ）、４．０ ２
（ Ｓ， ３Ｈ）、４．０７（ｄ、ＩＨ）、５．４４（
ｄ，ＬＨ）、６．２１ （ｄ１ １Ｈ） ■ 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠剤中）第３図と一
致する。

■ 溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ベンゼン、エーテル、ｎ−ヘキサンに可溶、
水に難溶である。

■ 薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値第２表、第
３衣に示される。

■ 比旋光度：本物質が濃青紫色のため測定できなかっ
た。

以上からこの物質は９ａ−０−メチル−１０−デカルバ
モイルオキシ−９−テヒドロマイトマイシンＢ（化合物
■）と特定される。

【図面の簡単な説明】

第１〜４図は次の化合物の臭化カリウム錠剤法による赤
外部吸収曲線を示す。 第１図：１ｏ−デカルバモイルオキシ−９−デヒドロマ
イシンＢ１第２図：７−アミノー１０−デカルバモイル
オキシ−９−デヒドロ−７−デメトキシマイ１・マイシ
ンＢ、第３図：９ａ−０−メチル−１０−デカルバモイ
ルオキシ−９−デヒドロマイトマイシンＢ、第４図：７
−アミノー９ａ−Ｏ−メチル−１０−デカルバモイルオ
キシ−９−デヒドロ−７−デメトキシマイトマイシンＢ
１第５図は１０−デカルバモイルオキシ−９−デヒドロ
マイトマイシンＢのＰＭＲスペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式（Ｉ） （式中、Ｘはアルコキシ基またはアミン基を示し、Ｙは
   水素またはアルキル基を示す）で示される新規なマイト
   マイシン誘導体。 ２ 一般式（ＩＩ） （式中、Ｘはアルコキシ基またはアミノ基を示す）で示
   されるマイトマイシン類を脱力ルバミン酸化させること
   を特徴とする一般式（■′） （式中、Ｘは前記と同意義を有する）で示される新規な
   マイトマイシン誘導体の製法。 ３ 一般式（ＩＩＩ） （式中、Ｙは水素またはアルキル基を示し、Ｒ′はアル
   キル基を意味する）で示されるマイトマイシン類をアン
   モニアと反応させることを特徴とする一般式（ＩＶ） （式中、Ｙは前記と同意義を有する）で示される新規な
   マイトマイシン誘導体の製法。 ４ 一般式（Ｖ） （式中、Ｘはアルコキシ基またはアミン基を示す、で示
   されるマイトマイシン類をアルキル化することを特徴と
   する一般式（ＶＩ） （式中、Ｘは前記と同様であり、Ｒ２はアルキル基を示
   す）で表わされる化合物の製法。 ５ ストレプトミセス属に属し、一般式（Ｉ）（式中、
   Ｘはアルコキシ基またはアミン基を示し、Ｙは水素また
   はアルキル基を示す）で表わされるマイトマイシン類を
   生産する能力を有する微生物を栄養培地に培養し、培養
   液中に該マイトマイシン類を生成蓄積せしめ、培養液中
   から蓄積したマイトマイシン類を採取することを特徴と
   する該マイトマイシン類の製法。