JPS58753A - 非ａ非ｂ型肝炎関連抗体および検出試薬 - Google Patents
非ａ非ｂ型肝炎関連抗体および検出試薬Info
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- JPS58753A JPS58753A JP9742581A JP9742581A JPS58753A JP S58753 A JPS58753 A JP S58753A JP 9742581 A JP9742581 A JP 9742581A JP 9742581 A JP9742581 A JP 9742581A JP S58753 A JPS58753 A JP S58753A
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- C07K—PEPTIDES
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は非ム非ｉｎ肝炎関連抗体および検出試薬に関す
る。さらに詳しくは、非ム非Ｂ！ｌ肝炎関連抗体および
当皺抗体の結合体並びにこれらを主要な構成成分として
含有する非ム非Ｂｍ肝炎関連抗原検出試薬に関する。
る。さらに詳しくは、非ム非Ｂ！ｌ肝炎関連抗体および
当皺抗体の結合体並びにこれらを主要な構成成分として
含有する非ム非Ｂｍ肝炎関連抗原検出試薬に関する。
ウィルス肝炎については従来よりム型およびＢ菫の存在
が知られており、すでに関連抗原抗体系も明らかＫされ
、これを利用した免疫血清学的な診断が可能となり、さ
らにワクチンの開発、導入Ｋまで至ワている。
が知られており、すでに関連抗原抗体系も明らかＫされ
、これを利用した免疫血清学的な診断が可能となり、さ
らにワクチンの開発、導入Ｋまで至ワている。
しかしながら、これに伴りて、非直非Ｂ型肝炎。
すなわち、従来から知られているム臘肝炎およびｌｌｌ
１肝炎のいづれにも属さないウィルス肝炎の存在が知ら
れるようＫなり、しかもその発生頻度が予想以上に高い
ことが明らかとなって来た。例えば、輸皇後肝炎の８０
〜５ｏＩｓあるいはさらＫこれ以上のものが非Ａ非ｌＩ
ｌ肝炎であり、散発的に発生する急性肝炎につい【も約
５０優は非直非Ｂ型肝炎であることが報告されるに至っ
ている。また正常供血者の中にさえ非ム非Ｂ型肝炎ウィ
ルスの保有者がかなりの数存在することが明らかとなっ
て来た。以下に記載する文献は非直非Ｂ型肝炎に関する
上述の状況を報告するものであり、参考のために列挙す
る。
１肝炎のいづれにも属さないウィルス肝炎の存在が知ら
れるようＫなり、しかもその発生頻度が予想以上に高い
ことが明らかとなって来た。例えば、輸皇後肝炎の８０
〜５ｏＩｓあるいはさらＫこれ以上のものが非Ａ非ｌＩ
ｌ肝炎であり、散発的に発生する急性肝炎につい【も約
５０優は非直非Ｂ型肝炎であることが報告されるに至っ
ている。また正常供血者の中にさえ非ム非Ｂ型肝炎ウィ
ルスの保有者がかなりの数存在することが明らかとなっ
て来た。以下に記載する文献は非直非Ｂ型肝炎に関する
上述の状況を報告するものであり、参考のために列挙す
る。
１） Ｐｒｔｍｅ＊、ム、 Ｍ、ａｔ ｍｌ ： Ｌ
＠ｎｇ−１ｍｃｗｂａｔｌｏｎｐ＠ｓｔ−ｔｒａｕｓｆ
ｗｇ＋ｌ＠ｎ ｋ＠ｐａｔｌｔ１ｍ ｖｌｔｈ＠ｕｔｍ
＠ｒ＠ｌ＠ｇｌｅａｌ ＊ｖｉｄ＠ｍｅ＠ｏｆ ＠ｘｐ
ｔｓｍｖｓｒ＠ｔ。
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ｈ＠ｐａｔｉｔｉｓ −Ｂ ｖｉｒｕｓ、 Ｌａｎｃｅ
ｔ、 Ｈ： ２４１−２４６、１９７４゜ ２）ム１ｔ＠ｒ、 Ｈ，Ｊ、 ａｔ ａｌ、 ： Ｃ１
１ｎｉｃａｌ ａｎｄｍ＠ｒ＠ｌｏｇｉｅａｌ ａｎ
ａｌｙ＠ｔｓ ｏｆ ｔｒａｍｓｆｔｕｌｏｎ−ａ
ｓｓ＊＠ｉａｔ＠ｄ ｈ＠ｐａｔｉｔｌｓ、 Ｌｎｃａ
ｔ、 Ｈ： ８３８−８４１．１９７５゜ ３） Ｆ＠ｉｍｓｔｏｍｓ、 ８６Ｍ、 ａｔ ａｌ
、 ：〒ｒａｍｓｆｗｍ１＠ｎ−ａｓｓ＠ｅｉａｔ＠ｄ
ｈ＠ｐａｔｉｔｉｓ ｎｅｔ ｄｕｅ ｔ。
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ｈ＠ｐａｔｉｔｉｓ ｎｅｔ ｄｕｅ ｔ。
ｖｌｒａｌ ｋ＊ｐａｔｉｔｌｓ ｔｙｐｅムｏｒ Ｂ
、Ｎ、Ｅｂｇｌ。
、Ｎ、Ｅｂｇｌ。
Ｊ、Ｍａｄ、 ２９２ ： ７６７−７７０．１９７５
゜４） Ｍ＠ｙ＠ｒｓ、 Ｊ、 Ｄ、ａｔ ｍｌ、
：Ｐａｒｓｎｔ＠ｒａｌｌｙｔｒａｍｍｒｍｉｔｔｅｄ
ｎｏｎ −Ａ、 ｍｅｎ−Ｂ ｈ＠ｐａｔｉｔｉｓ。
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ｎｏｎ −Ａ、 ｍｅｎ−Ｂ ｈ＠ｐａｔｉｔｉｓ。
Ａｓｓ、 Ｉｓｆｇｒｓ、 Ｍａｄ、 ＄７ ： ５７
−５９．１９７７゜５） Ｖｉｌｌａｒｖｊｅｓ、
Ｖ、 Ｍ、 ａｔ ｍｌ、 ： Ｅｖｌｄ＊ｎ＊ｅｆｏ
ｒ ｖｉｒａｌ ｂｔｐａｔｉｔｌｓ ｏｔｈｅ
ｒ ｔｈａｎ ｔｙｐｅムｏｒ ｔｙｐ＠Ｂ ａｍ
ｏｎｇ ｐ＠ｒｓｏｎｓ ｉｎ Ｃｏ５ｔｓＲ１ｅａ
、 Ｎ Ｅ路ｇＬ、 ／、 ｆｆｉｇｊ、 ２
９３ ： １３５０−１３５２゜１９７５゜ ４） Ｄｉｅｎｓｔａ＆Ｊ、 Ｌ、 ａｔ ｓｌ、
： ＥＬｉｏｌｏｇｙ ｏｆｓｐｏｒａｄｉｃ ｈ＠
ｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ５ｕｒｆａｃｓ ａｎｔｉｇｅ
ｎ −ｎ＊ｇａｔｌｖ＊ ｂｔｐａｔｉｔｌｓ、Ａｓｓ
、 Ｉｎｔｅｒｎ、 Ｍｔ、。
−５９．１９７７゜５） Ｖｉｌｌａｒｖｊｅｓ、
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、 Ｉｎｔｅｒｎ、 Ｍｔ、。
８７ ： ｌ−６，１９７７゜
さて、ここで非Ａ非Ｂ型肝炎とはＡ型肝炎ウィルス、
Ｂｍｙ炎ウィルス、サイトメガロウィルス。
Ｂｍｙ炎ウィルス、サイトメガロウィルス。
エプスタインパーウィルスなど従来知られたウィルス以
外のウィルスが病原体として関与することにより発生す
ると考えられる肝炎であって、Ｈム抗体、 Ｈｌｌ−抗
体、ＨＢｅ抗体、 ＨＢ・抗体など既知ウィルスに対す
る抗体について有意の上昇が認められないものを言う。
外のウィルスが病原体として関与することにより発生す
ると考えられる肝炎であって、Ｈム抗体、 Ｈｌｌ−抗
体、ＨＢｅ抗体、 ＨＢ・抗体など既知ウィルスに対す
る抗体について有意の上昇が認められないものを言う。
従って、非Ａ非Ｂ型肝炎患者とは、肝炎ウィルスに起因
する肝炎患者であり【。
する肝炎患者であり【。
ム型肝炎診断およびＢ型肝炎診断において陰性を示し、
ム型肝炎からもＢ型肝炎からも除外された患者であると
定義される。一般に非Ａ非」臘肝炎では＃ｌｌ型肝炎に
比較すると輸血から発症までの平均潜伏期が短かく、ま
たＧＰＴの最大値も低いとい５傾向がある。しかしその
反面、持続性があり１例えばＧＰＴ異常は慢性化してか
なりの長期間に及ぶという特徴がある。しかし、いづれ
Ｋせよ、非Ａ非Ｂ型肝炎は輸血後肝炎の大部分を占めて
おり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎ウィルスが原因となる肝疾患
は肝硬変、肝癌など広範囲に及んでおり。
ム型肝炎からもＢ型肝炎からも除外された患者であると
定義される。一般に非Ａ非」臘肝炎では＃ｌｌ型肝炎に
比較すると輸血から発症までの平均潜伏期が短かく、ま
たＧＰＴの最大値も低いとい５傾向がある。しかしその
反面、持続性があり１例えばＧＰＴ異常は慢性化してか
なりの長期間に及ぶという特徴がある。しかし、いづれ
Ｋせよ、非Ａ非Ｂ型肝炎は輸血後肝炎の大部分を占めて
おり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎ウィルスが原因となる肝疾患
は肝硬変、肝癌など広範囲に及んでおり。
適切なる対応策が早急に開発されることが望まれている
のである。とりわけ、輸血用血液中の非Ａ非Ｂ型肝炎関
連抗原を正確に検出する手段が提供されることは当該分
野における急務である。しがるに、非Ａ非Ｂｆｌｉ肝炎
については、未だそのウィルス事態はもとより、それに
関連した抗原抗体系さえも確立されておらず、従って適
切な検出１診断およびワタチンの製造がなされていない
のが現状である。
のである。とりわけ、輸血用血液中の非Ａ非Ｂ型肝炎関
連抗原を正確に検出する手段が提供されることは当該分
野における急務である。しがるに、非Ａ非Ｂｆｌｉ肝炎
については、未だそのウィルス事態はもとより、それに
関連した抗原抗体系さえも確立されておらず、従って適
切な検出１診断およびワタチンの製造がなされていない
のが現状である。
かかる実情にかんがみ１本発明者はまず非Ａ非Ｂ型肝炎
について一般的であり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎に特異的で
ある関連抗原を物質として単離することを試み、その結
果、非Ａ非Ｂ型肝炎剖検肝からの分離精製により所期の
物質を収得することに成功した。さらに引き続き９本発
明者は当該物質を用いて非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗体を免疫
学的手法により作製することを試み、これに成功し９本
発明を完成するに至った。
について一般的であり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎に特異的で
ある関連抗原を物質として単離することを試み、その結
果、非Ａ非Ｂ型肝炎剖検肝からの分離精製により所期の
物質を収得することに成功した。さらに引き続き９本発
明者は当該物質を用いて非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗体を免疫
学的手法により作製することを試み、これに成功し９本
発明を完成するに至った。
以上より明らかなごとく２本発明の目的は非Ａ非Ｂ型肝
炎について一般的であり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎に％異的
である関連抗体を提供すること並びに同抗体を用いて非
Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原の検出を可能にすることである。
炎について一般的であり、かつ非Ａ非Ｂ型肝炎に％異的
である関連抗体を提供すること並びに同抗体を用いて非
Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原の検出を可能にすることである。
次に本発明の詳細な説明する。
本発明抗体は非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原との間において特
異的に抗原抗体反応を呈する性質があり。
異的に抗原抗体反応を呈する性質があり。
この性質が本発明抗体を特定する。ここに非Ａ非Ｂ型肝
炎関連抗原とは非Ａ非Ｂ型肝炎患者の剖検肝からの分離
精製によって得られ、下記のごとき理化学的性状により
て特定されるものである。すなわち、その分子量はゲル
ｆ過法により求めると１５０万以上である。沈降定数（
１０）は１１ｓｅｋｍａｎｙｉ Ｍｏｄｅｌ Ｅで測定
すると５１．５８を示す。塩化セシウムまたは臭化カリ
ウム溶液中の浮上密度（、Ｆ／ｃ１１）はアツベの屈折
計によって求めると１．１５〜１．２５である。粒子直
径（ｎ、、）は電子顕微鏡観察によると２６〜３７（平
均３１５）である。電気的移動度は免疫電気泳動法によ
り求めると偽−へグロブリンの領域である。
炎関連抗原とは非Ａ非Ｂ型肝炎患者の剖検肝からの分離
精製によって得られ、下記のごとき理化学的性状により
て特定されるものである。すなわち、その分子量はゲル
ｆ過法により求めると１５０万以上である。沈降定数（
１０）は１１ｓｅｋｍａｎｙｉ Ｍｏｄｅｌ Ｅで測定
すると５１．５８を示す。塩化セシウムまたは臭化カリ
ウム溶液中の浮上密度（、Ｆ／ｃ１１）はアツベの屈折
計によって求めると１．１５〜１．２５である。粒子直
径（ｎ、、）は電子顕微鏡観察によると２６〜３７（平
均３１５）である。電気的移動度は免疫電気泳動法によ
り求めると偽−へグロブリンの領域である。
本発明抗体が上記の非Ａ非Ｂ１１１肝炎抗原との間にお
いて呈する抗原抗体反応は、後記実験例１に示されるご
と（特異的なものである。従って当該反応によりて本発
明抗体を特定することができる。
いて呈する抗原抗体反応は、後記実験例１に示されるご
と（特異的なものである。従って当該反応によりて本発
明抗体を特定することができる。
また当該反応は、後記実験例２および３に示されるごと
く定量的である。従って当該反応を利用して非Ａ非Ｂ型
肝炎関連抗原の検出をすることができる。
く定量的である。従って当該反応を利用して非Ａ非Ｂ型
肝炎関連抗原の検出をすることができる。
次に本発明抗体は頻回輸血を受けた患者血清あるいは非
Ａ非ｌ型肝炎回復期患者血清を原料として、これらから
の分離精製によって直接的に収得することもできるが、
一般にはヒト以外の動物を使って免疫学的手法により間
接的に収得する。すなわち、後記実施例１に示されるご
とく、前記非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原を例えばフロイント
完全アジェバントと共に家兎に頻回接種して免疫を与え
。
Ａ非ｌ型肝炎回復期患者血清を原料として、これらから
の分離精製によって直接的に収得することもできるが、
一般にはヒト以外の動物を使って免疫学的手法により間
接的に収得する。すなわち、後記実施例１に示されるご
とく、前記非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原を例えばフロイント
完全アジェバントと共に家兎に頻回接種して免疫を与え
。
そこから得られる抗血清について■ぎＧ精製分刻をおこ
ない収得することができる。
ない収得することができる。
また、ここで使用される非Ａ非Ｂ型肝炎抗原は非Ａ非ｌ
Ｉｌ肝炎剖検肝を出発物質として通常のタンパク分剰精
製法１例えば密度勾配遠心分離法。
Ｉｌ肝炎剖検肝を出発物質として通常のタンパク分剰精
製法１例えば密度勾配遠心分離法。
塩析法、電気泳動法、ゲル濾過法、アフィニティークロ
マトグラフィー法２等電点分劃法、限外ｒ適法、コーン
の分剰法を適宜組合わせて収得することができる６例え
ば非Ａ非Ｂ型肝炎剖検肝ホモジネート上清について、ま
ずセファクリルＳ−２００を用いてカラムクロマトグラ
フィー分剰を行い、得られた抗原陽性フラクシ璽ンを限
外濾過して加圧濃縮し、最後に超遠心分離と透析を繰返
す、ここで超遠心分離には蔗糖濃度勾配遠心および塩化
セシウム密度勾配遠心を組合わせて一回ないし数回行う
のが好ましい。
マトグラフィー法２等電点分劃法、限外ｒ適法、コーン
の分剰法を適宜組合わせて収得することができる６例え
ば非Ａ非Ｂ型肝炎剖検肝ホモジネート上清について、ま
ずセファクリルＳ−２００を用いてカラムクロマトグラ
フィー分剰を行い、得られた抗原陽性フラクシ璽ンを限
外濾過して加圧濃縮し、最後に超遠心分離と透析を繰返
す、ここで超遠心分離には蔗糖濃度勾配遠心および塩化
セシウム密度勾配遠心を組合わせて一回ないし数回行う
のが好ましい。
次に本発明抗体の用途としては、非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗
原の検出、非Ａ非１１ｉ１１肝炎の診断、非Ａ非Ｂ型肝
炎の予防等をあげることができる。すなわち９本発明抗
体は前記のごとく非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原との間におい
て特異的な抗原抗体反応を呈することができるので、轟
該抗原を正確に検出するための試薬を構成するものとな
ることがでさる。例えば輸血用血液に対する検査用試薬
を構成することができる。同様に非Ａ非Ｂ型肝炎の診断
薬を製造するための原料となることも期待される。
原の検出、非Ａ非１１ｉ１１肝炎の診断、非Ａ非Ｂ型肝
炎の予防等をあげることができる。すなわち９本発明抗
体は前記のごとく非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原との間におい
て特異的な抗原抗体反応を呈することができるので、轟
該抗原を正確に検出するための試薬を構成するものとな
ることがでさる。例えば輸血用血液に対する検査用試薬
を構成することができる。同様に非Ａ非Ｂ型肝炎の診断
薬を製造するための原料となることも期待される。
また１本発明抗体は非Ａ非Ｂ型肝炎を予防するための免
疫グロブリン製剤の構成原料となることも期待される。
疫グロブリン製剤の構成原料となることも期待される。
次に本発明検出試薬は本発明抗体を使用していづれの免
疫学的検出方法を利用するものであっても可能である。
疫学的検出方法を利用するものであっても可能である。
つまり検出試薬は採用する免疫学的検出方法に応じて適
宜に調製することができる。
宜に調製することができる。
例えば検出方法としてマイクロオフタロニー法（ＭＯ）
、免疫電気泳動法（！鵞Ｓ、ＺＩＰ）。
、免疫電気泳動法（！鵞Ｓ、ＺＩＰ）。
補体結倉反応法（ｃｙ）、免疫粘着血球凝集反応法（■
ムＨム）、−元平板免疫拡散法（８ＲＩＤ）を利用する
場合には本発明抗体をそのまま使用して適当な形態に調
製すればよい。−例として一元平板免疫拡散法を利用す
る場合を示せば、支持体として寒天、アガロース、デ／
プン、ポリアクリルアミドゲル等の中から適当なものを
選び、これを緩衝液に加熱溶解し１次に本発明抗体を添
加混合し、得られる溶液をガラス板上あるいはプラスチ
ック容器内に流し冷却固化し、固化したゲル平板に被検
血清注入用の孔をあければよい。
ムＨム）、−元平板免疫拡散法（８ＲＩＤ）を利用する
場合には本発明抗体をそのまま使用して適当な形態に調
製すればよい。−例として一元平板免疫拡散法を利用す
る場合を示せば、支持体として寒天、アガロース、デ／
プン、ポリアクリルアミドゲル等の中から適当なものを
選び、これを緩衝液に加熱溶解し１次に本発明抗体を添
加混合し、得られる溶液をガラス板上あるいはプラスチ
ック容器内に流し冷却固化し、固化したゲル平板に被検
血清注入用の孔をあければよい。
しかるに、検出方法として逆受身赤血球凝集反応法（Ｒ
−ＰＨＡ）、放射性免疫測定法（ＲＩム）。
−ＰＨＡ）、放射性免疫測定法（ＲＩム）。
酵素抗体法（ＩＬＩ８ム）等を利用する場合には本発明
抗体を適当なる結合体となす必要がある。
抗体を適当なる結合体となす必要がある。
すなわち、逆受身赤血球凝集反応法（Ｒ−ＰＨＡ）を利
用する場合には本発明抗体を微小粒子に結合させる必要
がある。微小粒子としては哺乳類および鳥類の赤血球が
好ましいが、その他、ポリスチレンラテックス、ポリエ
ステルラテックス、塩化ビニル、ベントナイト、ガラス
ピーズ等の約１〜１０μの粒子も使用することができる
。本発明抗体と微小粒子を結合させるＫは１例えばゲル
タールアルデヒド、ホルムアルデヒド、タンニン酸。
用する場合には本発明抗体を微小粒子に結合させる必要
がある。微小粒子としては哺乳類および鳥類の赤血球が
好ましいが、その他、ポリスチレンラテックス、ポリエ
ステルラテックス、塩化ビニル、ベントナイト、ガラス
ピーズ等の約１〜１０μの粒子も使用することができる
。本発明抗体と微小粒子を結合させるＫは１例えばゲル
タールアルデヒド、ホルムアルデヒド、タンニン酸。
ビスジアゾダイズペンチジン、塩化クロム、カル゛ボジ
イ之ドなどを使用すればよい。
イ之ドなどを使用すればよい。
放射性免疫測定法（Ｒ１ム）を利用する場合には本発明
抗体をアイソトープでラベル化する必要がある。アイソ
トープとしては１！１１，１″Ｉを使用することができ
、クロラミンＴ法により結合させればよい。
抗体をアイソトープでラベル化する必要がある。アイソ
トープとしては１！１１，１″Ｉを使用することができ
、クロラミンＴ法により結合させればよい。
酵素抗体法（ＥＬＩ８ム）を利用する場合には。
本発明抗体を酵素と結合させる必要がある。酵素として
は１例えばグルコースオキシダーゼ、アルカリホスファ
ターゼ、ペルオキシダーゼ、ペーターガラクトシグーゼ
等を使用することができる。
は１例えばグルコースオキシダーゼ、アルカリホスファ
ターゼ、ペルオキシダーゼ、ペーターガラクトシグーゼ
等を使用することができる。
結金剤としてはゲルタールアルデヒドを使用すればよい
。
。
本発明抗体およびこれｔ含む検出試薬の有用性を以下に
記載する実験例をもって説明する。
記載する実験例をもって説明する。
実験例１
試料
ａ、非ム非ｍ＠肝炎剖検肝からの分離精製によっ”（得
られ、前記の理化学的性状を有する非ム非ｍｍ肝炎関連
抗１［（以下、実験例２および実験例３において同じ） ｂ、非ム非Ｂｆｉ肝炎回復期患者の血清１、非ム非８型
肝炎剖検肝ホモジネート上清ｄ、正常ヒト肝ホモジネー
ト上清 ・、正常ヒト血清 ｆ、実施例ＩＫよつて得られた本発明抗体（家兎免疫抗
血清なＩｇＧ１’１ｌｌ１分劃したもの）方法 アガａ−ｘＡ−４５（牛丼化学＞ ０．８−（Ｗ／Ｖ）
。
られ、前記の理化学的性状を有する非ム非ｍｍ肝炎関連
抗１［（以下、実験例２および実験例３において同じ） ｂ、非ム非Ｂｆｉ肝炎回復期患者の血清１、非ム非８型
肝炎剖検肝ホモジネート上清ｄ、正常ヒト肝ホモジネー
ト上清 ・、正常ヒト血清 ｆ、実施例ＩＫよつて得られた本発明抗体（家兎免疫抗
血清なＩｇＧ１’１ｌｌ１分劃したもの）方法 アガａ−ｘＡ−４５（牛丼化学＞ ０．８−（Ｗ／Ｖ）
。
ｇＤテム−３Ｎｍ０．０２Ｍ、塩化ナトリウＡ０．ＩＭ
。
。
ＷａＮｍｏ、１−をトリス塩酸緩衝１１（０，０％Ｍ、
ｐＨ７，５）に溶解し、厚さＬ Ｓ ｍの寒天ゲル平板
を作・製し、試料についてマイクロオフタロニー法によ
る検出テストをおこなった。
ｐＨ７，５）に溶解し、厚さＬ Ｓ ｍの寒天ゲル平板
を作・製し、試料についてマイクロオフタロニー法によ
る検出テストをおこなった。
結果
結果を図１に示す。図中ａ ＝ ｆの光枠は対応する試
料をスポットした配置エリアを示す。図１においてｂａ
間の沈降線とｂｅ間の沈降線とは完全に融合しており、
またａｂ間の沈降線と＆ｆ間の沈降線とは完全に融合し
【いる。つまり１とＣとはｂ＜対して免疫学的に同一の
抗原性を有し、またｂとｆとはａＫ対して免疫学的に同
一の抗体特異性を示している。他方、正常ヒト肝ホモジ
ネート櫨および正常ヒト血清・は交差反応なまった（示
していない。そもそも非ム非Ｂｌｌ肝炎剖検肝とは前記
定義から明らかなごとく、肝炎ウィルスに起因する肝炎
患者であって、装置肝炎診断およびＢ！１１肝炎診断に
おいて陰性を示し、ム型肝炎からもＩＩ型肝炎からも除
外された患者の剖検肝である。
料をスポットした配置エリアを示す。図１においてｂａ
間の沈降線とｂｅ間の沈降線とは完全に融合しており、
またａｂ間の沈降線と＆ｆ間の沈降線とは完全に融合し
【いる。つまり１とＣとはｂ＜対して免疫学的に同一の
抗原性を有し、またｂとｆとはａＫ対して免疫学的に同
一の抗体特異性を示している。他方、正常ヒト肝ホモジ
ネート櫨および正常ヒト血清・は交差反応なまった（示
していない。そもそも非ム非Ｂｌｌ肝炎剖検肝とは前記
定義から明らかなごとく、肝炎ウィルスに起因する肝炎
患者であって、装置肝炎診断およびＢ！１１肝炎診断に
おいて陰性を示し、ム型肝炎からもＩＩ型肝炎からも除
外された患者の剖検肝である。
従りて非ム非ｍｍ肝炎剖検肝からの抗原を使用して実施
例１のごとく免疫産生せしめた本発明抗体ｆは非ム非Ｉ
ＩＩ肝炎抗原ａとの関において特異的な抗原抗体反応を
呈するものであり、かつ当骸抗体は非ム非Ｂ！１肝炎回
復期患者の血清からも収得することのできるものである
ことが判明する。
例１のごとく免疫産生せしめた本発明抗体ｆは非ム非Ｉ
ＩＩ肝炎抗原ａとの関において特異的な抗原抗体反応を
呈するものであり、かつ当骸抗体は非ム非Ｂ！１肝炎回
復期患者の血清からも収得することのできるものである
ことが判明する。
実験例２
試料
非直非Ｂ型肝炎関連抗原を表１の抗原希釈此種記載のご
とき７段階に希釈したものを試料とした。
とき７段階に希釈したものを試料とした。
また実施例２の記載において希釈倍率を適宜変更するこ
とにより、抗体含有率が０．６％、 １．０嗟および
１．４−である三種の８ＲＩＤ法用アガロースゲルを用
意した。
とにより、抗体含有率が０．６％、 １．０嗟および
１．４−である三種の８ＲＩＤ法用アガロースゲルを用
意した。
方法
試料を各５μ）づつ添加し、室温に放置して２０時間経
過後に、生成した沈降リングの直径（■）を測定した。
過後に、生成した沈降リングの直径（■）を測定した。
結果
結果を表ＩＫ示す。表１より、ａＲＩＤ法を利用する本
発明試薬を使用することより非ム非１Ｂ型肝炎関連抗原
の定量検索が可能となることが判明する０例えば、アガ
ロースゲルにおける抗体含有率を１（１以下にすると定
量性が向上−することが判る。
発明試薬を使用することより非ム非１Ｂ型肝炎関連抗原
の定量検索が可能となることが判明する０例えば、アガ
ロースゲルにおける抗体含有率を１（１以下にすると定
量性が向上−することが判る。
１１
表中、−は抗原抗体反応による沈降リングが検出されな
い、＋は沈降リングの形成はあるが、精確にリング直径
を測定することができな（・（直径４、０ ｗ以下）の
意味を表わす。
い、＋は沈降リングの形成はあるが、精確にリング直径
を測定することができな（・（直径４、０ ｗ以下）の
意味を表わす。
実験例３
試料
１６．非ム非１臘肝炎関連抗鳳
す、非ム非塾臘肝炎患者肝ホモジネート上清噛、正常ヒ
ト肝ホ毫ジネート上清 また実施例３の記載においＣ，ＩｇＧ精製物をリン酸緩
衝生鳳食塩液でその抗体希釈比が１：ｔｏ。
ト肝ホ毫ジネート上清 また実施例３の記載においＣ，ＩｇＧ精製物をリン酸緩
衝生鳳食塩液でその抗体希釈比が１：ｔｏ。
１ ：２Ｇ、１ ：４０および１：８０になるように希
釈シた液を使用して、その他については実施例３記載と
同様に処理し、四種類のＲ−ＰＨＡ法用抗体感作羊赤血
球を用意した。
釈シた液を使用して、その他については実施例３記載と
同様に処理し、四種類のＲ−ＰＨＡ法用抗体感作羊赤血
球を用意した。
方法
アクリル製のマイク關タイトレージ璽ンプレート（Ｖ−
タイプ）に２哄正富家兎血清を含有するリン酸緩衝生理
食塩液（０，１５Ｍ、ｐＨ７，２）２５μノを添加し、
検体試料を二系列づつ２１薔希釈した。次に一方の系列
にはンー正常家兎血清を含有するリン酸緩衝生理食塩液
（０，１５Ｍ、ｐＨ７，２＞２．５ｆｉｌを、他方の系
列には非ム非Ｂｆｉ肝炎回復助患者の血清２５ｓ）を添
加し、３７℃で３０分間インキ島ベートした。その後抗
体感作羊赤血球を添加し、室温で２時間放置し、凝集の
有無を確認した。緩衝液側の凝集価が３管（８倍希釈）
以上を示し、非ム非Ｂｌｌ肝炎回復期患者の血清の添加
による凝集抑制が２管以上確認された場合に陽性と判定
し、凝集を認めた最大希釈倍数の逆数を抗原価とした。
タイプ）に２哄正富家兎血清を含有するリン酸緩衝生理
食塩液（０，１５Ｍ、ｐＨ７，２）２５μノを添加し、
検体試料を二系列づつ２１薔希釈した。次に一方の系列
にはンー正常家兎血清を含有するリン酸緩衝生理食塩液
（０，１５Ｍ、ｐＨ７，２＞２．５ｆｉｌを、他方の系
列には非ム非Ｂｆｉ肝炎回復助患者の血清２５ｓ）を添
加し、３７℃で３０分間インキ島ベートした。その後抗
体感作羊赤血球を添加し、室温で２時間放置し、凝集の
有無を確認した。緩衝液側の凝集価が３管（８倍希釈）
以上を示し、非ム非Ｂｌｌ肝炎回復期患者の血清の添加
による凝集抑制が２管以上確認された場合に陽性と判定
し、凝集を認めた最大希釈倍数の逆数を抗原価とした。
結果
結果を表２に示す。
表２
表中、−は凝集Ｉｉ２倍以下を示す。
＄１！２より２本発明抗体を感作せしめた羊赤血球によ
る凝集反応の感度はＭＯ法に比較して５０〜１００倍以
上であり、優れて高いことが判明する。
る凝集反応の感度はＭＯ法に比較して５０〜１００倍以
上であり、優れて高いことが判明する。
また凝集抗原の特異性は本発明抗体を含む非ム非１１ｆ
ｉ肝炎回復期患者の血清による凝集抑制の有無から明瞭
Ｋ１１ｌｌすることができることも判明する。
ｉ肝炎回復期患者の血清による凝集抑制の有無から明瞭
Ｋ１１ｌｌすることができることも判明する。
以下に記載する実施例をもって本発明をさらに詳＃ＫＩ
ｔＷ１４する。
ｔＷ１４する。
ｖｌ、論例１
非ム非璽臘肝炎剖検肝からの分離精製によって得られ、
前記の理化学的性状を有する非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原を
含有する溶液Ｋ ７１ｆｆ’シト完全アジ為バントを１
：ｌの比に加えて乳化した。乳化液０．５ｄをウサギの
背部皮下、皮肉および足醜部に分割注射して免疫した。
前記の理化学的性状を有する非Ａ非Ｂ型肝炎関連抗原を
含有する溶液Ｋ ７１ｆｆ’シト完全アジ為バントを１
：ｌの比に加えて乳化した。乳化液０．５ｄをウサギの
背部皮下、皮肉および足醜部に分割注射して免疫した。
１週間後に同量の乳化液を同様にして追加免疫し、さら
に初回の免疫より１力月後に倍量の乳化液を再度追加免
疫した。最後の免疫より１週間後より数回にわたって採
血し。
に初回の免疫より１力月後に倍量の乳化液を再度追加免
疫した。最後の免疫より１週間後より数回にわたって採
血し。
血清を分離した。この血清に同量の正常ヒト肝ホ毫ジネ
ート上清を加え、３７℃で１時間、さらに４℃で１夜放
置した。これを１０．００Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離
し、上澄液を採取した。本発明抗体を水溶液の状態で保
存し、実施例２で用いた。
ート上清を加え、３７℃で１時間、さらに４℃で１夜放
置した。これを１０．００Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離
し、上澄液を採取した。本発明抗体を水溶液の状態で保
存し、実施例２で用いた。
次に１本発明抗体５０１１Ｌｌを０．ＯＩＭＩＪン酸緩
衝液（ｐＨ＆０）を外液として４℃−昼夜透析した。
衝液（ｐＨ＆０）を外液として４℃−昼夜透析した。
さらに、０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８，０）で十分
千両化したＤＩＡＥセルロースをカラムに充填し１本発
明抗体を添加、ｒ−グロブリン以外の血清蛋白を吸着さ
せた。引続きリン酸緩衝液（０，０１輩、ｐｉｔａ、ｏ
）で未吸着のｒ−グロブリンを溶出させ回収し、ｉ’Ｍ
−１０メンブレンを用い加圧限外濃縮し、蛋白量を約１
．０■／−に調整し２本発明抗体１ｔＧＷＩｍ物として
実施例３，４．５に用いた。
千両化したＤＩＡＥセルロースをカラムに充填し１本発
明抗体を添加、ｒ−グロブリン以外の血清蛋白を吸着さ
せた。引続きリン酸緩衝液（０，０１輩、ｐｉｔａ、ｏ
）で未吸着のｒ−グロブリンを溶出させ回収し、ｉ’Ｍ
−１０メンブレンを用い加圧限外濃縮し、蛋白量を約１
．０■／−に調整し２本発明抗体１ｔＧＷＩｍ物として
実施例３，４．５に用いた。
実施例２
ｐＨ７，５，０，ＯＩＭのトリス塩酸緩衝液（０，１５
Ｖの塩化ナトリウムおよびｏ、ｉｓの窒化す） ＩＪウ
ムを含む）中に７ガロースを１．２チ濃度になるように
加熱溶解した。このアガロース溶液８０１１／を約５６
℃まで冷却し、実施例１で得られた溶液を１０！に希釈
し、その２０５１１７を添加して攪拌した。
Ｖの塩化ナトリウムおよびｏ、ｉｓの窒化す） ＩＪウ
ムを含む）中に７ガロースを１．２チ濃度になるように
加熱溶解した。このアガロース溶液８０１１／を約５６
℃まで冷却し、実施例１で得られた溶液を１０！に希釈
し、その２０５１１７を添加して攪拌した。
これをプラスチック容器中に注入して放冷し、厚さ１−
のアガロースゲル平板となした。この平板に一定の間隔
をおいて直径３１ａＩＩの試料孔なあけた。
のアガロースゲル平板となした。この平板に一定の間隔
をおいて直径３１ａＩＩの試料孔なあけた。
得られたものは抗体含有率が２．０−のものであり。
１ｉ１ＲＩＤ法を利用する検出試薬に使用される。
実施例３
とツジ血液を遠心管にとり、生理食塩液を用いてλ００
０ｒν論で１０分間の遠心分離を５回繰返し、赤血球を
洗滌した。この赤血球Ｋ ｐ Ｈ７，５。
０ｒν論で１０分間の遠心分離を５回繰返し、赤血球を
洗滌した。この赤血球Ｋ ｐ Ｈ７，５。
０、ｌ５ｌｉのリン酸緩衝生理食塩液を加えて５−濃度
に調製した。同すン酸緩衝生理★塩液で２．５−濃度に
調整したゲルタールアルデヒド溶液を前記赤血球浮遊液
中に、その５分の１容加え、攪拌しながら室温で約５時
間反応させ、赤血球を固定した。ついでこの溶液を遠心
分離して固定赤血球を得、さらに生理食塩液を用い遠心
分離により数回洗滌した。この固定赤血球を前記リン酸
緩衝液で５嗟浮遊液に調整し、これに同すン酸緩貴生理
★塩液で５Ｍ９７ｇに調整したタンニン酸溶液を等量添
加して３０分間攪拌した。この溶液を遠心分離してタン
ニン酸処理固定赤血球を得、さらに生理食塩液を用い遠
心分離により数回洗滌した０％られたタンニン酸処理固
定赤血球に前記リン酸緩衝液を加え、５嘩赤血球浮遊液
とした。
に調製した。同すン酸緩衝生理★塩液で２．５−濃度に
調整したゲルタールアルデヒド溶液を前記赤血球浮遊液
中に、その５分の１容加え、攪拌しながら室温で約５時
間反応させ、赤血球を固定した。ついでこの溶液を遠心
分離して固定赤血球を得、さらに生理食塩液を用い遠心
分離により数回洗滌した。この固定赤血球を前記リン酸
緩衝液で５嗟浮遊液に調整し、これに同すン酸緩貴生理
★塩液で５Ｍ９７ｇに調整したタンニン酸溶液を等量添
加して３０分間攪拌した。この溶液を遠心分離してタン
ニン酸処理固定赤血球を得、さらに生理食塩液を用い遠
心分離により数回洗滌した０％られたタンニン酸処理固
定赤血球に前記リン酸緩衝液を加え、５嘩赤血球浮遊液
とした。
この赤血球浮遊液と実施例１で得られたＩ−精製物を前
記リン酸緩衝生理★塩液で蛋白質濃度が約５０μ９７Ｍ
１＜抗体希釈比１ ： ２０ ）になるように希釈した
液とを同量混合し、室温で６０分間攪拌して感作した。
記リン酸緩衝生理★塩液で蛋白質濃度が約５０μ９７Ｍ
１＜抗体希釈比１ ： ２０ ）になるように希釈した
液とを同量混合し、室温で６０分間攪拌して感作した。
この液を遠心分離して感作血球を得、さらに生理食塩液
を用い遠心分離により数回洗滌した。得られた感作赤血
球に２慢正常家兎血清含有リン酸緩衝生理食塩液を加え
て７チ浮遊液とした。この感作赤血球はＲ−ＰＨＡ法を
利用する検出試薬に使用される。
を用い遠心分離により数回洗滌した。得られた感作赤血
球に２慢正常家兎血清含有リン酸緩衝生理食塩液を加え
て７チ浮遊液とした。この感作赤血球はＲ−ＰＨＡ法を
利用する検出試薬に使用される。
実施例４
実施例１で得られたＩｇＧ精製物をｐ Ｈ７，５。
０．０５Ｍのリン酸緩衝液に溶解し、蛋白質濃度な１ダ
／−に調整する。この液１０μｌに１ミリキユーリーの
”ｌ−Ｎａ ５０μ！を加え、さらにフロラ建ン〒を
前記リン酸緩衝液に１．５ダ／ｄの割合に溶解した液を
１０声ノ加えて３０秒間攪拌する。次いでメタ重亜硫酸
ｊトリウムな前記り／酸緩衝液に２Ｎｇ／ＩＩ／の割合
に溶解した液を１００μ！加えて反応を停止させる。ヨ
ウ化カリウムを前記リン酸緩衝液にｌＯ■／−の割合に
溶解した液ｘｏｏｓｔをこの反応液に加え、ただちにセ
ファデックスＧ−５０を用いたゲルｆ過により１”Ｌ標
識物質と１１１１とを分離する。得られた１１１１標識
物質の比放射能は約５〜２０μＣＳｌμｇとなる。この
１町標繊物質はＲＩム法を利用する検出試薬に使用され
る。
／−に調整する。この液１０μｌに１ミリキユーリーの
”ｌ−Ｎａ ５０μ！を加え、さらにフロラ建ン〒を
前記リン酸緩衝液に１．５ダ／ｄの割合に溶解した液を
１０声ノ加えて３０秒間攪拌する。次いでメタ重亜硫酸
ｊトリウムな前記り／酸緩衝液に２Ｎｇ／ＩＩ／の割合
に溶解した液を１００μ！加えて反応を停止させる。ヨ
ウ化カリウムを前記リン酸緩衝液にｌＯ■／−の割合に
溶解した液ｘｏｏｓｔをこの反応液に加え、ただちにセ
ファデックスＧ−５０を用いたゲルｆ過により１”Ｌ標
識物質と１１１１とを分離する。得られた１１１１標識
物質の比放射能は約５〜２０μＣＳｌμｇとなる。この
１町標繊物質はＲＩム法を利用する検出試薬に使用され
る。
実施例５
実施例１で得られたＩｇＧ精製物を５〜１０ダ／１１７
（０，０５Ｍリン酸生理食塩緩衝液中）となるまで濃縮
し、この０．１〜０−２１１４に対してアルカリホスフ
ァターゼ（５ダ／ｍ）を０．３１Ｌｔの割合で添加し攪
拌する。次に２．５ｓゲルタールアルデヒド溶液５０μ
ｊを添加し、室温で３０分間攪拌する。
（０，０５Ｍリン酸生理食塩緩衝液中）となるまで濃縮
し、この０．１〜０−２１１４に対してアルカリホスフ
ァターゼ（５ダ／ｍ）を０．３１Ｌｔの割合で添加し攪
拌する。次に２．５ｓゲルタールアルデヒド溶液５０μ
ｊを添加し、室温で３０分間攪拌する。
これを０．０５Ｍ）リス塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）で−
昼夜透析しｅ ２．００Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離
したのち、その上清を酵素標識抗原としてＥＩＡ法を利
用す水検出試薬に使用される。
昼夜透析しｅ ２．００Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離
したのち、その上清を酵素標識抗原としてＥＩＡ法を利
用す水検出試薬に使用される。
【図面の簡単な説明】
図１は実験例１結果の項に記載の図１に相当する図面で
あり、マイクロオフタロニー法における沈降線の生成状
況を示す模式図である。 特許出願人 工−ザイ株式会社
あり、マイクロオフタロニー法における沈降線の生成状
況を示す模式図である。 特許出願人 工−ザイ株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１） 非ム非Ｂｆｉ肝炎剖検肝からの分離精製によ
って得られ、下記の理化学的性状を有する非ム非Ｉｌｌ
肝炎関連抗原との関において特異的な抗原抗体反応を呈
する非ム非Ｂ型肝炎関連抗体分子量 １５
０万以上 （ゲル濾過法） 沈降定数（１０） ５１．５１１ （超遠心分析法） 浮上轡度Ｃ１／ｃｄ＞ １．１５〜１．２５（塩化
セシウム中およ び臭化カリウム中） 粒子直径（ｍ醜） ２６〜３７ 電気的移動度 へ−へグロブリン領域（アガロー
スゲル中） （噂 非ム非ｌ１ｔｊ７１肝炎剖検肝からの分離精製に
よ一５′ｃ％られ、下記の理化学的性状を有する非Ａ非
ｍｍ肝炎一連抗原との間において特異的な抗原抗体反応
を呈する非ム非ｍｍ肝炎関連抗体と微小粒子、アイソト
ープ、＃素のうちのいづれかとの結合体 分子量 １５０万以上 （ゲル濾過法） 沈降定数（１Ｇ ） ５１．５８（超遠心分析法
） 浮上書度（Ｉｉ／ｆｆ１） １．１５〜１．２５（
塩化セシウム中およ び臭化カリウム中） 粒子直１１（ｍｌａ） ２６〜３７電気的移動度
偽−α、ダ四プリン領域（アガロースゲル中） （３）微小粒子が羊赤血球であり、アイソトープが１″
！または１ｓ１１であり、酵素がアルカリホスファター
ゼである特許請求の範囲第２項記載の結合体 （４）非ム非１ｆｉ肝炎剖検肝からの分離精製によつて
得られ、下記の理化学的性状を有する非ム非ｉｎ肝炎関
連抗原との間において特異的な抗原抗体反応を呈する非
ム非Ｂ型肝炎関連抗体を主要な構成成分として含有する
非ム非Ｂｌｌ肝炎関連抗原検出試薬 分子量 １５０万以上 （ゲルｒ過法） 沈降定数（１０”） ｓ ｔｓ ｓ（超遠心分析法
） 浮上冑度（＃／ｆｆ１） １．１５〜１．２５（塩
化セシウム中およ び臭化カリウム中） 粒子Ｗｉ径（ＩＪ１飄） ２６〜３７電気的移動度
偽−へグロブリン領域（アガロースゲル中） （荀 非ム非Ｉｌｌ肝炎剖検肝からの分離精製によって
得られ、下記の理化学的性状を有する非ム非１ｍｌ肝炎
関連抗原との関において特異的な抗原抗体反応を呈する
非ム非Ｂｉｌ肝炎関連抗体と微小粒子、アイソトープ、
＃素のうちのいづれかとの結合体を主要な構成成分とし
て含有する非ム非Ｉｌｌ肝炎関連抗原検出試薬 分子量 １５０万以上 （ゲルｆ過法） 沈降定数（１０”） ５１．５８ （超遠心分析法） 浮上書度（１／ａｄ） １．１５〜１．２５（塩化
セシウム中およ び臭化カリウム中） 粒子直径（＋ａｍ） ２６〜３７電気的移動度
％ｌｔダロプリン領域（アガロースゲル中） （藝）微小粒子が羊赤血球であり、アイソトープが′”
■またはＩＪであり、＃素がアルカリホスファターゼで
ある特許請求の範囲第５項記載の非ム非１１！１肝炎抗
原検出試薬
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9742581A JPS58753A (ja) | 1981-06-25 | 1981-06-25 | 非ａ非ｂ型肝炎関連抗体および検出試薬 |
| CA000405918A CA1177749A (en) | 1981-06-25 | 1982-06-24 | Non-a, non-b hepatitis-associated antibody and detection reagent |
| DE8282105643T DE3267565D1 (en) | 1981-06-25 | 1982-06-25 | Non-a, non-b hepatitis-associated antibody conjugate, the use thereof and detection reagent |
| EP19820105643 EP0068465B1 (en) | 1981-06-25 | 1982-06-25 | Non-a, non-b hepatitis-associated antibody conjugate, the use thereof and detection reagent |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9742581A JPS58753A (ja) | 1981-06-25 | 1981-06-25 | 非ａ非ｂ型肝炎関連抗体および検出試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58753A true JPS58753A (ja) | 1983-01-05 |
| JPH0250427B2 JPH0250427B2 (ja) | 1990-11-02 |
Family
ID=14192066
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9742581A Granted JPS58753A (ja) | 1981-06-25 | 1981-06-25 | 非ａ非ｂ型肝炎関連抗体および検出試薬 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0068465B1 (ja) |
| JP (1) | JPS58753A (ja) |
| CA (1) | CA1177749A (ja) |
| DE (1) | DE3267565D1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62249999A (ja) * | 1986-04-16 | 1987-10-30 | インステイテイ パスツ−ル | 非ａ非ｂ型ウイルス性肝炎検出用試薬および免疫酵素法による前記肝炎の診断法 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2502154A1 (fr) * | 1981-03-30 | 1982-09-24 | Trepo Christian | Procede de preparation d'antigenes de l'hepatite virale nanb, et application a la realisation d'un reactif permettant le diagnostic et le pronostic des infections provoquees par les virus des hepatites virales |
| JPS58183629A (ja) * | 1982-04-21 | 1983-10-26 | Eisai Co Ltd | 非ａ非ｂ型肝炎関連モノクロナ−ル抗体および診断薬 |
| US4649039A (en) * | 1984-07-03 | 1987-03-10 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Radiolabeling of methionine-containing proteins and peptides |
| NZ222465A (en) * | 1986-11-07 | 1992-11-25 | Pasteur Institut | Nanb (non a, non b hepatitis viral) antigen |
| FR2606515B1 (fr) * | 1986-11-07 | 1992-02-21 | Pasteur Institut | Procede pour l'isolement d'un nouvel agent viral et de l'antigene qui lui est associe, agent viral et antigene obtenus par ce procede et procede de detection dudit antigene a l'aide d'un reactif immunologique approprie |
| FR2609807B2 (fr) * | 1987-02-11 | 1992-05-29 | Pasteur Institut | Reactifs immunologiques pour la detection de l'hepatite virale nanb, leurs procedes de preparation et leurs applications dans des procedes de detection de l'hepatite virale nanb et en tant qu'agents therapeutiques |
| US5350671A (en) * | 1987-11-18 | 1994-09-27 | Chiron Corporation | HCV immunoassays employing C domain antigens |
| US5191064A (en) * | 1988-09-30 | 1993-03-02 | The Research Foundation For Microbial Diseases (Osaka University) | Non-a, non-b hepatitis virus antigen peptide |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4356164A (en) * | 1979-05-21 | 1982-10-26 | Govt. of the U.S., as represented by the Secretary, Dept. of Health & Human Services | Detection of non-A, non-B hepatitis associated antigen |
| FR2502154A1 (fr) * | 1981-03-30 | 1982-09-24 | Trepo Christian | Procede de preparation d'antigenes de l'hepatite virale nanb, et application a la realisation d'un reactif permettant le diagnostic et le pronostic des infections provoquees par les virus des hepatites virales |
-
1981
- 1981-06-25 JP JP9742581A patent/JPS58753A/ja active Granted
-
1982
- 1982-06-24 CA CA000405918A patent/CA1177749A/en not_active Expired
- 1982-06-25 DE DE8282105643T patent/DE3267565D1/de not_active Expired
- 1982-06-25 EP EP19820105643 patent/EP0068465B1/en not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62249999A (ja) * | 1986-04-16 | 1987-10-30 | インステイテイ パスツ−ル | 非ａ非ｂ型ウイルス性肝炎検出用試薬および免疫酵素法による前記肝炎の診断法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3267565D1 (en) | 1986-01-02 |
| EP0068465A3 (en) | 1983-03-23 |
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